CN105030822A

CN105030822A - 有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物的新用途

Info

Publication number: CN105030822A
Application number: CN201510343315.0A
Authority: CN
Inventors: 吴琼; 句红萍; 王海; 陈子豪; 冯云平; 罗利; 邹涛隅
Original assignee: Kunming University
Current assignee: Kunming University
Priority date: 2015-06-19
Filing date: 2015-06-19
Publication date: 2015-11-11
Anticipated expiration: 2035-06-19
Also published as: CN105030822B

Abstract

本发明公开了有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂的新用途，是所述的有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂在制备抗蛇毒药物中的应用。本发明所述的有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂，实验结果表明氨基酸修饰的Anderson型多阴离子不仅可以中和蛇毒而且可以进一步降低小鼠蛇毒咬伤的疼痛感(抽搐、舔受伤部位等不适症状减轻)，为抗蛇毒制剂的研发提供了新的思路，具有重要的科学意义和广泛的应用前景。

Description

有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物的新用途

技术领域

本发明属于药物技术领域，具体涉及有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物的新用途。

背景技术

蛇毒是毒蛇从毒腺中分泌出来的一种液体，主要成份是毒性蛋白质，约占干重的90%至95%。酶类和毒素约含二十多种。此外，还含有一些小分子肽、氨基酸、碳水化合物、脂类、核苷、生物胺类及金属离子等。蛇毒成分十分复杂，不同蛇毒的毒性、药理及毒理作用各具特点。

毒蛇咬伤具有发病急、变化快、并发症多、治疗复杂、致残、致死率高等特点，处理不及时或处理方法不当，往往造成不良后果，轻者致残，重者丧失生命，在世界很多地区都是公众医疗的重要威胁。据不完全统计，全世界每年有250万人被毒蛇咬伤，近12.5万人因毒蛇咬伤致死，实际数字可能更为惊人。而且近些年由于人们对环境保护意识的增强所实行的退耕还林、动物保护及人工蛇类养殖的增加，蛇伤病人的人数也呈逐年上升趋势。同时大多数受害者是居住在与偏远村庄居民和儿童，他们的残疾对自身家庭生活及当地经济影响极大，在我国西南地区的此类情况尤为严重。

被毒蛇咬伤如果处理不及时会使伤情严重恶化并导致死亡率大大增加。虽然抗蛇毒血清可以有效的中和相应的蛇毒，但在实际应用中存在诸多问题：首先毒血清专一性强，用药前必须鉴定蛇种，而且咬伤后立即用药才能取得最佳疗效，然而由于其价格昂贵且不易长时间保存，即使在发达地区及时的拿到可用的抗蛇毒血清也并非易事，在交通不便的山区就更为困难；此外抗毒血清易发生过敏，一些临床家强调不要把抗毒血清作为蛇伤的常规用药，要在出现明显全身中毒症状时才用。因此开发价格低廉、性质稳定的可作为血清辅助制剂的新型抗蛇毒药物就显得尤为重要。

发明内容

本发明的目的在于提供多阴金属氧酸盐化合物所述的有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂的新用途。

本发明的目的是这样实现的，所述的有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂在制备抗蛇毒药物中的应用。

本发明所述的有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂，实验结果表明氨基酸修饰的Anderson型多阴离子不仅可以中和蛇毒引起的出血而且可以进一步降低小鼠蛇毒咬伤的疼痛感，为抗蛇毒制剂的研发提供了新的思路，具有重要的科学意义和广泛的应用前景。

附图说明

图1为本发明有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂中和蛇毒出血毒结果比较示意图；

其中：A为空白对照；B为Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂，C为Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂；

图2为本发明Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂中和蛇毒出血毒结果显微镜观察示意图；

图3为Anderson多酸前体Na₃[CrMo₆H₆O₂₄]，Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂电导率测试图。

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。

本发明所述的有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂的新用途为所述的有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂在制备抗蛇毒药物中的应用。

所述的有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂在制备抑制蛇毒出血毒和缓解毒蛇咬伤导致疼痛药物中的应用。

所述的有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂在制备抗尖吻蝮蛇药物中的应用。

多阴金属氧酸盐（简称：多酸；英文名称：polyoxometalates,POMs）是一类金属氧化物具有多样的结构和富氧亲核的性质，可以作为优秀的无机多齿配体配体通过配位和螯合等方式与金属离子结合，更为重要是多酸作为一类独特的无机化合物，其组成及其丰富，周期表中的绝大多数元素都可参与多酸化合物的合成，于此同时每一种影响多酸对生物靶物分子识别与作用的性质如：分子尺寸、极性、氧化还原性、表面电荷分布形状、酸碱性等性质都可以根据具体应用的需要进一步的进行调控。

本发明在试验中发现，多酸化合物不仅具有中和蛇毒抑制局部出血的作用，同时其应用范围可能更广，试验中多酸对尖吻蝮蛇蛇毒表现出了较好的抑制效果；其次多酸化合物的副作用小在浓度下相同的情况下（1mM~10mM）与EDTA相比，多酸组试验小鼠疼痛抽搐显现明显减轻，主要包括：抽搐、舔受伤部位等不适症状减轻。

实施例1

一、抗蛇毒出血毒效果的研究：

1、蛇毒

以灭菌注射用水配制蛇毒母液，蛇毒冻干品按100mg/ml稀释，摇动易起泡沫，可闻腥味，符合蛇毒特征后小白鼠皮下注射给药，确定不同批次和种类蛇毒的100%致死量，备用。

2、体外中和实验

体外中和体内注射比较不同多酸化合物对蛇毒出血、组织坏死和致死率的抑制情况。按小鼠体重配制不同最小致死量倍数的蛇毒溶液，一般用5mM~20mM多酸化合物共同孵育30min，之后背部皮下或肌肉每组注射6只体重18~25g小鼠，3只一小时后断颈处死解剖比较出血面积及组织坏死情况，剩余3只继续观察疼痛反应、呼吸、死亡率等。

3、体内中和实验

相同部位先后注射比较不同多酸化合物对蛇毒出血、组织坏死和致死率的抑制情况。按小鼠体重配制不同最小致死量倍数的蛇毒溶液，每射6只体重18~25g小鼠背部皮下或肌肉组注，之后，相同部位再注射5mM~20mM多酸化合物，3只一小时后断颈处死解剖比较出血面积及组织坏死情况，剩余3只继续观察疼痛反应、呼吸、死亡率等。

4、组织切片照片

小鼠处死后取下肌肉、皮肤组织，固定、切片并行HE染色后观察肌肉组织细胞坏死情况。

5、总结多酸化合物各项中和抗蛇毒试验数据，分析不同理化性质与抗蛇毒出血毒活性之间的关系、并结合量化计算，分子模拟等手段形成多酸抗出血毒的理论体系。

二、多阴金属氧酸盐化合物抗尖吻蝮蛇蛇毒的部分结果：

本发明对常见的有机无机修饰的Keggin，Dawson，Anderson多酸结构进行了筛选，包括丙氨酸Ala，精氨酸Arg，天冬氨酸Asp，半胱氨酸Cys，谷氨酰胺Gln，谷氨酸Glu，组氨酸His，异亮氨酸Ile，甘氨酸Gly，天冬酰胺Asn，亮氨酸Leu，赖氨酸Lys，甲硫氨酸Met，苯丙氨酸Phe，脯氨酸Pro，丝氨酸Ser，苏氨酸L-Thr，色氨酸Trp，酪氨酸Tyr，缬氨酸Val修饰的多阴离子化合物，结果表明精氨酸（L-ArginineC₆H₁₄N₄O₂）和苏氨酸（L-Threonine，C4H9NO3）修饰的多酸盐Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂效果最好。

背部出血面积试验表明（见附图1和附图2），浓度为5mMB型Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂，Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂可以有效的中和2个LD₅₀尖吻蝮蛇蛇毒（1.8mg/kg，小鼠体重20~25g）,观察不到明显的出血点,小鼠保护率达到100%；

氨基酸与多阴离子结合后使得多阴离子的极性得到进一步的调节，使其在生理pH值范围内有了更好的稳定性、能以更快、更有效的形式抑制蛇毒。

发明人做了Anderson多酸前体Na₃[CrMo₆H₆O₂₄]，Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂的电导率测试（见附图3），结果表明，相对于Anderson多酸前体Na₃[CrMo₆H₆O₂₄]，Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂在生理pH值范围内有更好的稳定性。

Claims

1.一种有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂的新用途，其特征在于所述的有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂在制备抗蛇毒药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂的新用途，其特征在于所述的有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂在在制备抑制蛇毒出血毒和缓解毒蛇咬伤导致疼痛药物中的应用。

3.根据权利要求1所述的有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂的新用途，其特征在于所述的有机无机杂化多阴金属氧酸盐化合物Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Thr)₂和Na₃[CrMo₆(OH)₆O₁₈]}(H₂L-Arg)₂在制备抗尖吻蝮蛇蛇毒药物中的应用。