CN104862247A - 一种复合微生物菌剂的液体培养基及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及微生物肥料领域，具体为一种复合微生物菌剂的液体培养基及制备方法，解决现有复合液体微生物菌剂生产中单一微生物的发酵培养基种类过多、生产过程延长、生产工艺繁琐等问题，由食用红糖、黑豆、黑面、食盐、氯化钴、硫酸铵、皮胶、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、复合氨基酸粉、熟石灰、复合维生素、硫酸镁制成，该液体培养基目的明确、营养协调丰富、理化因素适宜、原料来源广且经济节约，它能够满足细菌类、放线菌类、酵母类、真菌类的营养需求。是一种简单、快捷、方便、高效的液体微生物菌剂产品的生产方法，极大地方便了微生物肥料产品的生产企业，提高产品质量打下良好基础，可广泛用于瓜果蔬菜等经济作物的种植领域。

Description

一种复合微生物菌剂的液体培养基及制备方法

技术领域

本发明涉及微生物肥料领域，具体为一种可用于瓜果、蔬菜等经济作物种植的复合微生物菌剂的液体培养基及制备方法。

背景技术

微生物本身不是肥料，但是它的生命活动过程可以起到肥效的作用。很多微生物都是生活在土壤里面，是土壤团粒的一部分。有的是可以固氮的，固定空气当中的氮，变成氨，提供植物的氮肥；有些固定的、不能被植物利用的钾或磷可在微生物的作用下变成植物可利用的磷肥和钾肥，所以，微生物肥料是以微生物的生命活动导致作物得到特定肥料效应的一种制品，是农业生产中使用肥料的一种。目前，微生物肥料不可能完全取代化肥，但它有一些其它肥料所没有的特殊作用：如提高化肥利用率的作用；在绿色食品生产中的作用；在环保中的作用；改良土壤的作用。

随着化肥的大量使用，其利用率不断降低已是众所周知的事实。这说明，仅靠大量增施化肥来提高作物产量是有限的，更何况还有污染环境等一系列的问题。为此各国科学家一直在努力探索提高化肥利用率达到平衡施肥、合理施肥以克服其弊端的途径，其中微生物肥料在解决这方面问题上有独到的作用，能够达到活化土壤中作物难以利用的或不能利用的氮、磷、钾和其他中、微量元素，提高作物自身利用养分的能力，所以，根据中国作物种类和土壤条件，采用微生物肥料与化肥配合施用，既能保证增产，提高肥料利用率，又减少了化肥使用量，降低成本，同时还能改善土壤及作物品质，减少污染。

目前，微生物肥料的产品有生物有机肥、复合微生物肥料和微生物菌剂三种。生物有机肥有粉剂、颗粒两种剂型；复合微生物肥料有液体、粉剂、颗粒三种剂型；微生物菌剂分为液体、粉剂、颗粒三种剂型。其中液体微生物菌剂的发展趋势：1、从豆科作物接种剂向非豆科用肥方面发展；2、由单一菌剂向复合菌剂方面发展；3、由单功能向多功能方面发展；4、由无芽孢菌转向芽孢菌。

为了能更好的充分利用微生物之间的相互作用，增强功能微生物的作用，抑制病原菌的侵染，通常采用复合液体微生物菌剂，复合微生物菌剂制备时采用单菌发酵生产，然后按比例复配而成，发酵培养基种类过多、成本较高，而且生产过程延长、生产工艺繁琐。

发明内容

本发明为了解决现有复合液体微生物菌剂生产中单一微生物的发酵培养基种类过多、生产过程延长、生产工艺繁琐等问题，提供一种复合微生物菌剂的液体培养基及制备方法。

本发明是采用如下技术方案实现的：一种复合微生物菌剂的液体培养基，由下列重量份数的原料制成：食用红糖62~68份、黑豆5~6份、黑面5~6份、食盐1~2份、氯化钴0.01~0.02份、硫酸铵5~6份、皮胶4~5份、磷酸二氢钾0.5~1份、磷酸氢二钾0.5~1份、复合氨基酸粉4~5份、熟石灰2~3份、复合维生素0.5~1份、硫酸镁0.5~1份。

制备如权利要求1所述复合微生物菌剂的液体培养基的方法，包括以下步骤：（1）将黑豆温水浸泡后磨成豆浆，150目过滤，滤去豆渣；（2）食用红糖、食盐、硫酸铵、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、复合氨基酸粉、氯化钴用冷水溶解；（3）皮胶用100℃热水溶解，充分搅拌、溶化；（4）黑面用冷水化开，充分搅拌均匀；（5）熟石灰用冷水溶解；将上述溶液依次加入到密闭的容器中，121℃连续灭菌1h，待冷却至室温后，无菌操作下，加入复合维生素的水溶液，充分搅拌均匀，制成复合微生物菌剂的液体培养基。使用本发明所述液体培养基，按1%的比例，加入适合各种农作物生长的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、细黄链霉菌、酿酒酵母、米曲霉等复合菌剂，通入无菌空气，30℃恒温培养5天，即可做成各种专用液体微生物菌剂。

上述各种原料均可从市场购得，其中黑面是指麦子产出来以后经过去皮等粗加工后开始磨面，这时候出来的是粗面，也是来百姓最常说的黑面；皮胶是指以动物的皮为原料提取的动物胶的粗制品，纯度低，呈黄色到棕黑色，为不透明的块状或颗粒状固体；复合氨基酸粉是以人或者动物毛发，皮毛或者以豆粕，菜粕，棉粕为原料，经微生物发酵、酸碱水解处理后，喷雾干燥加工而成。上述原料中，食用红糖提供碳源、能源、维生素、无机盐，黑豆提供缓效氮源，黑面提供氮源、维生素，食盐提供无机盐，氯化钴提供无机盐，硫酸铵提供速效氮源，皮胶提供缓效氮源，磷酸二氢钾、磷酸氢二钾提供无机盐、调节pH值，复合氨基酸粉提供缓效氮源，熟石灰调节pH值，复合维生素提供生长因子，硫酸镁提供无机盐。

该液体培养基目的明确、营养协调丰富、理化因素适宜、原料来源广且经济节约，它能够满足枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌等细菌；细黄链霉菌等放线菌；酿酒酵母、米曲霉等真菌的营养需求。采用此方法做成的液体复合微生物菌剂产品，每毫升中的有效活菌数（cfu）≥2亿，复合菌剂中每一种有效微生物的数量不少于0.01亿/毫升。很好解决了现有液体微生物菌剂产品多为单菌发酵培养，然后按比例复配成产品的问题，是一种简单、快捷、方便、高效的液体微生物菌剂产品的生产方法，极大地方便了微生物肥料产品的生产企业，提高产品质量打下良好基础，可广泛用于瓜果蔬菜等经济作物的种植领域。

为了进一步证明本发明所述复合微生物菌剂的液体培养基具体应用中的效果，本发明进行了以下肥效试验：

在2013年6月至2013年12月期间，利用本发明所述的复合微生物菌剂的液体培养基及其制备方法，再与适合不同农作物生长的复合微生物菌剂进行混合，然后通入无菌空气，30℃恒温培养5天，做成各种农作物专用液体微生物菌剂，分别在霍州市李曹镇杨枣村、霍州市什林镇退沙村及大张镇贾村对苹果、番茄、玉米进行了肥效试验。

试验一、在霍州市李曹镇杨枣村的苹果上进行了正规的肥效对比试验，首先对该块土壤进行成分分析、有害及有益菌群分析，确定复合微生物菌剂的种类，将复合微生物菌种接入本发明所述的复合微生物菌剂的液体培养基上，通入无菌空气，30℃恒温培养5天，每毫升中的有效活菌数（cfu）≥2亿，复合菌剂中每一种有效微生物的数量不少于0.01亿/毫升，做成苹果专用液体微生物菌剂，将传统化学肥料+苹果专用液体微生物菌剂作为试验组，将传统化学肥料作为对照组，肥效对比试验。通过本试验，该液体微生物菌剂在苹果上增产效果明显，较对照组相比，亩增产苹果340斤，增产率为11.0%，通过方差分析后达到极显著的增产水平。如果按苹果保守价3.5元/斤计算，多收益1190元，因此，在苹果上可以大面积推广使用。

试验二、在霍州市什林镇退沙村的番茄上进行了正规的肥效对比试验，首先对该块土壤进行成分分析、有害及有益菌群分析，确定复合微生物菌剂的种类，将复合微生物菌种接入本发明所述的复合微生物菌剂的液体培养基上，通入无菌空气，30℃恒温培养5天，每毫升中的有效活菌数（cfu）≥2亿，复合菌剂中每一种有效微生物的数量不少于0.01亿/毫升，做成番茄专用液体微生物菌剂，将传统化学肥料+番茄专用液体微生物菌剂作为试验组，将传统化学肥料作为对照组，肥效对比试验。通过本试验，该液体微生物菌剂在番茄上增产效果明显，较对照组相比，亩增产番茄490斤，增产率为10.5%，通过方差分析后达到极显著的增产水平。如果按番茄保守价1.5元/斤计算，多收益735元，因此，在番茄上可以大面积推广使用。

试验三、在霍州市大张镇贾村的玉米上进行了正规的肥效对比试验，首先对该块土壤进行成分分析、有害及有益菌群分析，确定复合微生物菌剂的种类，将复合微生物菌种接入本发明所述的复合微生物菌剂的液体培养基上，通入无菌空气，30℃恒温培养5天，每毫升中的有效活菌数（cfu）≥2亿，复合菌剂中每一种有效微生物的数量不少于0.01亿/毫升，做成玉米专用液体微生物菌剂，将传统化学肥料+玉米专用液体微生物菌剂作为试验组，将传统化学肥料作为对照组，肥效对比试验。通过本试验，该液体微生物菌剂在苹果上增产效果明显，较对照组相比，亩增产玉米70斤，增产率为10.3%，通过方差分析后达到极显著的增产水平。如果按玉米保守价1.2元/斤计算，多收益84元，因此，在玉米上可以大面积推广使用。

此外，本发明还作了以下试验研究，使用本发明所述液体培养基，按1%的比例，加入枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、细黄链霉菌、酿酒酵母、米曲霉，通入无菌空气，30℃恒温培养5天，做成液体微生物菌剂，然后进行以下对比试验：

1、实验材料：油料作物油葵，品种矮大头567。

试验地点：山西省临汾市魏村镇和村

对照组：正常施肥、浇水；

试验组：正常施肥，液体微生物菌剂随浇水冲施到试验地中；

分析指标：油葵盘直径、油葵盘饱满度、千粒重等指标；

结果表明：见下表

2、实验材料：粮食作物玉米，品种先玉335、浚单20；

试验地点：山西省临汾市洪洞县景村；山西省运城市新绛县北张镇北杜坞村；

对照组：正常施肥、浇水；

试验组：正常施肥，液体微生物菌剂随浇水冲施到试验地中；

分析指标：千粒重（g）；

结果表明：见下表

具体实施方式

实施例1：每份为1千克

一种复合微生物菌剂的液体培养基，由下列原料制成：食用红糖62千克、黑豆5千克、黑面5千克、食盐2千克、氯化钴0.02千克、硫酸铵5千克、皮胶5千克、磷酸二氢钾0.5千克、磷酸氢二钾1千克、复合氨基酸粉4千克、熟石灰2千克、复合维生素0.5千克、硫酸镁0.5千克。

制备所述复合微生物菌剂的液体培养基的方法，包括以下步骤：（1）将黑豆温水浸泡后磨成豆浆，150目过滤，滤去豆渣；（2）食用红糖、食盐、硫酸铵、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、复合氨基酸粉、氯化钴用冷水溶解；（3）皮胶用100℃热水溶解，充分搅拌、溶化；（4）黑面用冷水化开，充分搅拌均匀；（5）熟石灰用冷水溶解；将上述溶液依次加入到密闭的容器中，121℃连续灭菌1h，待冷却至室温后，无菌操作下，加入复合维生素的水溶液，充分搅拌均匀，制成复合微生物菌剂的液体培养基。使用本发明所述液体培养基，按1%的比例，加入适合农作物生长的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、细黄链霉菌、酿酒酵母，通入无菌空气，30℃恒温培养5天，制成液体微生物菌剂。每毫升中的有效活菌数（cfu）≥2亿，复合菌剂中每一种有效微生物的数量为0.02亿/毫升。该液体微生物菌剂可用于上述试验一。

实施例2：每份为1克

一种复合微生物菌剂的液体培养基，由下列原料制成：食用红糖68克、黑豆6克、黑面6克、食盐1克、氯化钴0.01克、硫酸铵6克、皮胶4克、磷酸二氢钾1克、磷酸氢二钾0.5克、复合氨基酸粉5克、熟石灰3克、复合维生素1克、硫酸镁1克。

制备所述复合微生物菌剂的液体培养基的方法，包括以下步骤：（1）将黑豆温水浸泡后磨成豆浆，150目过滤，滤去豆渣；（2）食用红糖、食盐、硫酸铵、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、复合氨基酸粉、氯化钴用冷水溶解；（3）皮胶用100℃热水溶解，充分搅拌、溶化；（4）黑面用冷水化开，充分搅拌均匀；（5）熟石灰用冷水溶解；将上述溶液依次加入到密闭的容器中，121℃连续灭菌1h，待冷却至室温后，无菌操作下，加入复合维生素的水溶液，充分搅拌均匀，制成复合微生物菌剂的液体培养基。使用本发明所述液体培养基，按1%的比例，加入适合农作物生长的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、细黄链霉菌、酿酒酵母、米曲霉，通入无菌空气，30℃恒温培养5天，制成液体微生物菌剂。每毫升中的有效活菌数（cfu）≥2亿，复合菌剂中每一种有效微生物的数量为0.05亿/毫升。该液体微生物菌剂可用于上述试验二。

实施例3：每份为1公斤

一种复合微生物菌剂的液体培养基，由下列原料制成：食用红糖65公斤、黑豆5.5公斤、黑面5.5公斤、食盐1公斤、氯化钴0.01公斤、硫酸铵5.5公斤、皮胶4.5公斤、磷酸二氢钾0.8公斤、磷酸氢二钾0.6公斤、复合氨基酸粉5公斤、熟石灰2.5公斤、复合维生素0.9公斤、硫酸镁0.7公斤。

制备所述复合微生物菌剂的液体培养基的方法，包括以下步骤：（1）将黑豆温水浸泡后磨成豆浆，150目过滤，滤去豆渣；（2）食用红糖、食盐、硫酸铵、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、复合氨基酸粉、氯化钴用冷水溶解；（3）皮胶用100℃热水溶解，充分搅拌、溶化；（4）黑面用冷水化开，充分搅拌均匀；（5）熟石灰用冷水溶解；将上述溶液依次加入到密闭的容器中，121℃连续灭菌1h，待冷却至室温后，无菌操作下，加入复合维生素的水溶液，充分搅拌均匀，制成复合微生物菌剂的液体培养基。使用本发明所述液体培养基，按1%的比例，加入适合农作物生长的球形芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、金霉素链霉菌、放线菌X、链霉菌通入无菌空气，30℃恒温培养5天，制成液体微生物菌剂。每毫升中的有效活菌数（cfu）≥2亿，复合菌剂中每一种有效微生物的数量为0.04亿/毫升。该液体微生物菌剂可用于上述试验三。

Claims (2)

1.一种复合微生物菌剂的液体培养基，其特征是由下列重量份数的原料制成：

食用红糖62~68份、黑豆5~6份、黑面5~6份、食盐1~2份、氯化钴0.01~0.02份、硫酸铵5~6份、皮胶4~5份、磷酸二氢钾0.5~1份、磷酸氢二钾0.5~1份、复合氨基酸粉4~5份、熟石灰2~3份、复合维生素0.5~1份、硫酸镁0.5~1份。

2.一种制备如权利要求1所述复合微生物菌剂的液体培养基的方法，其特征是包括以下步骤：

（1）将黑豆温水浸泡后磨成豆浆，150目过滤，滤去豆渣；

（2）食用红糖、食盐、硫酸铵、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、复合氨基酸粉、氯化钴用冷水溶解；

（3）皮胶用100℃热水溶解，充分搅拌、溶化；

（4）黑面用冷水化开，充分搅拌均匀；

（5）熟石灰用冷水溶解；

将上述溶液依次加入到密闭的容器中，121℃连续灭菌1h，待冷却至室温后，无菌操作下，加入复合维生素的水溶液，充分搅拌均匀，制成复合微生物菌剂的液体培养基。