CN106366164A

CN106366164A - 同型半胱氨酸抑制剂多肽及应用

Info

Publication number: CN106366164A
Application number: CN201610766399.3A
Authority: CN
Inventors: 罗瑞雪
Original assignee: Suzhou Puluoda Biological Science and Technology Co Ltd
Current assignee: Suzhou Puluoda Biological Science and Technology Co Ltd
Priority date: 2016-08-30
Filing date: 2016-08-30
Publication date: 2017-02-01

Abstract

本发明涉及药物领域，具体涉及具有抑制同型半胱氨酸，治疗脑卒中的多肽。其序列为SEQ ID NO：1是全新的序列。其有益效果在于：本发明多肽对大鼠脑梗塞模型疗效明显，可作为临床脑卒中有效的候选治疗方法。

Description

同型半胱氨酸抑制剂多肽及应用

技术领域

本发明涉及同型半胱氨酸抑制剂多肽及其应用，具体涉及具有抑制同型半胱氨酸，治疗脑卒中的多肽。

背景技术

同型半胱氨酸(Hcy)是一种含硫基的氨基酸。大量研究表明，高同型半胱氨酸血症在动脉粥样硬化和血栓栓塞性疾病如脑血管病、冠心病和静脉血栓等的发病机制中起重要作用，已被认为是独立的危险因素之一。

同型半胱氨酸和脑卒中(Stroke)有密切的关系。多数研究证实中度升高的Hcy与脑梗死、的危险性升高有关。普通人群中血浆Hcy水平高于15μmol/L者只有不到5％，而在脑卒中和其他血栓栓塞性疾病中则可达50％。有研究发现，有30-40％的脑血管病人有Hcy水平增高。急性卒中的病人平均Hcy浓度为14.5±4.5μmol/L，有动脉硬化危险的病人为14.6±6.2μmol/L而健康对照组为10.3±3.1μmol/L。另有研究人员用MRA检查发现脑血管有2-3处狭窄的病人的Hcy明显高于1处狭窄或没有狭窄的梗塞病人。多元Logistic回归分析表明中度Hcy升高与血管狭窄数显著相关。153例老年人中调查发现，调整年龄、性别、高血压、肾功能及烟酒史等后，高tHcy水平与仅在能MRI上发现的沉默性脑梗死(silent braininfarction，SBI)呈显著相关。500名高龄老人(81±9岁)的31±9个月跟踪研究，经逐步Cox回归分析，证实高Hcy是高龄老人新发的动脉血栓性脑梗塞的显著独立危险因素，每增加1μmol/L，危险系数为1.079。

Hcy血症对于闭塞性血管病的可能损伤机制之一是自由基生成。目前，自由基清除剂能对抗缺血再灌注时自由基造成的损伤。美国和加拿大，正在进行三个大规模随机对照试验，试图证实降低tHcy水平可以减少心脑血管病的发生。可见，同型半胱氨酸抑制剂可用于治疗脑卒中。

但是，现阶段没有同型半胱氨酸抑制剂的药物上市。

发明内容

发明目的

本发明提供全新的序列，该序列同型半胱氨酸抑制剂多肽，对脑卒中具有很好的疗效。

技术方案

同型半胱氨酸抑制剂多肽，其特征在于其序列为SEQ ID NO：1。

同型半胱氨酸抑制剂多肽在治疗脑卒中药物中的应用。

有益效果

利用固相合成法化学合成同型半胱氨酸抑制剂多肽，该多肽具有全新的序列，该多肽可用于治疗缺血性脑卒中。其药理学评价结果显示，本发明多肽能够改善脑梗塞模型大鼠的神经行为学评分，减少大鼠脑梗塞面积，降低脑水肿程度和大鼠脑组织中Hcy的含量，与模型组相比，具有统计学差异。可见，本发明多肽对大鼠脑梗塞模型疗效明显，可作为临床脑卒中有效的候选治疗方法。

具体实施方式

多肽由上海生工吉尔合成。

实施例1

同型半胱氨酸抑制剂多肽对大鼠脑梗塞模型脑梗塞面积的影响。

取8-12W的SD雄性大鼠，建立大鼠脑梗塞模型，观察同型半胱氨酸抑制剂多肽对大鼠脑梗塞模型的影响。大鼠麻醉，取颈部右侧旁切口，分离右侧颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA)，分离ECA主干，在其远端1.5cm处结扎、切断。提拉ECA残端的结扎线，用血管夹在CCA分出ECA处，将ECA临时夹闭，在血管夹与ECA残端之间结扎一道缝合线，不打紧。使用0.2-0.3mm尼龙线硅胶线支持导管栓子，由ECA残端附近进线，扎紧缝合线，松开血管夹，推动尼龙线进人ICA，进人距ICA和ECA分叉处。约1.8-1.9cm时，有阻挡感，表明栓线已越过大脑中动脉(MCA)，到达大脑前动脉(ACA)的起始部。记录栓塞开始时间，将ECA上缝合线扎紧。栓塞后90min，将尼龙线拔出。模型建立后将100只模型大鼠机分为5组，治疗组和对照组。各组均于当天(第一天)尼龙线拔出时给予皮下注射相应药物，随后，2次/d，共10d；治疗组皮下注射本发明多肽，剂量分别为20、10、5mg/Kg，对照组尿激酶，剂量为1000U/Kg。造模后第14d取脑组织，切片、2％TTC染色、孵育、固定后，拍照并使用图像分析***计算脑片梗死面积及脑片体积，按照公式计算脑梗塞体积百分比，脑梗塞体积百分比＝脑片梗死面积/脑片面积×100％，以评价本发明多肽对大鼠脑梗塞模型的影响。

表1本发明多肽对大鼠脑梗塞模型大鼠脑梗塞体积的影响

*p<0.05，**p<0.01与模型组相比

本发明多肽对大鼠脑梗塞模型结果如表1显示：本发明多肽能够减少大鼠脑梗塞体积，在剂量在5-20mg/Kg时呈剂量依赖性，与模型组相比，具有统计学差异。

实施例2

同型半胱氨酸抑制剂多肽对大鼠脑梗塞模型脑组织中Hcy含量的影响。

取8-12W的SD雄性大鼠，建立大鼠脑梗塞模型，观察同型半胱氨酸抑制剂多肽对大鼠脑梗塞模型的影响。建模方法见实施例1。模型建立后将100只模型大鼠机分为5组，治疗组和对照组。各组均于当天(第一天)尼龙线拔出时给予皮下注射相应药物，随后，2次/d，共10d；治疗组皮下注射本发明多肽，剂量分别为20、10、5mg/Kg，对照组尿激酶，剂量为1000U/Kg。造模后第14d，全脑，匀浆，取上清，采用日立7080全自动生化分析仪、循环酶法测定脑组织中Hcy的含量，评价本发明多肽对大鼠脑梗塞模型的影响。

表2本发明多肽对大鼠脑梗塞模型脑组织中Hcy含量的影响

*p<0.05，**p<0.01与模型组相比

本发明多肽对大鼠脑梗塞模型结果如表2显示：本发明多肽能够降低脑梗塞模型大鼠脑组织中Hcy含量，在剂量在5-20mg/Kg时呈剂量依赖性，与模型组相比，具有统计学差异。

实施例3

同型半胱氨酸抑制剂多肽对大鼠脑梗塞模型神经行为学评分的影响。

取8-12W的SD雄性大鼠，建立大鼠脑梗塞模型，观察同型半胱氨酸抑制剂多肽对大鼠脑梗塞模型的影响。建模方法见实施例1。模型建立后将100只模型大鼠机分为5组，治疗组和对照组。各组均于当天(第一天)尼龙线拔出时给予皮下注射相应药物，随后，2次/d，共10d；治疗组皮下注射本发明多肽，剂量分别为20、10、5mg/Kg，对照组尿激酶，剂量为1000U/Kg。造模后第14d观察神经行为学评分，以神经行为学评分为指标评价本发明多肽对大鼠脑梗塞模型的影响。脑功能缺损程度指标，描述为：0分-无神经功能缺损症状，大鼠被提尾悬空时两前肢向地面伸直；1分-轻微的神经功能缺损，大鼠被提尾悬空时病灶对侧前肢呈屈曲、抬高、肩内收、肘关节伸直；2分-中度局灶性神经功能缺损，有向瘫痪侧旋转征象；3分-重度局灶性神经功能缺损，有向病灶对侧跌倒征象；4分-无自发活动及认知水平下降。

表3本发明多肽对大鼠脑梗塞模型神经行为学评分的影响

*p<0.05，**p<0.01与模型组相比

本发明多肽对大鼠脑梗塞模型结果如表3显示：本发明多肽能够改善脑梗塞模型大鼠的神经行为学评分，与模型组相比，具有统计学差异。

实施例4

同型半胱氨酸抑制剂多肽对大鼠脑梗塞模型脑水肿的影响。取8-12W的SD雄性大鼠，建立大鼠脑梗塞模型，观察同型半胱氨酸抑制剂多肽对大鼠脑梗塞模型的影响。建模方法见实施例1。模型建立后将100只模型大鼠机分为5组，治疗组和对照组。各组均于当天(第一天)尼龙线拔出时给予皮下注射相应药物，随后，2次/d，共10d；治疗组皮下注射本发明多肽，剂量分别为20、10、5mg/Kg，对照组尿激酶，剂量为1000U/Kg。造模后第14d取脑组织，以脑组织含水量评价同型半胱氨酸抑制剂多肽对大鼠脑梗塞模型的影响。脑组织含水量＝(湿质量－干质量)/湿质量×100％。

表4本发明多肽对大鼠脑梗塞模型脑水肿的影响

*p<0.05，**p<0.01与模型组相比

本发明多肽对大鼠脑梗塞模型结果如表4显示：本发明多肽能够改善脑梗塞模型大鼠的神经行为学评分，在剂量在5-20mg/Kg时呈剂量依赖性，与模型组相比，具有统计学差异。

SEQUENCE LISTING

<110> 苏州普罗达生物科技有限公司

<120> 同型半胱氨酸抑制剂多肽及其应用

<130>

<160> 1

<170> Patent In version 3.3

<210> 1

<211> 24

<212> PRT

<213> 人工序列

<400> 1

Ile Thr Gly Ile Ala Arg Lys Leu Lys Glu Lys Cys Pro Gly Cys Arg

1 5 10 15

Ile Ile Gly Val Asp Pro Glu Gly

20

Claims

1.同型半胱氨酸抑制剂多肽，其特征在于其序列为SEQ ID NO：1。

2.同型半胱氨酸抑制剂多肽在治疗脑卒中药物中的应用。