CN104560757A - 一种农用高效固氮菌的生产方法 - Google Patents

一种农用高效固氮菌的生产方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104560757A
CN104560757A CN201310466100.9A CN201310466100A CN104560757A CN 104560757 A CN104560757 A CN 104560757A CN 201310466100 A CN201310466100 A CN 201310466100A CN 104560757 A CN104560757 A CN 104560757A
Authority
CN
China
Prior art keywords
days
fertilizer
production method
bacterium
weathered coal
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201310466100.9A
Other languages
English (en)
Inventor
魏明重
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201310466100.9A priority Critical patent/CN104560757A/zh
Publication of CN104560757A publication Critical patent/CN104560757A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F11/00—Other organic fertilisers
    • C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Fertilizers (AREA)

Abstract

本发明公开了一种农用高效固氮菌生产方法，(优选了特殊固氮菌种、创新培养基)所述的培养基除贝氏培养基外还先后改用了氨基酸、专用黄腐酸，载体用了优质风化煤、畜禽粪便、农作物秸杆等有机废料，产品经有资质权威机构检测总活菌数840亿／克，田间应用表现超常。本发明目的是为了减少尿素用量，降低硝酸盐污染，节能减排，有利人民健康，保护环境，促进生态文明建设，看来空中固氮前景看好。

Description

一种农用高效固氮菌的生产方法
技术领域  微生物技术领域 
背景技术
中国五千年传统农业，以有机肥为主，五千年土地没退化。学***衡，合理开发生物肥，改造自然的要求，具有广阔社会前景。 
氮是构成植物生命的最重要元素之一，自然界中某些微生物直接将大气中的氮通过固氮酶还原成氨NH4+，这类微生物包括细菌，兰绿藻、放线菌等，在固氮菌中有一类属自由生活类群，它们是植于植物根表，有可能浸入植物表皮外皮层的细胞间隙，和近根土壤中，靠根系分泌物生存、繁衍，与植物根系有密切关系，但宿主植物不形成特异分化结构，植物与细胞之间这种共生关系联合共生固氮。这类固氮菌，称联合固氮菌。 
巴西实验室1976年提出，20年来受到各国科学家重视。 
沙棘是在干旱地区少数具有固氮能力的木本植物。沙棘虽然不是豆种植物，但也与某些固氮菌共生，固氮菌在沙棘的根系上生长，形成根瘤。这种特性，对于沙棘在恶劣环境生存具有重要生态学意义。 
当前，农业生产需要的氮，主要是靠化学肥料-尿素供应，由于肥料碳氮比失调，土壤失去固氮能力，作物吸收约30％，70％的氮进入环境，主要进入地下水和空气，污染环境。 
如果我们换位思考，每亩地上空有数十吨氮含在空气中，没被利用，利用空气中的氮要靠生物固氮，现在的固氮菌(包括解磷、解钾菌)每克0.2亿-2个亿，下地作用甚微。每种菌最多不过固定相当于尿素2-3公斤氮，满足不了农作物对氮的需求。 
发明内容：
1、筛选耐恶劣环境沙棘树，从根部采集菌种用稀释分离法或划线分离法，对沙棘菌纯化处理，然后用阿须贝氏无氮培养基(PH值6.8-7.8进行试管斜面培养，培养箱温度25℃-30℃时间3天。 
2、把斜面菌种进行一级种子振荡培养，培养基含10％氨基酸水剂，用容器300ml的三角瓶装100毫升10％氨基酸水剂，把培养好的斜面菌种在洁净工作台上，接入三角瓶中，放入每分钟110转摇床内，25℃-30℃，培养三天。 
3、把一级振荡培养的菌种，接入二级振荡培养棕色瓶，换成含10％黄腐酸培养基(黄腐酸分子量400-1000为佳)用容量3000毫升的棕色瓶，瓶内装含10％黄腐酸水溶液1000毫升，把100毫升一级种接入瓶中放进摇床，温度25℃-30℃，培养三天。 
4、菌液通气发酵培养生产种，把二级种放入含无菌水的风化煤中，菌种：风化煤：无菌水比例1：70：29拌匀后，把风化煤放入温室，温度25℃-30℃，湿度70℃-85℃。发酵三天。可得到840亿／克左右的固氮菌生产种。用于生产固氮菌肥。 
5、选载体(风化煤、褐煤、泥炭、秸杆粉碎、经过分类粉碎脱毒的垃圾任意一种)菌和载体(以1：100重量比，加水30％拌匀在25℃-30℃温室发酵三天后形成固氮菌肥。 
任何肥料被作物吸收都必须有微生物的参与与分解，微生物肥料的功能也由此而产生，它既能最大限度发挥肥效，将养分分解转化被作物吸收利用，不产生残留和危害，即增产又不浪费，又保护生态环境，可以说是利国利民。 
现在过量使用化肥已造成农田环境的污染，土地退化，盐碱沙漠化快速蔓延，农作物农药残留超标，人食用的安全隐患增加，微生物肥料的研发和推广也是历史的必然。成为不可阻挡的潮流。 
农作物生长需要氮肥，是不可否认的事实，生物固氮由来已久，为什么尿素用量能占绝对优势，主要原因要从生物固氮本身找原因，生物固氮虽然好，但存在着以往生物固氮，发展慢、退化快、固氮少，不能满足农业发展需要，也是无法否认的现实。 
空气中存在着大量游离态氮，如何利用这些资源，给生物科技工作提供了广阔发展空间。我们翻开生物固氮发展史可以看出，自生互生联合固氮菌是从豆种植物和牧草根部采集的，由于它们的生长环境的优越，没有形成它耐恶劣环境和快速繁殖的优势，而是生存发展有选择性。天生的缺点无法克服。 
当前生物肥菌数只有0.2-2亿／克，这样少的菌数下地它要战胜杂菌，又要分解有机质、化肥，农药残留及矿物质和自身能力不相适应，往往“战斗”尚未展开菌数损失过半，敌我太悬殊，怪不了生物肥“效果不佳”。 
专家估计，化肥用量今后30年将继续保持增长趋势，2020年氮肥用量将增至目前用量2倍，如果不采取有效对策，水资源污染将进一步恶化，到那时间，就不是癌症“村”了。“未雨绸缪”和“亡羊补牢”的选择摆在我们面前。 
从源头抓起，效果会事半功倍。已经污染再去治理，难度之大，无可比拟。 
深度开发生物固氮对全球生态环境的保护，生态与发展极端重要，对动植物和人类的生存及农业增产和耕地的保护有极其重要的作用，是生态文明要解决的重大问题之一。 
选择生命力强的固氮菌，生命力强是恶劣环境造成的，豆种根瘤菌，环境优越，生命力弱，固氮少，繁殖慢，退化快，农民反映生物肥效果不佳，所以生物肥发展困难，不景气。 
从沙棘根须上采集筛选的沙棘固氮菌，因为沙棘在恶劣环境中生存，干旱沙漠、湿地，岩石缝中都能生长、繁衍，它固氮能力强，每亩沙棘树的根廇菌可固定相当25公斤尿素的氮。沙棘固氮菌与沙棘共生，离开沙棘以后能否存活，繁衍，固氮，实践告诉我们，离开沙棘树根以后，满足它的生存条件，很快繁衍到840亿／克，下地不用尿素，也没用磷肥和钾肥，蔬菜生长旺盛，说明，它固氮能力强，当然还应该用磷钾、微肥，有机质等不可缺少。减少尿素用量，对节能减排，保护生态环境，保护水源，保护人们健康都有重大而深远意义。 
具体实施方式：实施方案如下：实施例1： 
1、筛选耐恶劣环境沙棘树，从根部采集菌种用稀释分离法或划线分离法，对沙棘菌纯化处理，然后用阿须贝氏无氮培养基(PH值6.8-7.8进行试管斜面培养，培养箱温度25℃-30℃时间3天。 
2、把斜面菌种进行一级种子振荡培养，培养基含10％氨基酸水剂，用容器300ml的三角瓶装100毫升10％氨基酸水剂，把培养好的斜面菌种在洁净工作台上，接入三角瓶中，放入每分钟110转摇床内，25℃-30℃，培养三天。 
3、把一级振荡培养的菌种，接入二级振荡培养棕色瓶，换成含10％黄腐酸培养基(黄腐酸分子量400-1000为佳)用容量3000毫升的棕色瓶，瓶内装含10％黄腐酸水溶液1000毫升，把100毫升一级种接入瓶中放进摇床，温度25℃-30℃，培养三天。 
4、菌液通气发酵培养生产种，把二级种放入含无菌水的风化煤中，菌种：风化煤：无菌水比例1：70：29拌匀后，把风化煤放入温室，温度25℃-30℃，湿度70℃-85℃。发酵三天。可得到840亿／克左右的固氮菌生产种。用于生产固氮菌肥。 
5、选载体(风化煤、褐煤、泥炭、秸杆粉碎、经过分类粉碎脱毒的垃圾任意一种)菌和载体(以1：100重量比，加水30％拌匀在25℃-30℃温室发酵三天后形成固氮菌肥。 
附图说明
图中符号 
图1是生产工艺流程图，其中，1、筛选菌种、纯化处理、斜面培养。2、一级菌种扩大培养。3、二级菌种扩大培养。4、菌液通气发酵培养生产种。5、选载体消毒用生产种生产菌肥。 

Claims (5)

1.一种农用高效固氮菌的生产方法，其特征在于：筛选耐恶劣环境沙棘树，从根部采集菌种用稀释分离法或划线分离法，对沙棘菌纯化处理，然后用阿须贝氏无氮培养基(PH值6.8-7.8进行试管斜面培养，培养箱温度25℃-30℃时间3天。 
2.把斜面菌种进行一级种子振荡培养，培养基含10％氨基酸水剂，用容器300ml的三角瓶装100毫升10％氨基酸水剂，把培养好的斜面菌种在洁净工作台上，接入三角瓶中，放入每分钟110转摇床内，25℃-30℃，培养三天。 
3.把一级振荡培养的菌种，接入二级振荡培养棕色瓶，换成含10％黄腐酸培养基(黄腐酸分子量400-1000为佳)用容量3000毫升的棕色瓶，瓶内装含10％黄腐酸水溶液1000毫升，把100毫升一级种接入瓶中放进摇床，温度25℃-30℃，培养三天。 
4.菌液通气发酵培养生产种，把二级种放入含无菌水的风化煤中，菌种：风化煤：无菌水比例1：70：29拌匀后，把风化煤放入温室，温度25℃-30℃，湿度70℃-85℃。发酵三天。可得到840亿／克左右的固氮菌生产种。用于生产固氮菌肥。 
5.选载体(风化煤、褐煤、泥炭、秸杆粉碎、经过分类粉碎脱毒的垃圾任意一种)菌和载体(以1：100重量比，加水30％拌匀在25℃-30℃温室发酵三天后形成固氮菌肥。 
CN201310466100.9A 2013-10-09 2013-10-09 一种农用高效固氮菌的生产方法 Pending CN104560757A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310466100.9A CN104560757A (zh) 2013-10-09 2013-10-09 一种农用高效固氮菌的生产方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310466100.9A CN104560757A (zh) 2013-10-09 2013-10-09 一种农用高效固氮菌的生产方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN104560757A true CN104560757A (zh) 2015-04-29

Family

ID=53077839

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310466100.9A Pending CN104560757A (zh) 2013-10-09 2013-10-09 一种农用高效固氮菌的生产方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104560757A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105063166A (zh) * 2015-09-16 2015-11-18 东莞市保得生物工程有限公司 一种无氮固体培养基及利用其鉴定自生固氮菌是否分泌氨的方法
CN113174346A (zh) * 2021-05-21 2021-07-27 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 一种高效分离玉米内生固氮菌的方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1465226A (zh) * 2002-06-21 2004-01-07 中国科学院沈阳应用生态研究所 沙棘联合共生体的构建方法
CN1958532A (zh) * 2006-11-01 2007-05-09 内蒙古新鸿盛高科技园区有限责任公司 一种含有稀土元素的微生物肥料
WO2012117170A2 (fr) * 2011-02-28 2012-09-07 Am Phyto Conseil Extrait de rameaux d'hiver d'hippophae et son utilisation dans une composition cosmétique.
CN103214317A (zh) * 2013-05-16 2013-07-24 湖南泰谷生物科技股份有限公司 一种活性氨基酸水溶肥料及其制备方法和应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1465226A (zh) * 2002-06-21 2004-01-07 中国科学院沈阳应用生态研究所 沙棘联合共生体的构建方法
CN1958532A (zh) * 2006-11-01 2007-05-09 内蒙古新鸿盛高科技园区有限责任公司 一种含有稀土元素的微生物肥料
WO2012117170A2 (fr) * 2011-02-28 2012-09-07 Am Phyto Conseil Extrait de rameaux d'hiver d'hippophae et son utilisation dans une composition cosmétique.
CN103214317A (zh) * 2013-05-16 2013-07-24 湖南泰谷生物科技股份有限公司 一种活性氨基酸水溶肥料及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘志强，张利平: "沙棘和沙枣根瘤中固氮放线菌物种多样性研究", 《安徽农业科学》 *
赵溪 等: "关帝山不同植被恢复类型对土壤碳、氮含量及微生物数量的影响", 《生态学杂志》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105063166A (zh) * 2015-09-16 2015-11-18 东莞市保得生物工程有限公司 一种无氮固体培养基及利用其鉴定自生固氮菌是否分泌氨的方法
CN113174346A (zh) * 2021-05-21 2021-07-27 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 一种高效分离玉米内生固氮菌的方法
CN113174346B (zh) * 2021-05-21 2022-04-15 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 一种高效分离玉米内生固氮菌的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103626586B (zh) 一种蔬菜瓜果生物活性育苗基质及制备方法和应用
CN102653479B (zh) 一种以菌糠为原料制造生物有机肥及其制备方法
CN102531720B (zh) 尾菜与秸秆畜禽便发酵生物肥料及其制备方法
CN103664378B (zh) 有机肥料
CN103848698A (zh) 一种利用沼渣好氧发酵制备的生物有机肥及其制备方法
CN102491802A (zh) 茶粕生物有机肥及其生产方法
CN101463334B (zh) 一种用于制备生物有机肥的发酵液组合物及其制备方法和应用
CN103194405B (zh) 用于促进生姜生长及防控连作生姜土传枯萎病的促生菌及其微生物有机肥料
CN103664352A (zh) 一种基于动植物废弃物的微生物有机复合肥及其制备方法
CN109265217A (zh) 一种土壤调理剂的制作方法
CN102674996A (zh) 一种生物有机肥及其制造方法
CN101486609A (zh) 一种包含有机物、无机物和有益微生物的生态有机肥
CN1648107A (zh) 一种生物有机肥料及其制备方法
CN103664353A (zh) 一种基于中药废弃物的微生物有机复合肥及其制备方法
CN103449886A (zh) 一种水稻复合微生物肥料
CN105199962A (zh) 一种微生物秸秆腐熟剂及其制备方法和应用
CN103664354A (zh) 一种富有机硒微生物有机复合肥及其制备方法
CN104774087A (zh) 生物制剂及其制备方法、以及在土壤改良、肥料中的应用
CN107473786A (zh) 一种水稻秸秆还田改善土壤的方法
CN105565959A (zh) 修复土壤生态***有机肥
CN103833460A (zh) 一种富必需氨基酸的微生物有机复合肥及其制备方法
CN104829398A (zh) 一种有机土壤改良肥
CN102173887A (zh) 一种含有阿维菌素的生物有机肥的生产方法
CN107298633A (zh) 一种秸秆堆沤用生物制剂
CN106045679A (zh) 一种花生专用的有机复合生物肥的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
DD01 Delivery of document by public notice

Addressee: Wei Mingzhong

Document name: the First Notification of an Office Action

DD01 Delivery of document by public notice
DD01 Delivery of document by public notice

Addressee: Wei Mingzhong

Document name: Notification that Application Deemed to be Withdrawn

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20150429