CN106417259A - 猪***长效稀释粉及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于猪繁殖领域,涉及猪***长效稀释粉及其应用。由下述重量份的组分混合而成:配方1:葡萄糖4‑6g,二水柠檬酸三钠5‑7g,一水柠檬酸2‑3g,乙二胺四乙酸7‑8g,碳酸氢钠5‑6g,氯化钾2‑3g,三羟甲基氨基甲烷6‑7g,半胱氨酸0.1‑0.3g,海藻糖2‑3g,抗生素恩诺沙星0.3‑0.5g和硫酸多黏菌素0.05‑0.07g;配方2(优化):葡萄糖5.06g,二水柠檬酸三钠6.12g,一水柠檬酸2.30g,乙二胺四乙酸7.38g,碳酸氢钠5.54g,氯化钾2.37g,三羟甲基氨基甲烷6.85g,半胱氨酸0.21g,海藻糖2.11g,抗生素恩诺沙星0.42g和硫酸多黏菌素0.06g。
Description
技术领域
本发明属于猪繁殖技术领域。具体涉及猪***长效稀释粉及其应用。
背景技术
猪人工授精技术是用人工器械采集公猪***并对***进行品质检查和稀释后,再用器械将***注入发情母猪生殖道内,以代替公猪自然交配的一种配种方法,20世纪80年代在世界范围内迅速普及,目前在使用比较广的欧洲和北美等地区,普及率已超过80%,是进行科学养猪、实现养猪生产现代化的重要手段,它有如下优点:(1)节省公猪,并减少每头公猪的使用次数,克服时间和区域差异,可以方便地适时配种;(2)节省人力、物力、财力,提高经济效益,减少疾病的传播;(3)提高配种率,由于可以利用显微镜、密度仪等仪器对***质量进行监控,有效提高了配种受胎率,并可及时调整***质量较差的公猪;(4)增加遗传性能优良的公猪的利用率,扩大良种覆盖率,有利于品种改良和联合育种。
在开展猪的人工授精工作中,必须配制公猪***的稀释液,以便稀释保存。
申请号201310478237.6公开了一种猪***稀释剂,申请号201010133910.9公开了一种猪***常温保存稀释剂及其制备和稀释方法,保存***时间均只有3天;申请号201410164618.1的猪抗病毒***稀释液,保存***时间只有4天。
申请号为201410527131.5的发明公开了一种猪抗病毒长效***稀释液配方及制备方法,保存***的时间为5-7天,其缺陷是在制备时配方中的聚乙烯乙醇需要在加热电磁搅拌器上溶解于150ml 30-50℃的蒸馏水中,搅拌20-40分钟,制备步骤麻烦。
与本发明密切相关的申请号201210238501.4的发明公开了一种长效猪***稀释粉及其制备方法,猪***的保存时间为10-12天,但是其中的鸡卵黄干粉制备方法复杂,制备过程中被污染的几率大,需要相应的干燥设备,质保期短。
所以开发出保存猪***时间长、制备简便的猪***稀释粉对人工授精技术具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷,提供一种长效性的猪***稀释粉及其应用,本发明取材容易、制备简便、易于贮存,应用本发明的猪长效***稀释粉的***保存时间可长达9-11天。
本发明的另一个目的,是提供一种猪***长效稀释粉的应用方法。
本发明的技术方案如下:
一种猪***长效稀释粉,它是由如下重量份的组分混合而成:葡萄糖4-6g,二水柠檬酸三钠5-7g,一水柠檬酸2-3g,乙二胺四乙酸7-8g,碳酸氢钠5-6g,氯化钾2-3g,三羟甲基氨基甲烷6-7g,半胱氨酸0.1-0.3g,海藻糖2-3g,抗菌素恩诺沙星0.3-0.5g和硫酸多黏菌素0.05-0.07g。
作为优选方案,本发明由如下重量份的组分混合而成:葡萄糖5.06g,二水柠檬酸三钠6.12g,一水柠檬酸2.30g,乙二胺四乙酸7.38g,碳酸氢钠5.54g,氯化钾2.37g,三羟甲基氨基甲烷6.85g,半胱氨酸0.21g,海藻糖2.11g,抗菌素恩诺沙星0.42g和硫酸多黏菌素0.06g。
一种猪***长效稀释粉的应用方法,包括如下步骤:采集公猪***,测定得到渗透压为301.25±14.52mmol/kg、PH值为7.04±0.05,根据猪***长效稀释粉的配制目的--对***无害,能提供***营养,pH范围适合***存活,渗透压适当,原料易得、配置简单,长效保存,进行组分的筛选工作,筛选得到的各组分是:葡萄糖、二水柠檬酸三钠(C6H5Na307.2H2O)、一水柠檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、碳酸氢钠(NaHCo3)、氯化钾(Kcl)、三羟甲基氨基甲烷(TRIS)、半胱氨酸、海藻糖、抗菌素恩诺沙星和硫酸多黏菌素、牛血清白蛋白(BSA)。
根据测定公猪***得到的渗透压和PH值以及课题组先期的预配方试验结果,将牛血清白蛋白、半胱氨酸、海藻糖、抗菌素恩诺沙星和硫酸多黏菌素作为主要变化因素,梯度水平为4,采用L16(45)正交表进行试验,3个重复(3头公猪的***),筛选配方。然后对配方作进一步优化,调节理化参数,以渗透压为主,进行渗透压梯度试验,按最佳渗透压将配方进一步优化,考虑到牛血清白蛋白价格昂贵,直接导致成本上升,不利于大规模推广应用,决定弃用。每个试验周期为11天左右,直到绝大多数***样品活力降低到0.6以后停止检测,分析获得最佳的配方,优化后的配方稀释***,保存9-11天,***活力为0.60。
本发明的有益效果是:
自然交配时,一头公猪每年可承担25头母猪进行本交的配种负荷,而采用人工授精,一头公猪1年可配250头以上母猪,人工授精与本交相比较,其优点是可以节省公猪的饲养量。应用本发明长效稀释粉稀释猪***进行人工授精,可以减少人工授精过程中的消毒和配稀释液、稀释***的次数,猪***在一定长的时间内保存起来以便随时使用,节能省事。用本发明配制的猪***长效稀释粉稀释的猪***在温度为17℃的恒温条件下,可以保存9-11天。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步详细说明,实施例仅用来说明本发明,并不限制本发明的范围;实施例所用原料采用分析纯级别,所有步骤均在净化空间进行,净化空间的洁净度要求为30万级。
实施例1
一种猪***长效稀释粉,用如下重量份的组分混合而成:葡萄糖4.80g,二水柠檬酸三钠5.80g,一水柠檬酸2.18g,乙二胺四乙酸7.00g,碳酸氢钠5.25g,氯化钾2.25g,三羟甲基氨基甲烷6.50g,半胱氨酸0.20g,海藻糖2.00g,抗菌素恩诺沙星0.40g和硫酸多黏菌素0.06g。
(1)实施例原料采用分析纯级别,称量、真空包装后密封,得到稀释粉,2-8℃的条件下保存。
(2)使用稀释粉时,用加热至35-37℃的二次蒸馏水搅拌,混合均匀,定容到1000ml,得到***稀释液,1小时后用于猪***的稀释。
(3)猪***采集后,将气味、颜色正常的猪***先用***密度仪检测密度,再在预热37℃玻片上100倍显微镜下镜检***活力,活力达0.9级以上的猪***用公式计算稀释的份数:重量×密度×活力÷30=份数(30是指每份***有效***数30亿)。
(4)***稀释液与猪***温差不能超过1℃,并且通过调整***稀释液的温度使猪***与***稀释液的温度尽可能的接近,不能反向操作。
(5)稀释猪***时将***稀释液沿容器壁缓慢倒入到猪***中,落差不要大,以不起泡沫为准,然后轻轻摇动或用消毒玻璃棒搅拌,使两者轻柔混匀;按体积计算,如作1:2-4倍的高倍稀释时,应先作1:1-1.5倍的低倍稀释,待半分钟后在将余下的***稀释液沿容器壁缓慢加入,不可反过来将猪***倒入***稀释液中。所有稀释操作都要在室温23-25℃环境下,30min内完成。
(6)将稀释后的猪***缓慢装入洁净的***瓶或***袋中,以整个***瓶或***袋容积计算,空气含量6-7%,密闭***瓶或***袋,减少***与氧气接触,抑制***的代谢,延长***的保存时间,在23-25℃室温下避光缓慢降温1个小时后(也可用洁净的干的纯棉大毛巾包裹2层后)放置于17℃恒温箱中保存,每隔8小时缓慢摇动***,避免***沉积造成伤亡。每隔24小时检测一次***活力。
(7)室内禁止吸烟,女操作员不能使用气味浓重的化妆品,与***接触的温度计、玻璃棒、稀释杯、稀释水37℃预热。在猪***的运输过程中要避免阳光照射、避免颠簸震动、避免温差大起大落。使用专门的恒温运输箱或者泡沫箱,夏天放冰水袋,冬天放棉毛巾,保持箱内温度为15-20℃。
实施效果见表1
实施例2
一种优化的猪***长效稀释粉,由如下重量份的组分混合而成:葡萄糖5.06g,二水柠檬酸三钠6.12g,一水柠檬酸2.30g,乙二胺四乙酸7.38g,碳酸氢钠5.54g,氯化钾2.37g,三羟甲基氨基甲烷6.85g,半胱氨酸0.21g,海藻糖2.11g,抗菌素恩诺沙星0.42g和硫酸多黏菌素0.06g。
(1)实施例原料采用分析纯级别,称量、真空包装后密封,得到稀释粉,2-8℃的条件下保存。
(2)使用稀释粉时,用加热至35-37℃的二次蒸馏水搅拌,混合均匀,定容到1000ml,得到***稀释液,1小时后用于猪***的稀释。
(3)猪***采集后,将气味、颜色正常的猪***先用***密度仪检测密度,再在预热37℃玻片上100倍显微镜下镜检***活力,活力达0.9级以上的猪***用公式计算稀释的份数:重量×密度×活力÷30=份数(30是指每份***有效***数30亿)。
(4)***稀释液与猪***温差不能超过1℃,并且通过调整***稀释液的温度使猪***与***稀释液的温度尽可能的接近,不能反向操作。
(5)稀释猪***时将***稀释液沿容器壁缓慢倒入到猪***中,落差不要大,以不起泡沫为准,然后轻轻摇动或用消毒玻璃棒搅拌,使两者轻柔混匀;按体积计算,如作1:2-4倍的高倍稀释时,应先作1:1-1.5倍的低倍稀释,待半分钟后在将余下的***稀释液沿容器壁缓慢加入,不可反过来将猪***倒入***稀释液中。所有稀释操作都要在室温23-25℃环境下,30min内完成。
(6)将稀释后的猪***缓慢装入洁净的***瓶或***袋中,以整个***瓶或***袋容积计算,空气含量6-7%,密闭***瓶或***袋,减少***与氧气接触,抑制***的代谢,延长***的保存时间,在23-25℃室温下避光缓慢降温1个小时后(也可用洁净的干的纯棉大毛巾包裹2层后)放置于17℃恒温箱中保存,每隔8小时缓慢摇动***,避免***沉积造成伤亡。每隔24小时检测一次***活力。
(7)室内禁止吸烟,女操作员不能使用气味浓重的化妆品,与***接触的温度计、玻璃棒、稀释杯、稀释水37℃预热。在猪***的运输过程中要避免阳光照射、避免颠簸震动、避免温差大起大落。使用专门的恒温运输箱或者泡沫箱,夏天放冰水袋,冬天放棉毛巾,保持箱内温度为15-20℃。试验效果见表1
表1公猪***在17℃恒温下保存活力变化统计
本发明优化后的长效稀释粉稀释的猪***,在温度为17℃的恒温条件下,保存9-11天,***活力为0.60。科学研究表明,直线前进运动的***占总***数在60-95%之间,人工授***猪的妊娠率无显著差异。
Claims (3)
1.猪***长效稀释粉,其特征在于,由下述重量份的组分混合而成的:葡萄糖4-6g,二水柠檬酸三钠5-7g,一水柠檬酸2-3g,乙二胺四乙酸7-8g,碳酸氢钠5-6g,氯化钾2-3g,三羟甲基氨基甲烷6-7g,半胱氨酸0.1-0.3g,海藻糖2-3g,抗生素恩诺沙星0.3-0.5g和硫酸多黏菌素0.05-0.07g。
2.猪***长效稀释粉,其特征在于,所述的猪***长效稀释粉是由下述重量份的组分混合而成:葡萄糖5.06g,二水柠檬酸三钠6.12g,一水柠檬酸2.30g,乙二胺四乙酸7.38g,碳酸氢钠5.54g,氯化钾2.37g,三羟甲基氨基甲烷6.85g,半胱氨酸0.21g,海藻糖2.11g,抗生素恩诺沙星0.42g和硫酸多黏菌素0.06g。
3.权利要求1或2所述的猪***长效稀释粉在猪辅助生殖中的应用。
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