CN104971083A - 橄榄树叶在制备或筛选治疗咳嗽的药物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及医药化工领域，特别是涉及橄榄树叶在制备或筛选治疗咳嗽的药物中的用途。本发明提供橄榄树叶在制备或筛选治疗急性或慢性咳嗽的药物中的用途，并进一步提供了橄榄树叶提取物的制备方法。本发明发明人发现橄榄树叶提取物治疗急性和慢性咳嗽起效快，效果确切，能够使患处病损迅速恢复。试验中，210名急性和慢性患者中205名患者有效，未见任何不良反应。虽然100名慢性咳嗽病人无治愈，但在7天的时间里有95人有效，有效率高达97.6%。可见橄榄树叶在咳嗽治疗药物方面有着广阔的应用前景和产业价值。

Description

橄榄树叶在制备或筛选治疗咳嗽的药物中的用途

技术领域

本发明涉及医药化工领域，特别是涉及橄榄（Olea europaea L.）树叶在制备或筛选治疗咳嗽的药物中的用途。

背景技术

橄榄树是一种耐旱、耐寒、生长能力很强的亚热带常绿长寿乔木，起初广泛种植于欧洲南部地中海沿岸国家，主要是西班牙、意大利、法国、希腊、以色利、摩洛哥、突尼斯、土耳其。后因其历史性，经济性，以及更重要的药用性价值，逐渐引种到世界各地，如在***半岛，印度次大陆，亚洲，南北美洲，澳洲等都有种植。中国主要在湖北、四川、云南、贵州、陕西有比较多的种植。

根据史书记载：在地中海沿岸的国家里，民间利用橄榄，橄榄油和橄榄树叶治疗发热、疼痛、炎症、麻痹、痤疮、脱发、失眠、痴呆、哮喘、风湿病、过敏和外伤的历史已经有数千年。虽然随着近代和现代制药工业的发展和壮大，有关橄榄，橄榄油和橄榄树叶的药用价值的研究受到一定程度的忽视，但并没有完全停止，如在上世纪50年代，有人报道橄榄树叶的粗提物对高血压有明显治疗作用，并证明其对血管有舒张作用。随后的几十年里，人们逐渐注意到，地中海沿岸国家的心血管疾病发生率和肿瘤发生率为全世界最低。通过和其它地区人群的大规模流行病学对比研究，以及体外细胞和体内动物研究，花了前后大约20年时间，学术界正式确认：橄榄树产品如橄榄，橄榄油和橄榄树叶在地中海沿岸居民食物中的大量使用，是导致这种差异的原因。

最近十多年以来，有关橄榄、橄榄油和橄榄树叶里面有效活性成分的研究有了比较全面的进展。首先橄榄树上含活性成分最丰富的地方，不在橄榄果子，也不在橄榄油，而是存在于橄榄树叶里。目前了解到的主要两种活性单体化合物，是具有强烈抗氧化功能的橄榄苦苷（oleuropein）和羟基酪醇（hydroxytyrosol）。根据橄榄树的产地不同，仅橄榄苦苷一种单体物质就占橄榄树叶干重的6%到19%，相比在橄榄油中0.2%的含量，两者活性成分相差很大。其它目前研究得比较清楚的活性物质还有：对羟苯基乙醇（tyrosol），咖啡酸（caffeic acid），对羟基肉桂酸（p-coumaric acid），香草酸（vanillic acid），香草醛（vanillin），毛地黄黄酮（luteolin），香叶木素（diosmetin），芸香苷（rutin），毛蕊花苷（verbascoside），木犀草素-7-葡糖苷（luteolin-7-glucoside），芹菜甙元-7-葡糖苷（apigenin-7-glucoside）和香叶木素-7-葡糖苷（diosmetin-7-glucoside），这些分子占橄榄树叶的干重不到2%。

在近些年来，对橄榄树叶里面的主要成分橄榄苦苷和羟基酪醇的分子机理研究深入得较快。积累的资料已经表明：它们不仅具有强烈清除组织细胞内自由基的功能，而且还具有强烈的对抗细菌、病毒、霉菌和支原体的功能。进一步的研究发现，橄榄树叶的粗提物，因为含有更多各种不同的活性分子，其清除自由基和对抗病菌的能力，比之单用橄榄苦苷和/或羟基酪醇，作用更大更理想，也更经济。随后的大鼠体内急性毒性试验表明，在给予大鼠灌胃2000mg/kg橄榄树叶粗提物的情况下，仍未观察到半数致死，这是药物在小动物身上进行毒性试验的最高限，若高于此限，学术界认为可以基本判定为无毒。如果以2000mg/kg人为设定其半数致死量，按此值进行慢性毒性试验，即每天按2000mg/kg的量连续给予大鼠六月以上，未观察到任何不良发应；同样的量作用于大鼠，也未观察到对大鼠发育和生殖的任何毒性，甚至将剂量增大到5000mg/kg/天，仍未观察到对细胞和对造血***的毒性。根据这些安全性试验结果，结合地中海沿岸国家长期食用橄榄，橄榄油和橄榄树叶的生活习惯，依据大鼠和人之间剂量换算参考系数，可以认为在人身上食用橄榄树叶粗提物的绝对安全数值将远大于20mg/kg/天。国外已经根据这些试验数据设计出了口服液和胶囊两种商业化形式的橄榄树叶粗提物制剂，用于人体保健。

我们在研究橄榄树叶粗提物治疗人类疾病的过程中注意到，虽然大量文献已经阐明了橄榄树叶粗提物具有抗炎功能，但是否能治疗急性或慢性咳嗽，尚未见报道。

急性咳嗽的常见原因是普通感冒，其它病因包括急性支气管炎、急性鼻窦炎、过敏性鼻炎、慢性支气管炎急性发作、支气管哮喘（简称哮喘）等。慢性咳嗽的原因较多，通常可分为两类：一类为初查X线胸片有明确病变者，如肺炎、肺结核、肺癌等；另一类为X线胸片无明显异常，以咳嗽为主或唯一症状者，即通常所说的不明原因咳嗽。慢性咳嗽的常见原因为慢性支气管炎、支气管扩张、支气管内膜结核、变应性咳嗽（AC）、心理性咳嗽等。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种橄榄树叶的新用途，用于解决现有技术中的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明第一方面提供橄榄（Olea europaea L.）树叶在制备或筛选治疗急性或慢性咳嗽的药物中的用途。

优选地，所述用途具体为：橄榄树叶提取物在制备或筛选治疗急性或慢性咳嗽的药物中的用途。

更优选的，所述橄榄树叶提取物为橄榄树叶水溶液提取物。

更优选的，所述橄榄树叶水溶液提取物的制备方法包括如下步骤：

1）将橄榄树叶加水煎煮后取上清液；

2）剩余固相物继续加水煎煮多次，每次煎煮后均取上清液；

3）合并所得的上清液，浓缩、干燥即得粗体物；

4）将粗提物加入水中，充分搅拌后离心，上清液进行滤膜过滤、消毒后即得所述橄榄树叶水溶液提取物。

进一步优选的，所述步骤1中，橄榄树叶（干重）与水的重量比为1：8-12。

进一步优选的，所述步骤1和2中，煎煮的时间为15-25min。

进一步优选的，所述步骤2中，固相物（干重）与水的重量比为1：8-12。

进一步优选的，所述步骤2中，剩余固相物继续加水煎煮的次数为6-8次。

进一步优选的，所述步骤3中，浓缩的具体方法为真空浓缩，干燥的具体方法为冷冻干燥。

进一步优选的，所述步骤4中，粗提物与水的重量比为1：180-220。

进一步优选的，所述步骤4中，搅拌的具体条件为：室温下搅拌1.5-2.5小时，离心的具体条件为3500-4500rpm/min离心25-35分钟。

进一步优选的，所述步骤4中，上清液进行滤膜过滤、消毒的具体方法为：上清液依次经5μM和0.45μM滤膜过滤，再进行高压消毒（121℃，102.9KPa，30分钟），自然冷却后，先后用0.45μM和0.22μM滤膜再次过滤。

所述橄榄树叶水溶液提取物即可按瓶无菌分装，即为0.5%橄榄树叶粗提物水溶液，4℃保存待用。

本发明第二方面提供一种用于治疗急性或慢性咳嗽的药物组合物，所述药物组合物中包括有效量的橄榄树叶提取物。

本发明第三方面提供一种用于治疗急性或慢性咳嗽的药物制剂，所述药物制剂由所述药物组合物和药学上可接受的辅料组成。

由于在医疗实践中一些具有抗菌功能的物质不一定对具体的病菌能起到抑制作用，比如抗生素，由于细菌耐药性，或者在慢性炎症情况下，局部炎性因子拮抗，常常导致治疗无效。而本发明发明人首次在患者身上观察到了橄榄树叶提取物对急性或慢性咳嗽患者的治疗作用。

本发明发明人发现橄榄树叶提取物治疗急性和慢性咳嗽起效快，效果确切，能够使患处病损迅速恢复。试验中，210名急性和慢性患者中205名患者有效，未见任何不良反应。虽然100名慢性咳嗽病人无治愈，但在7天的时间里有95人有效，有效率高达97.6%。可见橄榄树叶在咳嗽治疗药物方面有着广阔的应用前景和产业价值。

具体实施方式

以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。

须知，下列实施例中未具体注明的工艺设备或装置均采用本领域内的常规设备或装置；所有压力值和范围都是指绝对压力。

此外应理解，本发明中提到的一个或多个方法步骤并不排斥在所述组合步骤前后还可以存在其他方法步骤或在这些明确提到的步骤之间还可以***其他方法步骤，除非另有说明；还应理解，本发明中提到的一个或多个设备/装置之间的组合连接关系并不排斥在所述组合设备/装置前后还可以存在其他设备/装置或在这些明确提到的两个设备/装置之间还可以***其他设备/装置，除非另有说明。而且，除非另有说明，各方法步骤的编号仅为鉴别各方法步骤的便利工具，而非为限制各方法步骤的排列次序或限定本发明可实施的范围，其相对关系的改变或调整，在无实质变更技术内容的情况下，当亦视为本发明可实施的范畴。

实施例1

1.1橄榄树叶粗提物水溶液的制备：

称取橄榄树叶500g(干重)，加水5000ml煎煮20min，取上清，渣重复上述操作，提取7次，合并上清液。然后真空浓缩至膏状，再冷冻干燥至恒重，称量，得棕色干粉，即为粗提物。称取粗提物112.5g，加入22500ml去离子水，室温电动搅拌2小时，4000rpm/min离心30分钟，上清液依次经5μM，0.45μM滤膜过滤，再进行高压消毒（121℃，102.9KPa，30分钟），自然冷却后，先后用0.45μM和0.22μM滤膜再次过滤，按500ml/瓶无菌分装至少45瓶，即为0.5%橄榄树叶提物水溶液。4℃保存待用。

1.2急性或慢性咳嗽的诊断标准：

咳嗽是机体呼吸道分泌物增多，或者有害因子侵入，造成呼吸道粘膜平滑肌受刺激，剧烈收缩所致，是一种有效的防御性反应，有利于排除分泌物以及异物等，但频繁剧烈的咳嗽严重影响患者的工作，生活和社会活动。按照咳嗽的时程，可分为急性咳嗽和慢性咳嗽。我们在试验中将持续时间少于8周的咳嗽定义为急性咳嗽；大于或等于8周时间的咳嗽定义为慢性咳嗽。

1.3治疗对象一般情况介绍：

总共210例咳嗽病人，其中急性咳嗽110人（男75人，女35人，年龄6-76岁），慢性咳嗽100人（男53人，女47人，年龄18-93），按知情同意原则接受本方法治疗。

1.4治疗方法：

本治疗采用自身对照方法观察疗效，即按盲法先给与210例急性和慢性咳嗽患者服用安慰剂，安慰剂采用市售维生素C咀嚼片（浙江康恩贝集团医疗保健品有限公司），每天1次，每次1片，每片213mg，连服7天，第8天报告疗效。随后，开始服用本口服液-橄榄树叶粗提物水溶液，制备方法见上，服用方法为：一天两次，每次50ml，连续服用7天，同样第8天上医院检查治疗结果。

1.5疗效评定标准：

将治疗效果分为治愈，有效和无效。治愈：咳嗽消失；有效：咳嗽明显好转，程度和次数都明显减少；无效：咳嗽的程度和次数均无明显改善。

2结果：

210例患者，服用安慰剂后咳嗽均无任何变化，但服用橄榄树叶粗提物水溶液7天后，急性咳嗽全部治愈，慢性咳嗽治愈0例，有效95例，无效5例，总有效率97.6%，未见任何不良反应。采用SPSS21.0统计分析软件进行统计分析，连续校正χ2检验=416.01，P<0.0001，统计有显著性差异（表1）。

表1

分组	例数	治愈	有效	无效	总有效率(%)
						维生素C安慰剂	210	0	0	210	0
橄榄树叶粗提物水溶液	210	110	95	5	97.6%

综上所述，本发明有效克服了现有技术中的种种缺点而具高度产业利用价值。

上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims (10)

1.橄榄树叶在制备或筛选治疗急性或慢性咳嗽的药物中的用途。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述用途具体为：橄榄树叶提取物在制备或筛选治疗急性或慢性咳嗽的药物中的用途。

3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述橄榄树叶提取物为橄榄树叶水溶液提取物。

4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述橄榄树叶水溶液提取物的制备方法包括如下步骤：

1）将橄榄树叶加水煎煮后取上清液；

2）剩余固相物继续加水煎煮多次，每次煎煮后均取上清液；

3）合并所得的上清液，浓缩、干燥即得粗体物；

4）将粗提物加入水中，充分搅拌后离心，上清液进行滤膜过滤、消毒后即得所述橄榄树叶水溶液提取物。

5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述步骤1和2中，煎煮的时间为15-25min，所述步骤1中，橄榄树叶与水的重量比为1：8-12，所述步骤2中，固相物与水的重量比为1：8-12。

6.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述步骤2中，剩余固相物继续加水煎煮的次数为6-8次。

7.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述步骤3中，浓缩的具体方法为真空浓缩，干燥的具体方法为冷冻干燥。

8.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述步骤4中，粗提物与水的重量比为1：180-220，搅拌的具体条件为：室温下搅拌1.5-2.5小时，离心的具体条件为3500-4500rpm/min离心25-35分钟，上清液进行滤膜过滤、消毒的具体方法为：上清液依次经5μM和0.45μM滤膜过滤，再进行高压消毒，自然冷却后，先后用0.45μM和0.22μM滤膜再次过滤。

9.一种用于治疗急性或慢性咳嗽的药物组合物，所述药物组合物中包括有效量的橄榄树叶提取物。

10.一种用于治疗急性或慢性咳嗽的药物制剂，所述药物制剂由权利要求9所述的药物组合物和药学上可接受的辅料组成。