CN105155139A - 一种静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其应用，将壬二酸，醋酸乙烯酯，醋酸汞，醋酸铜混合烧瓶中，室温搅拌1～15min后加入浓硫酸，在50℃～70℃下恒温搅拌反应8h，加入无水醋酸钠中和浓硫酸，分离提纯，得到壬二酸二乙烯脂。将壬二酸二乙烯酯和葡萄糖溶于无水吡啶中，加入碱性蛋白酶，于40-60℃反应3-5天，分离提纯，得到葡萄糖壬二酸二乙烯脂等等。本发明的膜材料含有丰富的可反应亲水活性功能基团，并且能够特异性吸附伴刀豆球蛋白(ConA)。
Description
技术领域
本发明属于纳米纤维膜的制备及应用领域，特别涉及一种静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其特异性蛋白质吸附的应用。
背景技术
糖与蛋白质，脂类和核酸一样，是构成生物体的重要成分，在细胞的构建，细胞的生物合成和细胞生命活动的调控中，糖均扮演着重要的角色，其中广泛存在的糖缀合物参与了一些重要的生理过程，人们尝试将糖基固定到不同载体表面，来模拟糖的各种生物功能。糖基化膜具有高度亲水性及良好的生物相容性，并且由于糖类可以和蛋白质特异性识别，来完成生物信息的传递。因此，制备糖基化薄膜，并且应用于蛋白质的特异性识别具有很广泛的应用前景。
静电纺丝技术是一种利用带电荷的高分子溶液或熔体在静电场中流动与变形制备纳米到亚微米尺寸聚合物纤维的技术，可以获得纳米到微米尺寸纤维材料。静电纺制备的纤维具有极大的比表面积，高孔隙率等优点。这些特性使得该纤维在过滤、组织工程、超敏感传感器等方面有很大的潜在应用前景。
糖基化纳米纤维的制备，目前主要有两种途径：一是通过含糖不饱和单体聚合合成含糖聚合物，在通过静电纺丝得到(CN1843592)，这种方法可以更好的讲纳米纤维的优点和糖基的功能性结合起来。二是通过大分子反应将糖基固定到纳米纤维的表面，基表面修饰的方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其特异性蛋白质吸附的应用，该方法操作简单、产物易处理且经济环保，该纳米纤维膜含有丰富的可反应亲水活性功能基团，并且利用葡萄糖的糖基特异性吸附伴刀豆球蛋白(ConA)。本发明是通过以下技术方案来实现的：
本发明公开了一种静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其应用，具体步骤如下：
(1)将壬二酸，醋酸乙烯酯，醋酸汞，醋酸铜混合烧瓶中，室温搅拌1～15min后加入浓硫酸，在50℃～70℃下恒温搅拌反应8h，加入无水醋酸钠中和浓硫酸，分离提纯，得到壬二酸二乙烯脂；
(2)将壬二酸二乙烯酯和葡萄糖溶于无水吡啶中，加入碱性蛋白酶，于40～60℃反应3～5天，合成葡萄糖壬二酸二乙烯脂；
(3)在上述葡萄糖壬二酸二乙烯脂中加入过硫酸铵作为引发剂，加入丙烯腈，加入H2O作溶剂，然后于55～60℃氮气保护下搅拌反应3～5h，聚合反应结束后得到葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物；
(4)将步骤(1)得到葡萄糖壬二酸二乙烯脂和步骤(2)得到的葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物和葡萄糖壬二酸二乙烯脂共同溶于DMAC和DMF混合溶液中，搅拌至完全溶解，然后静置，得葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液；
(5)将上述葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液进行静电纺丝，最后将得到的纳米纤维膜干燥，即得葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜；
(6)利用葡萄糖基对伴刀豆球蛋白(ConA)的特异性吸附，将葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜与荧光修饰的伴刀豆球蛋白(FL-ConA)混合，通过激光管聚焦显微镜(CLSM)观察其对ConA的特异性吸附；
(7)利用高浓度糖溶液能够解除葡萄糖基对伴刀豆球蛋白ConA的特异性吸附，利用缓冲液冲洗葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜，观察其脱吸附能力。
作为进一步地改进，本发明所述的步骤(1)中的壬二酸与醋酸乙烯酯的摩尔比为1:1～1:5，醋酸汞质量1g～3g，浓硫酸体积为0.1-0.25mL，无水醋酸钠的质量为0.1～1.0g，过量的醋酸乙烯酯的除杂方式为旋转蒸发，提纯方式为硅胶层析柱(300～400目)。
作为进一步地改进，本发明所述的步骤(2)中所述的壬二酸二乙烯酯和葡萄糖的摩尔比为1:1～4:1，步骤(2)中合成葡萄糖壬二酸二乙烯脂时，将得到的葡萄糖壬二酸二乙烯脂粗产物用硅胶层析柱分离提纯，洗脱剂为乙酸乙酯，展开剂为体积比为17:3:1的乙酸乙酯/甲醇/水，用I2显色。
作为进一步地改进，本发明所述的步骤(3)中过硫酸铵的用量为葡萄糖壬二酸二乙烯脂质量分数的0.2～2％，步骤(3)中葡萄糖壬二酸二乙烯脂与丙烯腈的摩尔比为1:1～1:50。
作为进一步地改进，本发明所述的步骤(3)中所述的加入H2O作溶剂后，葡萄糖壬二酸二乙烯脂与丙烯腈物质的量的浓度之和的单体浓度为2～3mol/L。
作为进一步地改进，本发明所述的步骤(4)DMAC和DMF混合溶液中DMAC与DMF的体积比为1:1～10:1，步骤(4)得到葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液中，葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物的总浓度为4～9wt％。
作为进一步地改进，本发明所述的步骤(4)中葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液中葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物占葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物质量之和的质量分数为10～90％，步骤(4)中葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液中葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物占葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物质量之和的质量分数为40％、50％或60％。
作为进一步地改进，本发明所述的步骤(5)中静电纺丝的工艺参数为：注射器规格为5mL，针头内径为0.4～0.7mm，喷出流速0.8～2mL/h，静电压10～18kV，接收屏采用铝箔接地接收，接受距离为10～20cm，步骤(5)中干燥为放入真空干燥箱中于40～60℃恒温干燥24～48h。
作为进一步地改进，本发明所述的步骤(6)中所述的蛋白吸附时间为2h。
作为进一步地改进，本发明所述的步骤(7)中所述的糖溶液为葡萄糖，洗脱缓冲液为HEPES缓冲液。
本发明的有益效果如下：
(1)本发明采用水相沉淀聚合方法制备了葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物，制备方法操作简单、产物易处理且经济环保。
(2)本发明将丙烯腈和葡萄糖壬二酸二乙烯脂共聚电纺，获得直径和孔径在纳米级的膜材料葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈超细纳米纤维膜。这种膜材料含有丰富的糖基功能基团，提高了材料表面的特异性吸附及改善材料表面的生物相容性，具有应用其做后续相关实验分析的潜力。
附图说明
图1为实施例1～3所得的含糖纳米纤维膜的扫描电镜照片，其中实施例1～3的含糖纳米纤维膜的扫描电镜照片分别为A、B、C(纺丝电压为16kV，接收距离为15cm，喷射流速为1.5mL/h)；
图2为实施例2在室温条件下的ConA吸附的CLSM图片；
图3为实施例3在室温下的ConA脱吸附的CLSM图片。
具体实施方式
本发明的公开了一种静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其特异性蛋白质吸附的应用，包括：
(1)将壬二酸，醋酸乙烯酯，醋酸汞，醋酸铜混合烧瓶中，室温搅拌1～15min后加入浓硫酸，在50℃～70℃下恒温搅拌反应8h，加入无水醋酸钠中和浓硫酸，分离提纯，得到壬二酸二乙烯脂。
(2)将壬二酸二乙烯酯和葡萄糖溶于无水吡啶中，加入碱性蛋白酶，于40～60℃反应3～5天，合成葡萄糖壬二酸二乙烯脂；
(3)在上述葡萄糖壬二酸二乙烯脂中加入过硫酸铵作为引发剂，加入丙烯腈，加入H2O作溶剂，然后于55～60℃氮气保护下搅拌反应3～5h，聚合反应结束后得到葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物；
(4)将步骤(1)得到葡萄糖壬二酸二乙烯脂和步骤(2)得到的葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物和葡萄糖壬二酸二乙烯脂共同溶于DMAC和DMF混合溶液中，搅拌至完全溶解，然后静置，得葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液；
(5)将上述葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液进行静电纺丝，最后将得到的纳米纤维膜干燥，即得葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜。
(6)利用葡萄糖基对伴刀豆球蛋白ConA的特异性吸附，将葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜与荧光修饰的伴刀豆球蛋白FL-ConA混合，通过激光管聚焦显微镜观察其对ConA的特异性吸附。
(7)利用高浓度糖溶液能够解除葡萄糖基对伴刀豆球蛋白ConA的特异性吸附，利用缓冲冲洗葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜，观察其脱吸附能力。
步骤(1)中的将壬二酸与醋酸乙烯酯的摩尔比为1:1～1:5。
步骤(1)中的醋酸汞质量1g～3g，浓硫酸体积为0.1-0.25mL。
步骤(1)中无水醋酸钠的质量为0.1～1.0g，过量的醋酸乙烯酯的除杂方式为旋转蒸发，提纯方式为硅胶层析柱(300～400目)
步骤(2)中所述的壬二酸二乙烯酯和葡萄糖的摩尔比为1:1～4:1。
步骤(2)中合成葡萄糖壬二酸二乙烯脂时，将得到的葡萄糖壬二酸二乙烯脂粗产物用硅胶层析柱分离提纯，洗脱剂为乙酸乙酯，展开剂为体积比为17:3:1的乙酸乙酯/甲醇/水，用I2显色。
步骤(3)中所述的葡萄糖壬二酸二乙烯脂与丙烯腈的摩尔比为1:1～1:50。
步骤(3)中所述的加入H2O作溶剂后，单体浓度(葡萄糖壬二酸二乙烯脂与丙烯腈物质的量的浓度之和)为2～3mol/L。
步骤(4)所述的DMAC和DMF混合溶液中DMAC与DMF的体积比为1:1～10:1。
步骤(4)得到葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液中，葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物的总浓度为4～9wt％。
步骤(4)中所述的葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液中葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物占葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物质量之和的质量分数为10～90％。
步骤(4)中所述的葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液中葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物占葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物质量之和的质量分数为40％、50％或60％。
步骤(5)中所述的静电纺丝的工艺参数为：注射器规格为5mL，针头内径为0.4～0.7mm，喷出流速0.8～2mL/h，静电压10～18kV，接收屏采用铝箔接地接收，接受距离为10～20cm；步骤(5)中所述的干燥为放入真空干燥箱中于40～60℃恒温干燥24～48h。
步骤(6)中所述的蛋白吸附时间为2h。
步骤(7)中所述的洗脱缓冲液为HEPES缓冲液。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。实施例1
(1)将1摩尔的壬二酸，醋酸乙烯酯，1g醋酸汞，微量醋酸铜混合于250mL烧瓶中，室温搅拌15min后加入0.2mL浓硫酸，在50℃～70℃下恒温搅拌反应8h。反应完毕得到蓝色澄清溶液。反应液冷却后加入0.5g无水醋酸钠，充分震荡以除去其中的硫酸，静置过滤后旋转蒸发除去过量的醋酸乙烯酯。剩余溶液经硅胶层析柱(300～400目)分离提纯，得到壬二酸二乙烯脂。
(2)将壬二酸二乙烯酯与葡萄糖按一定的比例(4:1，摩尔比)溶解在100mL无水吡啶中，加入1.5g碱性蛋白酶，放入50℃恒温振荡培养箱中反应4天，转速为210rpm，利用酶促合成技术合成葡萄糖壬二酸二乙烯脂。反应结束后，粗产物用硅胶层析柱分离提纯，洗脱剂为乙酸乙酯，展开剂为乙酸乙酯/甲醇/水(17:3:1,v/v/v)，用I2显色。
(3)将上述糖脂放于微量聚合管中，加入H2O作溶剂(葡萄糖壬二酸二乙烯脂与丙烯腈物质的量的浓度之和为2.5mol/LH2O)，用过硫酸铵(APS)(占葡萄糖乙烯脂质量分数为1.0％)作为引发剂，加入丙烯腈，其中葡萄糖壬二酸二乙烯脂与丙烯腈的摩尔比为1:20密封，用油泵抽真空后通氮气，反复多次。将体系置于55～60℃氮气保护下搅拌反应3h。
(4)将葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物溶于DMAC：DMF＝2:1(v/v)的混合溶液中，得到浓度为4wt％的纺丝溶液，其中葡萄糖壬二酸二乙烯脂占葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物之和的质量分数为21.5％
搅拌数小时至完全溶解,静置数小时使纺丝液中气泡完全搅拌形成均一纺丝液。
(5)用注射器抽取葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液，固定于静电纺丝装置上，控制喷出流速1.5mL/h，静电压16kV，接收屏采用铝箔接地接收，针头与接收屏的距离为15cm，采用正交方法(改变某一参数，固定其他的参数)调节不同纺丝参数进行电纺，葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物超细纳米纤维膜；放入真空干燥箱中60～80℃恒温干燥36h，制成再生纳米复合膜，其电镜照片如图1A所示。可以发现，纤维分布均匀，没有串珠状，证明再生纳米复合膜的成功制备。
实施例2
(1)将壬二酸二乙烯酯与葡萄糖按一定的比例(4:1，摩尔比)溶解在100mL无水吡啶中，加入1.5g碱性蛋白酶，放入50℃恒温振荡培养箱中反应4天，转速为210rpm，利用酶促合成技术合成葡萄糖壬二酸二乙烯脂。反应结束后，粗产物用硅胶层析柱分离提纯，洗脱剂为乙酸乙酯，展开剂为乙酸乙酯/甲醇/水(17:3:1,v/v/v),用I2显色。
(2)将上述糖脂放于微量聚合管中，加入H2O作溶剂(葡萄糖壬二酸二乙烯脂与丙烯腈物质的量的浓度之和为2.5mol/LH2O)，用过硫酸铵(APS)(占葡萄糖乙烯脂质量分数为1.0％)作为引发剂，加入丙烯腈，其中葡萄糖壬二酸二乙烯脂与丙烯腈的摩尔比为1:20密封，用油泵抽真空后通氮气，反复多次。将体系置于55～60℃氮气保护下搅拌反应3h。
(3)将葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物溶于DMAC：DMF＝2:1(v/v)的混合溶液中，得到浓度为6wt％的纺丝溶液，其中葡萄糖壬二酸二乙烯脂占葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物的之和的质量分数为21.5％，搅拌数小时至完全溶解,静置数小时使纺丝液中气泡完全搅拌形成均一纺丝液。
(4)用注射器抽取葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液，固定于静电纺丝装置上，控制喷出流速1.5ml/h，静电压16kV，接收屏采用铝箔接地接收，针头与接收屏的距离为15cm，采用正交方法(改变某一参数，固定其他的参数)调节不同纺丝参数进行电纺，葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物超细纳米纤维膜；放入真空干燥箱中60～80℃恒温干燥36h，制成再生纳米复合膜，其电镜照片如图1B所示。
(5)葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜对ConA的吸附
配制HEPES缓冲溶液，pH为7.5，其中10mMHEPES，0.15MNaCl，0.1mMCa2+,0.01mMMn2+。
将实施例2制备的葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜先后用PBS缓冲溶液预处理(20～30min)，以除去膜表面的污染物，取0.5mg待测膜，剪碎后放入试管中，分别加入1～10mL相同浓度的FL-ConA溶液，在25℃和37℃往返水域恒温振荡器避光恒温2h。待吸附平衡后，取出膜，用HEPES缓冲溶液清洗4-8次，后在室温下真空干燥。干燥结束后利用CLSM测定材料表面的荧光强度。如图2。可以发现在绿色荧光通道中存在很强的绿色荧光(因为图片只能是黑白，所以绿色荧光看起来只是一些小灰点)，那是ConA上的异硫氰酸荧光素(FITC)，证明葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜能够特异性吸附ConA。
实施例3
(1)将壬二酸二乙烯酯与葡萄糖按一定的比例(4:1，摩尔比)溶解在100mL无水吡啶中，加入1.5g碱性蛋白酶，放入60℃恒温振荡培养箱中反应4天，转速为210rpm，利用酶促合成技术合成葡萄糖壬二酸二乙烯脂。反应结束后，粗产物用硅胶层析柱分离提纯，洗脱剂为乙酸乙酯，展开剂为乙酸乙酯/甲醇/水(17:3:1，v/v/v)，用I2显色。
(2)将上述糖脂放于微量聚合管中，加入H2O作溶剂(葡萄糖壬二酸二乙烯脂与丙烯腈物质的量的浓度之和为2.5mol/LH2O)，用过硫酸铵(APS)(占葡萄糖乙烯脂质量分数为1.0％)作为引发剂，加入丙烯腈，其中葡萄糖壬二酸二乙烯脂与丙烯腈的摩尔比为1:20密封，用油泵抽真空后通氮气，反复多次。将体系置于55～60℃氮气保护下搅拌反应3h。
(3)将葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物溶于DMAC：DMF＝2:1(v/v)的混合溶液中，得到浓度为8wt％的纺丝溶液；其中葡萄糖壬二酸二乙烯脂占葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物之和的质量分数为21.5％，搅拌数小时至完全溶解,静置数小时使纺丝液中气泡完全搅拌形成均一纺丝液。
(4)用注射器抽取葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液，固定于静电纺丝装置上，控制喷出流速1.5mL/h，静电压16kV，接收屏采用铝箔接地接收，针头与接收屏的距离为15cm，采用正交方法(改变某一参数，固定其他的参数)调节不同纺丝参数进行电纺，葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物超细纳米纤维膜；放入真空干燥箱中60～80℃恒温干燥36h，制成再生纳米复合膜，其电镜照片如图1C所示。
(5)葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜对ConA的脱吸附。
将实施例3制备的葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜先后用PBS缓冲溶液预处理(20～30min)，以除去膜表面的污染物，取0.5mg待测膜，剪碎后放入试管中，分别加入1～10mL相同浓度的FL-ConA溶液，在25℃和37℃往返水域恒温振荡器避光恒温2h。待吸附平衡后，取出膜，用HEPES缓冲溶液清洗4-8次，后在室温下真空干燥。将上述吸附FL-ConA的膜材料浸入200μL的浓度为1M的葡萄糖溶液中，在25℃和37℃条件下脱吸附24h。然后，将膜材料用HEPES清洗4-8次，后在室温下真空干燥。干燥结束后利用CLSM测定材料表面的荧光强度。如图3。可以发现绿色荧光通道中的FITC荧光消失了(因为图片只能是黑白，所以绿色荧光看起来只是一些小灰点)，那是由于脱吸附作用使得ConA脱离了纳米纤维膜。证明葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜具有可再生性。
本发明所述的实施例1～3仅仅是对本发明的优选实施方式进行的描述，并非对本发明构思和范围进行限定，在不脱离本发明设计思想的前提下，本领域中工程技术对本发明的技术方案作出的各种变型和改进，均应落入本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其应用，其特征在于，具体步骤如下：
(1)将壬二酸，醋酸乙烯酯，醋酸汞，醋酸铜混合烧瓶中，室温搅拌1～15min后加入浓硫酸，在50℃～70℃下恒温搅拌反应8h，加入无水醋酸钠中和浓硫酸，分离提纯，得到壬二酸二乙烯脂；
(2)将壬二酸二乙烯酯和葡萄糖溶于无水吡啶中，加入碱性蛋白酶，于40～60℃反应3～5天，合成葡萄糖壬二酸二乙烯脂；
(3)在上述葡萄糖壬二酸二乙烯脂中加入过硫酸铵作为引发剂，加入丙烯腈，加入H2O作溶剂，然后于55～60℃氮气保护下搅拌反应3～5h，聚合反应结束后得到葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物；
(4)将步骤(1)得到葡萄糖壬二酸二乙烯脂和步骤(2)得到的葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物和葡萄糖壬二酸二乙烯脂共同溶于DMAC和DMF混合溶液中，搅拌至完全溶解，然后静置，得葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液；
(5)将上述葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液进行静电纺丝，最后将得到的纳米纤维膜干燥，即得葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜；
(6)利用葡萄糖基对伴刀豆球蛋白(ConA)的特异性吸附，将葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜与荧光修饰的伴刀豆球蛋白(FL-ConA)混合，通过激光管聚焦显微镜(CLSM)观察其对ConA的特异性吸附；
(7)利用高浓度糖溶液能够解除葡萄糖基对伴刀豆球蛋白ConA的特异性吸附，利用缓冲液冲洗葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜，观察其脱吸附能力。
2.根据权利要求1所述的静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法应用，其特征在于，所述的步骤(1)中的壬二酸与醋酸乙烯酯的摩尔比为1:1～1:5，所述的醋酸汞质量1g～3g，浓硫酸体积为0.1-0.25mL，所述的无水醋酸钠的质量为0.1～1.0g，过量的醋酸乙烯酯的除杂方式为旋转蒸发，提纯方式为硅胶层析柱(300～400目)。
3.根据权利要求1或2所述的静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其应用，其特征在于，所述的步骤(2)中所述的壬二酸二乙烯酯和葡萄糖的摩尔比为1:1～4:1，所述的步骤(2)中合成葡萄糖壬二酸二乙烯脂时，将得到的葡萄糖壬二酸二乙烯脂粗产物用硅胶层析柱分离提纯，洗脱剂为乙酸乙酯，展开剂为体积比为17:3:1的乙酸乙酯/甲醇/水，用I2显色。
4.根据权利要求3所述的静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其应用，其特征在于，所述的步骤(3)中过硫酸铵的用量为葡萄糖壬二酸二乙烯脂质量分数的0.2～2％，步骤(3)中所述的葡萄糖壬二酸二乙烯脂与丙烯腈的摩尔比为1:1～1:50。
5.根据权利要求3所述的静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其应用，其特征在于，所述的步骤(3)中所述的加入H2O作溶剂后，葡萄糖壬二酸二乙烯脂与丙烯腈物质的量的浓度之和的单体浓度为2～3mol/L。
6.根据权利要求4或5所述的静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其应用，其特征在于，所述的步骤(4)DMAC和DMF混合溶液中DMAC与DMF的体积比为1:1～10:1，所述的步骤(4)得到葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液中，葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物的总浓度为4～9wt％。
7.根据权利要求6所述的静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其应用，其特征在于，所述的步骤(4)中所述的葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液中葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物占葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物质量之和的质量分数为10～90％，步骤(4)中葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物纺丝液中葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物占葡萄糖壬二酸二乙烯脂和葡萄糖壬二酸二乙烯脂/丙烯腈共聚物质量之和的质量分数为40％、50％或60％。
8.根据权利要求1或2或4或5或7所述的静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其应用，其特征在于，所述的步骤(5)中静电纺丝的工艺参数为：注射器规格为5mL，针头内径为0.4～0.7mm，喷出流速0.8～2mL/h，静电压10～18kV，接收屏采用铝箔接地接收，接受距离为10～20cm，步骤(5)中所述的干燥为放入真空干燥箱中于40～60℃恒温干燥24～48h。
9.根据权利要求8所述的静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其应用，其特征在于，所述的步骤(6)中所述的蛋白吸附时间为2h。
10.根据权利要求8所述的静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法及其应用，其特征在于，所述的步骤(7)中所述的糖溶液为葡萄糖，洗脱缓冲液为HEPES缓冲液。
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105734827A (zh) * | 2016-04-13 | 2016-07-06 | 浙江浪莎内衣有限公司 | 一种含糖温敏共聚物纳米纤维膜的制备方法 |
Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006283240A (ja) * | 2005-04-01 | 2006-10-19 | Oji Paper Co Ltd | ウェブ製造装置 |
| CN101555324A (zh) * | 2009-05-18 | 2009-10-14 | 浙江大学 | 一种通过可控接枝聚合制备糖基化有序多孔膜的方法 |
| CN102418237A (zh) * | 2011-08-12 | 2012-04-18 | 东华大学 | 一种静电混纺含糖聚丙烯腈纳米纤维膜的制备方法 |
| CN102828346A (zh) * | 2012-07-26 | 2012-12-19 | 东华大学 | 一种半乳糖均聚物/聚丙烯腈复合纳米纤维膜制备方法 |
| CN102899735A (zh) * | 2012-07-10 | 2013-01-30 | 东华大学 | 静电纺含糖聚合物与丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法 |
| CN103194857A (zh) * | 2013-04-12 | 2013-07-10 | 东华大学 | 一种静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法 |
| CN103614860A (zh) * | 2013-11-26 | 2014-03-05 | 东华大学 | 一种葡萄糖壬二酸二乙烯脂/异丙基丙烯酰胺共聚物纳米纤维膜的制备方法 |
| CN103668525A (zh) * | 2013-12-06 | 2014-03-26 | 东华大学 | 一种静电纺丝制备丙烯腈基含糖共聚物纳米纤维的方法 |
| CN103724524A (zh) * | 2013-11-26 | 2014-04-16 | 东华大学 | 一种葡萄糖壬二酸二乙烯脂/异丙基丙烯酰胺共聚物纳米颗粒的制备方法 |
-
2015
- 2015-06-11 CN CN201510317125.1A patent/CN105155139A/zh active Pending
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006283240A (ja) * | 2005-04-01 | 2006-10-19 | Oji Paper Co Ltd | ウェブ製造装置 |
| CN101555324A (zh) * | 2009-05-18 | 2009-10-14 | 浙江大学 | 一种通过可控接枝聚合制备糖基化有序多孔膜的方法 |
| CN102418237A (zh) * | 2011-08-12 | 2012-04-18 | 东华大学 | 一种静电混纺含糖聚丙烯腈纳米纤维膜的制备方法 |
| CN102899735A (zh) * | 2012-07-10 | 2013-01-30 | 东华大学 | 静电纺含糖聚合物与丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法 |
| CN102828346A (zh) * | 2012-07-26 | 2012-12-19 | 东华大学 | 一种半乳糖均聚物/聚丙烯腈复合纳米纤维膜制备方法 |
| CN103194857A (zh) * | 2013-04-12 | 2013-07-10 | 东华大学 | 一种静电纺葡萄糖脂/丙烯腈共聚物纳米纤维膜的制备方法 |
| CN103614860A (zh) * | 2013-11-26 | 2014-03-05 | 东华大学 | 一种葡萄糖壬二酸二乙烯脂/异丙基丙烯酰胺共聚物纳米纤维膜的制备方法 |
| CN103724524A (zh) * | 2013-11-26 | 2014-04-16 | 东华大学 | 一种葡萄糖壬二酸二乙烯脂/异丙基丙烯酰胺共聚物纳米颗粒的制备方法 |
| CN103668525A (zh) * | 2013-12-06 | 2014-03-26 | 东华大学 | 一种静电纺丝制备丙烯腈基含糖共聚物纳米纤维的方法 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105734827A (zh) * | 2016-04-13 | 2016-07-06 | 浙江浪莎内衣有限公司 | 一种含糖温敏共聚物纳米纤维膜的制备方法 |
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