CN105816904B

CN105816904B - 一种医疗用抗菌纱布

Info

Publication number: CN105816904B
Application number: CN201610407321.2A
Authority: CN
Inventors: 顾银凤
Original assignee: Shaoxing Yibon Medical Co Ltd
Current assignee: Shaoxing Yibon Medical Co., Ltd.
Priority date: 2016-06-11
Filing date: 2016-06-11
Publication date: 2018-11-16
Anticipated expiration: 2036-06-11
Also published as: CN105816904A

Abstract

本发明公开了一种医疗用抗菌纱布，该纱布是在可溶性纱布坯布表面涂覆有抗菌多肽层制备而成。所述的多肽层具有较好的杀菌效果。所述的医用纱布具有在较短的时间内杀死病菌的效果。本产品成本低廉，制备简单。

Description

一种医疗用抗菌纱布

技术领域

本发明属于一次性卫生用品领域，尤其涉及医疗用抗菌纱布。

背景技术

纱布是由经线和纬线编织成的稀疏而轻薄的丝织品，纱布是医院大量使用的消耗品，主要用来包扎伤口，纱布通常由棉纱制成，虽然成本较低，但纱布本身容易滋生病菌，增加伤口感染的几率。

目前，在临床上使用的敷料，如医用纱布，一般有以下几种：①普通型无菌纱布，常用作为包扎材料；②抗粘型纱布，由于经过特殊处理，可防止伤口粘连，但无杀菌作用；③抗菌型纱布，因添加了抗生素，有一定的杀菌作用，但对一些大面积的伤口，杀菌作用差，并因长期使用，易产生抗药菌株。因此，临床上尚无有效的杀菌纱布。

抗菌肽(AMPs)是一类广泛存在于自然界生物体中的小肽类物质，它是机体先天性免疫***的重要组成部分。由于抗菌肽对细菌、真菌、寄生虫、病毒、肿瘤细胞等有着广泛的抑制作用，并且随着越来越多的抗生素耐药微生物的出现，使得抗菌肽在医药行业和食品添加剂等领域有良好的应用前景。虽然现有技术中已经有了将抗菌肽制备为涂层涂覆在医疗产品中，但是现有技术的抗菌肽其杀菌广谱性以及时效性还有待于提高。

发明内容

本发明克服了现有技术的缺陷，提供了一种具有光谱杀菌特性以及速效杀菌对抗菌肽，以及涂覆有该抗菌肽的医用纱布。

本发明提供一种医用纱布，其特征在于:在可溶性纱布坯布表面涂覆有抗菌多肽层。

本发明的上述杀菌多肽层厚度为5～30um。

本发明另外提供一种含有多肽层的纱布制备方法，将可溶性纱布坯布浸入聚乙烯亚胺的水溶液，该水溶液中聚乙烯亚胺的浓度为5-10mg/ml，含0.14mol/LNaCl中往复振荡浸泡40分钟，会在坯布的内外表面形成聚合物底层；然后置于100mL质量百分比浓度为0.01％的4，4’-二苯基二硫醇的甲醇溶液中反应5小时，反应后的可溶性纱布坯布经甲醇充分浸洗后真空干燥，与抗菌肽分别在辣根过氧化物酶和过氧化氢作用下反应，得到表面键合抗菌多肽的纱布。当纱布与伤口接触湿润后，细菌接触纱布后，芯片层表面的二硫键断裂，还原释放多肽，发挥杀菌作用。

本发明另外提供一种抗菌肽的制备方法，所述的抗菌肽SEQ ID NO：1～22任一所示，为申请人通过获得的人参基因组序列，寻找其中具有潜在编码功能的小开放阅读框，将这些小开放阅读框分别翻译出对应的氨基酸序列，利用三维结构分析软件从中筛选抗菌肽，根据预测筛选的抗菌肽序列，利用固相合成法合成其中的部分多肽，并且使C端酰胺化，N端不含有蛋氨酸，制备抗菌肽，进行相应的功能验证，筛选得到了22个抗菌肽。

本发明的有益效果在于：本方法制备的带有抗菌肽涂层的纱布，实现消毒杀菌、止血止痛、促进伤口愈合等功能，较之于传统纱布生产工艺简单、药性温和无刺激、对人体危害小，患者接受度高，市场应用价值巨大。

具体实施方式

实施例1抗菌多肽的筛选获得

通过前期筛选获得的人参基因组序列，寻找其中具有潜在编码功能的小开放阅读框，将这些小开放阅读框分别翻译出对应的氨基酸序列，利用三维结构分析软件从中筛选抗菌肽，根据预测筛选的抗菌肽序列，利用固相合成法合成其中的部分多肽，并且使C端酰胺化，N端不含有蛋氨酸，制备抗菌肽，进行相应的功能验证，筛选得到了22个抗菌肽，分别命名为WSJ-1～22。其序列分别如SEQ ID NO：1-22所示。

实施例2抗菌肽的效果验证

将WSJ-1多肽用蒸馏水溶解成浓度为2mg/ml，采用琼脂糖扩散法进行抗菌活性检测。琼脂糖扩散法中使用的菌株为沙眼衣原体、金黄葡萄球菌、淋病奈瑟菌、白带虫、白色念珠菌。菌株复苏后，接种于对应的培养基过夜培养后，分别取50微升菌液涂布于固体培养基。静置带菌液吸收后，分别加入浓度为2mg/ml的多肽溶液10微升。37℃培养16小时后，观察抑菌圈的有无和大小。同时观察抑菌圈一周内是否有变化，判断抑菌时间长短。结果见表1。

表1多肽抗菌活性分析结果

“+”表示抑菌圈的大小大于0.5cm；“++”表示抑菌圈的大小大于1cm；“+++”表示抑菌圈的大小大于1.5cm；“++++”表示抑菌圈的大小大于2cm。

从以上结果可以看出，本发明的多肽具有较好的杀灭伤口常见病菌的效果。

实施例3抗菌纱布的制备

将可溶性纱布坯布浸入聚乙烯亚胺的水溶液，该水溶液中聚乙烯亚胺的浓度为10mg/ml，含0.14mol/LNaCl中往复振荡浸泡40分钟，会在可溶性纱布坯布的内外表面形成聚合物底层；然后置于100mL质量百分比浓度为0.01％的4，4’-二苯基二硫醇的甲醇溶液中反应5小时，反应后的可溶性纱布坯布经甲醇充分浸洗后真空干燥，与SeqIDNO:1的抗菌肽分别在辣根过氧化物酶和过氧化氢作用下反应，得到表面键合抗菌多肽的可溶性纱布坯布。

将SeqIDNO:2-22任一的抗菌肽按照序列1的纱布制备方法，制备得到对应的涂覆有多肽层的纱布。

实施例4抗菌肽纱布的效果验证

为了验证本发明的抑菌效果，本发明卫生巾芯片样品经第三方权威检测机构测定，测试过程及结果如下：

检测方法：按《消毒技术规范》(2002年版)进行试验，作用时间为2min、5min、10min、20min，试验温度为19～21℃。阳性对照组平均菌落数，金黄葡萄球菌7*10⁵cfu/ml；淋病奈瑟菌5*10⁵cfu/ml；白色念珠菌7*10⁵cfu/ml；链球菌6*10⁵cfu/ml；

测试结论：测试样品作用2min、5min、10min，3种时间内对4种病菌菌的抑菌率均为100％，说明本发明的纱布具有极好的杀菌效果，并且杀菌效果迅速。

实施例5抗菌肽纱布的小鼠实验验证

选试验大鼠80只，随机分组，试验组和对照组均为40例，试验组和对照组大鼠去毛后对背部2*2cm的皮肤进行人工去皮，然后试验组用本发明的纱布进行包扎，对照组使用同样面积的常规纱布进行包扎，不给予抗生素治疗。试验三天后观察创面的愈合情况。对愈合情况的评价，根据外科常用的评价方法：甲级愈合，伤口无红肿愈合良好；乙级愈合，伤口周围有红肿或炎性硬结，但无化脓；丙级愈合，伤口已化脓感染。分别统计两组动物甲、乙、丙三级愈合的病例数。实验结果表明：实验组的40例大鼠表皮符合甲级的愈合标准；对照组大鼠有32例出现了化脓现象，有8例伤口红肿比较严重。从以上结果可以看出，本发明的涂覆有抗菌肽的纱布具有较好的伤口杀菌处理效果。

上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

序列表

〈110〉顾银凤

〈120〉一种医疗用抗菌纱布

〈210〉1

〈211〉18

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-1

CGCCQVCKMWNYFSVLHS

〈210〉2

〈211〉17

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-2

CTRDASGVKTCEAMQGM

〈210〉3

〈211〉16

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-3

SPVWPRIRPSSPSRSI

〈210〉4

〈211〉18

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-4

VPTPDIWTWEYRQEQMKF

〈210〉5

〈211〉17

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-5

IKTGSMGPHEKWNCNNA

〈210〉6

〈211〉16

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-6

KWNRRTTYLWMTFGCH

〈210〉7

〈211〉18

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-7

GQFHDPHTIVQHTYSPLK

〈210〉8

〈211〉17

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-8

ERRHGLTTTDTKHSGWG

〈210〉9

〈211〉16

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-9

FRDRLMTLSESWDNDH

〈210〉10

〈211〉18

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-10

PASYDNDGSWWRIGVCGW

〈210〉11

〈211〉17

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-11

DNVRLTYLPHTYITTQP

〈210〉12

〈211〉16

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-12

DLQGIPDWSPDNIWKA

〈210〉13

〈211〉18

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-13

YSYSRPWHMHSWSCPGSE

〈210〉14

〈211〉17

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-14

LVMPSMVGRTARRPDRE

〈210〉15

〈211〉16

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-15

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〈210〉16

〈211〉18

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-16

SHPEAWPKQTCHKGLHPH

〈210〉17

〈211〉17

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-17

YQGSFPGGNGNEACTTK

〈210〉18

〈211〉16

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-18

FHRLIAYVRSFPLDNF

〈210〉19

〈211〉18

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-19

KPEIRSSRQCGRLKIHVW

〈210〉20

〈211〉17

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-20

GIAGSTFRVRKRMATGH

〈210〉21

〈211〉16

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-21

SPRHSQKSNACPREAI

〈210〉22

〈211〉18

〈212〉PRT

〈400〉WSJ-22

FEEPYPTRDVPSDGPLWM

Claims

1.一种医疗用抗菌纱布的制备方法，将可溶性纱布坯布浸入聚乙烯亚胺的水溶液，该水溶液中聚乙烯亚胺的浓度为5-10mg/ml，同时该水溶液中还含有0.14mol/L的NaCl，将可溶性纱布坯布在该水溶液中往复振荡浸泡40分钟，会在可溶性纱布坯布的内外表面形成聚合物底层；然后置于100mL质量百分比浓度为0.01％的4，4’-二苯基二硫醇的甲醇溶液中反应5小时，反应后的可溶性纱布坯布经甲醇充分浸洗后真空干燥，与SEQ ID NO：1-22任一所示抗菌肽分别在辣根过氧化物酶和过氧化氢作用下反应，得到表面键合抗菌多肽的可溶性纱布。