CN104531557B - 一株产生杀螺活性物质的亚鲜红链霉菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一株产生杀螺活性物质的亚鲜红链霉菌及其应用，属于寄生虫防治技术领域。本发明放线菌保藏号为CGMCC No.9786，其16S rDNA的序列如SEQ ID No.1所示。该菌发酵产物在制备杀螺药物中的用途。本发明的优点是：所述的放线菌CGMCC No.9786为一株链霉菌属新种，其发酵液对钉螺有良好的杀灭作用，具有较高开发前景。

Description

一株产生杀螺活性物质的亚鲜红链霉菌及其应用
技术领域
本发明涉及一株产生杀螺活性物质的链霉菌属（Streptomyces subrutilus）放线菌，属于寄生虫防治技术领域。
背景技术
日本血吸虫病是一种严重危害我国人民身体健康和生命安全的重大传染性疾病，经过多年防治，取得了举世瞩目的成绩，但血吸虫病传播与流行的因素依然存在，成为导致血吸虫病疫情反复或再流行的潜在威胁因素。湖北钉螺是日本血吸虫病的唯一中间宿主，杀灭钉螺是预防和控制血吸虫病流行、巩固血吸虫病防治取得的成果的重要举措之一。因此寻找新的高效、低毒、价廉杀螺药物仍是当前迫切而重要的任务。
目前生物源农药的发展受到世界各国的关注，已有多个生物农药产品获得广泛应用，其中包括井冈霉素、赤霉素、阿维菌素、春雷霉素等。从放线菌中筛选新型农药是当前研究的热点之一。
土壤里生存繁衍着数量巨大的微生物，为了适应生态环境，土壤中的微生物形成了独特的生理特性和代谢特性，进而产生了多种多样的次生代谢产物，成为人类寻找和开发具有生物活性的化合物的重要源泉。
发明内容
本发明要解决的技术是提供一株能够产生杀螺活性物质的链霉菌。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一株产生杀螺活性物质的链霉菌属（Streptomyces subrutilus）放线菌，其保藏号为CGMCC No.9786。
放线菌CGMCC No.9786是由吉林省通化市玉皇山土壤中分离得到。
所述放线菌CGMCC No.9786，其16S rDNA的序列如SEQ ID No.1所示。
所述放线菌CGMCC No.9786的应用，该菌发酵产物在制备杀螺药物中的用途。
放线菌具有以下微生物特征：
（1）培养特征与形态特征
所述菌株在马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）、高氏一号合成培养基、甘油天冬素琼脂培养基（ISP2）、无机盐淀粉琼脂培养基（ISP3）、酵母精麦芽糖精琼脂培养基（ISP4）、燕麦粉琼脂培养基（ISP5）、Czapek培养基上生长良好，均可产生较丰富的气生菌丝，但均无可溶性色素产生。菌株在不同培养基上的培养特征详见表1。在光学显微镜下观察所述菌株孢子丝为波曲状，孢子呈椭圆形。
表1 菌株CGMCC No.9786的培养特征
（2）生理生化特征
所述菌株能利用葡萄糖、果糖、麦芽糖、木糖；不能利用蔗糖、***糖、甘露糖、甘露醇、乳糖。能利用纤维素，无黑色素，有微弱的H2S产生。能使明胶液化，牛奶凝固胨化。
（3）所述放线菌，其16S rDNA 的序列为SEQ ID No.1所示。
本发明的有益效果：所述的放线菌CGMCC No.9786为一株链霉菌属新种，其发酵液对钉螺有良好的杀灭作用，具有较高开发前景。
生物材料样品保藏：一株产生杀螺活性物质的链霉菌属（Streptomyces subrutilus）放线菌，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号CGMCCNo.9786，保藏日期2014年10月16日。
附图说明
图1本发明所述菌株在高氏一号培养基中（培养10天）的培养形态。
图2本发明所述菌株的菌丝及孢子丝形态，400×。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明
实施例1：菌株CGMCC No.9786的分离
称取1g土样加入到含10mL生理盐水的三角瓶中，充分混匀。对样品做10倍系列梯度稀释，各取100μL 10-1、10-2、10-3、10-4、10-5稀释度的菌液涂布于高氏一号培养基上，28℃倒置培养。适时挑取形态、颜色不同的菌落进行划线纯化。对于已纯化的放线菌，根据菌落形态学特征，排除相同菌株，转入斜面4℃保存，编号，留作菌株筛选用。
实施例2 ：菌株CGMCC No.9786的培养
（1）斜面培养：培养7天。培养基：可溶性淀粉2%，硝酸钾0.1%，氯化钠0.05%，磷酸氢二钾0.05%，硫酸镁0.05%，硫酸亚铁0.01%，琼脂1.5%。蒸馏水配制，初始pH 7.2-7.4。
（2）发酵培养：从斜面挑取经活化的单菌落接入发酵培养基中，28℃、180r/min 摇瓶培养7天。培养基：葡萄糖2%，可溶性淀粉2%，硝酸钾0.5%，磷酸氢二钾0.05%。用蒸馏水配制，初始pH 7.2-7.4。
实施例 3 菌株CGMCC No.9786发酵液杀螺效果
将发酵液用0.22μm微孔滤膜过滤，滤液分别稀释成发酵原液的1/10、1/50和1/100，每个浓度放入10只钉螺成螺，每组药液量为100mL，浸泡钉螺72h后倒去药液，清水冲洗，复苏48h，敲击法观察钉螺死活并计数；每个浓度均做三组平行同时设清水对照。发酵原液浓度的1/10、1/50和1/100钉螺死亡率分别为100.00%、100.00%和90.00%，表明此发酵液有良好的杀螺效果。
<210> SEQ ID NO: 1
<211> 1474
<212> DNA
<213> 链霉菌属（Streptomyces subrutilus）放线菌CGMCC No.9786
<400>1
AGAGTTTGAT CCTGGCTCAG GACGAACGCT GGCGGCGTGC TTAACACATG CAAGTCGAAC 60
GATGAAGCCC TTCGGGGTGG ATTAGTGGCG AACGGGTGAT AACACGTGGG CAATCTGCCC 120
TTCACTCTGG GACAAGCCCT GGAAACGGGG TCTAATACCG GATACCACTC CTGTCTGCAT 180
GGGCAGGGGT TGAAAGCTCG GCGGTGAAGG ATGAGCCCGC GGCCTATCAG CTTGTTGGTG 240
GGGTAATGGC CCACCAAGGC GACGACGGTA GCCGGCCTGA GAGGGCGCCG GCCACACTGG 300
GACTGAGACA CGGCCCAGAC TCCTACGGGA GGCAGCAGTG GGGAATATTG CACAATGGGC 360
GAAAGCCTGA TGCAGCGACG CCGCGTGAGG GATGACGGCC TTCGGGTTGT AAACCTCTTT 420
CAGCAGGGAA GAAGCGAAAG TGACGGTACC TGCAGAAGAA GCGCCGGCTA ACTACGTGCC 480
AGCAGCCGCG GTAATACGTA GGGCGCAAGC GTTGTCCGGA ATTATTGGGC GTAAAGAGCT 540
CGTAGGCGGC TTGTCACGTC GGATGTGAAA GCCCGAGGCT TAACCTCGGG TCTGCATTCG 600
ATACGGGCTA GCTAGAGTGT GGTAGGGGAG ATCGGAATTC CTGGTGTAGC GGTGAAATGC 660
GCAGATATCA GGAGGAACAC CGGTGGCGAA GGCGGATCTC TGGGCCATTA CTGACGCTGA 720
GGAGCGAAAG CGTGGGGAGC GAACAGGATT AGATACCCTG GTAGTCCACG CCGTAAACGT 780
TGGGAACTAG GTGTTGGCGA CATTCCACGT CGTCGGTGCC GCAGCTACGC ATTAAGTTCC 840
CCGCCTGGGG AGTACGGCCG CAAGGCTAAA ACTCAAAGGA ATTGACGGGG GCCCGCACAA 900
GCAGCGGAGC ATGTGGCTTA ATTCGACGCA ACGCGAAGAA CCTTACCAAG GCTTGACATA 960
TACCGGAAAG CATTAGAGAT AGTGCCCCCC TTGTGGTCGG TATACAGGTG GTGCATGGCT 1020
GTCGTCAGCT CGTGTCGTGA GATGTTGGGT TAAGTCCCGC AACGAGCGCA ACCCTTGTCC 1080
TGTGTTGCCA GCATGCCTTC GGGGTGATGG GGACTCACAG GAGACCGCCG GGGTCAACTC 1140
GGAGGAAGGT GGGGACGACG TCAAGTCATC ATGCCCCTTA TGTCTTGGGC TGCACACGTG 1200
CTACAATGGC CGGTACAATG AGCTGCGATA CCGTGAGGTG GAGCGAATCT CAAAAAGCCG 1260
GTCTCAGTTC GGATTGGGGT CTGCAACTCG ACCCCATGAA GTCGGAGTTG CTAGTAATCG 1320
CAGATCAGCA TTGCTGCGGT GAATACGTTC CCGGGCCTTG TACACACCGC CCGTCACGTC 1380
ACGAAAGTCG GTAACACCCG AAGCCGGTGG CCCAACCCGT AAGGGAGGGA GCTGTCGAAG 1440
GTGGGACTGG CGATTGGGAC GAAGTCGTAA CAAG 1474

Claims (3)

1.一株产生杀螺活性物质的链霉菌属（Streptomyces subrutilus）放线菌，其保藏号为CGMCC No.9786。
2.根据权利要求1所述放线菌CGMCC No.9786，其特征在于，其16S rDNA的序列如SEQID No.1所示。
3.权利要求1所述放线菌CGMCC No.9786的应用，其特征在于该菌发酵产物在制备杀螺药物中的用途。
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