CN105726516B - 一种促进动物伤口愈合的涂膜剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种促进动物伤口愈合的涂膜剂，它由如下物料组成：姜黄素28～32克、二甲基亚砜35～45ml、聚乙烯吡咯烷酮K‑3018～22克、乙基纤维素8～12克、聚乙二醇‑40055～65毫升，乙醇定容至1000毫升。本发明还公开了上述涂膜剂的制备方法。本发明通过筛选配比确定了该涂膜剂成分的最佳组合，按一定比例和工艺配制成涂膜剂，制备的透皮剂具备良好的成膜性、能够缓慢释放药物、疗效持久、应激小、且使用安全。本发明配方及制作方法独特，治疗效果显著。

Description

一种促进动物伤口愈合的涂膜剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种促进动物伤口愈合的姜黄素涂膜剂及其制备方法，属于动物药剂技术领域。
背景技术
创伤是动物体表的病理性损伤，有外伤、烧伤、疖、疮、痘、溃疡等多种表现。创伤的愈合对动物生理机能的恢复有着积极的意义。创伤愈合是涉及细胞的炎性反应、组织修复及细胞因子分泌与调控的复杂过程，许多中药及其成分都可影响到这一过程，如具有生肌、祛瘀、抗菌消炎等种类的中药都有促进伤口愈合的功效。同时，不同的制剂剂型对动物伤口愈合质量非常重要，尤其是外用剂型非常适合表面术后创伤的愈合治疗。这些剂型主要有膏剂、散剂、凝胶剂、巴布剂、膜剂及涂膜剂等，但涂膜剂尤其适合动物的创伤愈合治疗。涂膜剂是由主药、促透剂、成膜材料及基质通过筛选制成，使用后可短时自行成膜，并不断向创伤部位释放药物，具有长效及不需外加敷料等优点。但一个好的涂膜剂需要解决主药的溶解，促透剂筛选、基质组合及稳定有效等关键问题。姜黄素是一种具有抗菌消炎及对术后伤口消炎具有较好疗效的中药提取物，但使用剂型多为膏剂、片剂、散剂、微乳，尚无涂膜剂研制的报道。本研究拟筛选能够有效促进姜黄素透皮的促透剂，确定主药、促透剂及基质最合适的比例及制备方法，开展对皮肤刺激性及稳定性试验，评价该制剂抗菌消炎、促进术后创口愈合的效果，测定透皮给药后姜黄素的吸收分布特点，为制备疗效可靠、安全稳定的姜黄素涂膜剂提供依据。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种使用方便、刺激性小、疗效可靠的、安全的能够有效促进动物伤口愈合的涂膜剂。
本发明还要解决的技术问题是提供上述涂膜剂的制备方法。
本发明的解决方案是(1)首先找出有效稳定溶解姜黄素的办法；(2)然后以姜黄素为主药，发现能够有效地将其促进透过皮肤的促透剂；(3)找到既能够促进姜黄素透皮、又能够充当成膜材料的有效成分浓度；(4)通过不断地组合试验，总结出能够稳定保存、且无皮肤刺激性，促进伤口愈合效果好的涂膜剂的制备方法。因为该剂型可自行成膜，保护内层药物向皮内扩散，且可随时揭除，随时涂膜，这对伤口愈合的使用很方便。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：
一种促进动物伤口愈合的涂膜剂，其特征在于，它由如下物料组成：
姜黄素28～32克、二甲基亚砜35～45ml、聚乙烯吡咯烷酮K-30(PVP K-30)18～22克、乙基纤维素8～12克、聚乙二醇-40055～65毫升，乙醇定容至1000毫升。
上述促进动物伤口愈合的涂膜剂，优选由如下物料组成：
姜黄素30克、二甲基亚砜(DMSO)40ml、聚乙烯吡咯烷酮K-30(PVP K-30)20克、乙基纤维素(EC)10克、聚乙二醇-400(PEG-400)60毫升，乙醇定容至1000毫升。
上述促进动物伤口愈合的涂膜剂的制备方法，它包括以下步骤：
(1)A液制备：将配方量的聚乙烯吡咯烷酮K-30和乙基纤维素溶解于适量乙醇中，得到空白涂膜剂，即A液；
(2)B液制备：将配方量的二甲基亚砜和聚乙二醇-400加入配方量的姜黄素中，用适量乙醇溶解上述二甲基亚砜、聚乙二醇-400和姜黄素的混合物料，得到B液；
(3)将B液在搅拌条件下加入A液中，并继续加入乙醇定容至1000毫升，过滤制得姜黄素涂膜剂。
步骤(1)中，溶解的温度条件为50-65℃。
步骤(1)中，所述的适量乙醇，其用量没有特别限制，只要能够足够溶解聚乙烯吡咯烷酮K-30和乙基纤维素即可。
步骤(1)中，得到的A液置于50-65℃条件下保存。
步骤(2)中，将配方量的二甲基亚砜和聚乙二醇-400在搅拌条件下缓慢加入配方量的姜黄素中，搅拌速度为10～30r/min，加入速率0.1～0.2m3/min。
步骤(2)中，溶解的温度条件为50-65℃。
步骤(2)中，所述的适量乙醇，其用量没有特别限制，只要能够足够溶解二甲基亚砜、聚乙二醇-400和姜黄素的混合物料即可。
步骤(2)中，得到的B液置于50-65℃条件下保存。
步骤(3)中，将B液在搅拌条件下缓慢加入A液，搅拌速度为10～30r/min，加入速率0.1～0.2m3/min。
步骤(3)中，所述的乙醇预先预热至50-65℃。
上述涂膜剂在制备促进动物伤口愈合药物中的应用也在本发明的保护范围之内。
有益效果：本发明通过筛选配比确定了涂膜剂成分的最佳组合，按一定比例和工艺配制成涂膜剂，制备的透皮剂具备良好的成膜性、能够缓慢释放药物、疗效持久、应激小、且使用安全。本发明配方及制作方法独特，治疗效果显著。
附图说明
图1姜黄素涂膜剂中姜黄素的血药浓度－时间曲线；
图2不同浓度的姜黄素标准溶液对四种细菌的抑制作用，其中，a为犬金黄色葡萄球菌，b为鸽沙门氏菌，c为鸽大肠杆菌，d为犬绿脓杆菌；
图3兔线形伤口第1、3、5、7d愈合情况，其中，a为第1d致创不用药组，b为第1d涂膜剂治疗组，c为第3d致创不用药组，d为第3d涂膜剂治疗组，e为第5d致创不用药组，f为第5d涂膜剂治疗组，g为第7d致创不用药组，h为第7d涂膜剂治疗组；
图4姜黄素涂膜剂伤口愈合率(n＝6)；
图5伤后第7d伤口皮肤切片置于400倍光镜下观察结果，其中，a为第7d致创不用药组(400×)，b为第7d涂膜剂治疗组(400×)；
图6创口第14d皮肤切片置于400倍光镜下观察结果，其中，a为正常皮肤(400×)；b为致创不用药组(400×)；c为涂膜剂治疗组(400×)；d为阿米卡星治疗组(400×)。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例1：
一种促进动物伤口愈合的涂膜剂，由如下物料组成：
姜黄素30克、二甲基亚砜(DMSO)40ml、聚乙烯吡咯烷酮K-30(PVP K-30)20克、乙基纤维素(EC)10克、聚乙二醇-400(PEG-400)60毫升，乙醇定容至1000毫升。
制备方法：
(1)A液制备：准确称取配方量的聚乙烯吡咯烷酮K-30(PVP K-30)和乙基纤维素(EC)放入足够容量的烧杯中，加入约400ml无水乙醇，置于50-65℃水浴锅中加速溶解，得空白涂膜剂(即A液)，置水浴50-65℃保存。
(2)B液制备：准确称取配方量的姜黄素置于烧杯中，10～30r/min搅拌条件下缓慢加入二甲基亚砜(DMSO)、聚乙二醇-400(PEG-400)，加入速率控制在0.1～0.2m3/min，用约400ml无水乙醇于50-65℃温水浴溶解，至完全溶解，置水浴50-65℃保存。
(3)将溶有姜黄素的乙醇溶液(B液)趁热缓缓加入空白涂膜剂(A液)中，边加边缓慢搅拌(10～30r/min)，加入速率控制在0.1～0.2m3/min，并继续加入水浴50-65℃的乙醇溶液定容至1000毫升，过滤制得姜黄素涂膜剂。
实施例2：
一种促进动物伤口愈合的涂膜剂，由如下物料组成：
姜黄素28克、二甲基亚砜(DMSO)35ml、聚乙烯吡咯烷酮K-30(PVP K-30)18克、乙基纤维素(EC)8克、聚乙二醇-400(PEG-400)55毫升，乙醇定容至1000毫升。
制备方法同实施例1。
实施例3：
一种促进动物伤口愈合的涂膜剂，由如下物料组成：
姜黄素32克、二甲基亚砜(DMSO)45ml、聚乙烯吡咯烷酮K-30(PVP K-30)22克、乙基纤维素(EC)12克、聚乙二醇-400(PEG-400)65毫升，乙醇定容至1000毫升。
制备方法同实施例1。
实施例4：
本发明的一个重要特点是解决掉姜黄素溶解度差的问题，确定了在有效的药物浓度下选择姜黄素最适用量问题，并将姜黄素制成涂膜剂型，且涂膜剂中各组分有机组合。有关实验如下：
1、比较了不同浓度的薄荷醇和不同浓度的PEG-400对促伤口愈合药物在小鼠皮肤的体外透皮效果，筛选出了最好的促透剂及其浓度。
(1)分析方法的建立
波长测定:取适量姜黄素，用无水乙醇标准液配制成一定浓度的溶液，以乙醇标准液为对照，在100～900nm范围内扫描的紫外光谱，确定姜黄素最大吸收波长在425nm处，而在此波长下无水乙醇标准液无吸收值。因此，将425nm波长作为测定姜黄素含量的测定吸收波长。
(2)标准曲线的建立
准确称取0.01g的姜黄素，用乙醇标准液定容至100ml，即得100μg/ml的姜黄素贮备液。然后用乙醇标准液稀释成1、2、3、4、5ug/ml的姜黄素溶液，测定其吸光度，以吸光度为纵坐标(Y)，姜黄素含量为横坐标(X)，作线性方程，即得姜黄素含量测定标准曲线。
y＝0.1652x-0.0134(R2＝0.9996)
(3)精密度试验
称取0.01g姜黄素置于100ml容量瓶中，用乙醇标准液定容，然后将此溶液分别稀释为1、3、5、7μg/ml的姜黄素溶液，用紫外可见分光光度计测定其吸光度，并计算出日内和日间精密度。在1～7μg/mL浓度范围内，测定吸光度并计算浓度，得姜黄素的浓度的日内精密度范围分别为0.42％～2.15％，日间精密度范围为1.61％～3.81％，RSD(％)均在5％以下，表明日内精密度和日间精密度均符合要求。
(4)透皮试验
采用智能透皮试验仪进行姜黄素的体外透皮试验，接收液为15ml的乙醇标准液，释放液2ml，温度(37.0±0.5)℃，转速150r/min。分别在透皮开始后1、2、4、6、8、10、12h时从接收池取样5ml，以对照组为空白对照测定其吸光度，并补加同量的乙醇标准液。由测得的吸光度，代入姜黄素标准曲线计算每个时间点姜黄素透过的累积透过量(Q)。
Q＝(VCn+∑n-1i＝1CiVi)/A
式中：Q为单位时间累积透过量，V为接收池体积，A为透皮扩散面积，Cn为第n次取样时接收液的浓度，Ci为第i次取样时接收液的浓度，Vi为取样量。以单位时间累积透过量Q对时间t进行线性回归，所得方程的斜率(K)为渗透系数[单位为μg/(cm2.h)]，该系数可反应药物的透皮速率。
不同浓度的PEG-400对姜黄素均有较好的促透作用。其中，6v/v％的PEG-400的促透效果最佳12h的累积透过量为1957.03±22.46μg，显著高于其他各组。促透剂6％PEG-400的渗透系数显著高于其他各组，说明单一促透剂PEG-400对姜黄素的促透效果最佳。
实施例5：
以实施例1制得的涂膜剂进行以下实验：
1、涂膜剂的安全性试验
取健康新西兰大白兔8只，雌雄各4只，背部剪毛。将兔随机分为二组，第一组在左侧背部涂姜黄素涂膜剂，右侧背部涂空白涂膜剂。第二组用手术刀片人为在皮肤划出0.3～0.5cm切口，同法用药。在1h、24h、48h分别有无红斑、水肿、热、痛等发炎症状。同时观察精神状态、饮水、采食等是否正常。依据标准进行评判打分，并作统计分析。评分标准：红斑打分：皮肤表面无红斑得0分，基本可见得1分，明显红斑为2分，严重红斑得3分，***带痂皮得4分；水肿打分：目测未见得0分，勉强可见得1分，微凸皮肤得2分，***清晰得3分，明显水肿得4分。
2、姜黄素涂膜剂的污染菌检测
以常见污染菌绿脓杆菌及金黄色葡萄球菌为检测对象，制备胆盐乳糖培养基分别将3批姜黄素涂膜剂划线接种在培养基平板上培养。同时设绿脓杆菌及金黄色葡萄球菌接种胆盐乳糖培养基，分别置37℃温箱培养24～48小时，观察有无细菌生长。经对绿脓杆菌及金黄色葡萄球菌检测，各批次各时间段的姜黄素涂膜剂均未发现生长有这两种细菌，而阳性对照组均长出了细菌，说明该涂膜剂未受到这两种常见细菌的污染。
3、姜黄素涂膜剂的稳定性评价
制备三个批次的姜黄素涂膜剂(201402、201405、201408)至于室温保存(4℃-25℃)，在保存后的1、3、6、9及12个月，分别观察颜色、澄明度、姜黄素含量测定有无变化诸方面进行评判。结果3个批次的姜黄素涂膜剂12个月内均未发生在颜色、澄明度、药物含量方面有明显变化，表明姜黄素涂膜剂在12个月内性质是稳定的。
4、涂膜剂中姜黄素在大鼠体内的药动学测定
(1)动物给药与血样采集：试验前大鼠禁食不禁水12h。取3只大白鼠，摘眼球采血，置于含有肝素钠的抗凝管中，轻轻混匀后以3000r/min离心15min得空白血浆，-20℃保存备用。21只大鼠背部剃毛后喷涂姜黄素涂膜剂2ml，待其在皮肤表面成膜后，放入笼中，正常饲养。在给药后1、2、4、8、12、24、48h摘眼球采血约1ml，分离血浆，-20℃保存备用。
(2)色谱条件。色谱柱：Hedera ODS-2C18柱(150mm 2.1mm ID,dp 5m，Hanbon)；柱温：38℃；流动相：甲醇-0.1％甲酸水溶液(80∶20，V/V)；流速：0.3ml·min-1；进样量：10μL。
(3)质谱条件：离子检测方式：多重反应监测(MRM)；离子极性：负离子(negative)；离子化方式：气动辅助电喷雾离子化(ESI)；检测对象：姜黄素m/z 376.1→149.1，裂解电压-100V，碰撞能量-30eV；内标(格列美脲)m/z 489.0→364.1，裂解电压-90V，碰撞能量-25eV；干燥气流速：11L·min-1；雾化室压力：45psig；干燥气温度：350℃。
(4)血浆样品的处理：于2ml塑料离心管中精密加入血浆样品100μl，精密加入格列美脲内标溶液(10.09μg·ml-1)10μl，涡旋混匀，加入乙腈200μl，涡旋5min，，于15600r·min-1离心10min，吸取上清液200μl转移至自动进样器样品瓶中，进样量10μl，进行LC-MS/MS分析。
(5)血浆中姜黄素标准曲线的制备：取离心管数支，分别精密加入适量的姜黄素标准品溶液后以氮气流吹干，加入空白血浆100μl，涡旋混匀，配成含姜黄素浓度分别为5.450、10.90、21.80、54.50、109.0、218.0、545.0、1090ng·ml-1的标准含药血浆，按“血浆样品的处理”项下操作，制备标准曲线，并同时制备Double Blank样品和Blank样品(前者除不加内标外其余按“血浆样品的预处理”项下操作，后者不加标液，按“血浆样品的预处理”项下操作)，进行LC-MS/MS分析，记录色谱图，计算姜黄素峰面积As和内标格列美脲峰面积Ai的比值f(f＝As/Ai)。以峰面积比值f分别对姜黄素的血药浓度C作权重回归计算，以平均比值f对血药浓度C作权重回归计算，得典型回归方程f＝ax+b。
姜黄素：f＝0.0493×C+0.01159(权重系数w＝1/C2)r＝0.9982
(6)血浆中姜黄素的血药浓度：检测喷涂姜黄素涂膜剂后的大鼠血浆中姜黄素的含量，实测结果见表1。
表1 大鼠给药后血浆药物浓度(n＝4)
根据测得的姜黄素血药浓度，绘制曲线，见图1。
(7)药代动力学参数计算结果：大鼠给予复方涂膜剂后，计算所得药代动力学参数见表2。
表2 大鼠给药后药代动力学参数
注：T1/2末端消除半衰期，Tmax达峰时间，Cmax达峰浓度，AUC血药浓度—时间曲线下面积。
结果：制备的姜黄素涂膜剂在大鼠背部喷涂姜黄素涂膜剂后，在1～2h内血浆中的姜黄素含量迅速升高，达到峰值483.8±58.8ng/ml，在2h后姜黄素含量呈现下降趋势，到4h时下降至288.8±45.3ng/ml，随后又升高达到第二次峰值后缓慢降低。姜黄素血药浓度曲线表明姜黄素在大鼠体内可维持一定的血药浓度，虽然姜黄素在大鼠体内的代谢也较快，但与注射相比缓释作用还是强多了。通过检测涂膜剂中姜黄素在大鼠体内的血药浓度，分析得到涂膜剂中姜黄素的药动学参数，对于更好的理解姜黄素在大鼠体内的药动学特点，为姜黄素的临床应用提供了参考依据。
5、姜黄素涂膜剂促进动物手术创口愈合效果观察
(1)抑菌试验：将犬金黄色葡萄球菌、鸽大肠杆菌、鸽沙门氏菌和犬绿脓杆菌均采用琼脂培养基培养后分别于最适温度活化1～2h，再接入新鲜配制的营养肉汤中，摇床培养24～48h，将所得菌液稀释成108CFU/ml。将6mm灭菌滤纸片分别蘸取等量的不同浓度梯度的姜黄素标准品溶液(1.5％、0.75％)，贴于已接入试验菌种的平板上，于各菌种最佳培养温度培养1个生长周期，观察各抑菌圈的大小。结果见表3。
表3 姜黄素标准品溶液的抑菌结果(n＝3)
注：同一列数据标注字母无相同者差异显著(P<0.05)。
不同浓度的姜黄素标准溶液对四种细菌的抑制作用呈正相关作用，姜黄素浓度越高，抑菌圈越大；同一浓度的姜黄素标准溶液对四种细菌的抑制作用从强到弱依次为：犬金黄色葡萄球菌>犬绿脓杆菌>鸽大肠杆菌>鸽沙门氏菌。详见图2。
(2)抗炎试验(耳廓肿胀试验)：体重30g左右小白鼠50只，雌雄各半。随机分为5组，每组10只，分别为正常对照组，***组，3％姜黄素涂膜剂组，2％姜黄素涂膜剂组和1％姜黄素涂膜剂组。正常对照组不做任何处理；***组小鼠右耳涂抹0.2g***；不同浓度的姜黄素涂膜剂组小鼠右耳分别喷涂30μL的不同浓度的姜黄素涂膜剂，每日给药1次，连续3天给药，在末次给药后1h分别洗去小鼠右耳药物并用干棉球擦拭干净，各组每只小鼠右耳正反两面均匀涂抹二甲苯50μL致炎，左耳做对照，不做任何处理。致炎30min后断颈处死小鼠，剪下两耳，用直径为5.50mm的打孔器冲下左右耳同一部位圆片，称重，计算肿胀率。
肿胀率＝(右耳质量—左耳质量)/左耳质量×100％
结果见表4。
表4 姜黄素涂膜剂对二甲苯所致小鼠耳廓急性炎症的影响结果(n＝10)
试验数据显示，空白对照组小鼠在二甲苯致炎30min后，右耳明显肿胀，厚度增加，两耳片差异较大，而***组、不同浓度的姜黄素涂膜剂组小鼠右耳变化较小，其中3％的姜黄素涂膜剂组抑制作用明显，肿胀率仅为39.53％。结果表明，***组、不同浓度的姜黄素涂膜剂组对二甲苯所致小鼠耳廓急性炎症具有一定程度的改善作用。
(3)伤口愈合的肉眼观察
①线形伤口模型的建立及试验方法：兔子背部剪毛备皮，常规消毒，距脊柱两侧2.0cm处分别做3个长约30mm的线形伤口，深度从皮肤到肌层，厚度约0.3cm，然后缝合，用生理盐水冲洗伤口，备用。
取6只体重2kg左右的新西兰大白兔，雌雄各半，背部剪毛，麻醉，用手术刀切成3cm长的切口，建立线形伤口模型，外科手术缝合，分设致创不用药组和涂膜剂治疗组，致创不用药组兔伤口不做任何处理，涂膜剂治疗组兔伤口喷涂姜黄素涂膜剂，每天1次，每天分别观察伤口愈合情况，连续观察14天以上。
兔线形伤口第1、3、5、7d愈合情况，见图3。
从上述组图可以看出，在建立伤口模型后7天喷涂姜黄素涂膜剂的兔伤口愈合较快，创面面积较小，伤口收缩速度较快，综合愈合效果优于对照组，愈合效果较好。至第14天涂膜剂治疗组完全愈合，而致创不用药组伤口愈合，但留有疤痕。
②圆形伤口模型的建立及试验方法：将自制直径为15.80mm的伤口模具染上颜色，印在动物去毛背部进行定位，用无菌镊子从圆圈中心将兔皮肤夹起后，用无菌剪刀沿印迹边缘剪除圆圈皮肤，便可得到大小和深浅基本一致的圆形伤口。
取8只体重2kg左右的新西兰大白兔，雌雄各半，背部剪毛，麻醉，在皮肤上用剪刀制造圆形伤口模型，一组用生理盐水冲洗作为致创不用药组，另一组用2ml阿米卡星洗剂冲洗，为阿米卡星治疗组，第三组喷涂姜黄素涂膜剂2ml，为涂膜剂治疗组。每日用药1次，肉眼观察伤口愈合情况，并在伤口1、3、5、7、10和14d采用透明膜法，即用透明测量纸覆盖伤口沿伤口边缘画膜，数格，计算伤口愈合率。肉眼评价标准：红斑：皮肤表面无可见红斑为0分；勉强可见为1分；明显可见红斑为2分；严重红斑为3分；***并焦痂为4分。水肿：目测无水肿为0分；勉强可见为1分；轻微突出皮肤为2分；皮肤***轮廓清晰为3分；水肿明显***为4分。化脓：伤口表面干燥为0分；伤口边缘轻微湿润为1分；伤口边缘湿润为2分；整个伤口湿润为3分；伤口蓄脓为4分。
伤口愈合率＝[(同组d0伤口面积—同组dn时伤口面积)]/同组d0伤口面积×100％。(n为伤口测量时间)
以肉眼观察可知，姜黄素涂膜剂在伤后第3天即可消除伤口周围红斑，在第5天水肿消失，伤口不会感染化脓，其消肿化瘀、抗感染的能力均好于阿米卡星治疗组和致创不用药组，详见表5。
表5 姜黄素涂膜剂对伤口愈合的肉眼评价结果(n＝6)
从实验结果可知，涂膜剂治疗组对伤口的愈合率高于阿米卡星治疗组，并显著高于致创不用药组。在伤后第14天，涂膜剂治疗组兔伤口全部愈合，阿米卡星治疗组伤口愈合率大于90％，而致创不用药组仅为80.63％。见表6和图4。
表6 姜黄素涂膜剂伤口愈合率(n＝6)
注：同一列数据标注字母无相同者差异显著(P<0.05)。
(4)病理组织学观察
分别从圆形创口模型组取新西兰大白兔第7d、第14d的伤口周围皮肤组织，用常规石蜡包埋，制作切片，用HE染色，于光学显微镜下观察其组织学变化，并与正常皮肤、致创不用药组进行对比。
将伤后第7d伤口皮肤切片置于400倍光镜下观察，致创不用药组有肉芽组织长入，表皮开始增生，在伤口表面有覆盖，但尚未完全愈合；涂膜剂治疗组可见很多新生血管和成纤维细胞增生，肉芽组织更明显，更致密，表面已被增生的表皮覆盖伤口表面的大部分，伤口基本愈合(见附图5)；正常皮肤上皮完整，胶原纤维束排列自然、紧密，间隙均匀。
将创口第14d皮肤切片置于400倍光镜下观察，正常皮肤上皮完整，胶原纤维束排列自然、紧密，间隙均匀；致创不用药组有大量成纤维细胞分泌，胶原纤维束疏松、间隙大，排列不均匀；涂膜剂治疗组表皮已愈合完好，角层下生发层较厚，胶原纤维束较紧密，大致上与表皮平行生长，毛细血管较对照组多，有角质层，成纤维细胞大体数量少于对照组；阿米卡星治疗组上皮细胞缺损，胶原纤维束排列不自然，成纤维细胞大体数量多于涂膜剂治疗组。结果表明姜黄素涂膜剂组伤口愈合较早，且愈合更为完全。见图6。

Claims (10)

1.一种促进动物伤口愈合的涂膜剂，其特征在于，它由如下物料组成：
姜黄素28～32克、二甲基亚砜35～45ml、聚乙烯吡咯烷酮K-3018～22克、乙基纤维素8～12克、聚乙二醇-40055～65毫升，乙醇定容至1000毫升。
2.根据权利要求1所述的促进动物伤口愈合的涂膜剂，其特征在于，它由如下物料组成：
姜黄素30克、二甲基亚砜40ml、聚乙烯吡咯烷酮K-3020克、乙基纤维素10克、聚乙二醇-40060毫升，乙醇定容至1000毫升。
3.权利要求1或2所述的促进动物伤口愈合的涂膜剂的制备方法，其特征在于，它包括以下步骤：
(1)A液制备：将配方量的聚乙烯吡咯烷酮K-30和乙基纤维素溶解于适量乙醇中，得到空白涂膜剂，即A液；
(2)B液制备：将配方量的二甲基亚砜和聚乙二醇-400加入配方量的姜黄素中，用适量乙醇溶解上述二甲基亚砜、聚乙二醇-400和姜黄素的混合物料，得到B液；
(3)将B液在搅拌条件下加入A液中，并继续加入乙醇定容至1000毫升，过滤制得姜黄素涂膜剂。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，溶解的温度条件为50-65℃。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，得到的A液置于50-65℃条件下保存；步骤(2)中，得到的B液置于50-65℃条件下保存。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，将配方量的二甲基亚砜和聚乙二醇-400在搅拌条件下缓慢加入配方量的姜黄素中，搅拌速度为10～30r/min，加入速率0.1～0.2m3/min。
7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，溶解的温度条件为50-65℃。
8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，将B液在搅拌条件下缓慢加入A液，搅拌速度为10～30r/min，加入速率0.1～0.2m3/min。
9.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的乙醇预先预热至50-65℃。
10.权利要求1所述的涂膜剂在制备促进动物伤口愈合药物中的应用。
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