CN104777108A - 一种叶绿素含量的检测装置及方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种叶绿素含量的检测装置及方法,该方法包括:利用不同浓度的叶绿素溶液,建立叶绿素检测模型;采用两个波长的入射光对待测样本进行检测,获取所述待测样本的叶绿素的吸光度;将所述待测样本的叶绿素的吸光度代入所述叶绿素检测模型,获取所述待测样本的叶绿素的浓度。该方法分别用波长为645nm和663nm的光照射样品,通过光电传感器测量透射光的强度可以得到对应波长下的吸光度值,从而计算出叶绿素的相对浓度值。主要优点是:分析速度快、测量范围广、样品准备简单、不消耗样品、没有化学污染等。
Description
技术领域
本发明涉及光谱检测技术领域,具体涉及一种叶绿素含量的检测装置及方法。
背景技术
俗话说:“养鱼先养水”。要想取得水产养殖成功,最关键的是将水质调控做到位。而水产养殖中水质调控的关键是:溶解氧、透明度、酸碱度等。其中溶氧量是水产养殖动物的生命元素,叶绿素含量决定着水体中的溶氧量,叶绿素是藻类的重要组成成分,叶绿素的含量也能够在一定程度上反映水质状况。
用分光光度计721测量水体叶绿素含量的方法属于取样分析测量法,通常的做法是现场采取水样后带回实验室进行分析测定,需要经过采样、过滤、萃取、测定等几个步骤。这样的测定方法检测精度较高,而且能分析组分含量。但是样品的预处理过程复杂,极易在操作过程中带来二次污染;样品从海上或者湖泊带回实验室需要一定的时间,而叶绿素在微生物的作用下,可能会进行分解,难以准确反映在生态***中叶绿素的真实情况。
以YSI 6025型叶绿素传感器为核心的叶绿素监测***。YSI 6025型叶绿素传感器采用活体测定方法,即利用了叶绿素荧光响应的特征,在特定的波长光照下释放出荧光,荧光强度正比于叶绿素浓度。由于激发产生的荧光强度十分微弱,因此该检测方法在实际检测中,对环境要求十分高,容易受到环境光的干扰。同时由于水样杂质的不确定性,导致检测结果也会受到一定程度的干扰。
发明内容
针对现有技术中的缺陷,本发明提供了一种叶绿素含量的检测装置及方法,该方法分析速度快、测量范围广。
第一方面,本发明提供一种叶绿素含量的检测方法,包括:
利用不同浓度的叶绿素溶液,建立叶绿素检测模型;
采用两个波长的入射光对待测样本进行检测,获取所述待测样本的叶绿素的吸光度;
将所述待测样本的叶绿素的吸光度代入所述叶绿素检测模型,获取所述待测样本的叶绿素的浓度。
可选的,所述利用不同浓度的叶绿素溶液,建立叶绿素检测模型,包括:
利用两个波长下的光对不同浓度的标准叶绿素溶液进行检测;
分别计算所述两个波长的光对应的吸光度值和叶绿素浓度;
根据所述吸光度值和所述叶绿素浓度,建立叶绿素检测模型。
可选的,所述两个波长为663nm和645nm。
第二方面,本发明还提供了一种叶绿素含量的检测装置,包括:模型建立模块、光电探测模块和检测模块,所述模型建立模块设置于所述检测模块中,所述光电探测模块与所述检测模块相连;
所述模型建立模块,用于利用不同浓度的叶绿素溶液,建立叶绿素检测模型;
所述光电探测模块,用于采用两个波长的入射光对待测样本进行检测,获取所述待测样本的叶绿素的吸光度;
所述检测模块,用于将所述待测样本的叶绿素的吸光度代入所述叶绿素检测模型,获取所述待测样本的叶绿素的浓度。
可选的,所述模型建立模块,具体包括:
利用两个波长下的光对不同浓度的标准叶绿素溶液进行检测;
分别计算所述两个波长的光对应的吸光度值和叶绿素浓度;
根据所述吸光度值和所述叶绿素浓度,建立叶绿素检测模型。
可选的,所述两个波长为663nm和645nm。
可选的,所述检测模块包括:电压转换电路、光源稳流电路、I-U转换电路、滤波放大电路、A/D转换电路、显示电路和存储电路。
可选的,所述电压转换电路,用于通过电压转换给所述检测模块供电。
可选的,所述光源稳流电路,用于给光源供电。
可选的,所述存储电路,用于存储所述待测样本的叶绿素的吸光度。
由上述技术方案可知,本发明提供的一种叶绿素含量的检测装置及方法,该方法分别用波长为645nm和663nm的光照射样品,通过光电传感器测量透射光的强度可以得到对应波长下的吸光度值,从而计算出叶绿素的相对浓度值。主要优点是:分析速度快、测量范围广、样品准备简单、不消耗样品、没有化学污染等。
附图说明
图1为本发明一实施例提供的一种叶绿素含量的检测方法的流程示意图;
图2为本发明一实施例提供的检测装置结构示意图;
图3为本发明另一实施例提供的光路结构设计示意图;
图4为本发明一实施例提供的电压转换电路示意图;
图5为本发明一实施例提供的光源稳流供电电路示意图;
图6为本发明一实施例提供的I-U转换电路示意图;
图7为本发明一实施例提供的滤波放大电路示意图;
图8为本发明一实施例提供的A/D转换电路示意图;
图9为本发明一实施例提供的显示电路示意图;
图10为本发明一实施例提供的串口电路和同步U盘存储模块示意图;
图11为本发明一实施例提供的电信号处理过程示意图;
图12为本发明一实施例检测装置检测的流程示意图;
图13为本发明一实施例提供的测量流程示意图;
图14为本发明一实施例提供的U盘存储流程示意图;
具体实施方式
下面结合附图,对发明的具体实施方式作进一步描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案,而不能以此来限制本发明的保护范围。
图1示出了本发明实施例提供的一种叶绿素含量的检测方法的流程示意图,如图1所示,该方法包括如下步骤:
101、利用不同浓度的叶绿素溶液,建立叶绿素检测模型;
102、采用两个波长的入射光对待测样本进行检测,获取所述待测样本的叶绿素的吸光度;所述两个波长为663nm和645nm。
103、将所述待测样本的叶绿素的吸光度代入所述叶绿素检测模型,获取所述待测样本的叶绿素的浓度。
上述方法分别用波长为645nm和663nm的光照射样品,通过光电传感器测量透射光的强度可以得到对应波长下的吸光度值,从而计算出叶绿素的相对浓度值。主要优点是:分析速度快、测量范围广、样品准备简单、不消耗样品、没有化学污染等。
上述步骤101中所述利用不同浓度的叶绿素溶液,建立叶绿素检测模型,包括:
1011、利用两个波长下的光对不同浓度的标准叶绿素溶液进行检测;
1012、分别计算所述两个波长的光对应的吸光度值和叶绿素浓度;
1013、根据所述吸光度值和所述叶绿素浓度,建立叶绿素检测模型。
上述方法具有如下优点:
(1)使用透射原理,提高了测定效率
传统的叶绿素检测方法往往需要进行复杂的样本预处理,加上仪器携带不方便导致样本从采集到测量要经过很长一段时间,造成叶绿素的分解,影响了测量精度。本发明无需样本预处理,可以现采集现测量。保证了样本的完整性,提高了测量精度,并且安全无污染。
利用透射法原理进行叶绿素含量检测,能够避免采样、预处理过程中可能出现的叶绿素降解、其他物质污染等现象,从而保证了叶绿素浓度检测的准确性。由于荧光光强较弱,容易受到检测时环境光的干扰,因此使用透射法检测原理能够简化仪器的光学结构,同时降低仪器在使用时的环境要求,从而降低仪器的开发、制作和使用成本,对仪器的推广和使用更加有利。
(2)提供了可靠的高精度水体叶绿素含量检测模型
为了准确预测水体叶绿素含量,本发明直接建立并使用分光光度原理中的叶绿素含量测定模型。首先利用不同浓度的标准叶绿素溶液,建立标准叶绿素检测模型。利用两个波长下的光对不同浓度的标准叶绿素溶液进行检测,计算出对应的吸光度值。之后利用测得的吸光度值和对应的叶绿素浓度,建立高精度叶绿素浓度的检测模型(R2=0.84),并将该检测模型直接嵌入到仪器中。测量时首先利用叶绿素标准液对模型进行标定和校正,然后使用两个不同波长的入射光对均匀样本进行测定,利用光学结构和独立电路分别测量两个波长下光的透射率,最终根据嵌入的水体叶绿素浓度检测模型计算叶绿素含量。
(3)从结构上保障检测的准确性
为了提高检测仪的精确度,减少水中微粒运动对结果的影响,采用上下两路分别采集的方式测量叶绿素含量,通过求平均值得出最后叶绿素含量。这种测量方法将水样中微生物不均匀分布和测量过程中微粒沉淀对叶绿素含量的影响降到最低,提高了测量精度。
(4)提供了便利的数据支持工具
本发明是用于实时测量使用的,为了保存历史记录和增加存储量,提供了U盘同步存储功能,满足了多次测量的需要,方便了日后数据的调用和水质分布图的实现。
检测水体叶绿素含量是为了更好地指导水产养殖人员对水质进行调控,提高产量。
图2示出了本发明实施例提供的一种叶绿素含量的检测装置,包括:模型建立模块、光电探测模块和检测模块,所述模型建立模块设置于所述检测模块中,所述光电探测模块与所述检测模块相连;
所述模型建立模块,用于利用不同浓度的叶绿素溶液,建立叶绿素检测模型;
所述光电探测模块,用于采用两个波长的入射光对待测样本进行检测,获取所述待测样本的叶绿素的吸光度;所述两个波长为663nm和645nm。
所述检测模块,用于将所述待测样本的叶绿素的吸光度代入所述叶绿素检测模型,获取所述待测样本的叶绿素的浓度。
所述模型建立模块,具体包括:
利用两个波长下的光对不同浓度的标准叶绿素溶液进行检测;
分别计算所述两个波长的光对应的吸光度值和叶绿素浓度;
根据所述吸光度值和所述叶绿素浓度,建立叶绿素检测模型。
根据Lambert-Beer定律,在一定条件下某有色溶液的吸光度D与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即:D=aCL式中,a为比例常数。如果溶液中含有数种吸光物质,则此混合液在某一波长下的吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和,这就是吸光度的加和性。若测定叶绿素含量,只需测定该水样在特定波长下的吸光度A,并根据叶绿素a、b在该波长下的比吸收系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰,所用单色光的波长选择叶绿素在红光处的最大吸收峰。已知叶绿素a、b在红光区的最大吸收峰分别为663nm和645nm,因选取敏感波段为663nm和645nm。
对于两个波段下的吸光度计算公式为A=lg[Is(λ)/Iz(λ)],其中A为吸光度,Is(λ)为标准液(蒸馏水)的透射值,Iz(λ)为水样的透射。已知叶绿素a、b在红光区的最大吸收峰分别为663nm和645nm,又知在波长663nm下,叶绿素a、b在该溶液中的比吸收系数分别为82.04和9.27,在波长645nm下分别为16.75和45.6,根据加和性原则列出以下关系式:
A663=82.04Ca+9.27Cb A645=16.75Ca+45.6Cb
式中A663和A645分别为叶绿素溶液在波长663nm和645nm时的吸光度,Ca、Cb分别为叶绿素a、b的浓度,单位为mg/L。解方程组可得:
Ca=12.72A663-2.59A645 Cb=22.88A645-4.67A663
式中Ca、Cb分别为叶绿素a、b的浓度,单位为mg/L。将Ca和Cb相加即得叶绿素总浓度(CT,mg/L):CT=Ca+Cb=20.29A645+8.05A663
将模型嵌入单片机中即位于检测装置中,以供测量时直接调用。
检测装置由光学部分和控制部分组成。光学部分包括2个波段的4个LED光源发射装置,由单片机控制的光源驱动电路进行供电,经过准直透镜进行准直后垂直入射到水中,由4个光电探测器进行相应的采集;控制部分包括放大电路,滤波电路,A/D转换电路,单片机控制电路,液晶显示电路以及同步U盘存储电路。检测仪利用单片机控制光源依次点亮,光源发出的单波段光信号经过准直透镜后垂直入射到样本中进行测量,经过样本的吸收、散射和透射,被对应的光电探测器进行采集,光电探测器把光信号转化为电信号。经光电探测器转换成的电信号经过放大,滤波,A/D转换等处理后由89S52单片机暂存,并与依次接收进来的光信号计算出吸光度后一起代入水体叶绿素含量检测模型进行计算,计算后的结果由128*64液晶屏输出,同时可实现U盘存储等功能。图2是***总体结构设计图。
所述检测模块包括:电压转换电路、光源稳流电路、I-U转换电路、滤波放大电路、A/D转换电路、显示电路和存储电路。
传感器主要负责光源的驱动,光信号的采集,光电转化以及电信号的处理、放大、采集、发送等工作。图2为传感器的总体结构框图。下面将分别从机械结构、硬件电路设计、软件电路设计等方面作详细介绍。
A、传感器机械结构设计
a、传感器原理设计
叶绿素是藻类的重要组成成分之一,是进行藻类光和作用的重要因子。叶绿素含量的高低与水环境质量有关,直接决定了水体的含氧量高低。叶绿素具有特殊的光学特性。绝大多数的叶绿素a和全部的叶绿素b具有吸收光能的作用,但只有极少数特殊状态的叶绿素a分子,才具有将光能转换为电能的作用。因此我们根据叶绿素对可见光谱的吸收,只需利用探测仪测定该样本在两个特定波长下的吸光度A,并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的比吸收系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰,所用单色光的波长选择叶绿素在红光处的最大吸收峰。分别求出叶绿素a、b的浓度后相加即得叶绿素总浓度。
b、光路***设计
光路***主要是依靠准直透镜来完成光信号的传输,由光电探测器完成光信号的接收,主要由两部分组成,光信号传输通路和接收部分。
为了检测的准确性,必须选择合适的光源及其采集方式。根据低功耗,窄带宽,便携式的原则和检测仪的原理,选择2个不同波段的发光二极管作为入射光源,准直透镜作为传输通路。光路设计如图3所示,发光二极管经准直透镜后垂直入射到样品瓶的水样中,经过水样的吸收、散射和透射后被相应的传感器采集以完成光信号到电信号的转变。本检测仪上层和下层为同样的结构。
单片机控制依次点亮LED灯1,2,3,4,分别由探测器1,2,3,4采集透射信号,每次采集完后相应的灯灭后再点亮下一盏灯。
c、传感器硬件电路设计
仪器由一个9V电池经电源电路转换后给各个电路供电,四个LED光源由稳流源单独供电。光信号转变为电信号之后,需要一系列的硬件电路进行电信号处理工作,主要包括I—U转换电路,滤波放大电路,A/D转换电路,液晶显示电路和U盘存储电路。
(1)电压转换电路和光源稳流电路
便携式检测仪所用电源为9伏干电池,而电路中各个芯片的工作电压值为5伏,这需要电源转换电路来实现。采用L7805芯片用来将电池的9V电压转化为5V芯片供电电压,图4为电压转换电路图。所述电压转换电路,用于通过电压转换给所述检测模块供电。
由于外界电源不稳定会引起光源光强和光谱波动,应该对LED光源采用恒流源电路供电。如图5,用LM317构成恒流供电电路。其中LM317输入端接地,根据输出端与控制端之间形成1.25V稳定电压的原理,形成稳流源电路为LED提供稳流源。所述光源稳流电路,用于给光源供电。
(2)I-U转换电路
由于本***所采用的信号是由发光二极管发出,由准直透镜传输,信号比较微弱,再经过InGaAs光电探测器转换后得到的电信号更加微弱,此外,在这个过程中还夹杂了各种噪声的干扰,因此选用了高输入阻抗的集成运算放大器CA3140,图6是由CA3140实现的I-U转换电路,实现I-U转换的同时,实现了微弱信号的一次放大功能。
(3)滤波放大电路
微弱信号的二次放大功能是由LM358实现的,通过调节R9电位器的阻值将信号放大了380倍,通过R-C组成的一阶低通滤波器将信号送入AD7705进行A/D转化。
(4)A/D转换电路
两次放大的模拟信号通过图8的A/D转换电路变为数字信号,送入89S52的单片机***进行处理,A/D转换电路主要由一款16位分辨率,2通道全差分模拟输入的三线串行输入的模数转换器AD7705芯片实现。
AD7705采用SP I Q SP I兼容的三线串行接口,能够方便地与微控制器连接,也比并行接口方式大大节省了CPU的I O口。AD7705是完整的16位AD转换器。它采用了Σ-Δ技术,可以获得16位无误码数据输出。这一点非常符合对分辨率要求较高但对转换数字要求不高的应用,通过外接晶体振荡器、精密基准源和少量去耦电容,即可连续进行A D转换。通过与REF195相连可以使基准电压提高到5V,达到使用要求。
(5)液晶显示电路
液晶显示电路采用QC12864B汉字图形点阵液晶显示模块,可显示汉字和图形,内置8192个中文汉字(16*16点阵)、128个字符(8*16点阵)及62*256点阵显示RAM64点阵,点大小0.48*0.48mm2,点间距0.04mm。本电路设计采用串行接口,通过与单片机连接,实现有效控制液晶屏的正确显示。图9为液晶显示电路图。
(6)同步U盘存储电路
所述存储电路,用于存储所述待测样本的叶绿素的吸光度。U盘存储选用的是南京沁恒电子公司生产的U盘模块作为存储设备,通过MAX232芯片实现单片机和存储模块之间的通信。图10为串口电路和同步U盘存储模块。
经光电探测器转换之后的电流信号I0,通过I-U转换电路,电流信号I0转变为电压信号U0,通过由LM358组成的放大电路,电压信号U0变为U1,此时信号中包含一些噪声信号△U,通过由RC组成的一阶低通滤波器,去除噪声信号△U,得到U2(U1-△U)。
模拟信号U2经过A/D转换电路变为数字信号U3,数字信号U3送入单片机89S52处理器中进行处理,最终结果显示在12864B液晶屏上,同时通过U盘存储模块存入U盘中。图11为电信号处理过程。
C、运行流程设计
软件程序采用C语言编写,主要实现光源控制功能,键盘识别功能,A/D转换功能,软件滤波功能,数据处理功能,液晶显示功能和U盘存储功能,图为主程序流程图,测量流程图和U盘存储程序流程图。
本发明的操作简单,以下是检测仪详细工作过程和数据处理方法。
1、检测装置工作步骤
第一步,按下【电源】键,打开***电源,液晶显示:“中国农业大学精细农业研究中心水体叶绿素含量检测仪”,表示仪器已经初始化完成,可以正常工作。
第二步,将盛有蒸馏水的采样瓶,放入圆槽中,按下【标定】键,***将依次采集四个光强值,并将其显示在液晶屏上,***将采集到的数据自动通过串口传输保存到U盘中,液晶显示“数据存储中”。数据传输完成后,界面显示“存储完成”。若没有插上U盘或是U盘没有插好,界面会提示“请***U盘”。
第三步,将盛有水样的采样瓶,放入圆槽中,按下【测量】键,***将依次采集四个光强值,并将其显示在液晶屏上,自动保存到U盘中。
第四步,采集到标准溶剂和试验溶剂的光强值之后,***计算其吸光度并根据已有叶绿素含量预测模型,计算出水样的叶绿素含量,显示到液晶屏上并保存到U盘中。
第五步,重新放入样品,按下【测量】键进行测量即可。
2叶绿素水平分布图实现方法
水体叶绿素含量分布图采用VC的方法实现,可以将单点水体叶绿素含量和GPS坐标信息结合,实现单点水体叶绿素含量显示,插值,小区面积测算,小区水体叶绿素含量等值线图生成,为水质调控提供决策依据。
上述装置具有以下优点:
1、实现了叶绿素浓度的原位检测
利用透射法检测原理,省去了叶绿素检测中的采样、预处理、提纯等步骤,同时利用上下两路分别测量求平均的方式,能够有效的实现水体中叶绿素浓度的原位检测。对水产养殖中的水质起到有效的监控和指导作用。
2、实时监控叶绿素浓度的变化
结合上位机软件,能够实时生成水域中不同区域的叶绿素浓度分布图。同时结合其他气象和水文信息,能够有效的预测水体中叶绿素浓度的变化和趋势,从而对水产养殖起到积极的指导作用。
3、实用性强
本发明通过液晶屏幕和上位机软件生成的叶绿素浓度分布图能够直观反映出水体区域内的叶绿素分布,能够有效直观进行水质监控并进行水质调控。能够为水质调控有效的提供决策依据。
本发明的说明书中,说明了大量具体细节。然而,能够理解,本发明的实施例可以在没有这些具体细节的情况下实践。在一些实例中,并未详细示出公知的方法、结构和技术,以便不模糊对本说明书的理解。
最后应说明的是:以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围,其均应涵盖在本发明的权利要求和说明书的范围当中。
Claims (10)
1.一种叶绿素含量的检测方法,其特征在于,包括:
利用不同浓度的叶绿素溶液,建立叶绿素检测模型;
采用两个波长的入射光对待测样本进行检测,获取所述待测样本的叶绿素的吸光度;
将所述待测样本的叶绿素的吸光度代入所述叶绿素检测模型,获取所述待测样本的叶绿素的浓度。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述利用不同浓度的叶绿素溶液,建立叶绿素检测模型,包括:
利用两个波长下的光对不同浓度的标准叶绿素溶液进行检测;
分别计算所述两个波长的光对应的吸光度值和叶绿素浓度;
根据所述吸光度值和所述叶绿素浓度,建立叶绿素检测模型。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述两个波长为663nm和645nm。
4.一种叶绿素含量的检测装置,其特征在于,包括:模型建立模块、光电探测模块和检测模块,所述模型建立模块设置于所述检测模块中,所述光电探测模块与所述检测模块相连;
所述模型建立模块,用于利用不同浓度的叶绿素溶液,建立叶绿素检测模型;
所述光电探测模块,用于采用两个波长的入射光对待测样本进行检测,获取所述待测样本的叶绿素的吸光度;
所述检测模块,用于将所述待测样本的叶绿素的吸光度代入所述叶绿素检测模型,获取所述待测样本的叶绿素的浓度。
5.根据权利要求4所述的装置,其特征在于,所述模型建立模块,具体包括:
利用两个波长下的光对不同浓度的标准叶绿素溶液进行检测;
分别计算所述两个波长的光对应的吸光度值和叶绿素浓度;
根据所述吸光度值和所述叶绿素浓度,建立叶绿素检测模型。
6.根据权利要求4或5所述的装置,其特征在于,所述两个波长为663nm和645nm。
7.根据权利要求4所述的装置,其特征在于,所述检测模块包括:电压转换电路、光源稳流电路、I-U转换电路、滤波放大电路、A/D转换电路、显示电路和存储电路。
8.根据权利要求7所述的装置,其特征在于,所述电压转换电路,用于通过电压转换给所述检测模块供电。
9.根据权利要求7所述的装置,其特征在于,所述光源稳流电路,用于给光源供电。
10.根据权利要求7所述的装置,其特征在于,所述存储电路,用于存储所述待测样本的叶绿素的吸光度。
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