CN104620832A - 古侧柏扦插繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了古侧柏扦插繁殖方法。本发明提供了一种古侧柏扦插繁殖方法,包括如下步骤:将来源于古侧柏的插穗依次用高锰酸钾、木质素酸钠和激素处理,得到处理后的插穗;将所述处理后的插穗在基质中扦插,培育,实现古侧柏扦插繁殖。本发明的实验证明,本发明的方法,提高侧柏古树克隆繁殖的成活率,缩短侧柏古树生根时间,同时对其他古树克隆繁殖研究提供借鉴。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域,尤其涉及古侧柏扦插繁殖方法。
背景技术
侧柏在我国栽培历史悠久,寿命长达几百年、甚至几千年的古侧柏在全国许多地区均有分布,随着古树年龄增长其体内外受到的胁迫逐渐增加,千年侧柏尤其是3000年以上的侧柏现已进入高龄期,树势十分衰弱,如何有效地克隆繁殖高龄侧柏,使之生命永续、价值彰显,成为全球华人普遍关注的问题,也成为地方林业部门亟需解决的问题。树龄越大,生根愈困难从国内外进展来看,目前在几百年古树的扦插繁殖方面已有一些研究,例如,600年银杏扦插生根率为8%-25%。树龄为300年、500年以及600年的东北红豆杉为材料进行扦插时发现,随着插穗母树树龄、枝条年龄的增加,插穗生根率呈现降低趋势。此外对1300年左右的银杏和槐树的扦插繁殖也有报道,但是古槐树扦插没有成活。据美国《***》报道,从4600岁的狐尾松(Bristleconepine)切穗栽植后却没有成活,超过1000年的侧柏古树的成功扦插繁殖仍是空白。
树龄越大,越难生根,影响扦插繁殖的内因有:年龄效应、位置效应、群体和个体再生能力的差异等,影响扦插扩繁的外因主要有生长调节剂种类及其浓度、基质、光照、温湿度等。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种古侧柏扦插繁殖方法。
本发明提供的方法,包括如下步骤A:
将来源于古侧柏的插穗依次用高锰酸钾、木质素酸钠和激素处理,得到处理后的插穗;将所述处理后的插穗在基质中扦插,培育至生根,实现古侧柏扦插繁殖。
古侧柏为树龄大于100年的侧柏。
上述方法中,所述将来源于古侧柏的插穗依次用高锰酸钾、木质素酸钠和激素处理的方法包括如下步骤:
1)将来源于古侧柏的插穗在高锰酸钾水溶液中浸泡,得到高锰酸钾处理后插穗;
2)将所述高锰酸钾处理后插穗在木质素酸钠水溶液中浸泡,得到木质素酸钠处理后插穗;
3)将所述木质素酸钠处理后插穗在激素溶液中浸泡,得到处理后的插穗。
上述方法中,所述激素为NAA和IBA;
所述激素溶液由溶质和溶剂组成,所述溶质为NAA和IBA。
所述激素溶液制备方法:将激素用少量乙醇溶解后,再与水混合得到激素溶液。
上述方法中,所述高锰酸钾水溶液中的高锰酸钾质量百分含量为0.05%;
所述木质素酸钠水溶液中的木质素酸浓度为500-2000mg.L-1;
所述激素溶液中NAA和IBA浓度均为600-4000mg.L-1。
上述方法中,所述古侧柏及其对应的木质素酸钠和激素浓度如下1)-4)中任一个:
1)所述古侧柏的树龄为100年或300年或3000年,来源于所述来源于古侧柏的插穗对应的所述木质素酸钠水溶液中的木质素酸浓度为2000mg.L-1;来源于所述来源于古侧柏的插穗对应的所述激素溶液中NAA和IBA浓度均为1000mg.L-1;
2)所述古侧柏的树龄为700,来源于所述来源于古侧柏的插穗对应的所述木质素酸钠水溶液中的木质素酸浓度为500mg.L-1;来源于所述来源于古侧柏的插穗对应的所述激素溶液中NAA和IBA浓度均为600mg.L-1。
上述方法中,步骤2)中,来源于树龄为100年或300年或3000年古侧柏的插穗在木质素酸浓度为2000mg.L-1的木质素酸钠水溶液中浸泡1min,
来源于树龄为700年古侧柏的插穗在500mg.L-1的木质素酸钠水溶液中浸泡2h,
步骤3)中,来源于树龄为100年或300年或3000年古侧柏的插穗在NAA和IBA浓度均为1000mg.L-1的激素溶液中浸泡1min;
来源于树龄为700年古侧柏的插穗在600mg.L-1的溶质为NAA和IBA的激素溶液中浸泡1h。
上述方法中,所述来源于古侧柏的插穗为所述古侧柏树冠阳面上部(树冠上部二分之一至四分之三位置)1-3年生枝。
上述方法中,所述培育中对所述插穗进行消毒,所述消毒采用的灭菌剂为甲基-1H-2-苯并咪唑氨基甲酸酯、甲基硫菌灵、代森锰锌、波尔多液、甲基硫菌灵·锰锌和福美锌这6种中至少两种。
上述消毒方式为6种轮换使用。
本发明的另一个目的是提供一种培育古侧柏扦插苗的方法。
本发明提供的方法,包括上述扦插方法中的所述步骤A
古侧柏的树龄为100年或300年或700年或3000年。
本发明的实验证明,本研究充分利用不同年龄的侧柏,通过综合开展扦插繁殖相关技术研究,经过近两年探索,初步攻克了扦插繁殖技术难题,摸索了一套侧柏古树的扦插繁殖体系,并获取了3000年侧柏扦插克隆苗11株。此研究不仅为保护和克隆繁殖侧柏古树奠定了基础,为其他古树无性繁殖提供了方向。
古树克隆繁殖体系对古树优良基因保存、栽培技术成果转让、技术咨询与培训等方面将会创造很大的经济效益。保留下来的古树优良基因用于枣树、茶树等植物的育种和遗传改良及推广又能给林农业带来了巨大的经济效益。古树都有着深厚文化的背景,如黄帝陵的轩辕柏被英国人称为“世界柏树之父”,古树克隆繁殖能保存古树的完整基因,避免森林文化和旅游文化遗产消失,意义重大。
附图说明
图1为不同部位插穗生根率。
图2为抑制物清除后插穗愈伤诱导率。
图3为抑制物清除后插穗生根率。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
下述实施例中扦插的方法如下:
(一)插穗采取
2013-2014年剪取以5年生侧柏为对照、采取天坛公园100年、300年、700年的侧柏和约3000年生侧柏(陕西黄帝陵轩辕柏)树冠南部中下部3年生枝条上第一轮分生的、选择生长健壮、无病虫害的枝条(为插穗),用湿纸包住切口,喷洒水,泡沫箱带回。
(二)插穗制备与处理
将带回的枝条每个截成20个左右插穗(每个5~10cm),下切口离芽1~1.5cm,斜切,切口应平滑,在插穗基部1~1.5cm处用刀片纵切2~3刀,深达木质部,剪好后每20根一捆。插穗立即放入1‰的多菌灵溶液浸15min以消毒,然后用清水洗净。选用激素浸泡。扦插深度8~10cm。插后压实基质,并随即用喷壶喷水1次。
(三)基质准备
泥炭:珍珠岩=3:7
(四)插床准备
在中国林科院内,设有半径为6m的圆形插床,插床上设有间歇喷雾装置,前疏后密,每端各置喷头25个。扦插前1d用3‰的高锰酸钾对扦插基质进行消毒,扦插当日清水浇透。
实施例1、古侧柏的扦插穗件摸索
一、不同激素处理不同树龄古侧柏插穗生根率
生长素具有明显的促进不定根和侧根发生和生长的作用,由于不同生长激素对插穗生根的适宜性不周,而不同植物对不同生长激素的适应性也不同,因此,选择适当种类的生长激素对侧柏古树扦插显得尤为重要。激素选用扦插实验中较常用种类ABT1、NAA以及NAA:IBA=1:1这3种激素,浓度设计分为高浓度、中浓度以及低浓度。
ABT1溶液、NAA溶液和NI溶液(NAA:IBA=1:1)按照不同的浓度配制不同激素溶液,浓度设计分为低浓度(200-600mg.L-1;表1所示)、中浓度(1000-3000mg.L-1;表2所示)以及高浓度(4000-10000mg.L-1;表3所示)。
以5年生侧柏为对照,采取天坛公园100年、300年、700年的侧柏进行如下实验:
将不同树龄古侧柏插穗消毒后在含有不同激素的水溶液(表1-3所示)中浸泡1-2h,再在基质中扦插,培育。
培育45d后,检测不同树龄古侧柏的愈伤率=生成愈伤组织插穗的量/扦插插穗的总量;
培育90d后,检测不同树龄古侧柏的生根率=生根插穗的量/扦插插穗的总量。
结果如下:
1、低浓度激素对侧柏古树扦插生根的影响
在使用表1所示的低浓度激素处理插穗时,结果如表1,5年生幼树用600mg.L-1ABT1溶液处理1h以及400mg.L-1NI溶液(NAA:IBA=1:1)处理1h均能达到较好的效果,其愈伤诱导率和生根率均为100%,100年生侧柏以200mg.L-1ABT1溶液处理2h能有最大愈伤诱导率为18%,最终生根率为12%。而300年和700年侧柏插穗以200mg.L-1NI溶液(NAA:IBA=1:1)处理4h,愈伤诱导率分别是23%和32%,生根率为14%和15%。
表1.低浓度激素溶液处理不同年龄侧柏愈伤诱导率、生根率
注:A代表ABT1,N代表NAA,NI代表NAA:IBA=1:1,A200表示激素浓度为200mg.L-1的ABT1,下同,NI200表示NAA和IBA在NI溶液中的浓度均为200mg.L-1。
2、中浓度激素对侧柏古树扦插生根的影响
在使用表2所示的中浓度激素处理插穗时,结果如表2,5年生幼树愈伤诱导率均在50%以上,其中用1000mg.L-1ABT1溶液处理1min以及1000mg.L-1NI溶液处理30s均能达到较好的生根效果,其生根率为88%,后者在处理后具有更高的愈伤诱导率,为100%。100年生侧柏以2000mg.L-1NI溶液处理3min及3000mg.L-1NI溶液处理1min愈伤诱导率均达33%,而生根率差异不大,分别是19%和18%。300年侧柏插穗以1000mg.L-1NI溶液处理30s后,愈伤诱导率为48%,生根率可达24%。而700年侧柏插穗以1000mg.L-1ABT1溶液处理1min效果最好,有20%插穗能生根,40%插穗能分化愈伤组织。
表2 中浓度激素处理不同年龄侧柏愈伤诱导率、生根率
注:A代表ABT1,N代表NAA,NI代表NAA:IBA=1:1,A200表示激素浓度为200mg.L-1的ABT1,下同。
3、高浓度激素对侧柏古树扦插生根的影响
使用表3的高浓度激素处理插穗,结果如表3所示,5年生幼树以及100年侧柏插穗用8000mg.L-1ABT1溶液处理5s时愈伤诱导率最高,分别为99%和67%,最终生根则具有明显差异,5年生幼树有83%生根,而100年则仅有18%生根。300年和700年侧柏插穗则以4000mg.L-1NI溶液处理5s时效果较佳。
表3 高浓度激素处理不同年龄侧柏愈伤诱导率、生根率
注:A代表ABT1,N代表NAA,NI代表NAA:IBA=1:1,A200表示激素浓度为200mg.L-1的ABT1,下同。
就总体来看,使用高浓度激素处理插穗时,其生根效果没有使用中浓度激素处理的插穗好。
通过大量激素配方筛选之后,根据初步得出的实验结果可知,有利于提高高龄侧柏(尤其是300年和700年的树龄)插穗生根能力的最佳生根促进剂为NAA:IBA=1:1,进一步将该组合配方进行细化,通过设定不同浓度及处理时间,进一步选配出最佳的方案。
二、NI不同处理对插穗生根的影响
以5年生侧柏为对照,采取天坛公园100年、300年、700年的侧柏进行如下实验:
将不同树龄古侧柏插穗消毒后在不同浓度NI溶液(NAA:IBA=1:1;表4)中浸泡4h-1min时间,再在基质中扦插,培育。
四个月后检测不同树龄古侧柏的愈伤率和生根率,结果如表4,不同年龄插穗所对应的最佳激素处理浓度不同。其中5年生幼树和100年侧柏插穗以1000mg.L-1NI溶液处理2min愈伤诱导率分别为90%和67%,生根率为79%和25%。300年侧柏插穗则是以1000mg.L-1NI溶液处理1min达到较高的生根率,为20%,而700年侧柏插穗的愈伤诱导率达53%,所使用的激素是600mg.L-1NI溶液处理1h,最高生根率达16%。
表4 不同浓度NI溶液处理不同年龄插穗生根率
可以看出,1000mg.L-1NI溶液(NAA和IBA均为1000mg.L-1),为100年、300侧柏最佳的NI浓度,对于700年来说,NAA:IBA浓度为600mg.L-1,为最佳的NI浓度。
考虑处理时间,则选用NAA:IBA为1000mg.L-1作为古侧柏的最佳NI浓度进行如下实验摸索。
三、采条部位对扦插生根的影响
插穗在母树上的着生部位不同,细胞***能力不同,生根促进物质以及生根抑制物质的含量也有所差异,影响愈伤组织的产生和不定根的形成,导致生根能力有所不同。一般认为,从树冠下部采取的插穗,由于所形成的阻碍物质少,营养物质含量较高,所以生根率高。但也有人认为树冠上处于向光位置,枝条活力旺盛,下部由于受到荫蔽,枝条往往生长不良,因此下部枝条生根能力不如上部。
采取北京天坛公园100年侧柏东上、东下、南上、南下、西上、西下、北上、北下8个方位的插穗,并消毒后选用浓度1000mg.L-1NI溶液(NAA和IBA均为1000mg.L-1)处理1min,再在基质中扦插,培育(表5)。
扦插四个月后,对不同采条部位的扦插实验进行愈伤率和生根率统计。结果如图1,位于树冠上部的插穗较下部插穗的更容易生根,且位于母树南面的插穗较其他方位插穗的愈伤诱导率高,可达47%,而生根率高达42%。因此,在选取插穗时,以位于南面上部(靠上1/2至3/4树冠)插穗最佳。
表5 为采条部位对扦插生根的影响
四、内源生根抑制物清除
插穗较难生根,可能与体内存在某些生根阻碍物质有关。一般来说,抑制剂的含量会随着亲本年龄的增加而增加,随着枝条成熟度的增加而相应升高。在同一树冠上,下部抑制剂的含量会少于上部抑制剂含量。抑制剂阻碍插穗的生根的推测有两种:一是减弱或阻止生长素的作用;二是通过滞留在插穗切口表面,如树脂或单宁,从而影响插穗基部的吸水。
大量的实验表明,影响植物扦插生根的内源生根抑制物主要是酚类、黄酮类、单宁及树脂等,因此抑制物清除实验,主要针对这几种物质开展,并结合文献中所用的措施选择清除方式。
激素处理选用扦插生根效果较好的浓度1000mg.L-1NI溶液(NAA和IBA均为1000mg.L-1)对插穗进行处理,研究不同抑制物清除方式对侧柏扦插的影响,实验设计如表6,具体如下:
以5年生侧柏为对照,采取天坛公园100年、300年、700年的侧柏树冠的南面上部的插穗,消毒后,分别浸泡在0.1%硝酸银水溶液、0.1%醋酸水溶液、2%乙醇水溶液、水、洗洁精、0.05%高锰酸钾水溶液不同时间,再用浓度1000mg.L-1NI溶液(NAA、IBA和水混匀,得到水溶液,使NAA和IBA的终浓度均为1000mg.L-1)处理1min,再在基质中扦插,培育。
扦插四个月后,对插穗生根情况进行调查,其结果如图2和图3,图2为愈伤诱导率结果,图3为抑制物清除处理结果。可以看出,用0.1%硝酸银处理5年生幼树插
穗,能使其愈伤诱导率达90%,生根率达62%。而就100年、300年以及700年侧柏插穗而言,用0.05%KMnO4处理则能达到较好的生根效果,愈伤诱导率分别为37%、43%以及36%,生根率分别为20%、17%以及12%。
结果显示,不同年龄、不同的抑制物清除方式对侧柏插穗生根影响有较大差异。总体而言,以KMnO4处理最利于大于100年树龄的侧柏插穗愈伤组织的形成以及插穗生根,而0.1%醋酸处理对插穗抑制物清除没有明显作用。
表6 抑制物清除扦插实验
五、植物生长调节剂对不同年龄侧柏扦插生根的影响
插穗生根时需要一定的营养物质,主要是碳水化合物和氮素化合物。用蔗糖水溶液处理插穗,促进生根效果更好。此外,木质素酸钠(ASL)作为一种植物生长调节剂,具有促进植物伤口愈合、插穗发根、提高种子发芽率及加速苗木生长等作用,并能提高林木幼苗的抗逆性。用一定浓度的ASL预浸插穗,在一定的浓度范围内,对生根有明显的促进作用。因此,设计实验探究适合侧柏扦插繁殖的最佳ASL浓度,以及以蔗糖水溶液处理后的生根情况,具体如下:
以5年生侧柏为对照,采取天坛公园100年、300年、700年的侧柏树冠南面上部的插穗,消毒后,浸泡在0.05%高锰酸钾水溶液15min时间,再分别用不同浓度的木质素酸钠(ASL)水溶液和10%蔗糖水溶液浸泡不同时间,再用浓度1000mg.L-1NI溶液处理1min,再在基质中扦插,培育。
四个月后,对插穗生根情况进行统计,其结果如表7。
表7 不同浓度ASL处理侧柏愈伤诱导率、生根率
从表7可以看出,以一定浓度的ASL和蔗糖处理侧柏插穗,对其生根效果有一定作用。不同年龄所需浓度不同。5年生幼树以200mg.L-1处理4h能形成较多愈伤组织,生根率高达93%。100年侧柏用1000mg.L-1ASL水溶液处理3min以及2000mg.L-1ASL水溶液处理1min得到相同的生根率为45%,后者的愈伤诱导率更高。不同浓度ASL处理300年插穗,对其生根影响不大。而就700年侧柏插穗而言,低浓度长时间浸泡更利于其生根。蔗糖对插穗生根的影响也具有一定的年龄效应,但总体上利于插穗的生根。
考虑时间问题,100年和300年侧柏选用2000mg.L-1ASL水溶液浸泡1min,700年侧柏选用500mg.L-1ASL水溶液浸泡2h。
六、灭菌剂筛选
扦插后,插穗易受到病毒感染和阳光直射过多导致温度过高而烧苗脱水死亡,因此扦插后定期做消毒生根处理。灭菌剂包括:多菌灵、甲基托布津(甲基硫菌灵)、代森锰锌、波尔多液、甲基硫菌灵·锰锌、福·福锌等,具体如下:
采取天坛公园100年的侧柏树冠南面上部的插穗,消毒后,浸泡在0.05%高锰酸钾水溶液15min时间,再用2000mg.L-1ASL水溶液浸泡1min,再用浓度1000mg.L-1NI溶液处理1min,再在基质中扦插,培育。培育期间,每周一、四对苗木以及苗床进行全面消毒灭菌,直到扦插生根(生根时间为从扦插开始至长出第一个不定根止的时间,生根时间为3个月),消毒方式为如下1)或2):
1)多菌灵:
浙江春光生化有限公司;产品登记号:LS95505
多菌灵(甲基-1H-2-苯并咪唑氨基甲酸酯)稀释500倍,2g兑1kg水,每周一、四各喷洒一次,每平方米喷洒约1kg溶液。
2)6种灭菌剂轮用
多菌灵(甲基-1H-2-苯并咪唑氨基甲酸酯)、甲基托布津(甲基硫菌灵)、代森锰锌、波尔多液、甲霜·锰锌和福·福锌(二甲基二硫代氨基甲酸锌)这6种灭菌剂轮用,每周一、四各喷洒一次,每次喷洒的灭菌剂不同,在本实施例中采用的顺序为:周一喷甲基托布津(甲基硫菌灵)、周四喷代森锰锌、第二个周一喷波尔多液、第二个周四喷波尔多液、第三个周一喷甲基硫菌灵,第三个周四喷锰锌和福美锌(二甲基二硫代氨基甲酸锌)
甲基硫菌灵(甲基托布津SC):江苏龙灯化学有限公司;产品登记号:PD20080138
甲基托布津稀释500倍,2g兑1kg水,每平方米喷洒约1kg溶液。
代森锰锌:利民化工股份有限公司;产品登记号:PD20040011
代森锰锌稀释500倍,2g兑1kg水,每平方米喷洒约1-2kg溶液。
波尔多液:广东省应穗广农臻盛化工有限公司;产品登记号:LS20003F030332
波尔多液稀释1000倍,1g兑1kg水,每平方米喷洒约1-2kg溶液。
甲霜·锰锌:浙江禾本农药化学有限公司;产品登记号:PD20086169
甲霜·锰锌稀释500倍,2g兑1kg水,每平方米喷洒约1-2kg溶液。
福·福锌(二甲基二硫代氨基甲酸锌):河北赞峰生物工程有限公司;
福·福锌稀释250倍,4g兑1kg水,每平方米喷洒约1-2kg溶液。
结果如表8所示,在进行大量灭菌剂筛选后得出,多种灭菌剂轮流使用得到的效果最佳。
表8 为100年生侧柏灭菌后绿叶率
实施例2、3000年侧柏扦插繁殖技术体系
每个处理20根。重复3次。
3000年侧柏由于树龄较大,扦插繁殖较为困难,在利用不同年龄侧柏扦插繁殖选配出较好的激素配比和插穗处理的基础上,进一步探讨轩辕柏的扦插繁殖技术体系,以期利用扦插方式使其繁殖成功。扦插过程中选用上述结果中较好的激素ABT1和NAA:IBA(1:1)对轩辕柏进行扦插。在扦插过程中对插穗生长情况进行观察,以生根率数量为指标,具体如下:
2013年采取不同月份的3000年的侧柏(百度百科的陕西轩辕柏或者《树中寿星知多少》、《华夏古树多奇观》)树冠南面上部的插穗,消毒后,浸泡在0.05%高锰酸钾水溶液15min时间,再用2000mg.L-1ASL水溶液浸泡1min,再分别表9中不同浓度不同激素溶液处理,再在基质中扦插,培育。培育期间,每周一、四对苗木以及苗床进行全面消毒灭菌,直到扦插生根,消毒方式为实施例1中表8采用的几种灭菌剂轮用。结果如表9和表10。
表9 3000年侧柏生根率
表10 3000年侧柏扦插处理体系
在实验过程中可以看到,有利于3000年侧柏扦插成活的体系为:6月份采取3000年侧柏(黄帝陵轩辕柏)的南部中上部的当年生健壮萌条NAA:IBA(1:1)1000mg.L-13000年侧柏处理1min的生根率最高为2.5%,在这期间,通过定期为插穗灭菌消毒,并进行水分、温度的控制管理。在上述体系条件下,至2013年11月,已有11棵插穗成功生根并生长良好(共做了1000个插穗),目前存活幼苗6株,平均高度16.75cm,株高分别为:27cm、23cm、19.5cm、14cm、11cm、6cm。
Claims (9)
1.一种古侧柏扦插繁殖方法,包括如下步骤A:
将来源于古侧柏的插穗依次用高锰酸钾、木质素酸钠和激素处理,得到处理后的插穗;将所述处理后的插穗在基质中扦插,培育至生根,实现古侧柏扦插繁殖。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:
所述将来源于古侧柏的插穗依次用高锰酸钾、木质素酸钠和激素处理的方法包括如下步骤:
1)将来源于古侧柏的插穗在高锰酸钾水溶液中浸泡,得到高锰酸钾处理后插穗;
2)将所述高锰酸钾处理后插穗在木质素酸钠水溶液中浸泡,得到木质素酸钠处理后插穗;
3)将所述木质素酸钠处理后插穗在激素溶液中浸泡,得到处理后的插穗。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述激素为NAA和IBA;
所述激素溶液由溶质和溶剂组成,所述溶质为NAA和IBA。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:
所述高锰酸钾水溶液中的高锰酸钾质量百分含量为0.05%;
所述木质素酸钠水溶液中的木质素酸浓度为500-2000mg.L-1;
所述激素溶液中NAA和IBA浓度均为600-4000mg.L-1。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:
所述古侧柏及其对应的木质素酸钠和激素浓度如下1)或2):
1)所述古侧柏的树龄为100年或300年或3000年,来源于所述古侧柏的插穗对应的所述木质素酸钠水溶液中的木质素酸浓度为2000mg.L-1;来源于所述古侧柏的插穗对应的所述激素溶液中NAA和IBA浓度均为1000mg.L-1;
2)所述古侧柏的树龄为700年,来源于所述古侧柏的插穗对应的所述木质素酸钠水溶液中的木质素酸浓度为500mg.L-1;来源于所述古侧柏的插穗对应的所述激素溶液中NAA和IBA浓度均为600mg.L-1。
6.根据权利要求2-5中任一所述的方法,其特征在于:
步骤2)中,来源于树龄为100年或300年或3000年古侧柏的插穗在木质素酸浓度为2000mg.L-1的木质素酸钠水溶液中浸泡1min,
来源于树龄为700年古侧柏的插穗在500mg.L-1的木质素酸钠水溶液中浸泡2h,
步骤3)中,来源于树龄为100年或300年或3000年古侧柏的插穗在NAA和IBA浓度均为1000mg.L-1的激素溶液中浸泡1min;
来源于树龄为700年古侧柏的插穗在600mg.L-1的溶质为NAA和IBA的激素溶液中浸泡1h。
7.根据权利要求1-6中任一所述的方法,其特征在于:所述来源于古侧柏的插穗为所述古侧柏树冠阳面上部1-3年生枝。
8.根据权利要求1-7中任一所述的方法,其特征在于:所述培育中对所述插穗进行消毒,所述消毒采用的灭菌剂为甲基-1H-2-苯并咪唑氨基甲酸酯、甲基硫菌灵、代森锰锌、波尔多液、甲基硫菌灵·锰锌和福·福锌这6种中至少两种。
9.一种培育古侧柏扦插苗的方法,包括权利要求1-8任一中的所述步骤A。
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