CN104220442A

CN104220442A - 新的烷化剂

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Publication number: CN104220442A
Application number: CN201380016674.4A
Authority: CN
Inventors: I·伯利亚; M·卡鲁索; V·卢皮; P·奥西尼; M·萨尔萨; A·潘泽利
Original assignee: Nerviano Medical Sciences SRL
Current assignee: Nerviano Medical Sciences SRL
Priority date: 2012-04-05
Filing date: 2013-03-28
Publication date: 2014-12-17
Anticipated expiration: 2033-03-28
Also published as: EP2836494B1; EP3587426A1; ES2755719T3; US10071074B2; CN107011358B; JP6314128B2; RU2632206C2; ES2929759T3; US9527863B2; WO2013149948A1; CN107011358A; US20150051154A1; HUE060655T2; JP2018070599A; EP2836494A1; HRP20221356T1; EP3587426B1; CN104220442B; DK2836494T3; RU2014143994A

Abstract

本发明涉及新类型的包含与DNA-结合部分相连的噻吩并-吲哚部分的烷化剂，其具有细胞毒活性，且可用于治疗疾病、诸如癌症、细胞增殖性障碍和病毒感染。本发明还提供了制备这些化合物的方法、包含它们的药物组合物和利用此类化合物或包含它们的药物组合物治疗疾病的方法。本发明还涉及该新类型的烷化剂在制备缀合物中的应用。

Description

新的烷化剂

本发明涉及新类型的包含与DNA-结合部分相连的噻吩并-吲哚部分的烷化剂，它们的制备方法，包含它们的药物组合物及其在治疗某些哺乳动物肿瘤中的应用。

许多化学品现已可用于治疗癌症。尽管在抗癌研究中做出了努力，但癌症仍然是模糊和难以捉摸的靶点，因此仍然需要新的抗癌剂。

烷化剂是已经用于治疗癌症超过60年的细胞毒活性剂，而它们的全部功能仍然在增加。这些活性剂在细胞周期的所有阶段期间直接作用于DNA，引起DNA链断裂，导致异常的碱基配对、胞***的抑制并最终导致细胞死亡。

本发明提供了新类型的烷化剂，其包含与DNA-结合部分连接的噻吩并-吲哚部分。

GB2344818中描述了噻吩并-吲哚衍生物；将以上提及的专利申请的一些具体化合物排除在本发明的通式之外。

因此，本发明的第一个方面是提供式(I)或(II)的化合物及其可药用盐

其中R1和R2一起形成基团(D)或(G):

其中R5是氢、直链或支链的C₁-C₄烷基、直链或支链的C₁-C₄羟烷基或直链或支链的C₁-C₄氨基烷基；

R3和R4各自独立地是氢或是选自任选被取代的直链或支链的C₁-C₄烷基和直链或支链的C₁-C₄羟烷基的基团；

R6是离去基团；

T不存在或是N；

BM是式(V)的DNA结合部分:

其中:

X不存在、是直链或支链的C₁-C₄烷基、直链或支链的C₂-C₄烯基或直链或支链的C₂-C₄炔基；

Y和Y’独立地是任选被取代的芳基或杂芳基；

U是式(VI)或(VII)的部分:

其中R3如上文所定义；

q是0至4的整数；

L1是氢或L，其中L不存在或是在一定条件下可裂解的部分；

W1不存在或是包含一个或多个自我分解(self-immolative)基团的自我分解***；

Z1不存在或是肽、非肽或者杂肽和非肽的连接基；

条件是当以下情形时，排除其中L1是氢的式(I)的化合物或式(II)的化合物：

1)T和X均不存在，q是0且

Y’是式(VIII)、(VIII)’或(VIII)”的杂环基部分:

或

2)T和X均不存在，q是1，U是式(VII)的基团，

Y是式(IX)的杂环基部分

且

Y’是式(VIII)”’的杂环基部分

其中Q是N或O，且R21是氢或是选自–N(C₂H₅)₂和–C(NH)NH₂的基团。

细胞毒药物以各种不同的机制作用于快速增殖细胞，通常通过直接或间接干扰DNA复制。尽管该疗法对不同类型的肿瘤有效，但其可能受到一些限制:干扰细胞增殖事实上还影响经常增殖的正常细胞，诸如骨髓、胃肠道细胞和毛囊。因为对这些组织的剂量限制性的副作用导致免疫抑制、胃肠道毒性和脱发，所以可能达不到会完全消灭肿瘤的药物浓度。

另外，在一些情况中细胞毒药物显示非最佳的理化性质，且可能缺乏适合的药物动力学形式，限制它们在患者中的应用。

细胞毒药物与能携载药物并由此改善肿瘤靶向或能修饰其药物动力学性质的分子的缀合是已采用的解决以上提及的问题的策略之一。已经报道了细胞毒药物与蛋白质、肽或适体、聚合物或纳米微粒的缀合的不同实例，所述蛋白质、肽或适体、聚合物或纳米微粒能有更好的靶点递送，改善溶解度、及在一些情况中改善其他的药物动力学性质、诸如增加的半衰期或药物局部浓度，和改善药物性能。事实上，根据与细胞毒活性剂缀合的具体分子的性质，生成的缀合物在溶解度、进入细胞的渗透性、体内治疗窗、控制释放、到达靶点的能力方面具有改善的特性。

因此，对于开发适合与不同类型的分子缀合的官能团化的细胞毒活性剂有增加的需求。

本发明还提供了官能团化的烷化剂，其除了具有细胞毒活性，还适用于与不同类型的亲核体缀合。

因此，本发明的第二个目的是提供式(III)或(IV)的化合物及其可药用盐:

其中

BM是式(V)’的DNA结合部分:

其中:

X、Y、U、Y’和q如上文所定义；

A是选自-O-、-NH-、-CO-的原子；

A’不存在或是A，其中A如上文所定义；

L不存在或是在一定条件下可裂解的部分；

W不存在或是包含一个或多个自我分解基团的自我分解***；

Z不存在或是肽、非肽或杂肽和非肽的连接基；

RM不存在或是连接于一个或多个A、L、W或Z基团的反应性部分；

RM1不存在或是连接于一个或多个L1、W1或Z1基团的反应性部分；

且R1、R2、R3、R4、R6、T、BM、L1、W1和Z1如上文所定义；

条件是

1)当A’不存在，且RM1不存在时，排除式(IV)的化合物；

2)当以下情形时，排除式(III)或(IV)的化合物：

a)T和X均不存在，q是0且

Y’是式(VIII)^IV的杂环基部分

其中

Q是-O-、-S-、-NR14，其中R14是氢、C₁-C₄烷基或C₁-C₄羟烷基；

Q1是-CH＝或-N＝；

R7和R8独立地是氢、卤素、羟基、C₁-C₄烷氧基、氰基、-NCOOR3、-C(NH)-NH₂或–NR3R4，其中R3和R4如上文所定义；

或

b)T和X均不存在，q是1或2，U是式(VII)的基团，

Y是式(IX)’的杂环基部分:

且Y’是式(VIII)^IV的杂环基部分

其中Q、Q1、R7和R8如上文所定义。

应注意当L1是氢或是在一定条件下可裂解的部分，且O-L1键断裂产生OH官能团时，则式(II)或(IV)的化合物可分别被转化为式(I)或(III)的化合物，其通过文献中报道的适当综述的反应机理进行(参见例如Baiard,R；等,J.Am.Chem.Soc.1963,85,567-578；Zhao,R.Y.等J.Med.Chem.2012,55,766-782.)

此外，应注意式(III)的化合物具有一个官能团化的基团

而式(IV)的化合物可具有一个或两个官能团化的基团。

具体而言，当A’是A，且L1是氢时(如在式(IV)’的化合物中)，

或

A’不存在，且L1不是氢时(如在式(IV)”’的化合物中)，

式(IV)的化合物具有官能团化的基团，因为L、W、Z和/或RM不能直接连接于BM。

当A’是A，且L1是L时(如式(IV)”的化合物中)，

式(IV)的化合物具有两个官能团化的基团。

本发明还提供了合成方法，其通过由标准的合成转化构成的方法制备式(I)、(II)、(III)和(IV)的化合物，以及异构体、互变异构体、水合物、溶剂化物、复合物、代谢产物、前药、载体、N-氧化物。

本发明还提供了治疗癌症的方法，其包括向有需要的哺乳动物施用有效量的如上文定义的式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物。所述有需要的哺乳动物可以是例如人。

本发明还提供了如上文定义的式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物，其用于治疗癌症、细胞增殖性障碍和病毒感染的方法。

优选地，如上文定义的式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物用于治疗特定类型的癌症的方法，所述癌症包括但不限于：癌，诸如膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、肝癌、肺癌，包括小细胞肺癌、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、子***、甲状腺癌、***癌、和皮肤癌，包括鳞状细胞癌；淋巴细胞系血液肿瘤，包括白血病、急性淋巴细胞白血病，急性成淋巴细胞性白血病、B-细胞淋巴瘤、T-细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤；髓系造血肿瘤，包括急性和慢性髓性白血病、骨髓增生异常综合征和前髓细胞性白血病；间质起源的肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；中枢及外周神经***肿瘤，包括星形细胞瘤、成神经细胞瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；其它肿瘤，包括黑素瘤、***瘤、畸胎癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角化棘皮瘤(keratoxanthoma)、甲状腺滤泡癌、卡波西肉瘤和间皮瘤。

此外，如上文定义的式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物用于治疗特定的细胞增殖性障碍的方法，特定的细胞增殖性障碍为例如，良性***增生、家族性腺瘤性息肉病(FAP)、神经纤维瘤病、银屑病、与动脉粥样硬化相关的血管平滑细胞增生、肺纤维化、关节炎、肾小球肾炎以及术后狭窄和再狭窄。

此外，如上文定义的式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物用于抑制肿瘤血管发生和转移的方法，以及用于治疗器官移植排斥和移植物抗宿主病的方法。

本发明还提供了药物组合物，其包含治疗有效量的如上文定义的式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物或其可药用盐和至少一种可药用赋形剂、载体和/或稀释剂。

本发明还提供了药物组合物，其包含式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物和一种或多种化疗剂。

本发明还提供了药物组合物，其包含式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物，与已知的抗癌治疗、诸如放射疗法或化学疗法组合，其与以下药剂组合：细胞生长抑制剂或细胞毒活性剂、抗生素类药、烷化剂、抗代谢剂、激素药剂、免疫剂、干扰素类药、环氧化酶抑制剂(例如COX-2抑制剂)、基质金属蛋白酶抑制剂、端粒酶抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂、抗生长因子受体剂、抗HER2剂、抗EGFR剂、抗血管生成药(例如血管生成抑制剂)、法尼基转移酶抑制剂、ras-raf信号转导途径抑制剂、细胞周期抑制剂、其它cdk抑制剂、微管蛋白结合剂、拓扑异构酶I抑制剂、拓扑异构酶II抑制剂等。

另外，本发明提供了产品，其包含如上文定义的式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物或其可药用盐和一种或多种化疗剂，作为组合的制剂，用于在抗癌治疗法中同时、分开或连续应用。

在本发明的又一个方面提供了如上文定义的式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物或其可药用盐，其用作药物。

此外，本发明提供了如上文定义的式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物或其可药用盐在制备具有抗癌活性的药物中的应用。

最后，本发明提供了如上文定义的式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物或其可药用盐在制备缀合物中的应用。

除非另外规定，如本文使用的以下术语和短语旨在具有以下含义。

术语“直链或支链的C₁-C₄烷基”意指例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基的任何基团。

术语“直链或支链的C₁-C₄羟烷基”意指例如2-羟基乙基、3-羟基丙基、2-羟基丙基、4-羟基丁基、3-羟基丁基、2-羟基丁基的任何基团。

术语“直链或支链的C₁-C₄烷氧基”意指例如甲氧基、乙氧基、丙氧基等的任何基团。

术语“卤素”意指氟、氯溴或碘。

术语“直链或支链的C₁-C₄氨基烷基”意指例如，2-氨基乙基、3-氨基丙基、4-氨基丁基、3-氨基丁基等的任何基团。

如本文使用的术语"C₃-C₈环烃基"是指饱和的或不饱和的非芳族的全-碳单环，其可由一个环或稠合在一起的两个或多个环组成。实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环戊二烯基、环己基、环己烯基、1,3-环己二烯基、十氢萘基和1,4-环己二烯基。

如本文使用的术语"杂环基"是指饱和的或不饱和的非芳族的C₄-C₈碳环，其可由一个环或稠合在一起的两个或多个环组成，其中1至4个碳原子被杂原子、诸如氮、氧、硫替代，其中所述杂原子彼此之间可直接相连；氮和硫可任选地被氧化，且氮可任选地被季铵化。杂环基的非限制性实例为例如，四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、1,4-二氧杂环己基、十氢喹啉基、哌嗪基、噁唑烷基和吗啉基。

如本文使用的术语"芳基"是指1至4个环***的单-、二-或多-碳环烃，其任选地进一步稠合或彼此通过单键连接，其中碳环中的至少一个是芳族的，其中术语“芳族的”是指完全共轭的π-电子键***。此类芳基的非限制性实例是苯基、α-或β-萘基或蒽基。

如本文使用的术语"杂芳基"是指芳族的杂环，通常为4-至7-元杂环，具有1至4个选自氧、氮和硫的杂原子，其中氮和硫可任选地被氧化，且氮可任选地被季铵化；所述杂芳基环可以任选地进一步稠合或连接于以下环：一个或稠合在一起的两个或多个、芳族的和非芳族的碳环和杂环。杂原子可彼此直接连接。杂芳基的实例包括但不限于吡啶基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、***基、吡唑基、吡嗪基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、咪唑基、噻吩基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、嘌呤基、吲唑基、苯并***基、苯并异噁唑基、喹喔啉基、异喹啉基和喹啉基。在一个实施方案中，所述杂芳基包含1至4个杂原子。应注意"C₁杂芳基"是指杂芳族基团的环***中仅存在一个碳(因此不计算任选的取代基中的碳原子)。该杂芳族基团的一个实例是四唑基。

术语“离去基团”是指取代反应中可以被另一个基团取代的基团。此类离去基团在本领域中众所周知，且实例包括但不限于卤素基团(氟化物、氯化物、溴化物和碘化物)、叠氮化物、磺酸酯(例如，任选被取代的C₁-C₆烷烃磺酸酯、诸如甲磺酸酯和三氟甲磺酸酯或任选被取代的C₇-C₁₂烷基苯磺酸酯、诸如对甲苯磺酸酯)、琥珀酰亚胺-N-氧化物、对硝基苯氧化物、五氟苯氧化物、四氟苯氧化物、羧酸酯、氨基羧酸酯(氨基甲酸酯)和烷氧基羧酸酯(碳酸酯)。对于饱和碳上的取代，优选的离去基团是卤素基团和磺酸酯。对于羰基碳上的取代，可以使用例如卤素基团、琥珀酰亚胺-N-氧化物、对硝基苯氧化物、五氟苯氧化物、四氟苯氧化物、羧酸酯或烷氧基羧酸酯(碳酸酯)作为离去基团。术语“离去基团”还指由于消除反应(例如，电子级联反应或螺环化反应)而被消除的基团。在这种情况中，可以使用例如卤素基团、磺酸酯、叠氮化物、氨基羧酸酯(氨基甲酸酯)或烷氧基羧酸酯(碳酸酯)作为离去基团。

术语“活性酯”是指其中酯部分的烷氧基是好的离去基团的官能团。这种烷氧基的实例包括但不限于琥珀酰亚胺-N-氧化物、对硝基苯氧化物、五氟苯氧化物、四氟苯氧化物、1-羟基苯并***和1-羟基-7-氮杂苯并***和具有类似离去能力的基团。基于未被取代的烷基的烷氧基基团例如甲氧基、乙氧基、异丙氧基和叔丁氧基不被认为是好的离去基团，因此甲基、乙基、异丙基和叔丁基的酯不被认为是活性酯。

术语“亲核体”是指携带亲核基团的分子。术语“亲核基团”是指在化学反应中向亲电子基团提供电子对以形成化学键的基团。此类亲核基团的实例包括但不限于卤素、胺、亚硝酸盐/酯、叠氮化物、醇、醇盐阴离子、羧酸阴离子、硫醇、硫醇盐等。

术语“亲电子基团”是指在化学反应中从亲核基团接受电子对以形成化学键的基团。此类亲电子基团的实例包括但不限于酯、醛、酰胺、酮等。

术语“烷化部分"是指一个或多个可裂解的键断裂后仍存在且可能或可能不共价键合于核酸链的结构。

术语“非天然氨基酸”是指天然存在的氨基酸的D-立体异构体。

式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物的可药用盐包括与无机或有机酸的酸加成盐，例如硝酸、盐酸、氢溴酸、硫酸、高氯酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、富马酸、乳酸、草酸、丙二酸、苹果酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、羟乙磺酸和水杨酸。

式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物的可药用盐还包括与无机碱或有机碱的盐，例如碱金属或碱土金属，尤其是钠、钾、钙、铵或镁的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐、无环或环胺类。

如果异构体中心的立体中心或另一种形式存在于本发明的化合物中，则这种异构体的所有形式包括对映异构体和非对映异构体都预以被本文覆盖。包含立体中心的化合物可以作为外消旋混合物、富含对映异构体的混合物使用或可以使用众所周知的技术分离外消旋混合物，且各个对映异构体可以单独使用。在化合物具有不饱和碳-碳双键的情况中，顺式(Z)和反式(E)异构体都属于本发明的范围。

在当化合物可以以互变体形式存在的情况中，每种形式均被认为包括在本发明中，无论是以平衡形式还是以一种主要形式存在。

DNA-结合部分BM

BM部分是将式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物与DNA双链结合或连接的结合部分。所述结合部分可以改善衍生物对DNA的亲和性或者改善烷化剂的烷基化反应性或者靶向DNA的不同序列以调整化合物的靶向专一性。

优选地，在式(I)或(II)的化合物中，BM部分是如上文定义的式(V)的基团，

其中

X不存在或是式(XIV)的C₂-C₄烯基:

其中R3独立地如上文所定义，其为相同或不同的；

U和q如上文所定义；

如存在，Y是选自以下的基团:

且

Y’是选自以下的基团:

其中R3如上文所定义，且R15、R16和R20独立地是氢、卤素、羟基、NO₂、任选被取代的直链或支链的C₁-C₆烷基或C₁-C₆烷氧基、氰基、-COOH、-CONH-R3、-N-C(O)O-R3、-C(NH)-NH₂或–NR3R4，其中R3和R4如上文所定义。

根据本发明且除非另外规定，以上的R3、R15、R16和R20基团可以任选地在它们任何游离位置被一个或多个、例如1至3个独立地选自以下的基团取代:烷氧基、羟基、氨基、直链或支链的C₁-C₄烷基氨基、二烷基氨基、氨基羰基、杂环基和杂环基烷基。进而，每当适合时，以上取代基中的每一个可进一步被一个或多个上述基团取代。

更优选地，在式(I)或(II)的化合物中，BM部分是如上文定义的式(V)的基团，其中X和U如上文所定义，q是0至2的整数；

如存在，Y是选自以下的基团

其中R3如上文所定义；

且

Y’是选自以下的基团:

其中R3如上文所定义，且R15、R16和R20独立地是氢或甲氧基。

优选地，在式(III)或(IV)的化合物中，BM部分是如上文定义的式(V)’的基团，其中

X不存在或是如上文定义的式(XIV)的C₂-C₄烯基；

U和q如上文所定义；

且

如存在，Y和Y’独立地选自:

其中R3、R15、R16和R20如上文所定义。

更优选地，在式(III)或(IV)的化合物中，BM部分是如上文定义的式(V)’的基团，其中X和U如上文所定义，q是0至2的整数；

如存在，Y选自:

其中R3如上文所定义；且

Y’是选自以下的基团:

其中R3如上文所定义，且R15、R16和R20独立地是氢或甲氧基。

在一定条件下可裂解的部分L或L1

如存在，L或L1部分是在一定条件下可裂解的部分，在引入某些条件或在某些条件下其可以通过化学、光化学、物理、生物或酶方法裂解。这些条件之一可例如将本发明的化合物引入导致L和/或L1水解的水性环境中，或者将本发明的化合物引入含识别并裂解L和/或L1的酶的环境中，或者将本发明的化合物引入还原条件下，其导致L和/或L1的还原和/或移去，或者将本发明的化合物引入氧化条件下，其导致L和/或L1的氧化和移去，或者使本发明的化合物与辐射、例如UV光接触，其导致裂解，或者将本发明的化合物与热接触，其导致L和/或L1的裂解。由于在循环中酶普遍存在，在将本发明的化合物施用于动物、例如哺乳动物、例如人之后可直接遇到该条件。或者，当化合物位于特定的器官、组织、细胞、亚细胞靶点或细菌、病毒或微生物靶点时可遇到所述条件，例如通过内在因素(例如，靶点特异性酶或低氧)的存在或应用外界因素(例如，辐射、磁场)。

L或L1的裂解意指式(III)或(IV)的化合物中的A和L之间的键或式(II)或(IV)的化合物中氧和L1之间的键破裂:

应注意在式(IV)的化合物中，可以存在两个在一定条件下可裂解的部分。在该情况中，所述两个部分可能是或可能不是相同的，且对于裂解可能或可能不需要相同的条件。

在一个实施方案中，L和/或L1可以是通过与身体的其他部分相比的靶细胞附近或内部存在的酶或水解条件裂解的部分，或通过仅在靶细胞附近或内部存在的酶或水解条件裂解的部分。必须注意到如果靶点部位特异性仅基于选择性转化和/或所述L在靶点部位的裂解而实现，则引起裂解的条件应当优选地(至少在一定程度上)为靶点部位特异性的。在一个实施方案中，L的裂解在细胞内发生。

在另一个实施方案中，L的裂解在细胞外发生。

在另一个实施方案中，L和/或L1的裂解可以通过普遍存在的胞内酶发生。

在一个优选的实施方案中，L和/或L1可以是能通过普遍存在的酶裂解的部分，例如，循环中存在的酯酶或胞内酶、例如蛋白酶和磷酸酶，或者是通过pH-控制的水解。因此L和/或L1可任选地与连接原子A或氧一起形成可以在体内裂解的甲酸酯、氨基甲酸酯、脲、酯、酰胺、亚胺、二硫化物、醚、缩醛、缩酮或磷酸酯基团。

在一个更优选的实施方案中A是–O-，且L和L1独立地不存在或是选自以下的基团:

–NHCO-R9(Xa)；-NHCONH-R9(Xb)；-NHCOO-R9(Xc)；-NH-R9(Xd)；

其中:

R9和R10各自独立地不存在、是氢、羟基或选自以下的任选被取代的基团：直链或支链的C₁-C₄烷基、直链或支链的C₁-C₄羟烷基、直链或支链的C₁-C₄巯基烷基和直链或支链的C₁-C₄氨基烷基；

n是0至2的整数和

n1是0至4的整数。

根据本发明且除非另外规定，以上的R9和R10基团可任选地被取代可以任选地在它们任何游离位置被一个或多个、例如1至3个独立地选自以下的基团取代:卤素、直链或支链的C₁-C₄烷基、多氟化烷基、直链或支链的C₁-C₄烷氧基、多氟化烷氧基、羟基、氨基、直链或支链的C₁-C₄烷基氨基、二烷基氨基、C₁-C₄烷基羰基、C₃-C₈环烃基、环烷基烷基、杂环基、杂环基烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基和杂芳基烷基。

在另一个更优选的实施方案中，A是–N-，且L和L1独立地不存在或是选自以下的基团:

其中:

R9和n1如上文所定义。

在另一个更优选的实施方案中，A是–CO-，且L和L1独立地不存在或是选自以下的基团:

其中:

R9、R10和n1如上文所定义。

自我分解***W或W1

如存在，W或W1基团是自我分解***，其在式(III)和(IV)的化合物中以稳定的方式从一端将L或A(如果L不存在)连接于Z或RM(如果Z不存在)；在式(II)的化合物中以稳定的方式从一端将L1或氧(如果L1不存在)连接于Z1，或另外在式(IV)的化合物中连接于RM1(如果Z1不存在)。如上文所述地，在引入某些条件后或在某些条件下通过化学、光化学、物理、生物或酶方法活化后L-W、A-W、L1-W1或O-W1键可以变得不稳定，任选地导致释放相应的部分:

应注意在式(IV)的化合物中，可以存在两个自我分解***。在该情况中，所述两个***可能是或可能不是相同的，且对于裂解可能或可能不需要相同的条件。

式(II)、(III)或(IV)的化合物中可引入自我分解***例如以改善溶解度或改善烷基化部分和反应部分之间的空间；此外所述自我分解***可以调节RM或RM1对亲核体的反应性。

自我分解***为本领域技术人员所知，参见例如WO2002/083180和WO2004/043493中描述的那些；或Tranoy-Opalinsi,A.等.Anticancer Agents in Medicinal Chemistry,2008,8,618-637中描述的那些。自我分解***的其他实例包括但不限于任选被取代的4-氨基丁酸酰胺、适当地取代的二环[2.2.1]和二环[2.2.2]环***或2-氨基苯基丙酸酰胺[参见WO 2005/079398,WO 2005/105154和WO 2006/012527；Greenwald,R.B.,等.Adv.Drug Delivery Rev.2003,55,217-250；Kingsbury,W.D.；等.J.Med.Chem.1984,27,1447-1451]。

在一个优选的实施方案中，W或W1可以与连接原子L、L1、A、Z、Z1、RM、RM1或氧一起形成能任选地通过活化裂解的碳酸酯、氨基甲酸酯、脲、酯、酰胺、醚或硫代酰胺连接基团。

在优选的实施方案中，W和W1独立地不存在或是自我分解***，其包含一个或多个独立地选自以下的自我分解基团:

其中

R9和R10之一不存在，且另一个如上文所定义；

R11和R12各自独立地是氢、卤素、甲基、乙基或直链或支链的C₁-C₄羟基甲基；

m是0至3的整数；且

A₁是CH₂、CH₂N-R12或N-R12，其中R12如上文所定义。

在另一个更优选的实施方案中，W和W1独立地不存在或是选自以下的基团:

其中R9和R10之一不存在，且另一个如上文所定义；且R11如上文所定义。

Z或Z1连接基

如存在，Z或Z1连接基可以是肽的(Z_a),非肽的(Z_b)或杂化的，其中所述杂化连接基是肽和非肽(Z_c)的；在式(II)、(III)或(IV)的化合物中，所述Z或Z1连接基可以如上文所述在引入某些条件后或在某些条件下通过化学、光化学、物理、生物或酶方法分别从W或W1裂解:

Z或Z1连接基可以是直链或支链的。

Z或Z1及其左侧部分之间的键或Z或Z1与任选的RM或RM1之间的键可以是酰胺、碳酸酯、二硫化物或氨基甲酸酯键。

在一个实施方案中，Z和Z1均不存在；在另一个实施方案中，Z或Z1之一不存在。

在另一个实施方案中，Z、Z1是可以通过蛋白酶、纤溶酶、组织蛋白酶、β-葡糖醛酸糖苷酶、半乳糖苷酶、***特异性抗原(PSA)、尿激酶型纤维蛋白酶原激活剂(u-PA)或基质金属蛋白酶家族的成员裂解的肽连接基Z_a。

在另一个实施方案中，Z、Z1是可包含一个或多个非肽水溶性部分的非-肽连接基Z_b。在该情况中，所述连接基为式(II)、(III)或(IV)的化合物增加了水溶性。

在另一个实施方案中，Z_b是可包含一个或多个减少式(II)、(III)或(IV)的化合物的聚集的非肽部分的非-肽连接基，所述非肽部分可能是或可能不是还增加式(II)、(III)或(IV)的化合物的水溶性的部分。

例如，非肽水溶性Z_b连接基可包含寡聚乙二醇或聚乙二醇部分或其衍生物。

在另一个实施方案中，Z、Z1是可以包含通式Z_a-Z_b的肽残基和非肽残基二者的杂连接基Z_c，

其中Z_a和Z_b独立地是肽连接基或非-肽连接基。杂连接基可增加式(II)、(III)或(IV)的化合物的溶解度和/或是能被蛋白酶、例如基质金属蛋白酶家族的成员裂解的底物。

在一个优选的实施方案中，Z_a是单一氨基酸、二肽、三肽、四肽或寡肽部分，其包含天然L-氨基酸、非天然D-氨基酸、合成氨基酸、或其任何组合，其中C-末端或N-末端氨基酸残基之一连接于W、L或A，或者连接于W1、L1或氧，且另一个末端氨基酸以COOH或NH2基团结尾或者任选地连接于RM或RM1。

在一个更优选的实施方案中，Z_a是二肽或三肽，通过其C-末端连接于W或W1，或者当W不存在时连接于L，或者当W1不存在时连接于L1，或者当W和L均不存在时连接于A，或者当W1和L1均不存在时连接于0。

在另一个更优选的实施方案中，二肽或三肽的C-末端氨基酸残基选自甘氨酸、丙氨酸、精氨酸和瓜氨酸；且N-末端氨基酸残基选自任何天然或非天然氨基酸；优选地，在三肽的情况中，中间氨基酸残基选自丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸、苯基丙氨酸和脯氨酸。

在另一个更优选的实施方案中，Z_a包含五肽，其中C-末端氨基酸选自任何天然或非天然氨基酸，且N-末端氨基酸残基为6-氨基己酸。

在一个优选的实施方案中，Z_b可包含寡聚乙二醇或聚乙二醇部分或其衍生物。

在一个更优选的实施方案中，Z_b是选自以下的基团:

其中

R9和R10之一不存在，且另一个如上文所定义；且

p是1至20的整数；

在一个优选的实施方案中，Z_c是杂化部分，其包含

肽部分Z_a，其中Z_a是单一氨基酸、三肽或四肽，其包含天然L氨基酸和非天然D氨基酸；和

非肽部分Z_b，其包含寡聚乙二醇或聚乙二醇部分或其衍生物。

反应性部分RM或RM1

如存在，RM或RM1部分是可以在相对温和条件下、且不需要反应性部分的预先官能团化的情况下与亲核体(即携带亲核基团的分子)反应的亲电子基团，所述反应性部分和所述亲核体之间的反应将仅需要施加一些热、压力、催化剂、酸和/或碱。

因此，当RM或RM1部分之一存在时，式(III)或(IV)的化合物与不同类型的亲核体缀合。

当RM和RM1部分均不存在时，式(III)或(IV)的化合物通过一个或多个A、L、L1、W、W1、Z和Z1部分上存在的亲核基团与不同类型的亲电体(即携带亲电子基团的分子)缀合。

在式(III)的化合物中，RM部分可以连接于A、L、W或Z基团中的一个或多个；在式(IV)的化合物中，RM可以连接于A、L、W或Z基团中的一个或多个和/或连接于L1、W1、Z1基团中的一个或多个或者连接于氧原子:

反应性部分的实例包括但不限于氨基甲酰基卤、酰卤、活性酯、酸酐、α-卤代乙酰基、α-卤代乙酰胺、马来酰亚胺、异氰酸酯、异硫氰酸酯、二硫化物、硫醇、肼、酰肼、磺酰氯、醛、甲基酮、乙烯基砜、卤代甲基和磺酸甲酯。

在本发明的一个优选的实施方案中，当亲核体的亲核基团是NH、NH₂或OH时，RM和RM1独立地不存在或是选自以下的基团

其中R13是C₁-C₃烷基或含NO₂和CN基团的吸电子基团；

r是0至7的整数；且

R11和R12如上文所定义。

在本发明的另一个优选的实施方案中，当亲核体的亲核基团是COOH时，RM和RM1独立地不存在或是选自以下的基团

在本发明的另一个优选的实施方案中，当亲核体的亲核基团是SH时，RM和RM1独立地不存在或是选自以下的基团

其中R13如上文所定义。

在一个最优选的实施方案中，RM和RM1中至少一个并非不存在。

优选地，本发明提供了如上文定义的式(I)或(II)的化合物，其特征在于

R1和R2一起形成基团(D)，其中R5是直链或支链的C₁-C₄烷基。

更优选地，本发明提供了如上文定义的式(II)的化合物，其特征在于R6是卤素基团且

L1是氢或式(Xj)的在一定条件下可裂解的部分

其中R9是氢、羟基或选自以下的任选被取代的基团：直链或支链的C₁-C₄烷基、直链或支链的C₁-C₄羟烷基、直链或支链的C₁-C₄巯基烷基和直链或支链的C₁-C₄氨基烷基。

优选地，本发明提供了如上文定义的式(III)或(IV)的化合物，其特征在于

R1和R2一起形成基团(D)，其中R5是直链或支链的C₁-C₄烷基。

更优选地，本发明提供了如上文定义的式(IV)的化合物，其特征在于R6是卤素基团；且

A’不存在，且L1是L，其中L如上文所定义。

更优选地，本发明提供了如上文定义的式(III)或(IV)的化合物，其特征在于L和L1独立地不存在或是选自以下的在一定条件下可裂解的部分

NHCO-R9(Xa)；-NHCONH-R9(Xb)；-NHCOO-R9(Xc)；-NH-R9(Xd)；

其中:

n是0至2的整数且

n1是0至4的整数。

更优选地，本发明提供了如上文定义的式(III)或(IV)的化合物，其特征在于W和W1独立地是包含独立地选自以下的一个或多个自我分解基团的自我分解***:

其中

R9和R10之一不存在，且另一个如上文所定义；

m是0至3的整数；且

A₁是CH₂、CH₂N-R12或N-R12，其中R12如上文所定义。

更优选地，本发明提供了如上文定义的式(III)或(IV)的化合物，其特征在于Z和Z1独立地是肽连接基、优选二肽或三肽连接基，或者是非肽连接基，其包含选自以下的寡聚乙二醇或聚乙二醇部分或其衍生物:

其中

R9和R10之一不存在，且另一个如上文所定义；且

p是1至20的整数。

更优选地，本发明提供了如上文定义的式(III)或(IV)的化合物，其特征在于RM和RM1独立地是选自以下的反应性部分：

其中R13是C₁-C₃烷基或含NO₂和CN基团的吸电子基团；

r是0至7的整数；且

R11和R12如上文所定义。

具体且非限制性地，任选地为可药用盐形式，优选的本发明的化合物为以下化合物:

1)N-(6-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-3-基)-1H-吲哚-6-甲酰胺,

2)N-(5-{[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-1-甲基-4-{[(1-甲基-4-硝基-1H-吡咯-2-基)羰基]氨基}-1H-吡咯-2-甲酰胺,

3)(2E)-1-[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮,

4)(2E)-1-[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮,

5)N-(6-{[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-3-基)-1H-吲哚-6-甲酰胺,

6)1-甲基-N-(1-甲基-5-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吡咯-3-基)-4-{[(1-甲基-4-硝基-1H-吡咯-2-基)羰基]氨基}-1H-吡咯-2-甲酰胺,

7)(3bS,4aR)-3-甲基-6-[(2E)-3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯酰基]-4,4a,5,6-四氢-8H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-8-酮,

8)(3bR,4aS)-3-甲基-6-[(2E)-3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯酰基]-4,4a,5,6-四氢-8H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-8-酮,

9)(3bS,4aR)-N-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-甲酰胺,

10)(8R)-N-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-甲酰胺,

11)(8S)-N-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-甲酰胺,

12)(3bR,4aS)-N-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-甲酰胺,

13)N-(3-{(1E)-3-[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

14)N-(3-{(1E)-3-[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

15)N-(3-{(1E)-3-[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

16)N-(3-{(1E)-3-[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

17)N-(2-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-甲酰胺,

18){2-[(2-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)氨基甲酰基]-1H-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯,

19)5-氨基-N-(2-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-5a,7,8,8a-四氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

20){2-[(2-{[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)氨基甲酰基]-1H-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯,

21)5-氨基-N-(2-{[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

22)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8S)-6-({5-[({5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

23)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8S)-6-[(5-{[(5-氨基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯盐酸盐,

24)哌嗪-1-甲酸(8S)-8-(氯甲基)-6-({5-[(1H-吲哚-2-基羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

25){2-[(2-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)氨基甲酰基]-1H-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯,

26)5-氨基-N-(2-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

27)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8R)-6-({5-[({5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

28)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8R)-6-[(5-{[(5-氨基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯盐酸盐,

29)N-(2-{[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-5-硝基-1H-吲哚-2-甲酰胺,

30)N-(2-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-5-硝基-1H-吲哚-2-甲酰胺,

31)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(5-{[(5-硝基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

32)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8R)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(5-{[(5-硝基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

33)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8S)-8-(氯甲基)-6-[(5-{[(5-羟基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

34)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8R)-8-(氯甲基)-6-[(5-{[(5-羟基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

35)N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N～5～-氨基甲酰基-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺(ornithinamide),

36)N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N～5～-氨基甲酰基-N-[4-({[{3-[({[(8R)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

37)[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}甲酮,

38)[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}甲酮，

39)N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

40)N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{3-[({[(8R)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

41)N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[(3-{[({(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(2E)-3-{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}丙-2-烯酰基]-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基}氧基)羰基](甲基)氨基}-2,2-二甲基丙基)(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

42)N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[(3-{[({(8R)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(2E)-3-{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}丙-2-烯酰基]-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基}氧基)羰基](甲基)氨基}-2,2-二甲基丙基)(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

43)(2E)-1-[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1H-吲哚-3-基)丙-2-烯-1-酮,

44)N-(2-{[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1-甲基-1H-吲哚-5-基)-1-甲基-1H-吲哚-2-甲酰胺,

45)1-甲基-N-(1-甲基-2-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

46)N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-苯基丙氨酰-L-亮氨酰-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺,

47)N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-苯基丙氨酰-L-亮氨酰-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺,

48)N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-苯基丙氨酰-L-亮氨酰-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺,

49)N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-苯基丙氨酰-L-亮氨酰-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺,

50)L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

51)L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

52)N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

53)N-[19-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)-17-氧代-4,7,10,13-四氧杂-16-氮杂十九烷-1-酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰,胺和

54)N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺。

就所涉及的任何具体的任选地为可药用盐形式的本发明的式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物而言，参见实验部分和权利要求。

本发明还提供了如上述所定义的式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物的制备方法，通过使用下述反应途径和合成方案进行、使用本领域可得到的技术和易于得到的原料进行。本发明一些实施方案的制备描述在下文的实施例中，但本领域技术人员认为所述的制备适合于制备本发明的其他实施方案。例如，本发明非典型的化合物的合成可以通过本领域技术人员显而易见的改进进行，例如通过适当的防止干扰的基团，通过改变成本领域公知的其他适合的反应物，或通过进行反应条件的常规改变。或者，本文涉及或本领域公知的其他反应被视为适合于制备本发明的其他化合物。

本领域普通技术人员会理解根据所述方法进行的任何转化都可能需要标准的改进，例如保护干扰基团、改变成本领域公知的其他适合的试剂或对反应条件进行常规改变。

本发明提供了制备如上文所定义的式(I)或(III)的化合物的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤:

a)转化式(II)或(IV)的化合物

其中

L₁是氢，W1、Z1和RM1不存在，且

R1、R2、R3、R4、R6、T、BM、A’、L、W、Z和RM如上文所定义，

分别得到如上文定义的式(I)或(III)的化合物及其可药用盐。

因此，下文流程1中描述了式(I)或(III)的化合物的制备:

流程1

根据步骤a)，所述反应通过本领域中报道的众所周知的方法进行(参见例如Boger,D.L.；J.Am.Chem.Soc.1996,118,2301-2302)。一个不意欲限制所述方法的实例是使用碱性条件、例如使用TEA、NaHCO₃或DBU。所述反应在DCM或DMF或它们的混合物中、在20℃至回流的温度进行30分钟至约24小时。

本发明还提供了制备如上文定义的式(II)的化合物(即式(II)’的化合物(其中L1是氢)和式(II)”的化合物(其中L1不是氢))的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤:

b)将式(XVI)的化合物

其中R17是卤素、OH或羧基的活化部分、例如活化的酯，T如上文所定义，且BM是如上文定义的式(V)的结合部分,

与式(XVII)的化合物反应

其中R18是氢或保护基团，且R1、R2、R3、R4和R6如上文所定义；

任选地

c)除去保护(如存在)，并将生成的式(II)’的化合物

其中R1、R2、R3、R4、R6、T和BM如上文所定义，与式(XVIII)的化合物反应

R19-L1-W1-Z1 (XVIII)

其中R19不存在、是氢、NH基团的的活化部分、优选甲苯磺酰基或R17，其中R17如上文所定义，且

L1、W1和Z1如上文所定义，且它们中至少一个并非不存在，得到式(II)”的化合物

其中L1如上文所定义但氢除外，L1,W1和Z1中至少一个并非不存在，

且R1、R2、R3、R4、R6、T和BM如上文所定义,

及其可药用盐。

因此，下文流程2中描述了式(II)的化合物的制备:

流程2

本发明还提供了制备如上文定义的式(IV)的化合物(即式(IV)’的化合物(其中A’是A，且L1是氢)和式(IV)”的化合物(其中A’是A，且L1不是氢))的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤:

d)将式(XIX)的化合物

其中A’是A，其中A如上文所定义,

T如上文所定义，且

BM如上文定义的是式(V)’的结合部分,

与式(XX)的化合物反应

其中R19如上文所定义，且

L、W、Z和RM如上文所定义，且它们中的至少一个并非不存在；

e)将生成的式(XXI)的化合物

其中A’是A，其中A如上文所定义，且

T、BM、L、W、Z和RM如上文所定义，

与如上文定义的式(XVII)的化合物反应；

任选地

f)将生成的式(IV)′的化合物

其中A’是A，其中A如上文所定义，

L、W、Z和RM如上文所定义，且它们中的至少一个并非不存在，

且R1、R2、R3、R4、R6、T和BM如上文所定义，

与式(XX)′的化合物反应

其中R19如上文所定义，L1如上文所定义但氢除外，且W1、Z1和RM1如上文所定义，且它们中的至少一个并非不存在，得到式(IV)″的化合物

其中L1如上文所定义但氢除外，

W1、Z1和RM1如上文所定义，且它们中的至少一个并非不存在

A’是A，其中A如上文所定义,

L、W、Z和RM如上文所定义，且

R1、R2、R3、R4、R6、T和BM如上文所定义，

及其可药用盐。

本发明还提供了制备如上文定义的式(IV)的化合物、即如上文定义的式(IV)’的化合物和式(IVa)”的化合物的方法，其中A’是A，其中A是选自OH、NH₂和COOH的饱和的基团，且L1不是氢，其特征在于所述方法包括以下步骤:

d’)将式(XIX)的化合物与如上文定义的式(XVII)的化合物反应；

e’)将生成的式(XV)的化合物

其中A’是A，其中A是选自OH、NH₂和COOH的饱和的基团

且

R1、R2、R3、R4、R6、T和BM如上文所定义，

与如上文定义的式(XX)的化合物反应；

任选地

f’)将生成的式(IV)′的化合物

其中A’是A，其中A如上文所定义，且

R1、R2、R3、R4、R6、T、BM、L、W、Z和RM如上文所定义，

与上文定义的式(XX)’的化合物反应，得到如上文定义的式(IV)″的化合物及可药用盐。

或

e″)将如上文定义的式(XV)的化合物与如上文定义的式(XX)′的化合物反应；

任选地

f”)将生成的式(IVa)”的化合物

其中L1如上文所定义但氢除外，L1、W1、Z1和RM1如上文所定义，且它们中的至少一个并非不存在，

A’是A，其中A是选自OH、NH₂和COOH的饱和的基团，且R1、R2、R3、R4、R6、T和BM如上文所定义，

与如上文定义的式(XX)的化合物反应，得到如上文定义的式(IV)″的化合物和可药用盐。

因此，以下流程3描述了式(IV)的化合物、即如上文定义的式(IV)’、(IV)”或(IVa)”的化合物的制备:

流程3

根据步骤c)、d)、f)、e′)、f′)、e″)和f″)，偶联反应在有机溶剂中、优选DMF、在缩合剂、例如DCC、EDC的存在下进行(一般的偶联试剂参见例如Amino Acids,Peptides and Proteins in OrganicChemistry:Building Blocks,Catalysis and Coupling Chemistry,第3卷；Andrew B.Hughes,Ayman El-Faham,Fernando Albericio)。还参见下文实验部分中报道的具体的化学条件。

根据b)、e)、d’)，偶联反应优选在20℃至回流的温度范围、任选地在碱的存在下进行30分钟至约24小时。

式(XVII)和(XIX)的化合物是已知的，或者可以通过本领域中技术人员已知的方法或如上文引用的GB2344818或J.Med.Chem.2003,(46)第634-637页中报道的方法制备。

式(XVI)、(XVIII)、(XX)和(XX)’的化合物是已知的，或者可以通过本领域中技术人员已知的方法或如Anticancer Agents in MedChem 2008,(8)第618-637页中或WO2010/009124中报道的方法制备。

本发明还提供了制备如上文定义的式(IV)的化合物、即式(IV)”’的化合物的方法，其中A’不存在，且L1不是氢，其特征在于所述方法包括以下步骤:

e”’)将式(II)’的化合物

其中A’不存在,

R₁、R₂、R₃、R₄、R₆和T如上文所定义且

BM是如上文定义的式(V)的结合部分，

与式(XX)’的化合物反应

其中L1如上文所定义、但不是氢，且

R19、W1、Z1和RM1如上文所定义，得到式(IV)”’的化合物

其中A’不存在，

L1如上文所定义但氢除外，

R1、R2、R3、R4、R6、T和BM如上文所定义，且

W1、Z1和RM1如上文所定义，且它们中的至少一个并非不存在，

及其可药用盐。

因此，以下流程4中描述了式(IV)的化合物的制备，其中A’不存在:

流程4

根据步骤e”’)，偶联反应如上文e”)所述进行。

从上述所有描述中，本领域技术人员显而易见，当根据任一种上述方法的变化形式制备式(I)、(II)、(III)和(IV)的化合物时，可能产生不需要的副反应的原料或其中间体内的任选的官能团需要根据常规技术适当地保护。同样，将后者转化成游离的脱保护化合物可以根据已知方法进行。

正如易于理解的，如果根据上述方法制备的式(I)、(II)、(III)和(IV)的化合物作为异构体混合物得到，则使用常规技术将其分离成式(I)、(II)、(III)和(IV)的单一异构体属于本发明的范围。

优选将式(II)的化合物，其中L1如上文所定义但氢除外或

将式(IV)的化合物，其中RM和/或RM1均非不存在，且

R1、R2、R3、R4、R6、T、BM、A’、L、W、Z、L1、W1和Z1如上文所定义，

g)与式(XXII)的化合物反应

R17-RM (XXII)

其中R17如上文所定义，且RM如上文所定义、但并非不存在，得到相应的式(IV)的化合物，其中RM如上文所定义、但并非不存在，

然后任选地

h)与式(XXII)′的化合物反应

R17-RM1 (XXII)′

其中R17如上文所定义，且RM1如上文所定义、但并非不存在，得到相应的式(IV)的化合物，其中RM1如上文所定义、但并非不存在。

必须强调g)和h)中描述的步骤可任选地以相反的顺序发生，即首先进行步骤h)，然后进行步骤g)。

根据步骤g)和h)，偶联反应如上文b)中所述进行。

式(XXII)和(XXII)′的化合物为商购可得的，或者是已知的化合物，或者可以通过本领域技术人员已知的方法或如Anticancer Agents inMed Chem 2008,(8)第618-637页中或WO2010/009124中报道的方法制备。

优选将式(XIX)的化合物，其中A’是-OH，且T和BM如上文所定义，

i)与式(XX)的化合物反应

其中R19不存在，

L是式(Xf’)或(Xg’)的基团

其中R9是氢、羟基或选自以下的任选被取代的基团：直链或支链的C₁-C₄烷基、直链或支链的C₁-C₄羟烷基、直链或支链的C₁-C₄巯基烷基和直链或支链的C₁-C₄氨基烷基且

W、Z和RM不存在

或

R9不存在且

W、Z或RM中的至少一个并非不存在，得到式(XI)的化合物

其中A’是–O-，L是式(Xf)或(Xg)的基团，T、W、Z和RM如上文所定义，且BM是式(V)’的基团；

或

j)与式(XX)的化合物反应

其中R19不存在,

L是式(Xh’)或(Xi’)的基团

W、Z和RM不存在

或

R9不存在，且

W、Z或RM中的至少一个并非不存在，得到式(XXI)的化合物

其中A’是–O-，L是式(Xh)或(Xi)的基团，且T、BM、L、W、Z和RM如上文所定义；

或

k)与式(XX)的化合物反应

其中R19是活化的NH基团、优选甲苯磺酰基，

L是式–NHCOR₉(Xa)、-NHCONH-R₉(Xb)、-NHCOO-R₉(Xc),或-NH-R₉(Xd)的基团；

其中R9是氢、羟基或选自以下的任选被取代的基团：直链或支链的C₁-C₄烷基、直链或支链的C₁-C₄羟烷基、直链或支链的C₁-C₄巯基烷基和直链或支链的C₁-C₄氨基烷基，且

W、Z和RM不存在

或

R9不存在，且

W、Z或RM中的至少一个并非不存在，得到式(XXI)的化合物

其中A’是–O-，L是式(Xa)至(Xd)的基团，且T、BM、W、Z和RM如上文所定义；

或

l)与式(XX)的化合物反应

其中R19是R17，其中R17是-OH，

L是式(Xe)的基团

其中

R9和R10各自独立地是氢、羟基或选自以下的任选被取代的基团：直链或支链的C₁-C₄烷基、直链或支链的C₁-C₄羟烷基、直链或支链的C₁-C₄巯基烷基和直链或支链的C₁-C₄氨基烷基且

W、Z和RM不存在

或

R9或R10之一不存在，且

W、Z或RM中的至少一个并非不存在，得到式(XXI)的化合物

其中A’是–O-，L是式(Xe)的基团，且T、BM、W、Z和RM如上文所定义。

根据步骤i)和j)，反应在有机溶剂、优选DCM或DMF中、在PTSA的存在下、在20℃至回流的温度范围进行30分钟至约24小时。使用文献中报道的已知的方法进行保护基团的移除(参见例如Protective Groups in Organic Synthesis；Theodora W.Greeen,PeterG.M.Wuts)。

根据步骤k)，反应在有机溶剂、优选在醚、二噁烷或它们与LiHMDS的混合物中、在-10℃至50℃的温度范围进行30分钟至约24小时。使用文献中报道的已知的方法进行保护基团的移除(参见例如Protective Groups in Organic Synthesis；Theodora W.Greeen,Peter G.M.Wuts)。

根据步骤l)，反应在有机溶剂、优选DCM,THF,CH₃CN或CCl₄中、任选地在碱、优选DIPEA的存在下、在-10℃至50℃的温度范围进行30分钟至约24小时。

优选将式(XIX)的化合物，其中A’是-OH或-NH₂，且T和BM如上文所定义

m)与式(XX)的化合物反应

其中R19是R17，其中R17是羧基的活化的部分、优选吡咯烷-2,5-二酮-1-基,

L是式(Xj)或(Xk)的基团

W、Z和RM不存在

或

R9不存在，且

W、Z或RM中的至少一个并非不存在，得到式(XXI)的化合物

其中A’是–O-或-NH，L是式(Xj)或(Xk)的基团，且T、BM、W、Z和RM如上文所定义。

根据步骤m)，偶联反应在有机溶剂、优选DCM中、在碱性条件、例如TEA、DMAP中进行。该反应在0℃至回流的温度范围进行30分钟至约24小时。

优选将式(XIX)的化合物，其中A’是-COOH，且T和BM如上文所定义，

n)与式(XX)的化合物反应

其中R19是氢，

L是式(Xm)或(Xn)的基团

其中

W、Z和RM不存在

或

R9或R10之一不存在，且

W、Z或RM中的至少一个并非不存在，得到式(XXI)的化合物

其中A’是–CO-，L是式(Xm)或(Xn)的基团，且T、BM、W、Z和RM如上文所定义；

或

o)与式(XX)的化合物反应

其中L不存在,

W式(XIa)至(XIe)、(XIh)至(XIj)是的基团

其中R9是氢，

R10是氢、羟基或选自以下的任选被取代的基团：直链或支链的C₁-C₄烷基、直链或支链的C₁-C₄羟烷基、直链或支链的C₁-C₄巯基烷基和直链或支链的C₁-C₄氨基烷基且

W、Z和RM不存在

或

R10不存在，且

W、Z或RM中的至少一个并非不存在，

R11和R12如上文所定义,

A₁是-CH₂-、-CH₂N(R12)-或-NR12-，其中R12如上文所定义,得到式(XXI)的化合物

其中A’是–CO-，L不存在，W是式(XIa)至(XIe)、(XIh)和(XIj)的基团，T、BM、W、Z和RM如上文所定义。

根据步骤n)，反应在有机溶剂、优选DCM中、在碱性条件、例如TEA中、并任选地在缩合剂、例如DCC、EDC的存在下、在0℃至回流的温度范围进行30分钟至约24小时。

根据步骤o)，偶联反应使用文献中众所周知的条件进行(参见例如Scott,C.J.等J.Med.Chem.2005,48,1344-1358；Amino Acids,Peptides and Proteins in Organic Chemistry:Building Blocks,Catalysis and Coupling Chemistry,第3卷；Andrew B.Hughes,Ayman El-Faham,Fernando Albericio)。

优选将式(XIX)的化合物，其中A’是-OH或-NH₂，且T和BM如上文定义，

p)与式(XX)的化合物反应

其中R19不存在,

L不存在，

W是式(XIa)至(XIj)的基团

其中R10是-OH,

R9是氢、羟基或选自以下的任选被取代的基团：直链或支链的C₁-C₄烷基、直链或支链的C₁-C₄羟烷基、直链或支链的C₁-C₄巯基烷基和直链或支链的C₁-C₄氨基烷基且

W、Z和RM不存在

或

R9不存在，且

W、Z或RM中的至少一个并非不存在，

R11、R12、m和A₁如上文所定义,得到式(XXI)的化合物

其中A’是–O-或–NH-，L不存在，W是式(XIa)至(XIi)的基团，T、BM、W、Z和RM如上文所定义。

根据步骤p)，偶联反应如上文o)中所述进行。

步骤i)至m)和p)还可以用于将式(IV)′的化合物转化为式(IV)″的化合物(通过与式(XX)’的化合物反应(步骤f))，或者用于将式(XV)的化合物转化为式(IV)″'的化合物(通过与式(XX)′的化合物反应(步骤e″))，或者用于将式(II)′的化合物转化为式(II)″的化合物(通过与式(XVIII)的化合物反应(步骤c))，或者将式(XV)的化合物转化为式(IV)’的化合物(通过与式(XX)的化合物反应(步骤e’))，或者用于将式(IV)”’的化合物转化为式(IV)”的化合物(通过与式(XX)的化合物反应(步骤f”))。

药理学

本发明的化合物可用作抗肿瘤剂。

因此可通过包括向其施用药物有效量的式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物的方法治疗哺乳动物、例如人或动物。

以该方法可改进或改善人或动物的病症。

如下文所述进行式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物的细胞毒性的评价。

体外细胞增殖试验

将A2780人卵巢细胞和MCF7人乳腺癌细胞(1250细胞/孔)接种于白色384孔板完全培养基(RPMI1640或EMEM加10％胎牛血清)中，在接种后24h用溶解于0.1％DMSO中的化合物处理。将细胞在37℃和5％CO₂下温育，72小时后，按照生产商的指示CellTiter-Gloassay(Promega)处理板。

CellTiter-Glo是基于对存在的ATP(是代谢活性细胞的指示物)定量的同源方法。使用基于荧光素酶和导致光产生的D-荧光素的***将ATP定量。荧光信号与存在于培养物中的细胞数成比例。

简单而言，将25μL/孔的试剂溶液加入至每孔，振荡5分钟后通过光度计读取微量培养板。荧光信号与存在于培养物中的细胞数成比例。

在上文所述的特异性的体外细胞增殖试验中测试本发明的代表性的式(I)或(II)的化合物。

所有测试的化合物在A2780人卵巢癌细胞中具有<0.5μM(<500nM)的IC₅₀值。

具体而言，化合物7、9、23、6、1和5具有<50nM的IC₅₀值；化合物22、17和20具有<0.1nM的IC₅₀值；化合物18、8和37具有<0.01nM的IC₅₀值。

如本领域技术人员可以理解的，所有这些代表性的化合物因此在抗肿瘤治疗法中特别有利。

此外，本发明的官能团化的式(III)或(IV)的化合物适用于缀合。

已经通过将式(III)或(IV)的官能团化的衍生物与亲核基团、诸如半胱氨酸氨基酸的SH基团缀合评价了式(III)或(IV)的官能团化的衍生物缀合的能力。

缀合物的制备

将2nmol半胱氨酸(MW 121 Da)与2 nmol官能团化的式(IV)的化合物、即化合物54(MW 1221Da)反应。

将该反应混合物在21℃、在Borate缓冲液(50mM pH8)、2mMDTPA、50mM NaCl的存在下温育1h，得到缀合物A1(m/z＝1343(MH+))，然后在配备Agilent 1946单四极质谱检测器(具有正交式ESI源)的1100 Agilent HPLC装置上使用反相HPLC方法(PLRP-S柱，1000A 8uM 150 X 2.1 mm)进行HPLC ESI-MS分析。

图1显示缀合物A1的质谱图，并在x轴报道了分子量(m/z)，而在y轴报道了表示为每秒计数(cps)的强度。

图2显示缀合物A1的HPLC图，并在x轴报道了时间(min)，而在y轴报道了UV吸光度(mAU)。

药物部分从缀合物的释放

举例来说，即不意欲显示本发明的范围，如下文所报道在组织蛋白酶的存在下进行式(II)的化合物从缀合物的释放。

将缀合物A1用0.2单位的组织蛋白酶B在醋酸钠缓冲液(pH 5.5)和1mM Cys中在40℃温育2小时。

缀合物A1的消失和相应的式(II)的化合物、即化合物37、及其前体A3的释放证实缀合物的Z肽连接基的破裂。

通过HPLC ESI-MS分析观测到了式(II)的化合物从缀合物完全释放。

图3显示在用组织蛋白酶处理缀合物A1达2h后的HPLC图，并在x轴上报道了时间(min)，而在y轴上报道了UV吸光度(mAU)。

图4a显示释放的化合物37的质谱图，并在x轴上报道了分子量(m/z)，而在y轴上报道了表示为每秒计数(cps)的强度。

图4b显示释放的化合物A3、37的前体的质谱图，并在x轴上报道了分子量(m/z)，而在y轴上报道了表示为每秒计数(cps)的强度。

本发明化合物可以作为单独活性剂施用，或者，与已知的抗癌治疗例如与下述药剂组合的放射治疗或化学疗法组合：细胞生长抑制剂或细胞毒活性剂、抗生素类药、烷化剂、抗代谢剂、激素药剂、免疫剂、干扰素类药、环氧化酶抑制剂(例如COX-2抑制剂)、基质金属蛋白酶抑制剂、端粒酶抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂、抗生长因子受体剂、抗HER剂、抗EGFR剂、抗血管生成药(例如血管生成抑制剂)、法尼基转移酶抑制剂、ras-raf信号转导途径抑制剂、细胞周期抑制剂、其它cdk抑制剂、微管蛋白结合剂、拓扑异构酶I抑制剂、拓扑异构酶II抑制剂等。

如果制成固定剂量，所述组合产品在下述剂量范围内使用本发明的化合物，并在批准的剂量范围内使用其它药学活性剂。

当组合制剂不合适时，式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物可以与已知抗癌药依次使用。

适合于给哺乳动物(例如人)施用的本发明的式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物可以通过常用途径施用，并根据患者的年龄、体重、情况及施用途径来决定剂量水平。

例如，口服施用式(I)化合物的合适剂量可以为约1至约300mg/剂，每天1至5次。可以以各种剂型施用本发明化合物，例如口服，以片剂、胶囊、糖衣片剂或膜包衣片剂，液体溶液或混悬剂的形式；直肠，以栓剂形式；肠胃外，例如皮下、肌肉内、或通过静脉内和/或鞘内和/或脊柱内注射或灌输。

本发明还包括药物组合物，其包括式(I)化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂(可以为载体或稀释剂)。

含有本发明化合物的药物组合物通常根据常规方法制备并以合适的药学形式施用。例如，固体口服形式可以包含活性化合物与稀释剂(例如乳糖、右旋糖、蔗糖、纤维素、玉米淀粉或马铃薯淀粉)；润滑剂(例如硅石、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁或硬脂酸钙和/或聚乙二醇)；粘合剂(例如淀粉、***胶、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮)；崩解剂(例如淀粉、藻酸、藻酸盐或羟乙酸淀粉钠)；泡腾混合物；染料；甜味剂；润湿剂(例如卵磷脂、聚山梨醇酯、十二烷基硫酸盐)；和通常在药学制剂中使用的无毒和药学惰性物质。这些药学制剂可以用已知的方法制备，例如通过混合、成粒、压片、糖包衣或膜包衣方法。

口服施用的液体分散剂例如可以是糖浆、乳剂和混悬液。例如，糖浆剂包含蔗糖、或蔗糖与甘油和/或甘露糖醇和山梨醇作为载体。

混悬液和乳剂可以包含例如天然胶、琼脂、藻酸钠、果胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素、或聚乙烯醇作为载体实例。肌肉内注射的混悬液或溶液可以包含活性化合物与药学上可接受载体，例如无菌水、橄榄油、油酸乙酯、二醇(例如丙二醇)、和如果需要的话，合适量的盐酸利多卡因。静脉内注射或输注用溶液可以包含无菌水作为载体，或优选可以以无菌等渗水性盐溶液的形式或可以包含丙二醇作为载体。栓剂可以包含活性化合物与药学上可接受的载体，例如可可脂、聚乙二醇、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯表面活性剂或卵磷脂。

为了更好的阐明本发明而不对其进行任何限制，现在给出下述实施例。

实施例

在以下实施例中描述了本发明式(I)的一些化合物的合成制备。如下列实施例制备的本发明化合物还通过¹H-NMR和/或确切的质谱数据ESI(+)进行表征。

在25℃的恒温、在装备有5mm ¹H{¹³C,¹⁵N}z轴PFG IndirectDetection Cold-Probe的或可选择地装备有5mm ¹H{¹³C-¹⁵N}z轴PFGTriple Resonanace Probe的Varian INOVA 500光谱仪(对于¹H在499.8MHz运行，对于¹³C在125.8 MHz运行，且对于¹⁵N在50.6MHz运行)上记录¹H-NMR光谱。

化学位移参照残余溶剂信号。将数据报道如下：化学位移(δ)，峰裂数(s＝单峰、d＝二重峰、t＝三重峰、q＝四重峰、br.s＝宽单峰、td＝双三重峰、dd＝双二重峰、ddd＝双双二重峰、m＝多重峰)、偶合常数(Hz),和质子数。

精确质量数ESI(+)经直接连接于如前所述的Agilent 1100micro-HPLC***的Waters Q-Tof Ultima质谱仪获得(M.Colombo,F.Riccardi-Sirtori,V.Rizzo,Rapid Commun.Mass Spectrom.2004,18,511-517)。

在如下实施例和本申请的上下文中，下列缩写具有如下含义。如果不定义，则术语具有其普遍可接受的含义。

实施例1

步骤b，步骤a

N-(6-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-3-基)-1H-吲哚-6-甲酰胺[(II)](化合物1)

步骤b

将如GB2344818中报道制备的(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-醇(XVII)(14.2mg，0.0563mmol)的溶液溶于干燥的DMF(1.5mL)中，并用EDCI(43mg，4当量)和3-[(1H-吲哚-6-基羰基)氨基]-1H-吲哚-6-甲酸(XVI)(27mg，1.5当量)处理。将该混合物在室温搅拌16h，然后通过加入饱和的NaCl水溶液淬灭。通过以下步骤进行产物分离：用EtOAc萃取(x4)，随后将合并的有机层用2M HCl水溶液(x3)、饱和的Na₂CO₃水溶液(x3)和饱和的NaCl水溶液(x3)洗涤。将有机层干燥(Na₂SO₄)，在真空下浓缩。将粗制的残余物经快速色谱纯化(己烷-丙酮6:4)，得到标题化合物(18.7mg，60％)。

ESI MS:m/z 555(MH+)

类似地，通过使用相应的羧酸，制备了以下化合物:

N-(5-{[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-1-甲基-4-{[(1-甲基-4-硝基-1H-吡咯-2-基)羰基]氨基}-1H-吡咯-2-甲酰胺[(II)](化合物2)

ESI MS:m/z 650(MH+)

(2E)-1-[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮[(II)](化合物3)

ESI MS:m/z 424(MH+)

(2E)-1-[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮[(II)](化合物4)

ESI MS:m/z 424(MH+)

N-(3-{(1E)-3-[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺[(II)](化合物13)

ESI MS:m/z 582(MH+)

N-(3-{(1E)-3-[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺[(II)](化合物14)

ESI MS:m/z 582(MH+)

(2E)-1-[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1H-吲哚-3-基)丙-2-烯-1-酮[(II)](化合物43)

ESI MS:m/z 423(MH+)

¹H NMR(500MHz,丙酮-d6)δppm 2.60(d,J＝1.0Hz,3H)3.58(m,1H)3.88(m,J＝11.2,1.9Hz,1H)4.2(m,1H)4.46(t,J＝9.5Hz,1H)4.63(d,J＝10.6Hz,1H)7.07(d,J＝15.4Hz,1H)7.24(m,2H)7.32(m,1H)7.53(m,1H)7.91(m,1H)8.02(m,2H)8.13(br.s.,1H)9.26(br.s.,1H)10.81(br.s.,1H)

N-(2-{[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1-甲基-1H-吲哚-5-基)-1-甲基-1H-吲哚-2-甲酰胺[(II)](化合物44)

ESI MS:m/z 583(MH+)

步骤a

N-(6-{[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-3-基)-1H-吲哚-6-甲酰胺[(I)](化合物5)

将化合物1(25mg，0.045mmol)溶于DMF(2mL)中，并用NaHCO₃在水中的溶液(1mL，15mg NaHCO₃/mL)处理。将该反应混合物搅拌2h，加入EtOAc，并将得到的有机层用盐水洗涤(x4)，干燥(Na₂SO₄)，并在真空下浓缩。将粗制的残余物经快速色谱纯化(己烷-丙酮6:4)，得到化合物5(19mg，82％)。

ESI MS:m/z 519(MH+)

¹H NMR(500MHz,丙酮-d₆)δppm 1.75(t,J＝4.8Hz,1H)2.27(s,3H)2.32(dd,J＝7.6,4.6Hz,1H)3.40(dt,J＝7.5,4.9Hz,1H)4.13(d,J＝11.3Hz,1H)4.30(dd,J＝11.1,4.7Hz,1H)5.78(s,1H)6.57(br.s.,1H)7.32(dd,J＝8.4,0.7Hz,1H)7.44(s,1H)7.52(t,J＝2.7Hz,1H)7.67(d,J＝8.2Hz,1H)7.79(m,2H)8.00(d,J＝8.2Hz,1H)8.22(d,J＝2.7Hz,2H)9.51(s,1H)10.45(br.s,1H)10.61(br.s,1H)

类似地，通过使用相应的羧酸，制备了以下化合物:

1-甲基-N-(1-甲基-5-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吡咯-3-基)-4-{[(1-甲基-4-硝基-1H-吡咯-2-基)羰基]氨基}-1H-吡咯-2-甲酰胺[(I)](化合物6)

ESI MS:m/z 614(MH+)

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δppm 1.52(t,J＝4.9Hz,1H)2.21(s,3H)2.28(dd,J＝7.6,4.3Hz,1H)3.43(dt,J＝7.8,5.2Hz,1H)3.76(s,3H)3.86(s,3H)3.96(s,3H)4.16(d,J＝10.7Hz,1H)4.29(dd,J＝10.6,4.8Hz,1H)6.30(s,1H)6.77(d,J＝1.7Hz,1H)7.08(d,J＝1.8Hz,1H)7.25(d,J＝1.7Hz,1H)7.48(d,J＝1.7Hz,1H)7.58(t,J＝1.9Hz,2H)8.19(d,J＝1.8Hz,1H)10.00(s,1H)10.30(s,1H)

(3bS,4aR)-3-甲基-6-[(2E)-3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯酰基]-4,4a,5,6-四氢-8H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-8-酮[(I)](化合物7)

ESI MS:m/z 388(MH+)

¹H NMR(500MHz,丙酮-d₆)δppm 1.45(t,J＝4.8Hz,1H)2.19(dd,J＝7.6,4.5Hz,1H)2.26(d,J＝0.7Hz,3H)3.44(dt,J＝7.7,4.8Hz,1H)4.40(dd,J＝10.4,4.8Hz,1H)4.51(d,J＝10.3Hz,1H)6.98(d,J＝15.4Hz,1H)7.08(br.s.,1H)7.24(dd,J＝7.9,4.7Hz,1H)7.44(s,1H)7.98(d,J＝15.4Hz,1H)8.09(s,1H)8.34(dd,J＝4.8,1.5Hz,1H)8.41(dd,J＝7.8,1.3Hz,1H)11.30(s,1H)

(3bR,4aS)-3-甲基-6-[(2E)-3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯酰基]-4,4a,5,6-四氢-8H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-8-酮[(I)](化合物8)

ESI MS:m/z 388(MH+)

¹H NMR(500MHz,丙酮-d₆)δppm 1.45(t,J＝4.9Hz,1H)2.16-2.21(m,1H)2.26(s,3H)3.44(dt,J＝7.7,4.9Hz,1H)4.40(dd,J＝10.4,5.1Hz,1H)4.51(d,J＝10.4Hz,1H)6.98(d,J＝15.4Hz,1H)7.08(br.s.,1H)7.24(dd,J＝7.8,4.5Hz,1H)7.44(s,1H)7.98(d,J＝15.4Hz,1H)8.09(s,1H)8.34(dd,J＝4.7,1.1Hz,1H)8.41(d,J＝7.8Hz,1H)11.29(br.s.,1H)

N-(3-{(1E)-3-[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺[(I)](化合物15)

ESI MS:m/z 546(MH+)

N-(3-{(1E)-3-[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺[(I)](化合物16)

ESI MS:m/z 546(MH+)

¹H NMR(500MHz,丙酮-d6)δppm 1,58(m,1H)2,24(m,1H)2.27(s,3H)3.47(dt,J＝7.6,4.9Hz,1H)4.39(dd,J＝10.2,4.9Hz,1H)4.48(m,1H)6.96(d,J＝15.1Hz,1H)7.01(s,1H)7.12(m,2H)7.28(m,1H)7.40(d,J＝1.8Hz,1H)7.45(s,1H)7.61(d,J＝8.3Hz,1H)7.70(d,J＝8.1Hz,1H)7.98(m,1H)8.09(d,J＝2.8Hz,1H)8.76(d,J＝2.0Hz,1H)8.87(d,J＝2.0Hz,1H)9.76(br.s.,1H)10.97(br.s.,1H)11.32(br.s.,1H)

1-甲基-N-(1-甲基-2-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺[(I)](化合物45)

ESI MS:m/z 547(MH+)

¹H NMR(500MHz,丙酮-d6)δppm 1.65(t,J＝4.9Hz,1H)2.27(d,J＝12.4Hz,1H)2.27(d,J＝0.7Hz,3H)3.43(dt,J＝7.6,4.89Hz,1H)3.93(s,3H)4.12(s,3H)4.38(d,J＝11.1Hz,1H)4.51(dd,J＝10.8,4.8Hz,1H)6.52(s,1H)7.08(s,1H)7.13(m,1H)7.26(s,1H)7.32(td,J＝7.7,1.0Hz,1H)7.47(d,J＝1.0Hz,1H)7.54(m,2H)7.66(d,J＝7.8Hz,1H)7.71(dd,J＝9.1,2.0Hz,1H)8.29(d,J＝2.0Hz,1H)9.54(s,1H)

实施例2

{2-[(2-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)氨基甲酰基]-1H-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯[(II)](化合物18)

步骤b，脱保护，步骤a

步骤b

将如GB2344818中报道制备的(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-醇((XVII)，11.4mg，0.045mmol)的溶液溶于干燥的DMF(1mL)中，并用EDCI(35mg，4当量)和5-[({5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-甲酸(XVI)(29mg，1.5当量)处理。将该混合物在室温搅拌16h，然后通过加入饱和的NaCl水溶液淬灭。通过以下步骤进行产物分离：用EtOAc萃取(x4)，随后将合并的有机层用2M HCl水溶液(x3)、饱和的Na₂CO₃水溶液(x3)和饱和的NaCl水溶液(x3)洗涤。将有机层干燥(Na₂SO₄)，在真空下浓缩，得到标题化合物18，然后将其经快速色谱纯化(己烷-丙酮1:1)。

ESI MS:m/z 670(MH⁺)

¹H NMR(500MHz,丙酮-d₆)δppm 1.50(s,9H)1.79(dt,J＝6.4,3.3Hz,1H)2.61(s,2H)3.53-3.66(m,1H)3.89(dd,J＝11.4,2.8Hz,1H)4.25(m,1H)4.73(m,1H)4.84(d,J＝10.6Hz,1H)7.21(s,1H)7.26(s,1H)7.34(m,2H)7.49(d,J＝8.8Hz,1H)7.56(m,1H)7.61(m,1H)7.96(br.s.,2H)8.21(br.s.,1H)8.34(s,1H)9.28(s,1H)9.52(s,1H)10.73(br.s.,1H)10.80(br.s.,1H)。

通过脱保护获得了以下的化合物:

5-氨基-N-(2-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-5a,7,8,8a-四氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺[(II)](化合物19)

将化合物18(18mg，0.0268mmol)在3.5M HCl-EtOAc(5mL)中的溶液搅拌30分钟，随后在稳定的氮气流下除去溶剂，得到化合物2的盐酸盐衍生物(15mg，89％)。

ESI MS:m/z 570(MH⁺)

步骤a

{2-[(2-{[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)氨基甲酰基]-1H-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯[(I)](化合物20)

将化合物18(30mg，0.045mmol)溶于DMF(1mL)中，并用NaHCO₃水溶液(0.5mL，15mg NaHCO₃/mL)处理。将该反应混合物搅拌2h，加入EtOAc，并将得到的有机层用盐水洗涤(x4)，干燥(Na₂SO₄)，并在真空下浓缩。将粗制的残余物经快速色谱纯化(己烷-丙酮6:4)，得到最终化合物20(9mg，31％)。

ESI MS:m/z 634(MH⁺)

¹H NMR(500MHz,丙酮-d₆)δppm 1.41(s,9H)1.56(t,J＝4.8Hz,1H)2.22(m,1H)2.29(d,J＝0.9Hz,3H)3.52(m,1H)4.69(m,2H)7.06(s,1H)7.26(d,J＝1.5Hz,1H)7.28(d,J＝1.8Hz,1H)7.36(dd,J＝8.8,1.8Hz,1H)7.48(m,1H)7.49(d,J＝8.8Hz,1H)7.58(m,1H)7.63(m,1H)7.96(br.s.,1H)8.26(br.s.,1H)8.35(s,1H)9.55(s,1H)10.77(br.s.,1H)10.95(br.s.,1H)

通过脱保护，制备了以下的化合物:

5-氨基-N-(2-{[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺[(I)](化合物21)

ESI MS:m/z 534(MH⁺)

通过类似的方法、并使用适合的原料制备了以下的化合物:

{2-[(2-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)氨基甲酰基]-1H-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯[(I)](化合物25)

ESI MS:m/z 634(MH⁺)

5-氨基-N-(2-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺[(I)](化合物26)

ESI MS:m/z 534(MH⁺)

N-(2-{[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-5-硝基-1H-吲哚-2-甲酰胺[(I)](化合物29)

ESI MS:m/z 564(MH⁺)

N-(2-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-5-硝基-1H-吲哚-2-甲酰胺[(I)](化合物30)

ESI MS:m/z 564(MH⁺)

实施例3

步骤b，脱保护，步骤a

步骤b

中间体

(8R)-N-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-4-(苄基氧基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-甲酰胺

将如J.Med.Chem.2004,47,2611-2623中报道制备的4-氨基-N-[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酰胺(155mg，0.341mmol)、三乙胺(0.048mL，0.341mmol)和CDI(300mg，1.71mmol)在干燥的DMF(5mL)中的溶液在室温搅拌1h。将溶剂蒸发后，将残余物用THF处理，并搅拌过夜。将沉淀物(化合物XVI)过滤，在真空下在50℃干燥，在NaHCO₃(4mg，0.047mmol)的存在下用在干燥的DMF(2mL)中的(8R)-4-(苄基氧基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚(化合物(XVII)(15.5mg，0.045mmol，如GB2344818中报道制备)处理，并在氮气氛下在室温搅拌16h。将溶剂蒸发后，将残余物经快速色谱纯化(DCM-MeOH 95:5)，得到中间体(30mg，80％)。

ESI MS:m/z 824(MH+)

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δppm 2.31(t,J＝7.2Hz,2H)2.53(s,3H)3.53(t,J＝10.4Hz,1H)3.80(s,3H)3.85(s,3H)3.87(s,3H)4.12(m,1H)4.18(m,1H)4.32(d,J＝10.4Hz,1H)5.27(s,2H)6.83(d,J＝1.7Hz,1H)6.84(m,1H)7.05(m,2H)7.13(d,J＝1.5Hz,1H)7.20(d,J＝1.5Hz,1H)7.25(d,J＝1.5Hz,1H)7.36(m,2H)7.41(s,1H)7.43(m,2H)7.50(d,J＝7.3Hz,2H)7.99(m,2H)8.77(s,1H)9.91(s,1H)9.93(s,1H)

类似地，通过使用相应的酰基衍生物，制备了以下的化合物:

(8S)-N-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-4-(苄基氧基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-甲酰胺

ESI MS:m/z 824(MH+)

N-(2-{[(8S)-4-(苄基氧基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-甲酰胺

ESI MS:m/z 758(MH+)

¹H NMR(500MHz,丙酮-d₆)δppm 1.74(m,4H)2.59(m,4H)2.63(d,J＝1.0Hz,3H)2.86(m,2H)3.65(dd,J＝11.4,9.6Hz,1H)3.93(dd,J＝11.4,2.4Hz,1H)4.12(t,J＝6.1Hz,2H)4.29(m,1H)4.77(m,1H)4.87(m,1H)5.36(m,2H)6.94(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H)7.15(d,J＝2.3Hz,1H)7.25(m,2H)7.35(m,1H)7.38(d,J＝1.0Hz,1H)7.43(m,2H)7.49(d,J＝9.1Hz,1H)7.58(m,3H)7.63(m,1H)8.18(br.s.,1H)8.37(d,J＝1.3Hz,1H)9.52(s,1H)10.77(br.s.,1H)10.87(br.s.,1H)

[(8S)-4-(苄基氧基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}甲酮盐酸盐

ESI MS:m/z 600(MH+)

¹H NMR(500MHz,丙酮-d₆)δppm 2.06(m,4H)2.62(d,J＝1.0Hz,3H)3.02-3.32(m,2H)3.56(br.s.,2H)3.63(dd,J＝11.4,9.6Hz,1H)3.91(dd,J＝11.4,2.4Hz,1H)4.27(m,1H)4.57(br.s.,2H)4.73(dd,J＝10.2,8.2Hz,1H)4.84(m,1H)5.35(m,2H)7.05(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H)7.16(d,J＝1.7Hz,1H)7.31(d,J＝1.8Hz,1H)7.35(m,1H)7.38(d,J＝1.0Hz,1H)7.43(m,2H)7.52(d,J＝9.1Hz,1H)7.57(d,J＝7.6Hz,2H)8.16(br.s.,1H)10.80(br.s.,1H)13.38(br.s.,1H)

脱保护

(8R)-N-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-甲酰胺[(II)](化合物10)

将中间体(15mg，0.0182mmol)、25％HCO₂NH₄水溶液(0.15mL)和10％Pd-C(15mg)在THF(3mL)中的溶液在氮气氛下搅拌3h。将该反应混合物经Celite过滤，浓缩，色谱纯化(DCM-MeOH 10:1)后，得到化合物10(6.7mg，50％)。

ESI MS:m/z 734(MH+)

类似地制备了以下的化合物:

(8S)-N-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-甲酰胺[(II)](化合物11)

ESI MS:m/z 734(MH+)

N-(2-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-甲酰胺[(II)](化合物17)

ESI MS:m/z 668(MH+)

¹H NMR(500MHz,丙酮-d₆)δppm 2.19-2.25(m,4H)2.60(s,3H)3.39(br.s.,2H)3.81(m,2H)3.88(dd,J＝11.1,2.5Hz,1H)3.91-3.96(br.s,2H)4.24(m,1H)4.51(m,1H)4.72(dd,J＝10.8,7.8Hz,1H)4.80-4.82(d,J＝10.8,1H)7.01(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H)7.22(s,1H)7.26(d,J＝2.3Hz,1H)7.28(s,1H)7.33(s,1H)7.49(d,J＝8.9Hz,1H)7.55(m,1H)7.60(m,1H)7.90(br.s.,1H)8.29(d,J＝1.8Hz,1H)

[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}甲酮盐酸盐[(II)](化合物37)

ESI MS:m/z 510(MH+)

¹H NMR(500MHz,丙酮-d₆)δppm 2.10-2.29(m,4H)2.58(d,J＝1.3Hz,3H)3.33(m,2H)3.54(dd,J＝11.4,10.1Hz,1H)3.80(m,2H)3.89(m,3H)4.20(m,1H)4.51(m,2H)4.68(dd,J＝10.2,8.2Hz,1H)4.77(m,1H)7.04(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H)7.12(s,1H)7.29(d,J＝2.3Hz,1H)7.31(d,J＝0.5Hz,1H)7.49(d,J＝8.9Hz,1H)7.87(br.s.,1H)

[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}甲酮盐酸盐[(II)](化合物38)

ESI MS:m/z 510(MH+)

步骤a

将化合物10(5mg，0.0068mmol)在DMF(5mL)中的溶液用NaHCO₃的水溶液(3mL，15mg NaHCO₃/mL)处理。将该反应混合物搅拌4h，加入EtOAc，并将得到的有机层用盐水洗涤(x4)，干燥(Na₂SO₄)，并在真空下浓缩。将粗制的残余物经快速色谱纯化(DCM-MeOH 10:1)，得到化合物9(3.9mg，82％)。

(3bS,4aR)-N-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-甲酰胺[(I)](化合物9)

ESI MS:m/z 698(MH+)

¹H NMR(500MHz,二氯甲烷-d₂)δppm 1.37(m,1H)2.12(dd,J＝7.6,4.6Hz,1H)2.18(d,J＝0.9Hz,3H)2.47(t,J＝6.6Hz,2H)3.26(dt,J＝7.6,5.0Hz,1H)3.53(t,J＝6.6Hz,2H)3.85(s,3H)3.88(s,6H)4.05(d,J＝10.4Hz,1H)4.14(m,1H)6.64(d,J＝2.1Hz,1H)6.73(s,1H)6.82(m,2H)6.99(d,J＝1.8Hz,1H)7.17(d,J＝1.8Hz,1H)7.20(d,J＝1.8Hz,1H)7.29(d,J＝0.9Hz,1H)

类似地制备了以下的化合物:

(3bR,4aS)-N-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-甲酰胺[(I)](化合物12)

ESI MS:m/z 698(MH+)

实施例4

步骤c，脱保护

步骤c

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8S)-6-({5-[({5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(II)](化合物22)

向{2-[(2-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)氨基甲酰基]-1H-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯(化合物18)(42mg，0.064mmol)在干燥的DCM(6mL)中的溶液中加入4-甲基哌嗪-1-羰基氯盐酸盐(XIII)(39mg，0.193mmol)和N,N-二甲基氨基吡啶(27mg，0.212mmol)。将该反应混合物在室温在氮气氛下搅拌16h。将溶剂蒸发，并将残余物溶于EtOAc中，将得到的有机层用盐水洗涤(x3)，干燥(Na₂SO₄)，并在真空下浓缩。将粗制的残余物经快速色谱纯化(DCM-MeOH 95:5)，得到化合物22(30mg，59％)。

ESI MS:m/z 796(MH⁺)

¹H NMR(500MHz,丙酮-d₆)δppm 2.22(s,3H)2.65(d,J＝0.9Hz,3H)2.39–2.91(m,4H)3.72(dd,J＝11.6,9.5Hz,1H)3.96(dd,J＝11.6,3.1Hz,1H)3.49-4.14(m,4H)4.37(m,1H)4.79-4.85(m,1H)4.87-4.93(m,1H)7.27(d,J＝1.5Hz,1H)7.28(s,1H)7.34-7.38(m,1H)7.41(s,1H)7.50(d,J＝8.8Hz,1H)7.56(d,J＝8.5Hz,1H)7.62-7.65(m,1H)7.96(br.s.,1H)8.38(s,1H)9.60(s,1H)10.86(br.s.,1H)10.90(br.s.,1H)

通过类似的方法制备了以下的产物:

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8R)-6-({5-[({5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(II)](化合物27)

ESI MS:m/z 796(MH⁺)

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(5-{[(5-硝基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(II)](化合物31)

ESI MS:m/z 726(MH⁺)

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8R)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(5-{[(5-硝基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(II)](化合物32)

ESI MS:m/z 726(MH⁺)

脱保护

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8S)-6-[(5-{[(5-氨基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯盐酸盐[(II)](化合物23)

将化合物22(22mg，0.0276mmol)在3.5M HCl-EtOAc(5mL)中的溶液搅拌30分钟，随后在稳定的氮气流下除去溶剂，得到所需产物，为盐酸盐(18mg，89％)。

ESI MS:m/z 696(MH⁺)

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δppm 2.59(s,3H)2.76(br.s,3H)3.05–3.42(m,4H)3.75(dd,J＝10.8,7.9Hz,1H)3.95-4.01(m,1H)3.58–4.08(m,4H)4.32-4.40(m,1H)4.67(d,J＝11.1Hz,1H)4.75-4.83(m,1H)6.92(br.s.,1H)7.21(br.s.,1H)7.23(s,1H)7.30(br.s.,1H)7.37(d,J＝8.4Hz,1H)7.49-7.52(m,1H)7.55(s,1H)7.57-7.60(m,1H)8.16(s,1H)8.24(s,1H)10.15(br.s.,1H)11.67(br.s.,1H)11.70(s,1H)

通过类似的方法制备了以下的产物:

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8R)-6-[(5-{[(5-氨基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯盐酸盐[(II)](化合物28)

ESI MS:m/z 696(MH⁺)

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8S)-8-(氯甲基)-6-[(5-{[(5-羟基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(II)](化合物33)

ESI MS:m/z 697(MH⁺)

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8R)-8-(氯甲基)-6-[(5-{[(5-羟基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(II)](化合物34)

ESI MS:m/z 697(MH⁺)

实施例5

步骤c，脱保护

步骤c

哌嗪-1,4-二甲酸叔丁酯(8S)-8-(氯甲基)-6-({5-[(1H-吲哚-2-基羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(II)]的制备

将如GB2344818中报道制备的N-(2-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(111mg,0.2mmol)溶于干燥的DCM(15mL)中，并向该溶液中加入4-(氯羰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.4mmol)和N,N-二甲基氨基吡啶(55mg，0.45mmol)。将该反应混合物在室温在氮气氛下搅拌16h。将溶剂蒸发，并将残余物溶于EtOAc中，将得到的有机层用盐水洗涤(x4)，干燥(Na₂SO₄)，并在真空下浓缩。将粗制的残余物经快速色谱纯化(己烷-丙酮7:3)，得到标题化合物(30mg，19％)。

ESI MS:m/z 767(MH⁺)

¹H NMR(500MHz,丙酮-d₆)δppm 1.48(s,9H)2.65(d,J＝1.01Hz,3H)3.55(br.s.,4H)3.60(br.s.,2H)3.73(dd,J＝11.36,9.59Hz,1H)3.79(br.s.,2H)3.97(dd,J＝11.36,2.78Hz,1H)4.33-4.42(m,1H)4.80-4.86(m,1H)4.89-4.94(m,1H)7.10(t,J＝7.19Hz,1H)7.23-7.27(m,1H)7.28(s,1H)7.34(d,J＝1.51Hz,1H)7.42(s,1H)7.53-7.57(m,1H)7.60(d,J＝8.08Hz,1H)7.61-7.65(m,1H)7.67(d,J＝8.08Hz,1H)8.29(s,1H)8.38(d,J＝1.26Hz,1H)9.56(s,1H)10.89(br.s.,2H)。

脱保护

哌嗪-1-甲酸(8S)-8-(氯甲基)-6-({5-[(1H-吲哚-2-基羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(II)](化合物24)

将中间体(25mg，0.0326mmol)在3.5M HCl-EtOAc(5mL)中的溶液搅拌2h。将溶剂在稳定的氮气流下蒸发后，将残余物在真空下干燥，得到化合物9(11mg，48％)。

ESI MS:m/z 667(MH⁺)

实施例6

步骤e”’

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N～5～-氨基甲酰基-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺[(IV)](化合物35)

步骤e”’

向N-(2-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-甲酰胺(化合物17)(5mg，0.0071mmol)在DCM(1ml)和THF(0.5mL)中的溶液中加入氯甲酸4-硝基苯酯(3.1mg，0.0156mmol)和三乙胺(2.2mL，0.0156mmol)。将得到的混合物在室温搅拌6小时。

加入N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-{4-[({[2,2-二甲基-3-(甲基氨基)丙基](甲基)氨基甲酰基}氧基)甲基]苯基}-L-鸟氨酰胺(XX)’(16mg，0.018mmol)和三乙胺(3mL，0.021mmol)。将由此得到的混合物在室温搅拌过夜，用DCM稀释，并用饱和的NaHCO₃水溶液洗涤。将粗制的残余物经快速色谱纯化(DCM-MeOH 100:15)，得到标题化合物(2mg，20％)。

ESI MS:m/z 1422(MH+)

¹H NMR(500MHz,甲醇-d₃)δppm 0.82–1.45(m 29H)2.68(s,3H)2.90-3.61(m,20H)3.84–4.34(m,8H)4.49(m,1H)5.04–5.14(m,2H)6.70–6.77(m,2H)7.01(dd,J＝9.0,2.4,1H)7.18–7.71(m,11H)8.11(br.s.,2H)

类似地制备了以下的化合物:

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N～5～-氨基甲酰基-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺[(IV)](化合物36)。

ESI MS:m/z 1422(MH+)

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺[(IV)](化合物39)。

ESI MS:m/z 1264(MH+)

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{3-[({[(8R)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺[(IV)](化合物40)。

ESI MS:m/z 1264(MH+)

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[(3-{[({(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(2E)-3-{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}丙-2-烯酰基]-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基}氧基)羰基](甲基)氨基}-2,2-二甲基丙基)(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺[(IV)](化合物41)。

ESI MS:m/z 1290(MH+)

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[(3-{[({(8R)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(2E)-3-{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}丙-2-烯酰基]-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基}氧基)羰基](甲基)氨基}-2,2-二甲基丙基)(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺[(IV)](化合物42)。

ESI MS:m/z 1290(MH+)

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-苯基丙氨酰-L-亮氨酰-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺[(IV)](化合物46)

ESI MS:m/z 1483(MH+)

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-苯基丙氨酰-L-亮氨酰-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺[(IV)](化合物47)

ESI MS:m/z 1325(MH+)

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-苯基丙氨酰-L-亮氨酰-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺[(IV)](化合物48)

ESI MS:m/z 1441(MH+)

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-苯基丙氨酰-L-亮氨酰-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺[(IV)](化合物49)

ESI MS:m/z 1283(MH+)

实施例7

步骤c，脱保护，步骤g

步骤c

N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺[(II)]

在0℃在氮气氛下向N-(2-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-甲酰胺盐酸盐(13mg，0.02mmol)在THF/DCM 1:1(2mL)中的溶液中加入氯甲酸4-硝基苯酯(20mg，0.1mmol)和三乙胺(20mL，0.14mmol)。将该混合物在室温搅拌6小时，将溶剂蒸发，用***处理后，将残余物通过过滤分离。将得到的固体化合物用1mLDCM(10％DMF)稀释，并加入N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-{4-[({甲基[2-(甲基氨基)乙基]氨基甲酰基}氧基)甲基]苯基}-L-鸟氨酰胺盐酸盐(38mg，0.05mmol)和三乙胺(7mL，0.05mmol)。将该混合物搅拌过夜，将溶剂蒸发，经柱色谱纯化(DCM/MeOH 8:2)分离出标题化合物(12mg，42％收率)。

ESI MS:m/z 1409(MH+)

¹H NMR(500MHz,甲醇-d₄)δppm 2.07(br.s.,4H)2.58(s,3H)2.93-3.09(m,6H)3.40-3.69(m,8H)4.11-4.40(m,3H)4.43-4.81(m,3H)4.99-5.17(m,2H)6.92-7.44(m,14H)7.46-7.64(m,4H)7.75(br.s.,3H)8.01-8.22(m,2H)8.01-8.06(m,1H)

类似地制备了以下的化合物：

N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺

ESI MS:m/z 1251(MH+)

¹H NMR(500MHz,甲醇-d₄)δppm 0.94-1.01(m,6H)1.51-1.95(m,4H)2.12(br.s.,5H)2.48-2.62(m,3H)2.89-3.05(m,4H)3.40-3.54(m,4H)3.46-3.65(m,4H)3.58-3.74(m,2H)3.75-4.05(m,1H)4.08-4.42(m,3H)4.50(m,1H)4.55-4.81(m,4H)4.96-5.20(m,2H)6.92-7.81(m,17H)8.04(br.s.,1H)

脱保护

L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺[(II)](化合物50)

向N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺(11mg，0.0078mmol)在DMF(1mL)中的溶液中加入哌啶(4mL，0.039mmol)。将该混合物在室温搅拌1小时，将溶剂蒸发，并将得到的标题化合物未经进一步纯化地使用。

类似地制备了以下的化合物：

L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺[(II)](化合物51)

步骤g

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺[(IV)](化合物52)

向L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺(4.6mg，0.0039mmol)在1mL DCM(10％DMF)中的溶液中加入1-{6-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-6-氧代己基}-1H-吡咯-2,5-二酮(3.6mg，0.0117mmol)和三乙胺(2.2mL，0.0156mmol)。将该混合物在室温搅拌3小时，将溶剂蒸发，并通过柱色谱纯化(DCM/MeOH 8:2)分离出标题化合物(2.2mg，41％收率)。

ESI MS:m/z 1380(MH+)

¹H NMR(500MHz,甲醇-d₄)δppm 1.98(br.s.,4H)2.60-2.63(m,3H)2.89-3.11(m,6H)3.39–3.72(m,10H)4.07–4.75(m,7H)4.98-5.17(m,2H)6.74(br.s.,2H)7.00(m,2H)7.07-7.45(m,8H)7.52(br.s.,3H)8.07-8.11(m,1H)

类似地制备了以下的化合物:

N-[19-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)-17-氧代-4,7,10,13-四氧杂-16-氮杂十九烷-1-酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺[(IV)](化合物53)

ESI MS:m/z 1585(MH+)

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺[(IV)](化合物54)

ESI MS:m/z 1222(MH+)

¹H NMR(400MHz,dmf-d7)δppm 0.95(t,J＝7.8Hz,6H)2.16(m,1H)2.66(br.s.,3H)2.99-3.09(m,3H)3.09-3.29(m,3H)3.59(br.s.,2H)3.69(br.s.,2H)3.81(br.s.,2H)4.04(d,J＝10.7Hz,1H)4.31-4.47(m,2H)4.61(br.s.,1H)4.83(br.s.,2H)5.11(d,J＝15.7Hz,2H)5.60(s,2H)6.29(br.s.,1H)7.00(m,3H)7.30(m,2H)7.53(d,J＝8.5Hz,2H)7.88(d,J＝8.2Hz,1H)8.13(d,J＝7.8Hz,1H)8.27(s,1H)10.1(m,1H)11.61(br.s.,1H)

中间体的制备

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-{4-[({[2,2-二甲基-3-(甲基氨基)丙基](甲基)氨基甲酰基}氧基)甲基]苯基}-L-鸟氨酰胺(XX)’

步骤1

N,N'-(2,2-二甲基丙-1,3-二基)二甲酰胺

在圆底烧瓶中，将商购得到的2,2-二甲基丙-1,3-二胺(851mg，8.32mmol)与甲酸乙酯(4.2ml)反应。将该反应混合物在60℃搅拌3小时，直至检测不到原料(TLC分析，MeOH:CH₂Cl₂＝2:8)。然后将该反应混合物在真空下蒸发，得到粗制的产物(1.4g，油状物)。

ESI MS:m/z 159(MH+)

¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)0.79(s,6H)2.92(d,J＝6.41Hz,4H)7.94(br.s.,2H)8.05-8.09(m,2H)

步骤2

N,N',2,2-四甲基丙-1,3-二胺

向含在0℃在氩气气氛下冷却的N,N'-(2,2-二甲基丙-1,3-二基)二甲酰胺(1.4g，8.85mmol)的干燥的圆底烧瓶中加入氢化铝锂在四氢呋喃(1M)中的溶液(24ml)。将该反应混合物在室温搅拌28小时。在0℃冷却后，加入水在四氢呋喃中的溶液，并将得到的混合物经celite垫过滤。将滤液经无水硫酸钠干燥，过滤，并将由此得到的产物的四氢呋喃溶液未经进一步纯化地用于下一个步骤中。

步骤3

[2,2-二甲基-3-(甲基氨基)丙基]甲基氨基甲酸2-(联苯-4-基)丙-2-基酯

将商购的4-[({[2-(联苯-4-基)丙-2-基]氧基}羰基)氧基]苯甲酸甲酯(5.54mmol，2.16g)加入N,N',2,2-四甲基丙-1,3-二胺的四氢呋喃溶液中。将该反应混合物在室温搅拌24小时。然后将溶剂在真空下蒸发，并将残余物经快速色谱纯化(MeOH:CH₂Cl₂＝1:9)，得到所需产物(848mg)。

MS(ESI):369(MH+)

¹H NMR(600MHz,DMSO-d6)δppm 0.73-0.83(m,5H)0.91(br.s.,3H)1.65-1.77(m,6H)2.78(br.s.,1H)7.32-7.38(m,1H)7.41(d,J＝8.43Hz,2H)7.46(t,J＝7.69Hz,2H)7.58-7.69(m,4H)

类似地制备了以下的化合物：

甲基[2-(甲基氨基)乙基]氨基甲酸2-(联苯-4-基)丙-2-基酯

MS(ESI):327(MH+)

¹H NMR(401MHz,DMSO-d₆)δppm 1.70-1.75(m,6H)2.23-2.39(m,3H)7.30-7.39(m,1H)7.40-7.49(m,4H)7.58-7.63(m,2H)7.63-7.68(m,2H)

步骤4

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N-{4-[11-(联苯-4-基)-4,6,6,8,11-五甲基-3,9-二氧代-2,10-二氧杂-4,8-二氮杂十二烷-1-基]苯基}-N⁵-氨基甲酰基-L-鸟氨酰胺

向N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N5-氨基甲酰基-N-[4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺(0.492mmol，363mg)在无水二甲基亚砜(1.0ml)中的溶液中加入[2,2-二甲基-3-(甲基氨基)丙基]甲基氨基甲酸2-(联苯-4-基)丙-2-基酯(0.393mmol，145mg)在无水二甲基亚砜(0.9ml)中的溶液和三乙胺(1.5mmol，150mg)。将该反应混合物在室温搅拌直至检测不到原料，然后用正己烷(3x6ml)处理，并将粗制的残余物未经进一步纯化地用于下一个步骤中。

MS(ESI):967(MH+)。

类似地制备了以下的化合物

N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-缬氨酰-N-{4-[10-(联苯-4-基)-4,7,10-三甲基-3,8-二氧代-2,9-二氧杂-4,7-二氮杂十一烷-1-基]苯基}-N⁵-氨基甲酰基-L-鸟氨酰胺

MS(ESI):954(MH+)

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δppm 0.86(dd,J＝13.34,6.79Hz,6H)1.69(br.s.,6H)1.86-2.05(m,1H)2.76(m,J＝9.30Hz,2H)2.92(d,J＝14.95Hz,3H)3.01(m,J＝6.10Hz,1H)3.15-3.15(m,0H)3.38-3.53(m,2H)3.93(t,J＝7.63Hz,1H)4.18-4.26(m,2H)4.26-4.34(m,1H)4.42(br.s.,1H)4.92-5.06(m,2H)5.39(s,2H)5.96(t,J＝6.02Hz,1H)7.18-7.48(m,12H)7.52-7.66(m,6H)7.70-7.77(m,2H)7.88(d,J＝7.47Hz,2H)8.11(br.s.,1H)10.06(br.s.,1H)

步骤5

标题中间体

将粗制的产物N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N-{4-[11-(联苯-4-基)-4,6,6,8,11-五甲基-3,9-二氧代-2,10-二氧杂-4,8-二氮杂十二烷-1-基]苯基}-N⁵-氨基甲酰基-L-鸟氨酰胺用二氯乙酸(7.8mmol)处理。将该反应混合物在室温搅拌，直至检测不到原料，然后经硅胶快速柱色谱(EtOH:CH₂Cl₂＝1.5:8.5)纯化，得到所需产物(44.0mg，白色固体)。

MS(ESI):729(MH+)

¹H NMR(500MHz,甲醇-d₄)δppm 0.97(d,J＝4.42Hz,3H)0.98(d,J＝4.27Hz,3H)1.04(s,6H)1.23-1.35(m,4H)1.50-1.68(m,7H)1.76(dtd,J＝13.90,9.26,9.26,5.11Hz,1H)1.86-1.95(m,1H)2.07(dq,J＝13.90,6.86Hz,1H)2.26-2.31(m,2H)2.57(s,3H)2.67(s,2H)3.04(s,3H)3.11(dt,J＝13.50,6.67Hz,1H)3.16-3.22(m,1H)3.23(br.s.,2H)3.48(t,J＝7.09Hz,2H)4.14(d,J＝7.47Hz,1H)4.49(dd,J＝9.07,5.11Hz,1H)5.13(s,2H)5.94(s,3H)6.75-6.82(m,1H)7.36(d,J＝8.54Hz,2H)7.60(d,J＝8.69Hz,2H)。

中间体的制备

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-{4-[({甲基[2-(甲基氨基)乙基]氨基甲酰基}氧基)甲基]苯基}-L-鸟氨酰胺

步骤6

向产物N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-缬氨酰-N-{4-[10-(联苯-4-基)-4,7,10-三甲基-3,8-二氧代-2,9-二氧杂-4,7-二氮杂十一烷-1-基]苯基}-N⁵-氨基甲酰基-L-鸟氨酰胺[如上文步骤4中报道制备](0.063mmol，60mg)在无水二甲基甲酰胺(0.8ml)中的溶液中加入哌啶(0.32mmol，27.2mg)。将该反应混合物在室温搅拌直至检测不到原料。将溶剂在真空下蒸发，并将由此得到的粗品未经进一步纯化地用于下一个步骤。

MS(ESI):732(MH+)

步骤7

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N-{4-[10-(联苯-4-基)-4,7,10-三甲基-3,8-二氧代-2,9-二氧杂-4,7-二氮杂十一烷-1-基]苯基}-N⁵-氨基甲酰基-L-鸟氨酰胺

向粗制的产物N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N-{4-[11-(联苯-4-基)-4,6,6,8,11-五甲基-3,9-二氧代-2,10-二氧杂-4,8-二氮杂十二烷-1-基]苯基}-N⁵-氨基甲酰基-L-鸟氨酰胺(0.0629mmol)在无水二甲基甲酰胺(1.5ml)中的溶液中加入1-{6-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-6-氧代己基}-1H-吡咯-2,5-二酮(0.189mmol，58.3mg)和三乙胺(0.252mmol，25.5mg)。将该反应混合物在室温搅拌直至检测不到原料。将溶剂在真空下蒸发，并将粗品经硅胶(230-400目)快速柱色谱(洗脱剂:EtOH:CH₂Cl₂＝1:9)纯化,，得到所需产物(34mg，白色蜡状物)

MS(ESI):925(MH+)

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δppm 0.83(dd,J＝15.79,6.79Hz,6H)1.31-1.40(m,1H)1.60(br.s.,1H)1.69(s,6H)1.90-2.02(m,1H)2.05-2.23(m,2H)2.89-2.96(m,3H)3.01(br.s.,1H)3.34-3.38(m,2H)3.46(m,J＝8.24Hz,2H)4.19(t,J＝7.40Hz,1H)4.38(br.s.,1H)4.95-5.05(m,2H)5.40(s,2H)5.97(d,J＝12.20Hz,1H)6.98-7.02(m,2H)7.30(d,J＝8.85Hz,2H)7.37(dd,J＝15.40,7.93Hz,3H)7.45(m,J＝7.17Hz,2H)7.52-7.67(m,6H)7.80(d,J＝8.24Hz,1H)8.08(d,J＝6.71Hz,1H)9.76-10.18(m,1H)

步骤8

标题中间体

将步骤6中制备的中间体在上文步骤5中报道反应条件下反应，得到标题化合物，为白色粉末。

MS(ESI):687(MH+)

Claims

1.式(I)或(II)的化合物及其可药用盐

其中R1和R2一起形成基团(D)或(G):

R6是离去基团；

T不存在或是N；

BM是式(V)的DNA结合部分:

其中:

Y和Y’独立地是任选被取代的芳基或杂芳基；

U是式(VI)或(VII)的部分:

其中R3如上文所定义；

q是0至4的整数；

L1是氢或L，其中L不存在或是在一定条件下可裂解的部分；

W1不存在或是包含一个或多个自我分解基团的自我分解***；

Z1不存在或是肽、非肽或杂肽和非肽的连接基；

1)T和X均不存在，q是0且

Y’是式(VIII)、(VIII)’或(VIII)”的杂环基部分:

或

2)T和X均不存在，q是1，U是式(VII)的基团，

Y是式(IX)的杂环基部分

且

Y’是式(VIII)”’的杂环基部分

2.根据权利要求1的式(I)或(II)的化合物，其中

R1和R2一起形成基团(D)

其中R5是直链或支链的C₁-C₄烷基。

3.根据权利要求2的式(II)的化合物，其中

R6是卤素基团，且

L1是氢或式(Xj)的在一定条件下可裂解的部分

4.式(III)或(IV)的化合物及其可药用盐

其中

BM是式(V)’的DNA结合部分:

其中:

X、Y、U、Y’和q如上文所定义；

A是选自-O-、-NH-、-CO-的原子；

A’不存在或是A，其中A如上文所定义；

L不存在或是在一定条件下可裂解的部分；

W不存在或是包含一个或多个自我分解基团的自我分解***；

Z不存在或是肽、非肽或杂肽和非肽的连接基；

且R1、R2、R3、R4、R6、T、BM、L1、W1和Z1如在权利要求1中所定义；

条件是

1)当A1不存在，且RM1不存在时，排除式(IV)的化合物；

2)当以下情形时，排除式(III)或(IV)的化合物：

a)T和X均不存在，q是0且

Y’是式(VIII)^IV的杂环基部分

其中

Q1是-CH＝或-N＝；

R7和R8独立地是氢、卤素、羟基、C₁-C₄烷氧基、氰基、-NCOOR3、-C(NH)-NH₂或–NR3R4，其中R3和R4如在权利要求1中所定义；

或

b)T和X均不存在，q是1或2，U是式(VII)的基团，

Y是式(IX)’的杂环基部分:

且Y’是式(VIII)^IV的杂环基部分

其中Q、Q1、R7和R8如上文所定义。

5.根据权利要求4的式(III)或(IV)的化合物，其中

R1和R2一起形成基团(D)

其中R5是直链或支链的C₁-C₄烷基。

6.根据权利要求5的式(IV)的化合物，其中

R6是卤素基团；且

A’不存在，且L1是L，其中L如权利要求4中所定义。

7.根据权利要求5或6的式(III)或(IV)的化合物，其中

L和L1独立地不存在或是选自以下的在一定条件下可裂解的部分：

NHCO-R9(Xa)；-NHCONH-R9(Xb)；-NHCOO-R9(Xc)；-NH-R9(Xd)；

其中:

n是0至2的整数，且

n1是0至4的整数。

8.根据权利要求5、6或7的式(III)或(IV)的的化合物，其中

W和W1独立地是包含独立地选自以下的一个或多个自我分解基团的自我分解***:

其中

R9和R10之一不存在，且另一个如权利要求7中所定义；

m是0至3的整数；和

A₁是CH₂、CH₂N-R12或N-R12，其中R12如上文所定义。

9.根据权利要求5、6、7或8的式(III)或(IV)的化合物，其中

Z和Z1独立地是肽连接基、优选二肽或三肽连接基，或者是非肽连接基，其包含选自以下的寡聚乙二醇或聚乙二醇部分或其衍生物:

其中

R9和R10之一不存在，且另一个如权利要求7中所定义；且

p是1至20的整数。

10.根据权利要求5、6、7、8或9的式(III)或(IV)的化合物，其中

RM和RM1独立地是选自以下的反应性部分：

其中R13是C₁-C₃烷基或含NO₂和CN基团的吸电子基团；

r是0至7的整数；且

R11和R12如权利要求8中所定义。

11.根据权利要求1或4的化合物或其可药用盐，其选自:

N-(6-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-3-基)-1H-吲哚-6-甲酰胺,

N-(5-{[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-1-甲基-4-{[(1-甲基-4-硝基-1H-吡咯-2-基)羰基]氨基}-1H-吡咯-2-甲酰胺,

(2E)-1-[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮,

(2E)-1-[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮,

N-(6-{[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-3-基)-1H-吲哚-6-甲酰胺,

1-甲基-N-(1-甲基-5-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吡咯-3-基)-4-{[(1-甲基-4-硝基-1H-吡咯-2-基)羰基]氨基}-1H-吡咯-2-甲酰胺,

(3bS,4aR)-3-甲基-6-[(2E)-3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯酰基]-4,4a,5,6-四氢-8H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-8-酮,

(3bR,4aS)-3-甲基-6-[(2E)-3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯酰基]-4,4a,5,6-四氢-8H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-8-酮,

(3bS,4aR)-N-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-甲酰胺,

(8R)-N-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-甲酰胺,

(8S)-N-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-甲酰胺,

(3bR,4aS)-N-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1H-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1H-吡咯-3-基)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-甲酰胺,

N-(3-{(1E)-3-[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

N-(3-{(1E)-3-[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

N-(3-{(1E)-3-[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

N-(2-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-甲酰胺,

{2-[(2-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)氨基甲酰基]-1H-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯,

5-氨基-N-(2-{[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-5a,7,8,8a-四氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

{2-[(2-{[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)氨基甲酰基]-1H-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯,

5-氨基-N-(2-{[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8S)-6-({5-[({5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8S)-6-[(5-{[(5-氨基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯盐酸盐,

哌嗪-1-甲酸(8S)-8-(氯甲基)-6-({5-[(1H-吲哚-2-基羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

{2-[(2-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)氨基甲酰基]-1H-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯,

5-氨基-N-(2-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8R)-6-({5-[({5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8R)-6-[(5-{[(5-氨基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯盐酸盐,

N-(2-{[(3bR,4aS)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-5-硝基-1H-吲哚-2-甲酰胺,

N-(2-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-5-硝基-1H-吲哚-2-甲酰胺,

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(5-{[(5-硝基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8R)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(5-{[(5-硝基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8S)-8-(氯甲基)-6-[(5-{[(5-羟基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8R)-8-(氯甲基)-6-[(5-{[(5-羟基-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1H-吲哚-2-基)羰基]-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N～5～-氨基甲酰基-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N～5～-氨基甲酰基-N-[4-({[{3-[({[(8R)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}甲酮，

[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}甲酮,

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{3-[({[(8R)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[(3-{[({(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(2E)-3-{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}丙-2-烯酰基]-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基}氧基)羰基](甲基)氨基}-2,2-二甲基丙基)(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺，

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[(3-{[({(8R)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(2E)-3-{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}丙-2-烯酰基]-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基}氧基)羰基](甲基)氨基}-2,2-二甲基丙基)(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

(2E)-1-[(8S)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1H-吲哚-3-基)丙-2-烯-1-酮,

N-(2-{[(8R)-8-(氯甲基)-4-羟基-1-甲基-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1-甲基-1H-吲哚-5-基)-1-甲基-1H-吲哚-2-甲酰胺,

1-甲基-N-(1-甲基-2-{[(3bS,4aR)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氢-4H-环丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8H)-基]羰基}-1H-吲哚-5-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺,

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-苯基丙氨酰-L-亮氨酰-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺,

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-苯基丙氨酰-L-亮氨酰-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺,

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-苯基丙氨酰-L-亮氨酰-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺,

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-苯基丙氨酰-L-亮氨酰-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺,

L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,

N-[19-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)-17-氧代-4,7,10,13-四氧杂-16-氮杂十九烷-1-酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺,和

N-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-缬氨酰-N⁵-氨基甲酰基-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1H-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氢-6H-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-L-鸟氨酰胺。

12.药物组合物，其包含如权利要求1所定义的治疗有效量的式(I)或(II)的化合物或如权利要求4所定义的式(III)或(IV)的化合物和至少一种可药用赋形剂、载体或稀释剂。

13.根据权利要求12的药物组合物，其还包含一种或多种化疗剂。

14.产品，其包含如权利要求1中所定义的式(I)或(II)的化合物或如权利要求4所定义的式(III)或(IV)的化合物或其可药用盐和一种或多种化疗剂，作为组合的制剂，用于在抗癌治疗法中同时、分开或连续应用。

15.用作药物的如权利要求1中所定义的式(I)或(II)的化合物或如权利要求4所定义的式(III)或(IV)的化合物。

16.用于治疗癌症的方法的如权利要求1中所定义的式(I)或(II)的化合物或如权利要求4所定义的式(III)或(IV)的化合物。

17.根据权利要求16的化合物，其特征在于所述癌症是癌，诸如膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、肝癌、肺癌，包括小细胞肺癌、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、子***、甲状腺癌、***癌、和皮肤癌，包括鳞状细胞癌；淋巴细胞系血液肿瘤，包括白血病、急性淋巴细胞白血病，急性成淋巴细胞性白血病、B-细胞淋巴瘤、T-细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤；髓系造血肿瘤，包括急性和慢性髓性白血病、骨髓增生异常综合征和前髓细胞性白血病；间质起源的肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；中枢及外周神经***肿瘤，包括星形细胞瘤、成神经细胞瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；其它肿瘤，包括黑素瘤、***瘤、畸胎癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角化棘皮瘤、甲状腺滤泡癌、卡波西肉瘤和间皮瘤。

18.治疗癌症的方法，其包括向有需要的哺乳动物施用有效量的如权利要求1中所定义的式(I)或(II)的化合物或如权利要求4所定义的式(III)或(IV)的化合物。

19.权利要求18的方法，其中所述有需要的哺乳动物是人。

20.如权利要求1中所定义的式(I)或(II)的化合物或如权利要求4所定义的式(III)或(IV)的化合物在制备用于治疗癌症的药物中的应用。

21.如权利要求4所定义的式(III)或(IV)的化合物在制备缀合物中的应用。