CN105250406A - 一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液及其制备方法 - Google Patents
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液及其制备方法，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄2～5、黄芩2～4、金银花3～5、板蓝根1～2和黄芪1～2。该中草药发酵提取液属于天然药物，无毒副作用，更无药物残留，不但能够起到防治疾病的作用，而且提高水产动物的免疫力。
Description
技术领域
本发明属于水产用中医药技术领域，具体涉及一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液及其制备方法。
背景技术
淡水鱼类病毒性疾病在养殖中虽然不常见，但是危害很严重，尤其在每年的春秋季节，是鱼类病毒性疾病的多发季节，发病症状复杂多变，传染性强，死亡率高，目前尚无有效药物治疗。鱼的病毒性疾病主要有传染性造血器官坏死病、胰脏坏死病、鳗狂游病、鳗出血性张口病、鳜传染性肝肾坏死病、草鱼出血病、鲤痘疮病等。
淡水鱼病毒性疾病药物治疗应用的较少，且无高效的药物，一般情况采用消毒剂和抗病毒的化学药物进行防治，但抗病毒药物在灭活病毒前就可能对宿主细胞产生损害，且大量使用化学药物不仅会降低鱼的肉质质量，而且会残留毒性，进而污染了水体环境，降低鱼类自身的抗病能力。所以，研制无毒害的防治药物是抗病毒鱼药发展的一个重要方向。中草药具有免疫活性物质，能够增强机体免疫力和调节体质，对病毒也能起到灭活或抑制的作用，且因其天然性具有副作用少、毒性低、不产生抗药性等优点。所以其对鱼类病毒疾病的防治有一定的优越性。芽孢杆菌是一类好氧性细菌，在环境不良的情况下可形成内生孢子。芽孢杆菌能产生活性很高的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶，同时还有能降解饲料中复杂化合物的酶，不仅可以迅速分解水体中的残饵、***物和动物残体等有机物，明显降低养殖水体的富营养化程度，净化水质，减少疾病发生，还可以有效提高饲料利用率，促进水产动物生长。
中兽医药是我国珍贵的文化瑰宝，用中草药治疗动物疾病有悠久历史，同时我国又有丰富的中草药资源，利用中药作为动物疾病防治的主要药物，既解决了致病菌的耐药性问题，又消除了化学药品给环境带来的污染问题。从中草药中开发出新型的饲料添加剂和渔用药物，将会使我国的水产养殖业发展成为绿色产业，也为我国的水产品能引顺利进入国际市场铺平道路。微生态制剂在水产养殖中主要用于改善水质、增强鱼的机体健康、改善鱼的商品性质和种用性能。随着水产生态健康养殖的需要，人们加大了绿色、环保药物和添加剂的研究力度，正因益生菌和中草药制剂无毒、无残留、无污染的特性，在水产养殖上的联合应用也日趋广泛。
发明内容
本发明的目的在于提供一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液及其制备方法，该中草药发酵提取液属于天然药物，无毒副作用，更无药物残留，不但能够起到防治疾病的作用，而且提高水产动物的免疫力。
为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：
本发明提供一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄2～5、黄芩2～4、金银花3～5、板蓝根1～2和黄芪1～2。
根据上述的防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄2～3、黄芩3～4、金银花3～4、板蓝根1～1.5和黄芪1.5～2。
根据上述的防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄3、黄芩4、金银花5、板蓝根2和黄芪1。
所述的防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液的制备方法，具体步骤如下：
（1）将中药大黄、黄芩、金银花、板蓝根和黄芪烘干、粉碎为40～80目粉末备用；
（2）按照上述配方取步骤（1）中药粉末加入8～10倍量中药粉末量的水煎煮提取,煎煮1～2小时过滤得滤液；药渣加入8～10倍药渣量的水煎煮提取，煎煮1～2小时过滤得滤液，合并滤液备用；
（3）按重量比取芽孢杆菌菌液加入步骤（2）所得滤液中，芽孢杆菌菌液与中药液的重量比1:（40～60），密闭厌氧发酵，分装，即得防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液。
所述芽孢杆菌菌液的制备方法如下：取芽孢杆菌菌种进行斜面菌种培养，将斜面培养产生的悬浮液在对应的培养基内厌氧扩大培养，至对数生长期菌落数高于1.0×1010CFU/mL时止，得对应的菌液。
步骤（1）烘干温度为60～80℃。
步骤（3）中发酵温度为30℃～37℃，发酵时间为24～48h。
芽孢杆菌的培养基为营养琼脂培养基。
本发明中各原料功效简述如下：
大黄：又名锦纹、黄良，别名将军、生军、马蹄黄等，多年生草本植物。以根、根茎入药，抗菌作用强，抗菌谱广，有收敛、泻下、清热、解毒、破积、去瘀、增加血小板、促进血液凝固等作用。用于烂鳃病、烂鳃病、出血病及白头白嘴病等。黄芩：多年生草本植物。以根入药，有抑菌、抗病毒、镇静、利尿、保胆、保肝、解毒、消炎及使血糖上升等作用。主要用于防治烂鳃病、疖疮、打印病、出血性败血病、肠炎、尾柄病等。
金银花：又名忍冬。金银花既能宣散风热，还善清解血毒，用于各种热性病，如身热、发疹、发斑、热毒疮痈、咽喉肿痛等症，均效果显著。可防治鱼腐皮、肠炎等病症。
板蓝根：又名靛青根、蓝靛根、大青根。其性寒，味先微甜后苦涩，具有清热解毒、预防感冒、利咽之功效。可防治鱼烂腮、肠炎、出血等。
黄芪：又名绵芪。主产于内蒙古、山西、甘肃、黑龙江等地。黄芪性甘温，归肺经，有补气升阳、益卫固表之功能。黄芪有增强机体免疫功能、保肝、利尿、抗应激和较广泛的抗菌作用。
芽孢杆菌：芽孢杆菌属于革兰氏阳性菌，好氧，能产生孢子，是一类具有高活性的消化酶系、耐高温、抗应激性的异养菌。其能强烈地分解碳系、氮系、磷系、硫系污染物，分解蛋白质和复杂多糖，对水溶性有机物分解也有重要的作用，同时可以与养殖环境中的有害藻类及水产致病菌竞争，形成优势种群，抑制有害藻类及水产致病菌。所以芽孢杆菌在水产养殖中的应用越来越广泛。
与现有技术相比，本发明取得的有益效果：
1.本发明中草药发酵提取液属于天然药物，无毒副作用，更无药物残留，不但能够起到防治疾病的作用，而且可以提高水产动物的免疫力。
2.本发明通过芽孢杆菌的加入可以与养殖环境中的有害藻类及水产致病菌竞争，形成优势种群，抑制有害藻类及水产致病菌，有利于水产养殖，改善养殖环境，同时对水溶性有机物分解也有重要的作用。
3.本发明采用中药与益生菌的结合有显著的经济效益和社会效益。
用法用量：泼洒法。预防用药，本品每瓶1000ml泼洒范围为1000ml/10m2，连用2~3天。治疗量加倍，连用5~8天。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进一步的描述，但并不限制本发明的内容。
实施例1
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄2～5、黄芩2～4、金银花3～5、板蓝根1～2和黄芪1～2。
所述的防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液的制备方法，具体步骤如下：
（1）将中药大黄、黄芩、金银花、板蓝根和黄芪于温度为60～80℃下烘干、粉碎为40～80目粉末备用；
（2）按照上述配方取步骤（1）中药粉末加入8～10倍量中药粉末量的水煎煮提取,煎煮1～2小时过滤得滤液；药渣加入8～10倍药渣量的水煎煮提取，煎煮1～2小时过滤得滤液，合并滤液备用；
（3）按重量比取芽孢杆菌菌液加入步骤（2）所得滤液中，芽孢杆菌菌液与中药液的重量比1:（40～60），密闭厌氧发酵，发酵温度为30℃～37℃，发酵时间为24～48h，分装，即得防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液。
所述芽孢杆菌菌液的制备方法如下：取芽孢杆菌菌种进行斜面菌种培养，将斜面培养产生的悬浮液在对应的营养琼脂培养基内厌氧扩大培养，至对数生长期菌落数高于1.0×1010CFU/mL时止，得对应的菌液。
实施例2
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄3、黄芩4、金银花5、板蓝根2和黄芪1。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例3
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄2、黄芩3、金银花5、板蓝根1和黄芪2。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例4
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄5、黄芩2、金银花3、板蓝根2和黄芪1。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例5
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄3、黄芩3、金银花4、板蓝根1和黄芪2。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例6
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄2、黄芩4、金银花3、板蓝根2和黄芪2。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例7
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄4、黄芩4、金银花3、板蓝根1和黄芪1。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例8
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄2、黄芩2、金银花3、板蓝根2和黄芪2。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例9
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄3、黄芩4、金银花5、板蓝根2和黄芪2。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例10
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄2、黄芩2、金银花5、板蓝根1和黄芪2。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例11
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄5、黄芩3、金银花4、板蓝根2和黄芪2。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例12
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄4、黄芩2、金银花3.5、板蓝根2和黄芪2。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例13
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄5、黄芩2、金银花2.5、板蓝根1.5和黄芪2。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例14
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄3.5、黄芩3、金银花3.5、板蓝根1.5和黄芪1。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例15
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄2.5、黄芩3.5、金银花4.5、板蓝根1和黄芪2。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例16
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄3.5、黄芩4、金银花3.5、板蓝根1.5和黄芪1。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例17
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄4.5、黄芩2.5、金银花4、板蓝根1.5和黄芪2。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例18
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄3.5、黄芩2.5、金银花3.5、板蓝根1.5和黄芪1.5。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例19
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄3.5、黄芩4、金银花3.5、板蓝根2和黄芪1。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例20
一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄2.5、黄芩2.5、金银花5、板蓝根1和黄芪1。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
下面以具体实验说明本发明的效果：
试验例
试验动物：随机选取400尾外观正常，体质健硕，大小均匀约50g的草鱼。分为置于室内4个池内养殖，每个池内100尾草鱼。
试验组别：试验1～3组，分别泼洒实施例2～4中制备的中草药发酵提取液，对照组不给予任何用药方案，喂饲相同的饵料。
试验方法：4个组，对照组不加任何药物，只喂饲基础日粮。其他三个组，每隔一周按1000ml/10m2的用药量泼洒一次中草药发酵提取液。试验周期为8周。期间早晚各投一次饵料，水温控制为15～20℃，空气压缩机根据情况定期加氧，每天观察并记录鱼的健康情况；试验期间不换水，定期清理残饵和粪便。
疗效判断标准：
发病：试验中草鱼出现病毒性疾病的病症（体表有明显的病变）；
死亡：试验结束草鱼发病死亡；
存活：试验期间出现症状没死亡的和没发病的草鱼。
结论：统计分析，试验组1～3组中草鱼的发病率均显著低于对照组（P＜0.01），且存活率高于90%。试验组1的发病数和死亡数明显低于试验组2和3，存活数明显高于试验组2和3，说明本发明最佳实例为实施例2。由此可见，本发明淡水鱼病毒性疾病有较好的防治作用。
Claims (8)
1.一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，其特征在于是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄2～5、黄芩2～4、金银花3～5、板蓝根1～2和黄芪1～2。
2.根据权利要求1所述的防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，其特征在于是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄2～3、黄芩3～4、金银花3～4、板蓝根1～1.5和黄芪1.5～2。
3.根据权利要求1所述的防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液，其特征在于是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：大黄3、黄芩4、金银花5、板蓝根2和黄芪1。
4.一种如权利要求1所述的防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液的制备方法，其特征在于具体步骤如下：
（1）将中药大黄、黄芩、金银花、板蓝根和黄芪烘干、粉碎为40～80目粉末备用；
（2）按照上述配方取步骤（1）中药粉末加入8～10倍量中药粉末量的水煎煮提取,煎煮1～2小时过滤得滤液；药渣加入8～10倍药渣量的水煎煮提取，煎煮1～2小时过滤得滤液，合并滤液备用；
（3）按重量比取芽孢杆菌菌液加入步骤（2）所得滤液中，芽孢杆菌菌液与中药液的重量比1:（40～60），密闭厌氧发酵，分装，即得防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液。
5.根据权利要求4所述的防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液的制备方法，其特征在于芽孢杆菌菌液的制备方法如下：
取芽孢杆菌菌种进行斜面菌种培养，将斜面培养产生的悬浮液在对应的培养基内厌氧扩大培养，至对数生长期菌落数高于1.0×1010CFU/mL时止，得对应的菌液。
6.根据权利要求4所述的防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液的制备方法，其特征在于：步骤（1）烘干温度为60～80℃。
7.根据权利要求4所述的防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液的制备方法，其特征在于：步骤（3）中发酵温度为30℃～37℃，发酵时间为24～48h。
8.根据权利要求5所述的防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液的制备方法，其特征在于：芽孢杆菌的培养基为营养琼脂培养基。
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