CN105622638B - 嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种式Ⅰ所示的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物及其制备方法和应用，属于药物制备技术领域。该类化合物具有高效及选择性的抑制细胞周期依赖性激酶(Cdks)CDK4和CDK6的活性，进而通过抑制CDK4/CDK6阻止肿瘤细胞***。因此，本发明的化合物能够用于CDK4和CDK6所参与细胞周期控制失调导致各种疾病，特别适用于恶性肿瘤的治疗。

Description

嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及药物制备技术领域，特别是涉及一种嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物及其制备方法和应用。

背景技术

周期蛋白依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinase，CDK)和周期蛋白(cyclin)是细胞周期调控中的重要因子。CDK可以和cyclin结合形成异二聚体，其中CDK为催化亚基，cyclin为调节亚基，形成各种cyclin—CDK复合物，使不同底物磷酸化，对细胞周期不同的时相起推进和转化作用。

在哺乳动物中至少存在9种CDK。细胞由G1期向S期转化主要受G1期CDK激酶控制。与G1期细胞周期蛋白(cycling)结合的CDK激酶主要包括CDK2、CDK4和CDK6。cyclin D主要与CDK4和CDK6结合并调节后者活性；cyclin E在G1/S期与CDK2结合，呈现CDK2的激酶活性促进细胞进入S期。G2/M期主要受CDK1激酶调控，Cyclin A、cyclin B与CDK1结合，CDK1使底物蛋白磷酸化，如将组蛋白H1磷酸化则导致染色体凝缩，如将核纤层蛋白磷酸化则使核膜解体。在M期，M期促发因子(MPF)激活后期促进因子APC，将泛素连接在cycli A和cyclin B上，通过多泛素化作用，使它们被蛋白酶体降解，完成一个细胞周期(Malumbres M.et al:Nat Cell Biol 11:1275,2009；Malumbres M.et al Nat Rev Cancer 9:153,2009)。

细胞周期失控是人体肿瘤的一大共同特征。肿瘤细胞通常发生非常规增殖，基因组不稳定性(DNA突变增加和染色体畸变)和染色体不稳定性(增加染色体数量)。细胞周期受CDKs家族激酶调控。肿瘤细胞由于CDKs本身或它们的调制物或促有丝***的上游通路相关基因和表格遗传基因改变，导致CDKs活性异常(Cicenas J.J Cancer Res Clin Oncol147:1409,2011；Rizzolio F,et al.Curr Drug Targets.11:279,2010)。

过去十年来，CDK抑制剂作为抗肿瘤新药开发成为全球药业的一个热点，有超过20个CDK抑制剂进入临床开发。尽管CDK抑制剂抗肿瘤临床前药效学结果显著，但是早前多数临床试验结果不尽人意。主要问题包括在实体瘤缺乏疗效和毒性较大。(Nat Rev Drug Dis11:892,2012)。CDK抑制剂AG-24322﹑ZK-304709﹑SNS-032﹑R547﹑Seliciclib和AZD5438因为疗效和毒性原因导致临床研究终止。而在分析产生严重毒副作用的原因后发现，这些药物对CDK亚型抑制缺乏选择性，因此产生了严重的毒副作用。

近年来研究表明，CDK1对于参与正常细胞周期调控。在其它CDKs被抑制的情况下，保留CDK1活性足以维持正常细胞周期。CDK抑制剂的毒副作用与CDK1和CDK2的抑制有关(JNCI J Natl Cancer Inst 2012)。与此相反，CDK4和CDK6亚型不是哺乳细胞周期所必需，它们仅仅在特殊细胞类型增殖起重要作用，其成为抑制肿瘤的关键靶点。

CDK4和CDK6是两个密切相关的激酶，在肿瘤细胞周期中与Cyclin D结合促使G1期进入S期，是DNA复制和细胞***的细胞周期进程所必需的。而超过90％的人类肿瘤中，均发现通过各种的基因和生化适应导致G1-S期的过渡控制机制改变。P16和人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(retinoblastoma，Rb)是重要的肿瘤抑制蛋白，其能调控细胞周期。P16基因蛋白抑制CDK4、CyclinD1和Rb的反馈回路，并通过调节Rb的蛋白活性，从而防止细胞过度增殖，以达到抑制肿瘤的目的。已经证明在人体肿瘤中(如乳腺癌和骨髓瘤)，CDK4和CDK6激活导致细胞周期改变发生。而抑制CDK4和CDK6，可阻止肿瘤抑制蛋白Rb的失活和干扰肿瘤细胞周期进展(Choi YJ and Anders L，Oncogene 33：1890-903，2014)。

最近的研究还发现，CDK6作为转录复合物的一部分诱导肿瘤抑制基因p16INK4a和促血管生成因子VEGF-A的表达。CDK6可以通过增强细胞增殖和血管生成刺激发挥其肿瘤的促进作用(Cancer Cell 24-167,2013)。

Palbociclib(PD-0332991)能够选择性的抑制CDK4和CDK6，恢复细胞周期控制，从而阻断肿瘤细胞增殖。辉瑞(Pfizer)公司于今年5月根据其中期临床试验结果向美国食品药品监督管理局(FDA)提出申请NDA。根据辉瑞II期研究，在绝经后女性***受体阳性(ER⁺)、人表皮生长因子受体2阴性(HER₂ ^-)局部晚期或转移性乳腺癌患者中，与标准治疗药物曲唑(letrozole)治疗组相比，palbociclib和letrozole联合用药组的疾病无进展生存期(PFS)取得了统计学意义上的显著延长(20.2个月vs 10.2个月，p＝0.0004),达到了研究的主要终点。与非选择性CDK抑制剂不同，CDK4/6抑制剂PD-0332991的副作用较少。主要包括白细胞减少和疲劳(Pfizer Press Release 2014.4.6)的副作用较少。

选择性CDK4和CDK6抑制剂Palbociclib﹑LY2835219和LEE011进入用于治疗晚期乳腺癌的三期临床试验。由于CDK4/6在各种实体肿瘤和血液肿瘤的细胞周期控制失调中起关键作用。目前，这些药物的临床评价还包括转移性乳腺癌，脂肪肉瘤，非小细胞肺癌，肝癌，卵巢癌，胶质母细胞瘤，黑素瘤，多发性骨髓瘤和淋巴瘤。

发明内容

基于此，本发明的目的在于克服现有技术中CDK抑制剂缺乏选择性的缺陷，提供一种嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物，该类化合物能够选择性的抑制细胞周期依赖性激酶(Cdks)CDK4和CDK6，可用于CDK4和CDK6所参与的细胞周期控制失调导致各种疾病，特别是恶性肿瘤的治疗中。

为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：

式Ⅰ所示的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体或其前药分子：

其中：X选自：CH或N；

Y选自：C或N，且当Y选取N，则无R₆取代；

R₁选自：C1-C6烷基，C3-C6环烷基，C3-C6环烷基取代甲基；

R₂选自：卤素，COR₇，COOR₇，CONR₇R₈，C≡R₉；

R₃选自：H，C1-C6烷基；

R₆选自：H，F，CN，CH₃；

R₇、R₈分别独立选自：H，C1-C6烷基，C1-C6含氟烷基；C3-C6环烷基；

R₉选自：C1-C6烷基，C1-C6含氟烷基，含O，N，S杂原子的C1-C6烷基，C3-C6环烷基，任意0-3个R₁₂取代或未取代的苯基，任意0-3个R₁₂取代或未取代的5-6元环杂芳基；

R₁₂选自：C1-C6烷基，C1-C6含氟烷基，含O，N，S杂原子的C1-C6烷基,卤素，硝基，羟基，C1-C6烷氧基，氰基，氨基，酯基，酰胺基；R₁₁选自如下基团：

其中：Q选自：甲基或C＝O；

Z选自：C或N；

m选自：0或1；

n选自：1或2；

R₁₀选自：H，C1-C6烷基，C3-C6环烷基，苯甲基，乙酰基，甲磺基，羟基取代C1-C4烷基，C1-C3烷氧基取代C1-C4烷基，氨基取代C1-C4烷基，C1-C3烷基取代胺基，C1-C3烷基胺基取代C1-C4烷基，C3-C6环胺基；

并且，当Y选自N时，R₁₁不包括如下基团：

在其中一些实施例中，所述嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物选自如下式II所示化合物：

其中：R₄选自如下基团：

在其中一些实施例中，所述嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物选自如下式III所示化合物：

其中：R₅选自如下基团：

在其中一些实施例中，X选自：CH。

在其中一些实施例中，R₁选自：C3-C6环烷基。

在其中一些实施例中，R₃选自：H，C1-C6烷基，优选甲基或乙基。

在其中一些实施例中，R₂选自：卤素，COR₇，COOR₇，CONR₇R₈；卤素选自：Cl，Br；R₇、R₈分别独立选自：H，C1-C6烷基，优选甲基。

在其中一些实施例中，R₁选自：C3-C6环烷基，优选环戊烷；R₂选自：COR₇；R₇选自：C1-C6烷基，优选甲基；R₃选自：C1-C6烷基，优选甲基。

在其中一些实施例中，R₂选自：C≡R₉；

R₉选自：C1-C6烷基，C1-C6含氟烷基，含O，N，S杂原子的C1-C6烷基，C3-C6环烷基，任意0-3个R₁₂取代或未取代的苯基，任意0-3个R₁₂取代或未取代的5-6元环杂芳基。

在其中一些实施例中，R₉选自：甲基，乙基，丙基，羟甲基，2-羟基乙基，1-羟基乙基，乙酰基，酰胺基，甲氧基取代甲基，胺甲基，甲胺基甲基，二甲胺基甲基，任意0-3个R₁₂取代或未取代的苯基，任意0-3个R₁₂取代或未取代的杂芳基；

所述杂芳基选自：吡啶基，嘧啶基，呋喃基，苯并呋喃基，苯并噁唑基；

R₁₂选自：卤素，甲基，乙基，异丙基，羟基，甲氧基，乙氧基，甲氧基乙氧基(CH₃OCH₂CH₂O-)，氨基，甲胺基，二甲胺基，胺甲基，羟甲基，氰基，三氟甲基，酯基，酰胺基，甲磺酰氨基。

在其中一些实施例中，R₁选自：C3-C6环烷基，优选环戊基；

R₃选自：C1-C6烷基，优选甲基；

R₉选自：羟甲基，2-羟基乙基，1-羟基乙基，甲氧基取代甲基，任意0-3个R₁₂取代或未取代的苯基，任意0-3个R₁₂取代或未取代的杂芳基；

R₁₂选自：氨基，甲胺基，二甲胺基，胺甲基，酰胺基，甲磺酰氨基。

在其中一些实施例中，Y选自：C或N；R₆选自：H。

在其中一些实施例中，R₁₁或R₄或R₅选自如下基团：

其中：n选自：2；

R₁₀选自：H，C1-C6烷基，苯甲基，羟基取代C1-C4烷基，C1-C3烷基取代胺基，C3-C6环胺基。

在其中一些实施例中，所述嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物选自如下化合物：

本发明还公开了上述的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将化合物101与R₁NH₂反应生成氯被R₁NH取代的中间体102；该化合物101为4-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯；

(2)用还原剂还原中间体102中的酯基生成羟基化合物103；

(3)羟基化合物103用氧化剂氧化生成醛类化合物104；

(4)醛类化合物104先与甲基溴化镁反应后被二氧化锰氧化生成甲基酮类化合物105；

(5)甲基酮类化合物105在碱性条件下与三乙基膦酰基乙酸酯或三甲基膦酰基乙酸酯发应关环反应生成中间体106；

(6)中间体106与溴素反应生成溴代化合物107；

(7)溴代化合物107中的甲硫基被2-苯磺酰基-3-苯基氧杂氮杂环丙烷氧化生成甲基亚磺酰基中间体109；

(8)将中间体109与化合物110反应置换甲基亚磺酰基生成化合物111；

(9)化合物111先在钯试剂的催化下与三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡反应生成乙氧基乙烯基化合物，后在酸性条件下水解生成目标化合物；

反应路线如下：

其中：化合物110通过以下方法制备：

A)将化合物110A与具R₄基团的化合物反应，以R₄取代化合物110A中的溴，得到化合物110B；该化合物110A为5-溴-2-硝基吡啶与具R₄基团的化合物反应；

B)用还原剂将化合物110B中的硝基还原为氨基，得到化合物110；

反应路线如下：

上述化合物110由变量基团R₄构成，可由5-溴-2-硝基吡啶与不同的R₄反应，当R₄具有亲核的胺基，可直接取代溴生成氮直接连接在吡啶上的化合物；当R₄与吡啶以碳键相连，可通过偶联反应引入。

本发明还公开了上述的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将化合物201与R₁NH₂反应，选择性的置换碘邻位的氯生成化合物202；该化合物201为2,4-二氯-5-碘嘧啶；

(2)化合物202在钯试剂催化下与硼烷-2-丁烯酸乙酯缩合生成化合物203；

(3)化合物203在碱性条件下关环生成中间体204；

(4)化合物204与溴素反应生成溴代化合物205；

(5)溴代化合物205在碱性条件下与化合物110反应生成化合物111；

(6)化合物111先在钯试剂的催化下与三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡反应生成乙氧基乙烯基化合物，后在酸性条件下水解生成目标化合物；

反应路线如下：

其中：化合物110按照上述方法制备。

本发明还公开了上述的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将化合物301与NIS反应在氯的对位引入碘，得到化合物302；该化合物301为2-氯-4-胺基吡啶；

(2)化合物302与溴代R₁反应引入R₁取代的化合物303；

(3)化合物303在钯试剂催化下与硼烷-2-丁烯酸乙酯反应生成化合物304；

(4)化合物304在碱性条件下关环生成化合物305；

(5)化合物305与溴素反应生成溴代化合物306；

(6)溴代化合物306在钯试剂的催化下与三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡反应生成乙氧基乙烯基化合物307；

(7)化合物307在钯试剂催化下与化合物308反应生成化合物309；

(8)化合物309在酸性条件下水解生成目标化合物；

反应路线如下：

其中：化合物308通过以下方法制备：

A)将化合物110A与具R₅基团的化合物反应，以R₅取代化合物110A中的溴，得到化合物308A；该化合物110A为5-溴-2-硝基吡啶；

B)用还原剂将化合物308A中的硝基还原为氨基，得到化合物308；

反应路线如下：

上述化合物308由变量基团R₅构成，可由5-溴-2-硝基吡啶与不同的R₅反应，当R₅具有亲核的胺基，可直接取代溴生成氮直接连接在吡啶上的化合物；当R₅与吡啶以碳键相连，可通过偶联反应引入。

本发明还公开了上述的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将化合物401与碘代R₆反应生成3位R₆取代的化合物402；该化合物401为4-溴-2氯吡啶；

(2)化合物402在钯试剂催化下与R₁NH₂反应生成化合物403；

(3)化合物403用NIS碘化生成化合物404；

(4)化合物404在钯试剂催化下与硼烷-2-丁烯酸乙酯反应生成化合物405；

(5)化合物405在碱性条件下关环生成化合物406；

(6)化合物406与溴素反应生成溴化合物407；

(7)化合物407在钯试剂的催化下与三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡反应生成乙氧基乙烯基化合物408；

(8)化合物408在钯试剂催化下与化合物308反应生成化合物409；

(9)化合物409在酸性条件下水解生成目标化合物；

反应路线如下：

其中：化合物308按照权利要求17中的方法制备。

本发明还公开了上述的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)化合物501首先用有机锂试剂与炔的末端质子交换，随后与三丁基氯化锡反应生成化合物502；

(2)化合物111在钯试剂催化下与化合物502反应生成目标化合物；

反应路线如下：

本发明还公开了上述的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体或其前药分子在制备防治肿瘤药物中的应用。

在其中一些实施例中，所述肿瘤为实体肿瘤和血液肿瘤。

在其中一些实施例中，所述实体肿瘤和血液肿瘤包括乳腺癌，脂肪肉瘤，非小细胞肺癌，肝癌，卵巢癌，胶质母细胞瘤，黑素瘤，多发性骨髓瘤和套细胞淋巴瘤。

在其中一些实施例中，所述乳腺癌包括：在绝经后女性***受体阳性(ER⁺)和/或人表皮生长因子受体2阴性(HER₂ ^-)的局部晚期或转移性乳腺癌。

本发明还公开了一种防治肿瘤的药物组合物，包括作为活性成份的上述的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体或其前药分子，以及药学上可接受的载体。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明的式Ⅰ所示的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物，是一系列新的化合物，该类化合物可以选择性抑制CDK4和CDK6，能够用于CDK4和CDK6所参与细胞周期控制失调导致各种疾病，特别适用于恶性肿瘤的治疗。

特别是其中部分化合物具有选择性高、活性高和抗肿瘤细胞增殖作用强的特点，对CDK4和CDK6抑制的IC₅₀能达到50nM以下，而对CDK2抑制的IC₅₀大于500nM，几乎无抑制活性。

本发明的式Ⅰ所示的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物中，研究数据表明，R₂和R₃的取代基对增强CDK6/CDK4的选择性具有较大的影响。R₃首选小的烷基如甲基。R2需要有富电子的基团，如羰基及炔基等。R₂的具体活性表征是：在脂肪族炔基系列，含羟基或烷氧基的炔基显示较高的活性；在芳香族炔基系列，芳环上胺基取代对活性有利；当R₂是羰基的化合物中，乙酰基为首选。R₁可包容烷基和环烷基，以环戊基为首选。R₁₁或R₄或R₅基团可变性较大，但需要一个带碱性的含氮的环状结构。R₆对取代基种类敏感，以H为首选，当R₆是甲基时，活性降低。

具体实施方式

除在文献中已知的或在实验室程序中例证的标准方法外，可采用如下列方案中显示的反应制备本发明化合物。因此，下列说明性方案是为说明的目的而不是局限于所列化合物或任何特定的取代基，所述的方法仅仅意在进行描述，并且并不构成对本发明所具有的范围的限制。

方案一

方案二

方案三

方案四

方案五

实施例1化合物1的制备(按照方案一线路制备)

步骤1a：4-环戊胺基-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯(4-Cyclopentylamino -2-methylsulfanyl-pyrimidine-5-carboxylic Acid Ethyl Ester)(化合物102)的制备：将4-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯(101)(30.06克，129毫摩尔，1.0当量)溶解在四氢呋喃(300毫升)中，然后环戊胺(12.3克，141.6毫摩尔,1.1当量)和三乙胺(39.6克，387毫摩尔，3.0当量)逐渐慢慢加入到该溶液中，并在室温将混合物搅拌14小时。将沉淀的盐过滤，并将溶剂在减压条件下减压浓缩除去。将所得油状物溶解在乙酸乙酯中，并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。将有机相经硫酸钠干燥。将盐过滤，并将溶剂在减压条件下减压浓缩除去，得到4-环戊胺基-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯，为橙色油状物(33.7克，收率：92.5％)。

步骤1b：(4-环戊胺基-2-甲硫基嘧啶-5-基)-甲醇((4-(cyclopentylamino)-2-(methylthio)pyrimidin-5-yl)methanol)(化合物103)的制备：在氮气保护下，四氢锂铝(6.822克，0.18摩尔，1.5当量)悬浮在无水的四氢呋喃(200毫升)中，用冰浴冷却。化合物102(33.7克，0.12摩尔，1.0当量)溶解在干燥的四氢呋喃(200毫升)中，并在保持反应温度低于12℃下，逐滴加入到冷却的四氢锂铝溶液中。在室温下搅拌4小时后，通过慢慢加入冰水(7毫升)将反应猝灭，然后加入15％的氢氧化钠溶液(14毫升)，再加水(7毫升)。白色固体沉淀物过滤，并在真空中的将母液减压浓缩除去。将所得的固体，用庚烷洗涤，过滤，得到(4-环戊胺基-2-甲硫基嘧啶-5-基-甲醇，为浅黄色固体(29.03克，收率：100％)。

步骤1c：4-环戊胺基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛(4-(cyclopentylamino)-2-(methylthio)pyrimidine-5-carbaldehyde)(化合物104)的制备：将化合物(103)(29.03克，0.12摩尔，1.0当量)溶解在三氯甲烷(500毫升)中，随后加入二氧化锰(80.5克，0.926摩尔，7.7当量)，并将混合物在室温下搅拌16小时。通过硅藻土垫过滤除去固体，并用三氯甲烷洗涤。减压减压浓缩除去溶剂得到化合物4-环戊胺基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛，为浅黄色固体(24.9克，收率：86.8％)。

步骤1d：5-乙酰基-4-环戊胺基-2-甲硫基嘧啶(1-(4-(cyclopentylamino)-2-(methylthio)pyrimidin-5-yl)ethan-1-one)(化合物105)的制备：将化合物104(24.88克，0.105摩尔，1.0当量)溶解在四氢呋喃(100毫升)中，在氮气保护下，然后用冰浴冷却，甲基溴化镁(37.548克，0.315摩尔，3.0当量)缓慢加入到溶液中。将反应混合物搅拌1.5小时，然后用少量的饱和氯化铵水溶液猝灭，加入水。将混合物用乙酸乙酯萃取，将有机相用硫酸钠干燥。过滤取滤液，并将溶剂在真空中减压浓缩除去，得到一种油状物(23.98克，粗品)。该油状物溶解在二氯甲烷(500毫升)中，二氧化锰(96.5克，1.11摩尔)加入到该溶液中。将反应混合物在室温搅拌16小时。通过硅藻土垫过滤除去多余的二氧化锰，并用三氯甲烷洗涤。在真空中减压浓缩除去溶剂得到5-乙酰基-4-环戊胺基-2-甲硫基嘧啶，为浅黄色固体(23.78克，收率：84.6％)。

步骤1e：8-环戊基-5-甲基-2-甲硫基-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7酮(8-Cyclopentyl-5-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-one(化合物106)的制备：在氮气保护下，向在四氢呋喃(200毫升)中冷却的氢化钠(4.8克，0.2摩尔，在矿物油中的60％分散体，16.8当量)悬浮液中，分批加入三乙基膦酰基乙酸酯(48.8克，0.2摩尔，16.8当量)。将冷却浴除去后将溶解在100毫升四氢呋喃中的化合物105(6.0克，11.9毫摩尔，1.0当量)溶液缓慢地逐滴加入到预先形成的阴离子溶液中。将反应混合物回流36小时。将反应混合物冷却至室温，并用水和乙酸乙酯稀释。分离各层，并将水层用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤并用硫酸钠干燥，过滤，将滤液减压浓缩，得到化合物8-环戊基-5-甲基-2-甲硫基-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7酮，为蜡状固体(20.04克，收率：77.7％)。

目标产物表征数据：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆):δ8.92(s,1H),6.45(s,1H),5.90-5.72(m,1H),2.59(s,3H),2.41(s,3H),2.22(s,2H),1.98(s,2H),1.79(s,2H),1.63(d,J＝4.7Hz,2H)。

步骤1f：6-溴-8-环戊基-5-甲基-2-甲硫基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H-酮(6-bromo-8-cyclopentyl-5-methyl-2-(methylthio)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物107)的制备：将化合物106(4克，14.6毫摩尔)溶解在二氯甲烷(100毫升)中，缓慢加入溴素(1.47毫升)，将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用饱和的硫代硫酸钠溶液(15毫升)，然后用饱和的碳酸钠的溶液(20毫升)猝灭。将有机层分离，有机层用水洗和盐水洗涤，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩，得到化合物6-溴-8-环戊基-5-甲基-2-甲硫基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(19.7克，收率：96％)。

目标产物表征数据：¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ8.79(s,1H),6.14–5.91(m,1H),2.62(s,6H),2.28(d,J＝7.3Hz,2H),2.10(s,2H),1.89(s,2H),1.68(d,J＝4.4Hz,2H)。

步骤1g.2-苯磺酰基-3-苯基氧杂氮杂环丙烷(2-Benzenesulfonyl-3-phenyloxaziridine)(化合物108)的制备：将苯磺酰胺(44克，289毫摩尔，1.0当量)和苯甲醛二甲缩醛(50克，318毫摩尔，1.1当量)置于单口瓶中加热至130度，蒸馏出去反应所产生的甲醇，直至反应完全。将温度冷却至室温，加入石油醚和少量的二氯甲烷，过滤得白色固体(Z)-N-苯亚甲基苯磺酰胺(62克，收率：87.5％)。在氮气保护下将(Z)-N-苯亚甲基苯磺酰胺(28克，114毫摩尔，1.0当量)、氯化苄基三乙胺(2.85克，11.4毫摩尔，0.1当量)溶解在200毫升的氯仿中。将间氯过氧苯甲酸(25.4克，137毫摩尔，1.2当量)溶解在300毫升氯仿溶液在0摄氏度下滴加到上述反应液中。室温搅拌6小时，加入亚硫酸氢钠溶液淬灭，用饱和食盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，低温减压浓缩得2-苯磺酰基-3-苯基氧杂氮杂环丙烷(17克，收率：57.1％)。

步骤1h：6-溴-8-环戊基-5-甲基-2-甲基亚磺酰基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(6-bromo-8-cyclopentyl-5-methyl-2-(methylsulfinyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物109)的制备：将化合物107(19.7克，55.8毫摩尔)和2-苯磺酰基-3-苯基氧杂氮杂环丙烷(108)(15.9克，61.4毫摩尔)溶解于二氯甲烷(400毫升)中，并在室温下搅拌18小时。将混合物减压下减压浓缩除去至油状物，该油状物在乙酸乙酯/***中重结晶，过滤并在真空中干燥，得到化合物6-溴-8-环戊基-5-甲基-2-甲基亚磺酰基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮，为白色固体(8.4克，收率：40.9％)。

步骤1i:2-胺基-5-(5-苄基六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶(5-(5-benzylhexahydropyrrolo[3,4-c]pyrrol-2(1H)-yl)pyridin-2-amine)(化合物110-1)的制备：将5-溴-2-硝基吡啶(2.0克，9.85毫摩尔，1.0当量)、四丁基氟化铵(0.182克，0.49毫摩尔，0.5当量)、2-苄基八氢吡咯基[3,4-c]吡咯(2.59克，13毫摩尔，1.3当量)和碳酸钾(1.77克，13毫摩尔，1.3当量)溶解在15毫升二甲基亚砜中。在80度下反应搅拌过夜后，将反应液冷却至室温用二氯甲烷和水萃取，得到的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到黄色固体2-苄基-5-(6-硝基吡啶-3-基)八氢吡咯基[3,4-c]吡咯(2.34克，收率73.4％)。其LCMS(ESI):m/z325[M+1]⁺。

将上述产物(0.98克，3毫摩尔，1.0当量)和钯碳(50毫克，0.46毫摩尔，0.15当量)溶解在50毫升的甲醇中，然后分批加入硼氢化钠(0.5克，13毫摩尔，4.3当量).在回流3小时后，用硅藻土过滤，将滤液浓缩后用二氯甲烷和水萃取，得到的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到棕色固体2-胺基-5-(5-苄基六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶(0.8克，收率：90％)。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z295[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz，CDCl₃):δ8.17(d，J＝9.0Hz，1H)，7.85(d，J＝2.6Hz，1H)，7.30(s，4H)，6.88(dd，J＝9.1，2.6Hz，1H)，3.73–3.67(m，2H)，3.64(s，2H)，3.34(d，J＝10.2Hz，2H)，3.07(s，2H)，2.66(s，4H)。

步骤1j:2-(5-(5-苄基六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-胺基)-6-溴-8-环戊基-5-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(2-(5-(5-benzylhexahydropyrrolo[3,4-c]pyrrol-2(1H)-yl)pyridin-2-ylamino)-6-bromo-8-cyclopentyl-5-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物111-1)的制备：将化合物110-1(600毫克，2.05毫摩尔，1.0当量)和化合物109(0.5克，2.35毫摩尔，1.15当量)溶解在15毫升甲苯中。在氮气保护下回流反应18小时后，将甲苯用旋转蒸发仪浓缩除去。浓缩后的粗品经硅胶柱层析后得到无色油状物2-(5-(5-苄基六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-胺基)-6-溴-8-环戊基-5-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(0.6克，收率：7.4％)。LCMS(ESI):m/z600[M+1]⁺。

步骤1k:6-乙酰基-2-(5-(5-苄基六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-胺基)-8-环戊基-5-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(6-acetyl-2-(5-(5-benzylhexahydropyrrolo[3,4-c]pyrrol-2(1H)-yl)pyridin-2-ylamino)-8-cyclopentyl-5-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物1)的制备：将化合物111-1(90毫克，0.15毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(0.021克，0.018毫摩尔，0.12当量)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡(0.138克，0.375毫摩尔，2.5当量)溶解在5毫升甲苯中，在氮气置换保护下回流搅拌4小时。冷却后用旋转蒸发仪除掉甲苯，浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到黄色固体(60毫克，收率：67.7％),LCMS(ESI):m/z592[M+1]⁺。将固体溶解于5毫升二氯甲烷中，冷却到0摄氏度，加入3毫升4摩尔/升的盐酸后搅拌10分钟。加入饱和碳酸氢钠溶液至偏碱性(PH：8～9)，然后用二氯甲烷和水萃取，将混合的有机相用无水硫酸钠干燥之后，抽滤，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到产物6-乙酰基-2-(5-(5-苄基六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-胺基)-8-环戊基-5-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(40毫克，黄色固体，收率：70％)。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z564[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz，CDCl₃):δ8.77(s，1H)，8.07(d，J＝8.8Hz，1H)，7.85–7.74(m，2H)，7.32–7.30(m，4H)，7.24(m，1H)，7.06(dd，J＝9.0，3.0Hz，1H)，5.88(dt，J＝17.9，8.9Hz，1H)，3.62(s，2H)，3.51–3.39(m，2H)，3.17(dd，J＝9.2，3.3Hz，2H)，2.97(d，J＝12.3Hz，2H)，2.81–2.75(m，2H)，2.55(s，3H)，2.48(dd，J＝9.2，3.5Hz，2H)，2.37(m，5H)，2.06(s，2H)，1.94–1.82(m，2H)，1.69(dd，J＝10.6，5.5Hz，2H)。

实施例2化合物3的制备(按照方案一线路制备)

化合物110-3的制备，合成方法如实施例1中步骤1i，仅是将其中2-苄基八氢吡咯基[3,4-c]吡咯替换为2.5-双环〔2.2.1〕庚烷-2–甲酸叔丁酯，制备得到5-(6-胺基吡啶-3-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(tert-butyl5-(6-aminopyridin-3-yl)-2,5-diazabicyclo[2.2.1]heptane-2-carboxylate)(化合物110-3)。目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 291[M+1]⁺。

化合物111-3的制备，合成方法如实施例1中1j，仅是将其中的化合物110-1替换为110-3，制备得到5-(6-((6-溴-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢嘧啶[2,3-d]-2-嘧啶)胺)-3-吡啶)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(tert-butyl5-(6-((6-bromo-8-cyclopentyl-5-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)amino)pyridin-3-yl)-2,5-diazabicyclo[2.2.1]heptane-2-carboxylate)(化合物111-3)。目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 597[M+1]⁺。

化合物3的制备，将化合物111-3按照实施例1中步骤1k的方法制备得到2-{5-(2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-2-胺基}-6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(2-((5-(2,5-diazabicyclo[2.2.1]heptan-2-yl)pyridin-2-yl)amino)-6-acetyl-8-cyclopentyl-5-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物3)。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 460[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,CDCl₃)：δ8.70(s,1H),8.23(d,J＝2.4Hz,1H),7.75(dd,J＝8.9,2.6Hz,1H),7.09(s,1H),6.41(d,J＝8.9Hz,1H),5.83-5.71(m,1H),4.96(s,1H),4.32(s,1H),3.68–3.61(m,2H),3.32(q,J＝10.7Hz,2H),2.53(d,J＝7.5Hz,3H),2.34(s,3H),2.28(dd,J＝11.2,7.9Hz,3H),2.12–2.05(m,2H),1.89(s,2H),1.82(s,2H),1.61(s,2H)。

实施例3化合物2的制备(按照方案二线路制备)

步骤3a:5-碘-2-氯-4-环戊胺基嘧啶(5-iodine-2-chloro-4-cyclopentyl-aminopyrimidine)(化合物202)的制备：将2,4-二氯-5-碘嘧啶(化合物201)(80.00克，0.291摩尔，1.0当量)溶解在乙醇(800毫升)中，加入三乙胺(88.18克，0.873摩尔，3.0当量)，然后将混合物置于冰浴下搅拌，当温度降至0℃-5℃时，开始滴加环戊胺(49.50克，0.582摩尔，2.0当量)，30分钟滴加完毕，然后保持温度在5℃左右搅拌。HPLC监控，当2,4-二氯-5-碘嘧啶的峰面积比小于1％时，终止反应。将反应液浓缩后加入乙酸乙酯(300毫升)稀释，加入水(300毫升)，萃取，分液。水相用乙酸乙酯(200毫升×2)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(200毫升)萃取后，用无水硫酸钠干燥。真空浓缩有机相，将残留物用硅胶柱分离后得到化合物2-氯-N-环戊基-5-碘嘧啶-4-胺(87.88克，收率：93.5％)。MS(ESI):m/z324[M+1]⁺。

步骤3b：(E)-3-(2-氯-4-环戊胺基嘧啶-5-基)-2-丁烯酸乙酯((E)-Ethyl-3-(2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrimidin-5-yl)but-2-enoate)(化合物203)的制备：将2-氯-N-环戊基-5-碘嘧啶-4-胺(化合物202)(20.00克，0.0619摩尔，1.0当量)溶解在二甲基甲酰胺(200毫升)中，然后依次加入水(20毫升)，碳酸钠(16.40克，0.1547摩尔，2.5当量)，PdCl₂(PPh₃)₂(2.17克，0.0031摩尔，0.05当量)。在氮气的保护下，将混合物置于90℃油浴下搅拌，当温度升至90℃时，开始滴加(Z)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-2-丁烯酸乙酯(ethyl(Z)-3-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)but-2-enoate)(19.32克，0.0805摩尔，1.3当量)，30分钟滴加完毕，然后保持温度在90℃左右搅拌。HPLC监控当2-氯-N-环戊基-5-碘嘧啶-4-胺的峰面积比小于1％时，终止反应。将反应液冷却至室温，过滤，滤饼用甲基叔丁基醚(100毫升)洗涤。往滤液加入甲基叔丁基醚(200毫升)和水(400毫升)，萃取，分液。水相用甲基叔丁基醚(200毫升×2)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(200毫升)萃取后，用无水硫酸钠干燥。真空浓缩有机相，将残留物用硅胶柱分离后得到化合物(E)-3-(2-氯-4-环戊胺基嘧啶-5-基)-2-丁烯酸乙酯(13.85克，收率：72.4％)。LCMS(ESI):m/z 310[M+1]⁺。

步骤3c：2-氯-8-环戊基-5-甲基-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(2-Chloro-8-Cyclopentyl-5-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-one)(化合物204)的制备：将化合物203(20.00克，0.0647摩尔，1.0当量)溶解在二甲基甲酰胺(200毫升)中，然后加入碳酸铯(42.16克，0.1294摩尔，2.0当量)，在室温下搅拌。HPLC监控当化合物203的峰面积比小于1％时，终止反应。将反应液过滤，滤饼用甲基叔丁基醚(100毫升)洗涤。往滤液加入甲基叔丁基醚(200毫升)和水(400毫升)，萃取，分液。水相用甲基叔丁基醚(200毫升×2)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(200毫升)萃取后，用无水硫酸钠干燥。真空浓缩有机相，将残留物用硅胶柱分离后得到化合物2-氯-8-环戊基-5-甲基-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(13.94克，收率：81.9％)。LCMS(ESI):m/z 264[M+1]⁺。

步骤3d：6-溴-2-氯-8-环戊基-5-甲基-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(6-bromo-2-chloro-8-cyclopentyl-5-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-one)(化合物205)的制备：将化合物204(19.84克，0.0754摩尔，1.0当量)溶解在乙酸(200毫升)中，加入乙酸钠(24.75克，0.3017摩尔，4.0当量)，在室温下搅拌，缓慢滴加溴素(48.26克，0.3017摩尔，4.0当量)，20分钟滴加完毕，然后将混合物置于50℃的油浴下搅拌。HPLC监控当化合物204的峰面积比小于1％时，终止反应。将反应液冷却至室温后加入饱和亚硫酸钠水溶液(200毫升)，加入二氯甲烷(300毫升)，萃取，分液。水相用二氯甲烷(150毫升×2)萃取。合并有机相，有机相用饱和碳酸氢钠水溶液(200毫升×3)萃取后，用无水硫酸钠干燥。真空浓缩有机相，将残留物用硅胶柱分离后得到化合物6-溴-2-氯-8-环戊基-5-甲基-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(21.50克，收率：83.1％).LCMS(ESI):m/z 344[M+1]⁺。

步骤3e：5-(六氢环戊烷并[c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-胺(5-(hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)pyridin-2-amine)(化合物110-2)的制备：将5-溴-2-硝基吡啶(1.5克，7.4毫摩尔，1当量)，四丁基碘化铵(1.362克，3.69毫摩尔，0.5当量)，八氢环戊二烯并[C]吡咯(1.569克，10.8毫摩尔，1.5当量)和碳酸钾(3.06克，22.14毫摩尔，3当量)混合于二甲基亚砜(30毫升)中。反应加热到80摄氏度，并且搅拌反应过夜。冷却到室温后，加入水，二氯甲烷萃取。合并有机相并用盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化，得到黄色固体化合物2-(6-硝基吡啶-3-基)-八氢环戊烷并[c]吡咯(2.28克，粗品),LCMS(ESI):m/z234[M+1]⁺。将上述化合物(3克，12.87毫摩尔，1当量)和钯碳(0.067克，0.64毫摩尔，0.05当量)分散在50毫升甲醇中，然后分批加入硼氢化钠(1.47克，38.61毫摩尔，3当量)。升温至回流并反应3小时。过滤，滤饼用甲醇洗，滤液减压浓缩。残留物用乙酸乙酯溶解，碳酸氢钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到红色固体5-(六氢环戊烷并[c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-胺(1.305克，收率：50％),LCMS(ESI):m/z204[M+1]⁺。

步骤3f；6-溴-8-环戊基-2-[5(六氢环戊烷并[c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-胺基]-5-甲基-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(6-bromo-8-cyclopentyl-2-((5-(hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)pyridin-2-yl)amino)-5-methylpyrido[2,3-d]p yrimidin-7(8H)-one)(化合物111-2)的制备：将化合物110-2(475毫克，2.34毫摩尔，2.1当量)溶解于8毫升干燥的甲苯。冰水浴降温并在氮气的氛围下，将LHMDS(2.34毫摩尔，2.1当量，2.34毫升，1摩尔每升的四氢呋喃溶液)滴加到反应体系中。然后滴加2毫升化合物205(380毫克，1.11毫摩尔，1当量)的甲苯溶液。反应下冰浴条件下搅拌1.5小时。反应用饱和碳酸氢钠淬灭，过滤，滤饼用甲苯和水洗涤，得到黄色固体化合物6-溴-8-环戊基-2-[5(六氢环戊烷并[c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-胺基]-5-甲基-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(400毫克，收率：70.92％).LCMS(ESI)：m/z 509[M+1]⁺。

步骤3g:6-乙酰基-8-环戊基-2-[5(六氢环戊烷并[c]吡咯-2-(1H)-基)吡啶-2-胺基]-5-甲基-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(6-acetyl-8-cyclopentyl-2-((5-(hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)pyridin-2-yl)amino)-5-methylpyrido[2,3-d]p yrimidin-7(8H)-one)(化合物2)的制备：在氮气保护下，将化合物111-2(100毫克，0.196毫摩尔，1当量)，四三苯基磷钯(22.7毫克，0.0196毫摩尔，0.1当量)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡(0.106克，0.294毫摩尔，1.5当量)分散于5毫升干燥甲苯。反应升温至回流，并反应3.5小时。反应结束后，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化，得到黄色固体(92毫克，收率：93.65％)。LCMS(ESI):m/z501[M+1]⁺.将黄色固体溶解于15毫升二氯甲烷中。在冰水浴的条件下，滴加4摩尔的盐酸(2毫升)。反应在室温下搅拌0.5小时。用饱和碳酸钠溶液调节PH值至8-9，二氯甲烷萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化，得到黄色固体6-乙酰基-8-环戊基-2-[5(六氢环戊烷并[c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-胺基]-5-甲基-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(15毫克，收率：16.8％)。

目标产物表征数据：LCMS(ESI)m/z473[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz，DMSO-D₆)：δ9.92(s，1H)，8.92(s，1H)，7.80–7.72(m，2H)，7.12(dd，J＝9.0，3.0Hz，1H)，5.79(dd，J＝18.0，9.1Hz，1H)，3.41(dd，J＝9.4，7.9Hz，2H)，3.01(dd，J＝9.6，3.7Hz，2H)，2.77(d，J＝3.6Hz，2H)，2.42(s，3H)，2.30(s，3H)，2.24(dd，J＝11.2，7.8Hz，2H)，1.90–1.63(m，7H)，1.62–1.52(m，3H)，1.52–1.43(m，2H)。

实施例4化合物4的制备(按照方案二线路制备)

4-(6-胺基吡啶-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(tert-butyl-4-(6-aminopyridin-3-yl)piperidine-1-carboxylate)(化合物110-4)的制备：将5-溴-2硝基吡啶(2.6克，12.8毫摩尔，1.0当量)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(tert-butyl-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-3,6-dihydropyridine-1(2H)-carboxylate)(4.8克，15.5毫摩尔，1.2当量)，双三苯基磷二氯化钯(0.9克，1.28毫摩尔，0.1当量)，碳酸铯(8.4克，25.8毫摩尔，2当量)溶解于15毫升水和150毫升N,N-二甲基甲酰胺中。在氮气保护下，将反应体系置于预先加热的90度油浴中，加热反应1小时。反应完成后，将反应体系冷却至室温，乙酸乙酯萃取，将有机相用饱和食盐水洗涤多次，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。最后用硅胶柱层析纯化得到黄色固体，即6-硝基吡啶-3’,6’-二氢-[3,4'-吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(3.53克，收率：90％)。MS(ESI):m/z 306[M+H]⁺。将上述化合物(3.53克，11.6毫摩尔，1.0当量)溶解于100毫升甲醇中，然后加入钯碳(0.353克)。在氢气条件下，室温搅拌反应过夜。反应完成后，过滤，以除去反应液中的钯碳，用甲醇洗涤滤饼多次，将滤液减压浓缩。最后用硅胶柱层析纯化得到黄色固体，即4-(6-胺基吡啶-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.5克，收率：78％)。MS(ESI):m/z 278[M+H]⁺。

6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-(哌啶-4-基)吡啶-2-胺基)-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(6-acetyl-8-cyclopentyl-5-methyl-2-((5-(piperidin-4-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物4)的制备：合成方法如实施例3，仅是将其中的化合物110-2替换为化合物110-4。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 447[M+H]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D₆):δ10.21(s,1H),8.99(s,1H),8.22(s,1H),7.98(d,J＝8.5Hz,1H),7.69(d,J＝8.6Hz,1H),5.84(m,1H),3.03(d,J＝11.9Hz,2H),2.60(dd,J＝23.9,11.9Hz,3H),2.43(s,3H),2.32(s,3H),2.26(s,3H),1.90(s,2H),1.79(s,2H),1.70(d,J＝12.0Hz,2H),1.55(ddd,J＝21.3,11.3,7.0Hz,4H)。

实施例5化合物5的制备(按照方案二线路制备)

将实施例4所得的化合物4(100毫克，0.224毫摩尔，1.0当量)和碳酸钾(62毫克，0.448毫摩尔，2.0当量)分散于20毫升N,N-二甲基甲酰胺中。在氮气保护下，向反应体系中滴加溶于3毫升N,N-二甲基甲酰胺的碘乙烷(0.02毫升，0.268毫摩尔，1.2当量)溶液，室温搅拌反应5小时。待反应完全后，减压浓缩，最后用制备色谱纯化得到白色固体，即6-乙酰基-8-环戊基-2-(5-(1-乙基哌啶-4-基)吡啶-2-胺基)-5-甲基-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(6-acetyl-8-cyclopentyl-2-((5-(1-ethylpiperidin-4-yl)pyridin-2-yl)amino)-5-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物5)(27毫克，收率：25％)。

目标产物表征数据：MS(ESI):m/z 475[M+1]⁺。¹H NMR(500MHz,DMSO-D₆):δ10.20(s,1H),8.99(s,1H),8.24(s,1H),7.99(s,1H),7.74(s,1H),5.84(s,1H),2.99(s,2H),2.42(s,3H),2.32(dd,J＝30.4,18.1Hz,8H),1.93(d,J＝31.4Hz,4H),1.69(m,8H),1.02(s,3H)。

实施例6化合物6的制备(按照方案二线路制备)

将实施例4所得的化合物4(100毫克，0.224毫摩尔，1.0当量)和三乙胺(0.06毫升，0.448毫摩尔，2.0当量)分散于20毫升四氢呋喃中。在冰浴条件下，向反应体系中滴加甲磺酰氯(0.026毫升，0.336毫摩尔，1.5当量)，室温搅拌反应0.5小时。待反应完全后，用二氯甲烷萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。最后用硅胶柱层析纯化得到白色固体，即6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-(1-甲磺酰基哌啶-4-基)吡啶-2-胺基)-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(6-acetyl-8-cyclopentyl-5-methyl-2-((5-(1-(methylsulfonyl)piperidin-4-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物6)(26毫克，收率：22％)。

目标产物表征数据：MS(ESI):m/z 525[M+1]⁺。¹H NMR(500MHz,DMSO-D₆):δ10.25(s,1H),9.00(s,1H),8.28(s,1H),8.01(d,J＝8.5Hz,1H),7.77(d,J＝6.5Hz,1H),5.85(m,1H),3.70(d,J＝12.1Hz,2H),2.91(s,3H),2.83(t,J＝11.2Hz,2H),2.69(t,J＝12.3Hz,1H),2.43(s,3H),2.32(s,3H),2.27(s,2H),1.90(d,J＝11.7Hz,4H),1.74(m,4H),1.60(d,J＝5.0Hz,2H)。

实施例7化合物7的制备(按照方案二线路制备)

将实施例4所得的化合物4(100毫克，0.224毫摩尔，1.0当量)和碳酸钾(62毫克，0.448毫摩尔，2.0当量)分散于20毫升N,N-二甲基甲酰胺中。在氮气保护下，向反应体系中滴加溶于3毫升N,N-二甲基甲酰胺的2-溴乙醇(0.032毫升，0.448毫摩尔，2.0当量)溶液，加热至80度，搅拌反应过夜。待反应完全后，减压浓缩，最后用制备色谱纯化得到白色固体，即6-乙酰基-8-环戊基-2-(5-(1-(2-羟乙基)哌啶-4-基)吡啶-2-胺基)-5-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(6-acetyl-8-cyclopentyl-2-((5-(1-(2-hydroxyethyl)piperidin-4-yl)pyridin-2-yl)amino)-5-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物7)(62毫克，收率：57％)。

目标产物表征数据：MS(ESI):m/z 491[M+1]₊。¹H NMR(500MHz,DMSO-D₆):δ10.21(s,1H),8.99(s,1H),8.24(d,J＝2.1Hz,1H),7.98(d,J＝8.5Hz,1H),7.72(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),5.84(p,J＝8.9Hz,1H),4.33(s,1H),3.52(s,2H),2.98(d,J＝11.4Hz,2H),2.42(m,5H),2.28(m,5H),2.07(dd,J＝11.6,9.4Hz,2H),1.90(s,2H),1.69(m,9H)。

实施例8化合物16的制备(按照方案三路线制备)

步骤8a：2-氯-4-胺基-5-碘吡啶(2-chloro-5-iodopyridin-4-amine)(化合物302)的制备：在氮气保护下，将2-氯-4-胺基吡啶(15克，0.116摩尔，1当量)溶解于乙腈(200毫升)，油浴加热到70摄氏度，缓慢加入NIS(33克，0.139摩尔，1.2当量)，搅拌16小时。冷却至室温，加入饱和碳酸钠水溶液将反应体系PH值调节至9-10，加入乙酸乙酯(500毫升)萃取。分出有机相，并用饱和食盐水(100毫升)洗2次，用无水硫酸钠干燥后，真空下浓缩得2-氯-4-胺基-5-碘吡啶(23克，收率：78.1％),LCMS(ESI):m/z 255[M+1]⁺。

步骤8b：2-氯-4-环戊胺基-5-碘吡啶(2-chloro-N-cyclopentyl-5-iodopyridin-4-amine)(化合物303)的制备：在氮气保护下，将化合物302(23克，90.6毫摩尔，1当量)，碳酸铯(177克，0.544摩尔，6当量)，溴代环戊烷(81克，0.544摩尔，6当量)加入到反应瓶中，二氯亚砜(500毫升)作溶剂加热到90摄氏度搅拌反应36小时。过滤，乙酸乙酯萃取，有机相用水(500毫升)洗三次，饱和食盐水(400毫升)洗三次，无水硫酸钠干燥，真空浓缩得2-氯-4-环戊胺基-5-碘吡啶(6克，收率：20.5％),LCMS(ESI):m/z 323[M+1]⁺。

步骤8c:(E)-3-[6-氯-4-环戊胺基吡啶-3-基]-2-丁烯酸乙酯(ethyl(E)-3-(6-chloro-4-(cyclopentylamino)pyridin-3-yl)but-2-enoate)(化合物304)的制备：在氮气保护下，化合物303(6克，18.6毫摩尔，1当量)，碳酸钠(4.93克，46.5毫摩尔，2.5当量)，(Z)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-2-丁烯酸乙酯(ethyl(Z)-3-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)but-2-enoate)(5.8克，24.2毫摩尔，1.3当量)和双三苯基磷二氯化钯(1.31克，1.86毫摩尔，0.1当量)放入反应瓶中DMF和水(10:1)作溶剂，加热到90摄氏度，反应3.5小时。加入乙酸乙酯(400毫升)，水(200毫升)洗3次，盐水(100毫升)洗1次，浓缩后得粗品，通过硅胶柱层析分离纯化得(E)-3-[6-氯-4-环戊胺基吡啶-3-基]-2-丁烯酸乙酯(5.2克，收率：90.9％),LCMS(ESI):m/z 309[M+1]⁺。

步骤8d：7-氯-1-环戊基-4-甲基-1,6-萘啶-2(1H)-酮(7-chloro-1-cyclopentyl-4-methyl-1,6-naphthyridin-2(1H)-one)(化合物305)的制备：将化合物304(5.2克，16.9毫摩尔，1当量)溶于甲苯(20毫升)，加入DBU(2.57克，1.69毫摩尔，0.1当量)，加热至回流，搅拌16小时。降至室温，浓缩，通过柱层析分离纯化得7-氯-1-环戊基-4-甲基-1,6-萘啶-2(1H)-酮(3.7克，收率：83.4％)。LCMS(ESI):m/z 263[M+1]⁺。

步骤8e：3-溴-7-氯-1-环戊基-4-甲基-1,6-萘啶-2(1H)-酮(3-bromo-7-chloro-1-cyclopentyl-4-methyl-1,6-naphthyridin-2(1H)-one)(化合物306)的制备：化合物305(3.7克，14.1毫摩尔，1当量)溶于冰醋酸(10毫升)，加入醋酸钠(4.62克，56.4毫摩尔，4当量)，加热到50摄氏度，将溴素(4.9克，15.5毫摩尔，1.1当量)溶于醋酸，缓慢滴入反应瓶。搅拌3.5小时。冷却至室温，缓慢加入饱和硫代硫酸钠水溶液至澄清，滴入饱和碳酸钠水溶液将反应体系PH值调节至9-10，加入DCM(200毫升)萃取，浓缩后得粗品，通过硅胶柱层析分离纯化得3-溴-7-氯-1-环戊基-4-甲基-1,6-萘啶-2(H)-酮(3克，收率：62.6％)。LCMS(ESI):m/z 341[M+1]⁺。

步骤8f：7-氯-1-环戊基-3-(1-乙氧基乙烯基)-4-甲基-1,6-萘啶-2(1H)-酮(7-chloro-1-cyclopentyl-3-(1-ethoxyvinyl)-4-methyl-1,6-naphthyridin-2(1H)-one)(化合物307)的制备：在氮气保护下，将化合物306(1.5克，4.41毫摩尔，1当量)，四三苯基磷钯(509毫克，0.44毫摩尔，0.1当量)和三丁基(1-乙氧基乙烯)锡(2.07克，5.73毫摩尔，1.3当量)置于反应瓶溶于甲苯(20毫升)，加热至回流反应16小时。减压浓缩得粗品，通过硅胶柱层析分离提纯得7-氯-1-环戊基-3-(1-乙氧基乙烯基)-4-甲基-1,6-萘啶-2(1H)-酮(1.0克，收率：68.3％)。LCMS(ESI):m/z333[M+1]⁺。

步骤8g：4-(6-胺基吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(tert-butyl 4-(6-aminopyridin-3-yl)piperazine-1-carboxylate)(化合物308-16)的制备：将5-溴-2-硝基吡啶(40克，197毫摩尔,1.0当量)、四丁基碘化铵(29.95克，216.7毫摩尔，1.1当量)、哌嗪(20.06克，256.1毫摩尔，1.3当量)和碳酸钾(29.95克，216.7毫摩尔1.1当量)溶解在450毫升二甲基亚砜中。在80度下反应搅拌过夜后，将反应液冷却至室温用二氯甲烷和水萃取，得到的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到黄色固体4-(6-硝基吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(48.9克，粗品)。将上述所得的化合物(48.9克，197毫摩尔，1.0当量)和锌粉(51.52克，788毫摩尔，4.0当量)溶解在1000毫升的甲醇中，加入氯化铵(42.15克，788毫摩尔，4.0当量)。室温搅拌1小时后，用硅藻土过滤，将滤液浓缩后用二氯甲烷和水萃取，得到的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到棕色固体4-(6-胺基吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(26.0克，两步总收率：90％)。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)：δ9.11(s,1H),6.19–5.97(m,1H),2.98(s,3H),2.72(s,3H),2.23(s,2H),2.14(s,2H),1.95(s,2H),1.70(s,2H)。

步骤8h：4-(6-(1-环戊基-3-(1-乙氧基乙烯基)-4-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,6-萘啶-7-胺基)吡啶-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(tert-butyl 4-(6-((1-cyclopentyl-3-(1-ethoxyvinyl)-4-methyl-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-7-yl)amino)pyridin-3-yl)piperazine-1-carboxylate)(化合物309-16)的制备：在氮气保护下，化合物307(120毫克，0.361毫摩尔，1当量)，化合物308-16(151毫克，0.542毫摩尔,1.5当量)，碳酸铯(259毫克，0.794毫摩尔，2.2当量)，三(二亚苄基丙酮)二钯(33毫克，0.036毫摩尔，0.1当量)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(21毫克，0.036毫摩尔，0.1当量)放入装有甲苯(20毫升)的反应瓶，加热到回流反应6小时。减压浓缩得油状粗品，通过硅胶柱层析分离纯化得4-(6-(1-环戊基-3-(1-乙氧基乙烯基)-4-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,6-萘啶-7-胺基)吡啶-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100毫克，收率：48.5％)。LCMS(ESI):m/z 575[M+1]⁺。

步骤8i：3-乙酰基-1-环戊基-4-甲基-7-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-1,6-萘啶-2(1H)-酮(3-acetyl-1-cyclopentyl-4-methyl-7-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)-1,6-naphthyridin-2(1H)-one)(化合物16)的制备：化合物309-16(100毫克，0.175毫摩尔，1当量)溶于二氯甲烷，加入3毫升6摩尔每升的盐酸水溶液搅拌反应3小时，用碳酸钠水溶液调节体系PH值到9-10，二氯甲烷萃取，减压浓缩得黄色固体3-乙酰基-1-环戊基-4-甲基-7-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-1,6-萘啶-2(1H)-酮(60毫克，收率：77.1％)。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 447[M+1]⁺。¹H NMR(500MHz,DMSO-D₆)：δ9.85(s,1H),8.74(s,1H),8.10(s,1H),7.88(d,J＝2.8Hz,1H),7.42(dd,J＝9.1,2.9Hz,1H),7.36(d,J＝9.0Hz,1H),5.65(m,1H),3.00(m,4H),2.85(m,4H),2.43(s,3H),2.33(s,3H),2.24(m,2H),2.15(m,2H),1.88(m,2H),1.73(m,2H)。

实施例9化合物17的制备(按照方案三线路制备)

4-(6-(1-环戊基-3-(1-乙氧基乙烯基)-4-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,6-萘啶-7-胺基)吡啶-3-基)吡啶-1-甲酸叔丁酯(tert-butyl 4-(6-((1-cyclopentyl-3-(1-ethoxyvinyl)-4-methyl-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-7-yl)amino)pyridin-3-yl)piperidine-1-carboxylate)(化合物309-17)的制备：将化合物307(150毫克，0.45毫摩尔，1.0当量)，110-4(165毫克，0.585毫摩尔，1.3当量)，碳酸铯(300毫克，0.9毫摩尔，2.0当量)，4,5-双二苯基磷-9,9-二甲基氧杂蒽(21毫克，0.036毫摩尔，0.08当量)分散于30毫升甲苯中。在氮气保护下，加入Pd₂(dba)₃(毫克，0.018毫摩尔，0.04当量)。将该反应体系置于预先加热的130℃油浴中加热回流，搅拌反应6小时。反应完成后，冷却至室温，减压浓缩。最后用硅胶柱层析纯化得到黄色固体，即4-(6-(1-环戊基-3-(1-乙氧基乙烯基)-4-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,6-萘啶-7-胺基)吡啶-3-基)吡啶-1-甲酸叔丁酯(176毫克，收率：68％)。MS(ESI):m/z 574[M+H]⁺。

3-乙酰基-1-环戊基-4-甲基-7-(5-(哌啶-4-基)吡啶-2-胺基)-1,6-萘啶-2(1H)-酮(3-acetyl-1-cyclopentyl-4-methyl-7-((5-(piperidin-4-yl)pyridin-2-yl)amino)-1,6-naphthyridin-2(1H)-one)(化合物17)的制备：合成方法如实施例8，仅是将其中的309-16替换为309-17。目标产物表征数据：MS(ESI):m/z 446[M+1]⁺。¹H NMR(500MHz,DMSO-D⁶)：δ10.08(d,J＝17.5Hz,1H),8.77(d,J＝11.5Hz,1H),8.30(s,1H),8.14(d,J＝9.4Hz,1H),7.61(m,1H),7.41(d,J＝8.6Hz,1H),5.70(m,1H),3.36(m,3H),2.98(t,J＝11.5Hz,1H),2.86(t,J＝11.9Hz,1H),2.43(s,3H),2.36(d,J＝8.5Hz,3H),2.26(m,4H),1.85(m,8H)。

实施例10化合物18的制备(按照方案三线路制备)

5-(4-(吡咯烷-1-)哌啶-1-)吡啶-2-氨(5-(4-(pyrrolidin-1-yl)piperidin-1-yl)pyridin-2-amine)(化合物308-18)的制备：将4,4-哌啶二醇盐酸盐(12克，0.078摩尔，1.0当量)溶解于100毫升水中。于该溶液中，依次加入氢氧化钠(3.44克，0.086摩尔，1.1当量)、二碳酸二叔丁酯(15.77毫升，0.078摩尔，1.0当量)和四氢呋喃(100毫升)，在室温下搅拌。反应16小时后，用二氯甲烷600毫升分三次萃取反应液，再用饱和食盐水洗有机相。所得有机相经由无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，得白色晶体N-叔丁氧羰基-4-哌啶酮(15克，收率：98.6％)。

此白色晶体化合物(4.5克，0.0226摩尔，1.0当量)，醋酸钠(2.8克，0.034摩尔，1.5当量)，醋酸(2.2毫升)和吡咯烷(2.2克，0.031摩尔，1.4当量)溶于四氢呋喃(100mL)中，室温搅拌1小时后，往里加入醋酸硼氢化钠(9.6克，0.0452摩尔，2.0当量)。反应16小时后，减压浓缩，用氢氧化钠水溶液调节至碱性，二氯甲烷萃取。所得有机相经由无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，得到无色油状液体4-吡咯烷基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.5克，收率：79％)。LCMS(ESI):m/z255[M+1]⁺。

将上述化合物(4.5克，0.0177摩尔，1.0当量)溶于三氟乙酸(50毫升)，室温搅拌16小时，减压浓缩得到棕色油状液体产品4-吡咯烷基哌啶(2.5克，粗品)。将此化合物(2.7克，17.5毫摩尔，1.3当量)，5-溴-2-硝基吡啶(2.97克，13.5毫摩尔，1.0当量)，四丁基碘化铵(0.247克，6.7毫摩尔，0.5当量)和碳酸钾(4.65克，33.7毫摩尔，2.5当量)溶于二甲基亚砜(50毫升)中，升温至80度反应16小时。冷却到室温后，将其倒入100毫升水中，再用二氯甲烷萃取三遍。所得有机相经由无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，硅胶柱层析纯化得到2-硝基-5-(4-(吡咯烷-1-)哌啶-1-)吡啶(1.85克，收率：50％)。LCMS(ESI):m/z277[M+1]⁺。

将上述化合物(3.0克，10.9毫摩尔，1.0当量)，氯化铵(4.9克，92.7毫摩尔，8.5当量)和水(3毫升)溶于乙醇(50毫升)，搅拌条件下往里分批加入铁粉(4.9克，87.5毫摩尔，8.0当量)。升温回流反应2小时，冷却，过滤，乙酸乙酯和甲醇洗涤，减压浓缩，硅胶柱层析纯化得到棕色固体5-(4-(吡咯烷-1-)哌啶-1-)吡啶-2-氨(1.5g，收率：56％)。LCMS(ESI):m/z247[M+1]⁺。

3-乙酰基-1-环戊基-4-甲基-7-(5-(4-(吡咯-1-基)哌啶-1-基)吡啶-2-胺基)-1,6-萘啶-2(1H)-酮(3-acetyl-1-cyclopentyl-4-methyl-7-((5-(4-(pyrrolidin-1-yl)piperidin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)-1,6-naphthyridin-2(1H)-one)(化合物18)的制备：合成方法如实施例8，仅是将其中的308-16替换为308-18。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 515[M+1]⁺。¹H NMR(500MHz,DMSO-D₆)：δ9.84(s,1H),8.74(s,1H),8.09(s,1H),7.91(d,J＝2.9Hz,1H),7.44(dd,J＝9.1,3.0Hz,1H),7.35(d,J＝9.0Hz,1H),5.65(p,J＝9.4Hz,1H),3.53(d,J＝12.3Hz,2H),2.71(t,J＝10.6Hz,2H),2.51(s,3H),2.43(s,3H),2.33(m,3H),2.17(m,6H),1.90(m,4H),1.72(m,6H),1.53(td,J＝13.6,3.7Hz,2H)。

实施例11化合物19的制备(按照方案三线路制备)

2-胺基-5-(4-二甲胺基哌啶-1-基)吡啶(5-(4-(dimethylamino)piperidin-1-yl)pyridin-2-amine)(化合物308-19)的制备：合成方法如实施例10，仅是将其中的吡咯烷替换为二甲胺盐酸盐。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 221[M+1]⁺。

3-乙酰基-1-环戊基-7-[5-(4-二甲胺基哌啶-1-基)吡啶-2-胺基]-4-甲基-1,6-萘啶-2(1H)-酮(3-acetyl-1-cyclopentyl-7-((5-(4-(dimethylamino)piperidin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)-4-methyl-1,6-naphthyridin-2(1H)-one)(化合物19)的制备：合成方法如实施例8，仅是将其中的308-16替换为308-19。

目标产物表征数据：熔点：209-211℃.LCMS(ESI):m/z 489[M+1]⁺。¹H NMR(500MHz,MeOD)：δ8.72(s,1H),8.10(s,1H),7.98(d,J＝2.7Hz,1H),7.46(dd,J＝8.9,2.9Hz,1H),7.21(d,J＝9.0Hz,1H),5.69(m,1H),3.70(d,J＝12.4Hz,2H),2.76(m,2H),2.70(m,1H),2.53(s,6H),2.47(s,3H),2.39(s,3H),2.34(m,2H),2.18(m,2H),2.07(m,2H),1.97(d,J＝9.1Hz,2H),1.83–1.68(m,5H).

实施例12化合物21的制备(按照方案三线路制备)

5-(4-乙基哌啶-1-)甲基吡啶-2-氨(5-((4-ethylpiperazin-1-yl)methyl)pyridin-2-amine)(化合物308-21)的制备：将6-溴吡啶-3-甲醛(5克，26.9毫摩尔，1.0当量)和4-乙基哌啶溶于二氯甲烷(100毫升)，搅拌2小时后，往里分批加入醋酸硼氢化钠(6.2克，29.2毫摩尔，1.1当量)。反应16小时，往里加入2摩尔每升的氢氧化钠水溶液调节PH到碱性，再用二氯甲烷萃取，减压浓缩得到白色固体1-(6-溴吡啶-3-)甲基-4-乙基哌啶(6.98g，收率：91.4％)，MS(ESI):m/z＝285[M+H]⁺。

将上述化合物(6.98克，24.6毫摩尔，1.0当量)，氧化亚铜(97毫克，1.23毫摩尔，0.05当量)和甲醇(10毫升)溶于氨水(30毫升)，升温到70度反应16小时。冷却过滤，二氯甲烷萃取，减压浓缩，通过硅胶柱层析分离纯化得5-(4-乙基哌啶-1-)甲基吡啶-2-氨(2.0g，收率：36.4％)。MS(ESI):m/z＝221[M+H]⁺。

3-乙酰基-1-环戊基-7-(5-(4-乙基哌啶-1-基)甲基吡啶-2-胺基)-4-甲基-1,6-萘啶-2(1H)-酮3-acetyl-1-cyclopentyl-7-((5-((4-ethylpiperazin-1-yl)methyl)pyridin-2-yl)amino)-4-methyl-1,6-naphthyridin-2(1H)-one(化合物21)的制备：合成方法如实施例8，仅是将其中的308-16替换为308-21。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 489[M+1]⁺。^{1H NMR}(500MHz,MeOD)δ8.76(s,1H),8.40(s,1H),8.21(s,1H),7.66(dd,J＝8.5,2.1Hz,1H),7.23(d,J＝8.5Hz,1H),5.73(p,J＝9.2Hz,1H),3.52(s,2H),2.42(m,18H),2.24(s,2H),1.98(m,2H),1.82(m,2H),1.09(t,J＝7.2Hz,3H)。

实施例13化合物29的制备(按照方案五线路制备)

步骤13a：叔丁基二甲基(3-(三丁基锡基)丙炔-1-基)-氧硅烷(tert-butyldimethyl((3-(tributylstannyl)prop-2-yn-1-yl)oxy)silane)(化合物502-29)的制备：将叔丁基二甲基氯硅烷(15克，93.6毫摩尔，1.05当量)，丙炔醇(5克，89毫摩尔，1.0当量)和咪唑(12克，178毫摩尔，2.0当量)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(70毫升)中，并在室温下搅拌过夜。将反应液倒进水中，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗二至三次，然后用无水硫酸钠干燥，再浓缩。残留物过柱纯化得到黄色油状化合物叔丁基二甲基-(丙炔基-1-)氧硅烷(7.82克，收率：52％)。在氮气保护下，将所得到的叔丁基二甲基-(丙炔基-1-)氧硅烷(1.80克，10.6毫摩尔，1.0当量)溶解于干燥的四氢呋喃(50毫升)中，然后降温至-60℃，滴加正丁基锂(6毫升，13.8毫摩尔，1.3当量)，然后在此温度下搅拌半小时，继而在0℃搅拌半小时。反应再降至-60℃，滴加三丁基氯化锡(3.4克，10.6毫摩尔，1.0当量)，搅拌半小时后升至室温搅拌5小时。用水淬灭反应，然后用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水清洗，再用无水硫酸钠干燥，浓缩。残留物快速过柱纯化得到黄色油状化合物叔丁基二甲基(3-(三丁基锡基)丙炔-1-基)-氧硅烷(2.78克，收率：57％)。

步骤13b：4-(6-((6-溴-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-胺基)吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(tert-butyl 4-(6-((6-bromo-8-cyclopentyl-5-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)amino)pyridin-3-yl)piperazi ne-1-carboxylate)(化合物111-29)的制备：将化合物109(500毫克，1.35毫摩尔，1.0当量)和化合物308-16(524毫克，1.62毫摩尔，1.2当量)溶解在甲苯中加热回流搅拌21小时。将反应液冷却过滤用甲苯和水洗涤的黄色固体4-(6-((6-溴-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-胺基)吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(209毫克，收率：26.5％)。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z584.2[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.79(s,1H),8.19-8.17(d,J＝10.0Hz,1H),8.03(s,1H),7.98(s,1H),7.35-7.33(d,J＝10.0Hz,1H),6.00-5.97(m,1H),3.61(s,4H),3.12(s,4H),2.61(s,3H),2.32(s,2H),2.11(s,2H),1.89(s,2H),1.69(s,2H)。

步骤13c：8-环戊基-6-(3-羟基丙炔-1-基)-5-甲基-2-[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(8-cyclopentyl-6-(3-hydroxyprop-1-yn-1-yl)-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物29)的制备。将化合物111-29(150毫克，0.25毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(30毫克，0.025毫摩尔，0.1当量)和化合物502-29(133毫克，0.4毫摩尔，1.6当量)分散在甲苯(10毫升)中，然后在氮气保护下加热回流4.5小时。反应混合物冷却至室温，浓缩，得到的残留物过柱纯化得到黄色固体(104毫克，收率：61.7％)。LCMS(ESI):m/z674[M+1]⁺。

将上述固体溶解于二氯甲烷(100毫升)中，然后冰浴冷却。向反应液滴加三氟乙酸(3毫升)，然后在室温搅拌过夜。用饱和碳酸钠溶液调反应液的PH值到8-9，分液。有机相用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得黄色固体，通过柱层析纯化得到黄色固体化合物8-环戊基-6-(3-羟基丙炔-1-基)-5-甲基-2-[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(42毫克，收率：60.8％)。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z460[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.07(s,1H),8.88(s,1H),8.04(d,J＝2.6Hz,1H),7.87(d,J＝9.0Hz,1H),7.46(dd,J＝9.0,2.7Hz,1H),5.91–5.80(m,1H),5.29(s,1H),4.35(s,2H),3.17–3.07(m,4H),2.96(d,J＝4.4Hz,4H),2.56(s,3H),2.19(d,J＝3.3Hz,2H),1.90(s,2H),1.76(d,J＝4.8Hz,2H),1.58(d,J＝4.7Hz,2H)。

实施例14化合物30的制备(按照方案五线路制备)

4-(三丁基锡基)-3-丁炔-2-醇(4-(tributylstannyl)but-3-yn-2-ol)(化合物502-30)的制备：将化合物3-丁炔-2-醇(0.5克，7.14毫摩尔，1.0当量)和三甲基硅醇钾(1.83克，14.28毫摩尔，2.0当量)溶解于四氢呋喃(75毫升)中，然后往溶液中加正丁基氧化锡(7.27毫升，14.28毫摩尔，2.0当量)并在室温下搅拌4小时。将反应液倒进水中，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗二至三次，然后用无水硫酸钠干燥，再浓缩。残留物过柱纯化得到黄色油状目标化合物4-(三丁基锡基)-3-丁炔-2-醇(1.86克，收率：68％)。

8-环戊基-6-(3-羟基-1-丁炔-1-基)-5-甲基-2-[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(8-cyclopentyl-6-(3-hydroxybut-1-yn-1-yl)-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on e)(化合物30)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-30。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 474[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.03(s,1H),8.88(s,1H),8.02(s,1H),7.86(d,J＝9.1Hz,1H),7.44(d,J＝9.3Hz,1H),5.92–5.78(m,1H),5.46(d,J＝5.2Hz,1H),4.66–4.59(m,1H),3.06(s,4H),2.85(s,4H),2.55(s,3H),2.19(s,2H),1.90(s,2H),1.75(s,2H),1.59(s,2H),1.40(d,J＝6.5Hz,3H).

实施例15化合物31的制备(按照方案五线路制备)

三丁基(2-甲基-1,3-二氧噁环-2-乙炔基)锡烷(tributyl((2-methyl-1,3-dioxolan-2-yl)ethynyl)stannane)(化合物502-31)的制备：将化合物3-丁炔-2-酮(1.0克，14.7毫摩尔，1.0当量)，乙二醇(1毫升，18.4毫摩尔，1.25当量)和对甲基苯磺酸(2毫克)溶解于二氯甲烷(8毫升)中，并加热回流4小时直到反应完全。冷却后将反应液倒进水中，用二氯甲烷萃取，有机相用饱和碳酸氢钠溶液洗二至三次，食盐水洗2次，然后用无水硫酸钠干燥，再浓缩得到无色油状化合物2-乙炔基-2-甲基-1,3-二氧噁烷(260毫克，收率：15.8％)。

在氮气保护下，将上步反应得到的2-乙炔基-2-甲基-1,3-二氧噁烷(260毫克，2.32毫摩尔，1.0当量)溶解于干燥的四氢呋喃(25毫升)中，降温至-60℃，滴加正丁基锂(1.3毫升，3.12毫摩尔，1.3当量)，然后在此温度下搅拌半小时，再在0℃搅拌半小时。反应液随后降至-60℃，滴加三丁基氯化锡(746毫克，2.32毫摩尔，1.0当量)，搅拌半小时后升至室温搅拌5小时。用水淬灭反应，然后用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水清洗，再用无水硫酸钠干燥，浓缩。残留物快速过柱纯化得到无色油状化合物三丁基(2-甲基-1,3-二氧噁环-2-乙炔基)锡烷(903毫克，收率：96.7％)。

8-环戊基--6-(3-羟基-1-丁炔-1-基)--2-[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(8-cyclopentyl-5-methyl-6-(3-oxobut-1-yn-1-yl)-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物31)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-31。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 472[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.27(s,1H),8.98(s,1H),8.05(d,J＝3.0Hz,1H),7.83(d,J＝9.0Hz,1H),7.46(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),5.88–5.77(m,1H),3.18–3.06(m,4H),2.98–2.83(m,4H),2.63(s,3H),2.44(s,3H),2.20(s,2H),1.90(s,2H),1.77(s,2H),1.58(d,J＝5.2Hz,2H)。

实施例16化合物32的制备(按照方案五线路制备)

三丁基-(3-甲氧基丙炔-1-基)锡烷tributyl(3-methoxyprop-1-yn-1-yl)stannane(化合物502-32)的制备：在氮气保护下，氢化钠(961毫克，40.05毫摩尔，1.5当量)混悬在35毫升干燥的四氢呋喃中，然后冰浴冷却下缓慢滴加丙炔醇(1.5克，26.7毫摩尔，1.0当量)，滴完再加热到40℃反应过夜。在氮气保护下，反应液降温至-60℃，滴加正丁基锂(11.1毫升，26.7毫摩尔，1.0当量)，然后在此温度下搅拌半小时，然后在0℃搅拌半小时。然后反应再降至-60℃，滴加三丁基氯化锡(8.69克，26.7毫摩尔，1.0当量)后升至室温搅拌5小时。用水淬灭反应，然后用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水清洗，再用无水硫酸钠干燥，浓缩。残留物快速过柱纯化得到无色油状化合物三丁基-(3-甲氧基丙炔-1-基)锡烷(3.72克，粗品)。

8-环戊基-6-(3-甲氧基丙炔-1-基)-5-甲基-2-[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮8-cyclopentyl-6-(3-methoxyprop-1-yn-1-yl)-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one(化合物32)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-32。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 474[M+1]⁺.^{1H NMR}(500MHz,DMSO-D6)δ10.05(s,1H),8.90(s,1H),8.05(d,J＝3.0Hz,1H),7.87(d,J＝9.0Hz,1H),7.46(dd,J＝9.1,3.0Hz,1H),5.90–5.77(m,1H),4.38(s,2H),3.36(s,3H),3.16(dd,J＝10.1,5.4Hz,4H),3.03–2.91(m,4H),2.56(s,3H),2.21(dd,J＝11.4,7.8Hz,2H),1.90(s,2H),1.81–1.69(m,2H),1.62–1.54(m,2H).

实施例17化合物33的制备(按照方案五线路制备)

环戊基三丁基锡丙炔基醚(tributyl(3-(cyclopentyloxy)prop-1-yn-1-yl)stannane)(化合物502-33)的制备：将环戊醇(3克，34.9毫摩尔，1.0当量)溶于100毫升干燥的四氢呋喃中，在0摄氏度下，缓慢加入80％的氢化钠(2克，69.8毫摩尔，2.0当量)，搅拌一个小时之后加入3-溴丙炔(5克，41.9毫摩尔，1.2当量)。把反应置于常温反应12小时之后，在0度加入100毫升冰水，然后用二氯甲烷(100毫升×3)萃取，混合的有机相用无水硫酸钠干燥，然后过滤，减压浓缩，硅胶柱层析后得到黄色油状物丙炔基环戊基醚(2.5克，收率：57.8％)。将上述得到的化合物(3.4克，27.4毫摩尔，1.0当量)溶于100毫升干燥的四氢呋喃中，在负78度的条件下，缓慢加入1M正丁基锂(32.9毫摩尔，1.2当量)，然后加入三丁基氯化锡(8.9克，27.4毫摩尔，1.0当量)。在负78度反应2小时之后，移至常温反应16小时，减压浓缩，硅胶柱层析得到黄色油状物环戊基三丁基锡丙炔基醚(11.7克，收率：100％)。

8-环戊基-6-(3-环戊氧基-1-丙炔基)-5-甲基-2-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-7，8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7-酮(8-Cyclopentyl-6-(3-cyclopentyloxy-prop-1-ynyl)-5-methyl-2-(5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-ylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-one)(化合物33)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-33。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z528[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.03(s,1H),8.90(s,1H),8.04(d,J＝3.0Hz,1H),7.86(d,J＝9.0Hz,1H),7.45(dd,J＝9.1,3.0Hz,1H),5.90–5.80(m,1H),4.39(s,2H),4.17(m,1H),3.10–3.04(m,4H),2.90–2.83(m,4H),2.57(s,3H),2.22(m,2H),1.91(m,2H),1.81–1.57(m,10H),1.55–1.49(m,2H).

实施例18化合物34的制备(按照方案五线路制备)

4-(6-(6-溴-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-胺基)吡啶-3-甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(tert-butyl 4-((6-((6-bromo-8-cyclopentyl-5-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)amino)pyridin-3-yl)methyl)piperazine-1-carboxylate)(111-34)的制备：将Boc哌嗪(1.1克,5.9毫摩尔，1.1当量)加入至化合物6-bromonicotinaldehyde(1.0克，5.4毫摩尔，1当量)的二氯甲烷(100毫升)溶液中。混合体系在室温下搅拌2小时。分批少量加入醋酸硼氢化钠(5.15克，24.3毫摩尔，4.5当量)，反应体系在室温下搅拌反应过夜。反应用2N的氢氧化钠溶液淬灭，并用二氯甲烷萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到4-(6-溴吡啶-3-甲基)哌嗪-1-胺基甲酸叔丁酯(2.25克,粗品)。LCMS(ESI):m/z 357[M+1]⁺。

将30毫升氨水加入至上述化合物(1.5克,4.21毫摩尔，1当量)和氧化亚铜(20毫克，0.14毫摩尔，30当量)的甲醇(40毫升)溶液中，混合物加热至70℃并且搅拌反应过夜。反应体系冷却至室温，过滤。滤液减压浓缩，二氯甲烷溶解后用2N的氢氧化钠溶液调节PH至12-14。合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物硅胶柱层析纯化得到化合物4-(6-胺基吡啶-3-甲基)哌嗪-1-胺基甲酸叔丁酯(1.24克,粗品).LCMS(ESI):m/z 293[M+1]⁺。

在氮气的保护下，上述制备的化合物(613毫克，2.1毫摩尔，2.1当量)溶解于干燥的甲苯(10毫升)。降温至0℃，在搅拌的条件下缓慢滴加LiHMDS(2.1毫升，2.1毫摩尔，2.1当量)。混合体系在0℃下再搅拌10min。然后将20毫升化合物1-1-B5(342毫克，1毫摩尔，1当量)的甲苯溶液加入至体系当中，室温下搅拌1小时。反应用碳酸氢钠溶液淬灭，过滤，滤饼用甲苯和水洗，烘干后得到白色固体化合物4-(6-(6-溴-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-胺基)吡啶-3-甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(290毫克，收率：48.4％).LCMS(ESI):m/z 599[M+1]⁺。

8-环戊基-6-(3-羟基丙炔-1-基)-5-甲基-2-(5–(哌嗪-1-甲基)-吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(8-cyclopentyl-6-(3-hydroxyprop-1-yn-1-yl)-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-ylmethyl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimi din-7(8H)-one)(化合物34)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的111-29替换为111-34。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 474[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.25(s,1H),8.94(s,1H),8.22(s,1H),8.03(d,J＝8.5Hz,1H),7.72(d,J＝7.6Hz,1H),5.93–5.81(m,1H),5.33(s,1H),4.36(d,J＝4.7Hz,2H),3.42(s,2H),2.70(s,4H),2.58(s,3H),2.30(s,4H),2.21(s,2H),1.93(s,2H),1.78(s,2H),1.60(s,2H)。

实施例19化合物35的制备(按照方案五线路制备)

将111-34(0.12克，0.2毫摩尔，1.0当量)，四三苯基磷钯(0.021克，0.02毫摩尔，0.1当量)和502-30(1.86克，5.15毫摩尔，25当量)分散于15毫升甲苯中，按步骤13c方法合成，得到黄色固体8-环戊基-6-(3-羟基丁炔-1-基)-5-甲基-2-(5-(哌嗪-1-甲基)吡啶-2-胺基)-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮8-cyclopentyl-6-(3-hydroxybut-1-yn-1-yl)-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-ylmethyl)pyri din-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one(61毫克，收率：71％)。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 488[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.24(s,1H),8.93(s,1H),8.22(s,1H),8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.72(d,J＝8.3Hz,1H),5.87(m,1H),5.45(d,J＝5.4Hz,1H),4.64(m,1H),3.42(s,2H),2.67(s,4H),2.57(s,3H),2.29(s,4H),2.21(s,2H),1.93(s,2H),1.77(s,2H),1.57(d,J＝23.6Hz,2H),1.41(d,J＝6.5Hz,3H)。

实施例20化合物36的制备(按照方案五线路制备)

3-(三丁基锡基)-2-丙炔胺基甲酸叔丁酯(tert-butyl 3-(tributylstannyl)prop-2-ynylcarbamate)(化合物502-36)的制备：将2-丙炔胺基甲酸叔丁酯(0.61克，3.9摩尔，1.0当量)溶解在10毫升干燥四氢呋喃中，氮气置换3次，冷却到-60度后，往里滴加正丁基锂(4.0毫升，9.6毫摩尔，2.5当量)，在此温度下搅拌半小时后升温至0度搅拌半小时,然后将这深黄色反应液再度冷却到-60度。将三丁基氯化锡(1.65克，5.07毫摩尔，1.3当量)滴加到反应液中，再在-60度下搅拌半小时，升温至室温搅拌3小时。用水将反应淬灭，加入乙酸乙酯进行萃取，萃取的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到棕色油状物3-(三丁基锡基)-2-丙炔胺基甲酸叔丁酯(1.2克，收率：68.5％)。

6-(3-胺基丙炔-1-基)-8-环戊基-5-甲基-2-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(6-(3-aminoprop-1-ynyl)-8-cyclopentyl-5-methyl-2-(5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-ylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物36)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-36。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z459[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ9.98(s,1H),8.87(s,1H),8.02(d,J＝2.9Hz,1H),7.86(d,J＝9.0Hz,1H),7.43(dd,J＝9.1,3.0Hz,1H),5.95–5.79(m,1H),3.59(s,2H),3.13–3.02(m,4H),2.93–2.81(m,4H),2.56(s,3H),2.21-2.17(m,2H),1.91(s,2H),1.83–1.70(m,2H),1.67–1.54(m,2H)。

实施例21化合物37的制备(按照方案五线路制备)

N,N-二甲胺基-3-(三丁基锡烷基)丙炔(N,N-dimethyl-3-(tributylstannyl)prop-2-yn-1-amine)(化合物502-37)。将化合物N,N-二甲基2-丙炔-1胺(300毫克，3.6毫摩尔，1.0当量)和三甲基硅醇钾(462毫克，3.6毫摩尔，1.0当量)溶解于四氢呋喃(50毫升)中，往上述溶液中加正丁基氧化锡(2.15克，3.6毫摩尔，1.0当量)并在室温下搅拌过夜。将反应溶剂真空旋干。残留物过柱纯化得到黄色油状目标化合物N,N-二甲胺基-3-(三丁基锡烷基)丙炔(2.104克，粗品)。

8-环戊基-6-(3-二甲基胺基丙炔-1-基)-5-甲基-2-[[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(8-cyclopentyl-6-(3-(dimethylamino)prop-1-yn-1-yl)-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物37)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-37。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 487[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.03(s,1H),8.88(s,1H),8.06(s,1H),7.88(d,J＝8.3Hz,1H),7.47(d,J＝6.9Hz,1H),5.84(s,1H),3.51(s,2H),3.19(s,4H),3.02(s,4H),2.57(s,3H),2.25(d,J＝19.7Hz,8H),1.90(s,2H),1.75(s,2H),1.59(s,2H)。

实施例22化合物38的制备(按照方案五线路制备)

3-丁基锡基丙炔酰胺(3-tributylstannyl-propynamide)(化合物502-38)的制备：将丙炔酰胺(0.5克,7.24毫摩尔，1.0当量)和三甲基硅醇(0.95克，7.24毫摩尔，1.0当量)溶解在50毫升四氢呋喃中。然后往该反应液中加入三丁基氧化锡(3.7毫升，7.24毫摩尔，1.0当量)，在室温下搅拌反应1小时，减压旋干。最后硅胶柱层析纯化得到无色透明液体三丁基锡基丙炔酰胺(2.03克，收率：78％)。

4-6-(6-丙炔酰胺-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-胺基)-吡啶-3-基)哌嗪(3-(8-cyclopentyl-5-methyl-7-oxo-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-6-yl)propiolamide)(化合物38)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-38。

目标产物表征数据：LCMS(ESI)m/z 473[M+1]⁺.1H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.11(s,1H),8.93(s,1H),8.07(m,2H),7.83(m,1H),7.59(s,1H),7.43(d,J＝7.8Hz,1H),5.86-5.83(m,1H),3.09(s,4H),2.84(s,4H),2.61(s,3H),2.19(s,2H),1.90(s,2H),1.77(s,2H),1.59(s,2H)。

实施例23化合物39的制备(按照方案五线路制备)

三丁基(苯乙炔基)锡烷(tributyl(phenylethynyl)stannane)(化合物502-39)的制备：在氮气保护下，化合物苯乙炔(1.0克，9.8毫摩尔，1.0当量)溶解于干燥的四氢呋喃(40毫升)中，降温至-60℃，通过注射器滴加正丁基锂(5.3毫升，12.7毫摩尔，1.3当量)，在此温度下搅拌半小时，然后在0℃搅拌半小时。最后反应再降至-60℃，滴加三丁基氯化锡(3.15克，9.8毫摩尔，1.0当量)，搅拌半小时后升至室温搅拌3小时。用水淬灭反应，然后用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水清洗，再用无水硫酸钠干燥，浓缩。残留物快速过柱纯化得到黄色油状化合物三丁基(苯乙炔基)锡烷(4.35克，粗品)。

8-环戊基-5-甲基-6-苯乙炔基--2-[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(8-cyclopentyl-5-methyl-6-(phenylethynyl)-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物39)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-39。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z506[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.10(s,1H),8.94(s,1H),8.07(d,J＝3.0Hz,1H),7.90(d,J＝9.1Hz,1H),7.63–7.52(m,2H),7.49–7.39(m,4H),5.89(dt,J＝18.0,9.0Hz,1H),3.25–3.14(m,4H),3.12–2.95(m,4H),2.65(s,3H),2.24(dd,J＝11.4,7.9Hz,2H),1.93(s,2H),1.86–1.68(m,2H),1.69–1.50(m,2H)。

实施例24化合物40的制备(按照方案五线路制备)

三丁基(4-氟苯乙炔基)锡烷(tributyl((4-fluorophenyl)ethynyl)stannane)(化合物502-40)的制备：在氮气保护下，1-乙炔-4-氟苯(588克，4.9毫摩尔，1.0当量)溶解于干燥的四氢呋喃(40毫升)中，降温至-60℃，通过注射器滴加正丁基锂(2.7毫升，6.4毫摩尔，1.3当量)，反应混合物在此温度下搅拌半小时，然后在0℃搅拌半小时。反应再降至-60℃，滴加三丁基氯化锡(1.6克，4.9毫摩尔，1.0当量)，搅拌半小时后升至室温搅拌3小时。用水淬灭反应后，用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水清洗，再用无水硫酸钠干燥，浓缩。残留物快速过柱纯化得到黄色油状化合物三丁基(4-氟苯乙炔基)锡烷(4.69克，粗品)。

8-环戊基-6-(4-氟苯基乙炔基]-5-甲基-2-[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(8-cyclopentyl-6-((4-fluorophenyl)ethynyl)-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物40)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-40。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z524[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.08(s,1H),8.94(s,1H),8.05(d,J＝3.0Hz,1H),7.88(d,J＝9.0Hz,1H),7.67–7.55(m,2H),7.47(dd,J＝9.1,3.1Hz,1H),7.35–7.21(m,2H),5.97–5.82(m,1H),3.18–3.10(m,4H),3.01–2.92(m,4H),2.64(s,3H),2.23(dd,J＝11.4,8.0Hz,2H),1.92(s,2H),1.83–1.73(m,2H),1.60(dd,J＝10.3,5.3Hz,2H)。

实施例25化合物41的制备(按照方案五线路制备)

三丁基(4-氯苯乙炔基)锡烷(tributyl((4-chlorophenyl)ethynyl)stannane)(化合物502-41)的制备：在氮气保护下，1-乙炔-4-氯苯(670克，4.9毫摩尔，1.0当量)溶解于干燥的四氢呋喃(40毫升)中，降温至-60℃，通过注射器滴加正丁基锂(2.7毫升，6.4毫摩尔，1.3当量)，反应混合物在此温度下搅拌半小时，然后在0℃搅拌半小时。最后反应再降至-60℃，滴加三丁基氯化锡(1.6克，4.9毫摩尔，1.0当量)，搅拌半小时后升至室温搅拌3小时。用水淬灭反应，然后用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水清洗，再用无水硫酸钠干燥，浓缩。残留物快速过柱纯化得到黄色油状化合物三丁基(4-氯苯乙炔基)锡烷(5.52克，粗品)。

8-环戊基-6-(4–氯苯乙炔基]-5-甲基-2-[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(6-((4-chlorophenyl)ethynyl)-8-cyclopentyl-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物41)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-41。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 541[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.13(s,1H),8.95(s,1H),8.08(d,J＝2.9Hz,1H),7.90(d,J＝9.0Hz,1H),7.61–7.54(m,2H),7.53–7.47(m,3H),5.87(dd,J＝17.5,8.7Hz,1H),3.24–3.19(m,4H),3.12–3.04(m,4H),2.64(d,J＝6.0Hz,3H),2.27–2.19(m,2H),1.93(s,2H),1.79(d,J＝9.2Hz,2H),1.68–1.52(m,2H)。

实施例26化合物42的制备(按照方案五线路制备)

4-((三丁基锡基)乙炔基)苯胺基甲酸叔丁酯(tert-butyl 4-((tributylstannyl)ethynyl)phenylcarbamate)(化合物502-42)的制备：将对碘苯胺(2.2克，10毫摩尔，1.0当量)、双三苯基磷二氯化钯(0.175克，0.25毫摩尔，0.025当量)和碘化亚铜(40毫克，0.35毫摩尔，0.035当量)加入到10毫升三乙胺中。把反应液置于氮气保护下，然后再加入三甲基硅乙炔(1.47克，15毫摩尔，1.5当量)。在常温下反应过夜后，将反应液用乙酸乙酯和水萃取，得到的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到棕色固体4-(三甲基硅基)乙炔基苯胺(1.5克，收率：79％)。将所得到的4-(三甲基硅基)乙炔基苯胺(1.5克，7.94毫摩尔，1.0当量)溶解在10毫升的四氢呋喃中，在0摄氏度搅拌10分钟后，加入四丁基氟化铵(2克，23.8毫摩尔，3.0当量).在常温下半小时后，将反应液用乙酸乙酯和水萃取，得到的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到白色固体对胺基苯乙炔(0.7克，收率：79％)。LCMS(ESI):m/z118[M+1]⁺.^{1H NMR}(500MHz,CDCl₃)δ7.32–7.27(m,2H),6.61–6.56(m,2H),3.82(s,2H),2.96(s,1H)。

将所得的对胺基苯乙炔(0.55克，4.7毫摩尔，1.0当量)溶解在20毫升二氯甲烷中，往里加入三乙胺(1.96毫升，14.1毫摩尔，2.0当量)，二碳酸二叔丁酯(2.05克，9.4毫摩尔，2.0当量)。在常温下反应24小时后，将反应液用二氯甲烷和水萃取，得到的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到无色油状物4-(乙炔基)苯胺基甲酸叔丁酯(0.5克，收率：49％)。LCMS(ESI):m/z218[M+1]⁺.¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ7.33–7.30(m,2H),7.25(d,J＝8.7Hz,2H),2.92(s,1H),1.43(s,9H)。

将所得的4-(乙炔基)苯胺基甲酸叔丁酯(0.6克，2.76毫摩尔，1.0当量)溶解在10毫升干燥四氢呋喃中，氮气置换3次，冷却到-60度后，往里滴加正丁基锂(2.87毫升，6.9毫摩尔，2.5当量)，在此温度下搅拌半小时后升温至0度搅拌半小时,然后将这深黄色反应液再度冷却到-60摄氏度。将三丁基氯化锡(1.16克，3.58毫摩尔，1.3当量)滴加到反应液中，再在-60摄氏度下搅拌半小时，升温至室温搅拌3小时。用水将反应淬灭，加入乙酸乙酯进行萃取，萃取的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到橙色油状物4-((三丁基锡基)乙炔基)苯胺基甲酸叔丁酯(0.8克，收率：57.1％).

6-(4-胺基苯乙炔基)-8-环戊基-5-甲基-2-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(6-((4-aminophenyl)ethynyl)-8-cyclopentyl-5-methyl-2-(5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-ylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物42)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-42。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z521[M+1]⁺.^{1H NMR}(500MHz,DMSO-D6)δ9.95(s,1H),8.89(s,1H),8.02(d,J＝3.0Hz,1H),7.88-7.86(d,J＝10.0Hz,1H),7.45-7.44(d,J＝5.0Hz,1H),7.21(d,J＝8.5Hz,2H),6.57(d,J＝8.5Hz,2H),5.87(m,1H),5.56(s,2H),3.09–3.04(m,4H),2.88–2.82(m,4H),2.60(s,3H),2.23(s,2H),1.92(s,2H),1.77(s,2H),1.60(s,2H)。

实施例27化合物43的制备(按照方案五线路制备)

3-三丁基锡乙炔基苯胺基甲酸叔丁酯(3-Tributylstannanylethynyl-phenyl)-carbamic acid tert-butyl ester)(化合物502-43)的制备：将碳酸氢钠(1.43毫升,17毫摩尔，2当量)和BOC酸酐(2.224克,10.2毫摩尔，1.2当量)加入至化合物2-14-A1(1克,8.5毫摩尔，1当量)的四氢呋喃(10毫升)溶液中。混合体系在室温下反应10小时后，用乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压旋干。残留物硅胶柱层析纯化得到黄色油状物(1.95克,粗品)。将所得的油状物(0.5克,2.3毫摩尔，1当量)溶解于5毫升干燥的四氢呋喃中。冷却至-60℃，在10min内缓慢滴加正丁基锂(2.4毫升,5.75毫摩尔，2.4当量)。反应体系在-60℃下反应0.5小时和在0℃下0.5小时，然后再冷却至-60℃。三丁基氯化锡(823.5毫克,2.53毫摩尔，1.1当量)缓慢滴加至体系并搅拌0.5小时。混合体系慢慢回温至室温并搅拌3小时。用水淬灭反应，并用乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩。残留物硅胶柱层析纯化得到橙色油状物产物(0.785克,收率：67.2％)。

6-(3–胺基-苯乙炔基)-8-环戊基-5-甲基-2-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(6-((3-aminophenyl)ethynyl)-8-cyclopentyl-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物43)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-43。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z521[M+1]⁺.1H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.02(s,1H),8.92(s,1H),8.03(s,1H),7.87(d,J＝9.0Hz,1H),7.44(dd,J＝9.1,3.1Hz,1H),7.06(t,J＝7.8Hz,1H),6.78–6.73(m,1H),6.67(d,J＝7.7Hz,1H),6.63–6.58(m,1H),5.93–5.83(m,1H),5.23(s,2H),3.10–3.02(m,4H),2.89–2.82(m,4H),2.63(s,3H),2.26-2.22(m,2H),1.92(s,2H),1.84–1.71(m,2H),1.68–1.54(m,2H)。

实施例28化合物44的制备(按照方案五线路制备)

2-((三丁基锡基)乙炔基)苯胺基甲酸叔丁酯(2-tributylstannnany lethynyl-phenyl)carbamate acid tere-butyl ester)(化合物502-44)的制备：将2-碘苯胺(3.0克，13.7毫摩尔，1.0当量)、双三苯基磷二氯化钯(0.87克，1.6毫摩尔，0.12当量)和碘化亚铜(78毫克，0.55毫摩尔，0.04当量)加入到10毫升三乙胺中。把反应液置于氮气保护下，然后再加入三甲基硅乙炔(1.8克，18.3毫摩尔，1.3当量)。在常温下反应过夜后，将反应液用乙酸乙酯和水萃取，得到的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到棕色固体2-((三甲基硅基)乙炔基)苯胺(1.88克，收率72％)。LCMS(ESI):m/z190[M+1]⁺。

将所得的2-((三甲基硅基)乙炔基)苯胺(1.78克，9.4毫摩尔，1.0当量)溶解在100毫升二氯甲烷中，往里加入三乙胺(2.8毫升，18.8毫摩尔，2.0当量)，二碳酸二叔丁酯(4.1克，18.8毫摩尔，2.0当量).在常温下反应24小时后，将反应液用二氯甲烷和水萃取，得到的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到无色油状物2-((三甲基硅基)乙炔基)苯胺基甲酸叔丁酯(1.8克，收率：67％)。将所得的2-((三甲基硅基)乙炔基)苯胺基甲酸叔丁酯(1.8克，6.2毫摩尔，1.0当量)溶解在10毫升的四氢呋喃中，在0摄氏度搅拌10分钟后,加入四丁基氟化铵(4.6克，12.4毫摩尔，2.0当量).在常温下半小时后，将反应液用乙酸乙酯和水萃取，得到的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到白色固体2-乙炔基苯胺基甲酸叔丁酯(0.8克，收率：57％)。

将所得的2-乙炔基苯胺基甲酸叔丁酯(0.8克，3.6毫摩尔，1.0当量)溶解在10毫升干燥四氢呋喃中，氮气置换3次，冷却到-60度后，往里滴加正丁基锂(3.75毫升，9.0毫摩尔，2.5当量)，在此温度下搅拌半小时后升温至0度搅拌半小时,然后将这深黄色反应液再度冷却到-60度。将三丁基氯化锡(1.56克，4.8毫摩尔，1.3当量)滴加到反应液中，再在-60度下搅拌半小时，升温至室温搅拌3小时。用水将反应淬灭，加入乙酸乙酯进行萃取，萃取的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到橙色油状物2-((三丁基锡基)乙炔基)苯胺基甲酸叔丁酯(1.5克，收率：79％)。

6-(2-胺基苯乙炔基)-8-环戊基-5-甲基-2-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(6-((2-aminophenyl)ethynyl)-8-cyclopentyl-5-methyl-2-(5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-ylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物44)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-44。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z521[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.13(s,1H),8.95(s,1H),8.03(d,J＝2.9Hz,1H),7.85(d,J＝8.9Hz,1H),7.45(dd,J＝9.1,2.9Hz,1H),7.23(d,J＝6.4Hz,1H),7.09(dd,J＝12.0,4.9Hz,1H),6.73(d,J＝8.1Hz,1H),6.54(d,J＝7.3Hz,1H),5.91–5.85(m,1H),5.79(s,2H),3.10–3.01(m,4H),2.87–2.78(m,4H),2.64(s,3H),2.27(s,2H),1.90(s,2H),1.78(s,2H),1.60(s,2H)。

实施例29化合物45的制备(按照方案五线路制备)

甲基-(4-三丁基锡乙炔基-苯基)-胺基甲酸叔丁酯(tert-butyl methyl(4-((tributylstannyl)ethynyl)phenyl)carbamate)(化合物502-45)的制备：4-(乙炔基)苯胺基甲酸叔丁酯(1.12克，5.15毫摩尔，1.0当量)，碘甲烷(1.09克，7.73毫摩尔，1.5当量)和碳酸铯(2.52克，7.73毫摩尔，1.5当量)一起混溶在N,N-二甲基甲酰胺(50毫升)，然后加热到40℃搅拌反应15小时。反应混合物冷却到室温，倒进水中然后用乙酸乙酯(50毫升)萃取。有机相用水和食盐水清洗两到三次，用无水硫酸钠干燥，真空浓缩得到的残留物通过柱层析纯化得到目标化合物(690毫克，收率：42.3％)。

目标产物表征数据：¹H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.48–7.39(m,2H),7.20(d,J＝8.6Hz,2H),3.25(s,3H),3.04(s,1H),1.45(s,9H).所得的产物(670毫克，2.9毫摩尔，1.0当量)溶解于干燥的四氢呋喃(40毫升)中，降温至-60℃，通过注射器滴加正丁基锂(1.5毫升，3.7毫摩尔，1.3当量)，混合物在此温度下搅拌半小时后，再在0℃搅拌半小时。反应再降至-60℃，滴加三丁基氯化锡(944毫克，2.9毫摩尔，1.0当量)后升至室温搅拌5小时。用水淬灭反应，然后用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水清洗，再用无水硫酸钠干燥，浓缩。残留物快速过柱纯化得到黄色油状化合物(1.08克，88.5％)。

8-环戊基-5-甲基-6-(4-甲胺基苯乙炔基)-2-[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(8-cyclopentyl-5-methyl-6-((4-(methylamino)phenyl)ethynyl)-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物45)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-45。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z535[M+1]⁺.^{1H NMR}(500MHz,DMSO-D6)δ9.97(s,1H),8.89(s,1H),8.03(d,J＝3.0Hz,1H),7.88(d,J＝9.0Hz,1H),7.44(dd,J＝9.1,3.0Hz,1H),7.27(d,J＝8.6Hz,2H),6.56(d,J＝8.7Hz,2H),6.14(q,J＝5.0Hz,1H),5.94–5.83(m,1H),3.12–3.05(m,4H),2.89–2.83(m,4H),2.71(d,J＝5.0Hz,3H),2.60(s,3H),2.25-2.20(m,2H),1.93(s,2H),1.83–1.74(m,2H),1.62-1.59(m,2H).

实施例30化合物46的制备(按照方案五线路制备)

N,N-二甲基-(4-三丁基锡乙炔基)苯胺(N,N-dimethyl-4-((tributylstannyl)ethynyl)aniline)(化合物502-46)的制备：对乙炔苯胺化合物(500毫克，4.27毫摩尔，1.0当量)，碘甲烷(0.8毫升，18.23毫摩尔，4.2当量)和碳酸铯(5.94克，18.23毫摩尔，4.2当量)一起混溶在N,N-二甲基甲酰胺(50毫升)中，反应混合物加热到40℃搅拌15小时。反应混合物冷却到室温，倒入水中后用乙酸乙酯(50毫升)萃取。有机相用水和食盐水清洗两到三次，用无水硫酸钠干燥，真空浓缩得到的残留物通过柱层析纯化得到目标化合物4-乙炔基-N,N-二甲基苯胺(170毫克，收率：27.4％)。LCMS(ESI):m/z146[M+1]⁺。

将上述得到的4-乙炔基-N,N-二甲基苯胺(170毫克，1.17毫摩尔，1.0当量)溶解于干燥的四氢呋喃(30毫升)中，然后降温至-60℃，通过注射器滴加正丁基锂(0.6毫升，1.52毫摩尔，1.3当量)，反应混合物在此温度下搅拌半小时，然后在0℃搅拌半小时。最后再降至-60℃，滴加三丁基氯化锡(381毫克，1.17毫摩尔，1.0当量)后升至室温搅拌5小时。用水淬灭反应，然后用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水清洗，再用无水硫酸钠干燥，浓缩。残留物快速过柱纯化得到无色油状化合物N,N-二甲基-(4-三丁基锡乙炔基)苯胺(379毫克，74.6％)。

8-环戊基-6-(4-二甲基胺基苯乙炔基)-5-甲基-2-[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(8-cyclopentyl-6-((4-(dimethylamino)phenyl)ethynyl)-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物46)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-46。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 549[M+1]⁺.^{1H NMR}(500MHz,DMSO-D6)δ10.04(s,1H),8.91(s,1H),8.07(d,J＝2.8Hz,1H),7.92(d,J＝9.1Hz,1H),7.49(dd,J＝9.1,2.9Hz,1H),7.35(d,J＝8.8Hz,2H),6.73(d,J＝8.8Hz,2H),5.94–5.84(m,1H),3.23(s,4H),3.08(s,4H),2.97(s,6H),2.62(s,3H),2.24(s,2H),1.92(s,2H),1.78(s,2H),1.61(s,2H)。

实施例31化合物47的制备(按照方案五线路制备)

4-(三丁基锡基)乙炔基苯腈4-((tributylstannyl)ethynyl)benzonitrile(化合物502-47)的制备：将4-碘苯腈(2.0克，8.73毫摩尔，1.0当量)、双三苯基磷二氯化钯(184毫克，0.26毫摩尔，0.03当量)和碘化亚铜(83毫克，0.44毫摩尔，0.05当量)加入到15毫升三乙胺中。把反应液置于氮气保护下，然后再加入三甲基硅乙炔(1.34毫升，9.6毫摩尔，1.1当量)。在常温下反应过夜后，将反应液用乙酸乙酯和水萃取，得到的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到棕色固体4-三甲基硅基乙炔基苯腈(1.86克，收率100％)。将上述反应得到的4-三甲基硅基乙炔基苯腈(1.0克，5.0毫摩尔，1.0当量)、三丁基氧化锡(1.2毫升，5.0毫摩尔，1.0当量)、三甲基硅醇钾(0.65克，5.0毫摩尔，1.0当量)溶解在30毫升四氢呋喃中，在常温下反应1小时后，将反应液用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到无色油状物4-(三丁基锡基)乙炔基苯腈(1.86克，收率：93％)。

4-(8-环戊基-5-甲基-2-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)乙炔基苯腈(4-((8-cyclopentyl-5-methyl-7-oxo-2-(5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-ylamino)-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-6-yl)ethynyl)benzonitrile)(化合物47)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-47。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z531[M+1]⁺.^{1H NMR}(500MHz,CDCl₃)δ8.78(s,1H),8.16(d,J＝8.9Hz,1H),8.03(d,J＝2.8Hz,1H),7.90(s,1H),7.68-7.62(m,4H),7.33(dd,J＝9.0,2.8Hz,1H),5.99–5.93(m,1H),3.17-3.15(m,4H),3.09–3.07(m,4H),2.67(s,3H),2.37(s,2H),2.11(s,2H),1.89(s,2H),1.70(s,2H)。

实施例32化合物48的制备(按照方案五线路制备)

4-三丁基锡基乙炔基苄基胺基甲酸叔丁酯(tert-butyl(4-((tributylstannyl)ethynyl)benzyl)carbamate)(化合物502-48)的制备：将4-溴苯甲胺盐酸盐(3克，13.5毫摩尔,1当量)溶解在四氢呋喃(50毫升)加入碳酸氢钠(2.27克，27毫摩尔，2当量)和二碳酸二叔丁酯(3.24克，14.9毫摩尔，1.1当量)，反应混合物在常温下搅拌16小时。用二氯甲烷萃取，有机相盐水洗，无水硫酸钠干燥后，真空下浓缩得4-溴苄基胺基甲酸叔丁酯(3.68克，收率：95％),LCMS(ESI):m/z286[M+1]⁺。

将装有4-溴苄基胺基甲酸叔丁酯(2克，7.02毫摩尔，1当量)的四氢呋喃溶液的反应瓶置于零下60摄氏度下缓慢滴入正丁基锂(5.6毫升，14毫摩尔，2当量)滴加过程中保持反应体系温度在零下60摄氏度以下，搅拌30分钟后，将溶有碘素(1.78克，7.02毫摩尔，1当量)的四氢呋喃(10毫升)缓慢滴入到反应体系中。滴完在0摄氏度下搅拌6小时。加入少量水淬灭，加入水和乙酸乙酯萃取分层，有机相用盐水洗三次，无水硫酸钠干燥，减压旋干得4-碘苄基胺基甲酸叔丁酯(1.52克，收率：65％)。LCMS(ESI):m/z334[M+1]⁺。

在氮气保护下，将三苯基磷(16毫克，0.06毫摩尔，0.018当量)，双三苯基磷二氯化钯(84毫克，0.121毫摩尔，0.05当量)，碘化亚铜(6毫克，0.03毫摩尔,0.09当量)，上述制备得到的4-碘苄基胺基甲酸叔丁酯(0.8克，2.42毫摩尔，1当量)和三乙胺(366毫克，3.63毫摩尔，1.5当量)加入装有DMF(5毫升)的反应瓶，将三甲基硅乙炔(356毫克，3.63毫摩尔，1.5当量)加入反应瓶中，在60摄氏度下搅拌16小时。加入水喝乙酸乙酯萃取分层，有机相用盐水洗涤后无水硫酸钠干燥，浓缩得粗品，通过硅胶柱层析分离纯化得4-三甲基硅乙炔基苄基胺基甲酸叔丁酯(0.61克，收率：85％)。LCMS(ESI):m/z304[M+1]⁺。此制备得到的4-三甲基硅乙炔基苄基胺基甲酸叔丁酯(1.16克，3.83毫摩尔)三甲基硅醇钾(490毫克，3.83毫摩尔)溶于四氢呋喃(50毫升)，三丁基氧化锡(2.82克，3.83毫摩尔)加入到体系中，搅拌3小时。加入水和乙酸乙酯萃取分层，有机相用盐水洗涤后无水硫酸钠干燥，真空下浓缩得粗品，通过硅胶柱层析分离纯化得4-三丁基锡基乙炔基苄基胺基甲酸叔丁酯(1.57克，收率：78.6％)。

6-(4-胺甲基苯乙炔基)-8-环戊基-5-甲基-2-[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(6-((4-(aminomethyl)phenyl)ethynyl)-8-cyclopentyl-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物48)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-48。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 535[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.06(s,1H),8.94(s,1H),8.04(d,J＝2.8Hz,1H),7.87(d,J＝8.9Hz,1H),7.53(d,J＝8.2Hz,2H),7.44(t,J＝6.7Hz,3H),5.94–5.84(m,1H),3.86(s,2H),3.08(d,J＝5.0Hz,4H),2.88(d,J＝4.6Hz,4H),2.65(s,3H),2.24(s,2H),1.93(s,2H),1.79(s,2H),1.61(s,2H)。

实施例33化合物49的制备(按照方案五线路制备)

(4-三氟甲基-苯乙炔基)-三丁基锡烷Tributyl-(4-trifluoromethyl-phenylethynyl)-stannane(化合物502-49)的制备：在氮气保护下，将双三苯基磷二氯化钯(0.33克,0.47毫摩尔，0.1当量)，碘化亚铜(0.046克,0.235毫摩尔，5当量)，1-碘-4-三氟甲基-苯(1.28克,4.7毫摩尔，1当量)和N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)混合于三口瓶中。然后将三甲基硅乙炔(0.6克,6.11毫摩尔，1.3当量)和三乙胺(1.42克,14.1毫摩尔，3当量)滴加至混合体系。反应在室温条件下搅拌反应4小时。反应结束后，加入水，用乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化，得到棕色油状物(4-三氟甲基-苯乙炔基)-三甲基硅烷(1.2克,粗品)。

将得到的化合物4-三氟甲基-苯乙炔基)-三甲基硅烷(1.2克,4.59毫摩尔，1当量)溶解于四氢呋喃(12毫升)中。然后加入三丁基氧化锡(2.95克,4.95毫摩尔，1当量)和三甲基硅醇钾(635.1毫克,4.95毫摩尔，1当量)。反应体系在室温条件下反应2小时。反应结束后，混合体系减压浓缩，硅胶柱层析纯化，得到黄色油状物(4-三氟甲基-苯乙炔基)-三丁基锡烷(3.5克,粗品)。

8-环戊基-5-甲基-2-[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基]-6-(4-三氟甲基-苯乙炔基)-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(8-Cyclopentyl-5-methyl-2-(5-piperazin-1-yl-pyridin-2-ylamino)-6-(4-trifluoromethyl-phenylethynyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-one)(化合物49)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-49。

目标产物表征数据：LCMS(ESI)m/z574[M+1]⁺.1H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.11(s,1H),8.96(s,1H),8.04(d,J＝3.0Hz,1H),7.86(d,J＝9.1Hz,1H),7.78(q,J＝8.4Hz,4H),7.44(dd,J＝9.1,3.0Hz,1H),5.88(m,1H),3.07(m,4H),2.86(m,4H),2.67(s,3H),2.24(s,2H),1.92(s,2H),1.80(s,2H),1.60(d,J＝5.3Hz,2H)。

实施例34化合物50的制备(按照方案五线路制备)

(4-乙酰胺基苯乙炔基)-三丁基锡烷(N-(4-((tributylstannyl)ethynyl)phenyl)acetamide)(化合物502-50)的制备：将化合物4-乙炔苯胺(400毫克，3.42毫摩尔，1.0当量)和三乙胺(1毫升)溶解于二氯甲烷(40毫升)中，然后在冰浴条件下往溶液中加乙酰氯(0.3毫升，4.10毫摩尔，1.2当量)并在室温下搅拌过夜。过滤，将溶剂真空旋干。残留物过柱纯化得到橙色目标化合物4-乙酰胺基苯乙炔(412毫克，收率：75.7％)。LCMS(ESI):m/z160[M+1]⁺。

将上述反应产物4-乙酰胺基苯乙炔(200毫克，1.25毫摩尔，1.0当量)和三甲基硅醇钾(161毫克，1.25毫摩尔，1.0当量)溶解于四氢呋喃(50毫升)中，然后往溶液中加正丁基氧化锡(745毫克，1.25毫摩尔，1.0当量)并在室温下搅拌过夜。将反应溶剂真空旋干。残留物过柱纯化得到黄色油状目标化合物(4-乙酰胺基苯乙炔基)-三丁基锡烷(687毫克，粗品)。

N-(4-((8-环戊基-5-甲基-7-氧代-2-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)乙炔基苯基)乙酰胺(N-(4-((8-cyclopentyl-5-methyl-7-oxo-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-6-yl)ethynyl)phenyl)acetamide)(化合物50)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-50。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 563[M+1]⁺.1H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.13(s,1H),10.07(s,1H),8.93(s,1H),8.06(d,J＝2.8Hz,1H),7.89(d,J＝9.0Hz,1H),7.65(d,J＝8.5Hz,2H),7.47(d,J＝8.6Hz,3H),5.88(m,1H),3.17(m,4H),2.99(m,4H),2.63(s,3H),2.23(d,J＝7.7Hz,2H),2.07(s,3H),1.93(s,2H),1.79(m,2H),1.61(m,2H)。

实施例35化合物51的制备(按照方案五线路制备)

4-三丁基锡乙炔基苄氧基-叔丁基-二甲基硅烷(tert-butyldimethyl((4-((tributylstannyl)ethynyl)benzyl)oxy)silane)(化合物502-51)的制备：将对溴苄醇(3克，16毫摩尔，1当量)，碘化亚铜(0.3克，1.6毫摩尔，0.1当量)和二氯二三苯基磷钯(0.57克，0.8毫摩尔，0.05当量)溶于四氢呋喃(50毫升)溶液中，氮气保护条件下，往里加入三甲基硅乙炔(7.8克，80毫摩尔，5当量)。混合体系在50度条件下反应16小时后，减压旋干溶剂，残留物硅胶柱层析纯化得到棕色固体4-三甲基硅乙炔基苄醇(1.5克，粗品)。将上述化合物(1.5克，7.3毫摩尔，1当量)，碳酸钾(2克，14.6毫摩尔，2当量)和甲醇(5毫升)溶解于四氢呋喃(50毫升)中。混合体系室温下搅拌1小时。用水淬灭反应，并用乙酸乙酯萃取，有机相用盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩。残留物硅胶柱层析纯化得到棕色液体4-乙炔基苄醇(0.8克，粗品)。将反应所得的4-乙炔基苄醇(0.8克,6毫摩尔，1当量)，叔丁基二甲基氯硅烷(1.4克，9毫摩尔，1.5当量)和咪唑(0.4克，6毫摩尔，1当量)溶于DMF(20毫升)中。混合体系室温下搅拌3小时，用水淬灭反应，并用乙酸乙酯萃取，有机相用盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩。残留物硅胶柱层析纯化得到浅绿色液体4-乙炔基苄氧基-叔丁基-二甲基硅烷(0.3克，收率：20％)。

将反应所得的4-乙炔基苄氧基-叔丁基-二甲基硅烷(240毫克，1毫摩尔，1当量)溶于四氢呋喃(10毫升)中，氮气保护下，干冰丙酮浴降温到-60度往里滴加n-BuLi(0.8毫升，2毫摩尔，2当量)。滴加完再反应半小时后，往里滴加三丁基氯化锡(0.65克，2毫摩尔，2当量)。滴加完后再反应1小时得到4-三丁基锡乙炔基苄氧基-叔丁基-二甲基硅烷四氢呋喃溶液，不需要处理直接用于下一步反应。

8-环戊基-6-(4-羟甲基苯乙炔基)-5-甲基-2-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮盐酸盐(8-cyclopentyl-6-((4-(hydroxymethyl)phenyl)ethynyl)-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one hydrochloride)(化合物51)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-51。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z536[M+1]⁺.1H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.55(s,1H),8.97(m,3H),8.10(d,J＝3.0Hz,1H),7.90(d,J＝3.0Hz,1H),7.69(s,1H),7.51(d,J＝8Hz,2H),7.38(d,J＝8Hz,2H),5.90(t,J＝9Hz,1H),4.54(s,2H),3.39-3.41(m,4H),3.26(m,4H),2.67(s,3H),2.21(m,2H),1.95(m,2H),1.80(m,2H),1.61(m,2H)。

实施例36化合物52的制备(按照方案五线路制备)

N-(4-三丁基锡乙炔基-苯基)-甲烷磺酰胺(N-(4-((tributylstannyl)ethynyl)phenyl)methanesulfonamide)(化合物502-52)的制备：将对胺基苯乙炔(400毫克，3.42毫摩尔，1.0当量)和三乙胺(1毫升)溶解于二氯甲烷(50毫升)中，然后在冰浴条件下往溶液中加甲磺酰氯(584毫克，5.13毫摩尔，1.5当量)并在室温下搅拌过夜。过滤，将溶剂真空旋干。残留物过柱纯化得到橙色目标化合物N-(4-乙炔基苯基)甲烷磺酰胺(350毫克，收率：52.5％)。

将化合物N-(4-乙炔基苯基)甲烷磺酰胺(170毫克，0.87毫摩尔，1.0当量)和三甲基硅醇钾(112毫克，0.87毫摩尔，1.0当量)溶解于四氢呋喃(50毫升)中，然后往溶液中加正丁基氧化锡(518毫克，0.87毫摩尔，1.0当量)并在室温下搅拌过夜。将反应溶剂真空旋干。残留物过柱纯化得到目标化合物N-(4-三丁基锡乙炔基-苯基)-甲烷磺酰胺(1.23克，粗品)。

N-(4-(8-环戊基-5-甲基-7-氧代-2-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-乙炔基)苯基)甲磺酰胺(N-(4-((8-cyclopentyl-5-methyl-7-oxo-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)-7,8-dihydropyrido[2,3-d]p yrimidin-6-yl)ethynyl)phenyl)methanesulfonamide)(化合物52)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-52。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 599[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.11(s,1H),8.94(s,1H),8.08(d,J＝2.9Hz,1H),7.92(d,J＝9.0Hz,1H),7.51(dd,J＝14.0,5.7Hz,3H),7.26(d,J＝8.6Hz,2H),5.89(p,J＝8.9Hz,1H),3.26(m,4H),3.09(m,4H),3.06(s,3H),2.64(s,3H),2.24(s,2H),1.94(s,2H),1.79(m,2H),1.62(m,2H)。

实施例37化合物53的制备(按照方案五线路制备)

4-三丁基锡乙炔基苯甲酰胺(4-Tributylstannanylethynyl-benzamide)(化合物502-53)的制备：氮气保护下，将4-溴苯甲酰胺(597毫克，3毫摩尔，1.0当量)溶解于25毫升三乙胺中，然后加三甲基硅乙炔(2.94克，30毫摩尔，10当量)，双三苯基膦二氯化钯(421毫克，0.6毫摩尔，0.2当量)，碘化亚铜(228毫克，1.2毫摩尔，0.4当量)。反应混合物加热到50℃搅拌。反应体系用乙酸乙酯稀释，通过硅藻土过滤，再用乙酸乙酯洗两次，滤液在真空下浓缩，残留物通过柱层析纯化得到棕色油状目标化合物4-三甲基硅乙炔基-苯甲酰胺(780毫克，粗品)。LCMS(ESI):m/z 218[M+1]⁺。

将反应所得的4-三甲基硅乙炔基-苯甲酰胺(780毫克，粗品)和三甲基硅醇钾(385毫克，3毫摩尔，1.0当量)溶解于四氢呋喃(50毫升)中，然后往溶液中加正丁基氧化锡(1.788克，3毫摩尔，1.0当量)并在室温下搅拌过夜。将反应溶剂真空旋干。残留物过柱纯化得到目标化合物4-三丁基锡乙炔基苯甲酰胺(1.04克，粗品)。

4-(8-环戊基-5-甲基-7-氧代-2-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-乙炔基)苯甲酰胺(4-((8-cyclopentyl-5-methyl-7-oxo-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-6-yl)ethynyl)benzamide)(化合物53)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-53。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z549[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.14(s,1H),8.96(s,1H),8.06(m,2H),7.91(m,3H),7.62(d,J＝8.3Hz,2H),7.49(dd,J＝9.1,3.0Hz,1H),7.42(s,1H),5.89(p,J＝8.9Hz,1H),3.23(m,4H),3.06(m,4H),2.67(s,3H),2.23(d,J＝8.0Hz,2H),1.93(s,2H),1.78(s,2H),1.61(m,2H)。

实施例38化合物54的制备(按照方案五线路制备)

合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-43，111-29替换为111-34，得化合物6-(3-胺基苯乙炔基)-8-环戊基-5-甲基-2-(5-(哌嗪-1-甲基)吡啶-2-胺基)-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(6-((3-aminophenyl)ethynyl)-8-cyclopentyl-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-ylmethyl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物54)

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z535[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.28(s,1H),8.98(s,1H),8.23(d,J＝1.9Hz,1H),8.04(d,J＝8.4Hz,1H),7.73(dd,J＝8.5,2.2Hz,1H),7.06(t,J＝7.8Hz,1H),6.75(s,1H),6.68(d,J＝7.5Hz,1H),6.61(d,J＝8.1Hz,1H),5.90(t,J＝8.7Hz,1H),5.24(s,2H),3.43(s,2H),2.70(t,J＝4.7Hz,4H),2.64(s,3H),2.28(d,J＝23.9Hz,6H),1.95(s,2H),1.79(s,2H),1.61(d,J＝4.8Hz,2H)。

实施例39化合物55的制备(按照方案五线路制备)

合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-42，111-29替换为111-34，得化合物6-(4-胺基苯乙炔)-8-环戊基-5-甲基-2-(5–(哌嗪-1-甲基)-吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(6-((4-aminophenyl)ethynyl)-8-cyclopentyl-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-ylmethyl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物55)。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z535[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.22(s,1H),8.94(s,1H),8.22(d,J＝1.5Hz,1H),8.05(d,J＝8.5Hz,1H),7.72(dd,J＝8.5,2.0Hz,1H),7.21(d,J＝8.4Hz,2H),6.58(d,J＝8.5Hz,2H),5.90(m,1H),5.58(s,2H),3.42(s,2H),2.69(t,J＝4.5Hz,4H),2.61(d,J＝9.1Hz,3H),2.26(m,6H),1.95(s,2H),1.80(m,2H),1.61(m,2H).

实施例40化合物56的制备(按照方案五线路制备)

3-((三丁基锡基)乙炔基)吡啶(3-((tributylstannyl)ethynyl)pyridine)(化合物502-56)的制备：将3-乙炔基吡啶(0.2克，1.94毫摩尔，1.0当量)溶解在10毫升干燥四氢呋喃中，氮气置换3次，冷却到-60度后，往里滴加正丁基锂(1.0毫升，2.5毫摩尔，1.3当量)，在此温度下搅拌半小时后升温至0度搅拌半小时,然后将这深黄色反应液再度冷却到-60度。将三丁基氯化锡(0.548克，1.97毫摩尔，1.01当量)滴加到反应液中，再在-60度下搅拌半小时，升温至室温搅拌3小时。用水将反应淬灭，加入乙酸乙酯进行萃取，萃取的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到无色油状物4-((三丁基锡基)乙炔基)吡啶(0.677克，收率：59％)。

8-环戊基-5-甲基-2-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-6-(吡啶-3-乙炔基)-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(8-cyclopentyl-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)-6-(pyridin-3-ylethynyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物56)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-56。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z507[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,CDCl₃)¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ8.82(d,J＝1.4Hz,1H),8.78(s,1H),8.55(dd,J＝4.9,1.6Hz,1H),8.17(d,J＝9.1Hz,1H),8.03(d,J＝2.9Hz,1H),7.91–7.89(m,2H),7.30-7.27(m,2H),6.06–5.86(m,1H),3.16(m,4H),3.11–3.02(m,4H),2.68(s,3H),2.38(s,2H),2.12(s,2H),1.89(m,2H),1.70(m,2H).

实施例41化合物57的制备(按照方案五线路制备)

2-((三丁基锡基)乙炔基)吡啶2-(tributylstannyl)ethynyl)pyridine(化合物502-57)的制备：将2-乙炔基吡啶(1.0克，14.7毫摩尔，1.0当量)溶解在10毫升干燥四氢呋喃中，氮气置换3次，冷却到-60度后，往里滴加正丁基锂(6.7毫升，16.2毫摩尔，1.1当量)，在此温度下搅拌半小时后升温至0度搅拌半小时,然后将这深黄色反应液再度冷却到-60度。将三丁基氯化锡(5.26克，16.2毫摩尔，1.1当量)滴加到反应液中，再在-60度下搅拌半小时，升温至室温搅拌3小时。用水将反应淬灭，加入乙酸乙酯进行萃取，萃取的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到无色油状物2-((三丁基锡基)乙炔基)吡啶(3.0克，收率：79％)。

8-环戊基-5-甲基-2-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-6-(吡啶-2-乙炔基)-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮8-cyclopentyl-5-methyl-2-(5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-ylamino)-6-(pyridin-2-ylethynyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one(化合物57)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-57。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 507[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.78(s,1H),8.62(d,J＝4.6Hz,1H),8.17(d,J＝9.1Hz,1H),8.03(d,J＝2.8Hz,2H),7.70–7.61(m,2H),7.33(dd,J＝9.0,2.9Hz,1H),7.23(d,J＝6.0Hz,1H),5.94(m,1H),3.19–3.14(m,4H),3.07(d,J＝5.0Hz,4H),2.71(s,3H),2.38(m,2H),2.07(m,2H),1.91–1.86(m,2H),1.68(m,2H)。

实施例42化合物58的制备(按照方案五线路制备)

4-(三丁基锡基)乙炔基吡啶(4-(tributylstannyl)ethynyl)pyridine)(化合物502-58)的制备：将4-溴吡啶(3.0克，15.5毫摩尔，1.0当量)、双三苯基磷二氯化钯(1.0克，1.4毫摩尔，0.09当量)和碘化亚铜(88.4毫克，0.47毫摩尔，0.03当量)、三乙胺(3.1克，30.7毫摩尔，2.0当量)加入到20毫升氮氮二甲酰胺中。把反应液置于氮气保护下，然后再加入三甲基硅乙炔(2.3克，23.4毫摩尔，1.5当量)。在常温下反应过夜后，将反应液用乙酸乙酯和水萃取，得到的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到棕色固体4-三甲基硅基乙炔基-吡啶(2.0克，收率74％)。LCMS(ESI):m/z176[M+1]⁺。

将反应所得的4-三甲基硅基乙炔基-吡啶(1.0克，6.0毫摩尔，1.0当量)、三丁基氧化锡(3.4克，6.0毫摩尔，1.0当量)、三甲基硅醇钾(0.77克，6.0毫摩尔，1.0当量)溶解在100毫升四氢呋喃中，在常温下反应2小时后，将反应液用乙酸乙酯和水萃取，得到的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，再用旋转蒸发仪浓缩干。浓缩后的产品经硅胶柱层析后得到无色油状物4-(三丁基锡基)乙炔基吡啶(2.0克，收率：89％)。

8-环戊基-5-甲基-2-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-6-(吡啶-4-乙炔基)-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(8-cyclopentyl-5-methyl-2-(5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-ylamino)-6-(pyridin-4-ylethynyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物58)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-58。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z507[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.25(s,1H),8.99(s,1H),8.64–8.60(m,2H),8.12(d,J＝2.9Hz,1H),7.93(d,J＝9.0Hz,1H),7.57–7.48(m,3H),5.92–5.81(m,1H),3.42(s,4H),3.22(s,4H),3.17(s,3H),2.65(d,J＝19.6Hz,2H),1.92(m,2H),1.80(s,2H),1.61(s,2H)。

实施例43化合物59的制备(按照方案五线路制备)

5-三丁基锡乙炔基-2叔丁氧羰基胺基嘧啶(5-Tributylstannanylethynyl-pyrimidin-2-yl)-carbamic acid tert-butyl ester)(化合物502-59)的制备：将2-胺基嘧啶(2.4克，25毫摩尔，1.0当量)和碘单质(2.7克，10.7毫摩尔，0.43当量)加入到60毫升冰醋酸中，然后再加入高碘酸(0.86克，3.76毫摩尔，0.15当量)和0.5毫升浓硫酸溶解于3毫升水的硫酸溶液。将反应体系置于氮气条件下，加热至80度反应24小时。然后将反应液倒入饱和的硫代硫酸钠水溶液中至溶液为澄清，用二氯甲烷(200毫升×3)萃取，把混合的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，硅胶柱层析之后得到白色固体5-碘-2-胺基嘧啶(1.4克，产率22.2％)。LCMS(ESI):m/z222[M+1]⁺。

将制得的5-碘-2-胺基-嘧啶(1.4克，6.33毫摩尔，1.0当量)和三乙胺(1.9克，19毫摩尔，3.0当量)溶解于25毫升四氢呋喃中，然后加入二甲胺基吡啶(DMAP)(0.3克，3.2毫摩尔，0.5当量)和碳酸二叔丁酯(2.77克，12.7毫摩尔，2.0当量)。将反应液加热至60度反应12小时。把反应液减压浓缩后，硅胶柱层析后得到棕色固体5-碘-2(叔丁氧羰基)胺基嘧啶(1.35克，收率：51％)。LCMS(ESI):m/z322[M+1]⁺。

将制得的5-碘-2(叔丁氧羰基)胺基嘧啶(1.35克，4.2毫摩尔，1.0当量)、三乙胺(0.85克，8.4毫摩尔，2.0当量)、双三苯基磷二氯化钯(0.15克，0.21毫摩尔，0.05当量)和碘化亚铜(40毫克，0.21毫摩尔，0.05当量)加入到15毫升乙腈中。把反应液置于氮气保护下，然后再加入三甲基硅乙炔(0.45克，4.6毫摩尔，1.1当量)。在常温下反应24小时后，把反应液减压浓缩，硅胶柱层析后得到棕色固体5-三甲基硅乙炔基-2叔丁氧羰基胺基嘧啶(1.2克，收率100％)。LCMS(ESI):m/z292[M+1]⁺。

将制得的5-三甲基硅乙炔基-2叔丁氧羰基胺基嘧啶(1.2克，3.3毫摩尔，1.0当量)溶解于20毫升甲醇中，然后加入氢氧化钾(0.58克，10个毫摩尔，3.0当量)。反应液在常温下搅拌4小时之后，减压浓缩，硅胶柱层析之后旋干，然后把产物溶解于20毫升干燥的四氢呋喃中，在氮气保护下，把温度降至负七十八度，然后滴加1M正丁基锂/四氢呋喃(3.75毫升，1.1当量)，一个小时后，加入三丁基氯化锡(1.1克，3.3毫摩尔，1.0当量)，在-78摄氏度反应一个小时后，移至常温搅拌16小时。减压浓缩后，硅胶柱层析得到黄色固体5-三丁基锡乙炔基-2叔丁氧羰基胺基嘧啶(0.47克，收率：22％)。

6-(2-胺基-嘧啶-5-乙炔基)-8-环戊基-5-甲基-2-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基)-8H-吡啶[2,3-d]嘧啶-7-酮(6-((2-aminopyrimidin-5-yl)ethynyl)-8-cyclopentyl-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物59)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-59。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z523[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.08(s,1H),8.93(s,1H),8.42(s,2H),8.06(s,1H),7.90(m,1H),7.48(m,1H),7.13(s,2H),5.91–5.86(m,1H),3.19(s,4H),3.02(s,4H),2.62(s,3H),2.22(m,2H),1.93(m,2H),1.77(m,2H),1.60(m,2H)。

实施例44化合物60的制备(按照方案五线路制备)

4-(三丁基锡乙炔基)-2-胺基吡啶5-((tributylstannyl)ethynyl)-2-aminopyridine(化合物502-60)的制备：将2-胺基-5碘-吡啶(1克,4.52毫摩尔,1.0当量)和CuI(0.08克,0.41毫摩尔,0.09当量)分散于50毫升N,N-二甲基甲酰胺中。在氮气保护下，分别加入双三苯基磷二氯化钯(0.3克,0.41毫摩尔,0.09当量),三乙胺(2毫升,14.3毫摩尔,3.0当量)和三甲基硅乙炔(1.34毫升,9.6毫摩尔,2.1当量)，室温下搅拌反应1小时。用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压旋干。最后用硅胶柱层析纯化得到棕色固体5-(三甲基硅乙炔基)-2-胺基吡啶(867毫克,收率：95％)。LCMS(ESI):m/z 191[M+1]⁺。

将制得的5-(三甲基硅乙炔基)-2-胺基吡啶(0.8克，4.188毫摩尔，1.0当量)和三甲基硅醇钾(0.536克，4.188毫摩尔，1.0当量)溶解于50毫升四氢呋喃中。然后加入三丁基氧化锡(2.136毫升，4.188毫摩尔，1.0当量)，加热至45℃，搅拌反应4小时。自然冷却至室温，减压旋干。最后用硅胶柱层析纯化得到黄色固体4-(三丁基锡乙炔基)-2-胺基吡啶(1.32克)。

4-(6-(2-胺基吡啶乙炔基)-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-胺基)吡啶-3-基)哌嗪(4-((8-cyclopentyl-5-methyl-7-oxo-2-(5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-ylamino)-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-6-yl)ethynyl)-2-amino pyridine)(化合物60)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-60。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 522[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.08(s,1H),8.91(s,1H),8.11(d,J＝2.0Hz,1H),8.02(d,J＝2.8Hz,1H),7.87(d,J＝9.0Hz,1H),7.451-7.49(m,2H),6.46(d,J＝7.5Hz,3H),5.93–5.80(m,1H),3.11–2.99(m,4H),2.90–2.78(m,4H),2.60(s,3H),2.21(s,2H),1.92(s,2H),1.81–1.73(m,2H),1.64–1.53(m,2H)。

实施例45化合物61的制备(按照方案五线路制备)

2-三丁基锡乙炔基-呋喃(tributyl(furan-2-ylethynyl)stannane)(化合物502-61)。将化合物呋喃(3毫升，41.25毫摩尔，1.0当量)溶解于30毫升干燥的四氢呋喃中，氮气保护下，降至-60℃后通过注射器滴加正丁基锂溶液(2.4M，17.2毫升，41.25毫摩尔，1.0当量)。滴完后在此温度下反应5小时，再升至室温反应2小时。降至-60℃后加碘单质固体(10.45克，41.25毫摩尔，1.0当量)，充分搅拌慢慢升至室温搅拌过夜。反应液用新鲜制备的硫代硫酸钠溶液和碳酸氢钠溶液淬灭，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，真空浓缩得红色油状产品2-碘呋喃(3.24克，粗品)。目标产物表征数据：¹H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.53(dd,J＝1.9,0.8Hz,1H),6.54(dd,J＝3.3,0.7Hz,1H),6.32(dd,J＝3.3,2.0Hz,1H)。

氮气保护下，将制得的化合物2-碘呋喃(1.5克，7.73毫摩尔，1.0当量)溶解于50毫升三乙胺中，然后加三甲基硅乙炔(834毫克，8.5毫摩尔，1.1当量)，双三苯基膦二氯化钯(161毫克，0.23毫摩尔，0.03当量)，碘化亚铜(96.8毫克，0.51毫摩尔，0.06当量)。反应混合物在室温避光反应16小时。反应体系用正己烷稀释，通过硅藻土过滤，再用正己烷洗两次，滤液在真空下浓缩，残留物通过柱层析纯化得到黄色油状目标化合物2-三甲基硅乙炔基呋喃(1.25克，收率：98.4％)。目标产物表征数据：¹H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.16(dd,J＝1.8,0.6Hz,1H),6.40(dd,J＝3.4,0.6Hz,1H),6.17(dd,J＝3.4,1.9Hz,1H),0.06(s,9H)。

在冰浴条件和氮气保护下，化合物2-三甲基硅乙炔基呋喃(1.25克，7.6毫摩尔，1.0当量)溶解于甲醇(50毫升)中，然后加进碳酸钾(2.41克，17.48毫摩尔，2.3当量)。反应混合物在室温下搅拌18小时。用300毫升水稀释反应，再用二氯甲烷萃取，有机相用水和饱和食盐水洗两到三次，再用无水硫酸钠干燥，真空旋干溶剂得到化合物2-乙炔基-呋喃(693毫克，收率：98.9％)。目标产物表征数据：¹H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.38(dd,J＝1.8,0.6Hz,1H),6.65(d,J＝3.4Hz,1H),6.38(dd,J＝3.4,1.9Hz,1H),3.38(s,1H)。

在氮气保护下，2-乙炔基-呋喃(690毫克，7.49毫摩尔，1.0当量)溶解于干燥的四氢呋喃(30毫升)中，然后降温至-60℃，滴加正丁基锂(4.1毫升，9.74毫摩尔，1.3当量)，然后在此温度下搅拌半小时，然后在0℃搅拌半小时。然后反应再降至-60℃，滴加三丁基氯化锡(2.44克，7.49毫摩尔，1.0当量)再搅拌半小时后升至室温搅拌过夜。用水淬灭反应，然后用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水清洗，再用无水硫酸钠干燥，浓缩。残留物快速过柱纯化得到棕色油状化合物2-三丁基锡乙炔基-呋喃(926毫克，收率：32.5％)。

8-环戊基-6-(呋喃-2-乙炔基)-5-甲基-2-[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺基]-8H-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7-酮(8-cyclopentyl-6-(furan-2-ylethynyl)-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one)(化合物61)的制备：合成方法如实施例13，仅是将其中的502-29替换为502-61。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 496[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ10.20(s,1H),9.19(s,1H),8.95(s,1H),8.11(s,1H),7.93(d,J＝9.0Hz,1H),7.79(s,1H),7.54(dd,J＝9.1,3.0Hz,1H),6.91(d,J＝3.4Hz,1H),6.62(dd,J＝3.4,1.9Hz,1H),5.93–5.81(m,1H),3.46–3.36(m,4H),3.26-3.24(m,4H),2.62(s,3H),2.25-2.21(m,2H),1.92(s,2H),1.85–1.72(m,2H),1.66–1.54(m,2H)。

实施例46化合物25的制备(按照方案四路线制备)

步骤46a：4-溴-2-氯-3-甲基-吡啶(4-bromo-2-chloro-3-methylpyridine)(化合物402-25)的制备：将4-溴-2氯吡啶(5克，26.19毫摩尔，1.0当量)溶于30毫升干燥的四氢呋喃中，然后在负70度条件下，慢慢滴加到新鲜制备的二异丙基胺基锂溶液(50毫升，28.8毫摩尔，1.1当量)里。保持在负70度条件下，反应一小时后，滴加碘甲烷(4.087克，28.8毫摩尔，1.1当量)。低温反应50分钟后，用饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再浓缩得到固体化合物4-溴-2-氯-3-甲基-吡啶(5.22克，收率：97.2％)。LCMS(ESI):m/z 208/206[M+1]⁺.

步骤46b：2-氯-3-甲基-4-环戊胺基吡啶2-chloro-N-cyclopentyl-3-methylpyridin-4-amine(化合物403-25)的制备：在氮气保护下，将化合物402-25(4.80克，23.4毫摩尔，1.0当量)，环戊胺(2.988克，35.1毫摩尔，1.5当量)，三(二亚苄基丙酮)二钯(1.07克，1.17毫摩尔，0.05当量)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(1.22克，2.1毫摩尔，0.09当量)和碳酸铯(15.24克，46.8毫摩尔，2.0当量)溶解于干燥的甲苯(100毫升)中，然后油浴加热回流5个小时。然后反应再降至室温，过滤，真空浓缩。得到的残留物通过柱层析纯化得到棕色油状化合物2-氯-3-甲基-4-环戊胺基吡啶(4.52克，收率：91.9％)。LCMS(ESI):m/z 211[M+1]⁺.

步骤46c：5-碘-2-氯-3-甲基-4-环戊胺基吡啶2-chloro-N-cyclopentyl-5-iodo-3-methylpyridin-4-amine(化合物404-25)的制备：将化合物403-25(1.0克，4.76毫摩尔，1.0当量)，溶解在甲苯比醋酸为5比1的体系溶液(10毫升)中，然后在氮气保护下加入N-碘代丁二酰亚胺(2.14克，9.52毫摩尔，2.0当量)。加热到90度搅拌过夜。反应混合物冷却至室温，然后慢慢倒进亚硫酸钠溶液中，用饱和碳酸钠溶液调反应液的PH值到8-9，用乙酸乙酯萃取。有机相用食盐水清洗，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得棕色油状残留物，通过柱层析纯化得到黄色油状化合物5-碘-2-氯-3-甲基-4-环戊胺基吡啶(848毫克，收率：53％)。LCMS(ESI):m/z 337[M+1]⁺.

步骤46d：(E)-3-(6-氯-4-环戊基胺基-甲基吡啶-3-基)-2-丁烯酸乙酯(ethyl(E)-3-(6-chloro-4-(cyclopentylamino)-5-methylpyridin-3-yl)but-2-enoate)(化合物405-25)的制备：在氮气保护下，化合物404-25(848毫克，2.52毫摩尔，1.0当量)溶解于N,N-二甲基甲酰胺和水10比1的溶液体系(50毫升)中，然后加双三苯基二氯化钯(177毫克，0.252毫摩尔，0.1当量)，碳酸钠(534毫克，5.04毫摩尔，2.0当量)和3-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼戊环-2-基)-丁-2-烯酸乙酯(727毫克，3.03毫摩尔，1.2当量)，然后升温至90度搅拌反应1个小时。降到室温后，用水淬灭反应，然后用乙酸乙酯萃取。有机相用水和食盐水清洗两到三遍，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得棕色油状残留物，通过柱层析纯化得到黄色油状化合物(E)-3-(6-氯-4-环戊基胺基-甲基吡啶-3-基)-2-丁烯酸乙酯(733毫克，收率：90.3％)。LCMS(ESI):m/z 323[M+1]⁺。

步骤46e：7-氯-1-环戊基-4,8-二甲基-1,6-萘啶-2(1H)-酮(7-chloro-1-cyclopentyl-4,8-dimethyl-1,6-naphthyridin-2(1H)-one)(化合物406-25)的制备：将化合物405-25(733毫克，2.27毫摩尔，1.0当量)溶解于干燥的四氢呋喃(50毫升)中，然后升温到80度后加入碳酸铯(1.48克，4.55毫摩尔，2.0当量)，搅拌1小时。过滤，浓缩，得到的残留物通过柱层析纯化得到蜡状固体7-氯-1-环戊基-4,8-二甲基-1,6-萘啶-2(1H)-酮(513毫克，收率：81.9％)。LCMS(ESI):m/z 277[M+1]⁺。

步骤46f：3-溴-7-氯-1-环戊基-4,8-二甲基-1,6-萘啶-2(1H)-酮3-bromo-7-chloro-1-cyclopentyl-4,8-dimethyl-1,6-naphthyridin--one(化合物407-25)的制备：在密闭的单口瓶中，加入化合物406-25(513毫克，1.86毫摩尔，1.0当量)和醋酸钠(305毫克，3.72毫摩尔，2.0当量)，再加入50毫升冰醋酸(3.4克，10.6毫摩尔，1.0当量)，搅拌条件下加入溴素(2毫升，39.5毫摩尔，20.1当量)，然后升温到60度搅拌过夜。降到室温后，用饱和亚硫酸钠溶液淬灭反应，然后用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和碳酸氢钠溶液洗两次，再用无水硫酸钠干燥，浓缩得到棕色油状残留物，通过柱层析纯化得到白色蜡状目标化合物3-溴-7-氯-1-环戊基-4,8-二甲基-1,6-萘啶-2(1H)-酮(500毫克，收率：76％)。LCMS(ESI):m/z 357/355[M+1]⁺。

步骤46g：7-氯-1-环戊基-3(1-乙氧基乙烯基)-4,8-二甲基-1,6-萘啶-2(1H)-酮(7-chloro-1-cyclopentyl-3-(1-ethoxyvinyl)-4,8-dimethyl-1,6-naphthyridin-2(1H)-one)(化合物408-25)的制备：将化合物407-25(250毫克，0.7毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(81毫克，0.07毫摩尔，0.1当量)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡(383毫克，1.06毫摩尔，1.5当量)分散在甲苯(20毫升)中，然后在氮气保护下加热回流4.5小时。反应混合物冷却至室温，浓缩，得到的残留物通过柱层析纯化得到黄色蜡状化合物7-氯-1-环戊基-3(1-乙氧基乙烯基)-4,8-二甲基-1,6-萘啶-2(1H)-酮(120毫克，收率：49.6％)。LCMS(ESI):m/z 347[M+1]⁺。

步骤46h：4-{6-[1-环戊基-3-(1-乙氧基乙烯基)-4,8-二甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,6-萘啶-7-胺基]吡啶-3-基}哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(tert-butyl 4-(6-((1-cyclopentyl-3-(1-ethoxyvinyl)-4,8-dimethyl-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-7-yl)amino)pyridin-3-yl)piperazine-1-carboxylate)(化合物409-25)的制备：在氮气保护下，将化合物408-25(120毫克，0.35毫摩尔，1.0当量)，4-(6-胺基-吡啶-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(化合物1-1-A12)(116.8毫克，0.42毫摩尔，1.2当量)，三(二亚苄基丙酮)二钯(16毫克，0.017毫摩尔，0.05当量)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(18毫克，0.031毫摩尔，0.09当量)和碳酸铯(228毫克，0.7毫摩尔，2.0当量)溶解于干燥的甲苯(20毫升)中，然后油浴加热回流过夜。反应混合物降至室温，过滤，真空浓缩。得到的残留物通过柱层析纯化得到黄色蜡状化合物4-{6-[1-环戊基-3-(1-乙氧基乙烯基)-4,8-二甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,6-萘啶-7-胺基]吡啶-3-基}哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(187毫克，收率：90.8％)。

步骤46i：3-乙酰基-1-环戊基-4,8-二甲基-7-(5-(哌嗪-1-基)-吡啶-2-胺基)-1,6-萘啶-2(1H)-酮(3-acetyl-1-cyclopentyl-4,8-dimethyl-7-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)-1,6-naphthyridin-2(1H)-one)(化合物25)的制备：化合物409-25(187毫克，0.317毫摩尔，1.0当量)溶解于二氯甲烷(50毫升)中，然后冰浴冷却。向反应液滴加盐酸甲醇溶液(3毫升)，然后在室温搅拌1小时。加入100毫升二氯甲烷稀释，再用饱和碳酸钠溶液调反应液的PH值到8-9，分液。有机相用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得黄色蜡状残留物，通过柱层析纯化得到黄色固体化合物3-乙酰基-1-环戊基-4,8-二甲基-7-(5-(哌嗪-1-基)-吡啶-2-胺基)-1,6-萘啶-2(1H)-酮(104毫克，收率：71.3％)。

目标产物表征数据：LCMS(ESI):m/z 461[M+1]⁺.¹H NMR(500MHz,DMSO-D6)δ8.56(m,2H),7.95(d,J＝2.8Hz,1H),7.71(d,J＝9.0Hz,1H),7.37(d,J＝9.1Hz,1H),4.50(m,1H),3.02(d,J＝3.8Hz,4H),2.85(s,4H),2.42(d,J＝11.0Hz,3H),2.38(s,3H),2.32(d,J＝15.0Hz,3H),2.21(s,2H),1.91(s,4H),1.52(d,J＝21.4Hz,2H).

实施例47生物活性试验

一、酶活性抑制实验

1、实验方法

(1)、CDK2活性抑制实验

采用Caliper迁移率变动检测技术(Caliper mobility shift assay)测定CDK2蛋白激酶活性(参见J Biomol Screen 14:31，2009)。将上述得到的化合物用DMSO溶解后用激酶缓冲液(20mM HEPES-pH 7.5，0.01％Triton X-100，10mM MgCl₂，2mM DTT)稀释，在384孔板中加入5μl的10％DMSO溶解的5倍反应终浓度的化合物，无化合物对照孔是5μl的10％DMSO,无酶活性对照孔是5μl激酶缓冲液。加入10μl的稀释2.5倍后的CDK2酶溶液(Carna,Cat.No04-103)后在室温下孵育10分钟，再加入10μl的稀释2.5倍后的底物溶液PeptideFAM-P18(GL Biochem,Cat.No.114202)。28℃下孵育60分钟后加25μl终止液终止反应。Caliper EZ Reader II(Caliper Life Sciences)上读取转化率数据。把转化率转化成抑制率数据。其中max是指DMSO无化合物对照孔的转化率，min是指无酶活对照的转化率。以化合物浓度和抑制率为横纵坐标，绘制曲线，使用XLFit excel add-in version 4.3.1软件拟合曲线并计算IC50。抑制率％＝(max-转化率)/(max-min)×100。

(2)、CDK4活性抑制实验

采用Caliper迁移率变动检测技术(Caliper mobility shift assay)测定CDK4蛋白激酶活性(参见J Biomol Screen 14:31，2009)。将上述得到的化合物用DMSO溶解后用激酶缓冲液(20mM HEPES-pH 7.5，0.01％Triton X-100，10mM MgCl2，2mM DTT)稀释，在384孔板中加入5μl的10％DMSO溶解的5倍反应终浓度的化合物，无化合物对照孔是5μl的10％DMSO,无酶活性对照孔是5μl的激酶缓冲液。加入10μl稀释2.5倍后的CDK4酶溶液(GST-CDK4(1-303end)/GST-CycD3(1-292end；Carna,Cat.No 04-105))后在室温下孵育10分钟，再加入10μl的稀释2.5倍后的底物溶液Peptide FAM-P8(GL Biochem,Cat.No.112396)。28℃下孵育3小时后加25μl终止液终止反应。Caliper EZ Reader II(Caliper Life Sciences)上读取转化率数据。按照上述方法把转化率转化成抑制率数据。其中，抑制率％＝(max-转化)/(max-min)×100。

(3)、CDK6活性抑制实验

采用Caliper迁移率变动检测技术(Caliper mobility shift assay)测定CDK6蛋白激酶活性(参见J Biomol Screen 14:31，2009)。将上述得到的化合物用DMSO溶解后用激酶缓冲液(20mM HEPES-pH 7.5，0.01％Triton X-100，10mM MgCl2，2mM DTT)稀释，在384孔板中加入5μl的10％DMSO溶解的5倍反应终浓度的化合物，无化合物对照孔是5μl的10％DMSO,无酶活性对照对照孔是5μl的激酶缓冲液。加入10μl的稀释2.5倍后的CDK6酶溶液(GST-CDK6(1-326end)；Carna,Cat.No 04-107)后在室温下孵育10分钟，再加入10μl的稀释2.5倍后的底物溶液Peptide FAM-P8(GL Biochem,Cat.No.112396)。28℃下孵育40分钟后加25μl终止液终止反应。Caliper EZ Reader II(Caliper Life Sciences)上读取转化率数据。把转化率转化成抑制率数据。其中max是指DMSO对照(无化合物)的转化率，min是指无酶活对照的转化率。按照上述方法把转化率转化成抑制率数据。其中，抑制率％＝(max-转化)/(max-min)×100。

2、实验结果

上述实验结果如下表所示。

表1酶活性抑制结果

化合物

CDK6

CDK4

CDK2

化合物

CDK6

CDK4

CDK2

1

V

V

I

2

III

3

IV

V

II

4

IV

V

I

5

IV

V

I

6

II

7

V

V

I

16

IV

V

II

17

III

18

IV

19

IV

21

IV

29

IV

V

I

30

IV

IV

31

II

32

IV

33

IV

34

IV

35

IV

36

II

37

III

39

III

IV

I

40

III

II

42

IV

43

V

44

IV

45

III

50

IV

51

III

52

II

53

II

54

IV

55

IV

56

II

57

III

59

II

60

III

61

IV

PD-0332991

V

V

I

LY2835219

IV

V

IV

LEE011

III

注：I表示IC₅₀＞500nM，II表示500nM≥IC₅₀＞100nM，III表示100nM≥IC₅₀＞50nM，IV表示50nM≥IC₅₀＞10nM，V表示IC₅₀≤10nM。

从上述结果我们可以看出，本发明提供的化合物对CDK2抑制的IC₅₀为I或II，即至少＞100nM，而对CDK4或CDK6抑制的IC₅₀多为100nM以下，即该类化合物可以选择性抑制CDK4和CDK6，特别是其中的化合物1、4、5、7、29、39等，对CDK2抑制的IC₅₀大于500nM，几乎无抑制活性，而对CDK4和CDK6有较高的抑制活性，能达到50nM以下，具有高选择性和高活性的特点。

二、肿瘤细胞增殖抑制实验

1、实验方法

采用CellTiter-Glo发光细胞活力检测试剂盒法(Promega，Madison，WI)测定三磷酸腺苷(ATP)的含量来评估细胞活力。肿瘤细胞株(SW620、ZR-75-1、MDA-MB-231)购买自上海复旦IBS细胞资源中心和美国菌种保藏中心(ATCC)。将胰酶将细胞从细胞培养盘上消化和DPBS培养基重悬后用Scepter自动细胞计数仪(Millipore#PHCC00000)计数测定细胞密度。将细胞稀释成每毫升含44,000个细胞的溶液。调整密度后的细胞溶液以每孔90微升加入细胞实验板中。孔板置于37℃、5％CO₂培养箱培养24小时后加入不同浓度的待试化合物。细胞在10％胎牛血清存在下与化合物一起培养72小时。使用LuminescentCell Viability Assay kit(见厂家说明书)测定ATP的含量来评估细胞生长抑制。简要来讲，每个孔中加入30μl试剂，摇板10分钟，诱导细胞裂解，用FluoroskanAscent FL(Thermo)检测记录萤光信号。从二甲基亚砜处理72小时的细胞得到最大的信号值。从单独的培养基(细胞数为零)得到最小信号值。抑制率％＝(最大信号值-化合物信号值)/(最大信号值-最小信号值)X100。使用GraphPad Prism V5.0(GraphPad Software,SanDiego,CA)软件处理数据。通过S形剂量-反应曲线拟合计算IC50值。

2、实验结果

上述实验结果如下表所示。

表2肿瘤细胞增殖抑制结果

化合物	SW620	ZR-75-1	MDA-MB-231
				1	IV	III	I
3	III	III	II
				4	V	V	IV
5	IV	IV	IV
				7	IV	IV	III
16	IV	IV	IV
				17	IV	IV	II
18	IV	III	III
				19	IV	III	II
21	III	III	II
				29	II	IV	II
30	IV		II

32	I	III	II
				33	II	II
34	II	III	II
				35	II	III
43	III	III	II
				44	II	III	II
50	II	III
				54	III	III	II
55	III	III
				PD-0332991	IV	IV	IV
LY2835219	IV	V	IV
				LEE011	III	V	II

注：I表示IC₅₀＞5μM，II表示5μM≥IC₅₀＞1μM，III表示1μM≥IC₅₀＞0.5μM，IV表示0.5μM≥IC₅₀＞0.1μM，V表示IC₅₀≤0.1μM。

从上述结果我们可以看出，本发明提供的化合物对SW620、ZR-75-1、MDA-MB-231肿瘤细胞株均有抑制活性，且部分化合物活性较高。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (7)

1.嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物选自如下化合物：

2.权利要求1所述的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)化合物501首先用有机锂试剂与炔的末端质子交换，随后与三丁基氯化锡反应生成化合物502；

(2)化合物111在钯试剂催化下与化合物502反应生成目标化合物；

反应路线如下：

其中，R₁、R₄、R₉具有与权利要求1所述嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物相应位置取代基相同的定义。

3.权利要求1所述的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐在制备防治肿瘤药物中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为实体肿瘤和血液肿瘤。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述实体肿瘤和血液肿瘤包括乳腺癌，脂肪肉瘤，非小细胞肺癌，肝癌，卵巢癌，胶质母细胞瘤，黑素瘤，多发性骨髓瘤和套细胞淋巴瘤。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述乳腺癌包括：在绝经后女性***受体阳性和/或人表皮生长因子受体2阴性的局部晚期或转移性乳腺癌。

7.一种防治肿瘤的药物组合物，其特征在于，包括作为活性成份的权利要求1所述的嘧啶或吡啶并吡啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。