CN105986003A - 一种白细胞计数方法、装置及细胞分析仪 - Google Patents

Abstract

提供一种白细胞计数方法和装置，从细胞分析仪的第二白细胞测量***统计白细胞初始计数值，并利用从第一白细胞测量***获取的脂质颗粒数修正该初始计数值，从而减少第二白细胞测量***中脂质颗粒对白细胞计数的干扰，准确地统计白细胞。根据上述白细胞计数方法和装置，还提供了一种细胞分析仪。

Description

一种白细胞计数方法、装置及细胞分析仪

技术领域

本发明涉及细胞分析仪领域，具体涉及一种白细胞计数方法、装置及细胞分析仪。

背景技术

血液细胞分析仪是一种可检测血液中细胞的一种仪器，可以对白细胞(WBC)、红细胞、血小板、有核红细胞、网织红细胞等细胞进行计数及分类。

血液细胞分析仪实现白细胞检测最常见的一种方法为激光散射法，使用激光照射流经检测区的细胞，收集细胞反射或散射的光信号对白细胞进行分类和计数。光信号包括前向散射光、侧向散射光、荧光等。前向散射光信号反映细胞的大小信息，侧向散射光信号反映细胞内部结构的复杂程度，荧光信号反映细胞内DNA、RNA等可被荧光染料染色物质的含量。利用这些散射光信号可对白细胞进行分类，同时可以得到白细胞的计数值。

常见的五分类细胞分析仪包括第一白细胞测量***和第二白细胞测量***，第一白细胞测量***和第二白细胞测量***在样本分样后采用的反应试剂、需要收集的散射光和后续数据的分析处理都有所不同，第一白细胞测量***一般也称为DIFF通道或4DIFF通道，其采用前向散射光、侧向散射光、荧光等三种光信号进行细胞分类和计数，可将白细胞分为淋巴细胞群、单核细胞群、嗜酸性粒细胞群、中性粒细胞和嗜碱性粒细胞群等四类细胞；第二白细胞测量***一般也称为BASO通道，其可以将白细胞分为嗜碱性粒细胞和其它白细胞，可以得到白细胞计数值和嗜碱性粒细胞计数值。通过第一白细胞测量***和第二白细胞测量***可以实现白细胞的五分类和白细胞计数。

在实际工作中，由于用BASO通道进行白细胞计数具有简便快捷、成本低、准确性高的优点，临床上普遍认可其可靠性，常采用BASO通道的白细胞计数作为输出报告上的白细胞计数。但是，当血液样本中存在脂质颗粒时，如注射脂肪乳后，使用BASO通道进行白细胞计数，会出现白细胞计数值假性增大，影响临床判断。因此如何消除脂质颗粒对BASO通道的白细胞计数造成的影响，成为亟待解决的问题。

发明内容

本申请提供一种白细胞计数方法、装置及细胞分析仪，以提供一种从细胞分析仪的第二白细胞测量***中得到白细胞数值的新方案。

根据第一方面，一种实施例中提供一种白细胞计数方法,包括：

从细胞分析仪的第二白细胞测量***统计白细胞初始计数值，其中，第二白细胞测量***是至少可将白细胞分类为嗜碱性粒细胞和其它白细胞的测量***；从细胞分析仪的第一白细胞测量***获取脂质颗粒数，其中，第一白细胞测量***是至少可将白细胞分类为淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和嗜碱性粒细胞四类细胞的测量***；用脂质颗粒数修正白细胞初始计数值，得到修正后的白细胞计数值。

根据第二方面，一种实施例中提供一种白细胞计数装置,包括：初始计数模块、脂质颗粒数获取模块和修正模块，其中，

初始计数模块用于从细胞分析仪的第二白细胞测量***统计白细胞初始计数值，其中，第二白细胞测量***是至少可将白细胞分类为嗜碱性粒细胞和其它白细胞的测量***；脂质颗粒数获取模块用于从细胞分析仪的第一白细胞测量***获取脂质颗粒数，其中，第一白细胞测量***是至少可将白细胞分类为淋巴细胞群、单核细胞群、嗜酸性粒细胞群、中性粒细胞和嗜碱性粒细胞群四类细胞的测量***；修正模块用于用脂质颗粒数修正白细胞初始计数值，得到修正后的白细胞计数值。

根据第三方面，一种实施例中提供一种细胞分析仪，包括：光学检测设备、输送设备和上述白细胞计数装置，其中，输送设备用于将被测样本液输送到光学检测设备中；光学检测设备用于对流经其检测区域的被测样本液进行光照射，收集细胞因光照射所产生的各种光信号，并转换成对应的电信号输出；白细胞计数装置用于接收光学检测设备输出的电信号并进行处理。

依据上述实施例的白细胞计数方法及装置，由于通过从第一白细胞测量***获取的脂质颗粒数修正第二白细胞测量***白细胞数值，使得在从第二白细胞测量***中对白细胞进行计数时，能够减少脂质颗粒对其造成的干扰，较为准确地实现白细胞计数。

附图说明

图1a为一种实施例中血液细胞分析仪的原理示意图；

图1b为本申请实施例公开的一种白细胞计数装置结构框图；

图1c为本申请另一个实施例公开的一种白细胞计数装置结构框图；

图1d为本申请实施例公开的一种识别模块的结构框图；

图2为本申请实施例公开的一种白细胞计数方法流程图；

图3为本申请实施例根据第一初始白细胞计数值的白细胞计数方法流程图；

图4为本申请实施例一例脂质颗粒样本在第二白细胞测量***侧向散射光-前向散射光散点图；

图5a为本申请实施例一例脂质颗粒样本在第一白细胞测量***侧向散射光-前向散射光散点图；

图5b为图5a去除其它粒子后的示意图；

图5c为本申请实施例一例脂质颗粒样本在第一白细胞测量***三维散点图；

图6为WBC_B'与WBC参考值的对比图；

图7为本申请实施例根据第二初始白细胞计数值的白细胞计数方法流程图；

图8为本申请实施例可视化显示第二白细胞测量***的散点图的示意图；

图9为本申请实施例基于子区域识别脂质颗粒的流程图；

图10a、图10b和图10c为本申请实施例划分子区域的示意图。

具体实施方式

请参考图1a，为血液细胞分析仪的原理示意图，血液细胞分析仪包括光学检测设备20、输送设备30、数据处理装置40和显示设备50。

输送设备30用于将与试剂反应后的样本液(例如被测血液样本)输送到光学检测设备20中。输送设备30通常包括输送管路和控制阀，样本液通过输送管路和控制阀输送到光学检测设备20中。

光学检测设备20用于对流经其检测区域的样本液进行光照射，收集细胞因光照射所产生的各种光信号(例如散射光信号和/或荧光信号)，并转换成对应的电信号，这些光信号及其对应的电信号所承载的信息与细胞粒子的特征对应，可作为细胞粒子特征数据，前向散射光信号反映细胞的大小信息，侧向散射光信号反映细胞内部结构的复杂程度，荧光信号反映细胞内DNA、RNA等可被荧光染料染色物质的含量。图1a所示的实施例中，光学检测设备20可包括光源1025、作为检测区域的流动室1022、设置在光轴上的前向散射光信号收集装置1023、设置在光轴侧边的侧向散射光信号收集装置1026和荧光信号收集装置1027。

血液样本根据需要进行分样，经与不同试剂反应后的第一白细胞测量***和第二白细胞测量***的样本液先后在鞘液的裹挟下通过提供检测区域的流动室1022，光源1025发射的光束照射到检测区域1021，样本液中的各细胞粒子经光束照射后发出散射光，光收集装置对散射光进行收集，例如当DIFF通道的样本液经过检测区域1021时，前向散射光信号收集装置1023、侧向散射光信号收集装置1026和荧光信号收集装置1027分别收集前向散射光、侧向散射光和荧光信号，当BASO通道的样本液经过检测区域1021时，前向散射光信号收集装置1023和侧向散射光信号收集装置1026分别收集前向散射光和侧向散射光信号。经收集整形后的光照射到光电感应器，光电感应器将光信号转换成对应的电信号输出至数据处理装置40。

数据处理装置40通过对接收的粒子特征数据的分析处理从而实现对被测血液样本的分析。本实施例中，数据处理装置40包括白细胞计数装置，白细胞计数装置用于接收光学检测设备输出的表征光信号的电信号，将每个粒子的光信号作为表征该粒子的特征数据组，根据各粒子的特征数据组生成散点图。本发明实施例中，散点图是指由各细胞粒子的特征数据组组成的集合，其可以数字化的形式存储在存储装置中，也可以可视化的形式呈现在显示界面上。白细胞计数装置还对粒子的散点图进行进一步处理，得到白细胞的五分类和粒子计数。本实施例中，白细胞计数装置的第一白细胞测量***根据光收集装置收集的被测样本的光信号，生成散点图，根据散点图和预定的阈值或设门方法可得到淋巴细胞群、单核细胞群、嗜酸性粒细胞群、中性粒细胞和嗜碱性粒细胞群四类细胞的计数结果，白细胞计数装置的第二白细胞测量***根据光收集装置收集的被测样本的散射光信号，同样可根据各细胞粒子的特征数据组得到散点图，根据预定的阈值或设门方法得到白细胞计数值和嗜碱性粒细胞计数值。白细胞计数装置还从第一白细胞测量***获取脂质颗粒计数值，并通过该脂质颗粒计数值来消除在第二白细胞测量***中脂质颗粒对白细胞的计数干扰，从而修正第二白细胞测量***中得到的白细胞计数值。

显示设备50与数据处理装置40电耦合，用于显示数据处理设备40输出的分析结果，分析结果可以是图形、文字描述和/或表格等。本实施例中，显示设备50可以输出各种可视化的散点图和/或各种细胞分类结果。

请参考图1b，为本实施例公开的一种白细胞计数装置结构框图,该白细胞计数装置包括：初始计数模块1、脂质颗粒数获取模块2和修正模块3。其中，

初始计数模块1用于从细胞分析仪的第二白细胞测量***统计白细胞初始计数值，其中，第二白细胞测量***是至少可将白细胞分类为嗜碱性粒细胞和其它白细胞的测量***。例如基于第二白细胞测量***得到的散点图统计白细胞初始计数值。在一种实施例中，初始计数模块1包括第一初始计数单元；在另一种实施例中，初始计数模块1包括第二初始计数单元。第一初始计数单元用于根据细胞分析仪的第二白细胞测量***收集的被测血液样本的散射光信号生成第二白细胞测量***的散点图，统计第二白细胞测量***的散点图中非血影区域中的细胞数，得到第一初始白细胞计数值；第二初始计数单元用于根据细胞分析仪的第二白细胞测量***收集的被测血液样本的散射光信号生成第二白细胞测量***的散点图，统计第二白细胞测量***的散点图中白细胞区域中的粒子数，得到第二初始白细胞计数值。在具体实施例中，第二白细胞测量***收集的散射光信号包括前向散射光信号和侧向散射光信号，基于前向散射光和侧向散射光信号的二维散点图统计非血影区域中的粒子数或者白细胞区域中的粒子数。

脂质颗粒数获取模块2用于从细胞分析仪的第一白细胞测量***获取脂质颗粒数，其中，第一白细胞测量***是至少可将白细胞分类为淋巴细胞群、单核细胞群、嗜酸性粒细胞群、中性粒细胞和嗜碱性粒细胞群四类细胞的测量***。在一具体实施例中，脂质颗粒数获取模块2包括脂质颗粒计数单元，脂质颗粒计数单元用于根据细胞分析仪的第一白细胞测量***收集的被测血液样本的光信号，生成散点图，基于散点图识别脂质颗粒，并获取第一脂质颗粒计数值或者第二脂质颗粒计数值，其中，第一脂质颗粒计数值为非血影区域中的脂质颗粒数量，第二脂质颗粒计数值为白细胞区域中的脂质颗粒数量。例如，第一白细胞测量***收集的光信号包括前向散射光信号和侧向散射光信号，在前向散射光信号和侧向散射光信号的二维散点图上，脂质颗粒与其它粒子能够较好地区分而被识别，计数非血影区域的脂质颗粒数量得到第一脂质颗粒计数值或者计数白细胞区域的脂质颗粒数量得到第二脂质颗粒计数值。优选的，第一白细胞测量***收集的光信号还包括荧光信号，在前向散射光、侧向散射光、荧光信号的三维散点图，脂质颗粒与其它粒子的区分更加明显，能更好地被识别，得到的第一脂质颗粒计数值和第二脂质颗粒计数值也更准确。

修正模块3用于用脂质颗粒数修正白细胞初始计数值，得到修正后的白细胞计数值。在一种实施例中，修正模块3用于将第一初始白细胞计数值减去第一脂质颗粒计数值，得到修正后的白细胞计数值；在另一种实施例中，修正模块3用于将第二初始白细胞计数值减去第二脂质颗粒计数值，得到修正后的白细胞计数值。

在优选的实施例中，该白细胞计数装置还可以进一步包括标记模块6，其用于在第二白细胞测量***的散点图中以不同于标记白细胞的方式标记出脂质颗粒。通常情况下，散点图可以可视化形式呈现在显示设备的显示界面上。

参考图1c，在另一个优选的实施例中，该白细胞计数装置还可以进一步包括识别模块5，识别模块5用于识别第二白细胞测量***的散点图的脂质颗粒，在具体实施例中，识别模块5可以通过第一白细胞测量***中的脂质颗粒数来映射出第二白细胞测量***中的脂质颗粒。具体地，可以分别对第一白细胞测量***的散点图和第二白细胞测量***的散点图划分出若干对应的子区域，并统计第一白细胞测量***中各子区域的脂质颗粒数，而后，通过一定的函数关系来选取出在第二白细胞测量***中对应子区域的粒子数作为脂质颗粒。进一步的，标记模块6将识别模块5识别的脂质颗粒在第二白细胞测量***的散点图上，以不同于标记白细胞的方式被标记出来，可视化形式呈现给用户。

请参考图1d，识别模块5包括：第一区域划分单元51、第二区域划分单元52、统计单元53和识别单元54，其中，

第一区域划分单元51用于在第一白细胞测量***的散点图，沿侧向散射光方向上，将散点图分成若干第一子区域；第二区域划分单元52用于在第二白细胞测量***的散点图，沿侧向散射光方向上，将散点图分成若干第二子区域。其中，第一区域划分单元51与第二区域划分单元52划分子区域方式相同，使各第一子区域与各第二子区域有一一对应关系。需要说明的是，本实施例中，并不限定第一区域划分单元51与第二区域划分单元52的划分先后顺序。

统计单元53用于统计第一子区域的脂质颗粒数。

识别单元54用于在第二子区域中选取粒子并识别为脂质颗粒，使第一子区域中的脂质颗粒数和与其对应的第二子区域的脂质颗粒数的相同；或者，各第一子区域中的脂质颗粒数和与其对应的第二子区域的脂质颗粒数的比例相同。

实施例1：

基于上述白细胞计数装置，本实施还公开了一种白细胞计数方法，请参考图2，为白细胞计数方法流程图，该方法包括步骤如下：

步骤S100，初始计数。从细胞分析仪的第二白细胞测量***统计白细胞初始计数值，其中，第二白细胞测量***是至少可将白细胞分类为嗜碱性粒细胞和其它白细胞的测量***，收集流经检测区细胞的前向散射光信号和侧向散射光信号，形成散点图。在一具体实施例中，初始计数值可以是第二白细胞测量***散点图中非血影区域的粒子数；在另一具体实施例中，初始计数值也可以是第二白细胞测量***散点图中白细胞区域的粒子数。血影是血液样本经过样本前处理，其中的红细胞或血小板等细胞经低渗透或试剂处理细胞膜破裂后形成的细胞碎片结构，通常粒子体积较小，前向散射光信号较小，因此，根据经验可对血影的前向散射光信号设定阈值，从而可在侧向散射光-前向散射光散点图中划定血影的分布区域。血影分布区域以外的区域称为非血影区域。可将粒子的散射光信号的数据与各自的阈值进行比较，从而确定该粒子属于血影区域还是非血影区域。同样，根据经验，也可以通过设定阈值和设门的方式在侧向散射光-前向散射光散点图中确定白细胞区域，通过将粒子的散射光信号的数据与各自的阈值或设门进行比较，可确定该粒子是否属于白细胞区域。

步骤S200，脂质颗粒数获取。从细胞分析仪的第一白细胞测量***识别脂质颗粒，并获取第一脂质颗粒计数值或第二脂质颗粒计数值，其中，第一白细胞测量***是至少可将白细胞分类为淋巴细胞群、单核细胞群、嗜酸性粒细胞群、中性粒细胞和嗜碱性粒细胞群四类细胞的测量***，收集流经检测区细胞的前向散射光信号和侧向散射光信号，形成散点图，或者前向散射光信息、侧向散射光信号、荧光信号，形成三维散点图。在一个具体实施例中，该第一脂质颗粒计数值为非血影区域中的脂质颗粒数量，该第二脂质颗粒计数值为白细胞区域中的脂质颗粒数量。第一测量***散点图的非血影区是指第二测量***侧向散射光信号和前向散射光信号的散点图上的非血影区映射在该散点图上的区域，第一测量***散点图的白细胞区域是指第二测量***散点图的白细胞区域映射在该散点图上的区域，即第一测量***散点图的非血影区域和白细胞区域分别与第二测量***散点图的非血影区和白细胞区域具有相同的阈值或设门。

需要说明的是，步骤S100和步骤S200的执行先后顺序可以基于第二白细胞测量***和第一白细胞测量***的工作先后顺序来确定，当然也可以在收集全部数据后再开始步骤S100和步骤S200的处理。

步骤S300，修正。用脂质颗粒数修正白细胞初始计数值，得到修正后的白细胞计数值。在具体实施例中，可以通过非血影区域或者白细胞区域的初始计数值减去该区域脂质颗粒的数值，从而得到该区域的白细胞计数值。

以下具体说明白细胞计数的修正方式。

在一种具体实施例中，根据第一初始白细胞计数值进行修正时，请参考图3，为本实施例白细胞计数方法的流程图，该方法包括步骤如下：

步骤S110，第一初始计数。根据细胞分析仪的第二白细胞测量***收集的被测血液样本的散射光信号生成第二白细胞测量***的散点图，统计第二白细胞测量***的散点图中非血影区域中的细胞数，得到第一初始白细胞计数值。在具体实施例中，第二白细胞测量***收集的散射光包括前向散射光信号和侧向散射光信号，基于前向散射光和侧向散射光信号的二维散点图统计非血影区域中的细胞数。

请参考图4，为一例包含有脂质颗粒的样本在第二白细胞测量***侧向散射光-前向散射光散点图。H1-H1上方为非血影区域，H1-H1下方为血影区域，当然，在其它实施例中，非血影区域也存在其它的区域范围，如某一封闭区域。在非血影区域，A区域为白细胞所分布区域，定义为白细胞区域，即白细胞群所显示的粒子分布区域，譬如A区域分布有淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒白细胞等白细胞亚型。Z所示为脂质颗粒，脂质颗粒在散点图中呈现S曲线的特性，信号低端部分穿过白细胞粒子团，从而会影响白细胞的计数。在本实施例中，第一初始白细胞计数值为非血影区域中白细胞和脂质颗粒的数目之和。

需要说明的是，在其它具体实施例中，也可以在***中设定非血影区域的范围，譬如增大或缩小非血影区域的范围。或者，通过其它方法，例如根据检测***调整血影区的设门规则，找出血影区，将散点图上，除了血影区之外的区域定义为非血影区。

步骤S210，第一脂质颗粒计数。由于脂质颗粒的荧光强度比白细胞(包括淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞)低，故而在荧光信号的散点图上脂质颗粒可以和白细胞显著的区分，从而可以从第一白细胞测量***的包括荧光、散射光信号的二维或三维散点图中被识别并得到脂质颗粒的计数值。在具体实施例中，第一白细胞测量***收集被测血液样本的散射光信号，生成侧向散射光-前向散射光散点图，请参考图5a，白细胞群和脂质颗粒可以区分开，脂质颗粒能被识别，可以统计位于非血影区域内的粒子数作为第一脂质颗粒计数值；当然，也可以对该图进行处理去除脂质颗粒之外的粒子，获得脂质颗粒散点图，如图5b所示，统计非血影区域内的粒子数作为第一脂质颗粒计数值。优选的，还收集荧光信号，生成三维散点图，本实施例中，根据细胞分析仪的第一白细胞测量***收集的被测血液样本的前向散射光、侧向散射光和荧光，生成三维散点图，在三维散点图上，脂质颗粒和其它粒子的区分更明显，脂质颗粒识别更准确。请参考图5c，为一例包含有脂质颗粒的样本在第一白细胞测量***中的三维散点图。图5c中，A区域为白细胞分布区域，Z区域为脂质颗粒的分布区域，由图5c可知，在第一白细胞测量***的三维散点图中，白细胞和脂质颗粒的分布区域能够显著地区分出来，并且没有交叠，可以通过第一白细胞测量***的三维散点图能够分类出脂质颗粒(Z区域)，对位于非血影区(可根据第二白细胞测量***的非血影区域映射得到)内脂质颗粒的粒子数进行统计便能得到第一脂质颗粒计数值WBC_DL。当然，同样的，也可以对该图进行处理，去除脂质颗粒之外的粒子，获得脂质颗粒散点图，而后统计非血影区内的粒子数作为第一脂质颗粒计数值。

步骤S310，白细胞计数值修正。将第一初始白细胞计数值WBC_B减去第二白细胞测量***中非血影区域脂质颗粒计数值WBC_BL，得到修正后非血影区域的白细胞计数值WBC_B'。

虽然不希望受理论约束，在研究中发现，由于脂质颗粒不是细胞，当采用同样的散射光信号进行检测时，该群粒子在各自的散点图上表现的位置类似，也即分布区域一致或者有函数关系。虽然第一白细胞测量***与第二白细胞测量***采用不同的试剂，但是，由于第一白细胞测量***与第二白细胞测量***均采用前向散射光和侧向散射光信号进行细胞测量，因此，脂质颗粒在两个***中的分布区域一致、或存在函数关系。请参考图5a，为上述含有脂质颗粒的样本在第一白细胞测量***中的侧向散射光-前向散射光散点图。对比图5a和图4，脂质颗粒在第一白细胞测量***和第二白细胞测量***中呈现类似的S曲线的特性。

由于脂质颗粒在第一白细胞测量***和第二白细胞测量***的侧向散射光-前向散射光散点图中，具有一致、或存在函数关系的分布区域，因此，利用第一白细胞测量***中第一脂质颗粒计数值WBC_DL能够计算得到第二白细胞测量***中相应的非血影区域脂质颗粒计数值WBC_BL，记为：

WBC_BL＝f(WBC_DL)

在具体实施例中，函数f()可以为倍数，即

WBC_BL＝αWBC_DL

其中，α为常数，可根据预设值或经验值确定，在一具体实施例中，α＝1.0，由于两个白细胞检测***的差异，WBC_BL和WBC_DL可能略有差异，α的取值范围可以为0.5～2，一般取值在0.8-1.2可满足需要。由此可得第二白细胞测量***中修正后的白细胞计数值WBC_B'为：

WBC_B'＝WBC_B-WBC_BL＝WBC_B-αWBC_DL

由此，便修正得到第二白细胞测量***中白细胞计数值WBC_B'。

举例说明：一例脂质颗粒样本，通过血清置换实验方法处理样本去除脂质颗粒后，用粒子计数仪获得的白细胞参考值为5.96×10⁹/L，其在第一白细胞测量***中第一脂质颗粒计数值WBC_DL＝2.76×10⁹/L，采用系数α＝1可得到第二白细胞测量***中非血影区域脂质颗粒计数值WBC_BL＝2.76×10⁹/L，第二白细胞测量***中非血影区域的第一初始白细胞计数值WBC_BL＝2.76×10⁹/L，得到最终的第二白细胞测量***白细胞计数值为WBC_B'＝5.97×10⁹/L，与WBC参考值5.96×10⁹/L对应较为准确。

选取237例脂质颗粒样本，请参考图6，图6为采用本实施例的方案修正后的白细胞计数值和标准参考值之间的比较，由图6可知，WBC_B'与白细胞计数参考值(WBC参考值)的相关性斜率为1.020，截距为-0.038，R²＝0.998，R是相关系数，说明相关性良好，说明采用本实施例的方案修正后的白细胞计数值与真值非常接近。

在另一种具体实施例中，根据第二初始白细胞计数值进行修正时，请参考图7，为本实施例白细胞计数方法的流程图，该方法包括步骤如下：

步骤S120，第二初始计数。根据细胞分析仪的第二白细胞测量***收集的被测血液样本的散射光信号生成第二白细胞测量***的散点图，统计第二白细胞测量***的散点图中白细胞区域中的粒子数，得到第二初始白细胞计数值。不同于上述计数非血影区域中的粒子数，本实施例中，第二初始白细胞计数值为白细胞区域的粒子数，当然，该区域也含有部分脂质颗粒，对该区域白细胞计数造成了干扰。本实施例中，第二初始白细胞计数值为白细胞区域的白细胞数与位于该区域的脂质颗粒数之和。

步骤S220，第二脂质颗粒计数。根据细胞分析仪的第一白细胞测量***收集的被测血液样本的散射光，生成散点图，基于第一白细胞测量***的散点图识别脂质颗粒，并获取第二脂质颗粒计数值，所称第二脂质颗粒计数值为白细胞区域中的脂质颗粒数量。与上述实施例不同之处在于脂质颗粒的计数范围不同，步骤S210中获取的是非血影区域的脂质颗粒数量，而本实施例中，获取的是白细胞区域中的脂质颗粒数量，即计数的区域范围可能有所不同。根据上述描述可知，在第一白细胞测量***的散点图中，白细胞和脂质颗粒能够显著地区分出来，并且没有交叠，可以通过第一白细胞测量***的散点图能够分类出脂质颗粒。将第二白细胞测量***的前向散射光信号和侧向散射光信号的散点图上的白细胞区域映射到第一白细胞测量***的前向散射光信号和侧向散射光信号的二维散点图上，对位于该白细胞区域内脂质颗粒的粒子数进行统计便能得到第二脂质颗粒计数值。同样优选的，第一白细胞测量***的前向散射光、侧向散射光和荧光信号的三维散点图上，脂质颗粒能更好地与其它粒子区分，能更好地被识别。将第二白细胞测量***的白细胞区域映射到第一白细胞测量***前向散射光信号和侧向散射光信号的散点图上，得到对应的第一白细胞***的白细胞区域。通过三维散点图识别脂质颗粒后，统计在该对应的白细胞区域中的脂质颗粒数量，得到第二脂质颗粒计数值。在具体实施例中，在基于第一白细胞测量***的散点图识别出脂质颗粒并计数得到第二脂质颗粒计数值，还优选通过函数将该数值进行加权运算，具体地，一种函数为倍数函数，该倍数可以优选为1。当然，在其它实施例中，同样的，也可以对第一白细胞测量***的二维或三维散点图进行处理，去除脂质颗粒之外的粒子，获得脂质颗粒散点图，而后统计白细胞区域内的粒子数作为第二脂质颗粒计数值。

步骤S320，白细胞区域修正。将第二初始白细胞计数值减去第二脂质颗粒计数值，得到修正后的白细胞计数值，具体可参见步骤S310的计算方式，原理类似，在此不再赘述。在优选的实施例中，当步骤S220中通过函数对第二脂质颗粒计数值进行加权运算时，则应采用加权后的数值去修正白细胞计数值。

本实施例针对白细胞区域进行白细胞计数值修正，相对于针对整个非血影区域进行白细胞计数值修正，针对性强，因此，理论上修正得到的结果会更为准确。

本实施例利用第一白细胞测量***能够显著区分脂质颗粒的优点，统计出第一白细胞测量***中脂质颗粒数，而后根据第二白细胞测量***和第一白细胞测量***在采用相同散射光检测生成散点图时，其脂质颗粒的分布具有一致性或相关性的特点，计算出第二白细胞测量***中的脂质颗粒数，从而消除了脂质颗粒对在第二白细胞测量***中统计白细胞数干扰的影响，获得比较准确的白细胞数目统计。

实施例2：

请参考图2、图3和图7，本实施例公开的白细胞计数方法还包括对第二白细胞测量***的散点图中的脂质颗粒进行标记，包括：

步骤S400，脂质颗粒标记。请参考图8，通常情况下，细胞分析仪会将第一、第二白细胞测量***的散点图以可视化形式呈现在显示设备的显示界面上。在本实施例中，可视化显示的散点图至少包括第二白细胞测量***的侧向散射光-前向散射光的二维散点图，在其它实施例中，也可以根据用户的需求，显示其它散点图，譬如增加维度或者显示其它散点图。为提高用户体验，使用户在散点图上直观地看出白细胞区域的脂质颗粒分布，在可视化散点图中以不同于白细胞的方式标记出脂质颗粒。在具体实施例中，可以采用不同的符号和/或不同的颜色来区分。譬如黑色加号为白细胞粒子，黑色圆点为脂质颗粒。在其它具体实施例中，也可以在整个散点图上采用不同的标记区分白细胞粒子和脂质颗粒，使用户在散点图上直观地看出白细胞的分布和脂质颗粒的分布。

将第二白细胞测量***散点图上的脂质颗粒用与白细胞标记方式不同的方式标记出来，通过可视化的方式显示到显示界面，并直观地区分白细胞和脂质颗粒，有助于改善用户体验，也利于用户对样本的研究和分析。

步骤S400与步骤S320没有顺序上的限定，即白细胞计数值的修正，与在第二白细胞测量***上标记脂质颗粒，可以并行。

实施例3

本实施例公开的白细胞计数方法还包括：在第二白细胞测量***的散点图中识别脂质颗粒，请参考图9，为本实施例识别脂质颗粒的流程图，具体包括如下步骤：

步骤S510，第一子区域划分。在第一白细胞测量***的散点图，沿侧向散射光方向上，将散点图分成若干第一子区域。请参考图10a、10b和10c，在具体实施例中，可以沿侧向散射光方向等分为N段，N为5～20，优选为N＝8，具体取值可根据散点图的分辨率而定，分辨率高的，N可以较大。在其它实施例中，也可以不等分为N段。

步骤S520，第二子区域划分。在第二白细胞测量***的散点图，沿侧向散射光方向上，将散点图分成若干第二子区域。请参考图10a、10b和10c，在具体实施例中，可以沿侧向散射光方向等分为N段，N为5～20，优选为N＝8，具体取值可根据散点图的分辨率而定，分辨率高的，N可以较大。在其它实施例中，也可以不等分为N段。

本实施例中，并不限制步骤S510和步骤S520的执行先后顺序。第一子区域的划分方式与第二子区域的划分方式相同，使各第一子区域分别与各第二子区域有一一对应关系，即，第一子区域与其对应的第二子区域在侧向散射光方向上具有相同的信号强度。请参考图10a和10b，第一白细胞测量***的散点图和第二白细胞测量***的散点图在侧向散射光方向上单位区间所表征的信号强度一致。图10a中，第一白细胞测量***和第二白细胞测量***的散点图分别沿侧向散射光方向等分为N段，图10b中为不等分为N段，各第一子区域分别与各第二子区域沿侧向散射光方向上依次对应。请参考图10c，第一白细胞测量***的散点图和第二白细胞测量***的散点图在侧向散射光方向上单位区间所表征的信号强度不同，具体为：第二白细胞测量***的散点图在侧向散射光方向上单位区间所表征的信号强度小于第一白细胞测量***的散点图在侧向散射光方向上单位区间所表征的信号强度。因此，第二白细胞测量***所呈现出的散点图区域范围显得大于第一白细胞测量***所呈现出的散点图区域范围，故而，当采用相同的划分方式划分第一子区域与第二子区域时，各第一子区域所对应的第二子区域的区域范围应大于该第一子区域的范围，反之则反。

步骤S530，第一子区域统计。统计第一子区域的脂质颗粒数。根据上述描述可知，由于在第一白细胞测量***中能够识别出脂质颗粒，因此能够统计出各个子区域的脂质颗粒数。不妨设第i个第一子区域的脂质颗粒数为g_i，其中，i＝1～N。在一种实施例中，可以只统计可能存在脂质颗粒与白细胞重合的第一子区域的g_i；在另一种实施例中，也可以分别统计各个第一子区域的脂质颗粒数。

步骤S540，脂质颗粒识别。在第二子区域中选取粒子并识别为脂质颗粒，该识别出作为脂质颗粒的粒子数量与其对应的第一子区域的脂质颗粒的数量相同或者具有一定的比例关系。记第二子区域的脂质颗粒数m_i，其中，i＝1～N，m_i为第二白细胞测量***的散点图中第i个第二子区域的脂质颗粒数。在具体实施例中，可以采用如下公式计算m_i：

m_i＝T(g_i)

其中，函数T()可以是比例函数，譬如：

m_i＝βg_i

其中，β为常数，可根据预设值或经验值确定，在一具体实施例中，β的取值范围为0.5～2，优选地，β＝1.0。m_i＝βg_i表明，各第一子区域中的脂质颗粒数和与其对应的第二子区域的脂质颗粒数的比例相同。继而完成了第二白细胞测量***中各第二子区域的脂质颗粒识别。

在具体实施例中，在对第二白细胞测量***的散点图进行划分若干子区域后，可以按子区域进行标记脂质颗粒。如在求得m_i后，可在第i个第二子区域中随机选取m_i个粒子作为脂质颗粒进行标记，从而完成第二白细胞测量***的散点图中脂质颗粒的标记，如图10a、10b和10c所示。在其它实施例中，也可以根据用户的需求在分子区域识别出脂质颗粒后进行其它操作。

本实施例中，通过将散点图划分成若干子区域，基于子区域进行脂质颗粒的计数和识别，继而进一步提高了脂质颗粒识别的区域针对性。此外，基于子区域对第二白细胞测量***散点图的脂质颗粒进行标记，能够更好地反映出脂质颗粒的分布情况。

在另外的实施例中，在第一白细胞测量***的散点图中识别出的脂质颗粒，然后根据这些脂质颗粒的数据集合确定其在第二白细胞测量***的散点图中分布位置，并对其进行识别。

进一步的，在第二白细胞测量***的散点图这识别脂质颗粒后，用与白细胞标记方式不同的方式标记出来，通过可视化的方式呈现给用户。

本发明实施例中描述的技术特征或操作步骤可以按照任何合适的方式进行组合。本领域技术人员容易理解，本发明实施例描述的方法中的步骤或动作的顺序是可以改变的。因此，除非另有说明要求一定的顺序，在附图或者详细描述中的任何顺序只是为了用作说明的目的，而不是必须的顺序。

以上通过具体的实施例对本发明进行了说明，但本发明并不限于这些具体的实施例。本领域技术人员应该明白，还可以依据本发明提供的实施例做各种修改、等同替换、变化等等，这些变换只要未背离本发明的精神，都应在本发明的保护范围之内。此外，以上多处所述的“一个实施例”或“另一实施例”等表示不同的实施例，当然也可以将其全部或部分结合在一个实施例中。

本领域技术人员可以理解，上述实施方式中各种方法的全部或部分步骤可以通过程序来指令相关硬件完成，该程序可以存储于一计算机可读存储介质中，存储介质可以包括：只读存储器、随机存储器、磁盘或光盘等。

以上应用了具体个例对本发明进行阐述，只是用于帮助理解本发明，并不用以限制本发明。对于本发明所属技术领域的技术人员，依据本发明的思想，还可以做出若干简单推演、变形或替换。

Claims (11)

1.一种白细胞计数方法,其特征在于包括：

从细胞分析仪的第二白细胞测量***统计白细胞初始计数值，所述第二白细胞测量***是至少可将白细胞分类为嗜碱性粒细胞和其它白细胞的测量***；

从细胞分析仪的第一白细胞测量***获取脂质颗粒数，所述第一白细胞测量***是至少可将白细胞分类为淋巴细胞群、单核细胞群、嗜酸性粒细胞群、中性粒细胞和嗜碱性粒细胞群四类细胞的测量***；

用脂质颗粒数修正白细胞初始计数值，得到修正后的白细胞计数值。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，

从细胞分析仪的第二白细胞测量***统计白细胞初始计数值包括：

根据细胞分析仪的第二白细胞测量***收集的被测血液样本的散射光信号生成第二白细胞测量***的散点图；

统计第二白细胞测量***的散点图中非血影区域中的粒子数，得到第一初始白细胞计数值；或者统计第二白细胞测量***的散点图中白细胞区域中的粒子数，得到第二初始白细胞计数值；

从细胞分析仪的第一白细胞测量***获取脂质颗粒数包括：根据细胞分析仪的第一白细胞测量***收集的被测血液样本的光信号，生成散点图，基于第一白细胞测量***的散点图识别脂质颗粒，并获取第一脂质颗粒计数值或者第二脂质颗粒计数值；所述第一脂质颗粒计数值为非血影区域中的脂质颗粒数量；所述第二脂质颗粒计数值为白细胞区域中的脂质颗粒数量；

用脂质颗粒数修正包括白细胞初始计数值包括：将第一初始白细胞计数值减去第一脂质颗粒计数值，得到修正后的白细胞计数值；或者将第二初始白细胞计数值减去第二脂质颗粒计数值，得到修正后的白细胞计数值。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，

第二白细胞测量***收集的散射光信号包括前向散射光信号和侧向散射光信号，基于前向散射光信号和侧向散射光信号的二维散点图统计非血影区域中的粒子数或者白细胞区域中的粒子数；和

第一白细胞测量***收集的光信号至少包括前向散射光信号和侧向散射光信号，基于前向散射光信号和侧向散射光信号的二维散点图识别脂质颗粒，优选的，所述光信号还包括荧光信号，基于前向散射光信号、侧向散射光信号和荧光信号的三维散点图识别脂质颗粒。

4.如权利要求2或3所述的方法，其特征在于，还包括：

在第二白细胞测量***的散点图中以不同于标记白细胞的方式标记出脂质颗粒。

5.如权利要求2、3或4所述的方法，其特征在于，还包括：在第二白细胞测量***检测的粒子中识别出脂质颗粒：

在第二白细胞测量***的散点图，沿侧向散射光方向上，将散点图分成若干第二子区域；

在第一白细胞测量***的散点图，沿侧向散射光方向上，将散点图分成若干第一子区域；

所述第一子区域的划分方式与第二子区域的划分方式相同，使各第一子区域分别与各第二子区域有一一对应关系；

统计第一子区域的脂质颗粒数；

在第二子区域中选取粒子并识别为脂质颗粒，使第一子区域中的脂质颗粒数和与其对应的第二子区域的脂质颗粒数的相同；或者，各第一子区域中的脂质颗粒数和与其对应的第二子区域的脂质颗粒数的比例相同。

6.一种白细胞计数装置,其特征在于包括：

初始计数模块，用于从细胞分析仪的第二白细胞测量***统计白细胞初始计数值，所述第二白细胞测量***是至少可将白细胞分类为嗜碱性粒细胞和其它白细胞的测量***；

脂质颗粒数获取模块，用于从细胞分析仪的第一白细胞测量***获取脂质颗粒数，所述第一白细胞测量***是至少可将白细胞分类为淋巴细胞群、单核细胞群、嗜酸性粒细胞群、中性粒细胞和嗜碱性粒细胞四类细胞的测量***；

修正模块，用于用脂质颗粒数修正白细胞初始计数值，得到修正后的白细胞计数值。

7.如权利要求6所述的白细胞计数装置,其特征在于，

所述初始计数模块包括：

第一初始计数单元，用于根据细胞分析仪的第二白细胞测量***收集的被测血液样本的散射光信号生成第二白细胞测量***的散点图，统计第二白细胞测量***的散点图中非血影区域中的细胞数，得到第一初始白细胞计数值；和/或，

第二初始计数单元，用于根据细胞分析仪的第二白细胞测量***收集的被测血液样本的散射光信号生成第二白细胞测量***的散点图，统计第二白细胞测量***的散点图中白细胞区域中的粒子数，得到第二初始白细胞计数值；

所述脂质颗粒数获取模块包括：

脂质颗粒计数单元，用于根据细胞分析仪的第一白细胞测量***收集的被测血液样本的光信号，生成散点图，基于散点图识别脂质颗粒，并获取第一脂质颗粒计数值或者第二脂质颗粒计数值；所述第一脂质颗粒计数值为非血影区域中的脂质颗粒数量；所述第二脂质颗粒计数值为白细胞区域中的脂质颗粒数量；

所述修正模块用于将第一初始白细胞计数值减去第一脂质颗粒计数值，得到修正后的白细胞计数值；或者用于将第二初始白细胞计数值减去第二脂质颗粒计数值，得到修正后的白细胞计数值。

8.如权利要求7所述的白细胞计数装置，其特征在于，

第二白细胞测量***收集的散射光信号包括前向散射光信号和侧向散射光信号，基于前向散射光信号和侧向散射光信号的二维散点图统计非血影区域中的粒子数或者白细胞区域中的粒子数；和

第一白细胞测量***收集的光信号至少包括前向散射光信号和侧向散射光信号，基于前向散射光信号和侧向散射光信号的二维散点图识别脂质颗粒，优选的，所述光信号还包括荧光信号，基于前向散射光信号、侧向散射光信号和荧光信号的三维散点图识别脂质颗粒。

9.如权利要求7或8所述的白细胞计数装置，其特征在于，还包括：

标记模块，用于在第二白细胞测量***的散点图中以不同于标记白细胞的方式标记出脂质颗粒。

10.如权利要求7、8或9所述的白细胞计数装置，其特征在于，还包括识别模块，用于识别第二白细胞测量***的散点图的脂质颗粒，所述识别模块包括：

第一区域划分单元，用于在第一白细胞测量***的散点图，沿侧向散射光方向上，将散点图分成若干第一子区域；

第二区域划分单元，用于在第二白细胞测量***的散点图，沿侧向散射光方向上，将散点图分成若干第二子区域；

所述第一区域划分单元与所述第二区域划分单元划分子区域的方式相同，使各第一子区域与各第二子区域有一一对应关系；

统计单元，用于统计第一子区域的脂质颗粒数；

识别单元，用于在第二子区域中选取粒子并识别为脂质颗粒，使第一子区域中的脂质颗粒数和与其对应的第二子区域的脂质颗粒数的相同；或者，各第一子区域中的脂质颗粒数和与其对应的第二子区域的脂质颗粒数的比例相同。

11.一种细胞分析仪，其特征在于包括：

输送设备，用于将被测样本液输送到光学检测设备中；

光学检测设备，用于对流经其检测区域的被测样本液进行光照射，收集细胞因光照射所产生的各种光信号，并转换成对应的电信号输出；

如权利要求6-10任意一项所述的白细胞计数装置，用于接收光学检测设备输出的电信号并进行处理。