CN105941154A - 一种冬枣优质种苗综合繁育方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种冬枣优质种苗综合繁育方法，该方法在无菌条件下，把冬枣植物的组织从植物体上取下，放在由人工控制光照、温度、湿度和营养物质等因素的玻璃容器内培养，使它继续生存或发展，最后发育成一棵完整的冬枣植株，在室内人工控制的环境条件下进行，属于无性繁殖，可实现快速繁殖生产；人工控制，不受季节影响；节省土地；可筛选性强，能繁殖无病毒苗；品种提纯选优更加方便。通过这种方法生产的沾化冬枣苗木能保持其母体优良性状，并脱毒，抗病、抗逆性强；苗木本身健壮、节间短、根系发达；提前进入盛果期，结果品质好。

Description

一种冬枣优质种苗综合繁育方法

技术领域

本发明涉及植株的繁育方法，具体涉及一种冬枣优质种苗综合繁育方法。

背景技术

冬枣是优质晚熟鲜食枣品种，果实酷似小苹果，皮薄肉酥脆，口味浓甜微酸，营养丰富，尤其是富含维生素C，每100g果肉含维生素 C381mg，有“活维生素丸”和“百果之王”之称；冬枣还富含环磷酸腺苷，具有很高的保健价值，因此备受人们喜爱。自上世纪 90 年代末，冬枣在我国已形成发展热潮，然而，我国新发展冬枣产区的优良冬枣树较少，冬枣群体内表现出优劣冬枣参差不齐，劣质冬枣较多。且目前的优质冬枣树的繁育技术不高，大多单纯利用组培进行繁育，这种繁育方法存在繁育周期长，技术成本高，繁殖系数较低，抗病抗逆性差的缺点。致使冬枣树苗在栽培上存在成活率较低，植株生长不健壮，导致生产上存在严重的产量低、品质差、甚至不结果等问题。因此，解决冬枣优良树苗的繁育问题已成为保证我国冬枣产业快速、健康发展的当务之急。

发明内容

为了解决以上现有技术中的问题，本发明创造性的提出一种冬枣优质种苗综合繁育方法，该方法属于无性繁殖，不受季节影响，使冬枣品种的提纯选优更加方便和快速，繁育的冬枣树普遍具有性状优良，抗病、抗逆性强，苗木健壮、节间短、根系发达等特点。

本申请冬枣优质种苗综合繁育方法采取的技术步骤如下：

（1）外植体接种：在生长季节剪取刚萌发的枣头枝或二次枝顶芽2cm，用无菌水冲洗干净，然后在超净台上用酒精消毒，然后用次氯酸钠和升汞分别消毒，最后用无菌水冲洗干净，将材料放在解剖镜下用解剖针剥取0.3-0.5mm的生长点接种到初代培养基上；

（2）初代培养：将剥离的生长点接种到MS＋6-BA2.0mg/L＋IBA0.4的培养基上，待发出的芽长至3cm时，按节剪成段，作为继代繁殖材料；

（3）继代培养：将初代培养新抽出的芽梢剪成1cm的茎段，茎段保留一节以上，转接到MS＋6-BA1.5＋IBA0.5继代培养基上，将后续培养形成的芽梢反复转接不断的分化增殖；

（4）生根培养：将继代培养基上的芽梢剪成1cm带1-2节的茎段，接到适宜的生根培养基上培养，试管苗茎段根长达到2cm以上后，脱瓶移栽；

（5）过渡炼苗：当试管苗生根培养5周后，上部长出2cm以上的健壮枝叶，将试管苗移到温室避光处进行无土基质过渡炼苗，移栽初期相对湿度保持在90％以上，温度24-26℃。

（6）温室盆栽：炼苗20天后，在温室内将长势较好的枣苗移入营养钵或小素烧盆中，基质用专门配制的营养土（即：盆内底部先装4-5cm深的营养混合土即蛭石︰草炭︰园土(1︰1︰1)，上面再覆3-4cm厚的粗粒状蛭石︰珍珠岩（2︰1），将苗子栽到上层蛭石与珍珠岩中）。此法主要是苗子生新根后引导下扎，从上层伸入营养土中吸取营养，提高后期苗子在盆内的长势。

（7）大田苗圃：待生长30天后，小苗长到8厘米左右，将叶色浓绿长势较好的枣苗从营养钵或小素烧盆中移入大田苗圃，然后通过绿枝扦插或嫁接或定植成为成苗。

以上所述步骤（1）中消毒步骤具体为：在超净台上用70％酒精消毒5s，用5％的次氯酸钠和0.1％的升汞分别消毒8min。

以上所述步骤（4）中接到专用培养基上8-10d，试管苗茎段的腋芽开始萌动，同时茎段基部产生白色突起，12天后生出3—5条小白根，30—40天后根长达到2cm以上；

以上步骤（4）中所述的生根培养基具体为1/2 MS＋NAA1㎎/L＋IBA0.5㎎/L＋LH200㎎/L。

以上步骤（5）中无土基质为珍珠岩、蛭石的混合物，进一步讲，所述的无土基质为珍珠岩与蛭石质量比为1：3混合物。

将后续培养形成的芽梢反复转接不断的分化增殖，根据苗木需量多少而定，若苗木需求量大，在继代分化培养中要多分化转接（100瓶也行，200瓶也行，300瓶也行，等等），然后再转接到生根培养基中进行生根培养。

发明的有益效果为：本申请在无菌条件下，把冬枣植物的组织或单个细胞从植物体上取下，放在由人工控制光照、温度、湿度和营养物质等因素的玻璃容器内培养，使它继续生存或发展，最后发育成一棵完整的冬枣植株，在室内人工控制的环境条件下进行，属于无性繁殖，可实现快速繁殖生产；人工控制，不受季节影响；节省土地；可筛选性强，能繁殖无病毒苗；品种提纯选优更加方便。通过这种方法生产的沾化冬枣苗木能保持其母体优良性状，并脱毒，抗病、抗逆性强；苗木本身健壮、节间短、根系发达；提前进入盛果期，结果品质好。

本方法用三种消毒剂三次消毒，是为了更好更彻底的把材料上的病菌消灭掉，但要严格掌握好消毒剂浓度和消毒时间，不能损伤组织材料，不影响其生长，以达到最佳的消毒效果。带有茸毛的、粗糙不平的刚萌动的冬枣茎尖，在消毒之前，先在70％酒精中浸漂数秒，以便于其它消毒剂的浸润。70％酒精，有很强的穿透力和杀菌力，使用时应严格掌握好时间，以免把材料杀死。次氯酸钠，具有杀菌、消毒的作用。由于它能分解出具有杀菌作用的氯气，以后散失到空气中而对组织材料无害。0.1%的升汞液几分钟内就可杀死细菌的营养细胞，用来消毒外植体，效果极佳。

初代培养中的用MS＋6-BA2.0mg/L＋IBA0.4的培养基，能够很好地分化生长，成活率较高，为82%。发出的芽长至3cm时剪段，3厘米意味着能剪2至3段（剪段转苗时，必须每段至少带一个节点，节点腋芽起动生成新的嫩梢），若生长大于3cm，芽茎易弯曲，不便转苗。

继代培养中1cm的茎段，只有1cm以上的茎段才易保留节点（节与节之间距离大约为0.8厘米），节点处有芽眼，利于继代分化培养。

MS＋6-BA 1.5＋IBA0.5继代培养基，使节点腋芽起动率高，发芽长势好。

湿度是影响移栽成活率最重要的因素之一，尤其是移栽初期要保持较高的湿度，是保证成活的关键。温室自然湿度﹤80%，成活率仅在20%以下。通过经常喷雾、地面洒水的，空气湿度达到90%～100%，成活率达90%以上。

移栽初期，对温度有比较严格的要求，试验表明，移栽最适宜的温度在25℃左右，温度过低根系不生长，温度高于30℃，根系易褐化，地上部分易得茎腐病而死亡。因此，必须要有良好的条件，才能一年四季都能移栽。如果温室条件较差，冬季温度低于20℃，则就不能移苗，夏季温室不能有效降温，通常温度都在30℃以上，移苗很难成活。

温室盆栽中，含有蛭石、草炭、园土、粗粒状蛭石、珍珠岩成分的专门配制的营养土也称过渡营养土，可使苗子生新根后引导下扎，从上层伸入营养土中吸取营养，提高后期苗子在盆内的长势（表现为植株茎杆粗壮，叶色深绿）。

无土基质为珍珠岩、蛭石的混合物，该基质结合了珍珠岩透气、透水以及蛭石疏松、保水各自的优点，若单用珍珠岩保水性差，若单用蛭石易兜水烂根。该基质成活率明显高于透气性差易板结的基质，如草炭、面沙、园土等基质。试验证明，珍珠岩加蛭石是试管苗过渡炼苗最适基质，是无土培养向有土培养最好的过渡。为了促进生长，移栽后待幼苗长出幼根和新叶后，对盆内基质追施2～3次1/10的MS大量元素营养液。

具体实施方式

下面的实施例是对本发明的进一步详细描述。

实施例:

1.项目实施地点

冬枣苗木田间选育在沾化县冬枣研究所下属的中国高新技术苗木繁育场进行。

2. 项目实施规模

项目研究的不同阶段，规模由小到大，每种材料的规模在1000平方米左右，至开发阶段规模扩大。

3.项目实施方法

（1）外植体接种：在生长季节剪取刚萌发的枣头枝或二次枝顶芽2cm，用无菌水冲洗干净，然后在超净台上用70％酒精消毒5s，用5％的次氯酸钠和0.1％的升汞分别消毒8min，最后用无菌水冲洗干净，将材料放在解剖镜下用解剖针剥取0.3-0.5mm的生长点接种到初代培养基上；

（2）初代培养：将剥离的生长点接种到MS＋6-BA2.0mg/L＋IBA0.4的培养基上，待发出的芽长至3cm时，按节剪成段，作为继代繁殖材料；

（3）继代培养：将初代培养新抽出的芽梢剪成1cm的茎段，茎段保留一节以上，转接到MS＋6-BA1.5＋IBA0.5继代培养基上，将后续培养形成的芽梢反复转接不断的分化增殖；

（4）生根培养：将继代培养基上的芽梢剪成1cm带1-2节的茎段，接到生根培养基上培养，在培养基上培养8-10d，试管苗茎段的腋芽开始萌动，同时茎段基部产生白色突起，12天后生出3—5条小白根，30—40天后根长达到2cm以上，试管苗茎段根长达到2cm以上后，脱瓶移栽；

（5）过渡炼苗：当试管苗生根培养5周后，上部长出2cm以上的健壮枝叶，将试管苗移到温室避光处进行无土基质过渡炼苗，移栽初期相对湿度保持在90％以上，温度25℃左右，无土基质为珍珠岩、蛭石的混合物，其中珍珠岩与蛭石质量比为1：3混合物。

（6）温室盆栽：炼苗20天后，植株生长状况良好，在温室内将枣苗移入营养钵或小素烧盆中，基质制备为：盆内底部先装4-5cm深的营养混合土即蛭石︰草炭︰园土(1︰1︰1)，上面再覆3-4cm厚的粗粒状蛭石︰珍珠岩（2︰1），将苗子栽到上层蛭石与珍珠岩中）。此法主要是苗子生新根后引导下扎，从上层伸入营养土中吸取营养，提高后期苗子在盆内的长势。

（7）大田苗圃：待生长30天后，小苗长到8厘米左右，将叶色浓绿长势较好的枣苗从营养钵或小素烧盆中移入大田苗圃，然后通过绿枝扦插或嫁接或定植成为成苗。

该方法属于无性繁殖，不受季节影响，使冬枣品种的提纯选优更加方便和快速，通过以上方法繁育的冬枣树普遍具有性状优良，抗病、抗逆性强，苗木健壮、节间短、根系发达等特点。成活率在99%以上，其果品体积将明显增大，个体树将增产20％-50%，效益有显著提高，且其耐贮性和抗逆性将显著增强。

Claims (7)

1.一种冬枣优质种苗综合繁育方法，其特征在于繁育步骤如下：

（1）外植体接种：在生长季节剪取刚萌发的枣头枝或二次枝顶芽2cm，用无菌水冲洗干净，然后在超净台上用酒精消毒，然后用次氯酸钠和升汞分别消毒，最后用无菌水冲洗干净，将材料放在解剖镜下用解剖针剥取0.3-0.5mm的生长点接种到初代培养基上；

（2）初代培养：将剥离的生长点接种到MS＋6-BA2.0mg/L＋IBA0.4的培养基上，待发出的芽长至3cm时，按节剪成段，作为继代繁殖材料；

（3）继代培养：将初代培养新抽出的芽梢剪成1cm的茎段，茎段保留一节以上，转接到MS＋6-BA 1.5＋IBA0.5继代培养基上，将后续培养形成的芽梢反复转接不断的分化增殖；

（4）生根培养：将继代培养基上的芽梢剪成1cm带1-2节的茎段，接到生根培养基上培养，试管苗茎段根长达到2cm以上后，脱瓶移栽；

（5）过渡炼苗：当试管苗生根培养5周后，上部长出2cm以上的健壮枝叶，将试管苗移到温室避光处进行无土基质过渡炼苗，移栽初期相对湿度保持在90％以上，温度24-26℃；

（6）温室盆栽：炼苗20天后，在温室内将枣苗移入营养钵或小素烧盆中，基质用配制的营养土；

（7）大田苗圃：待生长30天后，将枣苗从营养钵或小素烧盆中移入大田苗圃，然后通过绿枝扦插或嫁接或定植成为成苗。

2.如权利要求1所述的一种冬枣优质种苗综合繁育方法，其特征在于步骤（1）中消毒步骤具体为：在超净台上用70％酒精消毒5s，用5％的次氯酸钠和0.1％的升汞分别消毒8min。

3.如权利要求1所述的一种冬枣优质种苗综合繁育方法，其特征在于：步骤（4）中接到专用培养基上8-10d，试管苗茎段的腋芽开始萌动，同时茎段基部产生白色突起，12天后生出3-5条小白根，30-40天后根长达到2cm以上。

4.如权利要求1或3所述的一种冬枣优质种苗综合繁育方法，其特征在于：所述的生根培养基具体为1/2 MS＋NAA1㎎/L＋IBA0.5㎎/L＋LH200㎎/L。

5.如权利要求1所述的一种冬枣优质种苗综合繁育方法，其特征在于：步骤（6）中基质用的配制的营养土具体为,盆内底部先装4-5cm深的营养混合土即蛭石︰草炭︰园土(重量份数比1︰1︰1)，上面再覆3-4cm厚的粗粒状蛭石︰珍珠岩（重量份数比2︰1）。

6.如权利要求1所述的一种冬枣优质种苗综合繁育方法，其特征在于：步骤（5）中无土基质为珍珠岩、蛭石的混合物。

7.如权利要求6所述的一种冬枣优质种苗综合繁育方法，其特征在于：所述的无土基质为珍珠岩与蛭石质量比为1：3混合物。