CN105315294B - 7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体及其制备方法和应用 - Google Patents

7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了7‑乙基‑10‑羟基喜树碱药物前体及其制备方法和应用。该药物前体的结构式如式(Ⅰ)或式(Ⅱ)所示，是由7‑乙基‑10‑羟基喜树碱的C‑10位或C‑20位羟基与疏水性分子发生酯化反应生成的。该药物前体具有较好的抗肿瘤活性，在体内能够以水解的方式直接释放活性成分，不需要羧酸酯酶的催化水解，生物利用率高；本发明的药物前体不仅在水中具有较好的溶解性，而且在吐温80等两亲性表面活性剂中也具有极好的溶解性，溶解度可达30mg/mL以上，用水稀释后仍具有较高的稳定性；本发明通过单步酯化法即可获得所述药物前体，产率高，制备成本低，稳定性高，安全性好，符合临床用药的要求，符合大规模工业化生产的要求，具备良好的市场前景与临床应用价值。

Description

7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及喜树碱类药物前体，具体涉及一系列7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体及其制备方法和应用。
背景技术
喜树碱是从喜树中提取的一种天然生物碱，其主要作用于DNA拓扑异构酶I，具有极强的抑制肿瘤细胞增殖的能力。7-乙基-10-羟基喜树碱(SN-38)是其中一种衍生物，尽管SN-38的抗肿瘤效果好，但是由于水溶性差，而且也不溶于药剂学上可以接受的溶剂(如吐温80、聚氧乙烯蓖麻油等)，因此不能直接用于临床。7-乙基-10-羟基喜树碱的结构式如下：
目前临床上被批准应用的喜树碱类抗癌药物有伊立替康(Irinotecan,CPT-11)等。伊立替康是通过对7-乙基-10-羟基喜树碱上的C10位羟基进行官能团修饰而获得的，其结构式如下：
伊立替康进入体内需要转化为活性的SN-38才能发挥药效，但伊立替康在体内转化成活性的SN-38时需要羧酸酯酶(Carboxylesterase)的催化水解。伊立替康在体内的生物利用率低，只有2-8％的转化率。相比伊立替康，SN-38的体外抗肿瘤活性高于伊立替康100-1000倍。
基于上述原因，近年来人们通过在7-乙基-10-羟基喜树碱上连接亲水性基团开发了一系列7-乙基-10-羟基喜树碱的高分子偶联物来克服其水溶性问题，而且可以避开像伊立替康那样需要体内酶解才能释放药物的路径。如Enzon Pharmaceuticals开发的EZN-2208高分子药物。该药物中，通过有机合成的方法把SN-38偶联至在四臂的聚乙二醇链上，提高了药物的水溶性及体内代谢的半衰期。该产品已经被浙江海正药业购买并申报临床1.1类新药。
但是上述聚乙二醇偶联的SN-38药物存在着一些缺陷，首先，载药量低(大约为4％)，需要大量的辅料；其次，生成所需的偶联药物，需要多步有机反应，制备过程繁琐，质量不易控制。
发明内容
本发明提供了一种7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体，该药物前体既能溶解于水中，也能溶解于吐温等两亲性表面活性剂中，大大增加了SN-38的应用范围。
7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体，结构式如式(Ⅰ)或式(Ⅱ)所示：
其中，R表示疏水性基团。
与现有提高药物水溶性的研究思路(连接亲水性基团)不同，本发明独辟蹊径地在SN-38的C-10位或C-20位羟基上连接疏水性基团后，发现得到的药物前体能够溶解于药剂学上可以接受的溶剂(吐温80、聚氧乙烯蓖麻油等)，并通过生理盐水稀释后可以静脉注射。同时我们也发现得到的药物前体能够在水溶液中直接溶解。通过酯键连接的方式使得药物前体能够在体内通过水解的方式直接释放有效抗肿瘤成分，避开了如伊立替康需要羧酸酯酶催化水解才能释放活性药物的问题。
本发明中，所述疏水性基团由以下疏水性分子中的其中一种提供：
脂肪酸，脱氧胆酸，青蒿素与酸酐形成的单酯，胆固醇与酸酐形成的单酯，叔丁氧羰基保护的氨基酸；
所述疏水性分子中的羧基参与形成式(Ⅰ)或式(Ⅱ)中的酯键(该酯键与R基团相连)。
作为优选，所述脂肪酸的碳链长度为C2～C22。所述脂肪酸可选择饱和脂肪酸或不饱和脂肪酸，优选为不饱和脂肪酸。相比于饱和脂肪酸，不饱和脂肪酸修饰的SN-38在吐温、水中均具有更高的溶解度。
所述不饱和脂肪酸优选为DHA、亚麻酸、油酸或亚油酸，更优选为DHA、亚麻酸或亚油酸，最优选为亚麻酸或亚油酸；所述饱和脂肪酸可选用正丁酸、正庚酸或十二酸。
青蒿素与酸酐形成的单酯、胆固醇与酸酐形成的单酯，这两类物质的疏水性取决于青蒿素、胆固醇，因此对参与形成单酯的酸酐种类(含碳个数)无严格要求。作为优选，所述青蒿素与酸酐形成的单酯为青蒿琥酯，所述胆固醇与酸酐形成的单酯为胆固醇丁二酸单酯。所采用的丁二酸酐结构简单，容易获取。
作为优选，所述氨基酸为甘氨酸、丝氨酸、缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸或组氨酸。作为进一步优选，所述氨基酸为甘氨酸或亮氨酸。本发明中，氨基酸的氨基经叔丁氧羰基保护后疏水性大大提高，使反应生成的药物前体保持相对较低的极性，更易在水溶液中自组装进而溶于水。
本发明还提供了所述7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体的制备方法，包括：
(1)在缩合剂存在下，7-乙基-10-羟基喜树碱的C10位羟基与疏水性分子发生酯化反应；
作为优选，所述疏水性分子为脂肪酸，脱氧胆酸，青蒿素与酸酐形成的单酯，胆固醇与酸酐形成的单酯，叔丁氧羰基保护的氨基酸；
作为进一步优选，所述脂肪酸为碳链长度为C2～C22的不饱和脂肪酸，所述青蒿素与酸酐形成的单酯为青蒿琥酯，所述胆固醇与酸酐形成的单酯为胆固醇丁二酸单酯，所述氨基酸为甘氨酸、丝氨酸、缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸或组氨酸；
作为优选，所述缩合剂为N,N’-二环己基碳二亚胺(DCC)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)或N,N’-二异丙基碳二酰亚胺(DIPC)；
(2)反应完成后对粗产物进行分离纯化，获得结构式如式(Ⅰ)所示的7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体；
分离纯化步骤用于除去反应中未反应的原料以及所用的缩合剂、催化剂等杂质。
或者，包括：
(1)在7-乙基-10-羟基喜树碱的C10位羟基上引入保护基；
作为优选，所述保护基为叔丁基二苯基硅基；
具体地，将7-乙基-10-羟基喜树碱与叔丁基二苯基氯硅烷混合溶解，室温下在无水二氯甲烷里面回流过夜；
(2)在缩合剂存在下，步骤(1)产物的C20位羟基与疏水性分子进行酯化反应；
(3)脱去步骤(2)产物中的保护基；
将步骤(2)产物与四丁基氟化铵(TBAF)反应，以脱去步骤(1)连接在C10位上的叔丁基二苯基硅基；
(4)反应完成后对粗产物进行分离纯化，获得结构式如式(Ⅱ)所示的7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体。
本发明还提供了所述7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体在制备抗肿瘤药物中的应用。通过疏水性基团的修饰，本发明的7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体既可溶解于吐温80、聚氧乙烯蓖麻油等常规药用试剂中，也能在水中自组装成纳米粒。
其中，由所述7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体在水中自组装成纳米粒而获得的纳米制剂经冻干后可以单独使用，也可以加入不同的赋形剂后加工成任何一种剂型，包括片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液及用于静脉注射的水针剂或粉针剂。
为使该药物前体能够在水中自组装成纳米粒，只能在SN-38的C10位羟基或C20位羟基处连接疏水性基团，不能在两个位置上同时连接疏水性基团，即其中一个羟基必须保持游离状态，从而使药物前体具有两亲性；若两个羟基都被修饰，则药物前体会因不能在水中自组装成纳米粒从而导致沉淀。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)本发明的7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体比临床用药伊立替康具有更好的抗肿瘤活性，在体内能够以水解的方式直接释放活性成分，不需要羧酸酯酶的催化水解，生物利用率高；
(2)本发明的7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体不仅在水中具有较好的溶解性(达8mg/mL)，而且在吐温80等两亲性表面活性剂中也具有极好的溶解性，溶解度可达30mg/mL以上，用水稀释后仍具有较高的稳定性；
(3)本发明通过单步酯化法即可获得所述药物前体，产率高，制备成本低，稳定性高，安全性好，符合临床用药的要求，符合大规模工业化生产的要求，具备良好的市场前景与临床应用价值。
附图说明
图1为实施例1中含烷烃链化合物的SN-38前体药物1的合成路线；
图2为实施例2中含烷烃链化合物的SN-38前体药物2的合成路线；
图3为实施例3中含烷烃链化合物的SN-38前体药物3的合成路线；
图4为实施例4中含不饱和烷烃链化合物的SN-38前体药物4的合成；
图5为实施例5中含不饱和烷烃链化合物的SN-38前体药物5的合成路线；
图6为实施例6中含不饱和烷烃链化合物的前体药物6的合成路线；
图7为实施例7中含不饱和烷烃链化合物的前体药物7的合成路线；
图8为实施例8中甘氨酸偶联的SN-38前体药物8的合成路线；
图9为实施例9中缬氨酸偶联的SN-38前体药物9的合成路线；
图10为实施例10中亮氨酸偶联的SN-38前体药物10的合成路线；
图11为实施例11中苯丙氨酸偶联的SN-38前体药物11的合成路线；
图12为实施例12中组氨酸偶联的SN-38前体药物12的合成路线；
图13为实施例13中青蒿琥酯偶联的SN-38前体药物13的合成路线；
图14为实施例14中胆固醇偶联的SN-38前体药物15的合成路线；
图15为实施例15中脱氧胆酸偶联的SN-38前体药物16的合成路线；
其中，DMF表示二甲基甲酰胺，EDC表示1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺，DMAP表示4-二甲氨基吡啶，DIEA表示N,N-二异丙基乙胺，pyridine表示吡啶。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细说明。
实施例1含烷烃链化合物的SN-38前体药物1的合成
在100mL圆底烧瓶中加入正丁酸(116μL，1.3mmol)和SN-38(500mg，1.3mmol)，溶解在28mL无水DMF(二甲基甲酰胺)中，再加入EDC·HCl(267mg，1.4mmol)，DMAP(4-二甲氨基吡啶)(172mg，1.4mmol)和DIEA(N,N-二异丙基乙胺)(232μL，1.4mmol)。25℃搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝75:1)后得到产物1(350mg，产率59％)。
产物1的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.02-1.05(t,3H),1.08-1.12(t,3H),1.42(t,3H),1.83-1.90(m,4H),2.64-2.67(t,2H),3.18-3.20(t,2H),5.30(s,2H),5.28-5.32(d,1H,J＝16),5.71-5.75(d,1H,J＝16.4),7.57-7.59(d,1H,J＝7.6),7.84(s,1H),7.86(s,1H),8.35-8.37(d,1H,J＝8.4)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for[C26H27N2O6]+[M+H]+＝463.1864，obsd463.1893。
实施例2含烷烃链化合物的SN-38前体药物2的合成
在100mL圆底烧瓶中加入正庚酸(108μL,0.76mmol)和SN-38(300mg,0.76mmol)，溶解在20mL无水DMF中，再加入EDC·HCl(160mg,0.84mmol)，DMAP(103mg,0.84mmol)和DIEA(149mL,0.84mmol)；25℃搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝75:1)后得到产物2(157mg,产率41％)。
产物2的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ0.91-0.94(t,3H),1.00-1.04(t,3H),1.35-1.41(m,6H),1.43-1.49(t,3H),1.80-1.91(m,4H),2.64-2.68(t,2H),3.17-3.18(q,2H),5.27(s,2H),5.27-5.31(d,1H,J＝16.4),5.70-5.74(d,1H,J＝16.4),7.54-7.56(d,1H,J＝7.6),7.79(s,1H),7.83(s,1H)8.29-8.31(d,1H,J＝9.2)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for[C29H33N2O6]+[M+H]+＝505.2333；obsd505.2289。
实施例3含烷烃链化合物的SN-38前体药物3的合成
在100mL圆底烧瓶中加入十二酸(153mg,0.76mmol)和SN-38(300mg,0.76mmol)，溶解在20mL无水DMF中，再加入EDC·HCl(160mg,0.84mmol)，DMAP(103mg,0.84mmol)和DIEA(149μL,0.84mmol)；25℃搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝100:1)后得到产物3(220mg,50％)。
产物3的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ0.86-0.90(t,3H),1.01-1.05(t,3H),1.25-1.35(m,16H),1.40-1.43(t,3H),1.78-1.91(m,4H),2.64-2.68(t,2H),3.15-3.22(q,2H),5.30(s,2H),5.27-5.31(d,1H,J＝16.4),5.70-5.74(d,1H,J＝16.4),7.56-7.58(d,1H,J＝7.6),7.85(s,1H),7.86(s,1H),8.34-8.37(d,1H,J＝9.2)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for[C34H43N2O6]+[M+H]+＝575.3116；obsd575.3091。
实施例4含不饱和烷烃链化合物的SN-38前体药物4的合成
在100mL圆底烧瓶中加入山梨酸(85.7mg,0.76mmol)和SN-38(300mg,0.76mmol)，溶解在10mL无水DMF中，再加入EDC·HCl(160mg,0.84mmol)，DMAP(103mg,0.84mmol)和DIEA(149μL,0.84mmol)；30℃搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝100:1)后得到产物4(160mg,43％)。
产物4的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.02-1.06(t,3H),1.39-1.42(t,3H),1.87-1.94(m,5H),3.14-3.18(q,2H),5.27(s,2H),5.30-5.34(d,1H,J＝16.0),5.72-5.76(d,1H,J＝16.0),6.02-6.06(d,1H,J＝15.2),6.31-6.34(m,2H),7.50-7.56(m,1H),7.59-7.61(d,1H,J＝9.2),7.68(s,1H),7.87(s,1H),8.23-8.25(d,1H,J＝8.8)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for[C28H27N2O6]+[M+H]+＝487.1864；obsd487.1859。
实施例5含不饱和烷烃链化合物的SN-38前体药物5的合成
在100mL圆底烧瓶中加入油酸(21mg,0.076mmol)和SN-38(30mg,0.076mmol)，溶解在2mL无水DMF中，再加入EDC·HCl(16mg,0.084mmol)，DMAP(10mg,0.084mmol)和DIEA(15μL,0.084mmol)；室温搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝100:1)后得到产物5(26mg,52％)。
产物5的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ0.79-0.82(t,3H),0.95-0.99(t,3H),1.20-1.32(m,23H),1.73-1.95(m,4H),1.99-2.04(m,4H),2.64-2.68(t,2H),3.15-3.21(q,2H),5.28(s,2H),5.30-5.37(m,2H),5.32-5.36(d,1H,J＝14.8),5.72-5.76(d,1H,J＝16.4),7.55-7.57(d,1H,J＝7.6),7.58(s,1H),7.85(s,1H),8.32-8.34(d,1H,J＝9.2)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for[C40H53N2O6]+[M+H]+＝657.3898；obsd657.3831。
实施例6含不饱和烷烃链化合物亚油酸的SN-38前体药物6的合成
在100mL圆底烧瓶中加入亚油酸(214mg,0.76mmol)和SN-38(300mg,0.76mmol)，溶解在5mL无水DMF中，再加入EDC·HCl(161mg,0.84mmol)，DMAP(103mg,0.84mmol)和DIEA(140μL,0.84mmol)；室温搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝100:1)后得到产物6(340mg,68％)。
产物6的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ0.79-0.84(m,6H),0.95-0.99(t,3H),1.18-1.40(m,16H),1.73-1.87(m,4H),1.96-2.01(m,4H),2.57-2.61(t,2H),2.70-2.73(t,2H),3.06-3.12(q,2H),3.69(s,1H),5.19-5.33(m,7H),5.67-5.71(d,1H,J＝16.4),7.48-7.55(d,1H,J＝7.6),7.60(s,1H),7.76(s,1H),8.17-8.19(d,1H,J＝9.2)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for[C40H51N2O6]+[M+H]+＝655.3742；obsd655.3731。
实施例7含不饱和烷烃链化合物亚麻酸的SN-38前体药物7的合成
在100mL圆底烧瓶中加入亚麻酸(250mg,0.9mmol)和SN-38(352mg,0.9mmol)，溶解在2mL无水DMF中，再加入EDC·HCl(189mg,1mmol)，DMAP(121mg,1mmol)和DIEA(163μL,1mmol)；室温搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝100:1)后得到产物7(318mg,49％)。
产物7的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ0.86-0.89(t,3H),0.96-1.00(t,3H),1.02-1.06(t,3H),1.25-1.47(m,12H),1.78-1.94(m,4H),2.06-2.09(t,2H),2.64-2.68(t,2H),2.80-2.83(t,2H),3.13-3.19(q,2H),3.77(s,1H),5.27-5.39(m,9H),5.74-5.78(d,1H,J＝16.4),7.54-7.56(d,1H,J＝7.6),7.66(s,1H),7.83(s,1H),8.24-8.26(d,1H,J＝9.2)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for[C40H49N2O6]+[M+H]+＝653.3585；obsd653.3572。
实施例8甘氨酸偶联的SN-38前体药物8的合成
在100mL圆底烧瓶中加入Boc-Gly-OH(144.8mg,0.76mmol)和SN-38(300mg,0.76mmol)，溶解在20mL无水DMF中，再加入EDC·HCl(160mg,0.84mmol)，DMAP(103mg,0.84mmol)和DIEA(139μL,0.84mmol)；25℃搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝80:1)后得到产物8(540mg,77％)。
产物8的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ0.97-1.06(t,3H),1.37-1.40(t,3H),1.50(s,9H),1.86-1.94(m,2H),3.14-3.17(q,2H),4.27-4.28(d,2H,J＝5.6),5.16(br,1H),5.26(s,2H),5.39-5.43(d,1H,J＝17.2),5.74-5.78(d,1H,J＝16.4),7.55-7.58(d,1H,J＝7.6),7.64(s,1H),7.85(s,1H),8.22-8.24(d,1H,J＝9.2)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for[C29H32N3O8]+[M+H]+＝550.2184；obsd550.2222。
实施例9缬氨酸偶联的SN-38前体药物9的合成
在100mL圆底烧瓶中加入Boc-Val-OH(166mg,0.76mmol)和SN-38(300mg,0.76mmol)，溶解在20mL无水DMF中，再加入EDC·HCl(160mg,0.84mmol)，DMAP(103mg,0.84mmol)和DIEA(149μL,0.84mmol)；室温搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝50:1)后得到产物9(215mg,46.4％)。
产物9的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO)：δ0.87-0.93(t,3H),1.05-1.07(d,6H,J＝6.4),1.27-1.31(t,3H),1.45(s,9H),1.86-1.90(m,2H),2.24-2.29(m,1H),4.09-4.17(m,1H),3.15-3.20(m,2H),5.34(s,2H),5.44(s,2H),7.24(s,1H),7.55-7.57(d,1H,J＝7.2),7.90(s,1H),8.23-8.25(d,1H,J＝9.2)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for[C32H38N3O8]+[M+H]+＝592.2653；obsd592.2637。
实施例10亮氨酸偶联的SN-38前体药物10的合成
在100mL圆底烧瓶中加入Boc-Leu-OH(318mg,1.3mmol)和SN-38(500mg,1.3mmol)，溶解在20mL无水DMF中，再加入EDC·HCl(269mg,1.4mmol)，DMAP(171.4mg,1.4mmol)和DIEA(232μL,1.4mmol)；室温搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝50:1)后得到产物10(540mg,77％)。
产物10的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.02-1.04(t,3H),1.06-1.08(m,6H),1.39-1.43(t,3H),1.49(s,9H),1.72-1.77(m,1H),1.86-1.93(m,4H),2.11(s,1H),3.15-3.20(q,2H),4.59(brs,1H),5.31(s,2H),5.30-5.34(d,1H,J＝16.4),5.71-5.75(d,1H,J＝16.4),7.56-7.58(d,2H,J＝9.2),7.68(s,1H),7.86(s,1H),8.22-8.25(d,2H,J＝9.2)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for[C33H40N3O8]+[M+H]+＝606.2810；obsd606.2788。
实施例11苯丙氨酸偶联的SN-38前体药物11的合成
在100mL圆底烧瓶中加入Boc-Phe-OH(318mg,1.3mmol)和SN-38(500mg,1.3mmol)，溶解在25mL无水DMF中，再加入EDC·HCl(269mg,1.4mmol)，DMAP(171.4mg,1.4mmol)和DIEA(232μL,1.4mmol)；室温搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝75:1)后得到产物11(450mg,55％)。
产物11的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.00-1.04(t,3H),1.24-1.26(t,3H),1.46(s,9H),1.90-1.94(m,2H),3.11-3.16(q,2H),3.25-3.29(m,3H),4.84(s,1H),5.32(s,2H),5.32-5.36(d,1H,J＝16.8),5.69-5.74(d,1H,J＝16.8),7.33-7.38(m,5H),7.40-7.42(d,1H,J＝7.6),7.63(s,1H),7.68(s,1H),8.18-8.20(d,1H,J＝9.6)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for[C36H38N3O8]+[M+H]+＝640.2653；obsd640.2634。
实施例12组氨酸偶联的SN-38前体药物12的合成
在100mL圆底烧瓶中加入Boc-His(Boc)-OH(318mg,1.3mmol)和SN-38(500mg,1.3mmol)，溶解在25mL无水DMF中，再加入EDC·HCl(269mg,1.4mmol)，DMAP(171.4mg,1.4mmol)和DIEA(232μL,1.4mmol)；25℃搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝75:1)后得到产物12(575mg,62.8％)。
产物12的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.02-1.06(t,3H),1.38-1.42(t,3H),1.48(s,9H),1.63(s,9H),1.86-1.94(m,2H),3.12-3.18(q,2H),3.49-3.78(m,2H),4.90(m,1H),5.26(s,2H),5.29-5.33(d,1H,J＝16.0),5.74-5.78(d,1H,J＝16.4),7.29(s,1H),7.59-7.61(d,1H,J＝9.2),7.64(s,1H),7.90(s,1H),8.07(s,1H),8.21-8.23(d,1H,J＝8.8)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for[C38H44N5O10]+[M+H]+＝730.3083；obsd730.3137。
实施例13青蒿琥酯偶联的SN-38前体药物13的合成
在100mL圆底烧瓶中加入青蒿琥酯(19mg,0.051mmol)和SN-38(20mg,0.051mmol)，溶解在2mL DMF中，再加入EDC·HCl(12mg,0.056mmol)，DMAP(8mg,0.056mmol)；室温搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝50:1)后得到产物13(23mg,59.5％)。
产物13的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ0.86-0.87(m,3H),0.94-0.97(m,6H),1.25-1.28(m,3H),1.29-1.31(m,2H),1.37-1.38(m,4H),1.40(s,2H),1.41-1.43(m,3H),1.62-1.65(m,2H),1.75(m,1H),1.85-1.89(m,2H),1.90-1.95(m,1H),2.02(s,1H),2.94-2.97(t,2H),2.98-3.07(m,2H),3.15-3.20(t,2H),5.27(s,2H),5.28-5.32(d,1H,J＝16),5.71-5.75(d,1H,J＝16.4),7.58-7.61(d,1H,J＝7.6),7.77(s,1H),7.84(s,1H),8.29-8.31(d,1H,J＝9.2)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for[C41H46N2O12]+[M+H]+＝759.3124；obsd759.3125。
实施例14胆固醇偶联的SN-38前体药物15的合成
在100mL圆底烧瓶中加入胆固醇(1.16g,3mmol)和丁二酸酐(0.902g,9mmol)，溶解在10mL吡啶中，再加入DMAP(367mg,3mmol)；室温搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝100:1)后得到产物14(950mg,65％)。
产物14的1H NMR核磁数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ0.67-1.57(m,37H),1.83-2.02(m,6H),2.30-2.32(m,1H),2.60-2.62(d,2H,J＝6.8),2.66-2.68(d,2H,J＝6.4),5.36-5.37(m,1H)。
在100mL圆底烧瓶中加入产物14(300mg,0.62mmol)和SN-38(241mg,0.62mmol)，溶解在18mL DMF中，再加入EDC·HCl(140mg,0.73mmol)，DMAP(80mg,0.73mmol)和吡啶(200μL,1mmol)；室温搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝100:1)，得到产物15(381mg,71.8％)。
产物15的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ0.64-1.59(m,37H),0.95-0.98(t,3H),1.32-1.43(t,3H),1.84-1.89(m,2H),1.87-2.02(m,6H),2.35-2.36(m,1H),2.78-2.80(d,2H,J＝7.2),2.96-2.98(d,2H,J＝6.8),3.11-3.16(q,2H),5.05-5.15(m,1H),5.23(s,2H),5.26-5.30(d,1H,J＝16),5.71-5.75(d,1H,J＝16.4),7.53-7.56(d,1H,J＝9.2),7.64(s,1H),7.80(s,1H),8.16-8.18(d,1H,J＝9.2)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for[C53H69N2O8]+[M+H]+＝861.5048；obsd861.5019。
实施例15脱氧胆酸偶联的SN-38前体药物16的合成
在100mL圆底烧瓶中加入脱氧胆酸(300mg,0.76mmol)和SN-38(300mg,0.76mmol)，溶解在13mL DMF中，再加入EDC·HCL(160mg,0.84mmol)，DMAP(103mg,0.84mmol)和DIEA(149μL,0.84mmol)；室温搅拌过夜，除去反应溶剂后，固体溶于二氯甲烷，然后分别用5％柠檬酸，饱和碳酸氢钠，饱和食盐水清洗；有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，收集滤液后减压除去溶剂；固体用柱层析色谱分离纯化(DCM:MeOH＝30:1)，得到产物16(85mg,14.5％)。
产物16的1H NMR核磁数据以及质谱数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ0.73(s,3H),0.91-0.94(t,6H),1.03-1.07(t,3H),1.09-1.10(m,4H),1.26(s,6H),1.39-1.43(t,7H),1.53-1.59(m,10H),1.77-1.81(m,2H),3.16-3.18(q,2H),3.64-3.68(m,2H),3.98-4.07(m,2H),5.27(s,2H),5.30-5.34(d,1H,J＝16.4),5.74-5.78(d,1H,J＝16.4),7.54-7.57(dd,1H,J＝9.2,2.8),7.66(s,1H),7.825-7.832(d,1H,J＝2.8),8.23-8.25(d,1H,J＝9.2)；
HR-ESI Qq-LTMS：calcd for C46H59N2O9[M+H]+＝783.4215；obsd783.3847。
实施例16溶解性评价
对实施例1-13中获得药物前体在吐温80和水中的溶解性进行评价，评价结果见表1。
表1.药物前体在吐温80及水中的溶解情况
由表1可见，以油酸制成的药物前体5、以亚油酸制成的药物前体6、以亚麻酸制成的药物前体7、以亮氨酸制成的药物前体10、以组氨酸制成的药物前体12、以青蒿琥酯制成的药物前体13、以胆固醇制成的药物前体15均能溶解于吐温80和水中，其中以药物前体6、7的溶解性最好，其在吐温80中的溶解度达30mg/mL，在水中的溶解度达8mg/mL。
实施例15抗肿瘤药效评价
为评价实施例1-13中获得的药物前体对肿瘤细胞的杀伤能力，以肠癌细胞系HCT-116、SW480、肺癌A549及乳腺癌MCF-7为例，采用MTT法进行了药效评价，并以伊立替康及SN-38作为对照。一系列前药对各种肿瘤细胞的毒性结果见表2。
表2.药物培养48小时后细胞成活率的测定(MTT)(IC50±SD inμM)
由表1可见，本发明制备的SN-38前药与细胞共培养48小时后，其体外抗肿瘤活性均远远优于临床用药伊立替康，并且具有与SN-38相类似的效果。

Claims (4)

1.7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体，其特征在于，结构式如式(Ⅰ)所示：
其中，R表示疏水性基团；
所述疏水性基团为亚油酸或亚麻酸；
所述疏水性分子中的羧基参与形成式(Ⅰ)的酯键。
2.如权利要求1所述7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体的制备方法，包括：
(1)在缩合剂存在下，7-乙基-10-羟基喜树碱的C10位羟基与疏水性分子发生酯化反应；
(2)反应完成后对粗产物进行分离纯化，获得结构式如式(Ⅰ)所示的7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体；
所述疏水性分子为亚油酸或亚麻酸。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述缩合剂为N,N’-二环己基碳二亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺或N,N’-二异丙基碳二酰亚胺。
4.如权利要求1所述7-乙基-10-羟基喜树碱药物前体在制备抗肿瘤药物中的应用。
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Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105777769B (zh) * 2014-12-26 2018-05-22 中国人民解放军第二军医大学 一种7-乙基-10-羟基喜树碱的衍生物及其制备方法与应用
JP2019094260A (ja) * 2016-03-28 2019-06-20 国立大学法人東北大学 癌疾患治療用ナノ粒子化製剤
CN105997943B (zh) * 2016-06-24 2019-02-26 浙江大学 一种人血清白蛋白负载喜树碱类药物的纳米颗粒及其制备方法和应用
CN106109415B (zh) * 2016-07-26 2019-01-29 金华市人民医院 一种载喜树碱类抗肿瘤药物脂质体、制备方法及其应用
CN106236752A (zh) * 2016-07-29 2016-12-21 浙江大学 联合用药抗肿瘤药物、制备方法及应用
CN106267227A (zh) * 2016-08-12 2017-01-04 北京蓝贝望生物医药科技股份有限公司 抗肿瘤药物
CN109289053B (zh) * 2018-09-30 2020-10-13 浙江大学 卡巴他赛-寡/聚乳酸偶联前药、制剂及其制备方法与应用
CN109400826A (zh) * 2018-10-25 2019-03-01 中国林业科学研究院林产化学工业研究所 木质素磺酸盐－二烯酸－丙烯酸酯共聚乳液的制备方法
CN109400619A (zh) * 2018-12-25 2019-03-01 东北林业大学 10-甲氧基喜树碱水溶性衍生物、制备方法和用途
SG11202111402PA (en) 2019-05-14 2021-11-29 Nuvation Bio Inc Anti-cancer nuclear hormone receptor-targeting compounds
CN110368500B (zh) * 2019-07-12 2020-06-30 浙江大学 一种两亲性共聚物药物前体、制备方法以及包载钙泊三醇的纳米颗粒
US11952349B2 (en) 2019-11-13 2024-04-09 Nuvation Bio Inc. Anti-cancer nuclear hormone receptor-targeting compounds
CN111253411B (zh) * 2020-03-26 2021-03-12 山东省科学院生物研究所 一种小檗碱亚油酸缀合物及其制备方法和用途
TW202227401A (zh) * 2020-10-23 2022-07-16 大陸商重慶兩江藥物研發中心有限公司 用於持續釋放治療劑的前藥及其用途
CN112656950B (zh) * 2021-01-25 2023-10-13 浙江大学 喜树碱类-聚己内酯偶联前药、制剂及其制备方法与应用
BR112023019420A2 (pt) 2021-03-23 2023-10-24 Nuvation Bio Inc Compostos de direcionamento ao receptor de hormônio nuclear anticâncer
WO2023150899A1 (en) * 2022-02-08 2023-08-17 Canwell Biotech Limited Conjugates of chemotherapy agents and tissue-binding small molecules, compositions and methods thereof

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070037739A1 (en) * 2003-02-03 2007-02-15 Medlogics Device Corporation Compounds useful in coating stents to prevent and treat stenosis and restenosis
CN1673226A (zh) * 2004-03-23 2005-09-28 中国科学院上海药物研究所 羟基喜树碱及其衍生物的羧酸酯前药、其制备方法与应用
US20060003976A1 (en) * 2004-06-04 2006-01-05 Yuehua Zhang Cholesterol/bile acid/bile acid derivative-modified therapeutic drug compounds
TW200731990A (en) * 2005-12-16 2007-09-01 Sonus Pharma Inc Lipophilic anticancer drug compounds, compositions, and related methods
CN101967173A (zh) * 2010-09-15 2011-02-09 东北林业大学 喜树碱10位偶合胆酸的新衍生物
CN102516258B (zh) * 2011-11-11 2014-06-25 正大天晴药业集团股份有限公司 水溶性维生素e衍生物修饰的脂溶性抗癌药物化合物和制剂、该化合物的制备方法及应用
CN102491981B (zh) * 2011-11-11 2014-11-19 南京美西宁医药科技有限责任公司 水溶性维生素e衍生物修饰的双亲性抗癌药物化合物和制剂、该化合物的制备方法及应用
WO2013188727A2 (en) * 2012-06-15 2013-12-19 The Children's Hospital Of Philadelphia Novel pro- and codrug derivatives for nanoparticle delivery of select anticancer agents formed using rapidly cleavable phenolic ester bridges
CN103864810A (zh) * 2012-12-07 2014-06-18 天津科技大学 一种新颖的10-羟基喜树碱10位衍生物制备方法及其在抗肿瘤药物中的应用
CN103864811A (zh) * 2012-12-13 2014-06-18 天津科技大学 一种新颖的10-羟基喜树碱20位衍生物制备方法及其在抗肿瘤药物中的应用
CN104163823B (zh) * 2014-04-30 2016-03-09 浙江工业大学 一种喜树碱与青蒿琥酯偶联物及其制备方法与应用

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