CN104304830A - 一种去除淡水鱼土腥味的饲料添加剂及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明的目的在于提供一种去除淡水鱼土腥味的饲料添加剂，包含有如下重量百分比的组分：大蒜素5-10％、紫苏叶提取物2-6％、茶多酚2-6％、乙基麦芽酚2-6％、酵母细胞壁20-40％、酵母内容物20-40％。本发明的饲料添加剂综合采用物理、化学和生物方法有效去除淡水鱼的土腥味，不产生耐药性和毒副作用，能够显著提高鱼类的生长速度，同时提高鱼类的抗氧化能力和免疫活性，增强鱼体的抗病力，提高鱼肉品质，增加鱼的市场价格，显著提升生产效益。
Description
技术领域
本发明属于涉及饲料添加剂技术领域，具体涉及一种去除淡水鱼土腥味的饲料添加剂及其应用。
背景技术
淡水鱼类，无论是自然捕捞的鱼类还是人工养殖的鱼类，都不同程度地存在土腥味。特别是罗非鱼、鲤鱼、鲢鱼、草鱼主要的淡水养殖鱼类的土腥味尤为严重。土腥味的存在给这些鱼类的口感费带来很大的负面影响，导致很多人不消费上述的淡水鱼。从而影响养殖者的经济效益，导致养殖规模的减少。因此，淡水鱼的土腥味现象及脱腥技术越来越受到研究者的重视。
目前在淡水鱼去腥技术的研究主要都集中在鱼类捕捞或加工过程中，没有在淡水鱼养殖阶段就开始采取措施。主要是通过对养殖池塘淤泥的清理、池塘用水水质的管理可以部分消除淡水鱼的土腥味，提高淡水鱼的鱼肉品质，增加养殖户效益。但上述两种方法不但成本高，而且受自然条件的限制。
发明内容
本发明的目的是提供一种去除淡水鱼土腥味的饲料添加剂及其应用，从而弥补现有技术的不足。
本发明首先提供了一种去除淡水鱼土腥味的饲料添加剂，包含有如下重量百分比的组分：大蒜素5-10％、紫苏叶提取物2-6％、茶多酚2-6％、乙基麦芽酚2-6％、酵母细胞壁20-40％、酵母内容物20-40％；
其中作为实施例的优选，本发明的饲料添加剂的一种具体组成如下：大蒜素5％、紫苏叶提取物5％、茶多酚5％、乙基麦芽酚5％、酵母细胞壁40％、酵母内容物40％。
为了取得更好的使用效果，上述的饲料添加剂中还添加有5％-10％的增效剂；
所述增效剂优选为食盐。
作为实施例的优选，添加有增效剂的饲料添加剂的组成如下：
大蒜素10％，紫苏叶提取物5％，茶多酚5％，乙基麦芽酚3％，酵母细胞壁27％，酵母内容物40％，增效剂10％。
其中紫苏叶提取物的制备方法如下:将紫苏叶粉碎后，加入水中进行蒸馏得到紫苏叶提取物。
本发明的饲料添加剂，其在饲料中的添加比例为0.5-1.0％。
本发明的饲料添加剂综合采用物理、化学和生物方法有效去除淡水鱼的土腥味，不产生耐药性和毒副作用，能够显著提高鱼类的生长速度，同时提高鱼类的抗氧化能力和免疫活性，增强鱼体的抗病力，提高鱼肉品质，增加鱼的市场价格，显著提升生产效益。
具体实施方式
申请人发现淡水鱼呈现土腥味的化合物，主要包括土臭素Geosmin(Trans-1,10-dimethyl-trans-9-decalol,反-1,10-二甲基-反-9-萘烷醇)、2-甲基异莰醇(2-methylisoborneol,MIB)、2-异丙基-3-甲氧基吡嗪(2-isopropyl-3-methoxypyrazine,IPMP)、2-异丁基-3-甲氧基吡嗪(2-isobutyl-3-methoxypyrazine,IBMP)及2,3,6-三氯代茴香醚(2,3,6-trichloroanisole,TCA)等。其中主要是由土臭素Geosmin和MIB引起的，鱼体中皮下含脂丰富的组织土腥味最为明显。放线菌、蓝细菌(蓝藻)等是引起和产生土腥味物质的主要生物。在上述的基础上，申请人通过长期的研究获得了本发明的去除淡水鱼土腥味的饲料添加剂。
对于本发明所使用的组分及检测的方法描述如下：
1、紫苏叶提取物：主要成分为紫苏醛(L-perillaldehyde)、紫苏醇(L-perillalcohol)、柠檬烯、芳樟醇、薄荷脑、丁香烯，并含香薷酮(elshottziaketone)、紫苏酮、丁香酚等,表现出很强的抗氧化活性、抑酶特性和抑菌特性，是一种高效、低毒的天然食品防腐剂。
2、酵母细胞壁:是将活性面包酵母经自溶、酶解、高速离心分离、喷雾干燥等工艺精制而成的酵母细胞壁，产品富含甘露寡糖和β-1,3/1,6葡聚糖和甘露寡糖，具有提高机体免疫力,吸附并排除病原菌,增强动物抗病力的作用；
3、酵母细胞内容物：是采用液体发酵的高蛋白高核酸活性面包酵母，经酶解破壁、抽提、离心分离、喷雾干燥、混合等工艺精制而成的高功效酵母核酸产品。富含天然核苷酸、活性肽GSH、多种游离氨基酸和B族维生素等，能快速补充动物生长时期内源核苷酸合成的不足，加快机体肠上皮细胞、肝脏细胞、白细胞和淋巴细胞等的复制、***增殖，提高免疫力，改善肝功能及脂质代谢，激发动物生产潜能，同时改善消化吸收、调理肠道等多种问题，减少动物消化道疾病，促进生长发育。
4、对于涉及到土腥味组分的检测方法：采用微波蒸馏-固相微萃取-气相色谱-质谱方法测定罗非鱼肉中土腥味物质土臭素和2-甲基异莰醇的含量。利用微波加热在短时间内将鱼肉中难以提取的土臭素和2-甲基异莰醇以气体方式蒸馏出来，然后经过冷凝水***将其由气态变为液态，之后利用固相微萃取富集提取，并用GC-MS分析。实验参数为微波功率360W(额定功率的40％)、微波时间为6min、载气气流为60mL/min。
实施例1
一种去除淡水鱼土腥味的饲料添加剂，添加剂的各种原料及重量百分比为：大蒜素5％，紫苏叶提取物5％，茶多酚5％，乙基麦芽酚5％，酵母细胞壁40％，酵母内容物40％；上述原料的重量百分比之和为100％。
上述添加剂的制备方法为：
a按照重量百分比称取各种原料；
b、将各种原料依次投入混合机内，混合均匀；
c、混合均匀后进行真空包装。
其中大蒜素来源为：淡黄色粉末，含量80％，山东康地恩生物科技有限公司；
其中紫苏叶提取物的具体制备方法如下:1)紫苏叶的精选:将紫苏株上的老黄叶、枯死叶、虫卵较密集的不良叶摘除,仅选择叶子完整、色紫、香气浓郁的紫苏叶(及嫩枝)备用。2)清洗紫苏叶：将挑选好的紫苏叶放入不锈钢池中清洗,洗净泥土及其他杂质，直至水体澄清。3)紫苏叶提取：将清洗出的紫苏叶进行干燥,取干燥后的紫苏叶粉碎成细末,放到烧杯中加水,转移到蒸馏装置中蒸馏3h,得到紫苏叶提取物；
其中茶多酚：浅黄色粉末，含量98％，青岛和本食品配料有限公司；
其中乙基麦芽酚：白色晶体粉末，焦香型，含量99.5％，青岛美辰食品有限公司；
其中酵母细胞壁和酵母内容物的具体来源为广州雅琪生物科技有限公司的，商品名称分别为雅安宝500和雅康宝450。
实施例2
一种去除淡水鱼土腥味的饲料添加剂，其中，添加剂的各种原料及重量百分比为：大蒜素10％，紫苏叶提取物5％，茶多酚5％，乙基麦芽酚3％，酵母细胞壁27％，酵母内容物40％，增效剂10％；上述原料的重量百分比之和为100％。
增效剂为食盐。
上述添加剂的制备方法为：
a、按照重量百分比称取各种原料；
b、将各种原料依次投入混合机内，混合均匀；
c、混合均匀后进行真空包装。
其中大蒜素来源为：淡黄色粉末，含量80％，山东康地恩生物科技有限公司；
其中紫苏叶提取物的制备方法如下:1)紫苏叶的精选:将紫苏株上的老黄叶、枯死叶、虫卵较密集的不良叶摘除,仅选择叶子完整、色紫、香气浓郁的紫苏叶(及嫩枝)备用。2)清洗紫苏叶：将挑选好的紫苏叶放入不锈钢池中清洗,洗净泥土及其他杂质，直至水体澄清。3)紫苏叶提取：将清洗出的紫苏叶进行干燥,取干燥后的紫苏叶粉碎成细末,放到烧杯中加水,转移到蒸馏装置中蒸馏3h,得到紫苏叶提取物；
其中茶多酚：浅黄色粉末，含量98％，青岛和本食品配料有限公司；
其中乙基麦芽酚：白色晶体粉末，焦香型，含量99.5％，青岛美辰食品有限公司；
其中酵母细胞壁和酵母内容物来源为：广州雅琪生物科技有限公司，商品名称分别为雅安宝500和雅康宝450。
实施例3
一种去除淡水鱼土腥味的饲料添加剂，其中，添加剂的各种原料及重量百分比为：大蒜素10％，紫苏叶提取物3％，茶多酚3％，乙基麦芽酚4％，酵母细胞壁30％，酵母内容物40％，增效剂10％；上述原料的重量百分比之和为100％。
增效剂为食盐。
上述添加剂的制备方法为：
a、按照重量百分比称取各种原料；
b、将各种原料依次投入混合机内，混合均匀；
c、混合均匀后进行真空包装。
其中大蒜素来源为：淡黄色粉末，含量80％，山东康地恩生物科技有限公司；
其中紫苏叶提取物的制备方法如下:1)紫苏叶的精选:将紫苏株上的老黄叶、枯死叶、虫卵较密集的不良叶摘除,仅选择叶子完整、色紫、香气浓郁的紫苏叶(及嫩枝)备用。2)清洗紫苏叶：将挑选好的紫苏叶放入不锈钢池中清洗,洗净泥土及其他杂质，直至水体澄清。3)紫苏叶提取：将清洗出的紫苏叶进行干燥,取干燥后的紫苏叶粉碎成细末,放到烧杯中加水,转移到蒸馏装置中蒸馏3h,得到紫苏叶提取物；
其中茶多酚：浅黄色粉末，含量98％，青岛和本食品配料有限公司；
其中乙基麦芽酚：白色晶体粉末，焦香型，含量99.5％，青岛美辰食品有限公司；
其中酵母细胞壁和酵母内容物来源为：广州雅琪生物科技有限公司，商品名称分别为雅安宝500和雅康宝450。
实施例4
含有实施例(添加剂)1—3的任意一种去除淡水鱼土腥味的饲料添加剂的配合饲料，其中，上述添加剂的重量百分比为0.5％，即添加剂按照0.5％的比例均匀添加到配合饲料中。
实施例5
含有实施例(添加剂)1—3的任意一种去除淡水鱼土腥味的饲料添加剂的配合饲料，其中，上述添加剂的重量百分比为0.8％，即添加剂按照0.8％的比例均匀添加到配合饲料中。
实施例6
含有实施例(添加剂)1—3的任意一种去除淡水鱼土腥味的饲料添加剂的配合饲料，其中，上述添加剂的重量百分比为1％，即添加剂按照1％的比例均匀添加到配合饲料中。
实施例7
试验鲤鱼购于山东济南市章丘水产养殖场，为池塘养殖的冬龄鱼种。经一周暂养、驯化后，选择体格健壮、规格整齐的鲤鱼1050尾，初始平均体重为55.72±0.60g，随机分为4组，每组设8个重复，每个重复30尾。实验周期是10周。各组间鲤鱼初始体重无显著差异。试验鱼养殖在相同的土质池塘，池塘水体的土腥味物质分别为土臭素30ng/L和2-甲基异莰醇5ng/L。
试验设计：试验共设4个处理组：对照组(未添加去除土腥味添加剂的普通鲤鱼饲料配)、试验组1采用添加了实施例1(添加剂)的配方的中添加剂，且添加的重量百分比为0.5％。试验组2采用添加了实施例2(添加剂)的配方的添加剂，且添加的重量百分比为0.8％，试验组3采用添加了实施例3(添加剂)的配方的添加剂，且添加的重量百分比为1％。分别以鱼粉、豆粕、棉粕、菜粕、面粉等为主要原料，辅以预混料、磷酸二氢钙、氯化胆碱等，所有原料经1.2mm筛孔的锤片式粉碎机粉碎，充分混合均匀，调质温度为85℃，通过制粒机制成直径2mm、长度4mm的颗粒，自然风晾干，4℃冰箱中保存。养殖10周后，取样测定相关指标，所有数据采用统计软件SPSS16.0进行并分析处理。试验日粮组成及营养水平见表1。
表1.普通鲤鱼饲料与添加去除土腥味添加剂的饲料的配方组成。
生长评估：经过10周的饲养，生长结果表明，饲料中添加去除土腥味添加剂的各个试验组的鲤鱼的成活率和生长速度都有显著提高，添加0.5％、0.8％和1.0％的试验组鲤鱼之间差异不显著。(表2)
表2.饲料中添加去除土腥味添加剂对鲤鱼生长性能的影响(平均值±标准误，n＝8)
注：同行不同字母表示差异显著(P<0.05),后表同此。
增重率(％)＝(末均重-初均重)/初均重×100％
特定生长率(％/d)＝(ln末均重-ln初均重)×100/养殖天数。
土腥味评估：借鉴食品检测中常用的评分法进行分析(朱红等,1990；张水华等,1999)。5个感官评定人员,20-40岁之间,***学***均值。
表3.饲料中添加去除土腥味添加剂后的鲤鱼土腥味感官评定结果
结果表明，添加去除土腥味饲料添加剂的试验饲料养殖的鲤鱼土腥味明显低于对照组，添加0.5％、0.8％和1％去除土腥味添加剂的鲤鱼虽然也能感觉到土腥味，但是都明显低于未添加组,且添加组之间也差异显著。因此，饲料中添加一种去除淡水鱼土腥味添加剂可以降低养殖鲤鱼的土腥味,并且随着添加量的增加去除效果更好。
表4饲料中添加去除土腥味添加剂对鲤鱼土臭素和2-甲基异莰醇含量的影响(平均值±标准误，n＝8)
结果表明,饲料中添加一种去除淡水鱼土腥味添加剂可以显著降低养殖鲤鱼鱼肉中吐臭素和2-甲基异莰醇的含量,但是仍然能够感觉到土腥味的存在,其含量超过了人口腔对土臭素和2-甲基异莰醇的嗅觉阈值分别为0.9μg/kg和0.6μg/kg，需要配合池塘的水质管理和销售前在清洁淡水中净化的方法进一步降低土腥味,满足人们对于养殖鱼类口感和气味的需求。
同时，在鲢鱼和草鱼上的试验同样表明，该添加剂能够降低鱼肉中土臭素和2-甲基异莰醇的含量及表现出来的土腥味，对于淡水养殖鱼类具有相同的效果，可以在其他鱼种上进行使用。
抗病力评估：养殖试验结束，尾静脉取血并制备血清，测定免疫相关酶活力。应用全自动生化分析仪(KHB卓越330)测定碱性磷酸酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶和肌酐。溶菌酶活性测定方法：称取少量溶壁微球菌菌粉，置匀浆器中，加入0.1mol/L pH＝6.4的磷酸钾盐缓冲液，研磨数分钟后用缓冲也配制成菌悬液(A570＝0.3-0.5),取3mL菌悬液与0.2mL血清在试管中混匀，测定570nm初始吸光值A0，然后置37℃水浴中10min后终止反应，测定570nm光密度值A，双蒸水做空白对照。酶活力计算公式：溶菌酶活力(U)＝(A0-A)/A。酶活力结果见表4。
另每处理组随机取13尾鱼进行抗病力测试。用嗜水气单胞菌(1×108cfu/mL)进行腹腔注射攻毒，观察1周后，统计各组鱼的死亡率，并计算免疫保护率。死亡率(％)＝(死亡鱼尾数/13)×100％。免疫保护率(％)＝(1-实验组死亡率/对照组死亡率)×100％。抗病力结果见表5。
表4.饲料中添加去除土腥味添加剂对鲤鱼血清酶活力的影响(平均值±标准误，n＝8)
表5.饲料中添加去除土腥味添加剂对鲤鱼抗病力的影响
| 项目 | 对照 | 试验1 | 试验2 | 试验3 |
| 攻毒鱼尾数 | 13 | 13 | 13 | 13 |
| 死亡鱼尾数 | 10 | 8 | 6 | 5 |
| 死亡率 | 76.9 | 61.5 | 46.2 | 38.5 |
| 免疫保护率 | 20 | 40 | 50 |
结果表明，添加去除土腥味饲料添加剂的试验饲料养殖的鲤鱼碱性磷酸酶和溶菌酶活力明显高于对照组，添加0.5％、0.8％和1％去除土腥味添加剂的鲤鱼之间差异不显著。因此，添加一种去除淡水鱼土腥味添加剂的可以提高养殖鲤鱼的免疫力。鲤鱼经嗜水气单胞菌攻毒后，添加去除土腥味饲料添加剂的试验饲料养殖的鲤鱼的死亡率低于对照组，添加0.5％、0.8％和1％去除土腥味添加剂的鲤鱼的免疫保护率分别是20％、40％和50％。因此，添加一种去除淡水鱼土腥味添加剂的可以降低养殖鲤鱼的死亡率、提高免疫保护率，能有效提高养殖鲤鱼的抗病力。
综合以上各试验结果，添加剂可以显著提高鲤鱼的生长速度，同时提高鲤鱼免疫力和抗病力，降低鲤鱼养殖过程中产生的土腥味，将会提高人们的消费需求，提高淡水鱼的市场价格，从而提升养殖户的生产效益；此外，该添加剂能够降低鲢鱼和草鱼的鱼肉中土臭素和2-甲基异莰醇的含量及表现出来的土腥味，对于淡水养殖鱼类具有相同的效果，可以在其他鱼种上进行使用，表明本发明的饲料添加剂具有通用性。
Claims (10)
1.一种去除淡水鱼土腥味的饲料添加剂，其特征在于，所述的添加剂包含有如下重量百分比的组分：大蒜素5-10％、紫苏叶提取物2-6％、茶多酚2-6％、乙基麦芽酚2-6％、酵母细胞壁20-40％、酵母内容物20-40％。
2.如权利要求1所述的添加剂，其特征在于所述的添加剂包含有如下重量百分比的组分：大蒜素5％、紫苏叶提取物5％、茶多酚5％、乙基麦芽酚5％、酵母细胞壁40％、酵母内容物40％。
3.如权利要求1所述的添加剂，其特征在于所述的添加剂中有5％-10％的增效剂。
4.如权利要求3所述的添加剂，其特征在于所述的添加剂的组分如下：大蒜素10％，紫苏叶提取物5％，茶多酚5％，乙基麦芽酚3％，酵母细胞壁27％，酵母内容物40％，增效剂10％。
5.如权利要求3或4所述的添加剂，其特征在于所述的增效剂为食盐。
6.如权利要求1或3所述的添加剂，其特征在于所述的紫苏叶提取物的制备方法是将紫苏叶粉碎后，加入水中进行蒸馏得到紫苏叶提取物。
7.权利要求1或3所述的添加剂在去除淡水鱼土腥味中的应用。
8.权利要求1或3所述的添加剂在制备去除淡水鱼土腥味的制品中的应用。
9.一种饲料，其特征在于，所述的饲料中添加有权利要求1或3所述的添加剂。
10.如权利要求9所述的饲料，其特征在于，所述的添加剂的添加比例为0.5-1.0％。
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