CN105687317B - 阴香叶总黄酮作为制备治疗骨质疏松症药物的应用及药物组合物 - Google Patents
阴香叶总黄酮作为制备治疗骨质疏松症药物的应用及药物组合物 Download PDFInfo
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Abstract
一种阴香叶总黄酮作为制备治疗骨质疏松症药物的应用,从阴香叶中制备了足够量的总黄酮,通过对不同饲喂条件下的大鼠进行骨密度测定和骨组织形态测定,证实了阴香叶总黄酮具有防治骨质疏松的作用,并制备出含有阴香叶总黄酮的防治骨质疏松的药物组合物。一种含有阴香叶总黄酮的防治骨质疏松的药物组合物,该药物包括辅料、活性成分主料、活性成分主料与辅料的重量比为1:99~99:1,活性成分主料包括阴香叶总黄酮,利用阴香叶总黄酮防治骨质疏松症,辅料是药剂上任意可以接受的赋形剂,例如淀粉、乳糖、微晶纤维素、糊精、羟丙纤维素、交联聚维酮、预交化淀粉、滑石粉、硬脂酸镁、微粉硅胶、十二烷基硫酸钠、吐温80、氢化植物油等。
Description
技术领域
本发明涉及阴香叶总黄酮的新用途,尤其涉及一种阴香叶总黄酮作为制备治疗骨质疏松症药物的应用及药物组合物。
背景技术
阴香叶是樟科樟属植物阴香的叶。《中华本草》中记载,阴香叶味辛、微甘、性温,具有祛风化湿、止泻、止血的作用。主治皮肤痒疹、风湿痹痛、泄泻、痢疾腹痛、寒结肿毒及外伤出血等。现代药理研究进一步发现,阴香叶还具有抑菌等生理活性。
骨质疏松是老年人常见病和多发病,它是以骨量减少、骨的微观结构退化为特征的。2008年在北京发布的《骨质疏松症防治中国***》中指出,我国至少有6944万人患有骨质疏松,有2.1亿人存在骨质疏松症的风险,每年医疗费用保守估计为150亿元。目前,西医治疗骨质疏松尚无理想的药物。因此,从天然植物和中药中寻找治疗骨质疏松疾病且副作用小的有效提取物、有效部位已成为研究热点。
近年来,现有技术对阴香的药理和挥发性成分研究较多,但还没有关于阴香叶总黄酮治疗骨质疏松症的公开技术方案。
发明内容
本发明提供了阴香叶总黄酮的新应用,即阴香叶总黄酮作为制备治疗骨质疏松症药物的应用。
还有必要提供一种含有阴香叶总黄酮的防治骨质疏松的药物组合物。该药物组合物包括辅料、活性成分主料、活性成分主料与辅料的重量比为1:99~99:1,活性成分主料包括阴香叶总黄酮,利用阴香叶总黄酮防治骨质疏松症。
上述阴香叶总黄酮作为制备治疗骨质疏松症药物的应用及含有阴香叶总黄酮的防治骨质疏松的药物组合物,发明人在阴香研究过程中,从阴香叶中制备了足够量的总黄酮,通过对不同饲喂条件下的大鼠进行骨密度测定和骨组织形态测定,证实了阴香叶总黄酮具有防治骨质疏松的作用,并制备出含有阴香叶总黄酮的防治骨质疏松的药物组合物。
附图说明
图1为各组大鼠总骨密度(t-BMD)图。
图2为各组大鼠左侧股骨micro CT扫描图。
具体实施方式
发明人用提取分离到的足够量的阴香叶总黄酮,在不同饲喂条件下,对大鼠进行骨密度测定和骨组织形态测定,证实阴香叶总黄酮具有防治骨质疏松的作用。
进一步的,上述阴香叶总黄酮可以制成防治骨质疏松的药物组合物,具体为:
一种含有阴香叶总黄酮的防治骨质疏松的药物组合物,该药物包括辅料、活性成分主料、活性成分主料与辅料的重量比为1:99~99:1,活性成分主料包括阴香叶总黄酮,利用阴香叶总黄酮防治骨质疏松症,辅料是药剂上任意可以接受的赋形剂,例如淀粉、乳糖、微晶纤维素、糊精、羟丙纤维素、交联聚维酮、预交化淀粉、滑石粉、硬脂酸镁、微粉硅胶、十二烷基硫酸钠、吐温80、氢化植物油等。
以下给出利用阴香叶总黄酮进行体外细胞或体内动物试验筛选,确证阴香叶提取物具有抗骨质疏松的作用的具体试验筛选过程:
1. 制备阴香叶总黄酮
方法一:阴香叶1 kg,干燥后粉碎,加8倍量80%乙醇,回流提取,提取时间为3小时,提取次数为3次。热过滤,滤液合并后减压浓缩至流浸膏状并且无醇味,加入至预先处理好的大孔吸附树脂上,其中大孔树脂与原药材重量比为1:1。先以10倍柱体积的水进行洗脱至近无色,再依次以20%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇进行洗脱,收集30~50%乙醇洗脱部位,浓缩,减压干燥得阴香叶总黄酮,紫外分光光度法测定总黄酮含量为61.2%。
方法二:阴香叶1 kg,干燥后粉碎,加10倍量80%乙醇,冷浸提取,提取时间12小时,提取次数为3次。过滤,滤液合并后减压浓缩至流浸膏状并且无醇味,加入至预先处理好的大孔吸附树脂上,其中大孔树脂与原药材重量比为1:1。先以8倍柱体积的水进行洗脱至近无色,再依次以20%乙醇、50%乙醇、70%乙醇进行洗脱,收集50%乙醇洗脱部位,浓缩,减压干燥得阴香叶总黄酮,紫外分光光度法测定总黄酮含量为63.4%。
2. 动物饲喂实验
实验动物:3月龄SD雌性大鼠,体重280±20 g,来自宁夏医科大学实验动物中心。
药物及试剂:上述制备出的阴香叶总黄酮。
阳性对照药:戊酸***片(补佳乐),法国DELPHARM Lille S. A.S.拜耳医药保健有限公司广州分公司。
3. 实验方法
取SD雌性大鼠40只,随机分为5组,每组8只,即:假手术组(SHam)、模型组(OVX)、戊酸***阳性对照组(EV, 1 mg/kg/d)、阴香叶总黄酮高剂量组(CFH, 100mg/kg/d)、阴香叶总黄酮低剂量组(CFL,25mg/kg/d)。大鼠以浓度为7%的水合氯醛0.5mL/kg腹腔注射麻醉后背部两侧切口,除假手术组外其余4组在无菌条件下摘除双侧卵巢作为骨质疏松症模型大鼠,假手术组只切开背部但不摘除卵巢。按上述给药剂量将药物溶于生理盐水后灌喂给药(10 mL/kg),连续给药3个月,假手术组和模型组灌喂等体积生理盐水。
4. 骨密度的测定
上述大鼠处死后,迅速剥离左侧股骨,利用双能X射线骨密度仪测定左侧股骨的总骨密度(t-BMD),统计分析用spss l8.0软件进行单因素方差分析。各组大鼠总骨密度与对照组总骨密度的显著性差异表示为*p<0.05和**p<0.01。各组大鼠总骨密度检测结果见图1。由图1可见,与模型对照组相比,各给药组均能显著提高总骨密度(*p<0.05,**p<0.01)。
5. 骨组织形态测定
取已测完骨密度的上述大鼠的左侧股骨,剔除肌肉与软组织,用切割机将股骨近端粗隆间沿股骨约1 cm处垂直切割,置micro-CT中进行扫描,采用Micview V2.1.2 三维重建处理软件进行每个样本三维图像的重建;ABA专用骨骼分析软件进行数据分析处理。假手术组(Sham),模型组(OVX),阳性对照药组(EV),阴香叶总黄酮高剂量组(CFH),阴香叶总黄酮低剂量组(CFL)。各组大鼠骨组织形态测定的结果请参看图2。
图2结果显示,假手术组(Sham)大鼠骨小梁选定区域较为致密,骨小梁数目较多,模型组(OVX)的ROI区域很疏松,出现中空地带,骨小梁数目显著减少,并且间隙显著增大;阳性对照药组(EV)、阴香叶总黄酮高剂量组(CFH)和阴香叶总黄酮低剂量组(CFL)大鼠的骨组织形态较模型组大鼠(OVX)比较明显有很大改善,骨小梁选定区域明显填充体积增大,骨小梁数目明显增多且连接紧密。
所述骨密度测定和骨组织形态测定表明,阴香叶总黄酮防治骨质疏松有效。
本发明的保护范围不限于实施例。凡技术人员按照本发明的思路在现有技术上通过逻辑分析、推断和实验得出的技术方案,均属于权利要求书中保护的范围。
Claims (3)
1.一种阴香叶总黄酮作为制备治疗骨质疏松症药物的应用;
所述阴香叶总黄酮的制备方法包括:阴香叶1kg,干燥后粉碎,加8倍量80%乙醇,回流提取,提取时间为3小时,提取次数为3次,热过滤,滤液合并后减压浓缩至流浸膏状并且无醇味,加入至预先处理好的大孔吸附树脂上,其中大孔树脂与原药材重量比为1:1;先以10倍柱体积的水进行洗脱至近无色,再依次以20%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇进行洗脱,收集30~50%乙醇洗脱部位,浓缩,减压干燥得阴香叶总黄酮,紫外分光光度法测定总黄酮含量为61.2%;
或者:阴香叶1kg,干燥后粉碎,加10倍量80%乙醇,冷浸提取,提取时间12小时,提取次数为3次,过滤,滤液合并后减压浓缩至流浸膏状并且无醇味,加入至预先处理好的大孔吸附树脂上,其中大孔树脂与原药材重量比为1:1;先以8倍柱体积的水进行洗脱至近无色,再依次以20%乙醇、50%乙醇、70%乙醇进行洗脱,收集50%乙醇洗脱部位,浓缩,减压干燥得阴香叶总黄酮,紫外分光光度法测定总黄酮含量为63.4%。
2.一种含有阴香叶总黄酮的防治骨质疏松的药物组合物,其特征在于:该药物组合物包括辅料、活性成分主料,活性成分主料与辅料的重量比为1:99~99:1,活性成分主料包括阴香叶总黄酮,利用阴香叶总黄酮防治骨质疏松症;
所述阴香叶总黄酮的制备方法包括:阴香叶1kg,干燥后粉碎,加8倍量80%乙醇,回流提取,提取时间为3小时,提取次数为3次,热过滤,滤液合并后减压浓缩至流浸膏状并且无醇味,加入至预先处理好的大孔吸附树脂上,其中大孔树脂与原药材重量比为1:1;先以10倍柱体积的水进行洗脱至近无色,再依次以20%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇进行洗脱,收集30~50%乙醇洗脱部位,浓缩,减压干燥得阴香叶总黄酮,紫外分光光度法测定总黄酮含量为61.2%;
或者:阴香叶1kg,干燥后粉碎,加10倍量80%乙醇,冷浸提取,提取时间12小时,提取次数为3次,过滤,滤液合并后减压浓缩至流浸膏状并且无醇味,加入至预先处理好的大孔吸附树脂上,其中大孔树脂与原药材重量比为1:1;先以8倍柱体积的水进行洗脱至近无色,再依次以20%乙醇、50%乙醇、70%乙醇进行洗脱,收集50%乙醇洗脱部位,浓缩,减压干燥得阴香叶总黄酮,紫外分光光度法测定总黄酮含量为63.4%。
3.如权利要求2所述的含有阴香叶总黄酮的防治骨质疏松的药物组合物,其特征在于:所述辅料是药剂上任意可以接受的赋形剂。
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