CN105199993A

CN105199993A - 一种光合细菌培养基及其制备方法

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Publication number: CN105199993A
Application number: CN201510691293.7A
Authority: CN
Inventors: 张光明; 彭猛; 王航瑶; 孟帆; 杨光; 王欣甜
Original assignee: Renmin University of China
Current assignee: Renmin University of China
Priority date: 2015-10-22
Filing date: 2015-10-22
Publication date: 2015-12-30

Abstract

本发明公开了一种光合细菌培养基及其制备方法。每L所述光合细菌培养基的组成为：三水合乙酸钠4～10g，硫酸铵1～5g，碳酸氢钠1～5g，磷酸二氢钾0.2～0.8g，硫酸镁0.2～0.8g，以及余量的水。所述光合细菌培养基的pH值为5.5～8.5。配制所述培养基时，将所述组分溶解于水中，然后调配pH值后定容即可。本发明提供的光合细菌培养基，其组成简单，仅由常规的5种化合物组成，未选用现有的培养基中的酵母膏和T.M储液等高价格物质，因此降低了生产成本，如与RCVBN培养基相比，产出1千克菌体培养基的费用能节省最高达85％；本发明的配制工艺简单易行，可操作性强；采用本发明培养基培养，光合细菌浓度高，OD₆₆₀高达2.2。

Description

一种光合细菌培养基及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种细菌培养基及其制备方法，具体涉及一种光合细菌培养基及其制备方法。

背景技术

光合细菌是一类能够进行光合作用而不产氧的特殊微生物群，广泛分布于海洋、河流、湖泊和土壤中，能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然界中的有机物、硫化物、氨等作为供氢体兼碳源进行光合作用，光合细菌富含蛋白质、生物高聚物、抗生素、类胡萝卜素、泛酸以及一些药用物质，现已广泛用于养殖业，种植业、污水处理等。基于以上优势，本应加大光合细菌推广力度，但由于用于培养光合细菌的培养基具有平均富集时间较长、培养基成分种类多以及成本较高等不足，限制了光合细菌在生产上的广泛应用。

根据研究现状表明，传统RCVBN培养基成分种类多，配制工艺复杂，光合细菌培养周期为3～5天，因此关于光合细菌培养基的研究逐渐受到重视，已有多位学者对其进行了优化，通过对培养基优化，减少了用量，提高了光合细菌的产量，如张伟研究出的光合细菌推荐培养基，操玉涛等研究出的改良71#培养基，刘军义等研究出的光合细菌计数培养基，刘昆等对光合细菌成产配方的优化研究等。但以上培养基成分种类仍较多，其中含有酵母膏和T.M储液等，生产成本高，不利于光合细菌的大规模工业化成产，因此亟需提供一种组成成分简单、成本低以及培养周期短的培养基。

发明内容

本发明的目的是提供一种组成简单的光合细菌培养基，解决了现有光合细菌培养基存在现有光合细菌培养基平均富集时间较长、培养基成分种类多以及成本较高等技术问题。

本发明所提供的光合细菌培养基，其组成为：

每L所述光合细菌培养基的组成为：

三水合乙酸钠4～10g，硫酸铵1～5g，碳酸氢钠1～5g，磷酸二氢钾0.2～0.8g，硫酸镁0.2～0.8g，以及余量的水。

进一步地，每L所述光合细菌培养基的组成可为：

三水合乙酸钠6～10g，硫酸铵2～5g，碳酸氢钠2～5g，磷酸二氢钾0.2～0.8g，硫酸镁0.2～0.8g，以及余量的水。

上述的光合细菌培养基的pH值可为5.5～8.5，具体可为7.5。

上述的光合细菌培养基的具体组成为：

每L所述光合细菌培养基的组成为：三水合乙酸钠6g，硫酸铵2g，碳酸氢钠2g，磷酸二氢钾0.4g，硫酸镁0.4g，以及余量的水；或，

每L所述光合细菌培养基的组成为：三水合乙酸钠10g，硫酸铵5g，碳酸氢钠5g，磷酸二氢钾0.8g，硫酸镁0.8g，以及余量的水。

本发明光合细菌培养基可通过如下方法进行制备：

将所述三水合乙酸钠、所述硫酸铵、所述碳酸氢钠、所述磷酸二氢钾和所述硫酸镁溶解于水中，经定容后即得所述培养基。

上述的制备方法中，还包括对所述培养基进行pH值调控的步骤。

上述的制备方法中，利用氢氧化钠和盐酸调控所述培养基的pH值。

本发明提供的培养基可用于培养细菌，如光合细菌。

本发明提供的光合细菌培养基，其组成简单，仅由常规的5种化合物组成，未选用现有的培养基中的酵母膏和T.M储液等高价格物质，因此降低了生产成本，如与RCVBN培养基相比，产出1千克菌体培养基的费用能节省最高达85％；本发明的配制工艺简单易行，可操作性强；采用本发明培养基培养，光合细菌浓度高，OD₆₆₀高达2.2。

附图说明

图1为本发明实施例1培养基培养光合细菌时的菌体生长情况。

图2为本发明实施例2培养基培养光合细菌时的菌体生长情况。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1、制备光合细菌培养基

称取如下组分：6g三水合乙酸钠、2g硫酸铵、2g碳酸氢钠、0.4g磷酸二氢钾、0.4g硫酸镁。

按照如下方法进行配制：

量取约500ml去离子水，准确称量6g三水合乙酸钠加入水中溶解，准确称量2g硫酸铵加入水中溶解，准确称量2g碳酸氢钠加入水中溶解，准确称量0.4g磷酸二氢钾加入水中溶解，准确称量0.4g硫酸镁加入水中溶解。然后向溶液中补充去离子水至约990ml，搅拌均匀。使用氢氧化钠及盐酸调节溶液pH至7.5。最后将溶液定容至1L。

本发明培养基与RCVBN培养基的成本比较，如表1和表2所示：

表1本发明实施例1培养基的成本

表2RCVBN培养基的成本

对比表1和表2中的数据可以得出，本发明培养基显著降低了生产成本；与RCVBN培养基相比，产出1千克菌体培养基的费用能节省85％。

利用上述制备的培养基进行光合细菌的培养：

取一定体积配制好的培养基于锥形瓶中，按照30％光合细菌成品菌液(其中光合细菌为红螺菌、红假单胞菌、外硫沼泽红假单胞菌；购自北京渔经生物技术有限责任公司)：70％培养基(体积比)接种。。接种后使用透氧封口膜将锥形瓶封口，置于60W白炽灯光下静置或摇床振荡培养，光照强度控制在3000lux，温度控制在26～30℃。培养2～3天即能得到成品菌。

上述培养过程中，菌体生长情况如图1所示，由图1可以看出，本发明培养基培养的光合细菌的浓度高，OD₆₆₀高达2.1，达到甚至超过RCVBN培养基所得的菌体浓度(为1.8左右，其培养方案与本发明培养基的培养方案相同)。

实施例2、制备光合细菌培养基

称取如下组分：称取如下组分：10g三水合乙酸钠、5g硫酸铵、5g碳酸氢钠、0.8g磷酸二氢钾、0.8g硫酸镁。

按照如下方法进行配制：

量取约500ml去离子水，准确称量10g三水合乙酸钠加入水中溶解，准确称量5g硫酸铵加入水中溶解，准确称量5g碳酸氢钠加入水中溶解，准确称量0.8g磷酸二氢钾加入水中溶解，准确称量0.8g硫酸镁加入水中溶解。然后向溶液中补充去离子水至约990ml，搅拌均匀。使用氢氧化钠及盐酸调节溶液pH至7.5。最后将溶液定容至1L。

本发明培养基与RCVBN培养基的成本比较，如表3和表2所示：

表3本发明实施例2培养基的成本

对比表3和表2中的数据可以得出，本发明培养基显著降低了生产成本；与RCVBN培养基相比，产出1千克菌体培养基的费用能节省约70％。

利用上述制备的培养基进行光合细菌的培养：

取一定体积配制好的培养基于锥形瓶中，按照30％光合细菌成品菌液(其中光合细菌为红螺菌、红假单胞菌、外硫沼泽红假单胞菌；购自北京渔经生物技术有限责任公司)：70％培养基(体积比)接种。其中光合细菌为红螺菌、红假单胞菌、外硫沼泽红假单胞菌。接种后使用透氧封口膜将锥形瓶封口，置于60W白炽灯光下静置或摇床振荡培养，光照强度控制在3000lux，温度控制在26～30℃。培养2～3天即能得到成品菌。

上述培养过程中，菌体生长情况如图2所示，由图2可以看出，本发明培养基培养的光合细菌的浓度高，OD₆₆₀高达2.2，达到甚至超过RCVBN培养基所得的菌体浓度(为1.8左右，其培养方案与本发明培养基的培养方案相同)。

Claims

1.一种光合细菌培养基，其特征在于：每L所述光合细菌培养基的组成为：

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于：每L所述光合细菌培养基的组成为：

三水合乙酸钠6～10g，硫酸铵2～5g，碳酸氢钠2～5g，磷酸二氢钾0.4～0.8g，硫酸镁0.4～0.8g，以及余量的水。

3.根据权利要求1或2所述的培养基，其特征在于：所述光合细菌培养基的pH值为5.5～8.5。

4.根据权利要求2或3所述的培养基，其特征在于：每L所述光合细菌培养基的组成为下述1)或2)：

1)三水合乙酸钠6g，硫酸铵2g，碳酸氢钠2g，磷酸二氢钾0.4g，硫酸镁0.4g，以及余量的水；

2)三水合乙酸钠10g，硫酸铵5g，碳酸氢钠5g，磷酸二氢钾0.8g，硫酸镁0.8g，以及余量的水。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的培养基，其特征在于：所述光合细菌培养基的pH值为7.5。

6.权利要求1-5中任一项所述培养基的制备方法，包括如下步骤：将所述三水合乙酸钠、所述硫酸铵、所述碳酸氢钠、所述磷酸二氢钾和所述硫酸镁溶解于水中，经定容后即得所述培养基。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述方法还包括对所述培养基进行pH值调控的步骤。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：利用氢氧化钠和盐酸调控所述培养基的pH值。

9.权利要求1-5中任一项所述培养基在培养细菌中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述细菌为光合细菌。