CN104587455A - 一种胰岛素制剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及生物制剂领域，特别是涉及一种胰岛素制剂。鉴于每日多次注射不同胰岛素注射液给糖尿病患者生活带来的不便，提供了一种速效和长效胰岛素混合物，只需每日注射一次，避免了多次注射的困扰。本发明所公开的胰岛素制剂是由甘精胰岛素溶液以及赖脯胰岛素溶液混合而成。本发明所公开的胰岛素制剂以赖脯胰岛素和甘精胰岛素为原料，在无需添加过多的添加剂的情况下，仅以pH条件和酚类稳定剂就可以得到稳定地胰岛素临床应用制，从而不仅简化了生产工艺、节约了生产成本，同时也进一步提高了临床的使用安全度。

Description

一种胰岛素制剂

技术领域

本发明涉及生物制剂领域，特别是涉及一种胰岛素制剂。

背景技术

近年来，随着生活水平的提高、饮食结构的改变、日趋紧张的生活节奏、人口老龄化以及少动多坐的生活方式等诸多因素，全球糖尿病发病率增长迅速，且发病年龄日趋年轻化，糖尿病已经成为继肿瘤、心血管病变之后第三大严重威胁人类健康的慢性疾病。根据国际糖尿病联盟（International Diabetes Federation）数据，预计到2030年全世界有糖尿病患者人数将直逼5亿。

虽然随着科技的发展以及医疗技术的进步，糖尿病治疗药物也不断涌现，但胰岛素及其类似物在糖尿病治疗中的作用和地位无可替代。目前，糖尿病（Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病）的治疗建议采用所谓的强化胰岛素疗法，即采用多种胰岛素组合物。按照这种方案，糖尿病患者每天需用多次注射不同的胰岛素注射液来治疗，包括每天一次或两次注射长效胰岛素以满足基础胰岛素的需求，另外补充推注速效胰岛素以满足餐后相关胰岛素的需求。而通常糖尿病患者要用胰岛素治疗数十年，为了安全和生命质量，非常需要改进胰岛素组合物，虽然目前也有胰岛素组合物出现，但多是鱼精蛋白胰岛素或鱼精蛋白锌胰岛素。这是因为早前认为鱼精蛋白是非免疫原性的，但是现在发现鱼精蛋白胰岛素结晶在人体内可能具有免疫原性，用于医用目的时可导致抗体形成，一些患者必须避免使用含有鱼精蛋白的长效胰岛素组合物。因此我们在此研究快速和长效胰岛素的组合，避免使用鱼精蛋白的同时，改进糖尿病患者的生活质量。

 

发明内容

本发明鉴于每日多次注射不同胰岛素注射液给糖尿病患者生活带来的不便，提供了一种速效和长效胰岛素混合物，只需每日注射一次，避免了多次注射的困扰。

本发明所提供的技术方案如下：

本发明公开的胰岛素制剂是由甘精胰岛素溶液以及赖脯胰岛素溶液混合而成。

进一步地，我们还公开了所述甘精胰岛素溶液是由一份或几份甘精胰岛素预混合体组成，其中一份甘精胰岛素预混合体是由37.04mg甘精胰岛素原料、10ml pH在3.5~4.5的酸性注射用水、300μg锌离子、间甲酚27mg、甘油170mg组成。

同时，我们还公开了所述赖脯胰岛素溶液是由一份或几份赖脯胰岛素预混合体组成，其中一份赖脯胰岛素预混合体是由35.71mg赖脯胰岛素原料、10ml pH在6.5~7.5的酸性注射用水、300μg锌离子、苯酚5mg、间甲酚27mg、甘油170mg组成。

进一步地，在赖脯胰岛素溶液的组成中，我们还公开了所述pH在6.5~7.5的酸性注射用水是由磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲体系，以及稀盐酸和氢氧化钠溶液共同调节形成。

更进一步地，我们还公开了所述胰岛素制剂由70份的甘精胰岛素溶液与30份的赖脯胰岛素溶液混合而成，所述胰岛素制剂的终pH为3.5~4.5。

同时，我们还公开了一种本发明所公开的胰岛素制剂的制备方法，具体包括以下步骤：

步骤A：按甘精胰岛素的含量精密称取甘精胰岛素原料1000IU，即37.04mg，加入注射水4ml搅拌均匀，滴加0.1mol/L盐酸至甘精胰岛素完全溶解，加氧化锌至每100IU甘精胰岛素注射液中含锌30μg，然后加入甘油170mg，间甲酚27mg，搅拌至全部溶解后补加水至9ml，然后用1mol/L盐酸溶液或1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至3.5-4.5，补水至终体积为10ml，用0.22微米微孔滤膜进行过滤除菌；

步骤B：按赖脯胰岛素的含量精密称取赖脯胰岛素原料1000IU，即35.71mg，加入注射水4ml搅拌均匀，滴加0.1mol/L盐酸至赖脯胰岛素完全溶解，加氧化锌至每100IU赖脯胰岛素注射液中含锌30μg，然后加入甘油170mg，苯酚5mg，间甲酚27mg，搅拌至全部溶解后补加缓冲液，所述缓冲液含1.5mg/mlNa2HPO4、1.25mg/mlKH₂PO₄，至溶液总体积9ml，然后用1mol/L盐酸溶液或1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.5-7.5，补水至终体积为10ml，用0.22微米微孔滤膜进行过滤除菌；

按照步骤A产品：步骤B产品以体积比计算70:30的比例进行混合，调节pH至3.5-4.5，得到胰岛素制剂。

本发明所公开的胰岛素制剂以赖脯胰岛素和甘精胰岛素为原料，在无需添加过多的添加剂的情况下，仅以pH条件和酚类稳定剂就可以得到稳定地胰岛素临床应用制，从而不仅简化了生产工艺、节约了生产成本，同时也进一步提高了临床的使用安全度。

 

附图说明

图1为Beagle犬皮下注射实施例1制备的制剂样品后的血糖浓度-时间曲线；

图2为Beagle犬皮下注射实施例2制备的制剂样品后的血糖浓度-时间曲线。

 

具体实施方式

实施例1

首先配制中间品A：按甘精胰岛素的含量精密称取甘精胰岛素原料1000IU（37.04mg），加入注射水4ml搅拌均匀，滴加0.1mol/L盐酸至甘精胰岛素完全溶解，加氧化锌至每100IU甘精胰岛素注射液中含锌30μg，然后加入甘油170mg，间甲酚27mg，搅拌至全部溶解后补加水至10ml，用0.22微米微孔滤膜进行过滤除菌。

然后配制中间品B：按赖脯胰岛素的含量精密称取赖脯胰岛素原料1000IU（35.71mg），加入注射水4ml搅拌均匀，滴加0.1mol/L盐酸至赖脯胰岛素完全溶解，加氧化锌至每100IU赖脯胰岛素注射液中含锌30μg，然后加入甘油170mg，苯酚5mg，间甲酚27mg，搅拌至全部溶解后补加缓冲液（含1.5mg/mlNa2HPO4、1.25mg/mlKH2PO4）至10ml，用0.22微米微孔滤膜进行过滤除菌。

最后，根据需要将中间品A：中间品B以体积比70:30的比例进行混合，并调节pH至3.5-4.5。

实施例2

首先配制中间品A：按甘精胰岛素的含量精密称取甘精胰岛素原料1000IU（37.04mg），加入注射水4ml搅拌均匀，滴加0.1mol/L盐酸至甘精胰岛素完全溶解，加氧化锌至每100IU甘精胰岛素注射液中含锌30μg，然后加入甘油170mg，间甲酚27mg，搅拌至全部溶解后补加水至9ml，然后用1mol/L盐酸溶液或1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至3.5-4.5，补水至终体积为10ml，用0.22微米微孔滤膜进行过滤除菌。

然后配制中间品B：按赖脯胰岛素的含量精密称取赖脯胰岛素原料1000IU（35.71mg），加入注射水4ml搅拌均匀，滴加0.1mol/L盐酸至赖脯胰岛素完全溶解，加氧化锌至每100IU赖脯胰岛素注射液中含锌30μg，然后加入甘油170mg，苯酚5mg，间甲酚27mg，搅拌至全部溶解后补加缓冲液（含1.5mg/mlNa2HPO4、1.25mg/mlKH2PO4）至9ml，然后用1mol/L盐酸溶液或1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至3.5-4.5，补水至终体积为10ml，用0.22微米微孔滤膜进行过滤除菌。

最后，根据需要将中间品A：中间品B以体积比70:30的比例进行混合。

对比例

分别根据甘精胰岛素和赖脯胰岛素的含量精密称取甘精胰岛素原料700IU（25.93mg），赖脯胰岛素300IU（10.71mg）加入注射水4ml搅拌均匀，滴加0.1mol/L盐酸至赖脯胰岛素和甘精胰岛素完全溶解，加氧化锌至每100IU胰岛素注射液中含锌30μg，然后加入甘油170mg，苯酚5mg，间甲酚27mg，搅拌至全部溶解后补加缓冲液（含1.5mg/mlNa₂HPO₄、1.25mg/mlKH₂PO₄）至9ml，然后用1mol/L盐酸溶液或1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至3.5-4.5，补水至终体积为10ml，用0.22微米微孔滤膜进行过滤除菌。

实施例3     稳定性考察

实施例3-1   取以上每种方法制备的注射液各10个样品，12000rpm离心一定时间后观察其表观性状：即离心后取出样品观察其底部有无沉淀，记录数量，同种制备方法的样品出现沉淀或絮状物数量越少，说明该方法制备的制剂样品越稳定。

表1离心实验

样品	离心30min出现沉淀数	离心60min出现沉淀数
			实施例1	0	0
实施例2	0	0
			对比例1	0	2

实施例3-2

取以上每种方法制备的注射液各10个样品在4℃贮存固定时间后，开启后室温放置一定时间后观察其性状：出现不溶物、絮状物数量越少，说明此制备方法制备的制剂越稳定。

表2 表观稳定性考察

样品	放置10天现不溶物样品数	放置20天现不溶物样品数	放置30天现不溶物样品数
				实施例1	0	0	0
实施例2	0	0	0
				对比例	1	5	7

以上结果可知，实例1和实例2制备的制剂样品贮存固定时间，开启后室温放置一定时间的表观性状无显著变化，稳定性较好。

实施例4 放置稳定性考察

取实施例1和实施例2中的获得的样品贮存在4℃一定时间，开启后，继续4℃放置，分别于0、3、6、9天取样检测其性状、pH、高分子蛋白、有关物质和含量如下表：

表3 4℃放置稳定性试验

    实施例1和实施例2制备的制剂样品开启后4℃放置0、3、6、9天，其性状、pH值、高分子蛋白、有关物质和含量均无显著变化，具有良好的稳定性。

实施例5  动物致敏性实验

取实施例1和实施例2制备的制剂样品分别进行动物致敏型研究：即取18条Beagle犬，给药开始时体重为7.0-11.2kg，按照性别、体重随机分为3组，每组各3雄3雌，分别为对照组、实施例1组和实施例2组。对照组注射等量的生理盐水，其他各组分别对应注射对应的实施例获得的样品，每组动物分别同时经颈背部皮下注射给予1.5IU/kg，连续给药7天，每天一次，观察每次注射后各犬的反应，即是否出现注射部位有红斑、水肿症状，同时观察是否有水肿、流涎、恶心、呕吐、腹泻等过敏反应。

研究结果发现，所有Beagle犬给药期间，均未发现注射部位有红斑、水肿、出血等明显异常情况，注射后也未出现水肿、流涎、恶心、呕吐、腹泻等过敏反应。因此，说明本发明获得的产品临床安全性好，具有较高的临床应用价值。

实施例6 药效学实验

分别取成年健康Beagle犬6只，雌雄各半，雌性无孕，7-9月龄，体重9.6-12.5kg，形成实施例1实验组和实施例2实验组。分别皮下注射实施例1、实施例2制备得到的样品，在给药前后不同时间从Beagle犬前肢静脉取血，取血时间点分别为0h（给药前）、1h、2h、3h、4h、5h、6h、8h、10h、12h、16h、24h，每次取血2mL，4℃、3500rpm离心10min后分离血浆，进行血糖浓度测定，绘制不同时间血糖浓度变化图，结果分别如图1和图2所示。

可以看出本发明公开的胰岛素制剂具有长效、高效的降血糖作用。

Claims (6)

1.一种胰岛素制剂，其特征是：所述胰岛素制剂是由甘精胰岛素溶液以及赖脯胰岛素溶液混合而成。

2.根据权利要求1所述的胰岛素制剂，其特征是：所述甘精胰岛素溶液是由一份或几份甘精胰岛素预混合体组成，其中一份甘精胰岛素预混合体是由37.04mg甘精胰岛素原料、10ml pH在3.5~4.5的酸性注射用水、300μg锌离子、间甲酚27mg、甘油170mg组成。

3.根据权利要求1所述的胰岛素制剂，其特征是：所述赖脯胰岛素溶液是由一份或几份赖脯胰岛素预混合体组成，其中一份赖脯胰岛素预混合体是由35.71mg赖脯胰岛素原料、10ml pH在6.5~7.5的酸性注射用水、300μg锌离子、苯酚5mg、间甲酚27mg、甘油170mg组成。

4.根据权利要求3所述的胰岛素制剂，其特征是：所述pH在6.5~7.5的酸性注射用水是由磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲体系，以及稀盐酸和氢氧化钠溶液共同调节形成。

5.根据权利要求1所述的胰岛素制剂，其特征是：所述胰岛素制剂由70份的甘精胰岛素溶液与30份的赖脯胰岛素溶液混合而成，所述胰岛素制剂的终pH为3.5~4.5。

6.一种权利要求1至5中任意一项所述的胰岛素制剂的制备方法，其特征是，包括以下步骤：

步骤A：按甘精胰岛素的含量精密称取甘精胰岛素原料1000IU，即37.04mg，加入注射水4ml搅拌均匀，滴加0.1mol/L盐酸至甘精胰岛素完全溶解，加氧化锌至每100IU甘精胰岛素注射液中含锌30μg，然后加入甘油170mg，间甲酚27mg，搅拌至全部溶解后补加水至9ml，然后用1mol/L盐酸溶液或1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至3.5-4.5，补水至终体积为10ml，用0.22微米微孔滤膜进行过滤除菌；

步骤B：按赖脯胰岛素的含量精密称取赖脯胰岛素原料1000IU，即35.71mg，加入注射水4ml搅拌均匀，滴加0.1mol/L盐酸至赖脯胰岛素完全溶解，加氧化锌至每100IU赖脯胰岛素注射液中含锌30μg，然后加入甘油170mg，苯酚5mg，间甲酚27mg，搅拌至全部溶解后补加缓冲液，所述缓冲液含1.5mg/mlNa₂HPO₄、1.25mg/mlKH₂PO4，至溶液总体积9ml，然后用1mol/L盐酸溶液或1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.5-7.5，补水至终体积为10ml，用0.22微米微孔滤膜进行过滤除菌；

按照步骤A产品：步骤B产品以体积比计算70:30的比例进行混合，调节pH至3.5-4.5，得到胰岛素制剂。