CN104450864A - 一种组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及医学检测领域，具体公开了一种组合物及其应用。本发明所述应用包括过氧化物酶、指示剂、抗干扰化合物，所述抗干扰化合物为钌元素化合物、铑元素化合物和钯元素化合物中的一种或两种以上。本发明选择过氧化物酶、指示剂和第5周期VIIIB族元素化合物为组合物，应用到以过氧化物酶为指示***的检测方法中，可有效降低各种干扰物质在检测时的影响，应用范围广泛。
Description
技术领域
本发明涉及医学检测领域，具体涉及一种组合物及其应用。
背景技术
干扰物是临床检测结果误差的主要来源。这种误差对病人的诊断非常不利，有时会导致非常严重的后果。
利用过氧化物酶作为指示***已广泛用于葡萄糖、肌酐、尿酸、胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇、谷丙转氨酶、谷草转氨酶等项目的测定。该方法的主要缺点是容易受到维生素C(抗坏血酸)、尿酸、胆红素、谷胱甘肽、水杨酸、对乙酰氨基酚等还原性物质的干扰，严重时测定结果会出现假性负值。
提高检测方法的特异性是人们不断追求的目标，文献中也报道了一些去除干扰的方法。例如：美国专利US5156947A公开的采用一些氧化酶去除还原性试剂的干扰。比如：胆红素氧化酶、尿酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶。但是，样本还有很多其他的干扰物质没有合适的氧化酶，比如：水杨酸、对乙酰氨基酚等。另外，氧化酶氧化干扰物后往往产生双氧水(即过氧化氢)，对随后分析物产生的双氧水的检测也会带来不利的影响。
欧洲专利EP0449812B1和美国专利US4743559公开了采用氧化性物质去除上述还原性物质干扰的方法，其公开的氧化性物质为次氯酸盐、高碘酸等。此方法中的氧化性物质能够氧化样本中的还原性干扰物质，但是常常同时氧化指示剂，造成结果的假性升高。
美国专利US4954451公开了采用铈的化合物去除抗坏血酸的干扰，例如：[(NO3)3Ce]3H2IO6、[(NO3)3Ce]3CrO4。但是此系列试剂的水溶性不佳，限制了其在诊断试剂中的应用。
美国专利US4310626公开了采用Co(III)化合物去除干扰的方法。但是钴的化合物带有颜色，常常会引入新的干扰。
美国专利US4587220公开了采用Fe(III)的螯合物去除抗坏血酸的干扰。例如：Fe-HEDTA。此方法在去除抗坏血酸干扰的时候有一定的作用，但是在对胆红素等其他干扰时没有效果。另外，随着此化合物的引入，显色剂的稳定性也显著地下降。
另外，对于胆红素的干扰美国专利US4291121公开了采用亚铁***去除此干扰的方法。但是作为还原性试剂的亚铁***，常常会竞争显色剂与双氧水反应，使检测结果偏低。
目前，尚未有一种应用广泛的试剂能够同时有效降低抗坏血酸、尿酸、胆红素、谷胱甘肽、水杨酸、对乙酰氨基酚等还原性物质的干扰。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种组合物及其应用，使得所述组合物能够有效降低抗坏血酸、尿酸、胆红素、谷胱甘肽、水杨酸、对乙酰氨基酚对检测的干扰。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种组合物，包括过氧化物酶、指示剂、抗干扰化合物，所述抗干扰化合物为钌元素化合物、铑元素化合物和钯元素化合物中的一种或两种以上。
本发明针对现有以过氧化物酶为指示***的检测方法易出现受干扰物质干扰的问题，选择包括抗干扰物质、过氧化物酶和指示剂在内组合物加入其中，有效的改善了干扰现象，提高了检测准确度。
本发明选择元素周期表第5周期VIIIB族钌元素、铑元素和钯元素的化合物为抗干扰物质，其去干扰的机理可能为所述钌元素的化合物中空d轨道(铑、钯为空s轨道)与过氧化物酶中活性中心铁卟啉辅基中的π键电子产生了某种吸引合，同时与双氧水分子中氧原子的孤对SP3杂化轨道电子形成了某种配位键合，起到了提高过氧化物酶特异性的作用，从而改善了其抗干扰能力。
其中，作为优选，所述钌元素化合物为正二价钌元素化合物、正三价钌元素化合物、正四价钌元素化合物和正七价钌元素化合物中的一种或两种以上；更优选地，所述钌元素化合物为氯化苯钌(II)、顺-双(2,2'-二吡啶基)二氯化钌(II)、二(2-甲基烯丙基)(1,5-环辛二烯)钌(II)、羰基氯氢三(三苯基膦)钌(II)、羰酰二氢三(三苯基膦)钌(II)、氯(1,5-环辛二烯)(五甲基环戊二烯基)钌(II)、氯(环戊二烯基)双(三苯基膦)钌(II)、氯(五甲基环戊二烯基)双(三苯基膦)钌(II)、三(三苯基膦)二氯化钌(II)、三(三苯基膦)二氯化钌(II)、氯化六氨合亚钌(II)、六氰基钌(II)酸钾、三羰基二氯代钌(II)、三(4,7-联苯-1,10-邻菲啰啉)二氯化钌(II)、氧化钌(IV)、硫化钌(IV)、四正丙基过钌(VII)酸铵、六氯钌(III)酸钾、五氯钌(III)酸钾、溴化钌(III)、氯化钌(III)、碘化钌(III)、亚硝酰乙酸钌(III)、亚硝酰氯化钌(III)、亚硝酰硫酸钌(III)、二氯化五氨合氯钌(III)、氯化六氨合钌(III)中的一种或两种以上。括号中的***数字在化学领域为表述某元素化合价。
作为优选，所述铑元素化合物为正一价铑元素化合物和正三价铑元素化合物中的一种或两种以上；更优选地，所述铑元素化合物为二羰基乙酰丙酮铑(I)、羰基乙酰丙酮(三苯基磷基)铑(I)、五氯铑(III)酸钾、溴化铑(III)、氯化铑(III)、碘化铑(III)、硝酸铑(III)、六溴代铑(III)酸钠、三(乙二胺)三氯化铑(III)、乙酰丙酮铑(III)中的一种或两种以上。
作为优选，所述钯元素化合物为正二价钯元素化合物和正四价钯元素化合物中的一种或两种以上；更优选地，所述钯元素化合物为六氯钯(IV)酸铵、双(乙腈)二氯钯(II)、乙二胺氯化钯(II)、溴化钯(II)、氯化钯(II)、氰化钯(II)、硝酸钯(II)、硫酸钯(II)中的一种或两种以上。
作为优选，所述钌元素化合物、铑元素化合物、钯元素化合物中任意一种化合物的工作浓度均为1μmol/L～10mmol/L；更优选地，工作浓度均为20μmol/L～500μmol/L。
作为优选，所述过氧化物酶的工作浓度为1KU/L～1000KU/L。
作为优选，所述指示剂为苯胺类指示剂、酚类指示剂、Trinder指示剂、联氮类指示剂中的一种或两种以上；更优选地，所述指示剂为：TMB(3，3’，5，5’-四甲基联苯胺)、DHBS(3，5-二氯-2-羟基苯磺酸钠)、4AA(4-氨基安替比林)、TOOS[N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐]、ABTS[(2，2′-偶氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐)]中的一种或两种以上
作为优选，所述指示剂中任意一种指示剂的工作浓度为10μmol/L～10mmol/L。
采用本发明所述组合物替代现有的过氧化物酶、指示剂，以添加抗坏血酸、尿酸、胆红素、谷胱甘肽、水杨酸、对乙酰氨基酚等干扰物质的样本为试验对象检测对应项目的浓度，结果显示，相比未加入本发明所述组合物的方案，本发明能够有效降低干扰物质的影响，使各项目检测结果更加趋近于空白对照组的结果。
基于此，本发明还提供了所述组合物在检测葡萄糖、肌酐、尿酸、胆固醇、甘油三酯、谷丙转氨酶或谷草转氨酶浓度和在制备检测葡萄糖、肌酐、尿酸、胆固醇、甘油三酯、谷丙转氨酶或谷草转氨酶浓度试剂中的应用。
按照上述技术思路，本发明根据应用领域，提供了一种检测葡萄糖、肌酐、尿酸、胆固醇、甘油三酯、谷丙转氨酶、或谷草转氨酶的浓度的试剂，包括本发明前述各种方案下的任意一种组合物。
作为优选，本发明所述试剂还包括缓冲剂、稳定剂、表面活性剂以及使葡萄糖、肌酐、尿酸、胆固醇、甘油三酯、谷丙转氨酶或谷草转氨酶产生双氧水的对应酶。
对于上述稳定剂、表面活性剂、缓冲剂以及对应酶在以过氧化物酶为指示***的检测方法中属于常用的组分，本领域技术人员可以知晓选择适合的组分，但是作为优选，本发明给出了以下选择，这些选择均可以单一的使用，也可以组合使用：
对应酶，葡萄糖的对应酶为葡萄糖氧化酶；肌酐的对应酶为肌酐水解酶、肌氨酸酶和肌氨酸氧化酶；尿酸的对应酶为尿酸氧化酶、胆固醇的对应酶为胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶；甘油三酯的对应酶为脂肪酶、甘油酯酶和甘油磷酸氧化酶；高密度脂蛋白胆固醇的对应酶为胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶；谷丙转氨酶的对应酶为丙酮酸氧化酶；谷草转氨酶的对应酶为丙酮酸氧化酶；任意一种对应酶的工作浓度均为1KU/L～1000KU/L；
稳定剂，选自糖类或蛋白类中的一种，如葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、海藻糖、葡聚糖、山梨醇、甘露醇、BSA、HSA、酪蛋白、明胶、蛋白胨，浓度为0.1％～10％(质量百分比)；
缓冲剂，选自柠檬酸缓冲剂、磷酸盐缓冲剂、醋酸缓冲剂或Good’s缓冲剂(如MOPS和HEPES)，浓度为10mmol/L～500mmol/L；
表面活性剂，选自Tween系列、Triton系列、Brij系列或Pluronic系列，浓度为0.01％～10％。
此外，本发明的检测试剂也可以应用于干化学检测，将本发明的组合物固定在固相载体上，如滤纸等载体，然后干燥。测试时将样本加在固相载体上，进行反应，其在检测葡萄糖、肌酐、尿酸、胆固醇、甘油三酯、谷丙转氨酶或谷草转氨酶浓度时，同样可以获得良好的抗干扰性能。
由以上技术方案可知，本发明选择过氧化物酶、指示剂和第5周期VIIIB族元素化合物为组合物，应用到以过氧化物酶为指示***的检测方法中，可有效降低各种干扰物质在检测时的影响，应用范围广泛。
具体实施方式
本发明公开了一种组合物及其应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明所述产品已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的的组合物和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
依照本发明的技术方案，在一些具体实施方式中，本发明所述抗干扰化合物为六氰基钌(II)酸钾、硫化钌(IV)、二氯化五氨合氯钌(III)、氯化六氨合钌(III)、五氯铑(III)酸钾、二羰基乙酰丙酮铑(I)、硝酸铑(III)、三(乙二胺)三氯化铑(III)、六氯钯(IV)酸铵、乙二胺氯化钯(II)或氯化钯(II)、
或者，氯化苯钌(II)和双(乙腈)二氯钯(II)；
或者，三羰基二氯代钌(II)和羰基乙酰丙酮(三苯基磷基)铑(I)；
或者，三(4,7-联苯-1,10-邻菲啰啉)二氯化钌(II)、五氯钌(III)酸钾和六溴代铑(III)酸钠；
或者，羰基乙酰丙酮(三苯基磷基)铑(I)和双(乙腈)二氯钯(II)；
或者，三(三苯基膦)二氯化钌(II)和氰化钯(II)；
或者，氯(五甲基环戊二烯基)双(三苯基膦)钌(II)和氯(1,5-环辛二烯)(五甲基环戊二烯基)钌(II)；
或者，氯(五甲基环戊二烯基)双(三苯基膦)钌(II)和二(2-甲基烯丙基)(1,5-环辛二烯)钌(II)；
或者，氯化六氨合亚钌(II)、氯(1,5-环辛二烯)(五甲基环戊二烯基)钌(II)和氯化铑(III)；
或者，氯化六氨合钌(III)和五氯铑(III)酸钾；
或者，三(三苯基膦)二氯化钌(II)和五氯铑(III)酸钾；
或者，五氯铑(III)酸钾和氯化钯(II)。
下面结合实施例，进一步阐述本发明。
实施例1：
检测项目：尿酸浓度；
按照表1配制所示组合物进行：
表1
| 方案A | 方案B | 方案C | 方案D | 方案E | |
| 尿酸氧化酶 | 200KU/L | 200KU/L | 200KU/L | 200KU/L | 200KU/L |
| 过氧化物酶 | 200KU/L | 200KU/L | 200KU/L | 200KU/L | 200KU/L |
| 4AA | 10mmol/L | 10mmol/L | 10mmol/L | 10mmol/L | 10mmol/L |
| TOOS | 10mmol/L | 10mmol/L | 10mmol/L | 10mmol/L | 10mmol/L |
| 六氰基钌(II)酸钾 | -- | 1mmol/L | -- | -- | -- |
| 硫化钌(IV) | -- | -- | 2mmol/L | -- | -- |
| 二氯化五氨合氯钌(III) | -- | -- | -- | 50μmol/L | -- |
| 氯化六氨合钌(III) | -- | -- | -- | -- | 50μmol/L |
| MOPS | 0.1mol/L | 0.1mol/L | 0.1mol/L | 0.1mol/L | 0.1mol/L |
| Triton X100 | 0.2％ | 0.2％ | 0.2％ | 0.2％ | 0.2％ |
| 蔗糖 | 4％ | 4％ | 4％ | 4％ | 4％ |
用盐酸或者氢氧化钠调节pH值至7.4。
测试含有200μmol/L抗坏血酸、1.3mmol/L对乙酰氨基酚、20mg/dl胆红素、4.4mmol/L水杨酸、3mmol/L还原性谷胱甘肽干扰的样本，以不含干扰的样本作为对照，其尿酸浓度均为209μmol/L。分别取上述5个方案试剂1ml，加入100μL的样本。37℃反应5min，在560nm读取吸光度。测试前，采用同样的方法测试标准样本以绘制标准曲线，利用此标准曲线将测试结果换算成浓度，结果如表2所示(单位：μmol/L)：
表2
| 方案A | 方案B | 方案C | 方案D | 方案E | |
| 对照样本 | 211 | 206 | 203 | 213 | 208 |
| 抗坏血酸样本 | 172 | 180 | 182 | 207 | 205 |
| 对乙酰氨基酚样本 | 155 | 175 | 170 | 210 | 199 |
| 胆红素样本 | 165 | 181 | 182 | 201 | 191 |
| 水杨酸样本 | 164 | 188 | 185 | 195 | 192 |
| 还原性谷胱甘肽样本 | 155 | 190 | 179 | 189 | 200 |
从表2可以看出，本发明所述组合物的加入显著地改善了存在还原性干扰物质情况下的准确性。
实施例2：
检测项目：葡萄糖浓度；
按照表3配制所示组合物进行：
表3
| 方案A | 方案B | 方案C | 方案D | 方案E | |
| 葡萄糖氧化酶 | 300KU/L | 300KU/L | 300KU/L | 300KU/L | 300KU/L |
| 过氧化物酶 | 250KU/L | 250KU/L | 250KU/L | 250KU/L | 250KU/L |
| TMB | 10mmol/L | 10mmol/L | 10mmol/L | 10mmol/L | 10mmol/L |
| 五氯铑(III)酸钾 | -- | 10μmol/L | -- | -- | -- |
| 二羰基乙酰丙酮铑(I) | -- | -- | 20μmol/L | -- | -- |
| 硝酸铑(III) | -- | -- | -- | 100μmol/L | -- |
| 三(乙二胺)三氯化铑(III) | -- | -- | -- | -- | 500μmol/L |
| 磷酸缓冲液 | 0.1mol/L | 0.1mol/L | 0.1mol/L | 0.1mol/L | 0.1mol/L |
| Tween 20 | 0.1％ | 0.1％ | 0.1％ | 0.1％ | 0.1％ |
| 海藻糖 | 4％ | 4％ | 4％ | 4％ | 4％ |
用盐酸或者氢氧化钠调节pH值至6.5。
测试含有200μmol/L抗坏血酸、1.3mmol/L对乙酰氨基酚、20mg/dl胆红素、4.4mmol/L水杨酸、1.4mmol/L尿酸、3mmol/L还原性谷胱甘肽干扰的样本，以不含干扰的样本作为对照，其葡萄糖浓度均为4.5mmol/L。分别取上述5个方案的试剂1ml，加入40μL的样本。37℃反应5min，在650nm读取吸光度。测试前，采用同样的方法测试标准样本以绘制标准曲线，利用此标准曲线将测试结果换算成浓度，结果如表4所示(单位：mmol/L)：
表4
| 方案A | 方案B | 方案C | 方案D | 方案E | |
| 对照样本 | 4.4 | 4.5 | 4.4 | 4.6 | 4.5 |
| 抗坏血酸样本 | 3.2 | 4.0 | 4.1 | 3.8 | 4.2 |
| 对乙酰氨基酚样本 | 3.1 | 3.9 | 3.7 | 4.0 | 4.1 |
| 胆红素样本 | 2.9 | 3.9 | 3.7 | 3.6 | 3.3 |
| 水杨酸样本 | 3.0 | 3.3 | 3.8 | 4.3 | 4.1 |
| 尿酸样本 | 2.8 | 3.6 | 4.0 | 4.0 | 4.4 |
| 还原性谷胱甘肽样本 | 2.5 | 2.9 | 3.8 | 3.8 | 3.9 |
从表4可以看出，本发明所述组合物的加入显著地改善了存在还原性干扰物质情况下的准确性。
实施例3：
检测项目：胆固醇浓度；
按照表5配制所示组合物进行：
表5
| 方案A | 方案B | 方案C | 方案D | |
| 胆固醇酯酶 | 200KU/L | 200KU/L | 200KU/L | 200KU/L |
| 胆固醇氧化酶 | 300KU/L | 300KU/L | 300KU/L | 300KU/L |
| 过氧化物酶 | 300KU/L | 300KU/L | 300KU/L | 300KU/L |
| 3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠 | 15mmol/L | 15mmol/L | 15mmol/L | 15mmol/L |
| 六氯钯酸铵(IV) | -- | 5μmol/L | -- | -- |
| 乙二胺氯化钯(II) | -- | -- | 100μmol/L | -- |
| 氯化钯(II) | -- | -- | -- | 5mmol/L |
| HEPES | 0.1mol/L | 0.1mol/L | 0.1mol/L | 0.1mol/L |
| Brij 35 | 0.5％ | 0.5％ | 0.5％ | 0.5％ |
| BSA | 2％ | 2％ | 2％ | 2％ |
用盐酸或者氢氧化钠调节pH值至7.2。
测试含有2200μmol/L抗坏血酸、1.3mmol/L对乙酰氨基酚、20mg/dl胆红素、4.4mmol/L水杨酸、1.4mmol/L尿酸、3mmol/L还原性谷胱甘肽干扰的样本，以不含干扰的样本作为对照，其总胆固醇浓度均为3.9mmol/L。分别取上述4个方案的试剂1ml，加入50μL的样本。37℃反应5min，在520nm读取吸光度。测试前，采用同样的方法测试标准样本以绘制标准曲线，利用此标准曲线将测试结果换算成浓度，结果如表6所示(单位：mmol/L)：
表6
| 方案A | 方案B | 方案C | 方案D | |
| 对照样本 | 3.8 | 3.8 | 3.9 | 3.7 |
| 抗坏血酸样本 | 3.0 | 3.2 | 3.1 | 3.5 |
| 对乙酰氨基酚样本 | 2.8 | 3.1 | 3.3 | 3.4 |
| 胆红素样本 | 2.5 | 2.7 | 2.9 | 3.2 |
| 水杨酸样本 | 2.7 | 3.2 | 3.5 | 3.0 |
| 尿酸样本 | 2.4 | 3.0 | 3.7 | 3.1 |
| 还原性谷胱甘肽样本 | 2.1 | 3.3 | 3.5 | 2.9 |
从表6可以看出，本发明所述组合物的加入显著地改善了存在还原性干扰物质情况下的准确性。
实施例4：
检测项目：谷草转氨酶浓度；
按照表7配制所示组合物进行：
表7
用盐酸或者氢氧化钠调节pH值至7.15。
测试含有2200μmol/L抗坏血酸、1.3mmol/L对乙酰氨基酚、20mg/dl胆红素、4.4mmol/L水杨酸、1.4mmol/L尿酸、3mmol/L还原性谷胱甘肽干扰的样本，以不含干扰的样本作为对照，其谷草转氨酶浓度均为89U/L。分别取上述4个方案的试剂500μl，加入50μL的样本。37℃反应5min，在405nm读取吸光度。记录每分钟的吸光度变化率：ΔA/min。测试前，采用同样的方法测试标准样本以绘制标准曲线，利用此标准曲线将测试结果换算成浓度，结果如表8所示(单位：U/L)：
表8
| 方案A | 方案B | 方案C | 方案D | 方案E | |
| 对照样本 | 88 | 88 | 90 | 92 | 92 |
| 抗坏血酸样本 | 75 | 80 | 88 | 89 | 85 |
| 对乙酰氨基酚样本 | 70 | 79 | 87 | 84 | 85 |
| 胆红素样本 | 55 | 77 | 85 | 84 | 79 |
| 水杨酸样本 | 62 | 84 | 81 | 86 | 85 |
| 尿酸样本 | 71 | 87 | 79 | 76 | 78 |
| 还原性谷胱甘肽样本 | 69 | 79 | 81 | 84 | 83 |
从表8可以看出，本发明所述组合物的加入显著地改善了存在还原性干扰物质情况下的准确性。
实施例5：
检测项目：甘油三酯浓度；
按照表9配制所示组合物进行：
表9
| 方案A | 方案B | 方案C | 方案D | 方案E | |
| 脂肪酶 | 300KU/L | 300KU/L | 300KU/L | 300KU/L | 300KU/L |
| 甘油激酶 | 200KU/L | 200KU/L | 200KU/L | 200KU/L | 200KU/L |
| 甘油磷酸氧化酶 | 250KU/L | 250KU/L | 250KU/L | 250KU/L | 250KU/L |
| 过氧化物酶 | 200KU/L | 200KU/L | 200KU/L | 200KU/L | 200KU/L |
| TBHBA | 12mmol/L | 12mmol/L | 12mmol/L | 12mmol/L | 12mmol/L |
| 氯化六氨合钌(III) | -- | 100μmol/L | -- | -- | 100μmol/L |
| 三(三苯基膦)二氯化钌(II) | -- | -- | 80μmol/L | -- | -- |
| 五氯铑(III)酸钾 | -- | 2mmol/L | 500μmol/L | 50μmol/L | -- |
| 氯化钯(II) | -- | -- | -- | 2mmol/L | 80μmol/L |
| Pluronic F-68 | 1％ | 1％ | 1％ | 1％ | 1％ |
| 甘露醇 | 5％ | 5％ | 5％ | 5％ | 5％ |
| HEPES | 0.1mol/L | 0.1mol/L | 0.1mol/L | 0.1mol/L | 0.1mol/L |
上述TBHBA(2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸)为指示剂。用盐酸或者氢氧化钠调节pH值至7.8。
将上述试剂浸湿滤纸，然后烘干。裁剪成4mm×4mm大小，每次测试使用一片滤纸，加样量为8μl。
测试含有200μmol/L抗坏血酸、1.3mmol/L对乙酰氨基酚、20mg/dl胆红素、4.4mmol/L水杨酸、1.4mmol/L尿酸、3mmol/L还原性谷胱甘肽干扰的样本，以不含干扰的样本作为对照，其甘油三脂浓度均为1.8mmol/L。分别取上述5个方案的滤纸，加入8μL的样本。37℃反应2min，在520-550nm读取反射率。测试前，采用同样的方法测试标准样本以绘制标准曲线，利用此标准曲线将测试结果换算成浓度，结果如表10所示(单位：mmol/L)：
表10
| 方案A | 方案B | 方案C | 方案D | 方案E | |
| 对照样本 | 1.8 | 1.8 | 1.9 | 1.7 | 1.8 |
| 抗坏血酸样本 | 1.5 | 1.7 | 1.8 | 1.8 | 1.8 |
| 对乙酰氨基酚样本 | 1.3 | 1.7 | 1.6 | 1.5 | 1.7 |
| 胆红素样本 | 1.2 | 1.8 | 1.6 | 1.8 | 1.6 |
| 水杨酸样本 | 1.4 | 1.6 | 1.6 | 1.8 | 1.7 |
| 尿酸样本 | 1.5 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.8 |
| 还原性谷胱甘肽样本 | 1.6 | 1.7 | 1.9 | 1.7 | 1.7 |
从表10可以看出，本发明所述组合物的加入显著地改善了存在还原性干扰物质情况下的准确性。
实施例6：
检测项目：谷丙转氨酶浓度；
按照表11配制所示组合物进行：
表11
用盐酸或者氢氧化钠调节pH值至7.15。
测试含有2200μmol/L抗坏血酸、1.3mmol/L对乙酰氨基酚、20mg/dl胆红素、4.4mmol/L水杨酸、1.4mmol/L尿酸、3mmol/L还原性谷胱甘肽干扰的样本，以不含干扰的样本作为对照，其谷草转氨酶浓度均为107U/L。分别取上述4个方案的试剂500μl，加入50μL的样本。37℃反应5min，在405nm读取吸光度。记录每分钟的吸光度变化率：ΔA/min。测试前，采用同样的方法测试标准样本以绘制标准曲线，利用此标准曲线将测试结果换算成浓度，结果如表12所示(单位：U/L)：
表12
| 方案A | 方案B | 方案C | 方案D | 方案E | |
| 对照样本 | 109 | 110 | 115 | 105 | 109 |
| 抗坏血酸样本 | 89 | 105 | 109 | 109 | 112 |
| 对乙酰氨基酚样本 | 66 | 99 | 105 | 110 | 108 |
| 胆红素样本 | 59 | 100 | 110 | 95 | 100 |
| 水杨酸样本 | 66 | 98 | 105 | 105 | 102 |
| 尿酸样本 | 87 | 107 | 112 | 97 | 105 |
| 还原性谷胱甘肽样本 | 78 | 105 | 103 | 101 | 107 |
从表12可以看出，本发明所述组合物的加入显著地改善了存在还原性干扰物质情况下的准确性。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种组合物，其特征在于，包括过氧化物酶、指示剂、抗干扰化合物，所述抗干扰化合物为钌元素化合物、铑元素化合物和钯元素化合物中的一种或两种以上。
2.根据权利要求1所述组合物，其特征在于，所述钌元素化合物为正二价钌元素化合物、正三价钌元素化合物、正四价钌元素化合物和正七价钌元素化合物中的一种或两种以上。
3.根据权利要求2所述组合物，其特征在于，所述钌元素化合物为氯化苯钌(II)、顺-双(2,2'-二吡啶基)二氯化钌(II)、二(2-甲基烯丙基)(1,5-环辛二烯)钌(II)、羰基氯氢三(三苯基膦)钌(II)、羰酰二氢三(三苯基膦)钌(II)、氯(1,5-环辛二烯)(五甲基环戊二烯基)钌(II)、氯(环戊二烯基)双(三苯基膦)钌(II)、氯(五甲基环戊二烯基)双(三苯基膦)钌(II)、三(三苯基膦)二氯化钌(II)、三(三苯基膦)二氯化钌(II)、氯化六氨合亚钌(II)、六氰基钌(II)酸钾、三羰基二氯代钌(II)、三(4,7-联苯-1,10-邻菲啰啉)二氯化钌(II)、氧化钌(IV)、硫化钌(IV)、四正丙基过钌(VII)酸铵、六氯钌(III)酸钾、五氯钌(III)酸钾、溴化钌(III)、氯化钌(III)、碘化钌(III)、亚硝酰乙酸钌(III)、亚硝酰氯化钌(III)、亚硝酰硫酸钌(III)、二氯化五氨合氯钌(III)、氯化六氨合钌(III)中的一种或两种以上。
4.根据权利要求1所述组合物，其特征在于，所述铑元素化合物为正一价铑元素化合物和正三价铑元素化合物中的一种或两种以上。
5.根据权利要求4所述组合物，其特征在于，所述铑元素化合物为二羰基乙酰丙酮铑(I)、羰基乙酰丙酮(三苯基磷基)铑(I)、五氯铑(III)酸钾、溴化铑(III)、氯化铑(III)、碘化铑(III)、硝酸铑(III)、六溴代铑(III)酸钠、三(乙二胺)三氯化铑(III)、乙酰丙酮铑(III)中的一种或两种以上。
6.根据权利要求1所述组合物，其特征在于，所述钯元素化合物为正二价钯元素化合物和正四价钯元素化合物中的一种或两种以上。
7.根据权利要求6所述组合物，其特征在于，所述钯元素化合物为六氯钯(IV)酸铵、双(乙腈)二氯钯(II)、乙二胺氯化钯(II)、溴化钯(II)、氯化钯(II)、氰化钯(II)、硝酸钯(II)、硫酸钯(II)中的一种或两种以上。
8.权利要求1-7任意一项权利要求所述组合物在检测葡萄糖、肌酐、尿酸、胆固醇、甘油三酯、谷丙转氨酶或谷草转氨酶浓度和在制备检测葡萄糖、肌酐、尿酸、胆固醇、甘油三酯、谷丙转氨酶或谷草转氨酶浓度试剂中的应用。
9.一种检测葡萄糖、肌酐、尿酸、胆固醇、甘油三酯、谷丙转氨酶、或谷草转氨酶的浓度的试剂，其特征在于，包括权利要求1-7任意一项所述组合物。
10.根据权利要求9所述试剂，其特征在于，还包括缓冲剂、稳定剂、表面活性剂以及使葡萄糖、肌酐、尿酸、胆固醇、甘油三酯、谷丙转氨酶或谷草转氨酶产生双氧水的对应酶。
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