CN104178427B - 一种去除螺旋藻中微囊藻毒素的方法 - Google Patents

一种去除螺旋藻中微囊藻毒素的方法 Download PDF

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Abstract

一种去除螺旋藻中微囊藻毒素的方法，属藻类食品的加工生产技术。本发明是通过滇池筛分的鞘氨醇单胞菌(CGMCC NO:1.9113，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心：China General Microbiological Culture Collection Center,CGMCC)，巨兽芽孢杆菌(YUMCC Da147；YUMCC为云南大学菌种保藏中心),铜绿假单胞菌(YUMCC ACM4)三种菌株添加到螺旋藻藻泥中，进行短期中低温厌氧发酵，达到去除螺旋藻中的微囊藻毒素的功效。经检测，本发明方法可以除去螺旋藻原料中80％～99％的微囊藻毒素。

Description

一种去除螺旋藻中微囊藻毒素的方法
技术领域
本发明书属藻类食品的加工生产技术。
背景技术
自上世纪80年代在我国程海湖发现螺旋藻后，该藻类食品日益风靡。随着螺旋藻产业的不断扩展，以及近年我国对食品安全前所未有的重视，微囊藻毒素对螺旋藻食品的风险逐步走入大众视野。研究表明，螺旋藻在人工养殖和自然环境中，都会伴生有铜绿微囊藻等产生微囊藻毒素的杂藻。如何去除混在螺旋藻中的微囊藻毒素不但是新的研究方向，而且还由于微囊藻毒素具有很强的稳定性，至今仍然是难题。
近年来有学者从滇池水体及底泥中筛分出“鞘氨醇单胞菌”及“巨兽芽孢杆菌”、并将它们用作去除饮水中微囊藻毒素的两种原生菌种；国内外报道，“食酸戴尔福特菌”、“蜡状芽孢杆菌”等菌种也对水体中的微囊藻毒素有一定的去除作用。但通过以上菌种对螺旋藻进行处理以消除所含的微囊藻毒素，至今尚无现有技术。
发明内容
本发明的目的在于提供一种去除螺旋藻中微囊藻毒素的方法，通过藻泥发酵技术来达到快速去除螺旋藻产品中的微囊藻毒素。
本发明方法至少包括以下步骤：
a.将水体中的螺旋藻收集浓缩成含水重量比为50％～90％的浓缩藻泥，将藻泥加温至55℃～70℃，保温5～25分钟，不辅以或同时辅以超声波进行混合，使藻泥被充分加热并将藻泥中的活藻杀灭。
b.将经以上处理的藻泥冷却至室温。
c.将鞘氨醇单胞菌，巨兽芽孢杆菌、铜绿假单胞菌预先分别扩繁制成0.9～1.1×105CFU/ml活菌体预制活菌液，扩繁采用常规方法。
d.将鞘氨醇单胞菌，巨兽芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的预制活菌液按照体积比4～6:0.5～2:1的比例混合成混合菌液。
e.按体积重量比为混合菌液：螺旋藻藻泥＝1:1000～1:10000进行混合，将混合物置于发酵罐中，以0.5℃～1℃/分的速度缓慢加温至20℃～37℃，保温6h～24h进行恒温发酵，期间每隔10～15分钟对发酵物料进行一次低速搅拌，每次搅拌时长1.5～2.5分钟，搅拌转速30～40转/分。
f.将发酵后的物料取出，进行灭菌处理，灭菌可采用常规方法。
g.干燥后制得螺旋藻原料品，干燥可采用喷雾或其它方式进行。
本发明是通过滇池筛分的鞘氨醇单胞菌(CGMCC NO:1.9113，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心：China General Microbiological CultureCollection Center,CGMCC)，巨兽芽孢杆菌(YUMCC Da147；注：YUMCC指云南大学菌种保藏中心),铜绿假单胞菌(YUMCC ACM4)三种菌株添加到螺旋藻藻泥中，进行短期中低温厌氧发酵，达到去除螺旋藻中的微囊藻毒素的功效。
经检测，本发明方法可以除去螺旋藻原料中80％～99％的微囊藻毒素。
以下是相同环境条件下三菌合用与单用的对比试验情况：
单位：ng/g
注：鞘指鞘氨醇单胞菌；巨指巨兽芽孢杆菌；铜指铜绿假单胞菌。
本发明的有益效果：三菌合用可高效去除螺旋藻产品中的微囊藻毒素。
具体实施方式
实施例1。将养殖的螺旋藻收集成含水量50％的藻泥10kg，取样测得藻泥中微囊藻毒素含量为107.2ng/g，将藻泥超声波加热至55℃，保持时间为5分钟，将藻泥冷却至室温后，加入lmL预混好的菌液(鞘氨醇单胞菌，巨兽芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的预制混合液，预制混合液中三种菌的体积比为：4:0.5:1)；在20℃下发酵12h；取出后做巴氏灭菌，取样检测微囊藻毒素，测的含量18.7ng/g。
实施例2。将养殖的螺旋藻收集成含水量50％的藻泥10kg，取样测得藻泥中微囊藻毒素含量为107.2ng/g，将藻泥超声波加热至55℃，保持时间为5分钟，将藻泥冷却至室温后，加入lmL预混好的菌液(鞘氨醇单胞菌，巨兽芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的预制混合液，预制混合液中三种菌的体积比为：4:2:1)；在37℃下发酵6h；取出后做巴氏灭菌，取样检测微囊藻毒素，测的微囊藻毒素含量6.4ng/g。
实施例3。将养殖的螺旋藻收集成含水量50％的藻泥10kg，取样测得藻泥中微囊藻毒素含量为107.2ng/g，将藻泥超声波加热至70℃，保持时间为5分钟，将藻泥冷却至室温后，加入lmL预混好的菌液(鞘氨醇单胞菌，巨兽芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的预制混合液，预制混合液中三种菌的体积比为：6:0.5:1)；在20℃下发酵6h；取出后做巴氏灭菌，取样检测微囊藻毒素，测的含量8.9ng/g。
实施例4。将养殖的螺旋藻收集成含水量50％的藻泥10kg，取样测得藻泥中微囊藻毒素含量为107.2ng/g，将藻泥超声波加热至55℃，保持时间为25分钟，将藻泥冷却至室温后，加入lmL预混好的菌液(鞘氨醇单胞菌，巨兽芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的预制混合液，预制混合液中三种菌的体积比为：6:2:1)；在37℃下发酵6h；取出后做巴氏灭菌，取样检测微囊藻毒素，测的含量8.4ng/g。
实施例6。将养殖的螺旋藻收集成含水量50％的藻泥10kg，取样测得藻泥中微囊藻毒素含量为139.1ng/g，将藻泥超声波加热至55℃，保持时间为25分钟，将藻泥冷却至室温后，加入lmL预混好的菌液(鞘氨醇单胞菌，巨兽芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的预制混合液，预制混合液中三种菌的体积比为：4:1:1)；在37℃下发酵12h；取出后做巴氏灭菌，取样检测微囊藻毒素，测的含量2.7ng/g。
实施例7。将养殖的螺旋藻收集成含水量90％的藻泥1kg，取样测得藻泥中微囊藻毒素含量为267.6ng/g，将藻泥超声波加热至70℃，保持时间为5分钟，将藻泥冷却至室温后，加入lmL预混好的菌液(鞘氨醇单胞菌，巨兽芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的预制混合液，预制混合液中三种菌的体积比为：6:1:1)；在37℃下发酵12h；取出后做巴氏灭菌，取样检测微囊藻毒素，测的含量8.6ng/g。
实施例8。将养殖的螺旋藻收集成含水量90％的藻泥10kg，取样测得藻泥中微囊藻毒素含量为267.6ng/g，将藻泥超声波加热至55℃，保持时间为25分钟，将藻泥冷却至室温后，加入lmL预混好的菌液(鞘氨醇单胞菌，巨兽芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的预制混合液，预制混合液中三种菌的体积比为：4:2:1)；在37℃下发酵6h；取出后做巴氏灭菌，取样检测微囊藻毒素，测的含量38.1ng/g。
实施例9。将养殖的螺旋藻收集成含水量50％的藻泥1kg，取样测得藻泥中微囊藻毒素含量为112.6ng/g，将藻泥超声波加热至55℃，保持时间为25分钟，将藻泥冷却至室温后，加入lmL预混好的菌液(鞘氨醇单胞菌，巨兽芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的预制混合液，预制混合液中三种菌的体积比为：4:2:1)；在37℃下发酵12h；取出后做巴氏灭菌，取样检测微囊藻毒素，测的含量1.2ng/g。

Claims (1)

1.一种去除螺旋藻中微囊藻毒素的方法，其特征在于至少包括以下步骤：
a.将水体中的螺旋藻收集浓缩成含水重量比为50％～90％的浓缩藻泥，将藻泥加温至55℃～70℃，保温5～25分钟，不辅以或同时辅以超声波进行混合，使藻泥被充分加热并将藻泥中的活藻杀灭；
b.将经以上处理的藻泥冷却至室温；
c.将鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas)，巨兽芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)预先分别扩繁制成0.9～1.1×105CFU/ml活菌体预制活菌液；
d.将鞘氨醇单胞菌，巨兽芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的预制活菌液按照体积比4～6:0.5～2:1的比例混合成混合菌液；
e.按体积重量比为混合菌液：螺旋藻藻泥＝1:1000～1:10000进行混合，将混合物置于发酵罐中，以0.5℃～1℃/分的速度缓慢加温至20℃～37℃，保温6h～24h进行恒温发酵，期间每隔10～15分钟对发酵物料进行一次低速搅拌，每次搅拌时长1.5～2.5分钟，搅拌转速30～40转/分；
f.将发酵后的物料取出，进行灭菌处理；
g.干燥后制得螺旋藻原料品。
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假单胞菌胞内酶粗提液对藻毒素MCLR的降解;苑宝玲 等;《环境化学》;20091130;第28卷(第5期);全文，尤其是第854页摘要，正文第2段 *
鞘氨醇单胞菌USTB-05对微囊藻毒素的生物降解;徐慧敏，闫海 等;《中国环境科学》;20140531;第34卷;1316-21 *

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