CN106106179B - 一种用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,包括以下原料:西瓜汁、葡萄汁、李子汁、香瓜汁、茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6‑苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水。本发明的用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,搭配合理,营养全面,能够快速促根生茎,提高移栽存活率,同时也能促进黄酮类化合物的积累,提高经济效益;本发明的用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基制备方法,操作简单,易于实现产业化、规范化和标准化生产。
Description
【技术领域】
本发明属于半枝莲种植技术领域,具体涉及一种用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基。
【背景技术】
半枝莲(Scutellaria barbate D.Don)为唇形科黄芩属植物,别名并头草、狭叶韩信草、赴山鞭、牙刷草、勺把草、兰花草等,属唇形科多年生野生药用草本植物,全草入药。其性味辛、苦、寒,归肺、肝、肾经,具有清热解毒、散瘀止血、利尿消肿的功效。半枝莲中含有多种化合物,黄酮类成分是其主要的活性成分,具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌等多种药理活性。
半枝莲是治癌的首选药物,在医学方面的用量逐年增加,是国家中医药管理局近年重点推荐发展的63种紧缺中药材之一。野生资源不断减少频临灭绝,而家种半枝莲受气候和地理条件等多种因素的影响,产量很不稳定,经常有供不应求的局面出现。鉴于半枝莲的良好疗效,为了更好地开发和利用中药半枝莲资源,可以通过组织培养技术组织培养半枝莲,可以短期内提供大量优质的半枝莲种苗,减低生产成本,提高种苗质量,从而提高种苗成活率及药材产量。
专利申请文献“一种半枝莲组培种苗工厂化生产方法(公开号:CN103518626A)”公开了一种以MS为基本培养基,添加各种植物激素的培养基,达到了快速组培半枝莲组培苗的效果,而然该专利申请未涉及促进半枝莲黄酮类化合物和多糖积累的技术。
【发明内容】
本发明提供一种用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,以解决如何提高半枝莲的主要有效成分黄酮类化合物和多糖的含量,提高经济效益等问题。本发明的用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,搭配合理,营养全面,能够快速促根生茎,提高移栽存活率,同时也能促进黄酮类化合物的积累,提高经济效益。
为解决以上技术问题,本发明采用以下技术方案:
一种用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,以重量份为单位,包括以下原料:西瓜汁208-292份、葡萄汁156-242份、李子汁126-200份、香瓜汁105-180份、茶多酚50-80份、硝酸钾5-8份、磷酸铁4-6份、硝酸铵4-6份、硝酸钙0.8-1份、硝酸镁0.6-0.8份、碘酸钾0.3-0.5份、硼酸钠0.3-0.5份、钼酸钾0.3-0.5份、氯化锌0.2-0.4份、硫酸亚锰0.2-0.4份、氯化铜0.2-0.3份、硝酸铁0.2-0.3份、维生素0.1-0.3份、氨基酸0.1-0.3份、吲哚丁酸0.06-0.1份、赤霉素0.06-0.1份、6-苄基腺膘呤0.06-0.1份、异戊烯氨基嘌呤0.08-0.12份、萘乙酸0.04-0.08份、琼脂0.2-0.4份、激动素0.06-0.09份、助溶剂1-3份、分散剂0.8-2.5份、相容剂1.2-2份、稳定剂1-2份、抗菌剂1.5-3份、水8000-12000份;
所述分散剂以重量份为单位,包括以下原料:羧甲基纤维素钾4-6份、改性淀粉3-6份、聚丙烯酸钾2-4份、海藻酸钾1-3份;
所述用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基的制备方法,包括以下步骤:
S1:将西瓜、葡萄、李子汁、香瓜混合用搅碎机搅碎,所得榨汁过2000-6000目筛子,制得混合汁;
S2:茶多酚的制备,包括以下步骤:
S21:将绿茶粉碎后过50-90目筛,与质量分数为36%-62%的乙醇水溶液按质量比为1:13-19混合,在温度为30-36℃,超声波功率为180-260W下,提取2-3次,每次7-15min,过滤,合并滤液,浓缩,制得茶多酚粗提取液;
S22:将步骤S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH调节至6.2-6.7,在离心转速为3000-6000r/min下除去杂质,采用0.05-0.1μm滤膜在温度为30-37℃下对离心后的溶液进行过滤,制得过滤液;
S23:将步骤S22制得的过滤液用***提取,在温度≤-12℃下冷冻浓缩,在温度为78-88℃下干燥后制得茶多酚;
S3:将步骤S1制得的混合汁、步骤S2制得的茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水按比例混合均匀,制得混合液;
S4:将步骤S3制得的混合液pH值调节至5-5.6,接着采用脉动真空压力蒸气灭菌器在温度为134-136℃,压力为210-230KPa下,灭菌1.5-2min,制得用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基。
进一步地,所述维生素由以下组分组成:维生素A0.06-0.1份、维生素B10.06-0.1份、维生素B20.04-0.05份、维生素D0.04-0.05份。
进一步地,所述氨基酸由以下组分组成:甘氨酸0.08-0.1份、胱氨酸0.06-0.08份、脯氨酸0.04-0.07份、丝氨酸0.02-0.05份。
进一步地,所述助溶剂为聚乙烯吡咯烷酮。
进一步地,所述相容剂为美国杜邦EEA2112AC。
进一步地,所述稳定剂为黄原胶。
进一步地,所述抗菌剂为富马酸糠醇甲酯。
本发明用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基中部分成分的作用如下:
果汁的添加有利于多糖含量的积累。
茶多酚作为一种抗氧剂,既能使细胞生长缓慢,也可以促进黄酮积累。
钾元素的营养功效可以提高光合作用的强度,促进作物体内淀粉和糖的形成,增强作物的抗逆性和抗病能力,还能提高作物对氮的吸收利用。
磷是形成细胞核蛋白、卵磷脂等不可缺少的元素。磷元素能加速细胞***,促使根系和地上部加快生长,促进花芽分化,提早成熟,提高果实品质。
氮是蛋白质构成的主要元素,蛋白质是细胞原生质组成中的基本物质。氮元素能促进蛋白质和叶绿素的形成,使叶色深绿,叶面积增大,促进碳的同化,有利于产量增加,品质改善。
缺少钙植物分生组织的生长变慢,缺钙和症初在生长点和幼叶,严重时,叶子变形和失绿,在叶子的边缘出现坏死斑点。
镁是叶绿素的组成成分。如果缺少镁,叶片失去了绿色,不能制造营养物质。
碘是植物生长不可缺少的元素,被誉为生命元素、智慧元素。
硼在植物体内比较集中于茎尖、根尖、叶片和花器官中,双子叶植物中的含量常常高于单子叶植物。硼可以提高豆科作物根瘤菌的固氮活性,增加固氮量,缺硼时,根留不发达,影响固氮量。硼还能增强作物抗逆性。
钼是固氮微生物,特别是与豆科作物共生的根瘤菌固定大气氮素时所必需的。同时又能增进叶片光合作用强度。缺钼时植株矮小,叶片脉间失绿,叶缘枯焦,向内卷曲,成萎蔫态。
锌能促进作物进行光合作用,它是多种酶的组成成分,缺锌时作物生长发育出现停滞。
植物叶绿体中含有锰,锰能促进种子发芽和幼苗时期生长,缺锰时影响作物的光合作用、呼吸作用、硝态氮在体内的积累。表现为叶片脉间失绿黄化,有褐色斑点。
铜参加植物的光合作用、呼吸作用、氮代谢、增强植物的抗性。缺铜时植株生长瘦弱,新叶发黄,凋萎干枯,叶尖卷曲发白,有坏死斑点。
铁是叶绿素形成不可缺少的,在植株体内很难转移,所以叶片“失绿症”是植物缺铁的表现,并且这种失绿首先表现在幼嫩叶片上。
维生素对植物的生根有效应,能够促进植物生根。
氨基酸是植物生长所必需的营养物质,由于氨基酸本身的特性,对植物生长特别是光合作用具有独特的促进作用,它可以增加植物叶绿素含量,提高酶的活性,促进二氧化碳的渗透,使光合作用更加旺盛,对提高作物品质,增加Vc和糖的含量都有着重要作用。
本发明具有以下有益效果:
(1)茶多酚能促进半枝莲黄酮类化合物的积累;茶多酚作为抗氧剂,同时能抑制植物细胞的生长,然而本发明在其他培养基组分协同作用下,茶多酚的抑制半枝莲作用较小;
(2)本发明的用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基有利于提高半枝莲苗的移栽存活率,达到99%-100%;
(3)本发明的用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,搭配合理,营养全面,能够快速促根生茎,提高移栽存活率,同时也能促进黄酮类化合物和多糖的积累,提高经济效益;
(4)采用本发明的用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基制备方法,能够缩短消毒时间,提高灭菌效果可靠性和产业化生产效率,降低生产成本;
(5)本发明的用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基制备方法,操作简单,易于实现产业化、规范化和标准化生产。
【具体实施方式】
为便于更好地理解本发明,通过以下实施例加以说明,这些实施例属于本发明的保护范围,但不限制本发明的保护范围。
在实施例中,所述用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,以重量份为单位,包括以下原料:西瓜汁208-292份、葡萄汁156-242份、李子汁126-200份、香瓜汁105-180份、茶多酚50-80份、硝酸钾5-8份、磷酸铁4-6份、硝酸铵4-6份、硝酸钙0.8-1份、硝酸镁0.6-0.8份、碘酸钾0.3-0.5份、硼酸钠0.3-0.5份、钼酸钾0.3-0.5份、氯化锌0.2-0.4份、硫酸亚锰0.2-0.4份、氯化铜0.2-0.3份、硝酸铁0.2-0.3份、维生素0.1-0.3份、氨基酸0.1-0.3份、吲哚丁酸0.06-0.1份、赤霉素0.06-0.1份、6-苄基腺膘呤0.06-0.1份、异戊烯氨基嘌呤0.08-0.12份、萘乙酸0.04-0.08份、琼脂0.2-0.4份、激动素0.06-0.09份、助溶剂1-3份、分散剂0.8-2.5份、相容剂1.2-2份、稳定剂1-2份、抗菌剂1.5-3份、水8000-12000份;
所述维生素由以下组分组成:维生素A0.06-0.1份、维生素B10.06-0.1份、维生素B20.04-0.05份、维生素D0.04-0.05份;
所述氨基酸由以下组分组成:甘氨酸0.08-0.1份、胱氨酸0.06-0.08份、脯氨酸0.04-0.07份、丝氨酸0.02-0.05份;
所述助溶剂为聚乙烯吡咯烷酮;
所述分散剂以重量份为单位,包括以下原料:羧甲基纤维素钾4-6份、改性淀粉3-6份、聚丙烯酸钾2-4份、海藻酸钾1-3份;
所述相容剂为美国杜邦EEA2112AC;
所述稳定剂为黄原胶;
所述抗菌剂为富马酸糠醇甲酯;
所述用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基的制备方法,包括以下步骤:
S1:将西瓜、葡萄、李子汁、香瓜混合用搅碎机搅碎,所得榨汁过2000-6000目筛子,制得混合汁;
S2:茶多酚的制备,包括以下步骤:
S21:将绿茶粉碎后过50-90目筛,与质量分数为36%-62%的乙醇水溶液按质量比为1:13-19混合,在温度为30-36℃,超声波功率为180-260W下,提取2-3次,每次7-15min,过滤,合并滤液,浓缩,制得茶多酚粗提取液;
S22:将步骤S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH调节至6.2-6.7,在离心转速为3000-6000r/min下除去杂质,采用0.05-0.1μm滤膜在温度为30-37℃下对离心后的溶液进行过滤,制得过滤液;
S23:将步骤S22制得的过滤液用***提取,在温度≤-12℃下冷冻浓缩,在温度为78-88℃下干燥后制得茶多酚;
S3:将步骤S1制得的混合汁、步骤S2制得的茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水按比例混合均匀,制得混合液;
S4:将步骤S3制得的混合液pH值调节至5-5.6,接着采用脉动真空压力蒸气灭菌器在温度为134-136℃,压力为210-230KPa下,灭菌1.5-2min,制得用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基。
下面通过更具体的实施例加以说明。
实施例1
一种用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,以重量份为单位,包括以下原料:西瓜汁250份、葡萄汁200份、李子汁160份、香瓜汁140份、茶多酚65份、硝酸钾7份、磷酸铁5份、硝酸铵5份、硝酸钙0.9份、硝酸镁0.7份、碘酸钾0.4份、硼酸钠0.4份、钼酸钾0.4份、氯化锌0.3份、硫酸亚锰0.3份、氯化铜0.2份、硝酸铁0.2份、维生素0.2份、氨基酸0.2份、吲哚丁酸0.08份、赤霉素0.08份、6-苄基腺膘呤0.08份、异戊烯氨基嘌呤0.1份、萘乙酸0.06份、琼脂0.3份、激动素0.08份、助溶剂2份、分散剂1.6份、相容剂1.6份、稳定剂1.5份、抗菌剂2.2份、水10000份;
所述维生素由以下组分组成:维生素A0.08份、维生素B10.08份、维生素B20.04份、维生素D0.04份;
所述氨基酸由以下组分组成:甘氨酸0.09份、胱氨酸0.07份、脯氨酸0.06份、丝氨酸0.04份;
所述助溶剂为聚乙烯吡咯烷酮;
所述分散剂以重量份为单位,包括以下原料:羧甲基纤维素钾5份、改性淀粉5份、聚丙烯酸钾3份、海藻酸钾2份;
所述相容剂为美国杜邦EEA2112AC;
所述稳定剂为黄原胶;
所述抗菌剂为富马酸糠醇甲酯;
所述用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基的制备方法,包括以下步骤:
S1:将西瓜、葡萄、李子汁、香瓜混合用搅碎机搅碎,所得榨汁过4000目筛子,制得混合汁;
S2:茶多酚的制备,包括以下步骤:
S21:将绿茶粉碎后过80目筛,与质量分数为50%的乙醇水溶液按质量比为1:16混合,在温度为34℃,超声波功率为220W下,提取2次,每次11min,过滤,合并滤液,浓缩,制得茶多酚粗提取液;
S22:将步骤S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH调节至6.5,在离心转速为5000r/min下除去杂质,采用0.08μm滤膜在温度为34℃下对离心后的溶液进行过滤,制得过滤液;
S23:将步骤S22制得的过滤液用***提取,在温度为-12℃下冷冻浓缩,在温度为84℃下干燥后制得茶多酚;
S3:将步骤S1制得的混合汁、步骤S2制得的茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水按比例混合均匀,制得混合液;
S4:将步骤S3制得的混合液pH值调节至5.3,接着采用脉动真空压力蒸气灭菌器在温度为135℃,压力为220KPa下,灭菌1.8min,制得用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基。
实施例2
一种用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,以重量份为单位,包括以下原料:西瓜汁208份、葡萄汁156份、李子汁126份、香瓜汁105份、茶多酚50份、硝酸钾5份、磷酸铁4份、硝酸铵4份、硝酸钙0.8份、硝酸镁0.6份、碘酸钾0.3份、硼酸钠0.3份、钼酸钾0.3份、氯化锌0.2份、硫酸亚锰0.2份、氯化铜0.2份、硝酸铁0.2份、维生素0.1份、氨基酸0.1份、吲哚丁酸0.06份、赤霉素0.06份、6-苄基腺膘呤0.06份、异戊烯氨基嘌呤0.08份、萘乙酸0.04份、琼脂0.2份、激动素0.06份、助溶剂1份、分散剂0.8份、相容剂1.2份、稳定剂1份、抗菌剂1.5份、水8000份;
所述维生素由以下组分组成:维生素A0.06份、维生素B10.06份、维生素B20.04份、维生素D0.04份;
所述氨基酸由以下组分组成:甘氨酸0.08份、胱氨酸0.06份、脯氨酸0.04份、丝氨酸0.02份;
所述助溶剂为聚乙烯吡咯烷酮;
所述分散剂以重量份为单位,包括以下原料:羧甲基纤维素钾4份、改性淀粉3份、聚丙烯酸钾2份、海藻酸钾1份;
所述相容剂为美国杜邦EEA2112AC;
所述稳定剂为黄原胶;
所述抗菌剂为富马酸糠醇甲酯;
所述用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基的制备方法,包括以下步骤:
S1:将西瓜、葡萄、李子汁、香瓜混合用搅碎机搅碎,所得榨汁过2000目筛子,制得混合汁;
S2:茶多酚的制备,包括以下步骤:
S21:将绿茶粉碎后过50目筛,与质量分数为36%的乙醇水溶液按质量比为1:13混合,在温度为30℃,超声波功率为180W下,提取2次,每次15min,过滤,合并滤液,浓缩,制得茶多酚粗提取液;
S22:将步骤S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH调节至6.2,在离心转速为3000r/min下除去杂质,采用0.05μm滤膜在温度为30℃下对离心后的溶液进行过滤,制得过滤液;
S23:将步骤S22制得的过滤液用***提取,在温度为-18℃下冷冻浓缩,在温度为78℃下干燥后制得茶多酚;
S3:将步骤S1制得的混合汁、步骤S2制得的茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水按比例混合均匀,制得混合液;
S4:将步骤S3制得的混合液pH值调节至5,接着采用脉动真空压力蒸气灭菌器在温度为134℃,压力为210KPa下,灭菌2min,制得用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基。
实施例3
一种用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,以重量份为单位,包括以下原料:西瓜汁292份、葡萄汁242份、李子汁200份、香瓜汁180份、茶多酚80份、硝酸钾8份、磷酸铁6份、硝酸铵6份、硝酸钙1份、硝酸镁0.8份、碘酸钾0.5份、硼酸钠0.5份、钼酸钾0.5份、氯化锌0.4份、硫酸亚锰0.4份、氯化铜0.3份、硝酸铁0.3份、维生素0.3份、氨基酸0.3份、吲哚丁酸0.1份、赤霉素0.1份、6-苄基腺膘呤0.1份、异戊烯氨基嘌呤0.12份、萘乙酸0.08份、琼脂0.4份、激动素0.09份、助溶剂3份、分散剂2.5份、相容剂2份、稳定剂2份、抗菌剂3份、水12000份;
所述维生素由以下组分组成:维生素A0.1份、维生素B10.1份、维生素B20.05份、维生素D0.05份;
所述氨基酸由以下组分组成:甘氨酸0.1份、胱氨酸0.08份、脯氨酸0.07份、丝氨酸0.05份;
所述助溶剂为聚乙烯吡咯烷酮;
所述分散剂以重量份为单位,包括以下原料:羧甲基纤维素钾6份、改性淀粉6份、聚丙烯酸钾4份、海藻酸钾3份;
所述相容剂为美国杜邦EEA2112AC;
所述稳定剂为黄原胶;
所述抗菌剂为富马酸糠醇甲酯;
所述用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基的制备方法,包括以下步骤:
S1:将西瓜、葡萄、李子汁、香瓜混合用搅碎机搅碎,所得榨汁过6000目筛子,制得混合汁;
S2:茶多酚的制备,包括以下步骤:
S21:将绿茶粉碎后过90目筛,与质量分数为62%的乙醇水溶液按质量比为1:19混合,在温度为36℃,超声波功率为260W下,提取3次,每次7min,过滤,合并滤液,浓缩,制得茶多酚粗提取液;
S22:将步骤S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH调节至6.7,在离心转速为6000r/min下除去杂质,采用0.1μm滤膜在温度为37℃下对离心后的溶液进行过滤,制得过滤液;
S23:将步骤S22制得的过滤液用***提取,在温度为-20℃下冷冻浓缩,在温度为88℃下干燥后制得茶多酚;
S3:将步骤S1制得的混合汁、步骤S2制得的茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水按比例混合均匀,制得混合液;
S4:将步骤S3制得的混合液pH值调节至5.6,接着采用脉动真空压力蒸气灭菌器在温度为136℃,压力为230KPa下,灭菌1.5min,制得用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基。
为验证本发明用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基的效果,通过以下实验验证。
每组选用规格基本一致的2-3cm的半枝莲带芽茎段数量100,对照组1以西瓜汁、香瓜汁、李子汁、香瓜汁、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水组成的培养基,对照组2单独以茶多酚为培养基,其他采用实施例1-3的培养基。培养110天后测量半枝莲苗黄酮类化合物平均得率和长度,结果见表1。
表1培养基组培半枝莲苗黄酮类化合物平均得率和长度情况
由表1可知,实施例1-3的半枝莲苗黄酮类化合物平均得率比对照组1的半枝莲苗黄酮类化合物平均得率高19.23%-26.92%;实施例1-3的半枝莲苗长度比对照组1的半枝莲苗长度短1.51%-2.18%,对照组2半枝莲几乎不生长,说明了茶多酚的存在能大大提高半枝莲苗黄酮类化合物平均得率,但同时茶多酚作为抗氧剂,也抑制植物细胞的生长,然而在其他培养基组分伍配作用下,茶多酚的抑制作用较小。
每组选用规格基本一致的2-3cm的半枝莲带芽茎段数量100,对照组以茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水组成的培养基,其他采用实施例1-3的培养基。培养110天后测量组培苗的多糖平均得率和长度,结果见表2。
表2培养基组培半枝莲苗多糖平均得率和长度情况
由表2可知,实施例1-3的半枝莲苗多糖平均得率比对照组的半枝莲苗多糖平均得率高25.8%-30.4%;实施例1-3的半枝莲苗长度比对照组的半枝莲苗长度短0.34%-1.03%,说明了用培养基无水果汁,或水果汁与其他培养基组分伍配作用下,对半枝莲苗高度增长作用不大。
表3是实施例1-3培养基组培半枝莲苗移栽存活情况。
表3培养基组培半枝莲苗移栽存活情况
实施例 | 实验组培苗数 | 组培苗移栽存活数 | 移栽存活率(%) |
1 | 100 | 98 | 100 |
2 | 100 | 98 | 99 |
3 | 100 | 99 | 100 |
由表3可以知道,以本发明的用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基组培半枝莲苗的平均移栽存活率为99%-100%,说明了本发明用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基有利于提高半枝莲苗的移栽存活率。
以上内容不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明,对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干简单推演或替换,都应当视为属于本发明由所提交的权利要求书确定的专利保护范围。
Claims (7)
1.一种用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,其特征在于,以重量份为单位,包括以下原料:西瓜汁208-292份、葡萄汁156-242份、李子汁126-200份、香瓜汁105-180份、茶多酚50-80份、硝酸钾5-8份、磷酸铁4-6份、硝酸铵4-6份、硝酸钙0.8-1份、硝酸镁0.6-0.8份、碘酸钾0.3-0.5份、硼酸钠0.3-0.5份、钼酸钾0.3-0.5份、氯化锌0.2-0.4份、硫酸亚锰0.2-0.4份、氯化铜0.2-0.3份、硝酸铁0.2-0.3份、维生素0.1-0.3份、氨基酸0.1-0.3份、吲哚丁酸0.06-0.1份、赤霉素0.06-0.1份、6-苄基腺膘呤0.06-0.1份、异戊烯氨基嘌呤0.08-0.12份、萘乙酸0.04-0.08份、琼脂0.2-0.4份、激动素0.06-0.09份、助溶剂1-3份、分散剂0.8-2.5份、相容剂1.2-2份、稳定剂1-2份、抗菌剂1.5-3份、水8000-12000份;
所述分散剂以重量份为单位,包括以下原料:羧甲基纤维素钾4-6份、改性淀粉3-6份、聚丙烯酸钾2-4份、海藻酸钾1-3份;
所述用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基的制备方法,包括以下步骤:
S1:将西瓜、葡萄、李子汁、香瓜混合用搅碎机搅碎,所得榨汁过2000-6000目筛子,制得混合汁;
S2:茶多酚的制备,包括以下步骤:
S21:将绿茶粉碎后过50-90目筛,与质量分数为36%-62%的乙醇水溶液按质量比为1:13-19混合,在温度为30-36℃,超声波功率为180-260W下,提取2-3次,每次7-15min,过滤,合并滤液,浓缩,制得茶多酚粗提取液;
S22:将步骤S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH调节至6.2-6.7,在离心转速为3000-6000r/min下除去杂质,采用0.05-0.1μm滤膜在温度为30-37℃下对离心后的溶液进行过滤,制得过滤液;
S23:将步骤S22制得的过滤液用***提取,在温度≤-12℃下冷冻浓缩,在温度为78-88℃下干燥后制得茶多酚;
S3:将步骤S1制得的混合汁、步骤S2制得的茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水按比例混合均匀,制得混合液;
S4:将步骤S3制得的混合液pH值调节至5-5.6,接着采用脉动真空压力蒸气灭菌器在温度为134-136℃,压力为210-230KPa下,灭菌1.5-2min,制得用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基。
2.根据权利要求1所述用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,其特征在于,所述维生素由以下组分组成:维生素A0.06-0.1份、维生素B10.06-0.1份、维生素B20.04-0.05份、维生素D0.04-0.05份。
3.根据权利要求1所述用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,其特征在于,所述氨基酸由以下组分组成:甘氨酸0.08-0.1份、胱氨酸0.06-0.08份、脯氨酸0.04-0.07份、丝氨酸0.02-0.05份。
4.根据权利要求1所述用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,其特征在于,所述助溶剂为聚乙烯吡咯烷酮。
5.根据权利要求1所述用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,其特征在于,所述相容剂为美国杜邦EEA2112AC。
6.根据权利要求1所述用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,其特征在于,所述稳定剂为黄原胶。
7.根据权利要求1所述用于提高半枝莲黄酮类化合物和多糖的培养基,其特征在于,所述抗菌剂为富马酸糠醇甲酯。
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