CN106442084B - 一种去除血清中的小分子物质的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种去除血清中的小分子物质的方法；具体地说，本发明公开了一种去甲状腺激素血清及其制备方法和包括所述去甲状腺激素血清的人总三碘甲状腺原氨酸及游离甲状腺原氨酸检测试剂盒。本发明的去甲状腺激素血清采用葡聚糖处理的活性炭吸附处理血清而得到。本发明的人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒具有检测灵敏度高、特异性强、结果稳定性好等优点；从而可以大规模适用于甲状腺疾病临床辅助诊断筛查。

Description

一种去除血清中的小分子物质的方法

技术领域

本发明涉及体外诊断医学检验领域。具体地说，本发明涉及一种去除血清中的小分子物质，例如血清中的甲状腺激素的方法以及所制备的去除小分子物质的血清的用途。

背景技术

在体外诊断医学检验领域，所谓的定标品是指客户端使用的，作为适用于特定试剂的标准物质。例如，为检测血清中某种物质，为了避免不同检测物质的误差，一般需要去除该物质的血清作为定标品稀释液。在试剂盒的研制过程中，公司内通过校准品建立各批号试剂盒的主曲线并给产品中的定标品赋值，客户端采用定标品修正主曲线生成定标曲线，测定常规样本后得到测定结果。

校准品是具有在校准函数中用作独立变量值的参考物质；主曲线是反映被测物质浓度与发光值之间函数关系的曲线。主曲线由试剂制造商制定。不同批号试剂的主曲线，一般都不会完全相同。

甲状腺作为人体最重要的腺体，通过合成、储存以及释放甲状腺素(thyroxine，levothyronine，T4)及三碘甲状腺原氨酸(Triiodothyronine，liothyronine，T3)两种甲状腺激素来控制能量、蛋白质及脂肪的合成代谢等人体生理活动(如图1所示)。

三碘甲状腺原氨酸(T3)是一种分子量为651道尔顿的激素，是甲状腺激素在组织中实现生物作用的活性形式。在人体内，超过99％的三碘甲状腺原氨酸与甲状腺素结合球蛋白(TBG)特异性结合，处于结合状态，只有约0.3％为游离状态(FT3)。血清总T4(TT4)、总T3(TT3)测定是反映甲状腺功能状态的最佳指标，它们在甲亢时增高，甲减时降低，而在甲亢时，血清TT3增高常较TT4增高出现更早。TT3的测定，有助于早期甲亢的诊断及对甲亢的治疗的监控。

游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)是总三碘甲状腺原氨酸(TT3)中具有生物活性的形式。检测FT3的优势在于，当由于怀孕、使用一些激素类药物进行治疗等情况导致三碘甲状腺原氨酸的蛋白结合浓度或亲和力变化时，FT3并不受到影响。FT3与游离T4(FT4)的联合检测，是临床诊断某些复杂或非典型甲亢及罕见甲状腺疾病的重要依据。

目前临床上总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸的检测方法主要有始于二十世纪中后期的放射免疫分析法(RIA)试剂盒，发展到二十世纪后期的酶联免疫法(ELISA)试剂盒。由于酶联免疫试剂盒采用酶促显色反应，其定量量程小、灵敏度低，需采用人工操作，费时费力且误差大，已逐渐被国外市场所淘汰。目前总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸试剂盒多采用化学发光法(CLIA)，化学发光法(CLIA)试剂盒不论是灵敏度、准确性，还是特异性都有很大的提高。化学发光法(CLIA)包括板式化学发光法和全自动化学发光试剂盒。板式化学发光法虽然解决了酶联免疫法定量灵敏度较低的缺点，但是不适用全自动免疫发光仪，相对于国外进口试剂盒没有优势。国内试剂厂商所生产的试剂盒多数仍为酶联免疫法试剂盒(ELISA)，缺乏市场竞争力，造成目前我国检测总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸的试剂盒主要由国外四大体外诊断试剂公司，如罗氏，雅培，贝克曼，西门子所垄断，这是检测诊断成本高的一个原因，且试剂盒的制备方法和相关材料均作为保密资料，未被公开，不利于总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸检测在社区基层医院的推广。国产总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸试剂盒重复性较差，批间差异难控，且灵敏度较低，交叉反应率较高，临床应用前景较差。

因此，本领域急需一种具有检测灵敏度高、特异性好、重复性高等优点的人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒。

发明内容

本发明的目的是提供一种去除分子量小于1,000道尔顿的小分子，例如甲状腺激素的血清及其制备方法，利用所述血清大幅提高了试剂盒的准确度及灵敏度。

本发明还有一目的是提供包括上述血清的检测试剂盒，例如人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒。

本发明再有一目的是提供利用本发明的血清或试剂盒，例如去甲状腺激素血清或人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸测试剂盒检测，例如人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸的方法。

在第一方面，本发明提供一种葡聚糖处理的活性炭，其中，活性炭的粒径为0.4～0.6mm，孔径为10～20A，葡聚糖的分子量为10000～40000道尔顿。

在优选的实施方式中，所述葡聚糖的分子量为10000；所述活性炭的粒径为0.6mm，孔径为20A。

在具体的实施方式中，用葡聚糖处理活性炭是将活性炭加入饱和的葡聚糖溶液中缓慢混匀过夜制备得到。

在优选的实施方式中，所述的葡聚糖处理活性炭的制备，是将活性炭加入饱和的葡聚糖溶液中，缓慢混匀过夜，活性炭上完全被葡聚糖封闭后，使用水溶液洗净沥干后，保存备用。

在优选的实施方式中，葡聚糖与活性炭的质量比为50-500:1，优选100:1。

在第二方面，本发明提供一种去除人血清中分子量小于1,000道尔顿的小分子的方法，所述方法包括以下步骤：

a)利用本发明第一方面所述的葡聚糖处理的活性炭来处理人血清；

b)混合步骤a)得到的葡聚糖处理的活性炭与人血清的体系以去除人血清中分子量小于1,000道尔顿的小分子后，低速离心去除葡聚糖处理的活性炭。

在具体的实施方式中，所述分子量小于1,000的小分子是甲状腺激素、性激素、肾上腺皮质激素，优选甲状腺激素。

在优选的实施方式中，所述处理是将葡聚糖处理的活性炭与血清进行混合，浓度为20-40mg/ml，在2-8℃，混合2-7天；优选40mg/ml，以50rpm混合3天或者20mg/ml，混合2天后，再加入10mg/ml混合1天，50rpm。

在第三方面，本发明提供一种去甲状腺激素人血清，所述人血清利用本发明第一方面所述的葡聚糖处理的活性炭进行处理，从而去除了甲状腺激素。

在优选的实施方式中，将葡聚糖处理的活性炭与人血清进行混合，浓度为20-40mg/ml，在2-8℃，混合2-7天。

在具体的实施方式中，所述去甲状腺激素人血清中总甲状腺素的含量低于8ng/ml,游离甲状腺素含量低于0.3ng/dL,总三碘甲状腺原氨酸含量低于0.25ng/ml，游离三碘甲状腺原氨酸含量低于1pg/ml。

在第四方面，本发明提供利用本发明第一方面所述的葡聚糖处理的活性炭得到的去甲状腺激素血清，或采用本发明第二方面所述的方法得到的去甲状腺激素人血清，或本发明第三方面所述的去甲状腺激素人血清在制备人总三碘甲状腺原氨酸及游离甲状腺原氨酸检测试剂盒中的用途。

在第五方面，一种人总三碘甲状腺原氨酸及游离甲状腺原氨酸检测试剂盒，所述试剂盒装有：利用本发明第一方面所述的葡聚糖处理的活性炭得到的去甲状腺激素血清，或采用本发明第二方面所述的方法得到的去甲状腺激素人血清，或本发明第三方面所述的去甲状腺激素人血清作为稀释液制得的定标品。

在优选的实施方式中，所述检测试剂盒还可装有：酶标记的三碘甲状腺原氨酸；包被T3抗体的磁微粒；稀释液；化学发光底物和洗涤液以及使用说明书。

在另一优选的实施方式中，所述人游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒还装有：酶标记的三碘甲状腺原氨酸；包被T3抗体的磁微粒；稀释液；化学发光底物和洗涤液。

在另一优选的实施方式中，所述酶标记的三碘甲状腺原氨酸中的酶是碱性磷酸酶。

在另一优选的实施方式中，所述包被T3抗体的磁微粒的主要成分是超顺磁性微粒，粒径为800nm～3μm，主要的活性功能基团为羧基、氨基或苯甲磺酰基。

在另一优选的实施方式中，所述化学发光底物的主要成分为1,2-二氧杂环丁烷衍生物，为酶促化学发光底物。

在另一优选的实施方式中，所述1,2-二氧杂环丁烷衍生物为AMPPD(3-(2'-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3"-磷酰氧基)苯-1,2-二氧杂环丁烷)、CDP-star。

在第六方面，本发明提供一种检测人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸的方法，所述方法包括利用本发明第一方面所述的葡聚糖处理的活性炭得到的去甲状腺激素血清，或采用本发明第二方面所述的方法得到的去甲状腺激素血清，或本发明第三方面所述的去甲状腺激素人血清，或本发明第五方面所述的人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒检测离体样品中的人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸。

在第七方面，本发明提供制备人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒的方法，所述的方法包括：

将利用本发明第一方面所述的葡聚糖处理的活性炭得到的去甲状腺激素血清，或采用本发明第二方面所述的方法得到的去甲状腺激素血清，或本发明第三方面所述的去甲状腺激素人血清；酶标记的三碘甲状腺原氨酸；包被T3抗体的磁微粒；稀释液；化学发光底物和洗涤液制成人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒。

在另一优选的实施方式中，所述的总三碘甲状腺原氨酸定标品的浓度分别为0-2ng/mL和4-8ng/mL；所述的游离三碘甲状腺原氨酸定标品的浓度分别为0-5pg/mL和10-30pg/mL。

在另一优选的实施方式中，所述的T3抗体交联磁微粒的制备，是将活性功能基团为羧基、氨基或苯甲磺酰基的磁微粒通过共价交联的方式与T3抗体中的裸露氨基交联反应，并通过含有0.5～2％的酪蛋白溶液洗涤和封闭，最终贮存于含有0.1～1％的酪蛋白溶液中，2～8℃保存备用。

在另一优选的实施方式中，所述的磁微粒试剂稀释液的配方为：10～100mM pH7.2～7.8Tris-HCl、0.5～2％酪蛋白、0.05～0.2％ProClin-300。

在另一优选的实施方式中，碱性磷酸酶标记三碘甲状腺原氨酸的制备方法为戊二醛偶联法，具体操作为：将碱性磷酸酶溶于终浓度5％戊二醛溶液中，室温静置过夜，生理盐水透析后，加入三碘甲状腺原氨酸，50mM pH9.6碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液中透析过夜，加入甘氨酸，室温反应2小时，等体积加入饱和硫酸铵，2～8℃2小时，4000rpm离心去上清，沉淀溶于50mM pH7.40磷酸缓冲液中，对其透析过夜，加入等体积甘油，置于-20℃保存。

在另一优选的实施方式中，碱性磷酸酶标记三碘甲状腺原氨酸的稀释液的配方为：10～100mM pH 7.2～7.8Tris-HCl、0.5～2％BSA、5～15％甘油、0.05～0.5％吐温-20、0.05～0.2％ProClin-300。

在另一优选的实施方式中，所述总三碘甲状腺原氨酸的稀释液配方为：10～100mMpH 7.2～7.8Tris-HCl，0.5～2％酪蛋白，0.1～1mg/ml解离剂，0.05～0.2％ProClin-300。

在另一优选的实施方式中，所述游离三碘甲状腺原氨酸的稀释液配方为：10～100mM pH 7.2～7.8Tris-HCl，0.5～2％酪蛋白，0.05～0.2％ProClin-300。

在另一优选的实施方式中，所述的洗涤液配方为：10～100mM pH 7.2～7.8Tris-HCl，50～300mM NaCl，0.1～1％曲拉通X-100，0.05～0.2％ProClin-300。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

附图说明

图1显示了甲状腺素及三碘甲状腺原氨酸的结构；

图2显示了使用本发明所述方法得到的去甲状腺激素血清、使用普通活性炭处理得到的去甲状腺激素血清和去甲状腺激素牛血清，对于总三碘甲状腺原氨酸试剂盒定标品的影响。由图2可看出对照去甲状腺激素血清线性最佳，优于使用普通活性炭处理得到的去甲状腺激素血清和去甲状腺激素牛血清。

具体实施方式

发明人经过广泛而深入的研究，出乎意料地发现利用葡聚糖处理的活性炭处理血清，能够有效去除其中分子量小于1,000道尔顿的小分子物质，将经处理的血清用作检测试剂盒的定标品，能够显著改善最终所得试剂盒的准确度及灵敏度。在此基础上完成了本发明。

在具体的实施方式中，利用葡聚糖处理的活性炭处理得到的去甲状腺激素血清，用作总三碘甲状腺原氨酸试剂盒及游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒的定标品，能够显著改善最终所得试剂盒的准确度及灵敏度。

本发明的去甲状腺激素血清及其制备方法

基于以上出乎意料的发现，本发明首先提供一种去甲状腺激素血清，所述去甲状腺激素血清在作为试剂盒定标品稀释液前，利用葡聚糖处理的活性炭进行处理。

本文所用的术语“葡聚糖处理的活性炭”是指由葡聚糖和活性炭构成的组合物，其中，活性炭的粒径为0.4～0.6mm，孔径为10～20A，葡聚糖的分子量为10000～40000道尔顿。在优选的实施方式中，所述葡聚糖的分子量为10000；所述活性炭的粒径为0.6mm，孔径为20A。

在具体的实施方式中，用葡聚糖处理活性炭是指将活性炭加入饱和的葡聚糖溶液中缓慢混匀过夜以制备葡聚糖处理的活性炭。在优选的实施方式中，所述的葡聚糖处理活性炭的制备，是将活性炭加入饱和的葡聚糖溶液中，反复活性炭上完全被葡聚糖封闭后，使用水溶液洗净沥干后，保存备用。其中，葡聚糖与活性炭的质量比为50-500:1，优选100:1。

相应地，本发明还提供了上文所述去甲状腺激素血清的制备方法，所述方法包括以下步骤：

a)利用上述的葡聚糖处理的活性炭来处理人血清；

b)混合步骤a)得到的葡聚糖处理的活性炭与人血清的体系以去除人血清中的甲状腺激素后，低速离心去除葡聚糖处理的活性炭。

在本发明中，所述处理是将葡聚糖处理的活性炭与正常人血清进行混匀。

所述处理是将葡聚糖处理活性炭与正常人血清进行混匀，浓度为20-40mg/ml，在2-8℃，混匀2-7天；优选40mg/ml混匀3天或者20mg/ml，2天后再加入10mg/ml混匀1天。鉴于本发明的教导和现有技术，本领域普通技术人员可以合理确定上述处理中，正常人血清与葡聚糖处理活性炭各自合适的浓度以及相互的比例。

例如，在具体的实施方式中，前处理中所述处理是将葡聚糖处理活性炭与正常人血清进行混匀，浓度为20-40mg/ml，在2-8℃，混匀2-7天；优选40mg/ml混匀3天50rpm或者20mg/ml，2天后再加入10mg/ml混匀1天50rpm。

本发明的人总三碘甲状腺原氨酸及游离甲状腺原氨酸检测试剂盒

本发明的去甲状腺激素血清可以用于检测人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒，从而能够显著改善最终所得试剂盒的准确度及灵敏度。

基于本发明的去甲状腺激素血清，本发明进一步提供了一种人总三碘甲状腺原氨酸及游离甲状腺原氨酸检测试剂盒，所述试剂盒利用本发明的去甲状腺激素血清作为定标品稀释液。

鉴于本发明的教导和现有技术，本领域普通技术人员可以确定所述人总三碘甲状腺原氨酸及游离甲状腺原氨酸检测试剂盒中的其它组分，例如，在具体的实施方式中，本发明的人总三碘甲状腺原氨酸及游离甲状腺原氨酸检测试剂盒还可装有：酶标记的三碘甲状腺原氨酸；包被T3抗体的磁微粒；稀释液；化学发光底物和洗涤液。

在优选的实施方式中，所述酶标记的三碘甲状腺原氨酸中的酶是碱性磷酸酶。

相应地，本发明的人三碘甲状腺原氨酸及游离甲状腺原氨酸检测试剂盒中的所述化学发光底物的主要成分可以为1,2-二氧杂环丁烷衍生物，为酶促化学发光底物。在优选的实施方式中，所述1,2-二氧杂环丁烷衍生物为AMPPD(3-(2'-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3"-磷酰氧基)苯-1,2-二氧杂环丁烷)、CDP-star。而本发明的人三碘甲状腺原氨酸及游离甲状腺原氨酸检测试剂盒中的磁微粒试剂的主要成分可以是超顺磁性微粒，其粒径为800nm～3μm，主要的活性功能基团为羧基、氨基或苯甲磺酰基。T3抗体交联磁微粒的制备，是将活性功能基团为羧基、氨基或苯甲磺酰基的磁微粒通过共价交联的方式与T3抗体中的裸露氨基交联反应，并通过含有0.5～2％的酪蛋白溶液洗涤和封闭，最终贮存于含有0.1～1％的酪蛋白溶液中，2～8℃保存备用。

本发明的人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒可如下所示进行制备，包括：

T3抗体交联磁微粒；酶标记的三碘甲状腺原氨酸；将本发明的去甲状腺激素血清作为稀释液的定标品；化学发光底物；和洗涤液制成人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒。

在具体的实施方式中，所述的磁微粒试剂稀释液的配方为：10～100mM pH 7.2～7.8Tris-HCl、0.5～2％酪蛋白、0.05～0.2％ProClin-300。

在具体的实施方式中，碱性磷酸酶标记T3抗体的制备方法为戊二醛偶联法，具体为：将碱性磷酸酶溶于终浓度5％戊二醛溶液中，室温静置过夜，生理盐水透析后，加入三碘甲状腺原氨酸，50mM pH 9.6碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液中透析过夜，加入甘氨酸，室温反应2小时，等体积加入饱和硫酸铵，2～8℃2小时，4000rpm离心去上清，沉淀溶于50mM pH 7.40磷酸缓冲液中，对其透析过夜，加入等体积甘油，置于-20℃保存。

在具体的实施方式中，碱性磷酸酶标记三碘甲状腺原氨酸的稀释液的配方为：10～100mM pH 7.2～7.8Tris-HCl、0.5～2％酪蛋白、5～15％甘油、0.05～0.5％吐温-20、0.05～0.2％ProClin-300；总三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒定标品的浓度分别为0-2ng/mL和4-8ng/mL；游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒定标品的浓度分别为0-5pg/mL和10-30pg/mL。；总三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒的稀释液配方为：10～100mM pH 7.2～7.8Tris-HCl，0.5～2％酪蛋白，0.1～1mg/ml解离剂，0.05～0.2％ProClin-300。游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒的稀释液配方为：10～100mM pH 7.2～7.8Tris-HCl，0.5～2％酪蛋白，0.05～0.2％ProClin-300。所述的洗涤液配方为：10～100mM pH 7.2～7.8Tris-HCl，50～300mMNaCl，0.1～1％曲拉通X-100，0.05～0.2％ProClin-300。

本发明的人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸的检测方法

在本发明的去甲状腺激素血清以及包含其的人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒的基础上，本发明还提供一种检测人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸的方法，所述方法利用本发明的去甲状腺激素血清，或本发明的人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒检测离体样品中的人总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸。

本领域技术人员知晓，本发明的肌红蛋白检测方法可以用于诊断目的，但不限于诊断目的，例如，可用于科研目的等等。

本发明的优点

1)包含本发明的去甲状腺激素血清的试剂盒的检测灵敏度高，目前市场上的总三碘甲状腺原氨酸试剂盒的最低检测限一般高于0.3ng/mL，相比之下，包含本发明去甲状腺激素血清的试剂盒的最低检测限能达到0.1ng/mL；前市场上的游离三碘甲状腺原氨酸试剂盒的最低检测限一般高于1.5pg/mL，相比之下，包含本发明去甲状腺激素血清的试剂盒的最低检测限能达到0.5pg/mL；

2)本发明的试剂盒特异性强；胆红素、血红蛋白、乳糜颗粒、类风湿因子(RF)、抗核抗体(ANA)、人抗鼠抗体(HAMA)对总三碘甲状腺原氨酸及游离三碘甲状腺原氨酸测定结果均无明显干扰；

3)本发明的试剂盒测定结果稳定性好；碱性磷酸酶更稳定、测定结果的重复性更好，1,2-二氧杂环丁烷衍生物具有较长的发光时间，发光信号可稳定超过20分钟以上；信号强度高，便于光电倍增管检测；抗干扰能力强，不易污染。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

实施例

实施例1.葡聚糖处理的活性炭的制备

选取分子量为10000道尔顿的葡聚糖1g，加入20mL纯化水充分溶解后加入粒径为0.6mm，孔径为的20A活性炭10mg，缓慢混匀过夜，待活性炭完全封闭后，使用水重复洗净，沥干制得葡聚糖处理活性炭。

实施例2.利用葡聚糖处理的活性炭处理人血清得到去甲状腺激素血清

将10g葡聚糖处理的活性炭与250mL血清进行混合，在2-8℃以50rpm转速进行混匀，混合3天，取去除了激素的血清2500rpm离心，去除活性炭后即制得去甲状腺激素血清。

实施例3.检验去甲状腺激素血清中甲状腺激素去除程度

使用总甲状腺素(TT4)、游离甲状腺素(FT4)、总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)试剂盒测试实施例2中制得的去甲状腺激素血清；测试结果如下：

从以上结果可以看出，本发明制得的去甲状腺激素血清中甲状腺激素的含量极低，本发明的方法能够充分去除血清中的甲状腺激素。

实施例4.本发明的试剂盒的验证

应用本发明的去甲状腺激素血清的总三碘甲状腺原氨酸试剂盒性能如下：

应用本发明的去甲状腺激素血清的游离总三碘甲状腺原氨酸试剂盒性能如下：

从以上结果可以看出，应用本发明的去甲状腺激素血清的检测试剂盒具备优异的检测灵敏度、最低检测限能、特异性、抗干扰性、结果稳定性。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (1)

1.一种去除人血清中分子量小于1,000道尔顿的小分子的方法，所述方法包括以下步骤：

a)利用葡聚糖处理的活性炭来处理人血清,其中，活性炭的粒径为0.4～0.6mm，孔径为10～20A，葡聚糖的分子量为10000～40000道尔顿，葡聚糖与活性炭的质量比为100:1；

b)混合步骤a)得到的葡聚糖处理的活性炭与人血清的体系以去除人血清中分子量小于1,000道尔顿的小分子后，低速离心去除葡聚糖处理的活性炭；

所述分子量小于1,000道尔顿的小分子是甲状腺激素。

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