CN104693279A - 关于信号传导及转录激活因子抑制多肽及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物领域，具体涉及具有抑制信号传导及转录激活因子，预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移的多肽。其序列为PTMVPSQLKNLVRAD是全新的序列，它们可以在体外抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移，并在体内试验中提高荷瘤小鼠生存率，具有潜在的新药开发价值。

Description

关于信号传导及转录激活因子抑制多肽及其应用

技术领域

本发明涉及信号传导及转录激活因子抑制多肽及其应用，具体涉及具有抑制信号传导及转录激活因子，预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移的多肽。

背景技术

女性乳腺是由皮肤、纤维组织、乳腺腺体和脂肪组成的，乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。乳腺癌中99%发生在女性，男性仅占1%。目前乳腺癌已成为威胁女性身心健康的常见肿瘤。

乳腺并不是维持人体生命活动的重要器官，原位乳腺癌并不致命；但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性，细胞之间连接松散，容易脱落。癌细胞一旦脱落，游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身，形成转移，危及生命。如何消灭某种癌症的远处转移或防止复发，是癌症治疗方法中不可缺少的组成部分，也是目前正在探讨的治疗乳腺癌热点问题。

信号传导及转录激活因子（STAT）是一种重要的核转录因子。细胞因子与受体结合后激活JAK，再进一步激活STAT。研究发现，STAT3在多种肿瘤组织中异常表达和激活，并与肿瘤的增殖、分化、细胞凋亡、血管生成、浸润转移和免疫逃避密切相关。STAT3蛋白的活性形式在多种肿瘤的侵袭和转移过程中起着重要的作用。因此，抑制信号传导及转录激活因子，能够抑制信号传导及转录激活因子与VEGFR3的结合，抑制成熟的***形成，从而抑制乳腺癌细胞的转移，可以预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移。

目前，没有成熟开发的信号传导及转录激活因子抑制多肽问世，用于预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移。

发明内容

发明目的

    本发明提供全新的序列，该序列为信号传导及转录激活因子拮抗剂，对乳腺癌具有很好的疗效。

技术方案

    信号传导及转录激活因子抑制多肽，其特征在于其序列为PTMVPSQLKNLVRAD。

信号传导及转录激活因子抑制多肽在预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移药物中的应用。

有益效果

利用固相合成法化学合成信号传导及转录激活因子抑制多肽，该多肽具有全新的序列，该多肽可体外抑制信号传导及转录激活因子，预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移。我们发现的信号传导及转录激活因子抑制多肽可以同时抑制乳腺癌细胞增殖活力，并在体内试验中提高荷瘤小鼠生存率，具有潜在的新药开发价值。

具体实施方式

实施例1

信号传导及转录激活因子抑制多肽乳腺癌细胞MCF-7迁移的作用。

采用划痕实验。先用marker笔在24孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔穿过3条线；将成对数生长的MCF-7细胞，以 1.0×10⁵加入24孔培养板中，培养 24h。第二天用10μl枪头比着直尺，垂直于背后的横线划痕，以划痕和背后横线的交叉点为固定观察位点；实验孔、阳性药物对照孔分别加入不同浓度的实验药物信号传导及转录激活因子抑制多肽（上海生工合成）和阳性对照药物长春新碱；空白组加入相同体积的溶剂，每孔设五个复孔；放入37℃、5%CO₂培养箱，培养。按0，6，12，24，36小时，拍照；测量0，6，12，24，36h划痕宽度。以不同的时间点，记录每孔三个固定位置处划痕宽度的变化，即为细胞迁移距离。按照公式计算迁移率（migration rate，MR）：迁移率（MR）＝（实验第n小时的划痕宽度－实验第0小时的划痕宽度）×100%/实验第0小时的划痕宽度。结果，随信号传导及转录激活因子抑制多肽浓度增加，迁移抑制率逐渐下降，说明信号传导及转录激活因子抑制多肽能够抑制乳腺癌细胞MCF-7迁移，抑制率为85.3%。

实施例2

信号传导及转录激活因子抑制多肽对体外培养人乳腺癌细胞的生长和存活IC50。

采用 MTT 比色法。将对数生长的人乳腺癌细胞，以 1.0×10⁵加入 96 孔培养板中，培养 24h，实验孔、阳性药物对照孔分别加入不同浓度的实验药物信号传导及转录激活因子抑制多肽（上海生工合成）和阳性对照药物紫杉醇；空白组加入相同体积的溶剂。每孔设五个复孔，培养 48h，分别在0h、2h、8h、14h、20h、24h、36h、，48h 每孔加入 MTT，作用 4h 后，加入 DMSO，孵育 30min，在酶标仪 620nm 处测定吸光度 A 值，按公式人乳腺癌细胞生长抑制率＝（1-实验组吸光值/对照组吸光值）×100％。计算出实验药物的 IC50 为0.48μM。

实施例3

用肿瘤模型检测信号传导及转录激活因子抑制多肽的体内活力。

建立MCF-7肿瘤模型，阳性对照药物紫杉醇；空白组加入相同体积的溶剂， 实验组多肽（上海生工合成）设3个剂量：0.75、1.5、3μM mg/Kg。21天后，观察小鼠存活数量，计算存活率。结果显示，信号传导及转录激活因子抑制多肽可有效地保护小白鼠，提高荷瘤小鼠的生存率，生存率达到91.2%。

                         SEQUENCE LISTING

 

<110>  苏州普罗达生物科技有限公司

 

<120>  关于信号传导及转录激活因子抑制多肽及其应用

 

<130> 

 

<160>  1    

 

<170>  PatentIn version 3.3

 

<210>  1

<211>  15

<212>  PRT

<213>  人工序列

 

<400>  1

 

Pro Thr Met Val Pro Ser Gln Leu Lys Asn Leu Val Arg Ala Asp

1               5                   10                  15 

 

 

Claims (2)

1. 信号传导及转录激活因子抑制多肽，其特征在于其序列为PTMVPSQLKNLVRAD。

2.如权利要求1所述的信号传导及转录激活因子抑制多肽在预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移药物中的应用。