CN104844721A - 一种茶树菇多糖的提取分离方法 - Google Patents

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本发明属于多糖的提取分离领域，公开了一种茶树菇多糖的提取分离方法，所述的茶树菇多糖的提取分离方法步骤如下：（1）将新鲜的茶树菇切成片后进行预冷，待茶树菇冻结后再进行冷冻干燥；（2）冷冻干燥后将茶树菇片进行迅速粉碎，粉碎后往茶树菇粉中加入乙醇水溶液，进行超声搅拌提取，提取后将提取液进行离心，离心后取上清液；（3）将上清液进行浓缩，浓缩至重量为茶树菇重量的2倍；（4）将茶树菇浓缩液进行膜过滤，通过分子量为1000的膜，收集截留液；（5）截留液通过分子量为200的膜，收集截留液；（6）浓缩至无溶剂；（7）将浓缩物用乙醇进行结晶纯化，过滤，过滤后自然干燥，为茶树菇多糖。

Description

一种茶树菇多糖的提取分离方法
技术领域
本发明属于提取分离领域，涉及一种多糖的提取分离方法，尤其是涉及一种茶树菇多糖的提取分离方法。
背景技术
 多糖(Polysaccharide)是由单糖之间脱水形成糖苷键，并以糖苷键线性或分枝连接而成的链状聚合物。一般将多于20个糖基的糖链则称为多糖。近年来，糖类结构测定和生物活性研究取得了明显的进展，大量实验事实揭示糖类是重要信息分子，参与许多生理和病理过程，有关研究已渗诱到生物学各个领域。研究表明，中药多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血糖等多种功能。多糖可以促进抗体的生成。文献报道香菇多糖能增加人体中外周单核细胞抗体的产生，裂褶菌多糖能促进患者脾脏形成抗体的细胞增加。云芝多糖能使抗体下降的患者产生抗体，使其免疫能力恢复到正常水平。目前多糖的提取方法主要有水提醇沉法、膜过滤法、柱层析法、微波提取法等多种方法。
发明内容
要解决的技术问题：茶树菇多糖作为一种活性成分，目前关于茶树菇多糖的分离纯化方法也较多，但是多数方法纯化得到的多糖纯度较低，纯度能够满足需要的茶树菇多糖的得率又较低，不能在保证得率的同时还能提高茶树菇多糖的纯度，因此需要一种新的茶树菇多糖的提取分离方法。
技术方案：针对上述问题，本发明公开了一种茶树菇多糖的提取分离方法，所述的茶树菇多糖的提取分离方法步骤如下：（1）将新鲜的茶树菇切成片后进行预冷，待茶树菇冻结后再进行冷冻干燥；（2）冷冻干燥后将茶树菇片进行迅速粉碎，粉碎后往茶树菇粉中加入乙醇水溶液，进行超声搅拌提取，提取后将提取液进行离心，离心后取上清液；（3）将上清液进行浓缩，浓缩至重量为茶树菇重量的2倍；（4）将茶树菇浓缩液进行膜过滤，通过分子量为1000的膜，收集截留液；（5）截留液通过分子量为200的膜，收集截留液；（6）将步骤（5）的截留液浓缩至无溶剂；（7）将浓缩物用乙醇进行结晶纯化，结晶时间为3h，结晶后过滤，过滤后自然干燥，为茶树菇多糖。
优选的，所述的一种茶树菇多糖的提取分离方法，所述的茶树菇多糖的提取分离方法步骤如下：
（1）将新鲜的茶树菇切成片后进行预冷，待茶树菇冻结后再进行冷冻干燥，冷冻干燥温度为-20℃，冷冻干燥时间为12h-20h；（2）冷冻干燥后将茶树菇片进行迅速粉碎，粉碎后往茶树菇粉中加入20wt%-30wt%的乙醇水溶液，乙醇水溶液与茶树菇的重量比为5:1-10:1，进行超声搅拌提取，超声功率为200w-400w，搅拌转速为100rpm，提取时间为2h-5h，提取温度为45℃，提取后将提取液进行离心，离线转速为3500rpm，离心后取上清液；（3）将上清液进行浓缩，浓缩至重量为茶树菇重量的2倍；（4）将茶树菇浓缩液进行膜过滤，通过分子量为1000的膜，收集截留液；（5）截留液通过分子量为200的膜，收集截留液；（6）将步骤（5）
的截留液浓缩至无溶剂；（7）将浓缩物用乙醇进行结晶纯化，乙醇重量为浓缩物重量的3-5倍，结晶温度为5℃，结晶时间为3h，结晶后过滤，过滤后自然干燥，为茶树菇多糖。
优选的，所述的一种茶树菇多糖的提取分离方法中乙醇重量为浓缩物重量的4倍。
优选的，所述的一种茶树菇多糖的提取分离方法中超声功率为300w。
优选的，所述的一种茶树菇多糖的提取分离方法中乙醇水溶液与茶树菇的重量比为7:1。
优选的，所述的一种茶树菇多糖的提取分离方法中乙醇水溶液浓度为20wt%。
优选的，所述的一种茶树菇多糖的提取分离方法中提取时间为4h。
有益效果：本发明的茶树菇多糖的提取分离方法，对茶树菇的提取工艺和分离工艺进行了改良，采用乙醇水溶液对茶树菇多糖进行提取，在保证提取率的同时还可以进行除杂，另外通过膜过滤对茶树菇多糖进行了进一步分离，最后通过乙醇结晶纯化的方式，在保证得率的同时还提高了制备得到的茶树菇多糖的纯度。
具体实施方式
实施例1
（1）将新鲜的茶树菇切成片后进行预冷，待茶树菇冻结后再进行冷冻干燥，冷冻干燥温度为-20℃，冷冻干燥时间为20h；（2）冷冻干燥后将茶树菇片进行迅速粉碎，粉碎后往茶树菇粉中加入20wt%的乙醇水溶液，乙醇水溶液与茶树菇的重量比为7:1，进行超声搅拌提取，超声功率为300w，搅拌转速为100rpm，提取时间为4h，提取温度为45℃，提取后将提取液进行离心，离线转速为3500rpm，离心后取上清液；（3）将上清液进行浓缩，浓缩至重量为茶树菇重量的2倍；（4）将茶树菇浓缩液进行膜过滤，通过分子量为1000的膜，收集截留液；（5）截留液通过分子量为200的膜，收集截留液；（6）将步骤（5）的截留液浓缩至无溶剂；（7）将浓缩物用乙醇进行结晶纯化，乙醇重量为浓缩物重量的4倍，结晶温度为5℃，结晶时间为3h，结晶后过滤，过滤后自然干燥，为茶树菇多糖。
实施例1最终得到的茶树菇多糖纯度为95%，最终得率为73%。
实施例2
（1）将新鲜的茶树菇切成片后进行预冷，待茶树菇冻结后再进行冷冻干燥，冷冻干燥温度为-20℃，冷冻干燥时间为20h；（2）冷冻干燥后将茶树菇片进行迅速粉碎，粉碎后往茶树菇粉中加入20wt%的乙醇水溶液，乙醇水溶液与茶树菇的重量比为10:1，进行超声搅拌提取，超声功率为400w，搅拌转速为100rpm，提取时间为2h，提取温度为45℃，提取后将提取液进行离心，离线转速为3500rpm，离心后取上清液；（3）将上清液进行浓缩，浓缩至重量为茶树菇重量的2倍；（4）将茶树菇浓缩液进行膜过滤，通过分子量为1000的膜，收集截留液；（5）截留液通过分子量为200的膜，收集截留液；（6）将步骤（5）的截留液浓缩至无溶剂；（7）将浓缩物用乙醇进行结晶纯化，乙醇重量为浓缩物重量的3倍，结晶温度为5℃，结晶时间为3h，结晶后过滤，过滤后自然干燥，为茶树菇多糖。
实施例1最终得到的茶树菇多糖纯度为89%，最终得率为77%。
实施例3
（1）将新鲜的茶树菇切成片后进行预冷，待茶树菇冻结后再进行冷冻干燥，冷冻干燥温度为-20℃，冷冻干燥时间为12h；（2）冷冻干燥后将茶树菇片进行迅速粉碎，粉碎后往茶树菇粉中加入30wt%的乙醇水溶液，乙醇水溶液与茶树菇的重量比为5:1，进行超声搅拌提取，超声功率为200w，搅拌转速为100rpm，提取时间为5h，提取温度为45℃，提取后将提取液进行离心，离线转速为3500rpm，离心后取上清液；（3）将上清液进行浓缩，浓缩至重量为茶树菇重量的2倍；（4）将茶树菇浓缩液进行膜过滤，通过分子量为1000的膜，收集截留液；（5）截留液通过分子量为200的膜，收集截留液；（6）将步骤（5）的截留液浓缩至无溶剂；（7）将浓缩物用乙醇进行结晶纯化，乙醇重量为浓缩物重量的5倍，结晶温度为5℃，结晶时间为3h，结晶后过滤，过滤后自然干燥，为茶树菇多糖。
实施例1最终得到的茶树菇多糖纯度为91%，最终得率为76%。

Claims (7)

1.一种茶树菇多糖的提取分离方法，其特征在于，所述的茶树菇多糖的提取分离方法步骤如下：（1）将新鲜的茶树菇切成片后进行预冷，待茶树菇冻结后再进行冷冻干燥；（2）冷冻干燥后将茶树菇片进行迅速粉碎，粉碎后往茶树菇粉中加入乙醇水溶液，进行超声搅拌提取，提取后将提取液进行离心，离心后取上清液；（3）将上清液进行浓缩，浓缩至重量为茶树菇重量的2倍；（4）将茶树菇浓缩液进行膜过滤，通过分子量为1000的膜，收集截留液；（5）截留液通过分子量为200的膜，收集截留液；（6）将步骤（5）的截留液浓缩至无溶剂；（7）将浓缩物用乙醇进行结晶纯化，结晶时间为3h，结晶后过滤，过滤后自然干燥，为茶树菇多糖。
2.根据权利要求1所述的一种茶树菇多糖的提取分离方法，其特征在于，所述的茶树菇多糖的提取分离方法步骤如下：
（1）将新鲜的茶树菇切成片后进行预冷，待茶树菇冻结后再进行冷冻干燥，冷冻干燥温度为-20℃，冷冻干燥时间为12h-20h；（2）冷冻干燥后将茶树菇片进行迅速粉碎，粉碎后往茶树菇粉中加入20wt%-30wt%的乙醇水溶液，乙醇水溶液与茶树菇的重量比为5:1-10:1，进行超声搅拌提取，超声功率为200w-400w，搅拌转速为100rpm，提取时间为2h-5h，提取温度为45℃，提取后将提取液进行离心，离线转速为3500rpm，离心后取上清液；（3）将上清液进行浓缩，浓缩至重量为茶树菇重量的2倍；（4）将茶树菇浓缩液进行膜过滤，通过分子量为1000的膜，收集截留液；（5）截留液通过分子量为200的膜，收集截留液；（6）将步骤（5）
的截留液浓缩至无溶剂；（7）将浓缩物用乙醇进行结晶纯化，乙醇重量为浓缩物重量的3-5倍，结晶温度为5℃，结晶时间为3h，结晶后过滤，过滤后自然干燥，为茶树菇多糖。
3. 根据权利要求2所述的一种茶树菇多糖的提取分离方法，其特征在于，所述的茶树菇多糖的提取分离方法中乙醇重量为浓缩物重量的4倍。
4.根据权利要求2所述的一种茶树菇多糖的提取分离方法，其特征在于，所述的茶树菇多糖的提取分离方法中超声功率为300w。
5.根据权利要求2所述的一种茶树菇多糖的提取分离方法，其特征在于，所述的茶树菇多糖的提取分离方法中乙醇水溶液与茶树菇的重量比为7:1。
6. 根据权利要求2所述的一种茶树菇多糖的提取分离方法，其特征在于，所述的茶树菇多糖的提取分离方法中乙醇水溶液浓度为20wt%。
7. 根据权利要求2所述的一种茶树菇多糖的提取分离方法，其特征在于，所述的茶树菇多糖的提取分离方法中提取时间为4h。
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