CN104721068A

CN104721068A - 琼枝麒麟菜多糖在制备抗氧化护肤品中的用途

Info

Publication number: CN104721068A
Application number: CN201510046743.7A
Authority: CN
Inventors: 王一飞; 王怀玲; 董栋; 廖晓凤; 袁晓; 王巧利
Original assignee: Guangzhou Jinan Biomedicine Research and Development Base Co Ltd
Current assignee: Guangzhou Jinan Biomedicine Research and Development Base Co Ltd
Priority date: 2015-01-29
Filing date: 2015-01-29
Publication date: 2015-06-24

Abstract

本发明公开了一种琼枝麒麟菜多糖在制备抗氧化护肤品中的用途。本发明的琼枝麒麟菜多糖的平均分子质量的范围为1000-100000，该琼枝麒麟菜多糖在制备抗氧化护肤品包括洁面啫喱、精华素、乳液、原液、爽肤水、面霜或面膜，其中爽肤水的原料包括：琼枝麒麟菜多糖、透明质酸、D-泛醇、燕麦β-葡聚糖、海藻糖、尿囊素、玫瑰提取物、1,2-戊二醇、甘油、防腐剂、余量为水。本发明的琼枝麒麟菜多糖具有明显的抗氧化功能，保湿性优良，具有保质时间长和抗氧化效果时间持续等优点，本发明的爽肤水无毒副作用，吸收快，能有效防止皱纹的生成，延缓皮肤老化，让肌肤充满活力与光泽，有利于该琼枝麒麟菜多糖护肤品的推广和应用。

Description

琼枝麒麟菜多糖在制备抗氧化护肤品中的用途

技术领域

本发明属于天然产物化学领域，具体涉及一种琼枝麒麟菜多糖在制备抗氧化护肤品中的用途。

背景技术

氧化是肌肤衰老的最大威胁，饮食不健康，日晒、压力、环境污染等都能让肌肤自由基泛滥，从而产生面色黯淡、缺水等氧化现象，人体的抗氧化物质有自身合成，有由食物供给，也有由周围的环境和氧气引起。我们无时无刻都处在氧化的环境中，所以，无论从健康层面还是从护肤层面，我们都需要在日常生活中注意抗氧化，尤其是皮肤的抗氧化作用，需要人们的注意。

活性氧(ROS)是生物体内一类活性含氧化合物的总称。主要包括超氧阴离子、羟自由基和过氧化氢等。在静息条件下，细胞内ROS的水平被控制在很低的范围，但在时间以及外界环境影响下，例如：暴露于紫外线(UVexposure)或热源(heat exposure)下等，ROS的量会急剧增多，进一步导致氧化应激和抗氧化防御间平衡失调，从而引起生物膜和大分子物质发生脂质过氧化损伤，引起细胞损坏，会使皮肤加速衰老，出现斑点，严重影响人体肌肤的健康。

目前，以改善或预防因日晒等生产的皮肤变黑，色素沉淀引起的褐斑、雀斑、抗氧化等为目的，使用化妆水、乳液、乳膏、美容液、面膜等美白化妆品或抗老化护肤品广泛采用L-抗坏血酸为有效成分。但是，由于L-抗坏血酸容易被氧化或水解，导致L-抗坏血酸的功效降低，损害护肤品的品质，对褐斑、雀斑、抗氧化的作用降低，无法满足现代人的需求。因此，研究发开出一种有效抗氧化、可以防止皮肤松驰及皱纹产生，改善紫外线引起的皮肤色素沉淀，淡化老年斑及其它色素斑的护肤品是当前亟需解决的难题。

麒麟菜又名海燕窝，是藻类植物药红翎菜科植物麒麟菜或珍珠麒麟菜的藻体，具有极高的营养价值，分布我国台湾沿岸，日本、马来群岛、印度尼西亚等地。多糖硫酸酯是糖羟基上带有硫酸基团的多糖，也称硫酸多糖。可经天然提取或硫酸化的结构修饰得到。近年的研究证明：多糖硫酸酯无论在体内还是体外，都显示了不同程度的抗氧化活性，尤其与目前抗氧化护肤品相比，其细胞毒作用小，效果显著，报纸时间长的优点而得到了广泛的关注，尤其是多糖硫酸酯的抗氧化活性的护肤品前景十分的广阔。

发明内容

为了解决现有技术抗氧化护肤品中效果不明显，抗氧化效果差的缺陷，本发明的目的在于提供一种琼枝麒麟菜多糖在制备抗氧化护肤品中的用途，已解决以上缺陷。

本发明的琼枝麒麟菜多糖在制备抗氧化护肤品中的用途，所述的琼枝麒麟菜多糖的的平均分子质量的范围为1000-100000；该平均分子质量的范围为1000-100000的琼枝麒麟菜多糖是通过下述制备方法得到，其包括以下步骤：

(1)称取一定量的琼枝麒麟菜，将洗净的琼枝麒麟菜，使琼枝麒麟菜的含水量不超过8％时用粉粹机粉碎；

(2)将粉粹过后的琼枝麒麟菜浸泡0.5h，然后用加热回流装置进行热水提取多糖3h；

(3)冷却至35-45℃后收集滤液，滤液用旋转蒸发仪减压浓缩至原滤液体积的2/3；

(4)加入3倍体积的95％的乙醇，并不断搅拌，置4℃冰箱醇沉12h，四层纱布过滤，收集过滤物，待残余酒精部分挥发后进行冷冻干燥，最终得到的白色纤维状物质即为琼枝麒麟菜多糖。

本发明制备所得的平均分子质量的范围为1000-100000的琼枝麒麟菜多糖为β-(1-3)-D-半乳糖-4-硫酸基、a-(1-4)-3，6-内醚-D-半乳糖和a-D-(1-6)-葡萄糖硫酸酯中的一种或其组合物。

本发明所述的抗氧化护肤品包括洁面啫喱、精华素、乳液、原液、爽肤水、面霜和面膜。

本发明所述的抗氧化护肤品优选为爽肤水。

另外，本发明的爽肤水原料包括：琼枝麒麟菜多糖1～10份、透明质酸0.1～1份、D-泛醇1～10份、燕麦β-葡聚糖1～10份、海藻糖1～10份、尿囊素0.1～1份、玫瑰提取物0.5～5份、1,2-戊二醇1～10份、甘油1～10份、防腐剂0.05～1份、水加至100份。

进一步的，所述的爽肤水原料优选为：琼枝麒麟菜多糖5份、透明质酸0.5份、D-泛醇1份、燕麦β-葡聚糖5份、海藻糖5份、尿囊素0.05份、玫瑰提取物2.5份、1,2-戊二醇5份、甘油5份、防腐剂0.05份、水加至100份。

此外，本发明还提供了一种制备爽肤水的制备方法，包括以下步骤：

(1)将处方量的琼枝麒麟菜多糖配置为1～10mg/ml的琼枝麒麟菜多糖溶液；

(2)按照处方量将甘油加入透明质酸中分散，加水溶解，搅拌均匀，得透明质酸溶液；

(3)将海藻糖和尿囊素用水溶解后与步骤(1)得到的透明质酸溶液混合，搅拌均匀，得混合溶液；

(4)将琼枝麒麟菜多糖溶液、D-泛醇、燕麦β-葡聚糖、玫瑰提取物、1,2-戊二醇和防腐剂依次加入步骤(3)得到的混合溶液，加水搅拌均匀，即得爽肤水。

本发明将提取的琼枝麒麟菜多糖进行单独的细胞试验，所用的细胞为人永生表皮细胞(HaCaT)。试验结果显示琼枝麒麟菜多糖具有明显的抗氧化活性的效果。将提取的琼枝麒麟菜多糖进行体外抗氧化机制研究，试验结果显示，琼枝麒麟菜多糖主要作用于抑制ROS的产生。

总之，本发明的琼枝麒麟菜多糖在制备抗氧化护肤品中的用途，与现有技术相比具有如下优势：

1)本发明的琼枝麒麟菜多糖具有明显的抗氧化功能，保湿性优良，具有保质时间长和抗氧化效果时间持续等优点；

2)本发明的琼枝麒麟菜多糖为天然制剂，具有保湿、抗氧化，无毒副作用，吸收快，能有效防止皱纹的生成，延缓皮肤老化，让肌肤充满活力与光泽的优势，有利于该琼枝麒麟菜多糖护肤品的推广和应用。

附图说明：

图1为琼枝麒麟菜多糖对HaCaT细胞的细胞毒性试验结果；

图2为维生素C对HaCaT细胞的细胞毒性试验结果；

图3为双氧水对HaCaT细胞的细胞毒性试验结果；

图4为6h时琼枝麒麟菜多糖、维生素C和双氧水对HaCaT细胞的抗氧化活性图；

图5为12h时琼枝麒麟菜多糖、维生素C和双氧水对HaCaT细胞的抗氧化活性图。

具体实施方式：

以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。

实施例1、本发明琼枝麒麟菜多糖的制备

(4)加入3倍体积的95％的乙醇，并不断搅拌，置4℃冰箱醇沉12h，四层纱布过滤，收集过滤物，待残余酒精部分挥发后进行冷冻干燥，最终得到的白色纤维状物质即为平均分子质量的范围为1000-100000的琼枝麒麟菜多糖。

实施例2、本发明的琼枝麒麟菜多糖的细胞毒性试验

1、试验材料

将实施例1制备所得琼枝麒麟菜多糖用纯水配置为1mg/mL的水溶液，保存于-20℃备用。

2、试验方法

将1mg/mL的琼枝麒麟菜多糖水溶液倍比稀释成不同浓度(起始浓度为500μg/mL)，采MTT法测定琼枝麒麟菜多糖的细胞毒性。

3、试验结果

如图1所示，当琼枝麒麟菜多糖(EGP)浓度达到500μg/mL时HaCaT细胞的存活率为74.85％；如图2所示，阳性对照药物维生素C 100μg/mL时HaCaT细胞的存活率达到90％；如图3所示，双氧水当浓度达到1μg/mL时HaCaT细胞的存活率达到90％；从图1、图2和图3可以看出琼枝麒麟菜多糖对HaCaT细胞的最大无毒浓度最大，对HaCaT细胞的毒害性最小。

实施例3、本发明琼枝麒麟菜多糖的抗氧化活性研究试验

1、试验材料

按照实施例1的制备方法，提取平均分子量为45000，单糖硫酸基取代度为2.13的a-D-(1-6)-葡萄糖硫酸酯的琼枝麒麟菜多糖(EGP)。

2、试验方法

2.1、参照实施例2细胞毒性试验结果，将a-D-(1-6)-葡萄糖硫酸酯的琼枝麒麟菜多糖制备成起始浓度为240μg/mL的稀释液，采用流式检测试验进行检测试验。

2.2、流式检测试验方法如下：

将处于对数生长期的HaCaT细胞用DMEM生长液调整至细胞密度为2.0×10⁵cells/ml，在37℃，过夜。待细胞长成单层后，弃培养液，用灭菌PBS洗1遍，分别设置H₂O₂组、H₂O₂+EGP组(图4、图5中用20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL、160μg/mL、240μg/mL表示)、VC+H₂O₂组、H₂O₂组和完全培养基组(图4、图5中用N表示)，各加2mlHaCaT细胞液，温度设为37℃(设置不同药物浓度、同孵育时间)。孵育完毕，将荧光试剂DCFH-DA用无血清培养基稀释成终浓度为50umol/l，每孔加入1ml，温度设为37℃，95％O2,，5％CO2,，孵育1h-30min。

3、试验结果

首先通过MTT实验确定EGP和维生素C和双氧水的最大无毒浓度，首先用双氧水刺激使产生氧化应激状态，接着再分别加EGP和维生素C(为阳性对照药)，检测ROS的相对释放情况，得知在高浓度时能够抑制ROS的产生，具有一定的抗氧化效果，结果如图4、图5所示。

实施例4、本发明的琼枝麒麟菜多糖的爽肤水制备

处方：

琼枝麒麟菜多糖1份、透明质酸1份、D-泛醇1份、燕麦β-葡聚糖10份、海藻糖1份、尿囊素1份、玫瑰提取物0.5份、1,2-戊二醇10份、甘油5份、防腐剂0.05份、水加至100份。

制备工艺：

实施例5、本发明的琼枝麒麟菜多糖的爽肤水制备

处方：

琼枝麒麟菜多糖5份、透明质酸0.5份、D-泛醇1份、燕麦β-葡聚糖5份、海藻糖5份、尿囊素0.05份、玫瑰提取物2.5份、1,2-戊二醇5份、甘油5份、防腐剂0.05份、水加至100份。

制备工艺：

实施例6、本发明的琼枝麒麟菜多糖的爽肤水制备

处方：

琼枝麒麟菜多糖10份、透明质酸0.1份、D-泛醇1份、燕麦β-葡聚糖0份、海藻糖1份、尿囊素1份、玫瑰提取物5份、1,2-戊二醇1份、甘油5份、防腐剂0.05份、水加至100份。

制备工艺：

实施例7、本发明的琼枝麒麟菜多糖的乳液制备

处方：

琼枝麒麟菜多糖1份、透明质酸钠0.05份、海藻糖2份、蘑菇葡聚糖1份、丁二醇3份、尿囊素0.2份、玫瑰提取物2份、霍霍巴籽油2份、氢化聚癸烯3份、聚二甲基硅氧烷2份、辛酸/癸酸三甘油酯3份、甘油5份、乳化剂3份、防腐剂0.20份、增稠剂0.1份、水加至100份。

制备工艺：

(2)按照处方量将透明质酸钠，加水溶解分散，搅拌均匀，得透明质酸溶液；

(3)按处方量加入甘油、丁二醇、海藻糖和尿囊素、增稠剂，用水溶解，加热至75℃；

(4)按处方量将霍霍巴籽油、氢化聚癸烯、聚二甲基硅氧烷、辛酸/癸酸三甘油酯、乳化剂加热至75℃，搅拌均匀；

(5)将(3)快速倒入(4)中，恒温均质3～5min，冷却；

(6)冷却至60℃以下，加入(1)、(2)、蘑菇葡聚糖、玫瑰提取物，均质；

(7)冷却至40℃以下，按照处方量加入防腐剂和香精。

实施例8、本发明的琼枝麒麟菜多糖的洁面啫喱制备

处方：

琼枝麒麟菜多糖2份、甘油5份、癸基葡糖苷6份、椰油酰苹果氨基酸钠6份、月桂醇聚醚硫酸酯钠3份、增稠剂1份、增溶剂0.2、香精0.05、水加至100份。

制备工艺：

(2)将琼枝麒麟菜多糖溶液、甘油、癸基葡糖苷、椰油酰苹果氨基酸钠、月桂醇聚醚硫酸酯钠、增溶剂0.2、香精0.05、依次加入水中；

(3)按处方量将增稠剂加入(2)中，搅拌至完全溶胀即可得洁面啫喱。

实施例9、本发明琼枝麒麟菜多糖抗氧化爽肤水的产品安全性评价(人体皮肤斑贴试验)

1.1试验品

本发明实施例5制备的爽肤水

1.2受试人群

数目：50人

年龄：18-48岁之间

性别：女35人，男15人

健康状况：受试者皮肤健康，无皮肤病过敏史，符合受试者志愿入选标准。

1.3斑贴方法：

选用合格的斑贴器，以封闭式斑贴试验方法，将试验品约0.020-0.025mL滴于斑贴器内，外用专用胶带贴覆于受试者背部，24小时后去除试验品，分别去除后0.5、6、12、24、48小时观察皮肤反应，按照《化妆品卫生规范》中皮肤反应分级标准记录其结果。

1.4试验结果

本试验50名受试者通过本发明实施例5制备的抗氧化爽肤水的斑贴试验，在0.5、6、12、24、48小时观察皮肤反应，其中0例出现皮肤不良反应，说明本发明抗氧化爽肤水产品使用安全。

实施例10、本发明琼枝麒麟菜多糖爽肤水的抗氧化效果

1.1试验品：

本发明实施例5制备的爽肤水

1.2受试人群

数目：50人

年龄：18-48岁之间

性别：女

1.3测试方法：

受试者脸部清洁后，将实施例5制备的爽肤水涂覆到左右两个脸颊上，观察和感受使用效果。

1.4测试评估结果如下：

表1实施例5的爽肤水的试用(8周)反馈总结表

测试者均表示，实施例5制备的爽肤水产品，使用后也不粘腻，吸收快，皮肤迅速饱满水润。经常使用后，提高了肌肤含水量，增强了肌肤保湿力和增强皮肤弹性，更可提高肌肤水嫩润泽感，具有去皱纹，去斑点的效果。同时使用者的问卷中未有人有过敏现象。

实施例11、本发明琼枝麒麟菜多糖乳液的抗氧化效果

1.1试验品：

本发明实施例7制备的乳液

1.2受试人群

数目：50人

年龄：18-48岁之间

性别：女

1.3测试方法：

受试者脸部清洁后，将实施例7制备的乳液涂覆到左右两个脸颊上，观察和感受使用效果。

1.4测试评估结果如下：

表2实施例7的乳液的试用(8周)反馈总结表

测试者均表示，实施例7制备的乳液产品，使用后也不粘腻，吸收快，皮肤迅速饱满水润。经常使用后，提高了肌肤含水量，增强了肌肤保湿力和增强皮肤弹性，更可提高肌肤水嫩润泽感，具有去皱纹，去斑点的效果。同时使用者的问卷中未有人有过敏现象。

Claims

1.琼枝麒麟菜多糖在制备抗氧化产品中的用途，所述的产品为护肤品。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的琼枝麒麟菜多糖的平均分子质量的范围为1000-100000。

3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述的琼枝麒麟菜多糖为β-（1-3）-D-半乳糖-4-硫酸基、a-（1-4）-3，6-内醚-D-半乳糖和a-D-（1-6）-葡萄糖硫酸酯中的一种或其组合物。

4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的护肤品包括洁面啫喱、精华素、乳液、原液、爽肤水、面霜和面膜。

5.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述的护肤品为爽肤水。

6.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述的爽肤水原料包括：琼枝麒麟菜多糖1~10份、透明质酸0.1~1份、D-泛醇1~10份、燕麦β-葡聚糖1~10份、海藻糖1~10份、尿囊素0.1~1份、玫瑰提取物0.5~5份、1,2-戊二醇1~10份、甘油1~10份、防腐剂0.05~1份、水加至100份。

7.如权利要求4或5所述的用途，其特征在于，所述的爽肤水的制备方法，包括以下步骤：

（1）将处方量的琼枝麒麟菜多糖配置为1~10mg/ml的琼枝麒麟菜多糖溶液；

（2）按照处方量将甘油加入透明质酸中分散，加水溶解，搅拌均匀，得透明质酸溶液；

（3）将海藻糖和尿囊素用水溶解后与步骤（1）得到的透明质酸溶液混合，搅拌均匀，得混合溶液；

(4)将琼枝麒麟菜多糖溶液、D-泛醇、燕麦β-葡聚糖、玫瑰提取物、1,2-戊二醇和防腐剂依次加入步骤（3）得到的混合溶液，加水搅拌均匀，即得爽肤水。