CN1042658A - 亲细胞非均质分子脂质及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一系列亲细胞非均质分子脂质CHML及其制备方法。所提供的CHML是分子型的，具有定向穿入细胞膜或壁的活性的分子载体，其分子结构中具有可与水溶性气溶性和脂溶性抗癌药物的连结部分，又有癌膜构的活性部分。动物实验及体外试验证实了它在协同杀伤恶性肿瘤细胞以及各种病毒的同时，本身还具有提高机体免疫细胞的功能。体外实验证明本发明的CHML能在50分钟内杀灭S180癌细胞和在40分钟内杀灭人食道鳞状上皮癌细胞，癌细胞死亡率达到100％。

Description

本发明涉及脂质，更具体地说，涉及一系列亲细胞非均质分子脂质及其制备方法。

六十年代初，英国学者贝汉（Bangham）等发现，磷脂分散在水中可形成多层囊，并证明每层均由双分子脂质将水隔开，双分子层厚度约为40

。后来把这种具有似类生物膜结构的微形颗粒囊称为脂质体（Liposome）。

由于脂质体含有一个亲水或亲脂的“小房间”，所以，在水中可溶解的以及在脂液中可溶解的分子、离子，都可“包裹”在脂质体颗粒的“小房间”中。这种独有的特性，使脂质体成为一种用途广泛的载体，特别是药物的载体。又由于脂质体可以改变药物代谢动力机理学，有选择地把药物输送到“目的地”，让药物在需要治疗的有利部位释放。这样，不仅可减少药物对正常细胞的“毒害”，而且还可以大大提高药物攻克有害细胞的疗效。另外，脂质体还有一个特殊的性质，它不论以游离状态进入血液循环中，还是结合到细胞和组织中，甚至由于“胞饮”作用进入细胞内部，这些被包裹的药物，都可以通过局部缓慢地释放。脂质体通过缓慢释放机理，延长了有效药物半衰期，使疗效明显改进。再由于脂质体是用天然磷脂或胆固醇等制成的，因此毒性低，无免疫原;有生物相容性和生物可降解性。近年，脂质体工程取得的进展，增进了利用脂质体作为药物载体的可能性。

1971年，英国的莱门（Ryhman）等人建议将脂质体作为酶及药物的载体。他们在生物膜理论研究基础上开始把酶及药物包裹在脂质体中，企图应用脂质体作为药物载体，使活性物质及药物在血液循环中免遭破坏并选择性地到达靶器官。加拿大籍中国科学家张铭书先生也研究过类似的载体，并将药物包裹在载体中，进行疾病的治疗。

八十年代，我国著名医药学家顾学裘教授应用二种多相脂质体（Polyphase    Liposome）作为载体，包裹抗癌药物治疗癌症病人，取得了一定疗效。于1985年，顾学裘教授在第四届世界肺癌会议上报告“多相脂质体”的研究成果，被评为本届大会最佳研究项目，荣获大会最高荣誉奖。

多相脂质体是抗癌药物载体的多相分散系新剂型。当把抗癌药物包裹在这种载体中，通过静脉注入患者的血液，它将如同一种“超微型导弹”，能准确地命中靶区-癌组织。该多相脂质体是一种乳白色乳剂。已研制出的几种多相脂质体混悬型静脉注射液，属于超微粒药物载体，都具有淋巴***定向性。有的通过内吞作用，被体内网状内皮***的吞噬细胞所吞噬，进入溶酶体，被消化而放出药物;有的则通过融合作用，即脂质体的膜材与细胞膜构成物相似而被融合入细胞，被消化后释放药物，使药物在靶组织中维持较高浓度。这种定向作用大大减轻了抗癌药物对正常细胞的侵袭和伤害，从而提高了抗癌药物的疗效，降低了毒性。

一般来说，脂质体可以看作是一种人工细胞膜，它具有一个封闭球形结构，直径约为300-2000

，最大为5μ左右，可使药物被保护在很好的空间内，保持其功能。但是总的来说，这样的颗粒仍然比较大，不容易直接进入到细胞浆中去，所以需要被细胞吞噬后才能进入。

目前已有的脂质体大都是由磷脂为骨架膜材及附加剂组成。磷脂为两性物质，其结构上有亲水及亲油基团。目前用以制备脂质体的有天然磷脂（卵磷脂、豆磷脂）和合成磷脂酰胆碱（如二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱），这些磷脂均具有两条疏水链，不管其亲水基结构如何，它们在水中均能形成脂质双分子层。附加剂常用的有胆固醇、十八胺、磷脂酸等。胆固醇虽然是用以调节双分子层流动性、通透性等，但其对人体来说是无益的;十八胺、磷脂酸等用以改变脂质体表面电荷性质。多相脂质体的成分包含磷脂、油酸、胆固醇和PVP类非离子表面活性剂。

脂质体作为药物载体及生物膜模型的研究与应用，制备方法亦有了较多的发展。多相脂质体的形成是磷脂与水接触后，由于它的极性基与疏水烃基的作用，排列成封闭式的多双分子层球形结构，在片层之间有水相层，水溶性药物可被包裹在水相中，而脂溶性药物可包裹在双分子层中。由于脂质体的表面特性如粒径大小、形态、表面电荷、可直接影响它在体内的稳定性及包裹药物百分率，而上述特性又取决于制备方法及磷脂类组成。

磷脂如卵磷脂、豆磷脂均含有不饱和脂肪酸链，化学性质不够稳定，易氧化、水解而产生过氧化物、丙二醛及溶血磷脂等。卵磷脂氧化可使膜流动性降低，稳定性、电负性增加，促进被包裹物质渗漏，因而滞留性变差，脂质体易产生聚集而沉淀且产生毒性。因此，有人提出卵磷脂作为脂质体膜材时应具有一定纯度，氧化指数在0.2以下等等。

在脂质体的制备中，药物的包封量一直是不容易解决的难题。例如，水溶性和脂溶性都小的药物包封量就小。又如，小分子及容易“渗漏”的药物，包封量也低。

总的来说，可以看到现有技术中的脂质体和多相脂质体作为一种药物载体，确实具有许多卓越的方面，例如，它们能作为药物载体包裹药物而进入细胞内，从而使药物作用较持久，这是由于在血液中包裹的药物不易被破坏;它们能够根据需要配成“水包油”或“油包水”的方式而包裹亲脂或亲水的药物，从而当与细胞表面接触时引起细胞产生“吞噬”作用，又由于具有淋巴定向性和选择性，能进入到网状内皮细胞丰富的***中去的量较多，等等。但是，根据报道的资料分析，脂质体或多相脂质体目前尚存在一些不足之处，例如，它们形成的颗粒较大，约为本发明的“亲细胞非均质分子脂质”十倍以上，如果输入静脉，可能造成全身毛细管循环障碍;它们需要被细胞吞噬才能进入细胞内，这需要细胞耗能;它们对癌细胞的特异性吞噬作用不强，常常出现被正常细胞吞噬的现象，造成药物对正常细胞的操作，同时减少了药物的生物效应;它们对人体免疫细胞促进作用不强，很少见到这方面的报道;它们不能将两相或两相以上药物进行同层包裹;它们含有胆固醇和/PVP聚乙烯吡咯烷酮对人体有不良影响。

因此，本发明的一个主要目的是提供一种极小，达到分子型的脂质，它具有定向穿入细胞膜或壁的活性，以及对靶细胞具有较强的特异性吸收，只需载有少量药物即能起到“分子型导弹”的作用。

本发明另一个目的是提供一种颗粒呈分子数量级的脂质，它不含磷酯加胆固醇***，因而不存在它们的不利因素。

本发明再一个目的是提供一种颗粒呈分子数量级的不含磷酯加胆固醇***的脂质，它本身具有提高机体免疫功能的能力，或者本身具有帮助杀伤恶性肿瘤细胞的作用。

本发明的进一步目的是提供一种工艺方法，以制备本发明提供的分子数量级的脂质。

本发明的上述和其他目的、特征和优点将从下列详细说明中得到更充分的揭示。

本发明人经过大量研究发现，现有技术中的脂质体，其分子结构可以用一根“拐杖”来形容：拐杖的手柄连结部分是“胆固醇”之类的分子;拐仗的直捍体部分是“磷脂”之类的分子所在;而“磷脂”又是由“磷酸”和“脂肪酸”两部分组成的。当这些“拐杖”似的“分子”聚集成多分子层的亲水、亲脂的脂质体时，在显微镜下呈不规则的球形体，最大粒子约5μm左右。

本发明经过大量实验成功地获得了一系列的“分子脂质”，它们可以看作是上述“拐仗”的直捍体中的一段，也就是“脂肪酸”这一段，既去掉了手柄部分，又舍弃了“磷酸”部分，从而获得了一系列性能极佳的“分子脂质”，它们不必聚集成多层的较大粒子的“体”，它们的每一个分子都是“脂质”，都具有极性基团和非极性基团而可携带药物，这是因为本发明的分子脂质系列具有下列的分子结构通式：

其中C＝碳;DB＝双键（0至8）;CA＝碳原子;R＝基本单元;O＝氧;X＝极性单元或金属离子或非金属离子，例如，铂、铜、锌、铁、钴、镁、钙等任何一带正电荷的金属离子和非金属离子包括氟、氯、溴、碘等以及醇式、酚式、醚式、醛式、酮式、醌式分子的基团和氨基酸分子、葡萄糖分子与嘧啶、嘌呤分子的基团作为极性基团或极性分子;OX和＝O是亲水基团;R是亲脂基团。

在上述分子结构中，作为分子载体，其上的CA是可与抗癌药物分子连结部分;X也是可与抗癌药物分子连结部分;而DB、CA、O以及X则都是癌膜构活性部分。

分子脂质的亲水基团首先与细胞外膜表面接触，并自身旋转，然后分子螺旋转动180°，疏水基团首先进入膜间隔，然后整个分子进入膜间隔。进入后，分子脂质疏水基团与膜间隔内层表面接触，分子再旋转180°，亲水基团先出内膜，进入细胞内，这就是本发明的分子脂质旋转360°进入细胞的机理。

由于绝大多数外界脂质欲通过生物膜被动吸收，必须要水解为分子脂质。这些分子脂质具有亲脂和亲水两重性。组成细胞膜结构的分子脂质是各种饱和、不饱和脂肪酸、磷酸、丙三醇、胆固醇及脂溶性维生素等等。它们把细胞内外隔开，形成细胞膜的脂质渗透压。饱和脂肪酸和不饱和脂肪酯共同存在于生物膜中，在一定的条件下，例如紫外线，发生脱氢反应而互相转化。生物膜的饱和脂肪酸增加了生物膜的粘度和稳定，并使毛细血管血流量相对增多;而不饱和脂肪酸增加了膜的流动和不稳定，并使毛细血管血流量相对减少。反之，血液中饱和脂肪酸量增高，相对减少了毛细血管血流量，而不饱和脂肪酸量增高，相对增加了毛细血管血流量。

当外界分子脂质刚达到细胞之内外动态平衡时的脂质饱和溶度时，细胞内对脂质的牵引力消失，分子脂质便不能再进入到细胞内。外界分子脂质渗透压的大小与生物膜分子脂质水油分配平衡值（HBL）以及外界分子脂质量有关。外界分子脂质渗透速度与生物膜表面积成正比，与外界分子脂质本身的结构大小呈反比。当正常人刚达到饥饿状态时，膜内外脂质渗透压达到内外动态平态，脂质牵引力消失，分子脂质便不能再进入细胞内。对于中国人来说，动态平衡时脂质渗透压平均约为0.127-0.318大气压（96.52-241.47mmHg）。外界的物理、化学和生物因素首先使脂质渗透压升高，这主要是由于膜离子渗透压改变，膜结构牵引变薄而造成的。随着胆固醇、分子脂质的外渗，造成生物膜严重受损而使脂质渗透压降低。

本发明应用适量的来自正常动植物细胞的各种人体必需的分子脂质，达到了控制异常细胞和癌细胞的脂质渗透压，并且能够有效抑制异常细胞和癌细胞的生长、繁殖和有丝***。如果这时有携带的抗癌药物同时存在，则协同效果便更强大。

本发明人经过十多年潜心研究，成功地发现并制备了一系列脂质达到了上述目的。本发明人把这一系列脂质命名为“亲细胞非均质分子脂质”，英文名称译为“Cytotropic    Heterogeneous    Molecular    Lipids”，简称CHML，其含义为：

C（Cytotropic）代表亲细胞。由于该物质来自生物细胞，或者生物细胞含有该物质的成份，故对任何活细胞的膜相结构，特别是异常膜相结构具有亲和性。同时，它具有刺激免疫细胞特别是B细胞、吞噬细胞（指单核-吞噬细胞***）的作用，并产生免疫反应，因为CHML可以激活免疫细胞，产生免疫效应。

H代表非均质。由于该物质具有几乎相似于生物膜的物理、化学和生物学性质，特别是对异常膜构具有特异性吸引作用;它能与极性水分子或水溶性药物相容，也能与亲脂性物质相容。同时，一定量的气体分子也能溶解于其中。另外，H还说明该物质的分子结构和元素所产生的原子力为非均等，它的分子两端带有正负弱电极等电学性质，所以它的分子本身也具非均质性。

M代表分子，说明它是分子型的，其平均分子量约为300左右，它的分子大小约为（20-30）×（8-10）×（4-6） 左右（参阅附图1），是现有技术中脂质体大小的十分之一不到。它可以用丁铎尔氏现象证明为溶胶溶液呈透明透亮状。（参阅附图2）

L代表脂质。

由于本发明的CHML分子结构微小，它可以较容易地穿过异常靶细胞膜而直接进入靶细胞;但现有技术中的脂质体或多相脂质体主要依靠靶细胞的吞噬而进入的。

本发明人经过悉心研究，发现癌细胞内的脂质代谢异常而对本发明的CHML有特异性吸收。所以本发明的CHML作为“生物分子导弹”发挥其全部载体作用外，还有助于对癌细胞的强大杀伤力。体外实验能在50分钟内杀死S180癌细胞（参阅附图3）。

本发明的CHML作为分子载体携带药物的作用较全面，它可携带亲水或亲脂或亲气的分子型药物进入靶细胞。同时，它也可以作为载体临时与二相以上的药物配伍，进行治疗之用。而这方面现有技术中的脂质体或多相脂质体的报道则较少。

本发明的CHML对人体细胞有促进免疫功能作用，特别是对促进B细胞功能有明显作用。而这主面在现有技术中的报道尚少。

本发明的CHML主要来自天然生物细胞，或者说天然生物细胞含有本发明CHML的成份，所以对人体的毒副作用甚微;稳定性好，可在室温常压下保持二年以上而不发生药物性能改变，不含磷酯，无需添加PVP（聚乙烯吡咯烷酮）之类的物质;同时它还有中和和减轻其他药物毒副作用的功能。

本发明的CHML在医学上有极广泛的应用价值，特别是对各种病毒有明显抑制作用，另外还有抗高血压作用。

本发明CHML主要含有饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸以及维生素、***素等成份，这些成份可以从表1所列化学结构式的物质中选择：

表1

（1）月桂酸（十二烷酸）

（2）豆蔻酸（十四烷酸）

（3）软脂酸（十六烷酸）

（4）硬脂酸（十八烷酸）

（5）花生酸（二十烷酸）

（6）鳖酸    主要包含（△9-十六烯酸）

（7）油酸    主要包含（△9-十八烯酸）

（8）亚油酸    主要包含（△9，12-十八二烯酸）

（9）亚麻酸    主要包含（△9，12，15-十八三烯酸）

（10）γ-亚麻酸    主要包含（△6，9，12-十八三烯酸）

（11）花生四烯酸    主要包含（△5，8，11，14-二十碳四烯酸）

（12）二十碳五烯酸    主要包含（EPA）（△5，8，11，14，17-二十碳五烯酸）

（13）二十二碳六烯酸    主要包含（DHA）（（△4，7，10，13，16，19-二十二碳六烯酸）

（14）二十烯酸    主要包含（△9-二十烯酸）

（15）二十碳二烯酸    主要包含（△9，12-二十碳二烯酸）

（16）二十碳三烯酸    主要包含（△9，14，17，-二十碳三烯酸）

（△8，11，14-二十碳三烯酸）

（17）二十二碳二烯酸    主要包含（△9，11-二十二碳二烯酸）

（18）二十二烯酸    主要包含（△11-二十二烯酸）

（19）二十二碳三烯酸    主要包含（△9，12，15-二十二碳三烯酸）

（△8，11，14-二十二碳三烯酸）

（20）二十二碳四烯酸    主要包含（△7，10，13，16-二十二碳四烯酸）

（△6，9，12，15-二十二碳四烯酸）

（21）二十二碳五烯酸    主要包含（△5，8，11，14，17-二十二碳五烯酸）

（22）二十四烯酸    主要包含（△12-二十四烯酸）

（23）二十四碳二烯酸    主要包含（△10，13-二十四碳二烯酸）

（△11，14-二十四碳二烯酸）

（24）二十四碳三烯酸    主要包含（△9，12，15-二十四碳三烯酸）

（25）二十四碳四烯酸    主要包含（△7，10，13，16-二十四碳四烯酸）

（26）二十四碳五烯酸    主要包含（△6，9，12，15，18-二十四碳五烯酸）

（27）二十四碳六烯酸    主要包含（△6，9，12，15，18，21-二十四碳六烯酸）

（28）鲨烯    主要包含（△2，6，10，14，18，22-三十碳六烯酸）

C₃₀H₅₀＝410;

（29）维生素A

C₂₂H₃₂O₂＝328;

（30）维生素D

C₂₇H₄₄O＝384;

（31）维生素E

C₃₁H₅₂O₃＝472;

（32）***素    主要包含（11a-15（s）-双羟基-9-酮基-5-顺-13-反前列双烯酸）

C₂₀H₃₂O₅＝352;

以上任何一种成分都可构成本发明的CHML，都具有式（Ⅰ）表示的分子结构。

本发明含有的上述这些成份主要是从植物和动物细胞中提取的。当然也可以任何实验室或工业上的任何方法来获得这些物质。然而，不管是可以提取的也好，可以获得的也好，都需进行定性定量的测定，以适应各种配方的需要。例如，脂肪酸程序升温气相色谱测定;常用气相色谱测定;紫外分光仪测定;碘值测定;硝酸银硅胶薄层层析等。又如，应用质谱仪、核磁共振、X衍射、红外光以及激光色谱对分子脂质的定性定量测定都是很好的方法。激光色谱所使用的激光器中应用氮分子激光器进行微量定性定量测定，可达到简便、快速和精确的测定效果。

将以上各种成分经过紫外分光仪、气相色谱、质谱仪、核磁共振、红外光、激光色谱等方法进行它们的分子结构式和含量的测定，然后经过分子精滤，分子重结晶等方法提纯。最后便可根据各种分子脂质成分不同的生物功能需要，按照本发明的配方进行精密称定，将各种成分混合，例如，在303-353K的温度充分混合，保持10-30分钟，再将温度降低至288-298K，通过垂熔漏斗即成透明透亮的混合物，也即本发明的分子脂质。

本发明经过大量试验，研究出了一系列亲细胞非均质分子脂质的配方，除了具有现有技术的全部载体功能外还具有各种不同的主要协同功能，从原则上说，只要选用至少一种饱和脂肪酸或不饱和脂肪酸或一种脂溶性维生素或***素就可以成为本发明的CHML，但为了使本发明的CHML功能和作用更全面，增加或不增加一种以上的成分，要按照功能需要进行合理选配。例如，

CHML-Y型    具有协同抗癌功能

CHML-V型    具有协同防癌功能

CHML-A型    具有协同诱导和增加B细胞及白细胞的免疫功能

CHML-M型    具有膜构监测功能

CHML-C型    具有协同抗病毒功能

CHML-H型    具有协同抗高血压及抗血管硬化功能

CHML-O型    分子脂质载体型

从原理上讲，从本发明提供的表1中选用至少一种饱和脂肪酸或不饱和脂肪酸或一种脂溶性维生素或***素就可以构成CHML分子脂质。为了使本发明的CHML的功能和效果更全面，可增加一种以上从表1中选取的其他成分，这样便构成了一系列的CHML配方，例如上述的Y型至O型。从理论上讲，这样的组合有许多种可能性。这就需要按照实际功能和效果进行合理的选配。为此，本发明提供的上述各型亲细胞非均质分子脂质的具体配方可以举例如下：

例1    CHML-Y型

鲨烯    0.5-2.0%（重量，下同）

-亚麻酸 0.7-2.5%

油酸    14-28%

硬脂酸    5-10%

软脂酸    6.5-12%

花生四烯酸＊    3-7%

花生三烯酸＊    2-4%

花生五烯酸＊    8-11%

二十二碳六烯酸    10-15%

二十四碳烯酸＊    2-4%

Vit    E    3-7%

Vit    A    0-0.5%

Vit    D    0-0.5%

二十二碳烯酸    4-6%

二十二碳二烯酸    0.5-2%

二十二碳三烯酸    1-3%

二十二碳四烯酸    3-7%

二十二碳五烯酸    5-10%

例2    CHML-V型

Vit    A    8-14%

Vit    D    2-6%

Vit    E    10-22%

-亚麻酸 0.5-8%

亚油酸    4-14%

油酸    4-7%

软脂酸    13-19%

硬脂酸    7-14%

鲨烯＊    2-10%

例3    CHML-A型

油酸    16-30%

亚油酸    0.5-2%

-亚麻酸 8-20%

软脂酸    10-14%

硬脂酸    4-6.5%

Vit    D    4-10%

Vit    A    0-4%

Vit    E    14.5-20%

十四烷酸    0.5-4.5%

***素F    ＊＊    0-0.2%

例4    CHML-M型

油酸    15-26%

亚油酸    3-12%

亚麻酸    14-22%

硬脂酸    10-18%

软脂酸    16-24%

二十碳烯酸＊    1.4-6%

Vit    A    0.5-1.5%

例5 CHML-C₁型

油酸    16-28%

亚油酸    1.5-4.5%

-亚麻酸 10-28%

软脂酸    14-16%

二十四碳四烯酸＊    15-18%

硬脂酸    0-10%

例6 CHML-C₂型

鲨烯＊    0.5-7.5%

二十碳五烯酸    10-20%

二十碳四烯酸＊    5-12%

二十碳三烯酸＊    2-4%

-亚麻酸 1-4%

油酸    4-10%

亚油酸    1.5-3%

硬脂酸    10-20%

二十二碳六烯酸    15-25%

例7    CHML-H型

硬脂酸    5-10%

亚油酸    10-18%

-亚麻酸 4-10%

油酸    10-20%

Vit    E    5-12%

Vit    A    0.5-4%

花生五烯酸＊    8-15%

花生四烯酸＊    3-8%

花生三烯酸＊    4-10%

软脂酸    6-8%

例8    CHML-O型（亲水型）

硬脂酸    10-19%

软脂酸    12-20%

-亚麻酸 20-34%

油酸    25-38%

例9    CHML-O型（亲脂型）

Vit    A    1.5-4%

Vit    D    1.5-4%

Vit    E    14-18%

油酸    40-60%

十二烷酸（月桂酸）    8-16%

十四烷酸（豆蔻酸）    5-12%

以上例1-例9中，＊表示该分子脂质成分可以采用生物分子活化处理;＊＊表示该分子脂质成分可以采用生物分子转化处理。本发明关于生物分子活化处理和生物分子转化处理这种特殊处理方法将在稍后加以详细举例说明。

可以看到，把上述例8亲水型分子脂质载体和例9亲脂型分子脂质载体中的成分结合起来便可成为既亲水又亲脂的分子脂质，而例1至例7中也基本上含有这些成分，也就是说，在亲水亲脂的分子脂质载体成分中再添加从表1中选取的其他成分，便可构成本发明的具有各种所需功能的亲细胞非均质分子脂质CHML独特载体。

在将上述各配方的成分配制成具体剂型时，表面活性剂等添加剂可适当选用，这样便能够达到本发明配方选取的表1中成分的非均质分合，成为具有独特功能的亲细胞非均质分子脂质，所谓分子脂质非均质分合是指使各组分混合后呈整齐极性排列，然后表面活性剂的极性基团或金属离子或非金属离子或其它极性基团与分子脂质连结，使这些分子脂质更具有对异常膜构亲和能力而发挥更大的生物效应。添加剂可以用表面活性剂吐温以及司盘、丙三醇、***、乙醇、高级醇硫酸脂盐（R-OSO₃Na）、烷基苯磺酸盐（R-C₆H₄-SO₃Na）、胆汁酸盐、烷基氨基酸（R-NH-CH₂-COOH）、长链季铵盐、月桂醇硫酸钠（Sodium Lauryl Sulfate）、硫酸化油、聚氯乙烯脂肪醇醚、聚氯乙烯烷基酚醚、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钠、氯化钙、氯化钠、氯化钾、氯化铁、氯化亚铁、氯化锌、氯化镁、硫酸镁、碘化钾、氯化铵、碳酸氢钠、硫酸锌、磷酸锌、氟烷、氯化氢、溴化钾、溴化碘、溴化钠、碘化钾和醇式、酚式、醚式、醌式分子的基团与氨基酸分子、葡萄糖分子和嘧啶、嘌呤分子的基团以及它们的各种组合物等等。较佳的组份是选择10-90%（重量）甘油、***和乙醇，加入90-10%（重量）高级醇硫酸脂盐、氢氧化钾、氢氧化钠、碳氟化物（FC）包括全氟正丁基四氢呋喃（FC-80）、过氟萘烷（FDC）以及三氟三丙基胺（FTpA）等。另一种较好的表面活性剂组分是选择70-30%（重量）的吐温、司盘、甘油和乙醇，加入30-70%的氢氧化钾、氢氧化钠、氢化蓖麻油、聚氯乙烯醚、***和胰脂酶。

对非均质分子脂质分合这一步骤，举例说明如下：

例10

将以上至少一种的添加剂，例如单一选用氢氧化钾35%的水溶液，加温之后加入从表1中选取的至少一种分子脂质成分，例如单一选用油酸;也可选用60%乙醇与5%硫酸镁作为添加剂，加入分子脂质液，如油酸中加温，温度控制在283-340K，水油分配平衡值（HLB）控制在3-16左右，pH2-12，时间为10-120分钟，用搅拌机边加热边搅拌，直至密度均匀，混合完全，达到透明，即呈分散极好、排列整齐的非均质分合分子脂质产品。

本发明提供上述各配方剂型的制备可以举下列例子来说明：

例11，取新鲜注射水适量，将选用的添加剂例如表面活性剂与之一起加温至283-363K溶解，滴入同温度的按上述功能配方成分称量、混合的混合物中，充分搅拌，摇匀，并根据需要浓度加入适量注射水，混匀成透明透亮的溶液即达到非均质分合，可用0.025μ滤膜过滤，灌封于真空或充氮的安瓿中。在流通的373±1K蒸汽中灭菌30-60分钟。避光避热贮藏备用。

例12，为适应大剂量制备，应用高速乳化机对例1的混合物进行二次匀化。乳化机泵速为54升/时，工作压力2000-8000磅/平方英寸。水油分配平衡值（HLB）为4-18。混匀溶液降温至293-303K，经0.6μ滤膜过滤。再加入0.2-2%的活性炭加温至373±1K煮沸30-60分钟。降温至288-303K，经0.45μ滤膜过滤，继之采用高速离心机，其条件为8000-50，000转/分，a＝15，000-60，000，离心5-10分钟;最后通过0.025μ滤膜过滤，得到透明透亮的CHML液，即达到非均质分合，灌封于真空或充氮的安瓿中;经流通蒸汽373±1K灭菌30-60分钟;避光、避热贮藏保存备用。

本发明的亲细胞非均质分子脂质CHML所包含的成分和配方已如上所述，这些成分可来自一切植物和动物细胞。

植物细胞的主要来源有：玉米、花生、向日葵、棉籽、大豆、豌豆、赤豆、豇豆、蚕豆、绿豆、茶籽、蓖麻、可可豆、芝麻、橄榄、乌桕籽、南瓜子、丝瓜子、冬瓜子、松子、椰子、菜籽等果实，以及它们的根茎和叶。

动物细胞的主要来源是：鸡、鸭、鹅、雀、牛、羊、马、猪、狗、鹿、兔、龟、鳖、和海洋生物中的蛤、扇贝、牡励及鲨鱼、鲸鱼、鳕鱼等。另外还有鸭、鹅、鸡蛋的膜。

CHML所需的成分在动物的肝、心、脑、骨髓、神经和肾上腺等器官中含量最高。

本发明CHML包含的各种成分其重要来源可以是植物中的玉米、向日葵、芝麻、花生、菜籽、大豆等果实，或者动物如海洋生物中的带鱼、真鲨科的大青鲨和白斑鲨、鳕科中的鳕鱼以及哺乳类的鲸鱼等。

选择所述的动、植物的有用部分，要求健康、无遗传病。对动物，要求有一定免疫力，动物自身的肝、肾、心、肺、脾、脑等必需符合提取规格者。然后用任何现有技术的方法都可将包含各种饱和及不饱和分子脂质的成分进行提取。例如，精选优良植物，洗净晒干，应用常规的粉碎以及加温压榨法将植物粉碎压榨便可获得植物油粗品。如果加入溶剂如***、丙酮等以及浸出剂也可得到植物油。如按上述植物品种某些食用或医用植物油也能从市场上获得，按需进行含量测定之后也能适当采用。又例如，在无菌环境下从动物中摘取有用部分，放入253K低温冰箱或直接用新鲜组织加工提取。将摘取的有用部分的组织去除杂质，绞碎，在303-323K温度下加热45分钟，然后在2000转/分钟转速下离心10-20分钟，细胞渣再用原组织重量的约30%的热蒸馏水保温20分钟，再在2000转/分钟下离心10-20分钟，然后将上清液去除，加入相当于组织重量的80%的蒸馏水不断搅拌，再用分液漏斗将动物油分离出来即可获得动物粗脂质。市售的各种动物油也需进行含量测定之后才能适当采用。

提取了植物油和动物油粗脂质产品之后，便可用皂化法、冷冻离心法或吸附法等方法使饱和与不饱和脂肪酸进行分离。举例来说，

例13

将植物油皂化，使皂化液的温度控制在323K，用1∶1（V/V）浓度的盐酸调节其PH值为3.0，酸化之后，弃去水层。乳化层用***提取，合并***提取液及油层，再将混合液中的***蒸去，加十倍量的丙酮溶解留下的混合物，按不同饱和脂肪酸的不同凝点分级冷冻，每次冷冻约2小时，离心600-2000转/分钟，约5-10分钟，过滤，收集各种饱和脂肪酸之后，蒸去丙酮，得混合不饱和脂肪酸。

例14

将鲨鱼肝脏匀浆溶液，加三倍量的95%乙醇，过滤。滤渣再加两倍量的95%乙醇提取后，过滤，合并滤液，浓缩以除去乙醇，加适量***萃取，除去不溶物，蒸除***，得脂质液。将脂质液以1.5倍乙醇溶解，加50%氢氧化钾液调PH至10以上，进行充氮皂化，至皂化完全后进行过滤，分离得到混合脂肪酸钾盐和不皂化脂质液。降温至233-243K待进一步分离。然后，将动物皂化液取出，以50%浓度的盐酸或硫酸进行酸化至PH＝3.0，去水层，用***提取，得到混合脂肪酸***液。将此混合脂肪酸***液浓缩成原体积的半量，置253K冷库约24小时，于273K用滤低自然过滤，滤渣以***洗涤，合并滤液，浓缩成半量，再置253K冷库约24小时，过滤，如此反复处理，即可分别收集到固体的饱和脂肪酸和液体不饱和脂肪酸。固体饱和脂肪酸根据凝点不同而分别提取。

例15

用干燥硅胶85份加烧石膏15份（烧石膏中加有CMC0.5～100%和淀粉10～40%），配制干燥的硅胶烧石膏，用该粉1份水3～4份调成糊状，铺层，薄层的厚度以250毫微米（nm）这宜，若以薄板上每平方厘米上所包含的吸附剂的重量来表示，约为10～15mg/cm²。制得之薄层，于室温下放置使其充分干燥。然后进行活化，加温353～383K1小时。将100%纯硝酸银溶于少量水中，配制成10～90%的硝酸银溶液，把预先制好的硅胶烧石膏板浸入该溶液中30～120秒，取出避光晾干。倒入尚需分离的皂化脂质溶液，吸附后用石油醚或己烷等非极性溶剂为洗脱剂进行洗脱，用生理盐水稀释后去除银离子，分离得到各种多烯不饱和脂肪酸。同时可收集洗脱下来的饱和脂肪酸备用。

对于各种不饱和脂肪酸的分离，可以用任何现有技术的例如吸附法、超速离心法、超滤法、冷冻结晶法、层折法、蒸馏法、电泳法、离子交换法等方法。还可以用包括溴化脱溴法、尿素包含法、相似相溶法、硝酸银络合法、EDTA-Na综合法等。本发明推荐几种综合法，举例如下：

例16

将混合不饱和脂肪酸加入适量的甲醇溶解，按不饱和脂肪酸∶尿素∶甲醇＝1∶3∶7的比例，在混合不饱和脂肪酸中加入尿素和甲醇，搅拌使得尿素完全溶解，选用CO₂干冰或液氮等使之冷却，按照各种不饱和脂肪酸的凝点，例如103～273K进行冷冻结晶，过滤，取过滤液，以无水硫酸钠干燥，蒸去甲醇，得到各种分离的不饱和脂肪酸。

例17

首先制取各种不饱和脂肪酸甲脂。然后取各种不饱和脂肪酸甲酯，加10倍量的1mol/l氢氧化钾醇液，在313～353K水浴中充氮回流半小时，经水解完全后，减压浓缩，除去部分甲醇，再加三倍的水稀释后，以4mol/l盐酸酸化至pH为3.0，加***提取，取此醚层，用水洗至pH5～6，取醚层用无水硫酸钠脱水充氮减压浓缩，除尽***，得到各种纯不饱和脂肪酸混合物，通过冷冻结晶，充氮避光冷藏。

对于脂溶性维生素A、D和E，可直接采用市售的。从不皂化脂质溶液中也可提取维生素A、D和E，但必须将胆固醇予以分离并进行含量的测定。

本发明在制备CHML的过程中，应用了紫外线和激光器，使某些成份中含有的微量胆固醇转化成为鲨稀类分子脂质。当鲨烯类分子脂质不易直接获得，应用本发明应用紫外线或激光转化的方法，可直接将胆固醇溶液活化成为鲨烯类分子脂质。这样，既可较经济简便地获得这类分子脂质，又可使微量对人体有不良影响的胆固醇转化为对人体有益的分子脂质，也就是说改变了它们原来所产生的生物效应，转变为新的生物效应，这是本发明的制备方法中很有独特效果的步骤。举例来说：

例18

应用光能进行胆固醇双键

位脱氢反应，使胆固醇转化成鲨烯类，使本发明的CHML协同杀伤癌细胞的能力提高约50%。化学反应式如下：

操作方法：将以上动物油或植物油不皂化的物质用丙酮提取胆固醇溶液100ml，或者其它胆固醇丙酮溶液100ml，用30瓦至100瓦的紫外灯，在常压下进行直接照射，紫外线波长为2537 ，能量密度为20～100mw·sec/cm²，照射时间为50～10，000秒，温度控制在318～348K，PH4～10，照射溶液的厚度为0.254～2.54毫米，相对湿度为55%，照射后蒸去仲醇即得鲨烯类分子脂质成分。

本发明应用激光照射使本发明的分子脂质的活性达到能产生最佳生物效应。例如，花生三、四、五烯酸应用激光活化而转化为***素;维生素A应用激光活化而转化为视黄醛;维生素E中的α-生育酚转化为α-生育酮;***素E转化为***素F;或反之亦然，将***F转化为***素E，等等。

本发明应用激光照射，还达到了尽可能减少分子脂质对人体正常细胞的损伤，并且提高人体生物利用度的效果。例如，二十二碳六烯酸（DHA）即对人体有抗高血压的作用，但同时它也会损伤血管内皮细胞，造成细胞的溶血。本发明的制备方法中，应用了激光照射，便可将这些长链的不饱和分子脂质在其双键的

位进行少量的环化，从而达到既附合人体需要，又减少对人体正常细胞的损伤的效果。在

位的双键加氢环化对于18碳至30碳的多烯不饱和脂肪酸都能用激光来达到。

本发明采用的激光器的较佳选择有：红宝石激光器、钕玻璃激光器、Nd⁺³激光器、YAG激光器、氦氖激光器、二氧化碳激光器、氩离子激光器、氮分子激光器和氦镉激光器等。

本发明应用的激光照射活化转化，可以在动物微粒体酶、***素酶和维生素C等物质参与下进行的。举例来说：

例19

应用激光、维生素C进行    前腺素E转化为***素F，即***素的酮式结构向醇式结构活化转化。化学分子反应式如下：

操作方法：从冰箱取出***素E（PGE）精品1克，调节PH为8，温度为303～311K，加入标准维生素C液0.05～1.5克，搅匀，同时通入氮气，用氦氖激光器或YAG激光器或氮分子激光器，如波长为6328A，10660A和3371A，以及它们的合成波，功率密度为0.2-50mw/cm溶液厚度为0.633～6.33毫米，时间为10～180分钟，反应终止后，用5，000～10，000转/分，离心5～10分钟，弃去上清液，并可同时冷冻结晶，得到***素F（PGF），其熔点为308～310K。***素PGE与***素PGF在生理作用上有较明显的区别，例如，在血管舒张、心输出量、支气管扩张等方面的作用相反。活化转化便达到了使分子脂质CHML含有精确的分子结构和生物效应。

例20

应用激光、绵羊精囊微粒体酶使二十二碳六烯酸（DHA）分子加氢环化。化学分子反应式：

操作方法：第一步制备酶制剂：取233～253K冷藏的绵羊精囊，去除脂肪及***，每公斤精囊中加入1升0.154mol/l氯化钾溶液，捣匀浆液，用600rpm离心10分钟，去掉上清液，用10，000rpm离心20～40分钟，用2mol/l枸缘酸调至PH4.6～5.6，用10，000rpm离心30～60分钟，去掉上清液，用PH8的0.2mol/l磷酸缓冲液100毫升洗下沉淀，再加入EDTA-2Na溶液1克搅匀，以2mol/l氢氧化钾滴入酶制剂，PH为7.8～8.2，冰箱冷冻保藏，温度维持在233～243K。第二步分子加氢环化：将新鲜酶剂按体积，每升加入适量氢醌及谷胱甘胺以少量水溶解之后加入酶制剂。再按每公斤绵羊精囊加1～1.5克DHA，搅拌通氧，以波长为6328 的氦氖激光器照射，功率密度为0.1～50mw/cm²，溶液深度为0.633～6.22毫米，照射时间为5～60分钟，温度为310～311K，反应终止后，缓慢冷却，用2mol/l盐酸轻拍容器壁，使PH为4.0～4.2，以10，000rpm离心30分钟，沉淀物中加三倍的丙酮，以氨水调节至PH7.0为宜，捣匀后经10～30分钟，抽滤、压干，反复多次得滤液，加入2mol/l磷酸缓冲剂，调节PH至8，进行提取，取水层，以石油醚脱脂，以2mol/l盐酸酸化，将PH调节至30，再以三氯甲烷提取，水洗酸后，抽干得二十二碳烯酸粗品（环式），经醋酸乙酯等展开剂，硝酸银硅胶为吸附剂，得二十二碳四烯酸（环式）精品，以生理盐水洗银，无水硫酸钠内干燥，滤去硫酸钠后减压充氮浓缩，除尽醋酸乙酯，冷冻干燥得DHA环状活化精品。

将以上经转化、活化处理的分子脂质成分，以紫外分光仪、气相色谱、质谱仪、核磁共振、红外光谱、激光色谱等方法对它们的分子结构式和纯度进行精确测定。然后经过分子精滤、分子重结晶等方法提纯各种脂质成分。最后，按照各种分子脂质不同的生物功能需要，按照选择的配方进行精密称量，与其它所需分子脂质的成分混合，适当加入上述的添加剂，在303～353K的温度下，充分混合，保持10～30分钟，再降温至288～298K，通过重熔漏斗，即可制成本发明的CHML，其质量和效果将更佳。

本发明的CHML在临床上可制成各种协同预防和***的剂型，常选用CHML的V型和Y型。为了增强在体内的协同效果，在本发明的CHML中可再加用一些抗癌药物，例如，氟尿嘧啶、平阳霉素等等。使它们能造成对癌细胞的“第一次打击”和“第二次打击”的协同作用。CHML-C型和CHML-H型分别具有抗病毒和抗高血压的效果。现举例说明它们的各种剂型、原料、用量和制法。

例21

片剂。主要适用于胃癌、结肠癌、直肠癌等消化道癌症的治疗和早期癌前变的预防。

原料    160片用量

CHML    50ml

糊精    17.8g

糖粉    10.2g

淀粉    2.0g

滑石粉    1.5g

硬脂酸镁    1.0g

抗癌药物    随需要适量加用

制法：浓缩CHML使含量达到20～40%，加入抗癌药物糊精、糖粉、淀粉，制粒，干燥之后，加入其它成分混匀，过16目筛，压片即成。

例22

微胶囊制剂。适用于全身性各种癌症的协同治疗和癌前期的预防。选用CHML-Y型和V型。也适用于抗病毒和抗高血压的剂型如CHML-C型和H型。可用细颗粒的明胶微囊，将10%的CHML溶液浸泡于干燥的微胶囊中，当CHML被吸干后，放入干燥器中，水分干燥后即得CHML微胶囊。

例23

滴眼剂。主要适用于病毒性感染的眼部疾患以及眼部癌前病变以及恶性肿瘤的协同预防和治疗。

配方1

原料    用量

CHML    50mg

无水磷酸氢二钠    适量

无水磷酸二氢钠    适量

盐酸吗啉双胍    4g

蒸馏水    加至100ml

配方2

原料    用量

CHML-Y    100mg

硼酸    适量

硼砂    适量

抗癌药物    随需要适量加用

蒸馏水    加至100ml

取CHML与磷酸盐或加温加入硼酸、硼砂，再加入盐酸吗啉双胍或抗癌药物混合至澄明，分装于煮沸干燥灭菌的滴眼瓶中。

例24

注射液。适用于各种良性或恶性肿瘤以及癌前变的协同治疗与预防。可配制成局部注射液、静脉推注液和静脉滴注液的CHML制剂。含有或不含抗癌药物，由临床医师掌握协同取用。

局部注射液，可直接注入病变区。

原料    用量

CHML-Y    10g

乙醇（95%）    2ml

抗癌药物    随需要适量加用

蒸馏水    加至100ml

将CHML加入蒸馏水和乙醇混合均匀，即可灌封于安瓿中，每支1ml或2ml，用373K流通蒸汽灭菌30分钟，备用。

静脉注剂和静滴注剂。其特点是，静脉推注剂为强化性的恶变全身转移协同治疗型，例如，在手术中冷冻病理切片报告提示后的应急处理，可选用，静脉滴注剂可适用于白血病的治疗和预防。其CHML的含量分别可为5%、10%、15%和20%。原料及量同本例中的注射液。如用于静脉推注时，可将1ml    CHML制剂加入20ml生理盐水进行静脉推注;如果用于静脉滴液，可将1～2ml新鲜CHML注射液加入5%葡萄糖盐水注之。

例25

耳鼻滴剂。主要适用于鼻腔、耳部的癌前变和癌症的协同治疗和预防。特别是鼻咽癌的治疗。

原料    用量

CHML-Y    250mg

薄荷脑    1g

平阳霉素    随需要适量加用

液体石蜡    加至100ml

取CHML加入适量平阳霉素，再取薄荷脑置于干燥乳罐中，加入以上溶液，先加入适量液体石蜡，研磨混匀，再添加液体石蜡至足量。

例26

喷雾剂。适用于肺癌的协同预防与治疗，同时也适用于气管癌、食管癌的协同预防与治疗。

原料    20瓶气雾剂用量

CHML-Y    60ml

柠檬精    1ml

7%乙醇    56ml

糖精钠    4g

氟尿嘧啶    随需要适量加用

二氯三氟甲烷    160ml

取CHML与7%乙醇加温至313～333K，冷却至283K，加柠檬精、氟尿嘧啶混合均匀，分装入气雾剂瓶中封口，压入二氯三氟甲烷。

本发明的CHML，无论在作为载体时添加少量或者甚至极少量药物，都是具有强大协同效果的“生物分子导弹”。本发明通过大量的实验研究，例如，对S180肉瘤细胞体外抑制实验;对B细胞作用的实验;临床前动物药理实验;Ames试验;常规量和极量测定等，有力地证明了这一点。

Ⅰ.CHML-Y型剂对S180肉瘤细胞的抑制实验。

本实验是在体外对小鼠标准S180肉瘤细胞的抑制甚至完全消灭作用来研究和说明CHML的强大生物作用的。

材料：

CHML-Y由发明人提供，含量为0.5%;

培养液采用RPMI-1640液;

实验用的S180肉瘤细胞来自上海市肿瘤研究所动物房的接种小鼠。

实验方法：

将S180肉瘤细胞接种后七天的小鼠拉颈至死。从该小鼠腹部抽取含有S180细胞的腹水。加入少量的RPMⅠ-1640液，取微量腹水进行S180细胞计数，然后再加RPMI-1640液，使S180细胞含量达5×10⁶/ml，将1.5mi上述含癌细胞的培养液分别吸入8支试管中，其中对照试管2支，观察试管6支，每支试管同时分别滴入1mg CHML-Y于每毫升上述含癌细胞的培养液中，加盖，放置37℃恒水浴，每隔10分钟离心一次，取出试管观察沉淀液，用瑞氏法染色玻璃涂片，观察CHML-Y的效果。三次重复试验结果列于表2。

另外，关于CHML-Y体外对S180细胞形态上的抑制试验结果，参阅附图3（a）至（d）。

如果本发明CHML选用适当成分或浓度则可在2-3秒钟内杀伤癌细胞;但是对人体细胞也有较大破坏。所以控制其成分及浓度使癌细胞在一定时间内杀伤，以最大限度减少对正常细胞的损伤。

Ⅱ.CHML-A型剂对小鼠B细胞作用的实验。

本实验证明CHML-A型是一种分子型的生物免疫促进剂，特别是对于B细胞的免疫功能作用比较明显。

材料：

CHML-A由发明人提供，含量为10%;

培养液采用RPMⅠ-1640粉剂按标准稀释，PH6.8，含青霉素100μg/ml，链霉素100μg/ml;

实验动物为JCR小鼠，由上海第二医科大学动物房提供。

实验方法：

1.脾-溶血空斑试验（PFC/Spleen）

将JCR小鼠32只，平均体重为20g左右，随机分为三组，第一组为对照组，尾静脉注射生理盐水0.2ml/只，第二、三组每只静脉注射CHML-A制剂分别为25mg/kg，50mg/kg，然后均在给药后10分钟，对以上三组小鼠每只注射25%的绵羊红细胞（SRBC），四天后将小鼠放血至死，取脾，用玻璃匀浆器轻轻研磨，制成细胞悬液，用R PMⅠ-1640培养液离心洗涤后，最后调节成2×10⁶/ml的细胞液度，再取细胞悬液0.5ml，加0.1ml25%的SRBC，0.1ml1∶2稀释的冻干豚鼠血清和0.15ml培养液，用载玻片封成单层细胞悬液，放置37℃培养60分钟，然后在实体显微镜下计算空斑形成细胞数。其结果见表3。

注：＊显著性t检验

2.小鼠脾指数的测定

将JCR小鼠24只，体重为20克左右，随机分为3组，每组8只，其中一组为对照组，每只每日静脉注射生理盐水0.4ml;另二组为治疗组，每天对每组小鼠分别施行静脉注射CHML-A型制剂25mg/kg，50mg/kg，连续给药四天，剖取脾脏称重，按下式计算脾指数：

脾指数＝ (脾脏重量)/(每10g体重) ×100%

测定结果列于表4。

注：＊显著性t检验

通过这两项试验说明CHML-A型剂对JCR小鼠的B细胞功能有促进作用，为临床过渡提供了可靠的依据。

Ⅲ.CHML临床前动物药理试验

由于本发明的CHML来自正常的动植物细胞，它的成分均为人体可接受的分子脂质。根据大量资料分析，本发明CHML的毒副作用在适量的情况下是甚微的。以下是动物实验结果。

1.急性毒性实验：（观察日期为注射后二周）

小白鼠20只，平均体重15克左右，年令2个月左右，随机分为两组，将1～5ml的0.015%CHML加5%葡萄糖盐水1毫升，注入实验组鼠背皮下组织。观察其活动情况，是否踡伏不动，闭目，其毛是否松蓬失光，不进食，逐渐消瘦直至死亡，是否出现心血管、呼吸、消化道的反应。实验结果，实验组中其10只小白鼠，在注射后20分钟到48小时内，出现心血管、呼吸、消化道的轻微反应，但活动情况正常;48小时后，未出现毛松失光现象;72小时后进食性猛，无消瘦及死亡现象发生。

兔子16只，平均体重2.3kg，随机分为两组，将10～30ml的1%CHML加5%葡萄糖盐水2ml，注入兔子耳背皮下静脉。观察内容;基础体温，局部反应和全身反应。用***表测量基础体温得：注射前平均体温为38.2±0.2℃，注射后24～48小时平均体温为38.2±0.4℃，注射后48小时平均体温为38.2±0.2℃。实验组共8例中，8例出现局剖静脉轻度血瘀、肿胀，局部温度提高，但24至72小时后，肿胀及温度均消退，无组织感染及坏死现象发生。全身观察，其呼吸及心率平均在三十分钟出现增块，48小时后恢复正常;消化道在注射后轻度食欲减少，72小时后食欲增强;神经***，全身活动自如，无其它神经***反常现象;毛发光泽正常，无消瘦及死亡现象发生。

2.亚急性毒性实验：（观察日期为注射后二周至三个月）

兔子8只，平均体重2kg，雌雄比例3∶5，将20～40ml的1%CHML加10%葡萄糖溶液4ml，注入兔子耳背皮下静脉。观察内容：血压、心率、神经***和消化***。其中，血压无明显变化;心率平均在三十分钟出现增快，48小时后恢复正常;神经***，活动无异常;消化***，注射后食欲轻度减退，72小时后食欲增加;无一例死亡。

3.慢性毒性及特殊毒性试验：（观察日期为3个月至6个月）

试验小白鼠6只，平均体重18克，均为受孕前约二周左右的雌性;另设对照组6只。将1至5ml的0.015%CHML加5%葡萄糖盐水1ml注入小白鼠腹腔。观察：新生鼠出生后，全身是否出现畸形，消化道、神经***以及发育情况。结果：出生后的新生鼠未发现畸形及消化、神经***的异常，发育与对照组相同。

狗4只，平均体重18.5kg，均为受孕后二个月左右的雌性，分为两组。将250mg～100mg/kg的CHML加入5%葡萄糖盐水4ml，注入动物的腹腔。观察：新生狗出生后全身是否出现畸形，消化道、神经***以及发育情况。结果：新生狗未发现畸形，消化及神经***未发现异常、发育情况与对照组相同。

Ⅳ.CHML的Ames试验

菌株鉴定

用鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型突变菌株，并带有R因子的TA98和TA100作为测试菌株。菌株先经过是否需组氨酸生长试验。自发回变试验、切除修复***缺失（UVr B），脂多醣屏障丢失（rfa）及抗氨苄青霉素试验作为鉴定菌种的合格标准。测试前将菌种接种在肉汤培养基中，在37℃培养16小时，经培养后的细胞悬液其活菌数必须达到每毫升含菌10⁸至10⁹之间才可作致突变检测用。

S-9混合液的制备

按Ames等人的方法，制备9，000克肝匀浆悬液，取雄性大鼠（150克左右），用玉米油稀释多氯联苯（Aroclor 1254），以500mg/kg量诱导5天后取肝，制成匀浆，再作9，000克离心，取上清液制成S-9，液氮速冻保藏，使用时另加入代谢活化***1ml的S-9混合液中含S-9 0.3ml，MgCl₂8μmol，KCl33μmol，G-6-P5μmol，NADP⁴μmol和PH为7.4的磷酸缓冲液100 μmol。测试时S-9混合液的用量为每皿0.2ml（约合S-9 40 μmol），上述操作均需无菌，测试时将鼠肝微粒体活化***加进去。

致突变控制

取CHML样品，用二甲基亚砜（DMSO）稀释成5μg～500μg/ml，每次浓度取三皿，每皿加底层培养基（U-B低培养液）15ml，待凝固后取2ml上层培养基加0.1ml菌液和待测样品0.1ml（每皿样品含量分别为0.5、5、50、500及5000μg），再加S-9混合液0.2ml，一并倒入上层培养基上，待凝固后，置37℃温度中培养48小时。计算回复突变菌落数。除菌株自发回变和菌液加S-9作阴性对照外，另外采用环磷酸酰胺（CTX）和二乙酰氨基（2-AF）作阴性对照测试物。

结果如表5所示。

讨论

经过实验证实，本发明CHML制剂的各种成分对试验菌株没有回复突变作用，证实了本发明的CHML的成分不存在能引起密码突变和残基对置换突变。

Ⅴ.CHML-Y型剂的常规量和极量测定结果：

小白鼠（昆明种）

静脉给药    常规量    25毫克/公斤

腹腔给药    极量    50毫克/公斤

兔子

静脉给药    常规量    50毫克/公斤

腹腔给药    极量    100毫克/公斤

Ⅵ.CHML-M白血病细胞膜构分子监测：

近二十多年来的实验材料证明，白血病患者的白细胞膜流动性高于正常人白细胞膜。这主要是由于白血病患者的白细胞膜构中不饱和分子脂质的含量增加，而饱和分子脂质及胆固醇含量降低造成膜的粘度增高而致。

本发明的CHML-M可根据白血病的细胞膜流动性增高、细胞膜对本制剂吸附、吸入能力减弱而设计一种新型膜构分子监测制剂及方法，其特点是方法简单、快速，测定值精确。

材料;

CHML-M标准试剂由本发明人提供，含量为3mg/ml;

培养试剂-RPM    I-1640培养剂;

正常血液标本取自正常人体献血者;白血病血液标本来自医院门诊和病房中已确诊的白血病患者。

仪器-紫外分光扫描仪。Philips    PU8800型，和国产753型紫外分光仪。

操作方法：

1.采血    常规新鲜采血2ml，注入含有40μ肝素试管，轻轻混匀;

2.沉降白细胞    采用自然沉降法。直立静置室温或37℃温箱中30～60分钟;

3.洗涤细胞    当血液分层后，随即吸出位于红细胞上层的白细胞层，放入RPM    Ⅰ-1640培养液中，用1，000转/分钟的水平离心机离心，洗涤共三次;

4.白细胞计数 去除上清液，用毛细管小心吸出白细胞，计数之，并按此计数精确调整白细胞浓度为1×10⁶/ml;

5.分管    轻轻混匀溶液并将细胞液分为二根试管，即，对照管和试验观察管，每管含白细胞溶液为0.9ml;

6.加试剂和生理盐水    观察管支加入0.3mg的CHML-M制剂，对照管每支加入0.1ml生理盐水;

7.培养和测定    在37℃恒温水浴中培养120分钟之后，以1，000转/分钟离心10分钟，取0.5ml上清液加入4.5ml三蒸水，然后置于紫外分光仪进行含量测定;

结果

本发明设计的CHML-M标准试剂吸收峰的紫外分光仪扫描结果列于表6。

本发明设计的CHML-M标准试剂的标准曲线示于图4。

本发明设计的CHML-M用紫外分光仪对白细胞膜构的监测结果见表7。

注：AGL为急性粒细胞白血病

CGL为慢性粒细胞白血病

应用本发明设计的CHML-M制剂对白血病细胞膜构分子监测的初步实验结果表明，本方法具有新颖、快速、简单、灵敏等特点，所以具有长远开发实用价值。

Ⅶ.家兔肺泡巨噬细胞吞噬实验

1.提取巨噬细胞

选择正常健康家兔6只，雌雄比率为3∶3，平均体重2.3kg。在麻醉下将远端气管连同肺一起取出，漂浮于PH7.4、浓度0.01M的PBS（磷酸缓冲液）玻璃圆盘中，用50ml注射器每次从气管中灌入30ml冲洗液（PH7.4，0.01MPBS），及时抽出，共洗3次，记录每次抽出的液体量。3次抽出液混匀于同一瓶内冷藏备用。

细胞计数。取上述洗液0.5微升于玻片上，加等量台盼兰混匀后滴入血球计算盘内，按白细胞计数方法计算肺泡巨噬细胞总数。

灌洗液回收率第一次灌洗回收量达84.6%，第二次达96.6%，第三次为98.3%。回收液中6只家兔巨噬细胞平均总数为2.5×10⁵ml，其中活细胞达93.5%。在灌洗液中，肺巨噬细胞平均为92.4%，嗜伊红细胞为6.5%，淋巴细胞占0.9%，嗜中性白细胞占0.4%。

2.吞噬菌试验

对照组

取8ml冲洗液加4ml白色念珠菌悬液（3，000万菌/ml）在无菌操作下混合，37℃温育30分钟，1，000转/分钟离心10分钟，沉淀部分制成涂片，瑞氏法染色及HE染色，光镜观察之。

实验组

取8ml冲洗液加4ml白色念珠菌悬液（3，000万菌/ml）在无菌操作下混合10分钟，然后分别加入5%CHML，10%CHML液10微升，37℃温育20分钟，1，000转/分钟离心10分钟，沉淀部分制成涂片，瑞氏及HE染色，光镜观察，分别记录吞噬百分率及吞噬指数。

吞噬百分率＝ (吞噬细菌的肺泡巨噬细胞数)/(200只肺泡巨噬细胞) ×100（%）

吞噬指数＝ (200肺泡巨噬细胞吞噬细菌数)/(200只肺泡巨噬细胞)

实验结果列于表8，可以看到实验组的吞噬明显提高。

Ⅷ.在试管中CHML-Y对人类食道鳞状癌细胞的作用实验

材料与实验方法同Ⅰ，CHML-Y型剂体外对S180细胞杀死实验。重复三次实验结果。

实验结果列于表9，

实验证明本发明的CHML是一系列的“生物分子导弹”，在试管中研究CHML对人体癌细胞的抑制作用的结果以及上述一系列的实验为本发明CHML用于临床提供了有力的可行性研究基础。

根据研究分析，当CHML达到0.1微克分子/克时，组织细胞氧的解离度降低，而CHML-M携带氧的能力增加;当CHML达到19微克分子/克时，组织细胞氧的解离度增高，而CHML携带氧的能力明显下降。这样，当细织细胞突变时，适量浓度的CHML进入突变细胞内，由于CHML吸入了大量的氧，造成该细胞内缺氧进一步明显，线粒体的氧化磷酸化受阻，ATP下降，细胞内蛋白质、核酸合成受阻，Ca⁺⁺离子与CHML的结合增加，内质网功能受阻，从而抑剂了细胞突变。

Ⅸ.CHML对病毒抑制作用的实验

CHML-C对蕃茄病毒抑制作用。

蕃茄上发生的病毒有烟草花叶病毒（TMV）、黄瓜花叶病毒（CMV）和马铃薯X病毒，它们之间的发病率大致分别为95∶23∶2。

CHML-C既可作为病毒的杀伤剂，又可作为载体将抗病毒药物分子带入植物细胞内。同时，CHML-C还具有增强植物抵抗力的功能。

本实验将CHML-C应用于蕃茄受病毒感染区，目的在于观察CHML预防并抑制蕃茄被病毒感染变质的效果。

材料的方法

CHML-C由发明人提供。

选择普通系蕃茄上有镶嵌斑驳受染的露天实验田，随机选择已结幼果的蕃茄，标记分组。用蒸馏水稀释CHML-C至35mg‰-50mg‰，进行外涂预防治疗，每次每只幼果量为20μl，每周一次，共计三次，观察三周，将成熟果称重记录。结果如表10所示。

注：＊显著性t检验

Ⅹ.单一组分的CHML体外抑制S180肿瘤细胞的试验

由于表1所列每一组分都可用本发明的方法制成CHML，从而且有通式（Ⅰ）所示的分子结构，既具有与抗癌药物的连结部分，又具有癌细胞膜构的活性部分，所以单一组分制成CHML都具有协同抗癌作用。例如，用油酸作为单一分子脂质组分制成CHML其对S180的体外抑制率在240分钟之后达到34%。

材料与方法

将油酸经过分子脂质非均质分合步骤制成0.5%和1%的CHML溶液。

采用RPM I-1640培养液将S180细胞稀释成1×10⁶个细胞/ml，然后将该S180细胞的稀释液装于24支试管中，每支试管1.5ml，放入37℃恒水浴中，在8支试管组成的实验组（1）中滴入0.5%的油酸CHML溶液0.4ml，在另8支试管组成的实验组（2）中滴入1%的油酸CHML溶液0.4ml，剩下8支为对照组，滴入生理盐水0.4ml。每隔一定时间例如，10分钟、20分钟、40分钟、60分钟、80分钟、100分钟、120分钟、240分钟各组取一管，离心后进行S180细胞计数及瑞氏涂片染色。

实验结果列于表11

用表1中选取的硬脂酸或维生素D分别作为CHML单一分子脂质成分，通过本发明的分子脂质非均质分合步骤，分别制成0.5%和1%的CHML溶液。同样进行上述的体外抑制S180细胞的试验。其实验结果分别列于表12和表13。

Ⅺ.CHML-Y型剂动物药代动力学实验

选择健康的昆明系小白鼠16只，随机分为四组，每组四只，平均每只体重约20克。从鼠尾静脉注射浓度为25mg/ml99M    CHML-Y型剂0.5ml;对照组注射0.5ml生理盐水。注射后的2小时、24小时和72小时分别从小鼠眼眶取血各0.2ml，再剖取肝、脾、肾、肺、胃及脑组织称重，放入测量试管，用闪烁计算器测定各种组织的放射性强度。

试验结果以每克组织的放射性脉冲百分数占各组织的百分比表示，列于表14。

从表14所示的动物实验结果观察到，CHML-Y型剂在静脉注射后，2小时以内进入肝、脾、肾、肺、胃和脑，其中以肝的吸收量最多，以次为脾、肺和肾。达到胃和脑的量最少。24小时后，从肾脏排出的CHML-Y型代谢产物达32.8%，仍以肝脾滞留量为量高。72小时后，94%的CHML-Y型代谢产物已排出体外，仅在肝、脾和肾内有微量滞留。

Ⅻ.CHML-H型剂对大鼠的抗高血压试验

选择雄性Wister大鼠，每只体重约175克，随机分组，其中12只作为正常组，剩下24只大鼠切除右肾，皮下注射Doca油剂30mg/kg/wk，然后随机分为高血压对照组、抗高血压组（1）和抗高血压组（2），每组8只。正常组和高血压对照组均喂标准块料，而抗高血压实验组（1）和（2）分别在标准块料中加入5mg/天和10mg/天的CHML-H型剂，进入实验前后以尾带式数字显示血压计测血压，每周二次。

试验结果列于表15。

注：＊P＜0.01（显著性t检验）

ⅩⅢ.CHML-H型剂对大鼠高血脂的影响

材料与方法

CHML-H型剂由本发明人提供。

胆固醇测定酶试剂由上海医疗工业研究院生化室出品。

高密度脂蛋白亚组份分离试剂由上海市心血管疾病研究所生化室提供。

Wister雄性大鼠，体重115克左右，饲养观察三天之后，从尾静脉取血测定总胆固醇（TC），高密度脂蛋白胆固醇（HLD-C），低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）。按各脂蛋白胆固醇水平高低进行均匀搭配随机分组，剔除血脂过高或过低的大鼠，使各组脂蛋白胆固醇水平大致相当。

实验按以下方法进行：

正常组：喂以普通饲料;

高脂对照组：喂以含1%胆固醇、5%猪油、0.2%3＃胆盐的高脂饲料;

实验组（1）：喂以高脂对照组相同的饲料并加入CHML-H型剂5mg/天;

实验组（2）：喂以高脂对照组相同的饲料并加入CHML-H型剂10mg/天。

分别于给药后10天、20天再次从尾静脉取血测定上述指标。

实验结果列于表16。

注：＊P＜0.01（显蓍性t检验）

CHML-H型剂有降低鼠血总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）和极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-c）的功能，并随着剂量的增大，效果加强。同时，CHML-H型剂有增加鼠高密度脂蛋白胆固醇（HLD-c）的功能，并随着剂量增大，效果加强。提示CHML-H型剂有降鼠血脂、抗动脉硬化的功能，为临床实验提供了有力的动物实验基础。

从以上列举的大量试验可以看到，本发明的“分子导弹”CHML，作为一种有效的载体，不只是一个纯理论上的名称，而且是确确实实的实际形象的表现。例如，CHML分子脂质可以与癌细胞膜构有特异的结合，这是因为癌细胞膜的钠泵功能亢进，微粘度提高，CHML便对准这此靶子击中其要害。根据上述实验的结果和所附的照片可以看到本发明CHML极小的尺寸以及其击中癌细胞使之成为碎片这样的事实（图1和3），更进一步地证实了本发明CHML具有分子导弹的功能和实际效果。

本发明以上所描述的所有内容，包括所用的专用名词、例子和附图，仅是某种程度对本发明特殊性和特征的说明。所有任何具体细节内容仅供描述而不是限制。必须理解的是，本发明可以作出广泛的、不同的形式、尺寸、结构、成分、精度、组合、安排程序上的变更、变化和改进，而不偏离本发明专利申请的权利要求书所请求保护的精神实质和范围。

附图的简要说明：

图1，射电电子显微镜照片（JEM200    CX，100KV），显示了CHML的分子大小。箭头所指显示了CHML-Y型的分子，放大倍数525000;

图2，为CHML-Y型产品的照片，呈    透明状，该产品已贮存二年;

图3，体外抗S180肉瘤细胞实验摄片：

（a）对照管玻璃涂片，S180细胞计数5×10⁶/ml，50分钟，×350;

（b）实验管玻璃涂片，S180细胞计数5×10⁶/ml，加入1mgCHML-Y型溶液，20分钟，×350;

（c）实验管玻璃涂片，S180细胞计数5×10⁶/ml，加入1mgCHML-Y型溶液，40分钟，×350;

（d）实验管玻璃涂片，S180细胞计数5×10⁶/ml，加入1mgCHML-Y型溶液，50分钟，×350，S180细胞全部被CHML-Y型击成碎片。

图4，为本发明设计的CHML-M标准试剂的标准曲线。

Claims (61)

1、一种亲细胞非均质分子脂质(CHML)，其特征在于其成分至少包含一种任意选自以饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸、脂溶性维生素以及***素所组成的这个组的组分。

2、如权利要求1所述的亲细胞非均质分子脂质，其进一步特征在于其中所述的饱和脂肪酸包括：十二烷酸（月桂酸）、十四烷酸（豆蔻酸）、十六烷酸（软脂酸）、十八烷酸（硬脂酸）和二十烷酸（花生酸）。

3、如权利要求1所述的亲细胞非均质分子脂质，其进一步特征在于其中所述的不饱和脂肪酸包括：鳖酸（主要包含△9-十六烯酸）、油酸（主要包含△9-十八烯酸）、亚油酸（主要包含△9，12-十八二烯酸）、亚麻酸（主要包含△9，12，15-十八三烯酸）、

-亚麻酸（主要包含△6，9，12-十八三烯酸）、花生四烯酸（主要包含△5，8，11，14-二十碳四烯酸）、二十碳五烯酸（主要包含EPA）、二十二碳六烯酸（主要包含DHA）、二十烯酸、二十碳二烯酸、二十碳三烯酸、二十二碳二烯酸、二十二烯酸、二十二碳三烯酸、二十二碳四烯酸、二十二碳五烯酸、二十四碳烯酸、二十四碳二烯酸、二十四碳三烯酸、二十四碳四烯酸、二十四碳五烯酸、二十四碳六烯酸和鲨烯（主要包含三十碳六烯酸）。

4、如权利要求1、2或3所述的亲细胞非均质分子脂质，其进一步特征在于其中所述的脂溶性维生素包括：维生素A、维生素D和维生素E。

5、如权利要求1所述的亲细胞非均质分子脂质，其进一步特征在于，其中所述的饱和脂肪酸包括：十二烷酸、十四烷酸、十六烷酸、十八烷酸和二十烷酸，所述的不饱和脂肪酸包括：鳖酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、

-亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸、二十烯酸、二十碳二烯酸、二十碳三烯酸、二十二碳二烯酸、二十二烯酸、二十二碳三烯酸、二十二碳四烯酸、二十二碳五烯酸、二十四烯酸、二十四碳二烯酸、二十四碳三烯酸、二十四碳四烯酸、二十四碳五烯酸、二十四碳六烯酸和鲨烯（主要包含三十碳六烯酸）。

6、如权利要求3或5所述的亲细胞非均质分子脂质，其进一步特征在于其中所述的鲨烯（主要包含三十碳六烯酸）类是由胆固醇经紫外光或激光照射而转化成的。

7、如权利要求1、3或5所述的亲细胞非均质分子脂质，其进一步特征在于，其中所述的不饱和脂肪酸和/或脂溶性维生素组分有部分是经过激光照射活化处理的。

8、如权利要求6所述的亲细胞非均质分子脂质，其进一步特征在于，其中所述的不饱和脂肪酸和/或脂溶性维生素组分有部分是经过激光照射活化处理的。

9、如权利要求7所述的亲细胞非均质分子脂质，其进一步特征在于，其中所述的部分不饱和脂肪酸包括：花生三烯酸、花生四烯酸、花生五烯酸和二十二碳六烯酸等，所述的部分脂溶性维生素包括：维生素A和维生素E。

10、如权利要求8所述的亲细胞非均质分子脂质，其进一步特征在于，其中所述的部分不饱和脂肪酸包括：花生三烯酸、花生四烯酸、花生五烯酸和二十二碳六烯酸等，所述的部分脂溶性维生素包括：维生素A和维生素E。

11、一种亲水型亲细胞非均质分子脂质，其特征在于其组分包含：硬脂酸10-19%，软脂酸12-20%，

-亚麻酸20-34%以及油酸25-38%（皆为重量百分数）。

12、一种亲脂型亲细胞非均质分子脂质，其特征在于其组分包含：维生素A1.5-4%，维生素D1.5-4%，维生素E14-18%，油酸40-60%，十二烷酸（月桂酸）8-16%，十四烷酸（豆蔻酸）5-12%（皆为重量百分数，以下同）。

13、一种具有协同抗癌功能的亲细胞非均质分子脂质，其特征在于其组分包含：鲨烯0.5-2%，

-亚麻酸0.7-2.5%，亚油酸1.0-4%，油酸14-28%，硬脂酸5-10%，软脂酸6.5-12%，花生四烯酸3-7%，花生三烯酸2-4%，花生五烯酸8-11%，二十二碳六烯酸10-15%，二十四碳烯酸2-4%，维生素E3-7%，维生素A0-0.5%，维生素D0-0.5%，二十二碳烯酸4-6%，二十二碳二烯酸0.5-2%，二十二碳三烯酸1-3%，二十二碳四烯酸3-7%，二十二碳五烯酸5-10%。

14、如权利要求13所述具有协同抗癌功能的亲细胞非均质分子脂质，其进一步特征在于，其中所述的花生四烯酸、花生三烯酸、花生五烯酸以及二十四碳烯酸是通过激光照射进行生物分子活化的。

15、如权利要求13或14所述的具有协同抗癌功能的亲细胞非均质分子脂质，其进一步特征在于，其中包含的鲨烯类成分是由胆固醇经紫外光或激光照射而转化成的。

16、一种具有协同防癌功能的亲细胞非均质分子脂质，特征在于其组分包含：维生素A8-14%，维生素D2-6%，维生素E10-22%， -亚麻酸0.5-8%，亚油酸4-14%，油酸4-7%，软脂酸13-19%，硬脂酸7-14%，鲨烯2-10%。

17、如权利要求16所述的具有协同防癌功能的亲细胞非均质分子脂质，其进一步特征在于，其中包含的鲨烯类成分是由胆固醇经紫外光或激光照射而转化成的。

18、一种具有协同诱导和增加B细胞及白细胞的免疫功能的亲细胞非均质分子脂质，特征在于其组分包含：油酸16-30%，亚油酸0.5-2%，

-亚麻酸8-20%，软脂酸10-14%，硬脂酸4-6.5%，维生素D4-10%，维生素A0-4%，维生素E14.5-20%，十四烷酸0.5-4.5%，***素F0-0.2%。

19、如权利要求18所述的具有协同防癌功能的亲细胞非均质分子脂质，其进一步特征在于，其中包含的***素F是由***素E在维生素C存在下经激光照射而转化的醇式结构。

20、一种具有细胞膜构监测功能的亲细胞非均质分子脂质，特征在于其组分包含：油酸15-26%，亚油酸3-12%，亚麻酸14-22%，硬脂酸10-18%，软脂酸16-24%，二十碳烯酸1.4-6%，维生素A0.5-1.5%。

21、如权利要求20所述的具有细胞膜构监测功能的亲细胞非均质分子脂质，进一步特征在于其中包含的二十碳烯酸是经激光照射在

位加氢环化的。

22、一种具有协同抗病毒功能的亲细胞非均质分子脂质，特征在于其组分包含：油酸16-18%，亚油酸1.5-4.5%， -亚麻酸10-28%，软脂酸14-16%，二十四碳四烯酸15-18%，硬脂酸0-10%。

23、如权利要求22所述的具有协同抗病毒功能的亲细胞非均质分子脂质，其进一步特征在于，其中包含的二十四碳四烯酸是经激光照射在

位加氢环化的。

24、一种具有协同抗病毒功能的亲细胞非均质分子脂质，特征在于其组分包含：鲨烯0.5-7.5%，二十碳五烯酸10-20%，二十碳四烯酸5-12%，二十碳三烯酸2-4%， -亚麻酸1-4%，油酸4-10%，亚油酸1.5-3%，硬脂酸10-20%，二十二碳六烯酸15-25%。

25、如权利要求24所述的具有协同抗病毒功能的亲细胞非均质分子脂质，进一步特征在于，其中包含的鲨烯是由胆固醇经激光照射而转化的，二十碳四烯酸和二十碳三烯酸是经激光照射在 位加氢环化的。

26、一种具有协同抗高血压功能的亲细胞非均质分子脂质，特征在于其组分包含：硬脂酸5-10%，亚油酸10-18%，γ-亚麻酸4-10%，油酸10-20%，维生素E5-12%，维生素A0.5-4%，花生五烯酸8-15%，花生四烯酸3-8%，花生三烯酸4-10%，软脂酸6-8%。

27、如权利要求26所述的具有协同抗高血压功能的亲细胞非均质分子脂质，进一步特征在于其组分中的花生四烯酸、花生三烯酸、花生五烯酸是经激光照射活化过的。

28、一种制备亲细胞非均质分子脂质（CHML）的方法，特征在于其步骤包括：

从可得的动植物原材料中提取粗脂质油，

从上述粗脂质中分离所需的各种饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸以及脂溶性维生素等分子脂质成分，

对上述分离的分子脂质成分中的部分组分进行转化和/或活化处理，

对上述经过和未经过转化和/或活化处理的分子脂质进行提纯，

对上述提纯的所需分子脂质进行分子结构和纯度的精确测定，

从上述测定后的所需分子脂质成分中按CHML载体不同功能配方选取CHML各组分进行精密称量，以及

对上述精密称量后的所需组分进行充分混匀从而达到非均质分合，成为透明的产品。

29、如权利要求28所述的制备（CHML）的方法，其进一步特征在于，其中所述的提取粗脂质步骤可采用加温压榨法或浸出法等方法进行。

30、如权利要求28所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的分离各种分子脂质成分的步骤中，可采用皂化法或冷冻离心法或吸附法等使饱和与不饱和脂肪酸分离。

31、如权利要求28或30所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的分离各种分子脂质成分的步骤中，可采用分级冷冻法分离各种饱和脂肪酸。

32、如权利要求28或30所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的分离各种分子脂质成分的步骤中，可采用吸附法或超速离心法，或超滤法，或冷冻结晶法，或层析法，或蒸馏法，或电泳法或离子交换或溴化脱溴法，或尿素包含法，硝酸银络合法，EDTA-Na络合法等方法分离各种不饱和脂肪酸。

33、如权利要求28所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的转化处理是采用紫外光或激光照射使胆固醇转化成鲨烯类。

34、如权利要求28所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的活化处理是采用激光使18碳至30碳的多烯不饱和脂肪酸在 位加氢环化。

35、如权利要求28所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的转化处理是采用激光使***素E酮式结构转化为***素F醇式结构。

36、如权利要求28所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的提纯步骤可采用分子精滤和/或分子重结晶等方法进行。

37、如权利要求28所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的精确测定步骤可采用紫外分光法，或气相色谱法，或质谱法，或核磁共振法，或红外光谱法，或激光色谱法等方法进行。

38、如权利要求28所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的非均质分合步骤是在添加剂存在下进行的。

39、如权利要求38所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的添加剂包括：吐温，司盘、丙三醇、***、乙醇、高级醇硫酸脂盐（R-OSO₃Na），烷基苯磺酸盐（R-C₆H₄-SO₃Na），胆汁酸盐，烷基氨基酸（R-NH-CH₂-COOH），长链季铵盐，月桂醇硫酸钠（Sodium Lauryl Sulfate），硫酸化油，聚氯乙烯脂肪醇醚，聚氯乙烯烷基酚醚、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钠、氯化钙、氯化钠、氯化钾、氯化铁、氯化亚铁、氯化锌、氯化镁、硫酸镁、碘化钾、氯化铵、碳酸氢钠、硫酸锌、磷酸锌、氟烷、氯化氢、溴化钾、溴化碘、溴化钠、碘化钾和醇式、酚式、醚式、醌式分子的基团和氨基酸分子、葡萄糖分子和嘧啶、嘌呤分子的基团以及它们之间的各种混合物。

40、如权利要求38所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的添加剂包括：10-90%（重量）甘油、乙醇和***，加入90-10%（重量）高级醇硫酸脂盐、氢氧化钾、氢氧化钠以及碳氟化物。

41、如权利要求40所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的碳氟化物为：全氟正丁基四氢呋喃（FC-80），过氟萘烷（FDC），以及三氟三丙基胺（FT_PA）等。

42、如权利要求38所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的添加剂是：70-30%（重量）吐温、司盘、甘油和乙醇，加入30-70%（重量）氢氧化钾、氢氧化钠、氢化蓖麻油、聚氯乙烯醚、***和胰脂酶。

43、一种制备亲细胞非均质分子脂质（CHML）的方法，特征在于其步骤包括：

从已提纯的饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸和脂溶性维生素及***素中按CHML的功能配方选取需要的组分，进行分子结构和纯度的精确测定，

根据上述精确测定结构和纯度的组分按功能配方进行精密称量，以及

对上述精密称量后组分进行充分混匀达到非均质分合。

44、如权利要求43所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于其中所述饱和脂肪酸包括：十二烷酸、十四烷酸、十六烷酸、十八烷酸和二十烷酸，所述的不饱和脂肪酸包括：鳖酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、

-亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸、二十烯酸、二十碳二烯酸、二十碳三烯酸、二十二碳二烯酸、二十二烯酸、二十二碳三烯酸、二十二碳四烯酸、二十二碳五烯酸、二十四烯酸、二十四碳二烯酸、二十四碳三烯酸、二十四碳四烯酸、二十四碳五烯酸、二十四碳六烯酸和鲨烯（三十碳六烯酸）。

45、如权利要求43或44所述制备（CHML）的方法，进一步特征在于所述的步骤还包括：

对已提纯的饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸和脂溶性维生素及***素中的部分组分进行转化和/或活化处理。

46、如权利要求45所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于所述的转化和/或活化是用紫外光或激光照射进行的。

47、如权利要求46所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于所述的激光其波长为6328

。

48、如权利要求43所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，所述的非均质分合是在添加剂存在下进行的。

49、如权利要求48所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的添加剂包括：吐温、司盘、丙三醇、乙醇、***、高级醇硫酸脂盐（R-OSO₃Na）、烷基苯磺酸盐（R-C₆H₄-SO₃Na）、胆汁酸盐、烷基氨基酸（R-NH-CH₂-COOH）、长链季铵盐、月桂醇硫酸钠（Sodium Lauryl Sulfate）、硫酸化油、聚氯乙烯脂肪醇醚、聚氯乙烯烷基酚醚、铂、钾、钠、铜、锌、铁、钴、镁、钙等金属离子和氟、氯、溴、碘等非金属离子和醇、酚、醚、醛、酮、醌、氨基酸、葡萄糖分子和嘧啶、嘌呤分子以及它们的各种混合物。

50、如权利要求48所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的添加剂包括：10-90%（重量）甘油、乙醇和***，加入90-10%（重量）高级醇硫酸脂盐、氢氧化钾、氢氧化钠和碳氟化物。

51、如权利要求50所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的碳氟化物为：全氟正丁基四氢呋喃（FC-80），过氟萘烷（FDC）和三氟三丙基胺（FTpA）等。

52、如权利要求48所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的添加剂包括：70-30%（重量）吐温、司盘、甘油和乙醇，加入30-70%（重量）氢氧化钾、氢氧化钠、氢化蓖麻油、聚氯乙烯醚、***和胰脂酶。

53、如权利要求45所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的CHML的功能配方为亲水型，包含：硬脂酸10-19%，软脂酸12-20%， -亚麻酸20-34%以及油酸25-38%。

54、如权利要求45所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的CHML的功能配方为亲脂型，包含：维生素A151.5-4%，维生素D1.5-4%，维生素E14-18%，油酸40-60%，十二烷酸8-16%，十四烷酸5-12%。

55、如权利要求45所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的CHML的功能配方为协同抗癌型，包含：鲨烯0.5-2%，

-亚麻酸0.7-2.5%，亚油酸1.0-4%，油酸14-28%，硬脂酸5-10%，软脂酸6.5-12%，花生四烯酸3-7%，花生三烯酸2-4%，花生五烯酸8-11%，二十二碳六烯酸10-15%，二十四碳烯酸2-4%，维生素E3-7%，维生素A0-0.5%，维生素D0-0.5%，二十二碳烯酸4-6%，二十二碳二烯酸0.5-2%，二十二碳三烯酸1-3%，二十二碳四烯酸3-7%及二十二碳五烯酸5-10%。

56、如权利要求45所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的CHML的功能配方为协同防癌型，包含：维生素A8-14%，维生素D2-6%，维生素E10-22%，

-亚麻酸0.5-8%，亚油酸4-14%，油酸4-7%，软脂酸13-19%，硬脂酸7-14%及鲨烯2-10%。

57、如权利要求45所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的CHML的功能配方为协同诱导和增加B细胞及白细胞免疫功能型，包含：油酸16-30%，亚油酸0.5-2%，

-亚麻酸8-20%，软脂酸10-14%，硬脂酸4-6.5%，维生素D4-10%，维生素A0-4%，维生素E14.5-20%，十四烷酸0.5-4.5及***素F0-0.2%。

58、如权利要求45所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的CHML的功能配方为膜构监测型，包含：油酸15-26%，亚油酸3-12%，亚麻酸14-22%，硬脂酸10-18%，软脂酸16-24%，二十碳烯酸1.4-6%及维生素A0.5-1.5%。

59、如权利要求45所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的CHML的功能配方为协同抗病毒型，包含油酸16-28%，亚油酸1.5-4.5%， -亚麻酸10-28%，软脂酸14-16%，二十四碳四烯酸15-18%及硬脂酸0-10%。

60、如权利要求45所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的CHML的功能配方为协同抗病毒型，包含：鲨烯0.5-7.5%，二十碳五烯酸10-20%，二十碳四烯酸5-12%，二十碳三烯酸2-4%， -亚麻酸1-4%，油酸4-10%，亚油酸1.5-3%，硬脂酸10-20%及二十二碳六烯酸15-25%。

61、如权利要求45所述的制备（CHML）的方法，进一步特征在于，其中所述的CHML的功能配方为协同抗高血压型，包含：硬脂酸5-10%，亚油酸10-18%，

-亚麻酸4-10%，油酸10-20%，维生素E5-12%，维生素A0.5-4%，花生五烯酸8-15%，花生四烯酸3-8%，花生三烯酸4-10%及软脂酸6-8%。

Images