CN104946616A - 一种用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂及其使用方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂及其使用方法。所述的用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂，其特征在于，由原料水溶液冻干后得到，所述的原料水溶液包含5-20g/L牛血清白蛋白，2-15mmol/L EDTA钠盐或EDTA钾盐，10-20g/L蔗糖或甘氨酸或甘露糖，0.1-1g/L吐温20或吐温40或吐温80或聚乙烯吡咯烷酮，1-5g/L环糊精和1-5g/L PEG2000或PEG6000或PEG8000。本发明可有效延长试剂的保存时间，可以使所述试剂的检测结果更为稳定。另外该稳定剂为固体，可以常温保存，使用简单方便。

Description

一种用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂及其使用方法

技术领域

本发明涉及用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂。

背景技术

目前临床上使用的体外诊断试剂盒大多含有酶、易分解的色源、辅酶等物质，含有酶类的体外诊断试剂盒，绝大多数酶试剂热稳定性不好，需在2～10℃下保存，有些作为遗传工程用的酶试剂则需在-20℃下保存，因为酶类受温度、缓冲液pH、液体长期保存易丧失部分或全部活力，导致试剂盒质量稳定性下降或失效，从而直接影响到临床样本测定结果的不准确和误诊。此外辅酶、色源等也受温度、缓冲液pH、液体长期保存条件的影响，易分解导致试剂盒不稳定或失效。

目前关于体外诊断试剂盒的稳定性的报道都是针对酶的稳定性的单一影响稳定性的因素来考虑。专利CN104195221A提到的一种用于葡萄糖测定试剂盒的复合稳定剂；专利CN200510111883.4提供了一种酶复合稳定剂只是对几种特定的单一酶的稳定性进行了研究，没有体现对试剂盒的其他不稳定成分综合稳定性起到作用；另外这些稳定剂都是液体成份，不便于长期保存和运输。因此研究和开发一种通用的固体稳定剂，对体外诊断试剂盒有广谱稳定作用的稳定剂，非常有必要。

发明内容

本发明的目的是提供一种通用固体稳定剂，用于体外诊断试剂，尤其是含有酶、易分解的色源或辅酶等不稳定成分的体外诊断试剂，该稳定剂为固体，便于长期保存、运输和使用。

为了达到上述目的，本发明提供了一种用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂，其特征在于，由原料水溶液冻干后得到，所述的原料水溶液包含5-20g/L牛血清白蛋白，2-15mmol/L EDTA钠盐或EDTA钾盐，10-20g/L蔗糖或甘氨酸或甘露糖，0.1-1g/L吐温20或吐温40或吐温80或聚乙烯吡咯烷酮，1-5g/L环糊精和1-5g/L PEG2000或PEG6000或PEG8000。

优选地，所述的体外诊断试剂为总胆汁酸测定试剂盒(循环酶法)中的R1和R2试剂、肌酐测定试剂盒(酶法)中的R1和R2试剂、岩藻糖苷酶试剂盒(CNPF底物法)中的R2试剂、高低密度测定试剂盒(均相法)中的R1和R2试剂和肌酸激酶同工酶(CK-MB)测定试剂盒中的R1和R2试剂中的至少一种。

本发明还提供了上述的用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂的使用方法，其特征在于，包括将上述的用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂加入到体外诊断试剂中，所述的通用固体稳定剂的重量与体外诊断试剂的体积的比例为0.1-1g/L。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明可有效延长试剂的保存时间，可以使所述试剂的检测结果更为稳定。另外该稳定剂为固体，可以常温保存，使用简单方便。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

下述实施例中所用的总胆汁酸测定试剂盒(循环酶法)中的R1和R2试剂、肌酐测定试剂盒(酶法)中的R1和R2试剂、岩藻糖苷酶试剂盒(CNPF底物法)中的R2试剂、高低密度测定试剂盒(均相法)中的R1和R2试剂和肌酸激酶同工酶(CK-MB)测定试剂盒中的R1和R2试剂都为市售产品，由骏实生物科技(上海)有限公司生产。

实施例

一种用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂，由原料水溶液冻干后得到，所述的原料水溶液的组分及各组分对应的浓度如下：

组分	浓度
		牛血清白蛋白	5g/L
EDTA二钠盐	15mmol/L
		蔗糖	10g/L
吐温80	1g/L
		聚乙烯吡咯烷酮	1g/L
环糊精	5g/L

PEG2000

5g/L

所述的用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂的制备方法为：将上述组分在常温下纯化水搅拌溶解后，过滤，得到原料水溶液，然后冻干，即可制得用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂。

分别将上述的用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂加入到总胆汁酸(TBA)测定试剂盒(循环酶法)中的R1和R2试剂、肌酐(CRE)测定试剂盒(酶法)中的R1和R2试剂、岩藻糖苷酶(AFU)试剂盒(CNPF底物法)中的R2试剂、高低密度(HDL-C/LDL-C)测定试剂盒(均相法)中的R1和R2试剂和肌酸激酶同工酶(CK-MB)测定试剂盒中的R1和R2试剂中，所述的通用固体稳定剂的重量与各体外诊断试剂的体积的比例为0.1g/L。同时取未加入通用固体稳定剂的各体外诊断试剂作为对照。

取对应质控品分别进行下述实验测定稳定性：

上述各质控品分别为RANDOX、ROCHE、伯乐公司、骏实生物生产。质控品分为质控1(正常值)和质控2(病理值)2个浓度。

国际临床化学学会对质控品定义是专门用于质量控制目的的标本或溶液，不能用于校准。对稳定性、瓶间差要求高。分定值和不定值两种。在选择控制品时，应该选择有几个浓度的、浓度范围分布较宽的、最好是医学决定水平的、有可报告范围范围是上下限值的质控品。

朗道生化质控品包括TBA(定值)项目；罗氏常规生化质控品包括CRE(定值)项目；伯乐公司生产的脂类质控品包括HDL/LDL(定值)项目；朗道公司生产CK-MB专用质控品(定值)。

(1)、2-8度稳定性试验：

在日立7600全自动生化分析仪上按照各试剂盒说明书采用质控1和质控2进行测定。

2-8度结果

由上表数据可以分析出，在2-8度保存条件下未加和加入稳定剂的试剂盒测定质控品基本没有差异。

(2)37℃、5天稳定性试验：将上述加入固体稳定剂和未加入固体稳定剂的各体外诊断试剂同时放入37℃生化培养箱中5天后，在37℃在日立7600全自动生化分析仪上按照各试剂盒说明书分别测定质控品，结果如下：

37度5天结果

由上表数据可以分析出，在37度放置5天测定结果可以分析，加入稳定剂的试剂盒质控品测定明显优于未加入的试剂盒。

(3)12个月长期稳定性试验：

将上述加入固体稳定剂和未加入固体稳定剂的各体外诊断试剂同时放入2-8度环境中12个月，定期测定其稳定性，结果如下：

由上表结果分析，加入稳定剂的试剂的长期稳定性优于未加入稳定剂的试剂，从质控看，未加入稳定剂的试剂的质控品在12个月已经失控，不达标。因此加入稳定剂可以提高试剂的稳定性。

对色源稳定性试验：

试剂盒AFU/HDL/LDL含有色源，分别在试剂AFU：R2；HDL/LDL-C：R1；CRE：R1中加入稳定剂和不加稳定剂，进行上述的37℃、5天稳定性试验，试验结果如下：

由上表结果分析，未加入稳定剂的试剂盒，质控下降。

对辅酶的稳定性试验，试剂盒TBA：R1；CK-MB：R2分别含有辅酶，在含有辅酶的试剂TBA：R1，CK-MB：R2中加入稳定剂和不加稳定剂，进行上述的37℃、5天稳定性试验，试验结果如下：

采用上述的用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂测定其在室温保存条件下的长期稳定性，在室温下保存12个月后，加入到TBA和CRE试剂盒中的R1和R2试剂中，进行上述的37℃、5天稳定性试验，来证明稳定剂的稳定性，结果如下：

由上表可以看出，稳定剂在室温保存12个月后，加入到试剂盒中，稳定性效果没有变化。

Claims (3)

1.一种用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂，其特征在于，由原料水溶液冻干后得到，所述的原料水溶液包含5-20g/L牛血清白蛋白，2-15mmol/L EDTA钠盐或EDTA钾盐，10-20g/L蔗糖或甘氨酸或甘露糖，0.1-1g/L吐温20或吐温40或吐温80或聚乙烯吡咯烷酮，1-5g/L环糊精和1-5g/L PEG2000或PEG6000或PEG8000。

2.如权利要求1所述的用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂，其特征在于，所述的体外诊断试剂为总胆汁酸测定试剂盒中的R1和R2试剂、肌酐测定试剂盒中的R1和R2试剂、岩藻糖苷酶试剂盒中的R2试剂、高低密度测定试剂盒中的R1和R2试剂和肌酸激酶同工酶测定试剂盒中的R1和R2试剂中的至少一种。

3.权利要求1所述的用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂的使用方法，其特征在于，包括将权利要求1所述的用于体外诊断试剂的通用固体稳定剂加入到体外诊断试剂中，所述的通用固体稳定剂的重量与体外诊断试剂的体积的比例为0.1-1g/L。