CN104761572B

CN104761572B - 一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐及其制法和应用

Info

Publication number: CN104761572B
Application number: CN201510106974.2A
Authority: CN
Inventors: 叶文才; 陈卫民; 师蕾; 王英; 唐根云; 刘鑫; 董晓; 黄小杰; 张文
Original assignee: Jinan University
Current assignee: Jinan University
Priority date: 2015-03-11
Filing date: 2015-03-11
Publication date: 2017-04-12
Anticipated expiration: 2035-03-11
Also published as: CN104761572A

Abstract

本发明公开了一种一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐及其制法和应用。所述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐具有如式(1)所示的化学结构：式(1)，式中：X是或者S中的一个，其中的R基团是CH₃、C₂H₅、n‑C₃H₇、n‑C₄H₉、n‑C₅H₁₁或者H中的一个；m是0、1、2、3、4、5、6、7、8或者9中的一个；n是0或者1中的一个；式中的数字1、2、3、4、5、6、7和8指示手性中心位置，该位置的构型是R或者S构型中的一种。所述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐可应用于制备治疗神经发育异常、神经损伤、神经退行性疾病和学习记忆障碍的药物。

Description

一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐及其制法和应用

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐及其制法和应用。

背景技术

神经元的早期发育包括一系列形态变化，如神经突起的生长、延伸、轴突和树突的分化和神经突触的成熟等过程(Polleux and Snider,Cold Spring Harb Perspect Biol,2010,2:a001925；Lewis et al.,J Cell Biol,2013,202:837-48)。这些发育过程的精密调控决定了神经元准确的形成联系并组成复杂的神经网络，由此调控我们的学习、记忆、情感等神经活动。在神经退行性疾病和神经损伤等脑疾病中，神经突起的断损、萎缩和神经元死亡是病情发展的主要标志(Medana and Esiri,Brain,2003,126:515-30)。因此，寻找能够有效促进前体细胞向神经元分化以及神经突起生长的药物将是治疗这些疾病的重要手段。对于这些疾病的治疗一般采取的主要方法包括保护神经元在损伤或应激的情况下更好的存活、促进神经元的新生分化和促进神经突起的再生或重新生长、延长，由此使神经元保持或重新形成正常的联系，确保神经网络的稳定性和可塑性。

此外，在神经退行性疾病(如阿尔茨海默症)和情感紊乱(如抑郁症)等疾病中，通常会出现神经突触传递和神经环路构筑的异常，由此导致认知功能和记忆障碍。因此，开发促进认知和记忆的药物亦是治疗这些疾病的关键。神经元之间的传递依赖于相互间形成的一个特殊结构——神经突触。人体中枢神经***中的神经突触分为兴奋性突触和抑制性突触，两种神经突触在数量上的动态平衡对于脑部的信息处理与思维活动十分重要(McAllister,Annu Rev Neurosci,2007,30:425-50)。其中，兴奋性突触的正常功能是决定学习与记忆能力的基础。兴奋性突触具有独特的突触后结构——树突棘(dendriticspines)，即位于神经元树突上的棘状小突起(Hering and Sheng,Nat Rev Neurosci,2001,2(12):880-8)。近年来越来越多的研究表明，树突棘是学习与记忆障碍、以及多种神经疾病的受损位点。因此，针对树突棘的形态、分子组成和电生理性质进行药物设计或干预是治疗这些疾病的重要方法之一。

发明内容

为解决现有技术的缺点和不足之处，本发明的首要目的在于提供一种一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐。

本发明的另一目的在于提供上述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的制备方法。

本发明的再一目的在于提供上述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的应用。

为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

一种一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐，具有如式(1)所示的化学结构：

式(1)中：X是或者S(硫原子)中的一个，其中的R基团是CH₃、C₂H₅、n-C₃H₇、n-C₄H₉、n-C₅H₁₁或者H中的一个；m是0、1、2、3、4、5、6、7、8或者9中的一个；n是0或者1中的一个；式中的数字1、2、3、4、5、6、7和8指示手性中心位置，该位置的构型是R或者S构型中的一种。

所述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐，其形式为光学异构混合物或光学纯单体(左旋或右旋体)。

上述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的第一种制备方法，包括以下步骤：(1)将左旋一叶萩碱((-)-Securinine)和叠氮基三甲基硅烷(Me₃SiN₃)进行反应，得到化合物S-SN-1和R-SN-1；(2)将化合物S-SN-1和R-SN-1分别与氢气进行反应，分别得到化合物S-SN-2和R-SN-2；(3)将化合物S-SN-2和R-SN-2分别与不同碳链长度的二酰氯进行反应，分别得到一叶萩碱二聚体类化合物SN0-L2、SN0-L3、SN0-L4、SN0-L5和SN0-L6；

其中，左旋一叶萩碱结构式为：

化合物S-SN-1结构式为：

化合物R-SN-1结构式为：

化合物S-SN-2结构式为：

化合物R-SN-2结构式为：

化合物SN0-L2结构式为：

化合物SN0-L3结构式为：

化合物SN0-L4结构式为：

化合物SN0-L5结构式为：

化合物SN0-L6结构式为：

所述不同碳链长度的二酰氯为乙二酰氯、丙二酰氯、丁二酰氯、戊二酰氯和己二酰氯。

上述第一种制备方法具体步骤为：(1)以二氯甲烷(CH₂Cl₂)为溶剂，将摩尔比为1：(5-8)的左旋一叶萩碱(-)-Securinine和叠氮基三甲基硅烷(Me₃SiN₃)在醋酸(AcOH)及催化量的DBU(1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯)催化下，常温下反应7-10小时，左旋一叶萩碱(-)-Securinine和醋酸的摩尔比为1：(5-8)；停止反应后，氯化铵(NH₄Cl)淬灭，水洗，CH₂Cl₂萃取，硅胶柱分离纯化，得到化合物S-SN-1和R-SN-1；(2)分别将化合物S-SN-1和R-SN-1与催化量的钯碳催化剂(10％Pd/C)加入到CH₂Cl₂溶剂中，抽真空，充氢气，反复置换3-4次，常温搅拌反应3-5小时后，过滤，滤液减压旋干；硅胶柱分离纯化，分别得到化合物S-SN-2和R-SN-2；(3)将化合物S-SN-2减压旋干，真空油泵抽干溶剂，在无水DIPEA(N,N-二异丙基乙胺)作碱、无水CH₂Cl₂为溶剂、-15℃低温的条件下分别和不同碳链长度的二酰氯(草酰氯、丙二酰氯、丁二酰氯、戊二酰氯和己二酰氯)按照摩尔比1：(0.5-0.6)反应4-6小时后，NH₄Cl淬灭，用饱和碳酸氢钠与饱和食盐水依次分别洗2次，CH₂Cl₂萃取，减压旋干，硅胶柱分离纯化，分别得到一叶萩碱二聚体类化合物SN0-L2、SN0-L3、SN0-L4、SN0-L5和SN0-L6。

上述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的第二种制备方法，包括以下步骤：(1)将左旋一叶萩碱((-)-Securinine)与甲胺、乙胺、正丙胺、正丁胺和正戊胺分别反应，分别得到化合物S-SN-5、R-SN-5、S-SN-3、S-SN-4、S-SN-6和S-SN-7；(2)将化合物S-SN-5和R-SN-5混合，然后与己二酰氯进行反应，再通过高效液相(HPLC)一次性分离得到3个互为非对映异构体的二聚体化合物，分别是SN3-L6、RS-SN3-L6和RR-SN3-L6；(3)将化合物S-SN-5分别与丁二酰氯、戊二酰氯、庚二酰氯和辛二酰氯进行反应，分别得到二聚体化合物SN3-L4、SN3-L5、SN3-L7和SN3-L8；(4)将化合物S-SN-3、S-SN-4、S-SN-6和S-SN-7分别与己二酰氯进行反应，分别得到二聚体化合物SN1-L6、SN2-L6、SN4-L6和SN5-L6；(5)将化合物S-SN-5和R-SN-5分别与丙酰氯进行反应，分别得到化合物S-SN-8和R-SN-8；

其中，左旋一叶萩碱结构式为：

化合物S-SN-5结构式为：

化合物R-SN-5结构式为：

化合物S-SN-3结构式为：

化合物S-SN-4结构式为：

化合物S-SN-6结构式为：

化合物S-SN-7结构式为：

化合物SN3-L6结构式为：

化合物RS-SN3-L6结构式为：化合物RR-SN3-L6结构式为：化合物SN3-L4结构式为：

化合物SN3-L5结构式为：化合物SN3-L7结构式为：

化合物SN3-L8结构式为：

化合物SN1-L6结构式为：

化合物SN2-L6结构式为：

化合物SN4-L6结构式为：

化合物SN5-L6结构式为：

化合物S-SN-8结构式为：

化合物R-SN-8结构式为：

上述第二种制备方法具体步骤为：(1)将左旋一叶萩碱(-)-Securinine分别与甲胺、乙胺、正丙胺、正丁胺和正戊胺按照摩尔比1：(5-10)在磷酸钾(K₃PO₄)催化的条件下反应12-18小时，左旋一叶萩碱(-)-Securinine与磷酸钾的摩尔比为1.0：(0.05-0.1)，NH₄Cl淬灭，水洗，CH₂Cl₂萃取，硅胶柱分离纯化，分别得到化合物S-SN-5、R-SN-5、S-SN-3、S-SN-4、S-SN-6和S-SN-7；(2)将化合物S-SN-5和R-SN-5混合，然后将混合物在无水DIPEA(N,N-二异丙基乙胺)作碱、无水CH₂Cl₂为溶剂、-15℃低温的条件下与己二酰氯按照摩尔比1.0：(0.5-0.6)进行反应4-6小时后，NH₄Cl淬灭，用饱和碳酸氢钠与饱和食盐水依次分别洗2次，CH₂Cl₂萃取，减压旋干，硅胶柱分离纯化，再通过高效液相(HPLC)一次性分离得到3个互为非对映异构体的二聚体化合物，分别是SN3-L6、RS-SN3-L6和RR-SN3-L6；(3)将化合物S-SN-5在无水DIPEA(N,N-二异丙基乙胺)作碱、无水CH₂Cl₂为溶剂、-15℃低温的条件下，分别与丁二酰氯、戊二酰氯、庚二酰氯和辛二酰氯按照摩尔比1.0：(0.5-0.6)进行反应4-6小时后，NH₄Cl淬灭，用饱和碳酸氢钠与饱和食盐水依次分别洗2次，CH₂Cl₂萃取，减压旋干，硅胶柱分离纯化，分别得到二聚体化合物SN3-L4、SN3-L5、SN3-L7和SN3-L8；(4)操作条件同步骤(3)，将化合物S-SN-3、S-SN-4、S-SN-6和S-SN-7分别与己二酰氯按照摩尔比1.0：(0.5-0.6)进行反应，分别得到二聚体化合物SN1-L6、SN2-L6、SN4-L6和SN5-L6；(5)操作条件同步骤(3)，将化合物S-SN-5和R-SN-5分别与丙酰氯按照摩尔比1.0：(1.5-1.8)进行反应，分别得到化合物S-SN-8和R-SN-8。

上述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的第三种制备方法，包括以下步骤：(1)将右旋一叶萩碱((+)-Securinine)与正丙胺进行反应，得到化合物(+)-S-SN-5和(+)-R-SN-5；(2)将化合物(+)-R-SN-5与己二酰氯进行反应，得到化合物(+)-SN3-L6；

其中，右旋一叶萩碱结构式为：

化合物(+)-S-SN-5结构式为：；

化合物(+)-R-SN-5结构式为：

化合物(+)-SN3-L6结构式为：

上述第三种制备方法具体步骤为：(1)将右旋一叶萩碱((+)-Securinine)溶于CH₂Cl₂中，加入K₃PO₄，随后加入正丙胺，室温搅拌反应12-18小时，右旋一叶萩碱((+)-Securinine)与K₃PO₄的摩尔比为1.0：(0.05-0.1)，右旋一叶萩碱((+)-Securinine)与正丙胺的摩尔比为1：(5-10)，NH₄Cl淬灭，水洗，CH₂Cl₂萃取，硅胶柱分离纯化，得到化合物(+)-S-SN-5和(+)-R-SN-5；(2)化合物(+)-R-SN-5减压旋干，真空油泵抽干溶剂，然后在无水DIPEA催化作碱、无水CH₂Cl₂溶剂为溶剂、-15℃低温的条件下和己二酰氯按照摩尔比1.0：(0.5-0.6)反应4-6小时后，NH₄Cl淬灭，用饱和碳酸氢钠与饱和食盐水依次分别洗2次，CH₂Cl₂萃取，减压旋干，硅胶柱分离纯化，得到化合物(+)-SN3-L6。

上述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的第四种制备方法，包括以下步骤：将左旋一叶萩碱((-)-Securinine)分别和不同的二硫醇反应，分别得到化合物SS-L2、SS-L3、SS-L4、SS-L5、SS-L6、SS-L8和SS-L9；

其中，左旋一叶萩碱结构式为：

化合物SS-L2结构式为：

化合物SS-L3结构式为：

化合物SS-L4结构式为：

化合物SS-L5结构式为：

化合物SS-L6结构式为：

化合物SS-L8结构式为：

化合物SS-L9结构式为：

所述不同的二硫醇为乙二硫醇、丙二硫醇、丁二硫醇、戊二硫醇、己二硫醇、辛二硫醇和壬二硫醇。

上述第四种制备方法具体步骤为：将摩尔比为1.0：(0.2-0.5)的左旋一叶萩碱((-)-Securinine)与K₃PO₄溶于体积比为4:1的CH₂Cl₂和CH₃OH的混合溶剂中，搅拌，将不同的二硫醇(乙二硫醇、丙二硫醇、丁二硫醇、戊二硫醇、己二硫醇、辛二硫醇和壬二硫醇)分别溶于适量CH₃OH，并缓慢加入反应体系中，室温下搅拌过夜，左旋一叶萩碱((-)-Securinine)与二硫醇的摩尔比为1.0：(0.5-0.6:)；将反应溶剂旋干，水洗，CH₂Cl₂萃取，减压旋干，硅胶柱分离纯化，分别得到化合物SS-L2、SS-L3、SS-L4、SS-L5、SS-L6、SS-L8和SS-L9。

上述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐在制备促进神经分化(neuronal differentiation)和神经突起(neurite)生长的药物中的应用，所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物优选SN1-L6、SN2-L6、SN3-L6、SN4-L6、SN5-L6、SN3-L4、SN3-L5、SN3-L7、RS-SN3-L6、RR-SN3-L6、(+)-SN3-L6或它们的可药用盐。

上述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐在制备促进CaMKII、Akt和ERK蛋白活性的药物中的应用，所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物优选SN3-L5、SN3-L6或它们的可药用盐。

上述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐在制备拮抗β淀粉样蛋白引起的神经毒性药物中的应用，所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物优选SN3-L6或其可药用盐。

上述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐在制备促进树突棘(dendritic spine)形成和功能的药物中的应用，所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物优选SN3-L6或其可药用盐。

上述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐在制备促进蛋白质合成(protein synthesis)的药物中的应用，所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物优选SN3-L6或其可药用盐。

上述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐在制备促进学习和记忆药物中的应用，所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物优选SN3-L6或其可药用盐。

上述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐在制备治疗由神经突起或神经突触(synapse)发育异常或受损所导致的认知障碍、神经退行性疾病、神经损伤或情绪紊乱症状中的应用。

上述一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐在制备用于治疗神经发育异常、神经损伤、神经退行性疾病和学习记忆障碍的药物组合物中的应用。

以中药及天然药物为来源，通过天然药物化学、分子生物学及药效评价相结合的研究方式，从中筛选和寻找药物先导化合物，是开展创新药物研究的独特模式。本专利以大戟科植物中提取的左旋(或右旋)一叶萩碱为前体化合物进行化学结构修饰，得到了一系列的新型一叶萩型生物碱二聚体类化合物及其中间产物。通过神经细胞株、原代培养的海马神经元和实验小鼠等体内外模型的药效评价，发现多个新型一叶萩型生物碱二聚体类化合物具有促进神经突起生长、神经元保护、神经突触形成和增强学习记忆功能的作用。

本发明提供的新型一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐可制备治疗由神经突起或神经突触(synapse)发育异常或受损所导致的认知障碍、神经退行性疾病、神经损伤或情绪紊乱症状中的应用。该新型一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐还可制备拮抗阿尔茨海默氏症中的神经毒性物质β淀粉样蛋白的药物。

此外，本发明提供的新型一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐可制备促进CaMKII、Akt和ERK蛋白活性的药物，所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物优选SN3-L5、SN3-L6或它们的可药用盐。

本发明提供的新型一叶萩型生物碱二聚体类化合物还可制备促进蛋白质合成(protein synthesis)的药物，所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物优选SN3-L6或其可药用盐。

上述所述的可药用的盐包括但不限于：无机阴离子，例如氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根、亚硫酸根、硝酸根、亚硝酸根、磷酸根和磷酸氢根等；有机阴离子，例如乙酸根、丙酸根、肉桂酸根、苯甲硫磺根、柠檬酸根、乳酸根和葡萄糖酸根等。

一叶萩型生物碱二聚体类化合物及其衍生物可以制成多种剂型，包括固体剂型，半固体剂型，液体剂型和气雾剂型。这几类剂型中的具体剂型包括片剂、丸剂、糖锭剂、颗粒剂、凝胶剂、膏剂、溶液剂、栓剂、注射剂、吸入剂以及喷雾剂。这些剂型既能用于局部或全身给药又能用于速释或缓释给药，此类药物的给药方式有很多种，除了上述方式，还有口腔给药、面颊给药、直肠给药、腹膜给药、腹膜内给药、皮表给药、皮下给药和气管内给药等。

当一叶萩型生物碱二聚体类化合物及其衍生物注射给药时，可以用水溶性或脂溶性的溶剂将此类化合物配制成溶液剂、悬浊剂和乳剂。脂溶性溶剂具体包括植物油及类似油类、合成脂肪酸甘油酯、高级脂肪酸酯以及乙二醇酯。

当一叶萩型生物碱二聚体类化合物及其衍生物口服给药时，可以采用常用技术将其与可药用的赋形剂制成复合物。这些赋形剂可以将这些化合物制成多种可以被病人接受的剂型，如片剂、丸剂、混悬剂、凝胶剂等。口服制剂的配制有多种方法，如先把化合物和固体赋形剂混匀，充分研磨混合物，添加适当的辅料，加工处理成颗粒。可以用于制成口服剂型的辅料包括：糖类如乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；纤维素类如玉米淀粉、小麦淀粉、马铃薯淀粉、明胶、西黄薯胶、甲基纤维素、羟甲基纤维素、羧甲基纤维素纳、聚乙烯吡咯酮等。

本发明涉及的一叶萩型生物碱二聚体类化合物及其衍生物也可以制成喷雾剂，此种剂型是通过一个加压器和一个喷雾器或者一个干粉吸入装置而实现的。可以用作喷射器里合适的喷射剂如二氯二氟甲烷、氟三氯甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳和二甲醚等。气雾剂给药的剂量可以通过喷射器的阀门来调节。

与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果：

本发明提供了一种全新结构的化合物，所采用的合成路线应用了绿色化学反应，更环保、更具有原料经济性。这些化合物可用于开发治疗和预防由于神经突起或神经突触发育异常或受损引起的神经退行性疾病、神经损伤或情绪紊乱等新药。

附图说明

图1为一叶萩型二聚体类化合物的合成路线。

图2为LDH检测新型一叶萩型生物碱的细胞毒性。

图3为化合物SN3-L6、RS-SN3-L6和SN3-L7促神经细胞株分化活性的剂量研究。

图4为化合物SN3-L5和SN3-L6激活ERK、Akt等分子信号通路蛋白。

图5为多条信号通路参与介导化合物SN3-L6诱导的神经分化作用。

图6为化合物SN3-L6对Aβ诱导损伤的神经元具有保护作用。

图7为化合物SN3-L6促进海马神经元树突棘的形成。

图8为化合物SN3-L6促进PSD95簇集数量的增加。

图9为化合物SN3-L6促进蛋白质的新生。

图10为蛋白质的新生是SN3-L6促进树突棘增多的关键步骤。

图11为化合物SN3-L6缩短小鼠在水迷宫实验中的逃逸潜伏期。

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1：(S)-叠氮基一叶萩碱(S-SN-1)及其非对映异构体R-SN-1的制备

在50mL单口烧瓶中加入一叶萩碱((-)-Securinine，200mg，约合0.90mmol)、醋酸溶液(0.32mL,5.4mmol,d＝1.05g/mL)、CH₂Cl₂(二氯甲烷，5mL)，室温下搅拌溶解。2分钟后加入叠氮基三甲基硅烷(Me₃SiN₃，0.71mL，5.40mmol,d＝0.876g/mL)和DBU(0.07mL，0.45mmol,d＝1.04g/mL)，室温下搅拌反应7～10小时，反应液呈浅红色，停止并淬灭反应，用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水依次分别洗两次，CH₂Cl₂萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥15分钟，减压旋干溶剂，硅胶柱纯化(氯仿：丙酮＝80:1洗脱)，得到淡黄色液体化合物S-SN-1(67％)和固体化合物R-SN-1(33％)。

S-SN-1：IR:2937,2852,2094,1764,1648cm^-1；ESI-MS:m/z 261.2[M+H]⁺；HRESIMS:m/z261.1347[M+H]⁺,calc for C₁₃H₁₆N₄O₂＝261.1346；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.68(d,J＝2.4Hz,1H),3.36(m,1H),3.24～3.15(m,1H),3.12～2.97(m,3H),2.96～2.90(m,1H),2.80(dd,J＝7.4,2.5Hz,1H),2.80～2.73(m,1H),1.94～1.81(m,1H),1.67～1.51(m,1H),1.50～1.33(m,5H)。

R-SN-1：IR:2935,2855,2112,1758,1645cm^-1；ESI-MS:m/z 261.0[M+H]⁺；HRESIMS:m/z261.1347[M+H]⁺,calc for C₁₃H₁₆N₄O₂＝261.1346；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.69(d,J＝2.4Hz,1H),3.92～3.84(m,1H),3.35～3.31(m,1H),3.06～2.90(m,4H),2.81(d,J＝16.8Hz,1H),2.57(dd,J＝11.1,6.1Hz,1H),1.95(m,1H),1.84(d,J＝11.1Hz,1H),1.67～1.62(m,1H),1.54～1.33(m,4H)。

实施例2：(S)-氨基一叶萩碱(S-SN-2)及其非对映异构体R-SN-2的制备

化合物S-SN-1(100mg,约合0.37mmol)放入50mL单口瓶中，加入5mLCH₂Cl₂搅拌溶解，加入钯碳(10％Pd/C,30mg)，瓶口接三通阀，密封，抽真空，充氢气，常温下搅拌3～5小时,停止反应，硅藻土过滤，滤液用无水硫酸钠干燥15分钟，减压旋干溶剂，硅胶柱纯化(氯仿：甲醇＝30:1洗脱)，得到淡黄色液体化合物S-SN-2(90％)。

通过化合物R-SN-1可用同样的方法得到化合物R-SN-2。

S-SN-2：IR:3368,3292,2939,2856,1740cm^-1；ESI-MS:m/z 235.3[M+H]⁺；HRESIMS:m/z235.1449[M+H]⁺,calc for C₁₃H₁₈N₂O₂＝235.1441；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.46(d,J＝2.4Hz,1H),3.04～2.75(m,6H),2.59(dd,J＝10.8,6.5Hz,1H),2.20(ddd,J＝14.9,8.9,2.4Hz,1H),1.83～1.68(m,1H),1.57～1.44(m,3H),1.42～1.22(m,5H)。

R-SN-2：IR:3360,3298,2930,2855,1724cm^-1；ESI-MS:m/z 235.3[M+H]⁺；HRESIMS:m/z235.1449[M+H]⁺,calc for C₁₃H₁₈N₂O₂＝235.1441；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.61(d,J＝2.4Hz,1H),3.34(dd,J＝6.8,4.1Hz,1H),3.08(t,J＝5.0Hz,1H),2.98～2.82(m,4H),2.54～2.43(m,2H),1.83(dd,J＝15.7,8.9Hz,2H),1.58(d,J＝10.1Hz,3H),1.46～1.30(m,4H)。

实施例3：(S,S)-草酰胺基-双-一叶萩碱(SN0-L2)及其类似二聚体化合物(SN0-L3、SN0-L4、SN0-L5和SN0-L6)的制备

将化合物S-SN-2(87.06mg,约合0.35mmol)加入到50mL的双口圆底烧瓶中，旋干溶剂，再用真空泵抽干溶剂(3小时)，加入搅拌子，反口胶塞密封其中一个瓶口。另一个瓶口接双排管，用针头加入干燥的CH₂Cl₂4mL，-15℃下搅拌溶解，溶解后通过双排管抽真空，充氮气，反复置换4次，加入无水DIPEA(N，N-二异丙基乙胺，0.10mL,0.58mmol,d＝0.74g/mL)，搅拌5分钟。取草酰氯(0.02mL,0.21mmol,d＝1.5g/mL)，迅速稀释在1.0mL的干燥的CH₂Cl₂中，立即用玻璃针管取出，少量多次缓慢加入到双口反应瓶中(大约60分钟加完)，加完后，-15℃条件下继续搅拌30分钟，之后将反应转移到常温条件下，搅拌反应4～6小时，反应液呈黑褐色，停止并淬灭反应，用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水依次分别洗两次，CH₂Cl₂萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥15分钟，减压旋干溶剂，硅胶柱纯化(氯仿：甲醇＝60:1洗脱)，得到淡黄色液体化合物SN0-L2(89％)。

变换不同的二酰氯，用同样的方法可以分别得到化合物SN0-L3，SN0-L4，SN0-L5和SN0-L6。

SN0-L2：IR:3327,2935,2852,1753,1671,1498cm^-1；ESI-MS:m/z 523.5[M+H]⁺；HRESIMS:m/z 523.2553[M+H]⁺,calc for C₂₈H₃₄N₄O₆＝523.2551；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.85(d,J＝7.5Hz,2H),5.75(s,2H),4.08～3.94(m,2H),3.31～3.25(m,2H),3.11～2.97(m,2H),2.87(d,J＝12.6Hz,6H),2.75(d,J＝17.4Hz,2H),2.49～2.41(m,2H),1.77(d,J＝10.9Hz,4H),1.38(d,J＝10.6Hz,10H)。

SN0-L3：IR:3276,2936,2851,1754,1648,1541cm^-1；ESI-MS:m/z 537.8[M+H]⁺；HRESIMS:m/z 537.2709[M+H]⁺,calc for C₂₉H₃₆N₄O₆＝537.2708；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.68(dd,J＝14.0,4.9Hz,2H),5.65(d,J＝1.9Hz,2H),4.21(dd,J＝9.1,5.6Hz,2H),3.41(d,J＝3.0Hz,2H),3.15(s,2H),2.99(s,6H),2.71～2.61(m,2H),2.57(dd,J＝11.3,5.9Hz,2H),1.87(s,2H),1.67～1.56(m,4H),1.48～1.31(m,8H),1.22(d,J＝11.6Hz,2H)。

SN0-L4：IR:3289,2935,2852,1753,1671,1498cm^-1；ESI-MS:m/z 551.8[M+H]⁺；HRESIMS:m/z 551.2862[M+H]⁺,calc for C₃₀H₃₈N₄O₆＝551.2864；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ6.84(d,J＝6.9Hz,2H),5.66(d,J＝2.1Hz,2H),4.23(dd,J＝5.8,3.7Hz,2H),3.41(s,2H),3.22～3.07(m,2H),2.94(d,J＝30.3Hz,6H),2.69～2.44(m,8H),1.89(s,2H),1.68～1.57(m,4H),1.39(dd,J＝18.3,10.4Hz,8H)。

SN0-L5：IR:3308,2937,2851,1753,1644,1539cm^-1；ESI-MS:m/z 565.9[M+H]⁺；HRESIMS:m/z 565.3023[M+H]⁺,calc for C₃₁H₄₀N₄O₆＝565.3021；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ6.98(s,2H),5.54(s,2H),4.16(s,2H),3.34(s,2H),3.04(dd,J＝20.4,11.0Hz,2H),2.92(s,6H),2.52(dd,J＝32.4,10.5Hz,4H),2.17(s,4H),1.82(s,4H),1.61(d,J＝11.0Hz,2H),1.50～1.24(m,10H)。

SN0-L6：IR:3356,2938,2851,1753,1644,1543cm^-1；ESI-MS:m/z 579.5[M+H]⁺；HRESIMS:m/z 579.3178[M+H]⁺,calc for C₃₂H₄₂N₄O₆＝579.3177；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ6.76(d,J＝7.4Hz,2H),5.59(d,J＝1.8Hz,2H),4.22(dd,J＝11.4,7.4Hz,2H),3.44～3.33(m,2H),3.15～3.03(m,2H),2.93(dd,J＝15.3,4.2Hz,6H),2.65～2.55(m,2H),2.52～2.45(m,2H),2.24～2.15(m,4H),1.85(s,2H),1.69～1.52(m,8H),1.37(dd,J＝20.4,11.7Hz,8H)。

实施例4：(S)-正丙胺基一叶萩碱(S-SN-5)及其类似物R-SN-5、(+)-S-SN-5、S-SN-3、S-SN-4、S-SN-6和S-SN-7的制备

取一叶萩碱(300mg,约合1.38mmol)加入到50mL圆底烧瓶中，加入CH₂Cl₂(4mL)搅拌溶解，再加入无水K₃PO₄(30mg，约合0.14mmol)和正丙胺(0.68mL，8.28mmol)，反应13小时，反应液呈淡黄色，停止并淬灭反应，用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水依次分别洗两次，CH₂Cl₂萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥15分钟，减压旋干溶剂，硅胶柱纯化(氯仿：甲醇＝90:1洗脱)，得到淡黄色液体化合物S-SN-5(65％)和R-SN-5(25％)。

S-SN-5：IR:2939,2860,1744,1628,1451cm^-1；ESI-MS:m/z 277.5[M+H]⁺；HRESIMS:m/z277.1901[M+H]⁺,calc for C₁₆H₂₄N₂O₂＝277.1911；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.57(d,J＝2.1Hz,1H),3.22～3.16(m,1H),3.01(dd,J＝6.3,4.2Hz,1H),2.92～2.75(m,3H),2.58～2.40(m,4H),1.89～1.79(m,2H),1.59～1.25(m,9H),0.85(t,J＝7.4Hz,3H)。

R-SN-5：IR:2934,2851,1744,1635,1442cm^-1；ESI-MS:m/z 277.5[M+H]⁺；HRESIMS:m/z277.1905[M+H]⁺,calc for C₁₆H₂₄N₂O₂＝277.1911；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.55(s,1H),3.34(d,J＝6.3Hz,1H),3.07～2.84(m,4H),2.72～2.47(m,4H),2.32～2.22(m,1H),1.84(s,1H),0.89(dd,J＝8.2,6.6Hz,3H)。

同样条件下，用右旋一叶萩碱置换一叶萩碱，得到淡黄色液体化合物(+)-R-SN-5(66％)和(+)-S-SN-5(22％)。

(+)-R-SN-5：IR:2937,2851,1744,1625,1456cm^-1；ESI-MS:m/z 277.5[M+H]⁺；HRESIMS:m/z 277.1907[M+H]⁺,calc for C₁₆H₂₄N₂O₂＝277.1911；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.63～5.54(m,1H),3.26～3.13(m,1H),3.02(dt,J＝12.4,6.3Hz,1H),2.95～2.75(m,4H),2.50(tdd,J＝18.2,13.9,7.9Hz,4H),1.92～1.79(m,2H),1.62～1.50(m,1H),1.52～1.23(m,7H),0.86(q,J＝7.0Hz,3H)。

(+)-S-SN-5：IR:2935,2860,1745,1663,1455cm^-1；ESI-MS:m/z 277.5[M+H]⁺；HRESIMS:m/z 277.1912[M+H]⁺,calc for C₁₆H₂₄N₂O₂＝277.1911；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.55(s,1H),3.34(d,J＝6.3Hz,1H),3.07～2.84(m,4H),2.72～2.47(m,4H),2.32～2.22(m,1H),1.84(s,1H),0.89(dd,J＝8.2,6.6Hz,3H)。

同样的条件，将一叶萩碱和不同的伯胺反应，得到化合物S-SN-3、S-SN-4、S-SN-6和S-SN-7。

S-SN-3：IR:2935,2851,1723,1643,1435cm^-1；ESI-MS:m/z 249.3[M+H]⁺；HRESIMS:m/z249.1591[M+H]⁺,calc for C₁₄H₂₀N₂O₂＝249.1598；¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:5.60(d,J＝2.1Hz,1H),3.20～3.23(m,1H),2.88～2.94(m,4H),2.77～2.85(m,1H),2.57～2.62(m,1H),2.42～2.49(dd,J＝6.0,10.8Hz,1H),2.36(s,3H),1.82～1.87(m,2H),1.55～1.59(m,2H),1.31～1.43(m,4H)。

S-SN-4：IR:2935,2852,1743,1644,898cm^-1；ESI-MS:m/z 263.3[M+H]⁺；HRESIMS:m/z263.1754[M+H]⁺,calc for C₁₅H₂₂N₂O₂＝263.1742；¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:5.59(d,J＝2.4Hz,1H),3.18～3.21(m,1H),3.02～3.06(m,1H),2.88～2.94(m,3H),2.79～2.86(m,1H),2.51～2.64(m,3H),2.46(dd,J＝6.0,12.0Hz,1H),1.87(d,1H,J＝10.1Hz),1.80～1.85(m,1H),1.55～1.61(m,1H),1.15～1.50(m,5H),1.05(t,J＝6.9Hz,3H)。

S-SN-6：IR:2937,2851,1744,1634,898cm^-1；ESI-MS:m/z 291.2[M+H]⁺；HRESIMS:m/z291.2060[M+H]⁺,calc for C₁₇H₂₆N₂O₂＝291.2067；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.51(s,1H),3.13(s,1H),2.94(dt,J＝9.9,5.1Hz,1H),2.87～2.69(m,4H),2.53～2.33(m,4H),1.84～1.71(m,2H),1.48(d,J＝11.9Hz,1H),1.44～1.11(m,9H),0.83～0.77(m,3H)。

S-SN-7：IR:2936,2855,1744,1635,898cm^-1；ESI-MS:m/z 305.0[M+H]⁺；HRESIMS:m/z305.2225[M+H]⁺,calc for C₁₈H₂₈N₂O₂＝305.2224；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.50(d,J＝2.2Hz,1H),3.16～3.08(m,1H),2.93(dt,J＝9.6,4.8Hz,1H),2.86～2.69(m,4H),2.52～2.33(m,4H),1.83～1.71(m,2H),1.49(dd,J＝10.2,6.7Hz,1H),1.42～1.21(m,7H),1.21～1.12(m,4H),0.78(t,J＝6.8Hz,3H)。

实施例5：(S,S)-己二酰正丙胺基-双-一叶萩碱(SN3-L6)及其类似二聚体化合物RS-SN3-L6、RR-SN3-L6、(+)-SN3-L6、SN1-L6、SN2-L6、SN4-L6和SN5-L6的制备

将化合物S-SN-5和R-SN-5(共400mg，约合1.52mmol)1:1混合加入到50mL的双口圆底烧瓶中，旋干溶剂，再用真空泵抽干溶剂(3小时)，加入搅拌子，反口胶塞密封其中一个瓶口。另一个瓶口接双排管，用针头加入无水CH₂Cl₂4mL，-15℃下搅拌溶解，溶解后通过双排管抽真空，充氮气，反复置换4次，加入无水DIPEA(N，N-二异丙基乙胺，0.5mL,2.88mmol,d＝0.74g/mL)，搅拌5分钟。取己二酰氯(0.13mL,0.91mmol,d＝1.25g/mL)，迅速稀释在1.0mL的无水CH₂Cl₂中，立即用玻璃针管取出，少量多次缓慢加入到双口反应瓶中(大约60分钟加完)，加完后，-15℃条件下继续搅拌30分钟，之后将反应转移到常温条件下，搅拌反应4～6小时,反应液色较深，呈黑褐色，停止并淬灭反应，用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水依次分别洗两次，CH₂Cl₂萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥15分钟，减压旋干溶剂，硅胶柱纯化(氯仿：甲醇＝90:1–60:1梯度洗脱)，一次性得到三个淡黄色固体化合物SN3-L6、RS-SN3-L6和RR-SN3-L6(总产率91％)。

SN3-L6：IR:2923,2851,1760,1637,1384cm^-1；ESI-MS:m/z 663.7[M+H]⁺；HRESIMS:m/z663.4126[M+H]⁺,calc for C₃₈H₅₄N₄O₆＝663.4116；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.60(s,2H),4.25(d,J＝6.3Hz,2H),3.42(s,2H),3.18～3.06(m,4H),2.87(d,J＝24.1Hz,10H),2.44(dd,J＝11.0,5.8Hz,2H),2.24(d,J＝3.7Hz,4H),1.80(s,2H),1.55(s,12H),1.34(d,J＝21.2Hz,8H),0.81(t,J＝7.3Hz,6H)。

RS-SN3-L6：IR:2938,2862,1759,1637,909cm^-1；ESI-MS:m/z 663.6[M+H]⁺；HRESIMS:m/z 663.4166[M+H]⁺,calc for C₃₈H₅₄N₄O₆＝663.4116；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.60(s,2H),4.49(t,J＝8.7Hz,1H),4.25(s,1H),3.55～3.40(m,2H),3.20～3.06(m,4H),3.00～2.82(m,8H),2.77(t,J＝7.3Hz,3H),2.62(dd,J＝10.9,6.6Hz,1H),2.45(dd,J＝10.9,5.8Hz,1H),2.33～2.21(m,4H),1.80(s,2H),1.46(ddd,J＝24.4,23.0,17.1Hz,19H),0.83(dd,J＝7.0,4.7Hz,6H)。

RR-SN3-L6：IR:2937,2862,1759,1636,909cm^-1；ESI-MS:m/z 663.6[M+H]⁺；HRESIMS:m/z 663.4150[M+H]⁺,calc for C₃₈H₅₄N₄O₆＝663.4116；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.65(s,2H),4.54(t,J＝8.7Hz,2H),3.60～3.48(m,2H),3.27(dd,J＝11.1,5.0Hz,2H),3.16(d,J＝6.4Hz,2H),3.03(dd,J＝10.8,4.1Hz,2H),2.98～2.76(m,10H),2.67(dd,J＝10.8,6.6Hz,2H),2.40～2.27(m,4H),1.85(s,2H),1.60～1.31(m,20H),0.89(d,J＝7.4Hz,6H)。

同样条件下，将原料S-SN-5和R-SN-5置换成(+)-R-SN-5，则得到二聚体化合物(+)-SN3-L6。

(+)-SN3-L6：IR:2924,2851,1761,1637,1384cm^-1；ESI-MS:m/z 663.7[M+H]⁺；HRESIMS:m/z 663.4094[M+H]⁺,calc for C₃₈H₅₄N₄O₆＝663.4116；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.66(s,2H),4.31(s,2H),3.48(s,2H),3.15(d,J＝10.6Hz,4H),3.02～2.83(m,10H),2.54～2.46(m,2H),2.30(s,4H),1.87(s,2H),1.62(s,12H),1.36(s,8H),0.88(t,J＝7.2Hz,6H)。

同样条件下，将原料S-SN-5和R-SN-5置换成S-SN-3、S-SN-4、S-SN-6和S-SN-7，则得到二聚体化合物SN1-L6、SN2-L6、SN4-L6和SN5-L6。

SN1-L6：IR:2925,2851,1757,1637,1384cm^-1；ESI-MS:m/z 607.5[M+H]⁺；HRESIMS:m/z607.3468[M+H]⁺,calc for C₃₄H₄₆N₄O₆＝607.3490；¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:5.07(s,2H),4,56～4.60(m,2H),3.44～3.47(m,2H),3.12～3.21(m,2H),2.92～3.05(m,4H),2.88(s,6H),2.72～2.78(d,J＝17.4Hz,4H),2.53～2.58(m,2H),2.31(s,4H),1.24～1.87(m,18H)。

SN2-L6：IR:2924,2852,1761,1637,1371cm^-1；ESI-MS:m/z 635.6[M+H]⁺；HRESIMS:m/z635.3784[M+H]⁺,calc for C₃₆H₅₀N₄O₆＝635.3803；¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:5.65(s,2H),4.29～4.31(m.2H),3.44(m,2H),3.27～3.34(m,2H),3.02～3.18(m,4H),2.95～3.00(m,2H),2.80～2.92(m,6H),2.45～2.51(m,2H),2.20～2.39(m,4H),1.84(m,2H),1.55～1.62(m,4H),1.06～1.25(m,18H)。

SN4-L6：IR:2927,2851,1743,1637,1381cm^-1；ESI-MS:m/z 691.3[M+H]⁺；HRESIMS:m/z691.4421[M+H]⁺,calc for C₄₀H₅₈N₄O₆＝691.4429；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ：5.66(s,2H),4.32(s,2H),3.48(s,2H),3.18(d,J＝10.4Hz,6H),3.02～2.85(m,10H),2.51(dd,J＝10.3,5.8Hz,2H),2.30(s,4H),1.87(s,2H),1.63(s,12H),1.37～1.27(m,10H),0.94(t,J＝7.3Hz,6H)。

SN5-L6：IR:2926,2850,1761,1643,1384cm^-1；ESI-MS:m/z 719.3[M+H]⁺；HRESIMS:m/z719.4761[M+H]⁺,calc for C₄₂H₆₂N₄O₆＝719.4742；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ：5.66(s,2H),4.43～4.17(m,2H),3.48(s,2H),3.17(d,J＝10.1Hz,4H),2.90(dd,J＝31.1,17.5Hz,10H),2.51(dd,J＝10.5,5.8Hz,2H),2.44～2.11(m,6H),1.87(s,2H),1.62(s,10H),1.39～1.21(m,16H),0.91(t,J＝7.1Hz,6H)。

实施例6：(S,S)-丁二酰正丙胺基-双-一叶萩碱(SN3-L4)及其类似二聚体化合物SN3-L5，SN3-L7和SN3-L8的制备

将化合物S-SN-5(130mg，约合0.49mmol)加入到50mL的双口圆底烧瓶中，旋干溶剂，再用真空泵抽干溶剂(3小时)，加入搅拌子，反口胶塞密封其中一个瓶口，另一个瓶口接双排管，用针头加入无水CH₂Cl₂4mL，-15℃下搅拌溶解，溶解后通过双排管抽真空，充氮气，反复置换4次，加入无水DIPEA(N，N-二异丙基乙胺，0.13mL,0.74mmol,d＝0.74g/mL)，搅拌5分钟。取丁二酰氯(0.03mL,0.25mmol,d＝1.4g/mL)，迅速稀释在1.0mL的无水CH₂Cl₂中，立即用玻璃针管取出，少量多次缓慢加入到双口反应瓶中(大约60分钟加完)，加完后，-15℃条件下继续搅拌30分钟，之后将反应转移到常温条件下，搅拌反应4～6小时,反应液色较深，呈黑褐色，停止并淬灭反应，用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水依次分别洗两次，CH₂Cl₂萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥15分钟，减压旋干溶剂，硅胶柱纯化(氯仿：甲醇＝60:1洗脱)，得到淡黄色固体化合物SN3-L4(90％)。

SN3-L4：IR:2924,2850,1761,1644,1384cm^-1；ESI-MS:m/z 635.2[M+H]⁺；HRESIMS:m/z635.3850[M+H]⁺,calc for C₃₆H₅₀N₄O₆＝635.3803；¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:5.63(s,2H),4.27～4.29(m,2H),3.22～3.40(m,4H),3.06～3.14(m,2H),2.79～2.99(m,9H),2.55～2.63(m,5H),2.43～2.48(m,2H),1.74～1.84(m,4H),1.50～1.61(m,4H),1.22～1.40(m,10H),0.87(t,J＝7.2Hz,6H)。

同样条件下，将原料丁二酰氯置换成戊二酰氯、庚二酰氯、辛二酰氯，则分别得到二聚体化合物SN3-L5、SN3-L7和SN3-L8。

SN3-L5：IR:2926,2851,1752,1633,1384cm^-1；ESI-MS:m/z 649.3[M+H]⁺；HRESIMS:m/z649.3956[M+H]⁺,calc for C₃₇H₅₂N₄O₆＝649.3959；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.65(s,2H),4.25(d,J＝24.8Hz,2H),3.46(s,2H),3.17(d,J＝10.7Hz,4H),2.92(d,J＝30.2Hz,10H),2.53～2.46(m,2H),2.36(d,J＝7.3Hz,4H),1.89(d,J＝9.2Hz,4H),1.62(d,J＝19.5Hz,6H),1.30(d,J＝35.4Hz,10H),0.88(t,J＝7.1Hz,6H)。

SN3-L7：IR:2924,2846,1772,1655,909cm^-1；ESI-MS:m/z 677.4[M+H]⁺；HRESIMS:m/z677.4310[M+H]⁺,calc for C₃₉H₅₆N₄O₆＝677.4272；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.67(s,2H),4.28(d,J＝37.1Hz,2H),3.50(s,2H),3.16(d,J＝9.6Hz,4H),2.91(dd,J＝31.9,15.5Hz,10H),2.55～2.48(m,2H),2.27(t,J＝6.9Hz,4H),1.88(s,2H),1.63(d,J＝6.4Hz,12H),1.35(d,J＝6.9Hz,10H),0.89(t,J＝7.1Hz,6H)。

SN3-L8：IR:2925,2846,1771,1655,909cm^-1；ESI-MS:m/z 691.8[M+H]⁺；HRESIMS:m/z691.4459[M+H]⁺,calc for C₄₀H₅₈N₄O₆＝691.4429；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.57(s,2H),4.21(d,J＝5.6Hz,2H),3.38(s,2H),3.07(dt,J＝15.1,9.2Hz,4H),2.90～2.76(m,10H),2.40(dd,J＝10.8,5.7Hz,2H),2.21～2.10(m,4H),1.76(s,2H),1.51(d,J＝10.7Hz,12H),1.23(s,12H),0.79(t,J＝7.2Hz,6H)。

实施例7：(S)-丙酰氯正丙胺基一叶萩碱S-SN-8及其非对映异构体R-SN-8的制备

将化合物S-SN-5(125mg，约合0.47mmol)加入到50mL的双口圆底烧瓶中，旋干溶剂，再用真空泵抽干溶剂(3小时)，加入搅拌子，反口胶塞密封其中一个瓶口。另一个瓶口接双排管，用针头加入无水CH₂Cl₂4mL，-15℃下搅拌溶解，溶解后通过双排管抽真空，充氮气，反复置换4次，加入无水DIPEA(N，N-二异丙基乙胺，0.2mL,1.19mmol,d＝0.74g/mL)，搅拌5分钟。取正丙酰氯(0.06mL,0.71mmol,d＝1.06g/mL)，迅速稀释在1.0mL的无水CH₂Cl₂中，立即用玻璃针管取出，少量多次缓慢加入到双口反应瓶中(大约60分钟加完)，加完后，-15℃条件下继续搅拌30分钟，之后将反应转移到常温条件下，搅拌反应4～6小时,反应液色较深，呈黑褐色，停止并淬灭反应，用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水依次分别洗两次，CH2Cl2萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥15分钟，减压旋干溶剂，硅胶柱纯化(氯仿：甲醇＝60:1洗脱)，得到淡黄色液体化合物S-SN-8(91％)。

S-SN-8：IR:2927,2862,1760,1635,909cm^-1；ESI-MS:m/z 333.4[M+H]⁺；HRESIMS:m/z333.2198[M+H]⁺,calc for C₁₉H₂₈N₂O₃＝333.2172；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.60(s,1H),4.24(s,1H),3.43(s,1H),3.10(dd,J＝16.4,7.1Hz,2H),2.84(dd,J＝20.9,14.0Hz,4H),2.48～2.39(m,1H),2.23(ddd,J＝9.3,6.8,3.0Hz,3H),1.78(s,1H),1.60(d,J＝11.1Hz,1H),1.51(d,J＝11.7Hz,2H),1.41～1.25(m,5H),1.08～1.01(m,5H),0.81(t,J＝6.3Hz,3H)。

同样条件下，将原料S-SN-5置换成R-SN-5，得到淡黄色液体化合物R-SN-8(92％)。

R-SN-8：IR:2941,2875,1765,1639,905cm^-1；ESI-MS:m/z 333.6[M+H]⁺；HRESIMS:m/z333.2198[M+H]⁺,calc for C₁₉H₂₈N₂O₃＝333.2172；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.67(s,1H),4.54～4.40(m,1H),3.52(dd,J＝18.6,7.9Hz,1H),3.36～3.20(m,2H),3.11(dd,J＝11.2,4.1Hz,1H),2.89(ddd,J＝21.2,13.8,8.0Hz,4H),2.70(dd,J＝11.1,6.5Hz,1H),1.86(s,1H),1.60(dd,J＝6.5,4.2Hz,2H),1.46(d,J＝12.5Hz,3H),1.39～1.32(m,2H),1.13(dd,J＝7.4,1.8Hz,6H),0.90(t,J＝7.3Hz,3H)。

实施例8：(S,S)-1,9-壬二硫醇基-双-一叶萩碱(SS-L9)的制备

将一叶萩碱(120mg,约合0.55mmol)与无水磷酸钾(35mg,约合0.17mmol)加进圆瓶烧瓶，加4mL CH₂Cl₂与1mL CH₃OH搅拌使溶解，搅拌5～10min后，将1,9-壬二硫醇(0.12mL，约合0.33mmol,d＝0.95g/mL)溶于1mL甲醇并缓慢加入体系，室温下搅拌过夜；之后停止反应并将体系溶剂旋干，往其中加入CH₂Cl₂6～8mL，然后依次用饱和NaHCO₃溶液与饱和氯化钠溶液洗涤，有机层加无水Na₂SO₄干燥，再于减压下浓缩，浓缩物以氯仿:甲醇＝30:1为洗脱液过硅胶柱，得白色泡沫状固体SS-L9(62.5mg,36.3％)。

SS-L9：IR:2926,2841,1745,1639,898cm^-1；ESI-MS:m/z 627.4[M+H]⁺；HRESIMS:m/z627.3287[M+H]⁺,calc for C₃₅H₅₀N₂O₄S₂＝627.3285；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.82(s,2H,H-12,12’),3.87～3.71(m,4H),3.70～3.55(m,2H),3.17～3.01(m,4H),2.76～2.55(m,6H),2.46～2.36(m,2H),2.04～1.82(m,8H),1.72～1.56(m,12H),1.41～1.23(m,10H)。

同样条件下，将原料1,9-壬二硫醇置换成不同碳链长度的二硫醇(乙二硫醇、丙二硫醇、丁二硫醇、戊二硫醇、己二硫醇、辛二硫醇)，得到固体化合物SS-L2、SS-L3、SS-L4、SS-L5、SS-L6和SS-L8。

SS-L2：IR:2927,2854,1765,1619,899cm^-1；ESI-MS:m/z 529.6[M+H]⁺；HRESIMS:m/z529.2174[M+H]⁺,calc for C₂₈H₃₆N₂O₄S₂＝529.2189；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:5.66(d,J＝1.8Hz,2H),3.31～3.34(m,2H),3.10～3.20(m,4H),2.90～2.97(m,6H),2.77～2.81(d,J＝14.7Hz,2H),2.52～2.65(m,6H),1.92(d,J＝10.8Hz,2H),1.82～1.88(m,2H),1.59～1.60(m,2H),1.33～1.48(m,8H)。

SS-L3：IR:2923,2844,1755,1637,898cm^-1；ESI-MS:m/z 543.6[M+H]⁺；HRESIMS:m/z543.2336[M+H]⁺,calc for C₂₉H₃₈N₂O₄S₂＝543.2346；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:5.63(s,2H),3.29～3.31(m,2H),3.10～3.17(m,4H),2.91～2.92(m,6H),2.76(d,J＝14.7Hz,2H),2.56～2.62(m,4H),2.48～2.54(dd,J＝6.0,10.8Hz,2H),1.88(d,J＝10.8Hz,2H),1.77～1.86(m,4H),1.52～1.56(m,2H),1.92～1.45(m,8H)。

SS-L4：IR:2924,2844,1771,1639,899cm^-1；ESI-MS:m/z 557.4[M+H]⁺；HRESIMS:m/z557.2505[M+H]⁺,calc for C₃₀H₄₀N₂O₄S₂＝557.2502；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.64(d,2H,J＝1.8Hz),3.35～3.26(m,2H),3.20～3.07(m,4H),2.99～2.87(m,6H),2.82～2.72(m,2H),2.56～2.47(m,6H),1.93～1.79(m,4H),1.68～1.61(m,4H),1.60～1.27(m,10H)。

SS-L5：IR:2926,2841,1765,1619,898cm^-1；ESI-MS:m/z 571.6[M+H]⁺；HRESIMS:m/z571.2656[M+H]⁺,calc for C₃₁H₄₂N₂O₄S₂＝571.2659；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ5.61(s,2H),3.34～3.21(m,2H),3.17～3.04(m,4H),2.96～2.83(m,6H),2.80～2.68(m,2H),2.54～2.42(m,6H),1.91～1.75(m,4H),1.60～1.47(m,6H),1.47～1.26(m,10H)。

SS-L6：IR:2927,2845,1765,1645,898cm^-1；ESI-MS:m/z 585.2[M+H]⁺；HRESIMS:m/z585.2805[M+H]⁺,calc for C₃₂H₄₄N₂O₄S₂＝585.2815；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:5.65(s,2H),3.31～3.33(m,2H),3.09～3.16(m,4H),2.92～2.95(m,6H),2.79(d,J＝15.0Hz,2H),2.49～2.56(m,6H),1.92(d,J＝11.1Hz),1.88～1.91(m,2H),1.31～1.58(m,18H)。

SS-L8：IR:2925,2844,1761,1639,899cm^-1；ESI-MS:m/z 613.6[M+H]⁺；HRESIMS:m/z613.3138[M+H]⁺,calc for C₃₄H₄₈N₂O₄S₂＝613.3128；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:5.62(s,2H),3.29～3.31(m,2H),3.07～3.13(m,4H),2.89～2.92(m,6H),2.74～2.84(m,2H),2.46～2.53(m,6H),1.90(d,J＝10.8Hz,2H),1.84～1.86(m,2H’),1.21～1.57(m,24H)。

实施例9：新型一叶萩型生物碱二聚体类化合物促神经分化活性的筛选与分析

Neuro-2a细胞(购于American type culture collection细胞库)复苏后，以生长培养基(MEM+10％FBS+100U/mL的青霉素和100μg/mL的链霉素)培养，种植在100mm的培养皿中，放入37℃、含5％CO2的恒温培养箱培养。细胞长至60～70％进行传代，吸去培养皿中的培养液，加入适量PBS清洗后用0.25％的胰蛋白酶消化45秒，待贴壁细胞呈圆球状后加生长培养基终止消化，混匀按1:10传代，三天一传。诱导神经细胞株分化时，细胞种植密度为2×10⁴个/35mm培养皿或1×10⁴个/孔(12孔板)，以生长培养基培养24小时后换为分化培养基(MEM+0.5％FBS+100U/mL的青霉素和100μg/mL的链霉素)，并加入一叶萩型生物碱类化合物处理48小时。神经细胞株的分化形态和神经突起通过免疫荧光染色的方法观察，具体步骤如下：

1)用PBS(含Ca²⁺/Mg²⁺)洗细胞1次后，加入800μL 4％多聚甲醛/4％蔗糖，室温固定20～30分钟；

2)用PBS洗3次，加入封闭液(含1％的牛血清白蛋白、4％的羊血清白蛋白和0.4％的Triton X-100的PBS)封闭20分钟；

3)弃掉封闭液，加入含β-tubulin III抗体(1:2000)的一抗稀释液(含1％的牛血清白蛋白、1％的羊血清白蛋白和0.4％的Triton X-100的PBS)，室温孵育1小时或4℃孵育过夜；

4)用PBS洗3次，加入含荧光二抗Alexa Fluor-546goat anti-mouse IgG抗体(1:4000)的稀释液(含1％的牛血清白蛋白和0.4％的Triton X-100的PBS)，室温孵育1小时；

5)最后，再用PBS洗3次后，可进行拍照。

采用高内涵仪器进行自动扫描拍照，并利用Cellomics view软件进行统计分析。定义神经突起长度大于两倍胞体的细胞为神经细胞，并进行统计分析。主要测量分析的参数有三个：1)细胞分化率；2)每个分化细胞的总神经突起的平均长度；3)每个分化细胞的最长神经突起的平均长度。结果见表1。

表1具有神经分化活性的代表化合物结果

实验结果的数据用mean±S.E.M(standard error of the mean)表示，并利用ANOVA检验的方法进行统计学处理，*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。

实施例10：LDH测定新型一叶萩型生物碱二聚体类化合物的细胞毒性

Neuro-2a细胞的培养方法参见实施例9。取对数期生长细胞，按5×10³个/孔的密度接种于96孔板，每孔100μL细胞悬液。设空白组、对照组和不同浓度的样品组，铺板过夜后加入不同浓度药物，每组设4个平行复孔。培养24小时后，每孔取50μL细胞培养基转移到新的96孔板，加入50μL LDH反应底物，混匀后避光反应20分钟，添加终止剂使反应终止(罗氏LDH检测试剂盒)。使用美国伯腾SynergyHT多功能酶标仪在490nm波长处检测吸光值，结果如图2所示。

从图2可看出，本发明新型一叶萩型生物碱二聚体类代表性化合物(10～60μM)对LDH的释放没有明显增加作用，说明这些化合物在60μM或以下的浓度时无细胞毒性。

实施例11：化合物SN3-L6、RS-SN3-L6和SN3-L7促神经细胞株分化活性的剂量研究

对于化合物SN3-L6、RS-SN3-L6和SN3-L7分别采取5μM、15μM和25μM的浓度进行促神经分化活性测定，实验方法与实施例9所述相同，结果如图3所示。从图3可看出，SN3-L6、RS-SN3-L6和SN3-L73个化合物均在15μM时达到最佳的促进神经分化和神经突起生长的活性。5μM时虽不能促进更多细胞分化，但可促进神经突起长度增长。

实施例12：化合物SN3-L6可激活CaMKII、ERK和Akt通路

Neuro-2a细胞的培养方法参见实施例9。细胞经SN3-L5(5μM或30μM)或者SN3-L6(15μM)处理5～120分钟后，用冰上预冷的DPBS洗一次，加RIPA裂解液(含蛋白酶抑制剂)，用细胞刮铲收集细胞并裂解；在4℃用12000rpm离心10分钟后收集上清细胞裂解液，用Bio-Rad蛋白分析试剂测定蛋白浓度。蛋白上样20μg/孔，进行SDS-PAGE电泳分离，后将蛋白转移到PVDF膜。用5％脱脂奶粉封闭，一抗孵育过夜，然后与抗鼠或者抗兔的辣根过氧化物酶标记二抗室温孵育1小时，最后用ECL检测***检测条带，将信号曝光到X-光片，用扫描仪进行扫描，结果如图4所示。

图4的Western blot结果表明，SN3-L5在5分钟的时候激活了Akt和ERK蛋白的磷酸化，使其磷酸化水平增高，并且可以持续激活至少2小时。SN3-L6在15分钟时分别激活了CaMKII，Akt和ERK蛋白，使其各自的磷酸化水平升高，且此种激活可至少持续2小时。

实施例13：多条信号通路参与介导化合物SN3-L6诱导的促神经分化作用

先将各种信号蛋白的抑制剂预处理1小时，再加SN3-L6(25μM)共处理48小时，检测神经细胞株分化的实验方法与实施例9所述相同。抑制剂的浓度分别为：LY294002，10μM；SB202190，10μM；SP600125，5μM；U0126，10μM；NSC23766，10μM；H89，0.5μM；Chelerythrinechloride 0.5μM；KN92,1μM；KN93，1μM。

结果如图5所示，从图中可看到，PI3K的抑制剂LY290042、MEK的抑制剂U0126、CaMKII的抑制剂KN93、JNK的抑制剂SP600125和Rac1的抑制剂NSC23766显著抑制了SN3-L6诱导的促神经分化和神经突生长，提示这些信号转导通路在SN3-L6活性中具有重要作用。

实施例14：化合物SN3-L6对Aβ诱导的损伤具有保护作用

β淀粉样蛋白(β-Amyloid 1-42,简称Aβ1-42)，是根据阿尔茨海默病人大脑中的毒性物质β淀粉样蛋白的氨基酸序列设计合成的多肽，购于rPeptide生物技术公司。用500μl1％的氨水溶解，超声1分钟，再加PBS配成100μM的母液，混匀后分装放-80℃保存。使用之前，根据需要取适量体积放37℃老化20小时。取胚胎期18天的斯普拉-道来(SpragueDawley)大鼠胎鼠的海马组织，用胰酶消化后得到单个分离神经元，种植于多聚赖氨酸(Poly-D-Lysine)包被的18mm玻片上，密度为2×10⁵/玻片，置于添加了2％B27的Neurobasal培养基中培养。每三天换一次液(加入2％B27的Neurobasal培养基)，每次半换。在第7天加入Aβ1-42(1μM)处理48小时，同时加入DMSO或SN3-L6(25μM)。用4％多聚甲醛固定神经元，并用原位红光细胞凋亡检测试剂盒(In Situ Cell Death Detection kit,TMRRed，Roche公司)对凋亡的神经元进行染色，同时用DAPI(1:4000)染细胞核。封片后用ZeissImager A2荧光显微镜拍摄，计算出凋亡细胞的百分率(即红光细胞占DAPI数的百分比)。

统计结果如图6所示，图6表明，仅～9.9％的正常神经元处于凋亡状态，Aβ处理后细胞凋亡率上升至～18.1％，而SN3-L6和Aβ1-42共处理的细胞凋亡率明显减少(～3.4％)，提示SN3-L6对Aβ诱导的海马神经元损伤具有保护作用。

实施例15：化合物SN3-L6可促进树突棘数量增加

离体培养的海马神经元的制备方法与实施例14所述相同，密度为1×10⁵/玻片，每三天换一次液(加入2％B27的Neurobasal培养基)，每次半换。于体外培养第10天采用磷酸钙方法转染绿色荧光蛋白(GFP)，第14天时加入DMSO或SN3-L6(25μM)。处理48小时后，用4％多聚甲醛固定，封片后用Zeiss Imager A2荧光显微镜拍摄GFP神经元(3次独立实验，每次15个神经元)，用Image-Pro Plus软件对树突棘进行统计分析，得到单位树突长度上的树突棘数量。结果如图7所示，图7显示，SN3-L6可促进树突棘数量增加。

实施例16：化合物SN3-L6可促进PSD-95簇集数量的增加

离体培养的海马神经元的制备方法与实施例14所述相同，密度为0.2×10⁵/玻片，每三天换一次液(加入2％B27的Neurobasal培养基)，每次半换。于培养第14天时加入DMSO或SN3-L6(25μM)。处理48小时后，先用4％多聚甲醛固定5分钟，再用预冷的甲醇在冰上固定15分钟。之后进行荧光免疫染色，一抗PSD95(1:300)4℃过夜，然后孵育二抗Mouse 488(1:300)2小时。用Zeiss Imager A2荧光显微镜拍照。结果如图8所示，图8显示，SN3-L6促进PSD-95簇集数量的增加。

实施例17：化合物SN3-L6可调控蛋白合成

蛋白合成的多少可使用puromycin(嘌呤霉素)标记方法测定。Puromycin具有与tRNA分子末端类似的结构，能够同氨基酸结合，代替氨酰化的tRNA同核糖体的A位点结合，并掺入到生长的肽链中。虽然puromycin能够同A位点结合，但是不能参与随后的任何反应，因而导致蛋白质合成的终止并释放出C-末端含有Puromycin的不成熟的多肽。OPP(O-propargyl-puromycin)是puromycin的氧代炔丙基修饰物，和puromycin一样，也可以掺入新生的肽链中，标记新合成的蛋白。

本实施例分别在Neuro-2a细胞和离体培养的海马神经元中(培养方法参见实施例9和实施例14)用puromycin标记的方法测定化合物SN3-L6是否调控蛋白合成。细胞经DMSO、SN3-L6(25μM)、蛋白合成抑制剂cycloheximide(CHX；50μM)或anisomycin(AS；2μM)处理2小时后，用ThePlus OPP Alexa488Protein Synthesis Assay试剂盒(LifeTechnologies)将新合成的蛋白标记上带绿色荧光的OPP，封片后用Zeiss Imager A2荧光显微镜拍摄细胞(3次独立实验，每次拍15张)。用ImageJ软件对每张照片的荧光密度进行统计分析，得到每组细胞OPP的平均光密度。结果显示，SN3-L6促进新生蛋白表达增加(OPP的光密度增高)，而蛋白合成抑制剂CHX和AS抑制新生蛋白表达(OPP的光密度降低；图9A–D)。

在另一种方法中，Neuro-2a细胞经SN3-L6(25μM)或CHX(25μM)处理1～24小时后，加入puromycin(1μM)处理30分钟标记新生蛋白。接着，用RIPA裂解液(含蛋白酶抑制剂)收集细胞裂解蛋白，随后进行Western blot实验，用puromycin的抗体检测puromycin标记的蛋白含量。结果显示，SN3-L6在1、2、4和24小时均增加puromycin标记的新生蛋白表达，而该作用可被蛋白合成抑制剂CHX显著抑制(图9E,F)。

实施例18：化合物SN3-L6通过促进蛋白合成促进树突棘增多

离体培养的海马神经元的制备方法与实施例14所述相同，密度为1×10⁵/玻片，每三天换一次液(加入2％B27的Neurobasal培养基)，每次半换。于体外培养第10天采用磷酸钙方法转染绿色荧光蛋白(GFP)，第14天时分别加入DMSO、SN3-L6(25μM)、CHX(12.5μM)+SN3-L6(25μM)、AS(0.5μM)+SN3-L6(25μM)。处理48小时后，用4％多聚甲醛固定，封片后用Zeiss Imager A2荧光显微镜拍摄GFP神经元(3次独立实验，每次15个神经元)，用Image-Pro Plus软件对树突棘进行统计分析，得到单位树突长度上的树突棘数量。结果如图10所示，图10显示，SN3-L6促进树突棘数量增加的这种作用可被蛋白合成抑制剂CHX和AS抑制，说明SN3-L6是通过刺激蛋白合成来调控树突棘形成的。

实施例19：化合物SN3-L6缩短小鼠在Morris水迷宫测试中的逃逸潜伏期

Morris水迷宫的主体是一个直径1.2米水池，水池其中一个区域放有一个水下的隐藏平台，并在水池的四周设置可供小鼠定位的标记。小鼠经过连续几天的训练，找到平台所需的时间(即逃逸潜伏期)反映了小鼠对于空间的学***台，说明SN3-L6具有促进空间学习记忆能力的活性。

上述实施例10–19中的实验结果的数据用mean±S.E.M表示，并用ANOVA检验和Student’s-t检验的方法进行统计学处理，当P<0.05时有统计学意义，*P<0.05,**P<0.01，***P<0.001。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐，其特征在于，具有如式(1)所示的化学结构：

式中：X是或者S中的一个，其中的R基团是CH₃、C₂H₅、n-C₃H₇、n-C₄H₉、n-C₅H₁₁或者H中的一个；m是0、1、2、3、4、5、6、7、8或者9中的一个；式中的数字1、

2、3、4、5、6、7和8指示手性中心位置，该位置的构型是R或者S构型中的一种。

2.根据权利要求1所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐，其特征在于，其形式为光学异构混合物或光学纯单体。

3.权利要求1所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将左旋一叶萩碱和叠氮基三甲基硅烷进行反应，得到化合物S-SN-1和R-SN-1；(2)将化合物S-SN-1和R-SN-1分别与氢气进行反应，分别得到化合物S-SN-2和R-SN-2；(3)将化合物S-SN-2与不同碳链长度的二酰氯进行反应，分别得到一叶萩碱二聚体类化合物SN0-L2、SN0-L3、SN0-L4、SN0-L5和SN0-L6；

其中，左旋一叶萩碱结构式为：

化合物S-SN-1结构式为：

化合物R-SN-1结构式为：

化合物S-SN-2结构式为：

化合物R-SN-2结构式为：

化合物SN0-L2结构式为：

化合物SN0-L3结构式为：

化合物SN0-L4结构式为：

化合物SN0-L5结构式为：

化合物SN0-L6结构式为：

4.根据权利要求3所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的制备方法，其特征在于，所述不同碳链长度的二酰氯为乙二酰氯、丙二酰氯、丁二酰氯、戊二酰氯和己二酰氯。

5.根据权利要求3所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体步骤为：(1)以二氯甲烷为溶剂，将摩尔比为1：(5-8)的左旋一叶萩碱和叠氮基三甲基硅烷在醋酸及催化量的DBU催化下，常温下反应7-10小时，左旋一叶萩碱和醋酸的摩尔比为1：(5-8)；停止反应后，氯化铵淬灭，水洗，CH₂Cl₂萃取，硅胶柱分离纯化，得到化合物S-SN-1和R-SN-1；(2)分别将化合物S-SN-1和R-SN-1与催化量的10％钯碳催化剂加入到CH₂Cl₂溶剂中，抽真空，充氢气，反复置换3-4次，常温搅拌反应3-5小时后，过滤，滤液减压旋干；硅胶柱分离纯化，分别得到化合物S-SN-2和R-SN-2；(3)将化合物S-SN-2减压旋干，真空油泵抽干溶剂，在无水N,N-二异丙基乙胺作碱、无水CH₂Cl₂为溶剂、-15℃低温的条件下分别和不同碳链长度的二酰氯按照摩尔比1.0：(0.5-0.6)反应4-6小时后，NH₄Cl淬灭，用饱和碳酸氢钠与饱和食盐水依次分别洗2次，CH₂Cl₂萃取，减压旋干，硅胶柱分离纯化，分别得到一叶萩碱二聚体类化合物SN0-L2、SN0-L3、SN0-L4、SN0-L5和SN0-L6。

6.权利要求1所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将左旋一叶萩碱分别与甲胺、乙胺、正丙胺、正丁胺和正戊胺反应，分别得到化合物S-SN-5、R-SN-5、S-SN-3、S-SN-4、S-SN-6和S-SN-7；(2)将化合物S-SN-5和R-SN-5混合，然后与己二酰氯进行反应，再通过高效液相一次性分离得到3个互为非对映异构体的二聚体化合物，分别是SN3-L6、RS-SN3-L6和RR-SN3-L6；(3)将化合物S-SN-5分别与丁二酰氯、戊二酰氯、庚二酰氯和辛二酰氯进行反应，分别得到二聚体化合物SN3-L4、SN3-L5、SN3-L7和SN3-L8；(4)将化合物S-SN-3、S-SN-4、S-SN-6和S-SN-7分别与己二酰氯进行反应，分别得到二聚体化合物SN1-L6、SN2-L6、SN4-L6和SN5-L6；

其中，左旋一叶萩碱结构式为：

化合物S-SN-5结构式为：

化合物R-SN-5结构式为：

化合物S-SN-3结构式为：

化合物S-SN-4结构式为：

化合物S-SN-6结构式为：

化合物S-SN-7结构式为：

化合物SN3-L6结构式为：化合物RS-SN3-L6结构式为：化合物RR-SN3-L6结构式为：化合物SN3-L4结构式为：

化合物SN3-L5结构式为：化合物SN3-L7结构式为：

化合物SN3-L8结构式为：

化合物SN1-L6结构式为：

化合物SN2-L6结构式为：

化合物SN4-L6结构式为：

化合物SN5-L6结构式为：

7.根据权利要求6所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体步骤为：(1)将左旋一叶萩碱分别与甲胺、乙胺、正丙胺、正丁胺和正戊胺按照摩尔比1：(5-10)在磷酸钾催化的条件下反应12-18小时，左旋一叶萩碱与磷酸钾的摩尔比为1.0：(0.05-0.1)，NH₄Cl淬灭，水洗，CH₂Cl₂萃取，硅胶柱分离纯化，分别得到化合物S-SN-5、R-SN-5、S-SN-3、S-SN-4、S-SN-6和S-SN-7；(2)将化合物S-SN-5和R-SN-5混合，然后将混合物在无水N,N-二异丙基乙胺作碱、无水CH₂Cl₂为溶剂、-15℃低温的条件下与己二酰氯按照摩尔比1.0：(0.5-0.6)进行反应4-6小时后，NH₄Cl淬灭，用饱和碳酸氢钠与饱和食盐水依次分别洗2次，CH₂Cl₂萃取，减压旋干，硅胶柱分离纯化，再通过高效液相一次性分离得到3个互为非对映异构体的二聚体化合物，分别是SN3-L6、RS-SN3-L6和RR-SN3-L6；(3)将化合物S-SN-5在无水N,N-二异丙基乙胺作碱、无水CH₂Cl₂为溶剂、-15℃低温的条件下，分别与丁二酰氯、戊二酰氯、庚二酰氯和辛二酰氯按照摩尔比1.0：(0.5-0.6)进行反应4-6小时后，NH₄Cl淬灭，用饱和碳酸氢钠与饱和食盐水依次分别洗2次，CH₂Cl₂萃取，减压旋干，硅胶柱分离纯化，分别得到二聚体化合物SN3-L4、SN3-L5、SN3-L7和SN3-L8；(4)操作条件同步骤(3)，将化合物S-SN-3、S-SN-4、S-SN-6和S-SN-7分别与己二酰氯按照摩尔比1.0：(0.5-0.6)进行反应，分别得到二聚体化合物SN1-L6、SN2-L6、SN4-L6和SN5-L6。

8.权利要求1所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将右旋一叶萩碱与正丙胺进行反应，得到化合物(+)-S-SN-5和(+)-R-SN-5；(2)将化合物(+)-R-SN-5与己二酰氯进行反应，得到化合物(+)-SN3-L6；

其中，右旋一叶萩碱结构式为：

化合物(+)-S-SN-5结构式为：；

化合物(+)-R-SN-5结构式为：

化合物(+)-SN3-L6结构式为：

9.根据权利要求8所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体步骤为：(1)将右旋一叶萩碱溶于CH₂Cl₂中，加入K₃PO₄，随后加入正丙胺，室温搅拌反应12-18小时，右旋一叶萩碱与K₃PO₄的摩尔比为1.0：(0.05-0.1)，右旋一叶萩碱与正丙胺的摩尔比为1.0：(5-10)，NH₄Cl淬灭，水洗，CH₂Cl₂萃取，硅胶柱分离纯化，得到化合物(+)-S-SN-5和(+)-R-SN-5；(2)化合物(+)-R-SN-5减压旋干，真空油泵抽干溶剂，然后在无水DIPEA催化作碱、无水CH₂Cl₂溶剂为溶剂、-15℃低温的条件下和己二酰氯按照摩尔比1.0：(0.5-0.6)反应4-6小时后，NH₄Cl淬灭，用饱和碳酸氢钠与饱和食盐水依次分别洗2次，CH₂Cl₂萃取，减压旋干，硅胶柱分离纯化，得到化合物(+)-SN3-L6。

10.权利要求1所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将左旋一叶萩碱分别和不同的二硫醇反应，分别得到化合物SS-L2、SS-L3、SS-L4、SS-L5、SS-L6、SS-L8和SS-L9；

其中，左旋一叶萩碱结构式为：

化合物SS-L2结构式为：

化合物SS-L3结构式为：

化合物SS-L4结构式为：

化合物SS-L5结构式为：

化合物SS-L6结构式为：

化合物SS-L8结构式为：

化合物SS-L9结构式为：

11.根据权利要求10所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的制备方法，其特征在于，所述不同的二硫醇为乙二硫醇、丙二硫醇、丁二硫醇、戊二硫醇、己二硫醇、辛二硫醇和壬二硫醇。

12.根据权利要求10所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体步骤为：将摩尔比为1.0：(0.2-0.5)的左旋一叶萩碱与K₃PO₄溶于体积比为4:1的CH₂Cl₂和CH₃OH的混合溶剂中，搅拌，将不同的二硫醇分别溶于适量CH₃OH，并缓慢加入反应体系中，室温下搅拌过夜，左旋一叶萩碱与二硫醇的摩尔比为1.0：(0.5-0.6:)；将反应溶剂旋干，水洗，CH₂Cl₂萃取，减压旋干，硅胶柱分离纯化，分别得到化合物SS-L2、SS-L3、SS-L4、SS-L5、SS-L6、SS-L8和SS-L9。

13.权利要求1所述的一叶萩型生物碱二聚体类化合物或其可药用盐在制备促进神经分化和神经突起生长的药物，制备促进CaMKII、Akt和ERK蛋白活性的药物，制备拮抗β淀粉样蛋白引起的神经毒性的药物，制备促进树突棘形成和功能的药物，制备促进蛋白质合成的药物，制备治疗由神经突起或神经突触发育异常或受损所导致的认知障碍、学习记忆障碍、神经发育异常、神经退行性疾病、神经损伤或情绪紊乱疾病的药物组合物中的应用。