CN106474299A - 一种中药组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种中药组合物的制备方法,包括:按照配方称取原料药,加入水进行提取,滤去药渣,制成汤剂;加入葡萄糖、酵母膏和低聚麦芽糖,用氢氧化钠调节pH至6.0‑8.0;对所得混合物高压灭菌,得到粪菌发酵底物;将粪便和生理盐水混合,再用纱布过滤,得到粪菌的混悬液;将粪菌接种到粪菌发酵底物中,恒温摇床培养,从而得到中药组合物;其中,根据不同的证选择配方以治疗外感寒湿证、湿热下迫证、脾胃虚弱证、脾胃虚寒证、或者脾肾阳虚证。由该方法制备的中药组合物能够有效地调节肠道菌群,从而治疗肠道菌群失调。
Description
技术领域
本发明涉及中医药领域,更具体地,涉及一种中药组合物及其制备方法和应用。
背景技术
近年来,随着分子生物学技术在肠道菌群检测方面的应用,肠道菌群失调与疾病的相关性研究及其在发病机制中的作用逐渐引起了人们的广泛重视。研究显示多种疾病均伴有肠道菌群的失调,肠道菌群失调也可引起肠内外的多种疾病,同时参与各种疾病的发生、发展过程,其与这些疾病相互作用、互为因果。相关疾病主要包括:炎症性肠病、肠易激综合征、肝脏疾病、糖尿病和多器官功能衰竭。由此可见,一种有效的调节肠道菌群失调的方法在预防、改善和治疗相关疾病方面都将起到至关重要的作用。
目前,市场上具有调节肠道菌群功效的保健食品和药物琳琅满目。利用益生菌或益生元调节肠道菌群是常用的调节肠道菌群失调的方法。例如,刘莉等在CN104107188 A中公开了苹果多糖调节肠道菌群失调及润肠通便的用途及其制备方法;吴力克等在CN102028197 A中公开了一种具有调节肠道菌群失调和增强免疫的功能营养剂及其制备方法。由党参、白术、茯苓、炙甘草四味中药和螺旋藻制成发酵液,随后接种乳杆菌和双歧杆菌进行发酵,最终将发酵液灭酶干燥得营养液;于莲在CN 102106925 A中公开了枸杞多糖双歧杆菌合生元结肠靶向微生态调节剂具有调节肠道菌群失调的作用;方曙光在CN101496822A中公开了一种具有改善肠道微生态环境,恢复肠道菌群平衡功能的复合益生菌微生态制剂,该制剂由复合微生物菌粉、复合低聚糖、辅助保护载体、食用香精混合而成。然而,利用粪菌发酵中药组合物调节肠道菌群,从而治疗肠道菌群失调尚无相关报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种中药组合物及其制备方法和应用,其中,使用的中药选自能够调节肠道菌群的部分中药,按照中医辨证理论,不同的证对应以下5个不同的配方。外感寒湿证:佩兰、香薷、羌活、半夏、陈皮、茯苓、甘草;湿热下迫证:猪苓、黄连、黄柏、甘草;脾胃虚弱证:黄芪、党参、茯苓、山药、陈皮、薏苡仁、甘草;脾胃虚寒证:黄芪、白术、干姜、甘草;脾肾阳虚证:干姜、肉桂、吴茱萸、白术、甘草。对证选择相应的一种或几种中药按适当重量份组成相应的配方。
根据本发明的一个方面,提供了一种中药组合物的制备方法,包括:按照配方称取原料药,加入水进行提取,滤去药渣,制成汤剂;加入葡萄糖、酵母膏和低聚麦芽糖,用氢氧化钠调节pH至6.0-8.0;对所得混合物高压灭菌,得到粪菌发酵底物;将粪便和生理盐水混合,再用纱布过滤,得到粪菌的混悬液;将所述粪菌接种到所述粪菌发酵底物中,恒温摇床培养,从而得到所述中药组合物;其中,根据不同的证选择所述配方,所述配方包括:外感寒湿证:佩兰0-20份、香薷0-20份、羌活0-20份、半夏0-12份、陈皮0-20份、茯苓0-20份、甘草0-12份;湿热下迫证:猪苓0-30份、黄连0-18份、黄柏0-18份、甘草0-12份;脾胃虚弱证:黄芪0-24份、党参0-24份、茯苓0-24份、山药0-24份、陈皮0-20份、薏苡仁0-20份、甘草0-12份;脾胃虚寒证:黄芪0-24份、白术0-24份、干姜0-20份、甘草0-12份;或者脾肾阳虚证:干姜0-24份、肉桂0-20份、吴茱萸0-24份、白术0-24份、甘草0-12份。
在上述方法中,优选地,所述配方包括:外感寒湿证:佩兰10份、香薷10份、羌活10份、半夏6份、陈皮10份、茯苓10份、甘草6份;湿热下迫证:猪苓15份、黄连9份、黄柏9份、甘草6份;脾胃虚弱证:黄芪12份、党参12份、茯苓12份、山药12份、陈皮10份、薏苡仁10份、甘草6份;脾胃虚寒证:黄芪12份、白术12份、干姜10份、甘草6份;或者脾肾阳虚证:干姜12份、肉桂10份、吴茱萸12份、白术12份、甘草6份。
在上述方法中,在制备所述粪菌发酵底物的步骤中,进一步包括:按照配方称取原料药,粉碎,以第一比例加入水,其中所述第一比例为水的体积与药材质量的比,并且其中所述第一比例在10:1至40:1的范围内,浸泡0.5~2小时,微沸状态下提取20~60分钟,滤去药渣,制成汤剂;加入0.5%~1%葡萄糖、0.3%~0.5%酵母膏、0.5%~1%低聚麦芽糖,用氢氧化钠调节pH至7.0;所得混合物在121℃下高压灭菌10~30分钟,得到所述粪菌发酵底物。
在上述方法中,在制备所述粪菌的混悬液的步骤中,进一步包括:以第二比例将粪便和生理盐水混合,所述第二比例为生理盐水的体积与粪便质量的比,并且其中所述第二比例在5:1至15:1的范围内,再用纱布过滤,得到所述粪菌的混悬液。
在上述方法中,在制备所述中药组合物的步骤中,进一步包括:当所述粪菌发酵底物的温度降到30℃以下时,按照0.1%~10%的体积百分数将所述粪菌接种到所述粪菌发酵底物中,在20℃~40℃下恒温摇床培养2~4天,从而得到所述中药组合物。
根据本发明的另一方面,还提供了一种根据上述方法制备的中药组合物。
根据本发明的又一方面,还提供了上述中药组合物在调节肠道菌群方面中的应用。
根据本发明的又一方面,还提供了上述中药组合物在制备食品和/或保健食品中的应用。
在上述应用中,所述食品和/或保健食品中包括:所述粪菌发酵中药组合物、矫味剂、赋形剂或它们的组合。
在上述应用中,所述食品和/或保健食品的服用形式包括:口嚼片、含化片、颗粒剂、袋泡茶、口服液、饮料或它们的组合。
本发明中使用的粪菌近年来被用于治疗艰难梭菌感染和重建肠道菌群获得很好疗效,然而粪菌移植是很多患者难以接受的疗法,本发明吸取粪菌移植中的精髓部分,并结合中医辨证论治理论,针对不同的证,使相应的中药在粪菌中发酵,通过粪菌在中药有机物环境中的生命活动过程,按健康肠道的各菌体比例不断积累各种菌体数量,同时体系中的菌群对中药成分进行生物转化和结构修饰,得到易被人体吸收的高活性成分,从而可达到调节肠道菌群,进而治疗肠道菌群失调的目的。
具体实施方式
为了更好地理解本发明,下面用具体实例来详细说明本发明的技术方案,但是本发明并不局限于此。在下述实施例中所给出的实验方法,如无特别说明,均为常规方法。其中所用试剂均有市售。
实施例1:粪菌发酵中药组合物的制备
一、中药原料药的配伍和提取
调节湿热下迫证的肠道菌群失调的中药及其用量为:猪苓15g、黄连9g、黄柏9g、甘草6g。
称取配方中的原料药,粉碎,加适量水,水体积ml:药材质量g=20:1,浸泡1小时,微沸状态下提取30分钟,滤去药渣,制成汤剂。
二、粪菌发酵
(1)取已经制成的汤剂,按质量g/体积ml加入0.7%葡萄糖、0.4%酵母膏、0.8%低聚麦芽糖,用NaOH调节pH至7.0;所得混合物在121℃高压灭菌20分钟,得到继后用于粪菌发酵的底物;
(2)粪菌的制备:将粪便和生理盐水按适当比例混合(质量g:体积ml=1:10),再用三层纱布过滤,得到的混悬液即为粪菌。在该步骤中,粪便来源于粪便捐献者,其中,对粪便捐献者的要求如下:
①优选身材苗条的小孩(7、8岁以上的中小学生);
②至少近3-6个月内没有发生腹泻(急性肠炎)、没有使用过抗生素;
③必须没有传染病,没有不良性生活嗜好(同性恋、***、***等);
④没有胃肠道疾病、糖尿病、肥胖症(包括偏胖,我们会计算体重指数BMI)。
(3)待底物的温度降到30℃以下,按体积百分数5%将粪菌接种到汤剂混合物中,于37℃下恒温摇床培养3天,由此获得目标组合物。
本发明组合物在制备食品保健食品的过程中,可以加入矫味剂、赋形剂,制成食品、保健食品,可以是食品和保健食品中可接受的任何形式的产品,如口嚼片、含化片、颗粒剂、袋泡茶、口服液、饮料类等口服剂型的产品。
实施例2:本发明组合物对肠道菌群失调动物模型的调节作用
1.肠道菌群失调动物模型的建立
选用50只昆明小鼠,雌雄各半,体重18~22克,随机分成5组,每组10只。先无菌采集小鼠正常粪便,经稀释后选择适当的稀释度,分别接种在各培养基上培养双歧杆菌(BS培养基),乳酸杆菌(LC培养基),肠杆菌(EMB培养基)及肠球菌(EC培养基),48小时之后数取培养基上菌落数。随机选取一组作为正常组,以生理盐水灌胃。其余4组灌服抗生素溶液(用pH 7.4的生理盐水配制的盐酸林可霉素,头孢唑林钠及氨苄西林钠的混合液,3种抗生素的浓度均为100mg/ml),0.2ml每只,每天2次,连续3天。3天后无菌采取每只小鼠粪便,经稀释后选择适当的稀释度,分别接种在各培养基上培养双歧杆菌(BS培养基),乳酸杆菌(LC培养基),肠杆菌(EMB培养基)及肠球菌(EC培养基),48小时之后数取培养基上菌落数。将两次的菌落数对比得出抗生素灌胃后小鼠肠道菌群失调,结果如表1。
表1小鼠粪便菌群检测结果(x±s,logCFU/g)
细菌 | 抗生素灌胃前 | 抗生素灌胃后 |
肠杆菌 | 6.85±1.35 | 8.52±0.92** |
肠球菌 | 6.42±1.31 | 5.13±0.87** |
双歧杆菌 | 9.57±0.92 | 8.34±0.83** |
乳杆菌 | 8.73±0.89 | 7.13±0.73** |
注:**,与抗生素灌胃前比较P<0.01。
2.基于肠道菌群失调动物模型的药效学试验
从肠道菌群失调的小鼠中随机选取一组作为模型组,与正常组以生理盐水灌胃,其余3组分别灌服微生态调节剂(主要成份为双歧杆菌和蜡样芽胞杆菌),粪便(肠道正常的小鼠的粪便)及粪菌发酵中药组合物,0.2ml每只,每天2次,连续5天。于最后1次给受试物24小时后,无菌采取小鼠粪便,选择适当的稀释度稀释后,分别接种在各培养基上培养双歧杆菌(BS培养基),乳杆菌(LC培养基),肠杆菌(EMB培养基)及肠球菌(EC培养基),48小时之后数取培养基上的菌落,如表2。
表2小鼠粪便菌群检测结果(x±s,logCFU/g)
注:*,与自然恢复组比较P<0.05;**,与自然恢复组比较P<0.01。
通过对比表1和表2可以看出,灌服抗生素小鼠肠道内菌群失调(双歧杆菌、乳杆菌及肠球菌的数量比灌药前减少,肠杆菌明显增加);待分别给予微生态调节剂、粪便及粪菌发酵中药组合物后,双歧杆菌、乳杆菌在小鼠肠道内的数量明显增加,说明3种受试物对于肠道菌群失调小鼠具有增殖双歧杆菌和乳杆菌等有益菌的作用;粪菌发酵中药组小鼠体内的肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌以及乳杆菌的数量均接近正常组,其接近度明显优于微生态组和粪便组,说明本发明提供的粪菌发酵中药具有很好的调节、重建肠道菌群的功能,从而可有效治疗肠道菌群失调。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种中药组合物的制备方法,其特征在于,包括:
按照配方称取原料药,加入水进行提取,滤去药渣,制成汤剂;加入葡萄糖、酵母膏和低聚麦芽糖,用氢氧化钠调节pH至6.0-8.0;对所得混合物高压灭菌,得到粪菌发酵底物;
将粪便和生理盐水混合,再用纱布过滤,得到粪菌的混悬液;
将所述粪菌接种到所述粪菌发酵底物中,恒温摇床培养,从而得到所述中药组合物;
其中,根据不同的证选择所述配方,所述配方包括:
外感寒湿证:佩兰0-20份、香薷0-20份、羌活0-20份、半夏0-12份、陈皮0-20份、茯苓0-20份、甘草0-12份;
湿热下迫证:猪苓0-30份、黄连0-18份、黄柏0-18份、甘草0-12份;
脾胃虚弱证:黄芪0-24份、党参0-24份、茯苓0-24份、山药0-24份、陈皮0-20份、薏苡仁0-20份、甘草0-12份;
脾胃虚寒证:黄芪0-24份、白术0-24份、干姜0-20份、甘草0-12份;或者
脾肾阳虚证:干姜0-24份、肉桂0-20份、吴茱萸0-24份、白术0-24份、甘草0-12份。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述配方包括:
外感寒湿证:佩兰10份、香薷10份、羌活10份、半夏6份、陈皮10份、茯苓10份、甘草6份;
湿热下迫证:猪苓15份、黄连9份、黄柏9份、甘草6份;
脾胃虚弱证:黄芪12份、党参12份、茯苓12份、山药12份、陈皮10份、薏苡仁10份、甘草6份;
脾胃虚寒证:黄芪12份、白术12份、干姜10份、甘草6份;或者
脾肾阳虚证:干姜12份、肉桂10份、吴茱萸12份、白术12份、甘草6份。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在制备所述粪菌发酵底物的步骤中,进一步包括:按照配方称取原料药,粉碎,以第一比例加入水,其中所述第一比例为水的体积与药材质量的比,并且其中所述第一比例在10:1至40:1的范围内,浸泡0.5~2小时,微沸状态下提取20~60分钟,滤去药渣,制成汤剂;加入0.5%~1%葡萄糖、0.3%~0.5%酵母膏、0.5%~1%低聚麦芽糖,用氢氧化钠调节pH至7.0;所得混合物在121℃下高压灭菌10~30分钟,得到所述粪菌发酵底物。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在制备所述粪菌的混悬液的步骤中,进一步包括:以第二比例将粪便和生理盐水混合,所述第二比例为生理盐水的体积与粪便质量的比,并且其中所述第二比例在5:1至15:1的范围内,再用纱布过滤,得到所述粪菌的混悬液。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在制备所述中药组合物的步骤中,进一步包括:当所述粪菌发酵底物的温度降到30℃以下时,按照0.1%~10%的体积百分数将所述粪菌接种到所述粪菌发酵底物中,在20℃~40℃下恒温摇床培养2~4天,从而得到所述中药组合物。
6.一种根据权利要求1-5中任一项所述的方法制备的中药组合物。
7.根据权利要求6所述的中药组合物在调节肠道菌群方面中的应用。
8.根据权利要求7所述的中药组合物在制备食品和/或保健食品中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其中,所述食品和/或保健食品中包括:所述粪菌发酵中药组合物、矫味剂、赋形剂或它们的组合。
10.根据权利要求8所述的应用,其中,所述食品和/或保健食品的服用形式包括:口嚼片、含化片、颗粒剂、袋泡茶、口服液、饮料或它们的组合。
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