CN104997776A - Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2在制备防治肿瘤药物中的应用，以及Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2作为去泛素化酶抑制剂在制备防治炎症、组织缺血-再灌注损伤、心肌肥大疾病的药物中的应用。还提供了以Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2为活性成分的防治肿瘤、炎症、组织缺血-再灌注损伤、心肌肥大疾病的药物，为临床提供了更多的选择。
Description
技术领域
本明涉及药物化学技术领域，特别涉及一种去泛素化酶抑制剂Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2在医学中的新应用。
背景技术
众所周知，蛋白质是组成细胞的必需物质，是细胞功能活动的主要承担者，调控蛋白质的更新是细胞代谢的基础环节之一。细胞内约30％的新合成的蛋白质可在10分钟内被迅速降解(Schubert et al.,2000)。细胞内这种高速的蛋白质更新需要一种特殊的***来精准地调控哪些蛋白需要被降解哪些被保留。泛素-蛋白酶体***就是这样一个调节蛋白质降解与功能的重要***。
泛素-蛋白酶体***(Ubiquitin-proteasome system,UPS)是近来极受关注的调控蛋白质降解并参与细胞内多种生命过程的重要***，UPS由泛素和蛋白酶体组成，泛素是一个含76个氨基酸的小分子，被泛素标记的的蛋白质会被蛋白酶体识别并降解；蛋白酶体则是一个负责将蛋白质降解成氨基酸片段的圆筒状大分子。细胞内超过80％的蛋白质是通过UPS降解的，如降解细胞内错误折叠或受损的蛋白质，细胞周期调控因子，癌基因，肿瘤抑制因子；调控抗原递呈和转录因子活性等(Coux et al.,1996；Hershko&Ciechanover,1998)。
泛素-蛋白酶体***降解蛋白质主要包括两个步骤：泛素通过一系列泛素启动酶将靶蛋白标记上多聚泛素链和26S蛋白酶体降解标记上泛素链的靶蛋白。泛素化过程是动态可逆的，被泛素化的蛋白可以被一种称之为去泛素化酶(DUBs)的特异性酶所去除。人类基因组编码了约100个DUBs，主要分为2大类：ubiquitin-specific proteases(USPs),ubiquitin carboxy-terminal hydrolases(UCHs),其中USPs占绝大多数(Fraile et al.,2012；Fortelny et al.,2014)。去泛素化酶(DUBs)是泛素-蛋白酶体***中的重要组成部分，它介导了泛素或泛素链从靶 蛋白上移除，是UPS发挥功能的关键环节。细胞内许多DUBs参与并调节了细胞周期、凋亡和转录等生命过程，与肿瘤的发生发展密切相关。
肿瘤细胞更新代谢快，UPS处于相对活化状态，因此靶向蛋白酶体的抗肿瘤药物对肿瘤细胞具有选择性从而成为肿瘤治疗的热门靶点。硼替佐米(bortezomib)，商品名为万珂(Velcade)是一种靶向作用于20S蛋白酶体的抑制剂，已经被美国FDA批准用于临床治疗多发性骨髓瘤和淋巴瘤等疾病，并取得了良好的疗效。由于绝大多数DUBs是半胱氨酸类蛋白酶，其活性位点的半胱氨酸残基与多种亲电试剂具有很高的反应性，相对于E3连接酶，以DUBs为靶点更具成药性。相对于20S蛋白酶体抑制剂，大部分DUBs抑制剂只针对特异的部分去泛素化酶，因此DUBs抑制剂更具选择性。最近几年，相继有文献报道去泛素化酶抑制剂在抗肿瘤方面展现出显著效果(参见Linder S.等，Nat Med 2011；17(12):1636-1640；Chauhan D,等，Cancer Cell 2012；22(3):345–358；Liu NN,等，Scientific Reports 2014；4:5240；Liu NN,等，Oncotarget 2014；5(14):5453-5471)综上所述，去泛素化酶抑制在肿瘤治疗方面具有很好的临床应用前景。
发明内容
本发明的目的是提供一种去泛素化酶抑制剂Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2在医学中的新应用。
实现上述目的的技术方案如下。
Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2简称NiPT，其结构式如下。
Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2在制备防治肿瘤药物中的应用。
在其中一个实施例中，所述肿瘤为白血病。
Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2作为去泛素化酶抑制剂在制备防治炎症、组织缺血-再灌注损伤、心肌肥大疾病的药物中的应用。
本发明的另一目的是提供一种防治肿瘤的药物。
具体技术方案如下。
所述药物的活性成份包括有Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2。
本发明的另一目的是提供一种防治炎症、组织缺血-再灌注损伤、心肌肥大疾病的药物。
具体技术方案如下。
一种防治炎症、组织缺血-再灌注损伤、心肌肥大疾病的药物，所述药物的活性成份包括有Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2。
本发明发现NiPT对去泛素化酶有明显的抑制作用，尤其是26S蛋白酶体相关去泛素化酶(USP14/UCHL5)。作为金属配合物，NiPT与顺铂等抗癌药物不同，NiPT对DNA分子没有影响，未引起DNA损伤效应。
本发明发现NiPT在癌细胞系中普遍的细胞毒性作用，并对顺铂耐药的细胞系也有效。而且，NiPT对体内肿瘤有治疗作用，特别是对白血病细胞具有选择性毒性作用。本发明为临床上防治肿瘤、炎症、组织缺血-再灌注损伤、心肌肥大提供了更多的选择。
附图说明
图1是NiPT诱导肿瘤细胞内泛素化蛋白量的变化。
图2是NiPT对蛋白酶体外源性特异性底物GFPu和泛素化蛋白的影响。
图3是NiPT对20S蛋白酶体蛋白酶解活性的影响。
图4是NiPT对去泛素化酶尤其是26S蛋白酶体去泛素化酶(USP14/UCHL5)活性的影响。
图5是NiPT与DNA分子相互作用的情况。
图6是NiPT在肿瘤细胞中对DNA损伤效应分子的影响。
图7是NiPT对多种肿瘤细胞活力的影响。
图8是NiPT对非转化细胞(正常细胞)活力的影响。
图9是NiPT诱导的细胞凋亡与caspase相关蛋白的表达情况。
图10是NiPT抑制蛋白酶体功能和诱导细胞凋亡的先后关系。
图11是EDTA对NiPT诱导的泛素化蛋白聚集和细胞凋亡的影响。
图12是NiPT对白血病细胞蛋白酶体功能和细胞凋亡的影响。
图13是NiPT对人外周血单个核细胞蛋白酶体功能和细胞凋亡的影响。
图14是NiPT对裸鼠移植瘤(A549)的抑制情况和对肿瘤组织中泛素化蛋白的影响。
图15是NiPT对裸鼠移植瘤(K562)的抑制情况和对肿瘤组织中泛素化蛋白的影响。
图16是合成NiPT的高效液相色谱图和氢谱图。
具体实施方式
本实施例方式中，发明人发现NiPT对去泛素化酶有明显的抑制作用，尤其是26S蛋白酶体相关去泛素化酶(USP14/UCHL5)。本发明所述Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2在制备防治肿瘤药物中的应用。另一个方面，Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2作为去泛素化酶抑制剂在制备防治炎症、组织缺血-再灌注损伤、心肌肥大疾病的药物中的应用
NiPT的制备方法，参考文献，具体步骤如下：
向配有滴液漏斗及温度计的100mL四口烧瓶中，加入6g吡啶硫酮钠和10mL的去离子水。调节反应混合物的pH值为8.5，搅拌加热到70～75℃，在1h内滴加30％的硫酸镍水溶液4.7g，随着硫酸镍的加入，反应混合物的pH值逐渐降低，滴加10％的氢氧化钠调节到pH为8.5。保温反应1h，冷却。得到的沉淀用蒸馏水洗涤3次，用25mL乙醇洗涤3次,在80℃下烘干，得到棕色的Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2。(参见HOSSEINI SM,KAUFMAN C W,HOBBS P,et al,US,5650095[P],1997-07-22)。通过核磁共振氢谱和高效液相色谱方法鉴定，确认该化合物为Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2。结果参见图16(a)(b)。
为了更好地说明本发明，便于理解本发明的技术方案，以下通过实施例结合 图例对本发明做进一步的阐述，但不用于限制本发明。
实施例1：NiPT诱导肿瘤细胞内泛素化蛋白量的变化。
用不同浓度的NiPT(1.25,5,7.510μM)分别作用于A549和A459/DDP细胞12后，收集细胞提取总蛋白，用在K562细胞上的浓度为NiPT(0.5,1.0,2.0,4.0μM)，进行Western Blot免疫印迹，检测Ub-Prs、K48-、p27、PARP的表达情况。结果表明，NiPT明显抑制蛋白酶体功能。结果参见图1。
Western Blot方法：1配置SDS-PAGE所需要的凝胶。首先按照配方配置下层分离胶，配置好后缓慢加入装备好的两层玻璃夹板中，加入适量双蒸汽水封闭压线；待下层分离胶凝固后，将上步中的上层水倒掉，加入配置好的浓缩胶后插上梳子，静待凝固。2将提取的蛋白煮沸变性后，根据蛋白浓度以相同的样品量加入到凝胶孔内，开始电泳(浓缩胶85V，分离胶100V)，一定时间后停止电泳，采用湿转的方法将蛋白转移到PVDF膜上。3转膜结束后，将PVDF膜取出，采用5％的脱脂奶粉室温封闭1h。4封闭结束后，用PBST洗膜3次，每次5min，加入一定量配置好的一抗，室温孵育1-2h。5一抗孵育结束后，用PBST洗膜3次，每次5min，加入一定量二抗，室温孵育1-2h。6二抗孵育结束后，用PBST洗膜3次，每次5min，显影。
实施例2：NiPT对蛋白酶体外源性特异性底物GFPu和泛素化蛋白的影响
用不同浓度的NiPT处理GFPu-HEK-293细胞(稳定转染GFPu)12h后，收集细胞提取总蛋白，进行Western Blot免疫印迹(参见实施例1)或荧光显微镜原位拍照，检测Ub-Prs、GFPu的表达情况。结果表明，NiPT明显抑制蛋白酶体功能。结果参见图2。
实施例3：NiPT对20S蛋白酶体蛋白酶解活性的影响
不同浓度的NiPT作用于纯化的20S蛋白酶体，加入Chymotrypsin-like酶解底物Suc-LLVY-aminomethycoumarin(AMC)，多功能酶标仪(350/438nm)检测AMC释放的荧光强度。结果表明，NiPT对纯化20S蛋白酶体的Chymotrypsin-like酶解活性无影响。结果参见图3(a)。
用不同浓度的NiPT处理A549、A459/DDP、K562细胞4h后，收集细胞提取裂解液蛋白，加入Chymotrypsin-like酶解底物Suc-LLVY-aminomethycoumarin(AMC)，多功能酶标仪(350/438nm)检测AMC释放的荧光强度。结果表明，NiPT对细胞内20S蛋白酶体的Chymotrypsin-like酶解活性无影响。结果参见图3(b)(c)(d)。
实施例4：NiPT对去泛素化酶尤其是26S蛋白酶体去泛素化酶(USP14/UCHL5)活性的影响
计算机分子对接技术对NiPT与26S蛋白酶体USP14、UCHL5的结合能力及作用方式进行模拟预测。实验应用软件Discovery Studio 2.0进行具体的分子对接，具体实验方法为：受体准备：蛋白质晶体结构(来自PDB)，删除不必要的分子，给受体添加极性氢；配体准备：对配体分子进行能量最小化处理(考虑到在生理条件下，NiPT(L1)会发生解离，所以参与对接的分子是NiPT离子(L2)，然后用CDOCKER进行分子对接。结果参见图4(a)。
采用纯化的26S(a)和未处理的细胞裂解液(b)作为DUBs的供体，NiPT(0.5,1.0,2.0μM)作用于蛋白30min后，加入Ub-AMC(400nM)作为DUBs(USP类/UCH类)的底物，多功能酶标仪(350/438nm)每2min检测一次，观察DUB活性的动态变化。结果显示NiPT可以抑制细胞内去泛素化酶尤其是26S蛋白酶体去泛素化酶(USP14/UCHL5)的活性。结果参见图4(b)(c)(d)。
UbVS为半胱氨酸类DUBs特异性抑制剂，NiPT可竞争性拮抗UbVS对26S蛋白酶体DUBs的抑制作用。通过检测HA-UbVS可以判断NiPT与UCHL5和USP14的结合情况。本实验用不同浓度的NiPT作用于纯化26S蛋白酶体30min，广谱DUBs抑制剂NEM作为阳性对照；之后加入HA-UbVS(250ng)反应30min，然后采用Western blot方法(参见实施例1)检测HA水平。结果表明，NiPT可与UCHL5和USP14发生共价结合。结果参见图4(e)。
用不同浓度的NiPT(5、50μM)作用于纯化26S蛋白酶体30min后，加入泛素四聚体链Ub4(K48-linked)作为DUBs(USP14/UCHL5/POH1)的底物， 采用采用Western blot方法(参见实施例1)检测Ub4裂解情况。结果显示NiPT可剂量依赖地抑制26S蛋白酶体DUBs的活性。结果参见图4(f)。
实施例5：NiPT与DNA分子相互作用的情况
固定浓度的NiPT(1.93*10-5M，溶于DMSO)，逐渐增加DNA的溶度[0(a)，1.42(b)，2.85(c)，4.27(d)*10-5M，溶于Tris-HCl缓冲液，0.05M，pH＝7.40]，以含有同等浓度DMSO的Tris-HCl缓冲溶液为参比，扫描不同混合体系在200-600nm范围内的吸收光谱。结果表明，与DNA混合之后，NiPT在300-500nm范围内的吸收光谱没有变化，推测NiPT与DNA之间没有发生相互作用。结果参见图5(a)。
固定EB-DNA体系的浓度[c(EB)＝2μM，c(DNA)＝1.4*10-5M，溶于Tris-HCl缓冲液，0.05M，pH＝7.40]，向其中加入不同浓度的PtPT[1.5(A)，3.8(B)，7.2(C)*10-5M]，激发波长514nm，扫描其荧光光谱。溶液中所含DMSO的浓度相同。结果表明，加入NiPT，EB-DNA体系的荧光强度及峰位均无明显的变化。推测NiPT与DNA之间的结合模式可能不是常见的嵌插结合。结果参见图5(b)。
实施例6：NiPT在肿瘤细胞中对DNA损伤效应分子的影响
分别用CDDP(2.5uM)，NiPT(1.25uM)处理A549细胞3h、6h、12h后，将细胞用3％的多聚甲醛固定后清洗，用含1％Triton X-100和0.5％NP-40穿膜，清洗后加入5％的BAS封闭，吸去BSA滴加一抗(抗γ-H2AX抗体)，孵育1-2h后，0.1％NP-40洗3次，滴加二抗，孵育1-2h，0.1％NP-40洗3次，滴加DAPI避光20min后洗片并封片，荧光显微镜拍照。结果表明，NiPT未引起细胞内DNA损伤标记物γ-H2AX的表达。结果参见图6(a)。
用不同浓度的NiPT(0.25、0.5、1.0uM)和CDDP(2.5、5、10uM)处理K562细胞6h后，收集细胞提取总蛋白；在A549细胞上用的浓度则是：NiPT(1.25、2.5、5.0uM)和CDDP(2.5、5、10uM)。采用Western Blot方法检测DNA损伤相关蛋白γ-H2AX,、p-ATM,、p-chk2、p-chk1和PARP的表达情 况。结果表明，在肿瘤细胞中PtPT随着浓度增加未产生DNA损伤效应。结果参见图6(b)。
NiPT(2.5uM)和CDDP(2.5uM)作用于A549细胞6h、12h、18h后，收集细胞提取总蛋白，采用Western Blot方法检测DNA损伤相关蛋白γ-H2AX,、p-ATM,、p-chk2、p-chk1和PARP的表达情况。结果表明，在肿瘤细胞中PtPT随着时间延长未产生DNA损伤效应。结果参见图6(c)。
实施例7：NiPT对多种肿瘤细胞活力的影响
不同浓度的NiPT和CDDP(1.25、2.5、5.0、10、20μM)处理U266、K562、A549/DDP、A549、SMMC-7721细胞48后，加入MTS溶液孵育1-4h，酶标仪(490nM)检测其吸光度值。结果显示，相较于CDDP，NiPT可明显抑制多种肿瘤细胞的活力，且呈剂量依赖关系。结果参见图7。
实施例8：NiPT对非转化细胞(正常细胞)活力的影响
不同浓度的NiPT和CDDP(1.25、2.5、5.0、10、20μM)处理LO2、16HBE细胞48后，加入MTS溶液孵育1-4h，酶标仪(490nM)检测其吸光度值。结果显示，NiPT对非转化细胞活力的抑制较CDDP弱。结果参见图8。
用不同浓度的PtPT(2.5、5.0、10μM)和CDDP(5.0、10、20μM)处理K562细胞24h后，加入AnnexinV-FITC/PI双染试剂，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。左边为统计直方图。结果表明，PtPT可剂量依赖诱导K562细胞凋亡且效应明显优于CDDP。结果参见图8。
实施例9：NiPT诱导的细胞凋亡与caspase相关蛋白的表达情况
用不同浓度的NiPT(0.25、0.5、1.0μM)处理K562细胞24h后，加入AnnexinV-FITC/PI双染试剂，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。左边为统计直方图。结果表明，NiPT可剂量依赖诱导K562细胞凋亡。结果参见图9(c)。
不同浓度NiPT(0.25、0.5、1.0μM)作用于K562细胞24h后，收集细胞提取 总蛋白；用NiPT(0.5μM)处理K562细胞12h、24h、36h后，收集细胞提取总蛋白。然后进行Western Blot免疫印迹(参见实施例1)，检测caspase-3、-8、-9和PARP及其活化形式的表达情况。结果表明，NiPT可以诱导肿瘤细胞PARP切割和caspase活化。结果参见图9(a)。
用不同浓度的NiPT(0.25、0.5、1.0μM)处理K562细胞24h后，加入rhodamine染色试剂，流式细胞仪检测线粒体膜电位情况。左边为统计直方图。结果表明，NiPT可剂量依赖引起K562细胞线粒体膜电位的下降。结果参见图9(b)。
实施例10：NiPT抑制蛋白酶体功能和诱导细胞凋亡的先后关系
用NiPT(5μM)分别处理A549、A549/DDP、K562细胞后，在指定时间(6h、12h、18h、24h)收集细胞提取总蛋白，进行Western Blot免疫印迹(参见实施例1)，检测Ub-Prs、K48-、p27、PARP的表达情况。结果表明，NiPT在抑制蛋白酶体功能之后引起PARP的切割。结果参见图10。
实施例11：EDTA对NiPT诱导的泛素化蛋白聚集和细胞凋亡的影响
NiPT(5μM)或NiPT(5μM)联合EDTA(100μM)作用于A549细胞12h后，收集细胞提取总蛋白，进行Western Blot免疫印迹(参见实施例1)，检测Ub-Prs、PARP的表达情况。结果表明，EDTA可逆转NiPT诱导的泛素化蛋白聚集和PARP的切割。结果参见图11(a)。
NiPT(5μM)或NiPT(5μM)联合EDTA(100μM)作用于K562细胞12h后，加入AnnexinV-FITC/PI双染试剂，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。左边为统计直方图。结果表明，EDTA可逆转NiPT诱导的细胞凋亡。结果参见图11(b)。
实施例12：NiPT对白血病细胞蛋白酶体功能和细胞凋亡的影响
在知情同意的情况下，抽取6例正常人(Nm)和6例白血病病人(Pt)血液作为样本，通过淋巴细胞分离液分离样本中的单个核细胞，用不同浓度的NiPT处理细胞24h后，加入MTS溶液孵育1-4h，酶标仪检测其在490nM处的吸光 度值。用IC50值做散点图。结果显示，NiPT对白血病细胞具有选择性。结果参见图12(a)。
白血病病人(#2，ALL)细胞通过淋巴细胞分离液分离出单个核细胞，用不同浓度的NiPT(0.25、0.5、1.0μM)处理细胞24h后，加入AnnexinV-FITC/PI双染试剂，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。左边为统计直方图。结果表明，NiPT可剂量依赖诱导白血病细胞凋亡。结果参见图12(b)。
白血病病人(#1，CML/#3，AML)细胞通过淋巴细胞分离液分离出单个核细胞，用不同浓度的NiPT(0.25、0.5、1.0μM)、CDDP(10μM)和Vel(50nM)处理细胞24h后，加入AnnexinV-FITC/PI双染试剂，荧光显微镜原位拍照。结果表明，NiPT可剂量依赖诱导白血病细胞凋亡。结果参见图12(c)。
白血病病人(#2、#4、#7)细胞通过淋巴细胞分离液分离出单个核细胞，用不同浓度的NiPT(0.5、1.0、2.0μM)处理细胞24h后，收集细胞提取总蛋白，通过Western Blot方法(参见实施例1)检测Ub-Prs、K48-和PARP的表达情况。结果表明，NiPT可抑制白血病细胞蛋白酶体功能并诱导白血病细胞凋亡。结果参见图12(d)。
实施例13：NiPT对人外周血单个核细胞蛋白酶体功能和细胞凋亡的影响
正常人外周血(#2)通过淋巴细胞分离液分离出单个核细胞，用不同浓度的NiPT(0.25、0.5、1.0μM)、CDDP(10μM)和Vel(50nM)处理细胞24h后，加入AnnexinV-FITC/PI双染试剂，荧光显微镜原位拍照。结果表明，NiPT较CDDP和Vel诱导人外周血单个核细胞凋亡能力弱，具有细胞选择性。结果参见图13(a)。
正常人外周血(#3、#6)通过淋巴细胞分离液分离出单个核细胞，用不同浓度的NiPT(0.25、0.5、1.0μM)、CDDP(10μM)和Vel(50nM)处理细胞24h后，通过Western Blot方法检测Ub-Prs、K48-和PARP的表达情况。结果表明，NiPT对人外周血单个核细胞蛋白酶体功能抑制较弱，具有细胞选择性。结果参见图13(b)。
实施例14：NiPT对裸鼠移植瘤(A549)的抑制情况和对肿瘤组织中泛素化蛋白的影响
将A549细胞悬液(5×106/ml，无血清RPMI1640培养基)皮下接种于12只BALB/c裸鼠(18-20g，购自广东省动物中心)背部外侧，随机分为2组(对照组、NiPT组)，每组6只，腹腔给药(NiPT 5mg/kg/day)，每天记录裸鼠体重，隔天记录裸鼠肿瘤体积，持续15天。肿瘤大小，肿瘤重量，裸鼠体重，肿瘤体积变化。结果显示，NiPT可显著抑制裸鼠移植瘤(A549)的生长。结果参见图14(a)(b)(c)(d)。
接种A549细胞的裸鼠经腹腔给药后，取2组(对照组、NiPT组)移植瘤组织，采用免疫组化方法检测肿瘤组织中Ub-Prs、K48-、p21和Cleaved-caspase3的表达情况。结果表明，NiPT可引起A549肿瘤组织中泛素化蛋白质的聚集。结果参见图14(e)。
实施例15：NiPT对裸鼠移植瘤(K562)的抑制情况和对肿瘤组织中泛素化蛋白的影响
将K562细胞悬液(5×106/ml，无血清RPMI1640培养基)皮下接种于12只BALB/c裸鼠(18-20g，购自广东省动物中心)背部外侧，随机分为2组(对照组、NiPT组)，具体方案参见实施例14。结果显示，NiPT可显著抑制裸鼠移植瘤(K562)的生长并引起裸鼠K562肿瘤组织中泛素化蛋白质的聚集。结果参见图15。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的 普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (6)
1.结构式如下的Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2在制备防治肿瘤药物中的应用
2.根据权利要求1所述的应用，其特征是，所述肿瘤为白血病。
3.结构式如下的Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2作为去泛素化酶抑制剂在制备防治炎症、组织缺血-再灌注损伤、心肌肥大疾病的药物中的应用
4.一种防治肿瘤的药物，其特征是，所述药物的活性成份包括有结构式如下的Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2
5.根据权利要求4所述的药物，其特征是，所述肿瘤为白血病。
6.一种防治炎症、组织缺血-再灌注损伤、心肌肥大疾病的药物，其特征是，所述药物的活性成份包括有结构式如下的Ni(1-oxidopyridine-2-thione)2
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| CN108938630A (zh) * | 2017-05-22 | 2018-12-07 | 广州医科大学 | 2-巯基吡啶-n-氧化物金盐化合物的新应用 |
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2015
- 2015-04-09 CN CN201510167157.8A patent/CN104997776B/zh active Active
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108938630A (zh) * | 2017-05-22 | 2018-12-07 | 广州医科大学 | 2-巯基吡啶-n-氧化物金盐化合物的新应用 |
| CN108938630B (zh) * | 2017-05-22 | 2020-03-03 | 广州医科大学 | 2-巯基吡啶-n-氧化物金盐化合物的新应用 |
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Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104997776B (zh) | 2018-12-28 |
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