CN104560757A - 一种农用高效固氮菌的生产方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种农用高效固氮菌生产方法,(优选了特殊固氮菌种、创新培养基)所述的培养基除贝氏培养基外还先后改用了氨基酸、专用黄腐酸,载体用了优质风化煤、畜禽粪便、农作物秸杆等有机废料,产品经有资质权威机构检测总活菌数840亿/克,田间应用表现超常。本发明目的是为了减少尿素用量,降低硝酸盐污染,节能减排,有利人民健康,保护环境,促进生态文明建设,看来空中固氮前景看好。
Description
技术领域 微生物技术领域
背景技术
中国五千年传统农业,以有机肥为主,五千年土地没退化。学***衡,合理开发生物肥,改造自然的要求,具有广阔社会前景。
氮是构成植物生命的最重要元素之一,自然界中某些微生物直接将大气中的氮通过固氮酶还原成氨NH4+,这类微生物包括细菌,兰绿藻、放线菌等,在固氮菌中有一类属自由生活类群,它们是植于植物根表,有可能浸入植物表皮外皮层的细胞间隙,和近根土壤中,靠根系分泌物生存、繁衍,与植物根系有密切关系,但宿主植物不形成特异分化结构,植物与细胞之间这种共生关系联合共生固氮。这类固氮菌,称联合固氮菌。
巴西实验室1976年提出,20年来受到各国科学家重视。
沙棘是在干旱地区少数具有固氮能力的木本植物。沙棘虽然不是豆种植物,但也与某些固氮菌共生,固氮菌在沙棘的根系上生长,形成根瘤。这种特性,对于沙棘在恶劣环境生存具有重要生态学意义。
当前,农业生产需要的氮,主要是靠化学肥料-尿素供应,由于肥料碳氮比失调,土壤失去固氮能力,作物吸收约30%,70%的氮进入环境,主要进入地下水和空气,污染环境。
如果我们换位思考,每亩地上空有数十吨氮含在空气中,没被利用,利用空气中的氮要靠生物固氮,现在的固氮菌(包括解磷、解钾菌)每克0.2亿-2个亿,下地作用甚微。每种菌最多不过固定相当于尿素2-3公斤氮,满足不了农作物对氮的需求。
发明内容:
1、筛选耐恶劣环境沙棘树,从根部采集菌种用稀释分离法或划线分离法,对沙棘菌纯化处理,然后用阿须贝氏无氮培养基(PH值6.8-7.8进行试管斜面培养,培养箱温度25℃-30℃时间3天。
2、把斜面菌种进行一级种子振荡培养,培养基含10%氨基酸水剂,用容器300ml的三角瓶装100毫升10%氨基酸水剂,把培养好的斜面菌种在洁净工作台上,接入三角瓶中,放入每分钟110转摇床内,25℃-30℃,培养三天。
3、把一级振荡培养的菌种,接入二级振荡培养棕色瓶,换成含10%黄腐酸培养基(黄腐酸分子量400-1000为佳)用容量3000毫升的棕色瓶,瓶内装含10%黄腐酸水溶液1000毫升,把100毫升一级种接入瓶中放进摇床,温度25℃-30℃,培养三天。
4、菌液通气发酵培养生产种,把二级种放入含无菌水的风化煤中,菌种:风化煤:无菌水比例1:70:29拌匀后,把风化煤放入温室,温度25℃-30℃,湿度70℃-85℃。发酵三天。可得到840亿/克左右的固氮菌生产种。用于生产固氮菌肥。
5、选载体(风化煤、褐煤、泥炭、秸杆粉碎、经过分类粉碎脱毒的垃圾任意一种)菌和载体(以1:100重量比,加水30%拌匀在25℃-30℃温室发酵三天后形成固氮菌肥。
任何肥料被作物吸收都必须有微生物的参与与分解,微生物肥料的功能也由此而产生,它既能最大限度发挥肥效,将养分分解转化被作物吸收利用,不产生残留和危害,即增产又不浪费,又保护生态环境,可以说是利国利民。
现在过量使用化肥已造成农田环境的污染,土地退化,盐碱沙漠化快速蔓延,农作物农药残留超标,人食用的安全隐患增加,微生物肥料的研发和推广也是历史的必然。成为不可阻挡的潮流。
农作物生长需要氮肥,是不可否认的事实,生物固氮由来已久,为什么尿素用量能占绝对优势,主要原因要从生物固氮本身找原因,生物固氮虽然好,但存在着以往生物固氮,发展慢、退化快、固氮少,不能满足农业发展需要,也是无法否认的现实。
空气中存在着大量游离态氮,如何利用这些资源,给生物科技工作提供了广阔发展空间。我们翻开生物固氮发展史可以看出,自生互生联合固氮菌是从豆种植物和牧草根部采集的,由于它们的生长环境的优越,没有形成它耐恶劣环境和快速繁殖的优势,而是生存发展有选择性。天生的缺点无法克服。
当前生物肥菌数只有0.2-2亿/克,这样少的菌数下地它要战胜杂菌,又要分解有机质、化肥,农药残留及矿物质和自身能力不相适应,往往“战斗”尚未展开菌数损失过半,敌我太悬殊,怪不了生物肥“效果不佳”。
专家估计,化肥用量今后30年将继续保持增长趋势,2020年氮肥用量将增至目前用量2倍,如果不采取有效对策,水资源污染将进一步恶化,到那时间,就不是癌症“村”了。“未雨绸缪”和“亡羊补牢”的选择摆在我们面前。
从源头抓起,效果会事半功倍。已经污染再去治理,难度之大,无可比拟。
深度开发生物固氮对全球生态环境的保护,生态与发展极端重要,对动植物和人类的生存及农业增产和耕地的保护有极其重要的作用,是生态文明要解决的重大问题之一。
选择生命力强的固氮菌,生命力强是恶劣环境造成的,豆种根瘤菌,环境优越,生命力弱,固氮少,繁殖慢,退化快,农民反映生物肥效果不佳,所以生物肥发展困难,不景气。
从沙棘根须上采集筛选的沙棘固氮菌,因为沙棘在恶劣环境中生存,干旱沙漠、湿地,岩石缝中都能生长、繁衍,它固氮能力强,每亩沙棘树的根廇菌可固定相当25公斤尿素的氮。沙棘固氮菌与沙棘共生,离开沙棘以后能否存活,繁衍,固氮,实践告诉我们,离开沙棘树根以后,满足它的生存条件,很快繁衍到840亿/克,下地不用尿素,也没用磷肥和钾肥,蔬菜生长旺盛,说明,它固氮能力强,当然还应该用磷钾、微肥,有机质等不可缺少。减少尿素用量,对节能减排,保护生态环境,保护水源,保护人们健康都有重大而深远意义。
具体实施方式:实施方案如下:实施例1:
1、筛选耐恶劣环境沙棘树,从根部采集菌种用稀释分离法或划线分离法,对沙棘菌纯化处理,然后用阿须贝氏无氮培养基(PH值6.8-7.8进行试管斜面培养,培养箱温度25℃-30℃时间3天。
2、把斜面菌种进行一级种子振荡培养,培养基含10%氨基酸水剂,用容器300ml的三角瓶装100毫升10%氨基酸水剂,把培养好的斜面菌种在洁净工作台上,接入三角瓶中,放入每分钟110转摇床内,25℃-30℃,培养三天。
3、把一级振荡培养的菌种,接入二级振荡培养棕色瓶,换成含10%黄腐酸培养基(黄腐酸分子量400-1000为佳)用容量3000毫升的棕色瓶,瓶内装含10%黄腐酸水溶液1000毫升,把100毫升一级种接入瓶中放进摇床,温度25℃-30℃,培养三天。
4、菌液通气发酵培养生产种,把二级种放入含无菌水的风化煤中,菌种:风化煤:无菌水比例1:70:29拌匀后,把风化煤放入温室,温度25℃-30℃,湿度70℃-85℃。发酵三天。可得到840亿/克左右的固氮菌生产种。用于生产固氮菌肥。
5、选载体(风化煤、褐煤、泥炭、秸杆粉碎、经过分类粉碎脱毒的垃圾任意一种)菌和载体(以1:100重量比,加水30%拌匀在25℃-30℃温室发酵三天后形成固氮菌肥。
附图说明
图中符号
图1是生产工艺流程图,其中,1、筛选菌种、纯化处理、斜面培养。2、一级菌种扩大培养。3、二级菌种扩大培养。4、菌液通气发酵培养生产种。5、选载体消毒用生产种生产菌肥。
Claims (5)
1.一种农用高效固氮菌的生产方法,其特征在于:筛选耐恶劣环境沙棘树,从根部采集菌种用稀释分离法或划线分离法,对沙棘菌纯化处理,然后用阿须贝氏无氮培养基(PH值6.8-7.8进行试管斜面培养,培养箱温度25℃-30℃时间3天。
2.把斜面菌种进行一级种子振荡培养,培养基含10%氨基酸水剂,用容器300ml的三角瓶装100毫升10%氨基酸水剂,把培养好的斜面菌种在洁净工作台上,接入三角瓶中,放入每分钟110转摇床内,25℃-30℃,培养三天。
3.把一级振荡培养的菌种,接入二级振荡培养棕色瓶,换成含10%黄腐酸培养基(黄腐酸分子量400-1000为佳)用容量3000毫升的棕色瓶,瓶内装含10%黄腐酸水溶液1000毫升,把100毫升一级种接入瓶中放进摇床,温度25℃-30℃,培养三天。
4.菌液通气发酵培养生产种,把二级种放入含无菌水的风化煤中,菌种:风化煤:无菌水比例1:70:29拌匀后,把风化煤放入温室,温度25℃-30℃,湿度70℃-85℃。发酵三天。可得到840亿/克左右的固氮菌生产种。用于生产固氮菌肥。
5.选载体(风化煤、褐煤、泥炭、秸杆粉碎、经过分类粉碎脱毒的垃圾任意一种)菌和载体(以1:100重量比,加水30%拌匀在25℃-30℃温室发酵三天后形成固氮菌肥。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105063166A (zh) * | 2015-09-16 | 2015-11-18 | 东莞市保得生物工程有限公司 | 一种无氮固体培养基及利用其鉴定自生固氮菌是否分泌氨的方法 |
CN113174346A (zh) * | 2021-05-21 | 2021-07-27 | 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 | 一种高效分离玉米内生固氮菌的方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1465226A (zh) * | 2002-06-21 | 2004-01-07 | 中国科学院沈阳应用生态研究所 | 沙棘联合共生体的构建方法 |
CN1958532A (zh) * | 2006-11-01 | 2007-05-09 | 内蒙古新鸿盛高科技园区有限责任公司 | 一种含有稀土元素的微生物肥料 |
WO2012117170A2 (fr) * | 2011-02-28 | 2012-09-07 | Am Phyto Conseil | Extrait de rameaux d'hiver d'hippophae et son utilisation dans une composition cosmétique. |
CN103214317A (zh) * | 2013-05-16 | 2013-07-24 | 湖南泰谷生物科技股份有限公司 | 一种活性氨基酸水溶肥料及其制备方法和应用 |
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- 2013-10-09 CN CN201310466100.9A patent/CN104560757A/zh active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1465226A (zh) * | 2002-06-21 | 2004-01-07 | 中国科学院沈阳应用生态研究所 | 沙棘联合共生体的构建方法 |
CN1958532A (zh) * | 2006-11-01 | 2007-05-09 | 内蒙古新鸿盛高科技园区有限责任公司 | 一种含有稀土元素的微生物肥料 |
WO2012117170A2 (fr) * | 2011-02-28 | 2012-09-07 | Am Phyto Conseil | Extrait de rameaux d'hiver d'hippophae et son utilisation dans une composition cosmétique. |
CN103214317A (zh) * | 2013-05-16 | 2013-07-24 | 湖南泰谷生物科技股份有限公司 | 一种活性氨基酸水溶肥料及其制备方法和应用 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
刘志强,张利平: "沙棘和沙枣根瘤中固氮放线菌物种多样性研究", 《安徽农业科学》 * |
赵溪 等: "关帝山不同植被恢复类型对土壤碳、氮含量及微生物数量的影响", 《生态学杂志》 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105063166A (zh) * | 2015-09-16 | 2015-11-18 | 东莞市保得生物工程有限公司 | 一种无氮固体培养基及利用其鉴定自生固氮菌是否分泌氨的方法 |
CN113174346A (zh) * | 2021-05-21 | 2021-07-27 | 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 | 一种高效分离玉米内生固氮菌的方法 |
CN113174346B (zh) * | 2021-05-21 | 2022-04-15 | 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 | 一种高效分离玉米内生固氮菌的方法 |
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