CN105823770A - 一种无光学干扰的拉曼标记探针及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明以对巯基苯乙炔为主体结构设计了一系列拉曼散射峰位在1800‑2400 cm‑1波数区信号分子，选择金、银纳米粒子作为拉曼信号的增强基底，将带巯基的炔烃信号分子自组装于增强基底表面并使用巯基乙酸对SERS信号进行优化，然后选择透光、亲水并富含活性反应基团的包裹材料进行探针封装，最后在包裹材料外层嫁接特定的生物靶向功能分子。此探针拉曼散射的光学响应强、窄带单峰发射、无光学背景干扰，在多组分同时标记的生物成像领域意义重大。该技术可延伸至以带通滤光片为分光器件，以光电倍增管（PMT）或雪崩光电二极管（APD）为检测器件的无光栅超快拉曼成像仪的设计与开发，克服了拉曼成像逐点扫描、成像慢的技术瓶颈，将填补光学成像类仪器的市场空白。

Description

一种无光学干扰的拉曼标记探针及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于生物成像技术领域，涉及一种新型炔烃编码、生物靶向的表面增强拉曼散射(Surface-enhanced Raman scattering,SERS)活性纳米标记探针的制备方法。更重要的是，涉及以带通滤光片为分光器件，以光电倍增管(PMT)或雪崩光电二极管(APD)为检测器件的无光栅超快拉曼成像仪的设计与开发。
背景技术
生物成像(如活细胞成像)技术使得科学家可以实时和动态观察生物体内部结构和生理过程，彻底革新了生物学家研究生物体活动机制的方式。在众多的生物成像技术中，荧光标记成像应用最为广泛和成熟。它利用可吸收特定波长的光并发射出波长更长的光(荧光)的信号探针，比如小分子有机染料或者荧光蛋白来特异性地标记生物体系中的特定组分，并通过其荧光信号的定位来获取目标生物物质的分布情况，极大地提升了人们探索生物体内部结构和过程的能力。然而，这种成像技术明显受制于荧光光谱法的固有缺陷，即传统的荧光染料发射峰宽(约50nm)过宽会造成多色(或多组分)标记时信号重叠而难以区分、辨析。量子点技术近年来的进展克服了上述传统有机荧光染料和荧光蛋白的固有缺陷，其发射峰窄且对称，相互重叠小以及其发射峰波长可由其组成材料和粒径进行精细调节等优良特性倍受细胞标记和成像研究的青睐，但其潜在的生物毒性使其应用于活体成像的一些深入研究难有新的进展。
表面增强拉曼散射(Surface-enhanced Raman scattering,SERS)技术除具有非破坏性、高光谱特异性和不受水干扰等普通拉曼光谱的优点外，还具有更低的检测限和更高的灵敏度(具备单分子检测的能力)，特别是在纳米技术强势介入生物医学领域的情形下，各种具有表面增强拉曼散射效应的金(银)纳米颗粒广泛应用于生物样品的分析检测与生物成像研究。为了提高拉曼检测的灵敏度，人们对SERS基底材料的选择和制备进行了大量的研究。然而，作为另一个决定探针优劣的重要因素，信号分子的选择和设计却并未引起人们足够的重视。新颖的信号分子的提出通常需要经过合理的设计，仔细的筛选和***的表征，相较于选择“现成”的SERS探针而言则无疑显得过于繁琐，从而造成了现如今关于信号分子设计的工作少之又少。但是在复杂的研究体系当中，SERS探针分子的随意选用却可能会成为研究进一步发展的障碍，因为干扰分子或检测分子与传统的SERS信号分子极易发生光谱重叠的现象，这将会严重影响结果的精确性。随着多目标同时检测概念的提出，这一困扰甚至会延伸至各类SERS探针分子之间，这时传统信号分子选择的困难性将会进一步被放大。面对如此困境，人们迫切需要大量相互无重叠的新颖信号分子用于复杂体系的抗干扰、多目标分析检测。
炔基的拉曼特征峰在2120cm-1附近，在这一光谱区域细胞内常见的干扰物质是没有拉曼响应的，所以近些年在不少研究中人们将炔烃标记的生物代谢分子，如DNA、RNA、蛋白质、脂类等用于生物标记成像并取得了不错的效果；此外，炔基的拉曼位移和强度会因为与之相连的取代基的不同而发生明显偏移，甚至仅仅是将炔基的碳原子12C更换为它的同位素13C，拉曼位移就会产生100个波数的偏移，这两点预示了炔烃的衍生物极其适合抗干扰的多目标分析检测。但是，炔烃类信号分子的广泛应用却依然被自发拉曼散射信号强度很弱的问题严重限制，为了检测到极度微弱的炔基拉曼散射信号，人们不得不提高曝光时间或使用高强度激光，由此却又可能引起样品的损伤；近些年也有人尝试使用受激拉曼散射(Stimulated Raman scattering,SRS)技术进行相关研究，但昂贵的仪器价格让人们望而生畏的同时，其在多目标同时成像上的捉襟见肘也使其无法成为生物成像领域的通用仪器。结合近些年研究较多的SERS技术，它提供106～1012倍的信号增强，理论上将是一个改善炔基自发拉曼散射信号较弱的理想途径。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新型炔烃编码、生物靶向的表面增强拉曼散射(Surface-enhanced Raman scattering,SERS)活性纳米标记探针的制备方法，更重要的是，发展一种亮度高、多色输出、光学稳定且无干扰的新型SERS成像技术。该技术(包括探针产品)可在常规的商品化共聚焦拉曼谱仪上实现广泛的生物成像应用；同时，亦能用于以带通滤光片为分光器件，以光电倍增管(PMT)或雪崩光电二极管(APD)为检测器件的无光栅超快拉曼成像仪的设计与开发。
本发明提供的技术方案如下：
一种无光学干扰的拉曼标记探针的制备方法，包括以下步骤：将拉曼散射峰位在1800-2400cm-1波数区、带宽为1-2nm的窄带单峰信号分子通过Au-S键或Ag-S键自组装到增强基底的表面，然后采用透光亲水的壳体材料进行探针封装，即得到无光学干扰的拉曼标记探针；
所述的窄带单峰拉曼信号分子，具有通式I所示的结构：
其中，R1、R2、R3、R4为-NO2、-CH3或H，R5为H或-Si(CH3)3、-C2H5、-CH2CH2CH2OH、苯基或炔基；
所述的增强基底为粒径30-60nm的纳米粒子，所述的纳米粒子为(i)纳米金、(ii)纳米银或(iii)以纳米金或纳米银为壳的核壳结构纳米粒子；
所述的壳体材料为生物分子、聚合物、二氧化硅中的一种。
进一步地，R5为H的窄带单峰信号分子自组装到增强基底的表面后，用巯基羧酸对窄带单峰信号分子与增强基底的连接方式进行优化，接着采用透光亲水的壳体材料进行探针封装。
再进一步地，将探针封装后在壳体材料上嫁接生物靶向分子。
所述的窄带单峰拉曼信号分子为
所述的巯基羧酸为巯基乙酸、巯基丙酸、巯基丁酸中的一种或几种；所述的生物靶向分子为抗体、配体、多肽中的一种。
所述的抗体为促黄体激素释放激素，所述的配体为叶酸，所述的多肽为细胞穿透肽或核定位肽。
所述的生物靶向分子通过与EDC-NHS或戊二醛交联反应嫁接到探针表面。
一种无光学干扰的拉曼标记探针，由所述的无光学干扰的拉曼标记探针的制备方法制备得到。
所述的无光学干扰的拉曼标记探针在生物成像中的应用。
一种高灵敏超快拉曼成像仪，以所述的无光学干扰的拉曼标记探针为检测对象，在常规的光学显微镜基础上，以激光作为激发光源，配置高精度的快速扫描样品台，以超窄带带通滤光片提取探针的窄带单峰超强拉曼散射信号，以超灵敏的雪崩光电二极管为检测元件，通过样品台的二维扫描逐点采集探针的光子信号并作伪彩色处理。
此快速、灵敏和高空间分辨拉曼成像仪器以带通滤光片的波长标定色差，以光子信号的强度标定色度。
将所述的无光学干扰的拉曼标记探针对多个靶标进行标记，使用带二维自动扫描平台的拉曼光谱仪，快速地逐点采集光谱，进而对探针窄带单峰的超强拉曼散射信号作伪彩色图像处理，其散射峰的位移用于标定色差，散射峰的强度用于标定色度；所述快速采集光谱的条件为：曝光时间为1s，波长范围为Δ50cm-1；所述的靶标为细胞、组织或生物体。
本发明的原理为：
1.以对巯基苯乙炔为主体结构，通过替换炔基末端取代基团来改变炔基拉曼散射信号的位移，可根据密度泛函理论计算对炔烃类信号分子的结构-拉曼位移的关系进行一系列预测及理论研究，筛选出不同窄带单峰的分子结构。
2.合成不同形状、尺寸的金、银及其核壳结构纳米粒子，筛选出高增强活性的纳米粒子作为SERS增强基底，将炔烃信号分子通过Au-S或Ag-S键自组装单层于增强基底表面。
3.信号分子的自组装过程中可使用巯基乙酸等对信号分子与增强基底的连接方式进行优化，以消除由于空间取向不同导致的干扰峰，保证在1800～2400cm-1光谱区间内的窄带单峰输出模式。
4.以生物大分子、聚合物或二氧化硅料作为保护壳层，封装自组装有信号分子贵金属纳米粒子等探针母体，其外表面提供富含反应活性基团利于后续生物功能分子的嫁接。
5.以配体(如叶酸)、抗体(如促黄体激素释放激素)、多肽类(如细胞穿透肽、核定位肽等)等生物功能分子通过EDC-NHS或戊二醛等交联反应至探针表面，即可得具有特异生物靶向功能的SERS成像探针。
相对于现有SERS成像探针，本发明具有以下优点和有益效果：
1.该探针在1800-2400cm-1光谱区发射窄带(1-2nm)单峰的超强拉曼散射信号，能够有效避免细胞内源物质在低波数区域(<1800cm-1)的本征拉曼信号和荧光信号的干扰；该探针所使用信号分子的炔基拉曼位移可以通过改变对巯基苯乙炔主体结构中炔基末端的取代基团来调节，在多色成像应用中能有效避免标记信号之间互相重叠的问题；该探针信号强度大、光学稳定，使用常规拉曼光谱仪能有效缩短生物成像时间，其窄带单峰的输出模式可用于无光栅超快拉曼成像仪的设计与开发。
2.该探针拉曼散射的光学响应强、窄带单峰发射、无光学背景干扰，在多组分同时标记的生物成像领域意义重大。该技术可延伸至以带通滤光片为分光器件，以光电倍增管(PMT)或雪崩光电二极管(APD)为检测器件的无光栅超快拉曼成像仪的设计与开发，克服了拉曼成像逐点扫描、成像慢的技术瓶颈，将填补光学成像类仪器的市场空白。
附图说明
图1为巯基乙酸对信号分子与增强基底的连接方式进行改善的原理示意图。
图2为B1、B2、B3三种信号分子的拉曼位移光谱对比图。
图3为巯基乙酸对信号分子与增强基底的连接方式进行改善的光谱强度对比图。
图4为B3信号分子制备的SERS探针与花粉细胞内源物质在不同波数处的细胞成像对比图；其中，图4(A)为1580cm-1的细胞成像图，图4(B)为2212cm-1的细胞成像图。
图5为B1、B2、B3三种信号分子制备的SERS探针的贴壁细胞成像图。
图6为B1、B2、B3三种SERS探针在同一细胞中的光谱图。
图7为B1、B2、B3三种SERS探针在同一细胞中的细胞成像图。
具体实施方式
下面结合实例对本发明作进一步详细的描述，并以实例证明本方法的优势，但本方法的实施方式不限于此。
实施例1：窄带单峰拉曼信号分子的制备
炔烃类窄带单峰拉曼信号分子设计：本发明以对巯基苯乙炔为主体结构，通过替换炔基末端取代基团来改变炔基拉曼散射信号的位移，并利用密度泛函理论计算对信号分子的结构-拉曼位移的关系进行一系列预测及理论研究，得到了下表中的化学结构及其拉曼位移，证明了当在对巯基苯乙炔的炔基末端改变基团时能有效的调节窄带单峰信号分子拉曼信号的位移。
信号分子光谱优化：以一定尺寸的银包金纳米粒子为增强基底，使用532nm对对巯基苯乙炔分子的拉曼光谱进行优化，发现当金纳米粒子加入对巯基苯乙炔时，会在1972cm-1和2105cm-1处分别产生一个拉曼信号，经过密度泛函理论计算证实这是由于信号分子与增强基底的空间取向不同导致的，经过研究发现加入巯基乙酸时能够对信号分子与增强基底的连接方式进行改善，结果示意图如图1所示。
信号分子SERS光谱：根据信号分子光谱优化结果，选择三种窄带单峰信号分子B1、B2、B3为例，得到的实际SERS光谱如图2所示，三者的炔基拉曼位移分别位于2105cm-1、2158cm-1、2212cm-1处，能有效地避免相互之间的干扰。
实施例2
(1)AuNPs-标记分子：取10mL银包金纳米溶胶三份，分别向其中加入10μL浓度为1mM的窄带单峰信号分子B1、B2、B3的四氢呋喃溶液。
(2)巯基乙酸优化：上述溶液静置3h后加入100μL浓度为10mmol/L的巯基乙酸的水溶液。(此步骤仅在信号分子的炔基末端没有取代时需要，譬如以B1为信号分子)。
(3)保护壳层：再静置3h后继续加入1mL浓度为0.1wt‰的多环芳烃(PAH)水溶液。
(4)生物功能分子连接：12h后同时加入10μL浓度为10mM的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)水溶液和20μL浓度为1mM的N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)水溶液，静置活化羧基，1h后分别向三份溶液中加入20μL浓度为1mM的叶酸(FA)、促黄体激素释放激素(LHRH)、细胞穿透肽(CALNNR8)溶液。
(5)静置一夜后离心收集并重悬至粒子浓度约为1012个/mL，放入冰箱中保存备用。其中FA和LHRH修饰的SERS探针具有细胞膜靶向能力，CALNNR8修饰的SERS探针具有内质网靶向能力。
以B1为信号分子，使用不同量的巯基乙酸进行优化：取三份10mL的B1-AuNPs纳米粒子，向其中分别加入0、1、10、100μL浓度为10mmol/L的巯基乙酸的水溶液，静置三小时后测得的SERS光谱，如图3所示。
实施例3
取10mL粒子浓度约为1012个/mL的银包金纳米溶胶，向其中加入20μL浓度为1mM的B3信号分子，静置3h后继续加入1mL浓度为0.1wt‰的多环芳烃(PAH)水溶液，继续静置12h后制得SERS探针。
取10mL均匀分散有百合花粉的水溶液，并向其中加入1mLSERS探针，在摇床上混匀后将花粉溶液冻干以除去水分。
配制高浓度的蔗糖溶液并滴加少量至载玻片上，晾干后表层形成均匀透明的蔗糖层。取少量花粉颗粒洒落在蔗糖层上并轻轻吹气以施加压力，使花粉牢固地粘附在蔗糖表面后可进行拉曼成像实验。
以花粉中的类黄酮类物质在1580cm-1的拉曼信号为干扰峰进行验证实验。可以发现，炔基信号分子在1580cm-1低波数区域的拉曼信号很容易与花粉中的干扰峰发生光谱重叠现象(见图4(A))，这对最终结果会产生极大干扰，而使用2212cm-1的标记峰则能有效避免此类问题(见图4(B))。证实了炔基SERS探针在细胞成像研究中对细胞内源物质的抗干扰能力。
实施例4
取10mL粒子浓度约为1012个/mL的银包金纳米溶胶三份，分别向其中加入20μL浓度为1mM的窄带单峰信号分子B1、B2、B3的四氢呋喃溶液。静置3h后继续加入1mL浓度为0.1wt‰的巯基聚乙二醇(HS-PEG)水溶液，静置6h后即可制得相应的SERS探针。
在一次性培养皿(35mm)中放入直径为20mm的玻璃盖玻片(均经过高温消毒)，取细胞传代的最后一步稀释后分散均匀的细胞悬浮液(300～500μL)均匀滴加至盖玻片表面。在培养箱中静置2-4h后，细胞基本贴壁，补加2.5mL新鲜细胞培养液，等待4h。
取三份上述方法准备的贴壁细胞，并向其中分别加入三种SERS探针，在培养箱中继续共培养12h后取出，使用PBS缓冲溶液轻轻冲洗盖玻片，清除吸附于细胞膜表面而未进入细胞中的SERS探针，之后可进行成像实验。
如图5所示，三种SERS探针均在细胞内呈现出了良好的分布状况，并且各个通道之间完全无影响，证明了三种炔烃SERS探针相互之间不会发生干扰。
实施例5
取10mL粒子浓度约为1012个/mL的银包金纳米溶胶三份，分别向其中加入20μL浓度为1mM的窄带单峰信号分子B1、B2、B3的四氢呋喃溶液。静置3h后继续加入1mL浓度为0.1wt‰的聚丙烯胺水溶液。12h后同时加入10μL浓度为10mM的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)水溶液和20μL浓度为1mM的N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)水溶液。静置活化羧基1h后分别向三份探针中加入20μL浓度为1mM的叶酸(FA)、促黄体激素释放激素(LHRH)、细胞穿透肽(CALNNR8)溶液。静置一夜后离心收集即可制得三种相应的SERS探针。
在一次性培养皿(35mm)中放入直径为20mm的玻璃盖玻片(均经过高温消毒)，取细胞传代最后一步稀释后分散均匀的细胞悬浮液(300～500μL)均匀滴加至盖玻片表面。在培养箱中静置2-4h后，细胞基本贴壁，补加2.5mL新鲜细胞培养液，等待4h。
细胞完全贴壁后加入具有内质网靶向能力的SERS探针(B3-CLANNR8-NPs)200μL并轻轻混匀。在培养箱中继续共培养12h后取出，使用PBS缓冲溶液轻轻冲洗盖玻片，清除吸附于细胞膜表面而未进入细胞中的内质网靶向探针，然后补加3mL新鲜培养基至小培养皿中，并加入两种细胞膜靶向SERS探针(B1-FA-NPs和OPE1-LHRH-NPs)各200μL。继续培养2-4h后可进行SERS成像研究。
图6是在细胞中测得的较为典型的SERS光谱，可以发现三种标记分子的信号能够非常清楚地区分开，并且完全不会被细胞内源物质所干扰。图7是三种探针在同一细胞中经过检测实际得到的成像结果，三种SERS探针均按照生物功能分子的作用实现了特异性靶向结果。

Claims (10)

1.一种无光学干扰的拉曼标记探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将拉曼散射峰位在1800-2400cm-1波数区、带宽为1-2nm的窄带单峰信号分子通过Au-S键或Ag-S键自组装到增强基底的表面，然后采用透光亲水的壳体材料进行探针封装，即得到无光学干扰的拉曼标记探针；
所述的窄带单峰拉曼信号分子，具有通式I所示的结构：
其中，R1、R2、R3、R4为-NO2、-CH3或H，R5为H或-Si(CH3)3、-C2H5、-CH2CH2CH2OH、苯基或炔基；
所述的增强基底为粒径30-60nm的纳米粒子，所述的纳米粒子为(i)纳米金、(ii)纳米银或(iii)以纳米金或纳米银为壳的核壳结构纳米粒子；
所述的壳体材料为生物分子、聚合物、二氧化硅中的一种。
2.根据权利要求1所述的无光学干扰的拉曼标记探针的制备方法，其特征在于：R5为H的窄带单峰信号分子自组装到增强基底的表面后，用巯基羧酸对窄带单峰信号分子与增强基底的连接方式进行优化，接着采用透光亲水的壳体材料进行探针封装。
3.根据权利要求1或2所述的无光学干扰的拉曼标记探针的制备方法，其特征在于：将探针封装后在壳体材料上嫁接生物靶向分子。
4.根据权利要求3所述的无光学干扰的拉曼标记探针的制备方法，其特征在于：所述的窄带单峰拉曼信号分子为
5.根据权利要求3所述的无光学干扰的拉曼标记探针的制备方法，其特征在于：所述的巯基羧酸为巯基乙酸、巯基丙酸、巯基丁酸中的一种或几种；所述的生物靶向分子为抗体、配体、多肽中的一种。
6.根据权利要求5所述的无光学干扰的拉曼标记探针的制备方法，其特征在于：所述的抗体为促黄体激素释放激素，所述的配体为叶酸，所述的多肽为细胞穿透肽或核定位肽。
7.根据权利要求5所述的无光学干扰的拉曼标记探针的制备方法，其特征在于：所述的生物靶向分子通过与EDC-NHS或戊二醛交联反应嫁接到探针表面。
8.一种无光学干扰的拉曼标记探针，其特征在于：由权利要求1-7任一项所述的无光学干扰的拉曼标记探针的制备方法制备得到。
9.权利要求8所述的无光学干扰的拉曼标记探针在生物成像中的应用。
10.一种高灵敏超快拉曼成像仪，其特征在于：以权利要求8所述的无光学干扰的拉曼标记探针为检测对象，在常规的光学显微镜基础上，以激光作为激发光源，配置高精度的快速扫描样品台，以超窄带带通滤光片提取探针的窄带单峰超强拉曼散射信号，以超灵敏的雪崩光电二极管为检测元件，通过样品台的二维扫描逐点采集探针的光子信号并作伪彩色处理。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107561054A (zh) * 2017-06-02 2018-01-09 南京大学 金银双金属三维有序大孔结构作为sers基底用于心肾综合征多种蛋白质同时检测
CN108037108A (zh) * 2017-12-05 2018-05-15 武汉大学 一种新型的测定实际样品中硫氰酸根离子含量的方法
CN108562569A (zh) * 2018-06-04 2018-09-21 中国人民解放军第二军医大学 一种基于表面增强拉曼光谱探针的循环肿瘤细胞检测方法
CN114107435A (zh) * 2021-11-30 2022-03-01 广东省人民医院 一种用于免疫治疗实时监测的可激活光声-荧光双模探针及应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1162993A (zh) * 1994-08-20 1997-10-22 雷尼肖公司 ***物的检测器
US20070134733A1 (en) * 2003-07-10 2007-06-14 Parallax Biosystems, Inc. Raman signature probes and their use in the detection and imaging of molecular processes and structures
US20080202195A1 (en) * 2006-08-18 2008-08-28 Samsung Electronics Co., Ltd. GOLD NANOPARTICLE-BASED pH SENSOR IN HIGHLY ALKALINE REGION BY SURFACE-ENHANCED RAMAN SCATTERING STUDY
CN102323312A (zh) * 2011-09-21 2012-01-18 福州大学 便携式快速、可视检测铜离子含量的检测方法及其装置
CN103454268A (zh) * 2013-04-19 2013-12-18 南京工业大学 一种基于点击反应的还原糖定量检测方法
CN103674925A (zh) * 2012-09-14 2014-03-26 北京大学 4-巯基苯硼酸修饰的金纳米粒子及用其检测细胞表面糖标记的方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1162993A (zh) * 1994-08-20 1997-10-22 雷尼肖公司 ***物的检测器
US20070134733A1 (en) * 2003-07-10 2007-06-14 Parallax Biosystems, Inc. Raman signature probes and their use in the detection and imaging of molecular processes and structures
US20080202195A1 (en) * 2006-08-18 2008-08-28 Samsung Electronics Co., Ltd. GOLD NANOPARTICLE-BASED pH SENSOR IN HIGHLY ALKALINE REGION BY SURFACE-ENHANCED RAMAN SCATTERING STUDY
CN102323312A (zh) * 2011-09-21 2012-01-18 福州大学 便携式快速、可视检测铜离子含量的检测方法及其装置
CN103674925A (zh) * 2012-09-14 2014-03-26 北京大学 4-巯基苯硼酸修饰的金纳米粒子及用其检测细胞表面糖标记的方法
CN103454268A (zh) * 2013-04-19 2013-12-18 南京工业大学 一种基于点击反应的还原糖定量检测方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GUOHUA YANG ET AL.: "Arenethiols Form Ordered and Incommensurate Self-Assembled Monolayers on Au(111) Surfaces", 《JOURNAL OF PHYSICAL CHEMISTRY B》 *
HENRRY M.OSORIO ET AL.: "Preparation of nascent molecular electronic devices from gold nanoparticles and terminal alkyne functionalised monolayer films", 《JOURNAL OF MATERIALS CHEMISTRY C》 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107561054A (zh) * 2017-06-02 2018-01-09 南京大学 金银双金属三维有序大孔结构作为sers基底用于心肾综合征多种蛋白质同时检测
CN107561054B (zh) * 2017-06-02 2020-07-17 南京大学 金银双金属三维有序大孔结构作为sers基底用于心肾综合征多种蛋白质同时检测
CN108037108A (zh) * 2017-12-05 2018-05-15 武汉大学 一种新型的测定实际样品中硫氰酸根离子含量的方法
CN108037108B (zh) * 2017-12-05 2019-12-10 武汉大学 一种测定实际样品中硫氰酸根离子含量的方法
CN108562569A (zh) * 2018-06-04 2018-09-21 中国人民解放军第二军医大学 一种基于表面增强拉曼光谱探针的循环肿瘤细胞检测方法
CN108562569B (zh) * 2018-06-04 2021-01-01 中国人民解放军第二军医大学 一种基于表面增强拉曼光谱探针的循环肿瘤细胞检测方法
CN114107435A (zh) * 2021-11-30 2022-03-01 广东省人民医院 一种用于免疫治疗实时监测的可激活光声-荧光双模探针及应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN105823770B (zh) 2018-07-27

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