CN104396707A - 一种提高樟子松苗木抗逆性的方法 - Google Patents
一种提高樟子松苗木抗逆性的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种提高樟子松苗木抗逆性的方法,(1)菌丝体发酵液培养,(2)菌剂制作,(3)种子处理,(4)无菌土制备,(5)播种,(6)菌剂接种。本发明提高樟子松苗木生长及抗逆水平,采用打孔灌根及间隔接种的方式,对出苗1个月的樟子松苗木接种褐环乳牛肝菌发酵液,生长1个月后,采用同样的方式接种绿木霉发酵液。180天苗木高生长提高42.3%,地径提高66.7%,过氧化物酶提高268.3%,超氧化物歧化酶提高66.18%,接种苗木无病害发生。
Description
技术领域
本发明涉及一种提高樟子松苗木抗逆性的方法。
背景技术
樟子松是北方主要的造林树种,其良好的耐旱抗逆性使其在植被恢复、生态修复和园林绿化方面都发挥了重要作用。苗木质量是造林成功与否的关键。引入植物根际有益微生物(如菌根菌和木霉菌)有利于改善苗圃土壤环境,可以有效促进苗木生长、增强苗木抗逆性和预防病害的发生。以多种微生物复合接种来提高苗木的抗逆性可以得到良好的效果,提高苗木的成活率。
发明内容
本发明的目的在于克服上述技术中存在的不足之处,提供一种提高樟子松苗木生长和抗逆性的根际益生菌的接种方法。
为了达到上述目的,本发明采用的技术方案是:
(1)菌丝体发酵液培养:采用马铃薯葡萄糖培养基,马铃薯180-250g,葡萄糖18-20g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5g,水1000mL,将制作好的培养基装入500mL的三角瓶中,装液量200-300mL/500mL,置于121℃高压灭菌锅中灭菌20min,在无菌条件下接种褐环乳牛肝菌和绿木霉,接种量10%-15%,将接种后的三角瓶置于转速120-140r/min,温度25℃-27℃的摇床培养,发酵天数褐环乳牛肝菌20d-30d,绿木霉3d-5d,
(2)菌剂制作:将褐环乳牛肝菌、绿木霉发酵液在无菌条件下粉碎,加入无菌水配成发酵液:无菌水浓度为1∶5,
(3)种子处理:将供试种子用0.5%高锰酸钾消毒30min,清水冲洗数次后,用灭菌湿纱布包裹保湿,在人工气候箱中,置于25℃下催芽,每天早晚用无菌水各冲洗一次,直至出芽,
(4)无菌土制备:将草炭土、蛭石和河沙按2∶1∶1的比例配制混合土,置高温高压灭菌器中121℃下灭菌2h,装入直径15cm×高13cm 营养钵中,
(5)播种:将经催芽的樟子松种子播入营养钵中,每钵30颗种子,上覆2cm厚无菌土,浇透水后放入大棚中培养,待幼苗出土后,定苗至每钵15株,进行常规的日常管护,
(6)菌剂接种:采取打孔灌根接种的方式,在出苗30d进行接种,每盆接种褐环乳牛肝菌菌剂40mL-50mL,待苗木生长30d后,以同样的方式接种绿木霉菌剂。
本发明的优点是:
(1)提高樟子松苗木生长及抗逆水平;
(2)采用打孔灌根及间隔接种的方式,对出苗1个月的樟子松苗木接种褐环乳牛肝菌发酵液,生长1个月后,采用同样的方式接种绿木霉发酵液。180天苗木高生长提高42.3%,地径提高66.7%,过氧化物酶提高268.3%,超氧化物歧化酶提高66.18%,接种苗木无病害发生。
保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所
保藏日期:2014年6月4日
保藏编号:9246(N94)9264(M43)
分类命名:褐环乳牛肝菌,suillus luteus;绿木霉Trichodermavirens
具体实施方式
下面对本发明的实施例作进一步详细描述。
实施例1、
(1)菌丝体发酵液培养:采用的马铃薯葡萄糖培养基,马铃薯180g,葡萄糖18g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5g,水1000mL,将制作好的培养基装入500mL的三角瓶中,装液量200mL/500mL,置于121℃高压灭菌锅中灭菌20min,在无菌条件下接种褐环乳牛肝菌和绿木霉,接种量10%,将接种后的三角瓶置于转速120r/min,温度25℃的摇床培养,发酵天数褐环乳牛肝菌20d,绿木霉3d,
(2)菌剂制作:将褐环乳牛肝菌、绿木霉发酵液在无菌条件下粉碎,加入无菌水配成发酵液:无菌水浓度为1∶5,
(3)种子处理:将供试种子用0.5%高锰酸钾消毒30min,清水冲洗数次后,用灭菌湿纱布包裹保湿,在人工气候箱中,置于25℃下催芽,每天早晚用无菌水各冲洗一次,直至出芽,
(4)无菌土制备:将草炭土、蛭石和河沙按2∶1∶1的比例配制混合土,置高温高压灭菌器中121℃下灭菌2h,装入直径15cm×高13cm 营养钵中,
(5)播种:将经催芽的樟子松种子播入营养钵中,每钵30颗种子,上覆2cm厚无菌土,浇透水后放入大棚中培养,待幼苗出土后,定苗至每钵15株,进行常规的日常管护,
(6)菌剂接种:采取打孔灌根接种的方式,在出苗30d进行接种,每盆接种褐环乳牛肝菌菌剂40mL,待苗木生长30d后,以同样的方式接种绿木霉菌剂。
实施例2、
(1)菌丝体发酵液培养:采用的马铃薯葡萄糖培养基,马铃薯210g,葡萄糖19g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5g,水1000mL,将制作好的培养基装入500mL的三角瓶中,装液量260mL/500mL,置于121℃高压灭菌锅中灭菌20min,在无菌条件下接种褐环乳牛肝菌和绿木霉,接种量12%,将接种后的三角瓶置于转速130r/min,温度26℃的摇床培养,发酵天数褐环乳牛肝菌25d,绿木霉4d,
(2)菌剂制作:将褐环乳牛肝菌、绿木霉发酵液在无菌条件下粉碎,加入无菌水配成发酵液:无菌水浓度为1∶5,
(3)种子处理:将供试种子用0.5%高锰酸钾消毒30min,清水冲洗数次后,用灭菌湿纱布包裹保湿,在人工气候箱中,置于25℃下催芽,每天早晚用无菌水各冲洗一次,直至出芽,
(4)无菌土制备:将草炭土、蛭石和河沙按2∶1∶1的比例配制混合土,置高温高压灭菌器中121℃下灭菌2h,装入直径15cm×高13cm营养钵中,
(5)播种:将经催芽的樟子松种子播入营养钵中,每钵30颗种子,上覆2cm厚无菌土,浇透水后放入大棚中培养,待幼苗出土后,定苗至每钵15株,进行常规的日常管护,
(6)菌剂接种:采取打孔灌根接种的方式,在出苗30d进行接种,每盆接种褐环乳牛肝菌菌剂45mL,待苗木生长30d后,以同样的方式接种绿木霉菌剂。
实施例3、
(1)菌丝体发酵液培养:采用的马铃薯葡萄糖培养基,马铃薯250g,葡萄糖20g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5g,水1000mL,将制作好的培养基装入500mL的三角瓶中,装液量300mL/500mL,置于121℃高压灭菌锅中灭菌20min,在无菌条件下接种褐环乳牛肝菌和绿木霉,接种量15%,将接种后的三角瓶置于转速140r/min,温度27℃的摇床培养,发酵天数褐环乳牛肝菌30d,绿木霉5d,
(2)菌剂制作:将褐环乳牛肝菌、绿木霉发酵液在无菌条件下粉碎,加入无菌水配成发酵液:无菌水浓度为1∶5,
(3)种子处理:将供试种子用0.5%高锰酸钾消毒30min,清水冲洗数次后,用灭菌湿纱布包裹保湿,在人工气候箱中,置于25℃下催芽,每天早晚用无菌水各冲洗一次,直至出芽,
(4)无菌土制备:将草炭土、蛭石和河沙按2∶1∶1的比例配制混合土,置高温高压灭菌器中121℃下灭菌2h,装入直径15cm×高13cm营养钵中,
(5)播种:将经催芽的樟子松种子播入营养钵中,每钵30颗种子,上覆2cm厚无菌土,浇透水后放入大棚中培养,待幼苗出土后,定苗至每钵15株,进行常规的日常管护,
(6)菌剂接种:采取打孔灌根接种的方式,在出苗30d进行接种,每盆接种褐环乳牛肝菌菌剂50mL,待苗木生长30d后,以同样的方式接种绿木霉菌剂。
Claims (1)
1.一种提高樟子松苗木抗逆性的方法,其特征在于:
(1)菌丝体发酵液培养:采用马铃薯葡萄糖培养基,马铃薯180-250g,葡萄糖18-20g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5g,水1000mL,将制作好的培养基装入500mL的三角瓶中,装液量200-300mL/500mL,置于121℃高压灭菌锅中灭菌20min,在无菌条件下接种褐环乳牛肝菌和绿木霉,接种量10%-15%,将接种后的三角瓶置于转速120-140r/min,温度25℃-27℃的摇床培养,发酵天数褐环乳牛肝菌20d-30d,绿木霉3d-5d,
(2)菌剂制作:将褐环乳牛肝菌、绿木霉发酵液在无菌条件下粉碎,加入无菌水配成发酵液:无菌水浓度为1∶5,
(3)种子处理:将供试种子用0.5%高锰酸钾消毒30min,清水冲洗数次后,用灭菌湿纱布包裹保湿,在人工气候箱中,置于25℃下催芽,每天早晚用无菌水各冲洗一次,直至出芽,
(4)无菌土制备:将草炭土、蛭石和河沙按2∶1∶1的比例配制混合土,置高温高压灭菌器中121℃下灭菌2h,装入直径15cm×高13cm营养钵中,
(5)播种:将经催芽的樟子松种子播入营养钵中,每钵30颗种子,上覆2cm厚无菌土,浇透水后放入大棚中培养,待幼苗出土后,定苗至每钵15株,进行常规的日常管护,
(6)菌剂接种:采取打孔灌根接种的方式,在出苗30d进行接种,每盆接种褐环乳牛肝菌菌剂40mL-50mL,待苗木生长30d后,以同样的方式接种绿木霉菌剂。
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