CN105669750B - 新型锌离子螯合剂及其制备和在抗革兰氏阴性菌感染中的应用 - Google Patents

新型锌离子螯合剂及其制备和在抗革兰氏阴性菌感染中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及含有新型锌离子螯合基团的化合物及其制备方法和在制备抗革兰氏阴性菌感染药物中的应用；试验研究表明，所述锌离子螯合基团化合物及其组合物有望用于制备抗革兰氏阴性敏感菌和耐药菌感染药物。

Description

新型锌离子螯合剂及其制备和在抗革兰氏阴性菌感染中的 应用
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及含有磷酸基、硼酸基、硅酸基和三氟乙酰基等锌离子螯合基团的化合物及其制备和在抗革兰氏阴性菌感染中的应用。
背景技术：
随着抗生素的广泛和不合理的应用，耐药菌的广泛出现并不断富集，导致耐药菌的感染性问题又一次成为严重威胁全球人类健康的疾病之一。造成感染的细菌可以分为革兰阴性菌和阳性菌，其中阴性菌的感染率明显高于阳性菌。根据中国细菌耐药性监测网(CHINET)2005-2014年连续耐药监测结果，我国大型教学型医院临床分离致病菌中，革兰阴性菌的比例明显高于阳性菌(二者比例约为7:3)，而且阴性菌所占比例呈上升趋势[胡付品,朱德妹,汪复.2014年中国CHINET细菌耐药性监测(J).中国感染与化疗杂志,2015,15(5):401-410]。2009年，Vincent等在JAMA报道的全球ICU病房感染数据同样也表明，世界范围内革兰阴性菌感染率明显高于阳性菌。因此，控制耐药革兰氏阴性菌的感染刻不容缓。
革兰氏阴性菌具有一层独特的外膜结构，是阻碍抗生素进入细菌的天然屏障，这是导致多种抗生素对革兰阴性菌疗效较差的重要原因之一。因此，相对于革兰氏阳性菌，革兰氏阴性菌的感染更难治疗。目前对耐药革兰氏阴性菌感染有效药物很少，所以针对革兰氏阴性菌寻找新的特效药物具有重要意义。
革兰氏阴性菌的外膜主要由脂多糖(LPS)构成，在外膜和内膜之间存在肽聚糖(PGN)，两者都是抗原，感染后容易引起***性免疫反应。脂多糖由三部分构成：O-型抗原、核心多糖和类脂A(1ipid A)。类脂A(1ipid A)是革兰氏阴性菌外膜脂多糖(LPS)的膜结合区域，是外膜能够正确组装的结构基础，同时它也是保护细菌抵御外部因子(如抗生素和去污剂)的重要构成部分。它也是强有力的内毒素，可越过肠黏膜屏障入血，引起致死性败血性休克，是革兰氏阴性菌感染致病的重要原因(Wyckoff TJO,Raetz CRH,JackmanJE.Antibacterial and anti-inflammatory agents that target endotoxin.TrendsMicrobiol1998；6:154-9)。因此，类脂A是革兰氏阴性菌耐药和致病的重要因素，有效抑制它的生物合成，有可能控制革兰氏阴性菌感染问题。
类脂A是革兰氏阴性菌通过9种特定的酶在细胞质和细胞壁内膜表面合成的。其中类脂A合成第二步中的UDP-3-O(R-3-羟基肉豆蔻酰基)-N-乙酰葡萄糖胺脱乙酰基酶(LpxC)，是催化其合成过程中的第一个非可逆反应的关键酶，对其作用调控引起人们广泛关注。大肠杆菌中无论是LpxC酶缺失或过表达，还是引入该酶的抑制剂，都会导致大肠杆菌的死亡。另外，LpxC在革兰氏阴性菌中高度保守，并且在结构和序列上与各种哺乳动物蛋白都不存在同源性。因此，针对此靶点开发的高特异性抑制剂具有低脱靶和低毒性的特点。由于LpxC是控制革兰氏阴性菌感染的新靶标，不存在已有的耐药性，所以其抑制剂对于临床上耐药革兰氏阴性菌同样有效。
目前，针对LpxC这一靶标已有多种特异性抑制剂的报道。由于LpxC是一种锌离子金属酶，文献报道的这些抑制剂都包含一个同锌离子螯合的异羟肟酸基团和一个疏水性酶识别区，其代表性化合物见图1。这些抑制剂中研究最为深入的是ACHAOGEN公司开发的ACHN-975，该化合物已经进入临床研究，无论对于敏感型还是耐药型铜绿假单胞菌的抗菌活性，它都要明显优于妥布霉素、环丙沙星、头孢他啶、亚胺培南和粘菌素等临床上常用的一、二线抗菌药物(Developing Novel Antibacterials to Treat Multi-drug ResistantGram-negative Bacterial Infections.Achaogen,13th Needham HealthcareConference April 8,2014)。然而该化合物由于存在局部注射耐受性问题被从临床试验撤回。CHIR-090在酶水平的IC50值和ACHN-975相当。
由于LpxC是一种锌离子金属酶，文献报道的这些抑制剂都包含一个锌离子螯合区和疏水性酶识别区。已有的小分子同LpxC共晶表明，锌离子螯合基团是该类抑制剂的药效团，是酶抑制活性必需片段；在锌离子络合基团存在下，可以对疏水性片段进行一定的替换，该片段和LpxC酶之间主要是疏水作用和π-π堆积作用，所以用疏水性片段对其进行替换仍保持较好的LpxC抑制活性。
作为锌离子螯合基团的羟肟酸基团在人体内易被葡萄糖苷化或者磺酸化等代谢途径失活，并且容易被水解为羟胺而产生毒性。本发明涉及的含有磷酸基、硼酸基、硅酸基和三氟乙酰基等新型锌离子螯合基团的化合物，不具有潜在的毒性，是良好的LpxC抑制剂，具有用于开发为治疗革兰氏阴性菌感染药物的潜力。
发明内容：
本发明所解决的技术问题之一是，提供一类含有磷酸基、硼酸基、硅酸基和三氟乙酰基等锌离子螯合基团的化合物。
所述含有锌离子螯合基团化合物的结构如式I所示：
式I中
R1为磷酸基、硼酸基、硅酸基和三氟乙酰基；
R2为少于4个碳原子的烷基，少于4个碳原子的羟烷基；
X＝N,O；
Y＝羰基，亚甲基；
A为炔基，二炔基；
B为6个碳原子以下(含6个碳原子)的饱和、不饱和烷烃，氢原子。
以上R1、R2、X、Y、A、B之间可以任意组合。
本发明所解决的技术问题之二是，提供式I所示化合物的制备方法。
式I所示化合物可以通过式II和式III所示化合物经缩合反应制得，所使用的缩合剂为HATU、HBTU、EDC、DCC、DIC、PyBOP和PyAOP；所使用的碱为TEA、DIEA和DMAP；
式II所示化合物可以通过金属催化的偶联反应制得；
式III所示化合物可以通过还原、溴代、消除和加成等反应制得。
本发明所解决的技术问题之三是，提供式I所示化合物的用途。
本发明所提供的含有磷酸基、硼酸基、硅酸基和三氟乙酰基等锌离子螯合基团化合物的用途包括以下方面的应用：
1)制备LpxC抑制剂中的应用；
2)制备抗革兰阴性菌药物中的用途。
本发明所解决的技术问题之四是，提供式I所示化合物组合物的用途。
本发明所提供的含有磷酸基、硼酸基、硅酸基和三氟乙酰基等锌离子螯合基团化合物组合物的用途包括以下方面的应用：
1)制备LpxC抑制剂中的应用；
2)制备抗革兰阴性菌药物中的用途。
所述抗革兰氏阴性菌药物包括但不限于抗绿假单胞菌、耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌的药物。
附图说明：
图1.文献报道的代表性的LpxC抑制剂
图2.化合物11的制备路线
图3.化合物15的制备
图4.化合物20的制备
图5.化合物23的制备
具体实施方式：
实验中，薄层分析用薄层硅胶板检测(青岛海洋化工，GF254,0.5mm)；柱层析所用硅胶(H60)为购买自青岛海洋化工，柱层析所用到的石油醚沸程为60-90℃；实验中所用试剂除有特殊说明外均为购自北京偶合试剂有限公司，为分析纯或化学纯，未经进一步处理。各化合物进行生物活性测试之前都采用HPLC进行纯度分析，分析中均使用色谱纯有机溶剂和屈臣氏纯净水。
《实施例1》含磷酸基代表化合物11的制备
化合物11的制备路线见图2，具体操作如以下所述：
*(4S,5R)-methyl 5-methyl-2-oxooxazolidine-4-carboxylate(1)的制备
将3g L-苏氨酸甲酯盐酸盐溶于20mL四氢呋喃，加入三光气3.5g，回流1小时后，蒸除溶剂，柱层析(硅胶，石油醚/丙酮＝1:1)，得油状固体1.6g，收率为85.1％。ESI-MS：[M+H]+:160.1。
*(4R,5R)-4-(hydroxymethyl)-5-methyloxazolidin-2-one(2)的制备
将化合物1(1.87g)溶于乙醇中，加入硼氢化钠0.45g，0℃搅拌5分钟，室温搅拌1小时。蒸除溶剂后硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝25:1)，得油状固体1.28g，收率为82.7％。ESI-MS：[M+H]+:132.6。*(4S,5R)-4-(bromomethyl)-5-methyloxazolidin-2-one(3)的制备
将化合物2(30mg)和三乙胺64μL溶于0.5ml的二氯甲烷中，加入对甲苯磺酸66mg，室温搅拌7h。蒸除溶剂，柱层析(硅胶，二氯甲烷/甲醇＝100:1)得对甲苯磺酸酯中间体51mg，收率为78％。将对甲苯磺酸酯51g溶于2ml无水四氢呋喃，加入溴化锂46mg，回流4h。蒸除溶剂柱层析(硅胶，二氯甲烷/甲醇＝100:1)得化合物328mg，收率为83.3％。ESI-MS：[M+H]+:194.1。
*Diethyl(((4S,5R)-5-methyl-2-oxooxazolidin-4-yl)methyl)phosphonate(4)的制备
将化合物3(28mg)溶于0.5mL亚磷酸三乙酯，180℃回流7小时，减压蒸除溶剂，硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝100:1)得产物433mg，收率为90.1％。ESI-MS：[M+H]+:252.1。
*diethyl((2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutyl)phosphonate(5)的制备
将化合物4(33mg)溶于0.6mL四氢呋喃，加入四氢锂铝(1M in THF，50μL)，室温搅拌1h。蒸除溶剂，柱层析(二氯甲烷/甲醇＝80:1)得产物516mg，收率为54.7％。ESI-MS：[M+H]+:226.2，[M+Na]+:248.2。
*Methyl 4-((trimethylsilyl)ethynyl)benzoate(6)的制备
氩气保护下，将200mg4-碘苯甲酸甲酯，3mg双三苯基膦氯化钯和3mg碘化亚铜溶于2mL无水DMF，加入三乙胺0.4mL和三甲基炔基硅。50℃反应5h后加入乙酸乙酯50mL，饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥浓缩。柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝50:1)，得产物152mg，收率为85.9％。ESI-MS：[M+H]+:233.3。
*4-ethynylbenzoic acid(7)的制备
将7g化合物6溶于60mL乙醇中，加入20mL水和2.57g氢氧化钠，室温反应1h，1N盐酸调节pH值为3-4，蒸除乙醇，水层用乙酸乙酯萃取。有机相用无水硫酸钠干燥浓缩。柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝30:1)，得产物3.1g，收率为72.3％。ESI-MS：[M-H]-:145.0。
*4-(4-iodobenzyl)morpholine(8)的制备
将对碘苯甲醛430mg溶于20mL四氢呋喃中，加入吗啉210mg和三乙酰氧基硼氢化钠室温搅拌60小时。反应结束后加入30mL饱和碳酸氢钠淬灭，乙酸乙酯萃取(60mLx3)，有机相用无水硫酸钠干燥浓缩。柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)，得产物487mg，收率为86.9％。ESI-MS：[M+H]+:304.2。
*4-((4-(morpholinomethyl)phenyl)ethynyl)benzoic acid(9)的制备
氩气保护下，将1.08g化合物7、2.46g化合物8、29mg双三苯基磷氯化钯和28mg碘化亚铜溶于14ml四氢呋喃。室温搅拌1h，40℃反应4h。蒸除溶剂，加入50mg水，用乙酸乙酯萃取(50mlx3)。有机相用无水硫酸钠干燥浓缩，柱层析(石油醚/乙酸乙酯,1:1)，得产物1.78g，收率为75.1％。ESI-MS：[M-H]-:320.1。
*Diethyl(3-hydroxy-2-(4-((4-(morpholinomethyl)phenyl)ethynyl)benzamido)butyl)phos-phonate(10)的制备
将30mg化合物5和43mg化合物9溶于2mL的DMF中加入101mg的HATU和69μL的DIEA，室温反应2h。加入10mL乙酸乙酯，依次用饱和碳酸氢钠、饱和氯化铵和饱和食盐水各10mL洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥浓缩。柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)，得产物41mg，收率为59.1％。ESI-MS：[M+H]+:529.4。
*(3-hydroxy-2-(4-((4-(morpholinomethyl)phenyl)ethynyl)benzamido)butyl)phosphonic acid(11)的制备
将41mg的化合物10溶于2ml四氢呋喃中，加入0.4mL水和10mg氢氧化钠，室温搅拌30分钟。6N盐酸调节pH值为2-3，有固体析出抽滤得化合物1122mg，收率为60.1％。ESI-MS：[M-H]-:471.2。
《实施例2》含硼酸基代表化合物15的制备
化合物15的制备路线见图3，具体操作如以下所述：
*(4R,5R)-5-methyl-4-((4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)methy l)oxazolidin-2-one(12)的制备
将化合物3(1.2g)溶于无水2mL DMF中加入2.4g的Bis(pinacolato)diboron、0.47g的甲醇锂和60mg的纳米铜粉，室温反应5h。反应结束后加入30mL乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤干燥浓缩，柱层析得1.07g产物12，收率为71.9％。ESI-MS：[M+H]+:242.2。
*(2R,3R)-3-amino-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)butan-2-ol(13)的制备
将化合物12(50mg)溶于0.6mL四氢呋喃，加入四氢锂铝(1M in THF，104μL)，室温搅拌1h。蒸除溶剂，柱层析(二氯甲烷/甲醇＝80:1)得产物1318mg，收率为41.2％ESI-MS：[M+H]+:216.3，[M+Na]+:238.3。
*N-(3-hydroxy-1-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)butan-2-yl)-4-((4-(morpholinomethyl)phenyl)ethynyl)benzamide(14)的制备
将107mg化合物13和160mg化合物9溶于2mL的DMF中加入380mg的HBTU和216μL的TEA，室温反应2h。加入20mL乙酸乙酯，依次用饱和碳酸氢钠、饱和氯化铵和饱和食盐水各20mL洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥浓缩。柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)，得产物195mg，收率为75.2％。ESI-MS：[M+H]+:519.5。
*(3-hydroxy-2-(4-((4-(morpholinomethyl)phenyl)ethynyl)benzamido)butyl)boronic acid(15)的制备
将195mg的化合物14溶于4ml四氢呋喃中，加入0.8mL水和60mg氢氧化钠，室温搅拌30分钟。6N盐酸调节pH值为2-3，有固体析出抽滤得化合物15125mg，收率为76.5％。ESI-MS：[M-H]-:435.2。
《实施例3》含硅酸基代表化合物20的制备
化合物20的制备路线见图4，具体操作如以下所述：
*(R)-5-methyl-4-methyleneoxazolidin-2-one(16)的制备
将400mg的化合物3溶于5mL四氢呋喃中，加入220mg的叔丁醇钾，50℃反应30分钟。加入乙酸乙酯50mL，依次用饱和碳酸氢钠、饱和氯化铵和饱和食盐水各20mL洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥浓缩。柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)，得产物150mg，收率为64.5％。
ESI-MS：[M+H]+:114.1。
*(5R)-4-(2,2-bis((trimethylsilyl)oxy)propyl)-5-methyloxazolidin-2-one(17)的制备
将150mg化合物16溶于无水甲苯，加入heptamethyltrisiloxane(1.55mL，1M)和Karstedt's catalyst回流20小时。蒸除溶剂，柱层析得产物347mg，收率为78％。ESI-MS：[M+H]+:336.2。
*(2R)-3-amino-4-(1,1,1,3,5,5,5-heptamethyltrisiloxan-3-yl)butan-2-ol(18)的制备
将化合物17(347mg)溶于0.6mL四氢呋喃，加入四氢锂铝(1M in THF，517μL)，室温搅拌1h。蒸除溶剂，柱层析(二氯甲烷/甲醇＝80:1)得产物18199mg，收率为62.4％。ESI-MS：[M+H]+:310.3，[M+Na]+:332.3。
*N-(1-(1,1,1,3,5,5,5-heptamethyltrisiloxan-3-yl)-3-hydroxybutan-2-yl)-4-((4-(morpholinomethyl)phenyl)ethynyl)benzamide(19)的制备
将154mg化合物18和160mg化合物9溶于2mL的DMF中加入380mg的HATU和216μL的DIEA，室温反应2h。加入20mL乙酸乙酯，依次用饱和碳酸氢钠、饱和氯化铵和饱和食盐水各20mL洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥浓缩。柱层析得产物261mg，收率为72.4％。ESI-MS：[M+H]+:613.4。
*N-(1-(dihydroxy(methyl)silyl)-3-hydroxybutan-2-yl)-4-((4-(morpholinom ethyl)phenyl)ethynyl)benzamide(20)的制备
将60mg的化合物19溶于2ml四氢呋喃中，加入0.4mL水和10mg氢氧化钠，室温搅拌30分钟。6N盐酸调节pH值为2-3，有固体析出抽滤得化合物1128mg。ESI-MS：[M+H]+:469.3。
《实施例4》含三氟乙酰基代表化合物23的制备
化合物23的制备路线见图5，具体操作如以下所述。
*(5R)-5-methyl-4-(2,2,2-trifluoroacetyl)oxazolidin-2-one(21)的制备
将200mg化合物1溶于4mL无水THF中，冷却到-78℃。加入LDA(0.75mL，2M)搅拌10分钟后，室温搅拌45分钟。将反应瓶重新冷却至-78℃，加入三氟乙酸乙酯(357mg)并搅拌2小时。加入50mL乙酸乙酯，依次用饱和碳酸氢钠、饱和氯化铵和饱和食盐水各20mL洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥浓缩。柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)，得产物199mg，收率为80.2％。ESI-MS：[M+H]+:198.1。
*(4R)-3-amino-1,1,1-trifluoro-4-hydroxypentan-2-one(22)的制备
将化合物21(133mg)溶于2mg四氢呋喃，加入0.8mL水和54mg的KOH室温搅拌5h。蒸除溶剂，柱层析(二氯甲烷/甲醇＝80:1)得产物589mg，收率为77.7％。ESI-MS：[M+H]+:192.1，[M+Na]+:214.1。
*4-((4-(morpholinomethyl)phenyl)ethynyl)-N-(1,1,1-trifluoro-4-hydroxy-2-oxopentan-3-yl)benzamide(23)的制备
将45mg化合物22和160mg化合物9溶于2mL的DMF中,加入380mg的HATU和216μL的DIEA，室温反应2h。加入20mL乙酸乙酯，依次用饱和碳酸氢钠、饱和氯化铵和饱和食盐水各20mL洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥浓缩。柱层析得产物181mg，收率为76.2％。ESI-MS：[M+H]+:475.3，[M+Na]+:497.3。
《实施例5》化合物11、15、20、23对革兰氏阴性菌的最低抑制浓度MIC的测定
通过抑菌实验证明化合物11、15、20、23对于大肠杆菌、绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、克氏肺炎菌和阴沟杆菌等革兰氏阴性菌都具有较好的抑菌活性，其最低抑制浓度MIC在0.1-4.0微克/毫升范围内(具体见表1)，活性和阳性对照CHIR-090相当。阳性对照CHIR-090是按照文献(N.H.Anderson,J.Bowan,A.Erwin,etal.,WO2004/062601)方法制备的。
表1.化合物11、15、20、23对革兰氏阴性菌的最低抑制浓度(MIC)
MIC值具体测试方法是：
将新鲜的细菌过夜培养物再悬浮于无菌盐水中，调节浊度为0.5麦氏单位，随后用阳离子调节的Mueller-Hinton肉汤稀释200倍，得到每毫升5x105个菌落形成单位的最终接种物。用100％的二甲基亚砜(DMSO)制备化合物的两倍系列稀释液，最高浓度是最低浓度的100倍；将所得到的化合物稀释系列用10倍无菌水再稀释，得到含DMSO10％的待测化合物溶液。将90μL的接种液和10μL的待测化合物溶液加入到微量滴定孔中，37℃孵育20小时。随后用微量滴定板读数器在600nM检测，并结合视检确定最低抑制浓度MIC。
实验所用菌种均通过北京中原公司购自美国ATCC生物制品中心。
实施例6化合物11、15、20、23对LpxC酶抑制的IC50
酶抑制试验表明化合物11、15、20、23在1-100nM能够对E.coliLpxC和P.aeruginosa LpxC酶的催化活性产生强烈的抑制作用，其IC50见表2。
表2化合物11、15、20、23对LpxC酶酶抑制作用
IC50的具体测试方法是：
按照文献(Hyland S A,Eveland S S,Anderson M S Journal of bacteriology,1997,179(6):2029-2037)的方法转染表达并纯化E.coliLpxC和P.aeruginosa LpxC酶。利用P.aeruginosa LpxC酶将UDP-3-O-(R-3-hydroxyacyl)-N-acetylglucosamine(购自SigmaAldrich Co.Ltd)水解为UDP-3-O-(R-3-hydroxyacyl)-glucosamine，并绘制成含量标准曲线备用。
测试过程：
向每孔包含50mM pH7.5的磷酸钠缓冲液和0.005％Trition X-100的总体积为50μL的36孔板中，加入不同浓度的待测化合物的DMSO溶液和等体积的LpxC酶，使待测化合物终浓度为1nM、5nM、10nM、25nM，酶终浓度为1nM，然后加入终浓度为2μM的底物UDP-3-O-(R-3-hydroxyacyl)-N-acetylglucosamine，反应20min后向每孔中加入20％的醋酸中止反应。将反应混合物离心，用液质联用分析得到产物的峰面积，通过标准曲线计算得出产物的含量。将不加抑制剂(待测化合物)时的抑制率指定为0％，反应开始前用醋酸中止反应的抑制率定为100％。将测得的酶催化产物含量转化为百分抑制率，计算得到IC50值。

Claims (8)

1.一类锌离子螯合基团化合物，其结构如式1所示：
其中：
R1为三氟乙酰基；
R2为少于4个碳原子的烷基，少于4个碳原子的羟烷基；
X＝NH,O；
Y＝羰基，亚甲基；
A为炔基，二炔基；
B为6个碳原子以下的饱和、不饱和的烷烃，氢原子；
以上R1、R2、X、A、B之间任意组合。
2.制备权利要求1所述化合物的方法，其步骤是，将式II和式III所示化合物通过缩合反应得到，
其中：R1、R2、X、Y、A、B的定义同权利要求1，且R1、R2、X、Y、A、B之间任意组合。
3.权利要求2所述的方法，其特征是，所使用的缩合剂为HATU、HBTU、EDC、DCC、DIC、PyBOP和PyAOP；所使用的碱为TEA、DIEA和DMAP。
4.权利要求2所述的方法，其中式II所示化合物是通过金属催化的偶联反应制得；式III所示化合物是通过还原、溴代、消除和加成反应制得。
5.权利要求1所述化合物在制备LpxC抑制剂和抗革兰氏阴性菌感染药物中的应用。
6.以权利要求1所述化合物为有效成分与药学上可接受的一种或多种载体组成的组合物。
7.权利要求6所述组合物在制备LpxC抑制剂和抗革兰氏阴性菌感染药物中的应用。
8.权利要求5或7所述的应用，其抗革兰氏阴性菌的药物包括但不限于抗绿假单胞菌、耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌的药物。
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