CN104130207A - 阿考替胺氢溴酸盐水合物及其晶型的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种阿考替胺氢溴酸盐水合物的Ⅰ晶型及其制备方法，具体地，本发明涉及一种阿考替胺氢溴酸盐水合物Ⅰ晶型的制备方法，通过X-粉末衍射表征，所述阿考替胺Ⅰ晶型在6.26°±0.2°、9.64±0.2°、10.94°±0.2°、12.51°±0.2°、14.22°±0.2°、15.05°±0.2°、16.36°±0.2°、16.77°±0.2°、17.84°±0.2°、19.30°±0.2°、20.33°±0.2°、20.60°±0.2°、22.91°±0.2°、23.75°±0.2°、24.46°±0.2°和26.08°±0.2°(2θ)出现X射线衍射峰。本发明的阿考替胺氢溴酸盐水合物的Ⅰ晶型能够用于治疗功能性消化不良等疾病。

Description

阿考替胺氢溴酸盐水合物及其晶型的制备方法

技术领域

本发明属于化学合成领域，具体而言，本发明涉及阿考替胺氢溴酸盐水合物及其晶型的制备方法。

背景技术

阿考替胺(式I所示化合物)是全球第一个功能性消化不良治疗用药，由日本泽里新药株式会社开发，并已于2013年2月在日本批准上市。适用于餐后的饱胀感，功能性消化不良，上腹部饱胀，早饱的治疗。

然而，目前制备阿考替胺晶型的方法，仍有待改进。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一或至少提供一种有用的商业选择。为此，本发明的一个目的在于提出一种阿考替胺氢溴酸盐水合物及其Ⅰ晶型和用于治疗功能性消化不良以及用于改善胃动力障碍、胃排空延迟，从而改善FD症状，包括餐后饱胀，上腹胀，早饱等用途提供了空间。

在本发明的第一个方面，粉末X-射线衍射研究已广泛用于阐明分子结构、结晶和多晶型现象，用装有3KW X-射线发生器(CuKα1放射)和NaI(Ti)闪射检测器的Philips APD3720型粉末衍射仪记录粉末X-射线(XRD)，从3～45°(2θ)进行测定。样品保持在环境温度。

根据本发明的实施例，所述阿考替胺氢溴酸盐水合物Ⅰ晶型的X射线粉末衍射图在6.26°±0.2°、9.64±0.2°、10.94°±0.2°、12.51°±0.2°、14.22°±0.2°、15.05°±0.2°、16.36°±0.2°、16.77°±0.2°、17.84°±0.2°、19.30°±0.2°、20.33°±0.2°、20.60°±0.2°、22.91°±0.2°、23.75°±0.2°、24.46°±0.2°和26.08°±0.2°(2θ)出现X射线衍射峰。由此可以提高阿考替胺氢溴酸盐水合物的Ⅰ晶型的纯度。

另外，根据本发明的实施例，所述阿考替胺氢溴酸盐水合物的Ⅰ晶型还可以具有如下附加的技术特征：

根据本发明的实施例，所述阿考替胺氢溴酸水合物样品在DSC(TGA)(STA449F3同步热分析仪—德国耐驰仪器制造有限公司)图中显示其74.8℃左右有吸热峰，失重3.11％，为一分子水，184.9℃左右熔化。由经可以确定该样品中含有一个结晶水，且纯度较高。

根据本发明的实施例，上述阿考替胺氢溴酸盐水合物的Ⅰ晶型含有至少99.5％重量的阿考替胺氢溴酸盐水合物，由此可以进一步提高阿考替胺氢溴酸盐水合物Ⅰ晶型的纯度。

任选地，含有0.5％重量以下的式I所示化合物

由此，可以进一步提高阿考替胺氢溴酸盐水合物Ⅰ晶型的纯度。

根据本发明的实施例，上述阿考替胺氢溴酸盐水合物的Ⅰ晶型作为功能性消化不良治疗用药。由此可以提高阿考替胺的治疗效果。

在本发明的第二方面，本发明提出了一种制备上述实施例的阿考替胺氢溴酸盐水合物的Ⅰ晶型的方法，该方法包括：将阿考替胺与有机溶剂混合，以便获得含有阿考替胺和有机溶剂的第一混合物；将所述第一混合物中加入成盐溶剂进行成盐反应，以便获得含有阿考替胺氢溴酸盐的第二混合物；将所述第二混合物过滤，滤饼用有机溶剂洗涤，干燥，以便获得含有阿考替胺氢溴酸盐粗品的第三混合物；将所述第三混合物溶解在含水的有机溶剂中，加热溶解后缓慢降温析晶，以便获得阿考替胺氢溴酸盐水合物晶体的第四混合物；以及从所述第四混合物中分离所述晶体，并在20～90℃对所分离的晶体进行加热，以便获得阿考替胺氢溴酸盐一水合物Ⅰ晶型。

另外，根据本发明上述实施例的方法还可以具有如下附加的技术特征：

根据本发明的实施例，所述有机溶剂为选自甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、丙酮、叔丁基甲醚、甲基四氢呋喃的至少一种，优选甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、丙酮、叔丁基甲醚中的至少一种，最优选甲醇、乙醇、异丙醇的至少一种。

根据本发明的实施例，所述成盐溶剂为氢溴酸水溶液。

根据本发明的实施例，基于所述氢溴酸水溶液的总重量，所述氢溴酸的含量为10％～40％重量，氢溴酸的含量优选为30％～40％重量。

根据本发明的实施例，所述成盐反应温度为30～100℃，优选50～80℃，最优选70～80℃。

根据本发明的实施例，所述含水的有机溶剂中溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、四氢呋喃、丙酮中至少一种，优选甲醇、乙醇、异丙醇、四氢呋喃，最优选甲醇、乙醇、异丙醇的至少一种。所述的有机溶剂中有机溶剂体积比为10％～90％体积，优选为40％～90％体积，最优选为60％～90％体积。

根据本发明的具体实施例，从所述第四混合物中分离所述晶体后，优选在20～70℃对所分离的晶体进行加热，最优选在30～60℃对所分离的晶体进行加热。由此可以进一步获得高纯度阿考替胺氢溴酸盐水合物Ⅰ晶型。

与现有技术相比，本发明的优点在于：制备一种没有文献报道的阿考替胺氢溴酸盐一水合物，并且经过XRD数据显示其为没有文献报道的晶型化合物，该化合物能够稳定存在，因此可以作为一种新的阿考替胺药用酸盐。

本发明附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

附图说明

本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：

图1为根据本发明实施例的阿考替胺氢溴酸盐一水合物的高效液相图谱；

图2为根据本发明实施例的阿考替胺氢溴酸盐一水合物(Ⅰ晶型)的DSC图；

图3为根据本发明实施例的阿考替胺氢溴酸盐一水合物的氢谱；

图4为根据本发明实施例的阿考替胺氢溴酸盐一水合物(Ⅰ晶型)的X射线衍射图；

图5为根据本发明实施例的阿考替胺盐酸盐三水合物(Ⅰ晶型)的DSC图。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例，需要说明的是下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。另外，如果没有明确说明，在下面的实施例中所采用的所有试剂均为市场上可以购得的，或者可以按照文本或已知的方法合成的，对于没有列出的反应条件，也均为本领域技术人员容易获得的。

一般方法

参照下式，在下列实施例中，制备阿考替胺氢溴酸盐水合物的方法主要包括以下步骤：

(1)称取游离态阿考替胺，加入有机溶剂加热溶解后加入成盐溶剂，搅拌，自然冷却；

(2)过滤，滤饼用有机溶剂洗涤，烘干，得阿考替胺氢溴酸盐粗品；

(3)将阿考替胺粗品溶解在含水的有机溶剂中，加热溶解后缓慢降温析晶，搅拌，过滤，在20～90℃范围内对所分离的晶体进行加热，得到阿考替胺氢溴酸盐一水合物的Ⅰ晶型。

本发明专利的具体实施例如下：

实施例1阿考替胺氢溴酸盐水合物的合成

步骤(1)阿考替胺氢溴酸盐粗品的制备

取3.0g游离态阿考替胺，加入30ml异丙醇，加热至50℃溶解。在此温度下，加入4g，35％氢溴酸水溶液，搅拌5h，自然冷却至15℃。过滤，滤饼用20ml异丙醇洗涤。在50℃条件下烘干。最终得到2.7g阿考替胺氢溴酸盐粗品。

步骤(2)阿考替胺氢溴酸盐的精制

取上述制备的阿考替胺氢溴酸粗品2.6g，加入25ml体积比为60％异丙醇水溶液，加热至70℃溶解。搅拌4h。过滤，滤饼用10ml异丙醇洗涤。然后在40℃条件下干燥4h。最终得到2.4g阿考替胺氢溴酸水合物。HPLC分析纯度为99.5％，HPLC图谱见图1所示。水分KF值3.33％，经DSC-TGA图谱分析，其在74.8℃左右有吸热峰，失重3.11％，为一分子水，在184.9℃左右熔化，如图2所示。

制备的为阿考替胺氢溴酸一水合物。

目标产物¹H-NMR(400MHz DMSO-d6)：δ1.30-1.33(m，12H)，3.20-3.25(m，2H)，3.56-3.61(m，2H)，3.67-3.70(t，2H)，3.77-3.84(ss，6H)，6.69-6.70(s，1H)，7.51-7.52(s，1H)，7.91-7.95(s，1H)，8.63-8.68(m，2H)，11.68-11.69(s，1H)，11.74-11.76(s，1H)，如图3所示。

经XRD分析，所制备的样品在约6.26±0.2、9.64±0.2、10.94±0.2、12.51±0.2、14.22±0.2、15.05±0.2、16.36±0.2、16.77±0.2、17.84±0.2、19.30±0.2、20.33±0.2、20.60±0.2、22.91±0.2、23.75±0.2、24.46±0.2和26.08±0.2(2θ)处有关键的吸收峰。为Ⅰ晶型，如图4所示。

实施例2阿考替胺氢溴酸盐水合物的合成

步骤(1)阿考替胺氢溴酸盐的制备

取30g游离态阿考替胺，加入300ml异丙醇，加热至70℃溶解。在此温度下，加入35g40％氢溴酸水溶液，搅拌5h，自然冷却至15℃。过滤，滤饼用100ml异丙醇洗涤。在70℃条件下烘干。最终得到28.8g阿考替胺氢溴酸盐粗品。

步骤(2)阿考替胺氢溴酸盐水合物的制备

取上述制备的阿考替胺氢溴酸粗品28.8g，加入300ml体积比为80％异丙醇水溶液，加热至70℃溶解。搅拌4h。过滤，滤饼用100ml异丙醇洗涤。然后在40℃条件下干燥4h。最终得到24g阿考替胺氢溴酸水合物。纯度99.5％，水分KF值3.33％，经DSC-TGA图谱分析，制备的为阿考替胺氢溴酸一水合物。经XRD分析，所制备的样品为Ⅰ晶型。

实施例3阿考替胺氢溴酸盐水合物理化性质

实施例2中所得阿考替胺氢溴酸盐一水合物测熔点。测量仪器为VRR型熔点仪，测定值为182.6-186.6℃。

将实施例2中得到的样品做DSC-TGA检测，谱图如附图4：阿考替胺盐酸酸水合物样品在DSC(TGA)图中显示其74.8℃左右有吸热峰，失重3.11％，为一分子水，184.9℃左右熔化。由经可以确定该样品中含有1个结晶水，且纯度较高。

实施例4阿考替胺氢溴酸一水合物在高湿和高温条件下的稳定性以及和阿考替胺盐酸盐一水合物、三水合物在高湿和高温条件下的稳定性对比

实施例2中所得阿考替胺氢溴酸水合物经测定为一水合物。然后将该样品分别放置在高温和高湿条件下考察其稳定性，该实施例中高湿气环境为放有饱和氯化钠水溶液的干燥器。高温环境为60℃鼓风干燥箱。

表1阿考替胺氢溴酸一水合物在高湿环境(25℃，湿度75％)下水含量的变化

放置时间	水分KF值	水合物类型
			0day	3.33％	一水合物
2day	3.58％	一水合物
			7day	3.30％	一水合物
14day	3.47％	一水合物

表2阿考替胺氢溴酸一水合物在高温环境(60℃，湿度＜40％)下水含量的变化

放置时间	水分KF值	水合物类型
			0h	3.47％	一水合物
5h	3.56％	一水合物
			18h	3.23％	一水合物
20h	3.35％	一水合物

从表中可以得知，所制备的阿考替胺氢溴酸一水合物在高温和高湿条件下均能够稳定存在。

阿考替胺盐酸盐一水合物和三水合物在在高湿和高温条件下的稳定性

根据日本泽里新药株式会社公布的工艺专利CN101006040B中指明的工艺条件，我们制备出阿考替胺盐酸盐一水合物和阿考替胺盐酸盐三水合物，该实施例中高湿气环境为放有饱和氯化钠水溶液的干燥器。高温环境为60℃鼓风干燥箱。

表3阿考替胺盐酸盐一水合物在高湿环境下水含量的变化

放置时间	水分KF值	水合物类型
			0day	3.6％	一水合物
4day	9.70％	一水合物
			15day	9.85％	一水合物
30day	10.03％	一水合物

表4阿考替胺盐酸盐三水合物在高温环境下水含量的变化

放置时间	水分KF值	水合物类型
			0h	10.03％	三水合物
5h	6.54％	三水合物
			18h	4.30％	三水合物
20h	3.30％	三水合物

从表中可以得知，所制备的阿考替胺盐酸盐存在一水合物、二水合物和三水合物，而三水合物在高湿条件下稳定，但在高温条件下不稳定，因此，制备稳定的阿考替胺盐酸盐三水合物将会加大生产技术和设备的要求。而阿考替胺氢溴酸一水合物在高温和高湿条件下能够稳定存在。相比而言，阿考替胺氢溴酸一水合物更加具有优势。

实施例5阿考替胺氢溴酸盐一水合物和阿考替胺盐酸盐三水合物热差热重分析

将实施例1中得到的样品做DSC-TGA检测，谱图如附图4：从图谱上来看，所制备的样品为一水合物，其在74.8℃左右有吸热峰，失重3.11％，后续基本没有失重变化，表明其含有一分子水，在184.9℃左右熔化。

将实施例4中得到的样品做DSC-TGA检测，谱图如附图5：从图谱上来看，所制备的样品为三水合物，其在70℃左右有吸热峰，失重6.48％，表明其含有两分子水，在122.1-143.6℃有吸热峰，失重3.27％，表明其含有一分子水，在152.6-167.0℃熔化。

实施例6大鼠口服阿考替胺氢溴酸盐的药代动力学

受试原料：实施例1合成的阿考替胺氢溴酸盐一水合物和我们合成的盐酸阿考替胺三水合物

分组给药

选用Wistar大鼠40只，按体重分为4组，每组10只，雌雄兼用，禁食16h，各组分别口服灌胃阿考替胺氢溴酸盐水合物和盐酸阿考替胺三水合物，剂量为20mg/kg。分别，分别给药后0.5、1、2、4、6、8、12、18、24、36、48、60h眼框取血，分离血清，-20℃保存待测

色谱条件

固定相：DiamonsilTM C18柱，10μm，250×4.6mm(I.D.)，柱温30℃。

流动相：甲醇∶水＝70∶30，流速：1ml/min。

检测波长：215nm，灵敏度：0.005AUFS。

进样量：20μl。

血样处理

取大鼠血清200μl，加入内标(阿考替胺200μg/ml)10μl，混匀后加入DMF(N、N-二甲基甲酰胺)200μl，振荡10min，放置30分钟，以10000转/min的速度离心10min，取上清液20μl进样。

血药浓度测定

测定标准曲线后，得出直线回归方程(y＝ax+b)。测定大鼠给药后血样所得峰面积的比值，根据直线回归方程计算出血药浓度，并经3P97药代计算程序计算药代参数。

仪器

HPLC测试***：岛津SPD-10AUv检测器，Hi-Tech P4000高压泵，Lab Alliance-AS1000自动进样器，ANASTAR色谱工作站。

HT-230A柱温箱：天津市恒奥科技发展有限公司生产。

TGL-16G台式高速离心机：上海安亭科学仪器厂制造。

WX-80A微型旋涡混合仪：上海沪西分析仪器厂生产。

研究结果

注：表中数据为平均数±标准差(n＝6)。

结论：大鼠口服阿考替胺氢溴酸盐一水合物原料后的药代动力学研究表明，大鼠口服灌胃20mg/kg的考替胺氢溴酸盐一水合物，从药代参数可见，各个参数之间存在一定差异，但基本都在同一个数量级范围内，可以用于开发成新的药物，而且此结构稳定，在动物体内的吸收、消除基本一致。

因此，本发明实施例1制备得到的阿考替胺氢溴酸盐在制备治疗功能性消化不良药物方面显现出较高的生物活性,为后续药物开发提供广阔空间。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (10)

1.一种阿考替胺氢溴酸盐水合物的Ⅰ晶型，其特征在于，所述Ⅰ晶型的X射线粉末衍射图在6.26°±0.2°、9.64±0.2°、10.94°±0.2°、12.51°±0.2°、14.22°±0.2°、15.05°±0.2°、16.36°±0.2°、16.77°±0.2°、17.84°±0.2°、19.30°±0.2°、20.33°±0.2°、20.60°±0.2°、22.91°±0.2°、23.75°±0.2°、24.46°±0.2°和26.08°±0.2°(2θ)出现X射线衍射峰。 

2.根据权利要求1所述的阿考替胺氢溴酸盐水合物的Ⅰ晶型，其特征在于，所述Ⅰ晶型为阿考替胺氢溴酸盐一水合物，所述阿考替胺氢溴酸盐一水合物在74.8℃左右有吸热峰，失重3.11％，为一分子水，在184.9℃左右熔化。 

3.根据权利要求1所述的阿考替胺氢溴酸盐水合物的Ⅰ晶型，其特征在于，含有至少99.5％重量的阿考替胺氢溴酸盐水合物， 

任选地，含有0.5％重量以下的式I所示化合物 

4.权利要求1-3任一项所述的阿考替胺氢溴酸盐水合物的Ⅰ晶型在制备药物中的用途，所述药物用于治疗功能性消化不良。 

5.一种制备权利要求1-3任一项所述的阿考替胺氢溴酸盐水合物的Ⅰ晶型的方法，其特征在于，包括： 

将阿考替胺与有机溶剂混合，以便获得含有阿考替胺和有机溶剂的第一混合物； 

将所述第一混合物中加入成盐溶剂进行成盐反应，以便获得含有阿考替胺氢溴酸盐的第二混合物； 

将所述第二混合物过滤，滤饼用有机溶剂洗涤，干燥，以便获得含有阿考替胺氢溴酸盐粗品的第三混合物； 

将所述第三混合物溶解在含水的有机溶剂中，加热溶解后缓慢降温析晶，以便获得阿考替胺氢溴酸盐水合物晶体的第四混合物；以及从所述第四混合物中分离所述晶体，并在20～90℃对所分离的晶体进行加热，以便获得所述阿考替胺氢溴酸盐水合物的Ⅰ晶型， 

任选地所述阿考替胺氢溴酸盐水合物的Ⅰ晶型为阿考替胺氢溴酸盐一水合物。 

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂为选自甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、丙酮、叔丁基甲醚、甲基四氢呋喃的至少一种，优选甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、丙酮、叔丁基甲醚中的至少一种，最优选甲醇、乙醇、异丙醇的至少一种。 

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述成盐溶剂为氢溴酸水溶液。 

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述氢溴酸水溶液的浓度为10％～40％重量，优选浓度为30％～40％重量。 

9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述成盐反应的温度为30～100℃，优选50～80℃，最优选70～80℃。 

10.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述含水的有机溶剂中有机溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、四氢呋喃、丙酮中至少一种，优选甲醇、乙醇、异丙醇、四氢呋喃，最优选甲醇、乙醇、异丙醇的至少一种， 

任选地，所述的含水的有机溶剂中有机溶剂占10％～90％体积，优选占40％～90％体积，最优选占60％～90％体积。