CN104059028B - 与Aβ斑块具有亲和力的含手性侧链取代的氟代2-芳基苯并杂环化合物、其制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种与Aβ斑块具有亲和力的含手性侧链取代的氟代2‑芳基苯并杂环化合物，所述化合物的结构通式如式(I)所示：
Figure DDA0000516715290000011
其中，X为N；Y为S或O；Z为N或CH；R1为5位或6位取代基，R1为
Figure DDA0000516715290000012
F为19F或18F；R2为NHCH3或N(CH3)2。本发明所述化合物与Aβ斑块具有很高的亲和力，可以制备成相应放射性核素标记的探针，用于阿尔茨海默症的早期诊断。

Description

与Aβ斑块具有亲和力的含手性侧链取代的氟代2-芳基苯并杂 环化合物、其制备方法及应用
技术领域
本发明涉及一种与Aβ斑块具有亲和力的含手性侧链取代的氟代2-芳基苯并杂环化合物、其制备方法及应用。
背景技术
阿尔茨海默症(Alzheimer's Disease，AD)是一种进行性发展的致死性神经退行性疾病，临床表现为认知和记忆功能下降，日常生活能力减退，并伴有各种神经精神症状和行为障碍。AD已成为继肿瘤、心脏病和中风之后，严重威胁老年人身心健康的主要疾病。统计资料显示，我国AD的患病率在65岁以上人群中平均为6.6％，发病率随年龄的增长而增加，75-80岁为11％，80岁以上高达22％。目前，我国正在快速步入老龄化社会，预计到2050年，我国60岁及以上老人占比将超过30％。因此，AD的防治工作任务艰巨，研究AD的早期诊断方法具有极其重要的意义。
AD脑内沉积在神经细胞外的老年斑(SPs)和神经细胞内的神经纤维缠结(NFTs)是AD的两大主要病理特征，但其确切的致病机理目前尚不清楚(Hardy J et al.Science.,2002,297:353-356)。研究表明，脑内的Aβ斑块沉积在AD发病前10-20年就已经开始(Braak,H et al.Acta Neuropathol.,1991,82:239-259)。目前，临床上还很难准确诊断AD，主要通过评价病人的认知功能损伤来诊断。AD的确诊只能通过病人死后尸检脑内的SPs和NFTs来判断。因此，尽管目前AD病因还不明确，但利用脑内的Aβ斑块为靶点，开发与之具有高亲和性和选择性的分子探针，通过正电子发射断层(PET)扫描显像，可以灵敏、无创伤的从分子水平上早期诊断AD(Cai L S et al.Curr Med Chem.,2007,14:19-52)。
在过去10年里，已经有不少正电子Aβ分子探针进入了临床试验阶段，如C-11标记的PIB是目前使用最为广泛的Aβ显像剂，它可以明显的区分正常人和AD病 人(Klunk W Eet al.Annals of Neurology.,2004,55:306-319)。然而，C-11核素短半衰期(20.4min)的性质限制了其在临床上的应用。因此，采用长半衰期核素F-18标记的Aβ显像剂是目前发展的趋势，如PIB的类似物[18F]GE-067(Koole M et al.Journal of Nuclear Medicine.,2009,50:818-22)以及二苯乙烯衍生[18F]AV-45(Wong D F et al.Journal of NuclearMedicine.,2010,51:913-20)目前均已被FDA批准，进入了商业开发阶段。
发明内容
本发明的目的是提供一种与AD病人脑部Aβ斑块具有高亲和力的含手性侧链取代的2-芳基苯并杂环化合物、其制备方法及应用。
为了实现本发明目的，本发明的一种与Aβ斑块具有亲和力的含手性侧链取代的氟代2-芳基苯并杂环化合物，所述化合物的结构通式如式(I)所示：
Figure BDA0000516715270000021
其中，
X为N；Y为S或O；Z为N或CH；
R1为5位或6位取代基，R1为
Figure BDA0000516715270000022
F为19F或18F；
R2为NHCH3或N(CH3)2。
本发明还提供式(I)所示化合物的制备方法，当R1中F为19F时，所述化合物的制备方法包括以下步骤：
(1)将1mmol
Figure BDA0000516715270000023
与1.5mmol
Figure BDA0000516715270000024
以及3mmolK2CO3和催化剂量的18-crown-6溶于30mL无水丙酮中，在80℃油浴条件下搅拌回流反应；反应完毕后，除去溶剂丙酮，经柱层析分离得到如式(II)或式(III)所示的化合物：
Figure BDA0000516715270000025
(2)将0.2mmol式(II)或式(III)所示化合物溶于15mL甲苯中，向其中加入含 1MTBAF的THF溶液1mL，在80℃油浴条件下搅拌回流反应；反应完毕后，除去溶剂，用CH2Cl2萃取后，最后经柱层析分离得到如式(IV)或式(V)所示的化合物：
Figure BDA0000516715270000031
其中，X为N；Y为S或O；Z为N或CH；R为NHCH3或N(CH3)2。
前述的化合物，当R1中F为18F，且R2为N(CH3)2时，所述化合物的制备方法包括以下步骤：
(1)将1mmol
Figure BDA0000516715270000032
溶于30mL无水乙醇中，向其中加入200g/LNaOH溶液0.3mL，在80℃油浴条件下搅拌回流反应1h后，向其中加入1.5mmol
Figure BDA0000516715270000033
反应完毕后，除去溶剂，经柱层析分离得到如式(VI)或式(VII)所示的化合物：
Figure BDA0000516715270000034
(2)当R为NHCH3时，将1mmol式(VI)或式(VII)所示化合物、8mmol咪唑以及8mmol叔丁基二甲基氯硅烷溶于30mL CH2Cl2溶液中，在40℃油浴条件下搅拌回流反应5h，反应完毕后除去CH2Cl2，经柱层析分离得到如式(VIII)或式(IX)所示的化合物：
Figure BDA0000516715270000035
(3)将1mmol式(VIII)或式(IX)所示化合物溶于30mL THF溶液中，向其中加入过量的(Boc)2O,在80℃油浴条件下搅拌回流反应过夜，反应完毕后除去THF，经柱层析分离得到如式(X)或式(XI)所示的化合物：
Figure BDA0000516715270000036
Figure BDA0000516715270000041
(4)将1mmol式(X)或式(XI)所示化合物溶于30mL THF溶液中，向其中加入7mmolTBAF，在30℃油浴条件下搅拌回流反应过夜，反应完毕后除去THF，经柱层析分离得到如式(XII)或式(XIII)所示的化合物：
Figure BDA0000516715270000042
(5)将1mmol式(VI)或式(VII)所示化合物(R＝NMe2)以及1mmol式(XII)或式(XIII)所示化合物分别溶于5mL吡啶溶液中，向其中加入1.5mmol TsCl，在0℃冰浴条件下搅拌反应，反应完毕后除去吡啶，经柱层析分离得到如式(XIV)或式(XV)所示的化合物：
Figure BDA0000516715270000043
其中，R为N(CH3)2；
(6)将1mmol式(XIV)或式(XV)所示化合物、4mmol3,4-dihydro-2H-pyran以及0.2mmol PPTS分别溶于30mL CH2Cl2溶液中，在40℃油浴条件下搅拌回流反应过夜，反应完毕后除去CH2Cl2，经柱层析分离得到如式(XVI)或式(XVII)所示的化合物：
Figure BDA0000516715270000044
(7)将10mg式(XVI)或式(XVII)所示化合物加入2mL乙腈溶解。将其加入到已除水的具有一定活度的含K222/K2CO3的18F-的反应管中，于100℃标记12min，冷却后加入1MHCl0.15mL，涡旋后继续反应5min中，冷却后加入少量水用NaHCO3中和至偏碱性，最后过C18反相柱用水冲洗除去盐和剩余的18F-，然后用乙腈淋洗，N2吹干后，用HPLC分离得到如式(XVI)或式(XVII)所示的化合物：
Figure BDA0000516715270000051
本发明还提供所述化合物在制备Aβ斑块显像剂中的应用，其中式(I)所示的化合物中，F为18F。
本发明首次提供一类新结构含手性侧链取代的2-芳基苯并杂环化合物，体外竞争结合实验表明，该类分子与Aβ1-42聚集体的亲和力较高；正常小鼠体内生物分布实验表明，部分F-18标记的显像剂具有初始脑摄取高，清除快的优点。有望成为一种新的用于临床显像的正电子Aβ斑块显像剂。
附图说明
图1为本发明含手性侧链取代的2-芳基苯并杂环类化合物的合成示意图；其中，a表示K2CO3、18-crown-6和丙酮，回流；b表示TBAF和甲苯，回流。
图2为本发明含光学纯手性侧链取代的2-芳基苯并杂环类化合物F-18标记中间体的制备路线图；其中，a表示NaOH、EtOH和H2O，90℃；b表示TBDMSCl、CH2Cl2和咪唑；c表示(Boc)2O和THF，回流；d表示TBAF和THF，回流；e表示TsCl和吡啶；f表示PPTS、CH2Cl2和3,4-dihydro-2H-pyran，回流。
图3为本发明F-18标记化合物的制备路线图；其中，a表示18F-、K2CO3、Kryptofix-2.2.2和乙腈，反应温度100℃；b表示HCl(1M)，反应温度100℃。
图4为本发明实施例84中制备的化合物[18F]29s与AD病人及AD转基因小鼠脑切片的放射自显影图片。
图5为本发明实施例83中制备的化合物[18F]29r与AD病人及AD转基因小鼠脑切片的放射自显影图片。
图4和图5中：A是AD病人脑切片；B是AD转基因小鼠脑切片；C是正常人脑切片；D是正常小鼠脑切片。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市 售商品。
含手性侧链取代的2-芳基苯并杂环类化合物的合成。合成反应式如图1所示，本发明以下实施例中的化合物编号与图1所示反应式中编号统一。
含光学纯手性侧链取代的2-芳基苯并杂环类化合物F-18标记中间体的制备路线如图2所示。
实施例1合成中间体8r
将化合物1(257.2mg,1.0mmol)、K2CO3(435.0mg,3.2mmol)以及催化剂量的18-crown-6溶于60mL丙酮溶液中，向其中加入化合物7r(139.0mg,1.5mmol)，将上述混合物在80℃油浴条件下搅拌回流反应12h，反应完毕后，除去丙酮，经柱层析分离得到35.0mg中间体8r，结构如下，产率11.2％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.87(d,J＝8.7Hz,2H),7.86(d,J＝9.0Hz,1H),7.35(d,J＝2.5Hz,1H),7.06(dd,J＝8.9,2.6Hz,1H),6.64(d,J＝8.7Hz,2H),4.29(dd,J＝11.0,3.1Hz,1H),4.03(dd,J＝11.0,5.7Hz,1H),3.42–3.37(m,1H),2.95–2.93(m,1H),2.91(s,3H),2.79(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd forC17H16N2O2S312.09,found313.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000061
实施例2 合成中间体8s
由化合物1反应制得中间体8s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率23.0％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.87(d,J＝8.7Hz,2H),7.86(d,J＝8.9Hz,1H),7.34(d,J＝2.5Hz,1H),7.06(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.64(d,J＝8.7Hz,2H),4.29(dd,J＝11.0,3.1Hz,1H),4.02(dd,J＝11.0,5.7Hz,1H),3.41–3.36(m,1H),2.94–2.91(m,1H),2.90(s,3H),2.78(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd for C17H16N2O2S312.09,found313.1(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000062
实施例3合成中间体9r
由化合物2反应制得中间体9r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与 实施例1相同，产率16.4％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(d,J＝8.8Hz,2H),7.87(d,J＝8.9Hz,1H),7.34(d,J＝2.5Hz,1H),7.06(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.74(d,J＝8.9Hz,2H),4.29(dd,J＝11.0,3.1Hz,1H),4.02(dd,J＝11.0,5.7Hz,1H),3.42–3.37(m,1H),3.05(s,6H),2.93(t,J＝4.5Hz,1H),2.79(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd for C18H18N2O2S326.11,found327.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000071
实施例4合成中间体9s
由化合物2反应制得中间体9s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率34.0％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(d,J＝8.9Hz,2H),7.87(d,J＝8.9Hz,1H),7.34(d,J＝2.5Hz,1H),7.06(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.74(d,J＝8.9Hz,2H),4.29(dd,J＝11.0,3.1Hz,1H),4.02(dd,J＝11.0,5.7Hz,1H),3.42–3.37(m,1H),3.05(s,3H),2.93(t,J＝4.6Hz,1H),2.78(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd for C18H18N2O2S326.11,found327.1(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000072
实施例5合成中间体10r
由化合物3反应制得中间体10r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率38.3％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.71(d,J＝2.1Hz,1H),8.12(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),7.88(d,J＝8.9Hz,1H),7.35(d,J＝2.5Hz,1H),7.09(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.48(d,J＝8.8Hz,1H),5.06(d,J＝4.2Hz,1H),4.31(dd,J＝11.0,3.0Hz,1H),4.02(dd,J＝11.0,5.8Hz,1H),3.43–3.39(m,1H),3.01(d,J＝5.1Hz,3H),2.94(t,J＝4.5Hz,1H),2.80(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/zcalcd for C16H15N3O2S313.09,found314.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000073
实施例6合成中间体10s
由化合物3反应制得中间体10s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与 实施例1相同，产率31.6％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.71(d,J＝2.1Hz,1H),8.12(dd,J＝8.8,2.2Hz,1H),7.88(d,J＝8.9Hz,1H),7.36(d,J＝2.4Hz,1H),7.09(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.48(d,J＝8.8Hz,1H),5.05(d,J＝4.0Hz,1H),4.32(dd,J＝11.0,3.0Hz,1H),4.02(dd,J＝11.0,5.8Hz,1H),3.43–3.38(m,1H),3.01(d,J＝5.1Hz,3H),2.95(t,J＝4.5Hz,1H),2.80(dd,J＝4.8,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/zcalcd for C16H15N3O2S313.09,found314.1(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000081
实施例7合成中间体11r
由化合物4反应制得中间体11r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率58.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.76(d,J＝2.3Hz,1H),8.13(dd,J＝8.9,2.2Hz,1H),7.87(d,J＝8.9Hz,1H),7.35(d,J＝2.4Hz,1H),7.08(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),6.59(d,J＝9.0Hz,1H),4.31(dd,J＝11.0,3.0Hz,1H),4.01(dd,J＝11.0,5.7Hz,1H),3.43–3.38(m,1H),3.18(s,6H),2.94(t,J＝4.5Hz,1H),2.80(dd,J＝4.8,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd for C17H17N3O2S327.10,found328.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000082
实施例8合成中间体11s
由化合物4反应制得中间体11s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率70.7％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.76(d,J＝2.3Hz,1H),8.13(dd,J＝9.0,2.4Hz,1H),7.87(d,J＝8.9Hz,1H),7.35(d,J＝2.5Hz,1H),7.08(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.59(d,J＝9.0Hz,1H),4.31(dd,J＝11.0,3.0Hz,1H),4.01(dd,J＝11.0,5.8Hz,1H),3.43–3.38(m,1H),3.18(s,6H),2.95(t,J＝4.5Hz,1H),2.80(dd,J＝4.8,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd for C17H17N3O2S327.10,found328.1(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000083
实施例9合成中间体12r
由化合物5反应制得中间体12r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率55.3％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.02(d,J＝8.8Hz,2H),7.56(d,J＝8.7Hz,1H),7.10(d,J＝2.3Hz,1H),6.93(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),6.66(d,J＝8.8Hz,2H),4.29(dd,J＝11.0,3.1Hz,1H),4.00(dd,J＝11.0,5.7Hz,1H),3.42–3.38(m,1H),2.99–2.93(m,1H),2.92(s,3H),2.80(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd for C17H16N2O3296.12,found297.0(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000091
实施例10合成中间体12s
由化合物5反应制得中间体12s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率51.9％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03(d,J＝8.8Hz,2H),7.57(d,J＝8.7Hz,1H),7.11(d,J＝2.4Hz,1H),6.93(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),6.67(d,J＝8.8Hz,2H),4.29(dd,J＝11.0,3.1Hz,1H),4.01(dd,J＝11.0,5.7Hz,1H),3.43–3.38(m,1H),2.97–2.93(m,1H),2.92(s,3H),2.80(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd for C17H16N2O3296.12,found296.9(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000092
实施例11合成中间体13r
由化合物6反应制得中间体13r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率43.5％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(d,J＝9.0Hz,2H),7.57(d,J＝8.7Hz,1H),7.11(d,J＝2.3Hz,1H),6.93(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),6.77(d,J＝9.0Hz,2H),4.29(dd,J＝11.0,3.1Hz,1H),4.01(dd,J＝11.0,5.7Hz,1H),3.43–3.38(m,1H),3.07(s,6H),2.98–2.91(m,1H),2.80(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd for C18H18N2O3310.13,found310.8(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000093
实施例12合成中间体13s
由化合物6反应制得中间体13s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率28.1％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(d,J＝8.7Hz,2H),7.57(d,J＝8.6Hz,1H),7.11(d,J＝1.7Hz,1H),6.93(dd,J＝8.6,1.8Hz,1H),6.77(d,J＝8.7Hz,2H),4.29(dd,J＝10.9,2.7Hz,1H),4.01(dd,J＝10.9,5.7Hz,1H),3.43–3.38(m,1H),3.07(s,6H),2.95(t,J＝4.4Hz,1H),2.88–2.73(m,1H),MS(ESI):m/z calcd for C18H18N2O3310.13,found310.8(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000101
实施例13合成目标化合物14s
将中间体8r(54.1mg,0.17mmol)溶于15mL甲苯溶液中，向其中加入TBAF的THF溶液(1mL，1.0mmol)，将上述混合物在80℃油浴条件下搅拌回流反应12h，反应完毕后，除去甲苯，残余物经柱层析分离得到8.4mg目标化合物14s，结构如下，产率14.9％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.77(d,J＝9.0Hz,1H),7.74(d,J＝8.7Hz,2H),7.62(d,J＝2.4Hz,1H),7.05(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),6.62(d,J＝8.7Hz,2H),5.47(d,J＝4.8Hz,1H),4.59–4.50(m,1H),4.47–4.39(m,1H),4.09–3.98(m,3H),2.73(d,J＝4.8Hz,3H),HRMS(EI):m/z calcdfor C17H18N2O2FS333.1073；found333.1072(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000102
实施例14合成目标化合物14r
由化合物8s反应制得目标化合物14r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率7.4％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.77(d,J＝9.0Hz,1H),7.74(d,J＝8.8Hz,2H),7.62(d,J＝2.4Hz,1H),7.05(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.62(d,J＝8.7Hz,2H),5.47(d,J＝5.1Hz,1H),4.60–4.50(m,1H),4.47–4.39(m,1H),4.09–4.01(m,3H),2.73(d,J＝4.9Hz,3H),HRMS(EI):m/z calcd for C17H18N2O2FS333.1073,found333.1079(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000111
实施例15合成目标化合物15s
由中间体9r反应制得目标化合物15s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率5.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(d,J＝8.8Hz,2H),7.88(d,J＝9.0Hz,1H),7.33(d,J＝2.4Hz,1H),7.04(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.74(d,J＝8.8Hz,2H),4.72–4.64(m,1H),4.60–4.52(m,1H),4.35–4.24(m,1H),4.17–4.10(m,2H),3.05(s,6H),HRMS(EI):m/z calcd for C18H20N2O2FS347.1230,found347.1234(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000112
实施例16合成目标化合物15r
由中间体9s反应制得目标化合物15r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率14.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(d,J＝8.8Hz,2H),7.88(d,J＝8.9Hz,1H),7.33(d,J＝2.4Hz,1H),7.04(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.74(d,J＝8.9Hz,2H),4.72–4.64(m,1H),4.61–4.52(m,1H),4.35–4.24(m,1H),4.15–4.13(m,2H),3.05(s,6H),HRMS(EI):m/z calcd for C18H20N2O2FS347.1230,found347.1223(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000113
实施例17合成目标化合物16s
由中间体10r反应制得目标化合物16s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率21.0％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.71(d,J＝1.8Hz,1H),8.12(dd,J＝8.8,2.2Hz,1H),7.88(d,J＝8.9Hz,1H),7.35(d,J＝2.4Hz,1H),7.07(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.48(d,J＝8.8Hz,1H),5.04(s,1H),4.73–4.65(m,1H),4.61–4.53(m,1H),4.36–4.25(m,1H),4.17–4.15(m,2H),3.01(d,J＝5.1 Hz,3H),HRMS(EI):m/z calcd forC16H17N3O2FS334.1026,found334.1033(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000121
实施例18合成目标化合物16r
由中间体10s反应制得目标化合物16r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率14.1％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.68(d,J＝2.0Hz,1H),8.15(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),7.88(d,J＝8.9Hz,1H),7.36(d,J＝2.5Hz,1H),7.08(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.51(d,J＝8.8Hz,1H),5.27(s,1H),4.73–4.68(m,1H),4.61–4.54(m,1H),4.34–4.27(m,1H),4.17–4.15(m,2H),3.01(d,J＝5.1Hz,3H),HRMS(EI):m/z calcd forC16H17N3O2FS334.1026,found334.1022(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000122
实施例19合成目标化合物17s
由中间体11r反应制得目标化合物17s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率38.6％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.76(d,J＝2.0Hz,1H),8.14(d,J＝8.8Hz,1H),7.88(d,J＝8.9Hz,1H),7.35(d,J＝2.2Hz,1H),7.06(dd,J＝8.9,2.2Hz,1H),6.59(d,J＝9.0Hz,1H),4.73–4.65(m,1H),4.64–4.53(m,1H),4.33–4.28(m,1H),4.19–4.11(m,2H),3.19(s,6H),HRMS(EI):m/z calcd for C17H19N3O2FS348.1182,found348.1188(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000123
实施例20合成目标化合物17r
由中间体11s反应制得目标化合物17r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率35.7％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.76(s,1H),8.13 (d,J＝8.9Hz,1H),7.87(d,J＝8.9Hz,1H),7.35(d,J＝1.9Hz,1H),7.06(dd,J＝8.8,1.9Hz,1H),6.59(d,J＝9.0Hz,1H),4.73–4.65(m,1H),4.61–4.53(m,1H),4.34–4.26(m,1H),4.16–4.11(m,2H),3.19(s,6H),HRMS(EI):m/z calcd for C17H19N3O2FS348.1182,found348.1189(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000131
实施例21合成目标化合物18s
由中间体12r反应制得目标化合物18s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率62.4％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(d,J＝8.7Hz,2H),7.59(d,J＝8.7Hz,1H),7.08(d,J＝2.3Hz,1H),6.93(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),6.77(d,J＝8.4Hz,2H),4.75–4.64(m,1H),4.63–4.52(m,1H),4.39–4.25(m,1H),4.19–4.01(m,2H),2.94(s,3H)。
Figure BDA0000516715270000132
实施例22合成目标化合物18r
由中间体12s反应制得目标化合物18r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率51.4％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03(d,J＝8.8Hz,2H),7.57(d,J＝8.7Hz,1H),7.09(d,J＝2.3Hz,1H),6.91(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),6.68(d,J＝8.6Hz,2H),4.75–4.64(m,1H),4.63–4.52(m,1H),4.38–4.24(m,1H),4.19–4.06(m,2H),2.92(s,3H)。
Figure BDA0000516715270000133
实施例23合成目标化合物19s
由中间体13r反应制得目标化合物19s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率61.1％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(d,J＝8.9Hz,2H),7.58(d,J＝8.7Hz,1H),7.10(d,J＝2.3Hz,1H),6.92(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H), 6.78(d,J＝8.8Hz,2H),4.73–4.65(m,1H),4.62–4.53(m,1H),4.38–4.22(m,1H),4.17–4.07(m,1H),3.08(s,6H)。
Figure BDA0000516715270000141
实施例24合成目标化合物19r
由中间体13s反应制得目标化合物19r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率63.3％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(d,J＝8.5Hz,2H),7.58(d,J＝8.7Hz,1H),7.10(d,J＝2.3Hz,1H),6.92(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),6.78(d,J＝7.9Hz,2H),4.73–4.65(m,1H),4.62–4.53(m,1H),4.40–4.22(m,1H),4.19–4.06(m,1H),4.17–4.09(m,1H),3.07(s,6H)。
Figure BDA0000516715270000142
实施例25合成中间体24r
由化合物20反应制得中间体24r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率31.7％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(d,J＝8.8Hz,2H),7.40(d,J＝8.8Hz,1H),7.21(d,J＝2.5Hz,1H),6.91(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.67(d,J＝8.8Hz,2H),4.27(dd,J＝10.9,3.2Hz,1H),4.01(dd,J＝10.9,5.7Hz,1H),3.42–3.37(m,1H),2.93(s,3H),2.94–2.91(m,1H),2.79(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd for C17H16N2O3296.12,found297.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000143
实施例26合成中间体24s
由化合物20反应制得中间体24s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率16.2％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.04(d,J＝8.8Hz,2H),7.39(d,J＝8.8Hz,1H),7.20(d,J＝2.4Hz,1H),6.90(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.66(d,J＝8.8Hz,2H),4.26(dd,J＝10.9,3.2Hz,1H),4.00(dd,J＝10.9,5.7Hz,1H),3.42–3.37(m,1H),2.92(s,3H),2.94–2.90(m,1H),2.79(dd,J＝4.9,2.7Hz,1H), MS(ESI):m/z calcd for C17H16N2O3296.12,found297.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000151
实施例27合成中间体25r
由化合物21反应制得中间体25r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率52.9％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(d,J＝9.0Hz,2H),7.39(d,J＝8.8Hz,1H),7.21(d,J＝2.4Hz,1H),6.90(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.76(d,J＝9.0Hz,2H),4.26(dd,J＝10.9,3.2Hz,1H),4.01(dd,J＝10.9,5.6Hz,1H),3.42–3.37(m,1H),3.07(s,6H),2.92(t,J＝4.5Hz,1H),2.79(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd forC18H18N2O3310.13,found311.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000152
实施例28合成中间体25s
由化合物21反应制得中间体25s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率72.9％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(d,J＝9.0Hz,2H),7.39(d,J＝8.8Hz,1H),7.21(d,J＝2.4Hz,1H),6.90(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.76(d,J＝9.0Hz,2H),4.26(dd,J＝10.9,3.2Hz,1H),4.01(dd,J＝10.9,5.6Hz,1H),3.42–3.37(m,1H),3.07(s,6H),2.92(t,J＝4.5Hz,1H),2.79(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd forC18H18N2O3310.13,found311.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000153
实施例29合成中间体26r
由化合物22反应制得中间体26r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率34.6％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.93(d,J＝2.0Hz,1H),8.22(dd,J＝8.8,2.2Hz,1H),7.42(d,J＝8.8Hz,1H),7.21(d,J＝2.4Hz,1H),6.93(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.50(d,J＝8.8Hz,1H),5.18(s,1H),4.28(dd,J＝10.9,3.1Hz,1H),4.00(dd,J＝10.9,5.7Hz,1H),3.43–3.38(m,1H),3.02(d,J＝5.1Hz,3H),2.94(t,J＝4.5Hz,1H),2.80(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd for C16H15N3O3297.11,found298.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000161
实施例30合成中间体26s
由化合物22反应制得中间体26s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率33.3％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.93(d,J＝1.6Hz,1H),8.22(dd,J＝8.8,2.1Hz,1H),7.42(d,J＝8.8Hz,1H),7.21(d,J＝2.4Hz,1H),6.93(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.50(d,J＝8.9Hz,1H),5.19(s,1H),4.28(dd,J＝10.9,3.1Hz,1H),4.00(dd,J＝10.9,5.7Hz,1H),3.42–3.39(m,1H),3.02(d,J＝5.1Hz,3H),2.94(t,J＝4.5Hz,1H),2.80(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd for C16H15N3O3297.11,found298.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000162
实施例31合成中间体27r
由化合物23反应制得中间体27r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率71.7％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.98(d,J＝2.2Hz,1H),8.21(d,J＝9.0Hz,1H),7.42(d,J＝8.8Hz,1H),7.21(d,J＝2.4Hz,1H),6.92(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.61(d,J＝9.0Hz,1H),4.28(dd,J＝10.9,3.1Hz,1H),4.00(dd,J＝10.9,5.7Hz,1H),3.43–3.38(m,1H),3.21(s,6H),2.93(t,J＝4.5Hz,1H),2.80(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcdfor C17H17N3O3311.13,found312.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000163
实施例32合成中间体27s
由化合物23反应制得中间体27s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例1相同，产率61.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.87(d,J＝2.1Hz,1H),8.09(dd,J＝8.9,1.9Hz,1H),7.31(d,J＝8.8Hz,1H),7.09(d,J＝2.4Hz,1H),6.81(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.49(d,J＝9.0Hz,1H),4.17(dd,J＝10.9,3.1Hz,1H), 3.88(dd,J＝10.9,5.7Hz,1H),3.32–3.27(m,1H),3.09(s,6H),2.82(t,J＝4.5Hz,1H),2.69(dd,J＝4.8,2.6Hz,1H),MS(ESI):m/z calcd for C17H17N3O3311.13,found312.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000171
实施例33合成目标化合物28s
由由中间体24r反应制得制得目标化合物28s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率16.6％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.05(d,J＝8.6Hz,2H),7.40(d,J＝8.8Hz,1H),7.22(d,J＝2.1Hz,1H),6.88(dd,J＝8.8,2.1Hz,1H),6.67(d,J＝8.6Hz,2H),4.73–4.64(m,1H),4.61–4.52(m,1H),4.34–4.24(m,1H),4.16–4.09(m,2H),2.93(s,3H),HRMS(EI):m/z calcd for C17H18N2O3F317.1301；found317.1293(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000172
实施例34合成目标化合物28r
由中间体24s反应制得目标化合物28r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率31.3％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.05(d,J＝8.7Hz,2H),7.40(d,J＝8.8Hz,1H),7.22(d,J＝2.5Hz,1H),6.88(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.67(d,J＝8.8Hz,2H),4.72–4.64(m,1H),4.60–4.52(m,1H),4.34–4.24(m,1H),4.16–4.07(m,2H),2.92(s,3H).HRMS(EI):m/z calcd for C17H18N2O3F317.1301；found317.1295(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000173
实施例35合成目标化合物29s
由中间体25r反应制得目标化合物29s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率53.0％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(d,J＝8.5Hz,2H),7.40(d,J＝8.6Hz,1H),7.22(s,1H),6.87(d,J＝8.0Hz,1H),6.77(d,J＝8.3 Hz,2H),4.68–4.66(m,1H),4.57–4.54(m,1H),4.32–4.27(m,1H),4.13(s,2H),3.07(s,6H),HRMS(EI):m/z calcdfor C18H20N2O3F331.1458,found331.1448(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000181
实施例36合成目标化合物29r
由中间体25s反应制得目标化合物29r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率28.0％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(d,J＝8.6Hz,2H),7.40(d,J＝8.8Hz,1H),7.22(s,1H),6.88(d,J＝8.7Hz,1H),6.78(d,J＝8.6Hz,2H),4.72–4.64(m,1H),4.60–4.52(m,1H),4.33–4.25(m,1H),4.13(s,2H),3.08(s,6H),HRMS(EI):m/z calcd forC18H20N2O3F331.1458,found331.1454(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000182
实施例37合成目标化合物30s
由中间体26r反应制得目标化合物30s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率22.6％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.92(d,J＝1.6Hz,1H),8.23(dd,J＝8.8,1.7Hz,1H),7.43(d,J＝8.8Hz,1H),7.22(d,J＝2.3Hz,1H),6.91(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),6.51(d,J＝8.9Hz,1H),5.26(s,1H),4.74–4.65(m,1H),4.62–4.54(m,1H),4.34–4.27(m,1H),4.14–4.12(m,2H),3.02(d,J＝5.1Hz,3H),HRMS(EI):m/z calcd forC16H17N3O3F318.1254,found318.1251(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000183
实施例38合成目标化合物30r
由中间体26s反应制得目标化合物30r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率28.2％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.93(s,1H),8.21 (d,J＝8.8Hz,1H),7.42(d,J＝8.8Hz,1H),7.21(d,J＝2.0Hz,1H),6.90(dd,J＝8.8,2.2Hz,1H),6.49(d,J＝8.8Hz,1H),5.09(s,1H),4.73–4.64(m,1H),4.61–4.52(m,1H),4.35–4.24(m,1H),4.13(s,2H),3.01(d,J＝5.1Hz,3H),HRMS(EI):m/z calcd for C16H17N3O3F318.1254,found318.1246(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000191
实施例39合成目标化合物31s
由中间体27r反应制得目标化合物31s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率19.5％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.98(d,J＝1.8Hz,1H),8.20(dd,J＝9.0,2.0Hz,1H),7.42(d,J＝8.8Hz,1H),7.21(d,J＝2.3Hz,1H),6.89(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),6.60(d,J＝9.0Hz,1H),4.74–4.65(m,1H),4.62–4.53(m,1H),4.35–4.26(m,1H),4.16–4.09(m,2H),3.20(s,6H),HRMS(EI):m/z calcd for C17H19N3O3F332.1410,found332.1415(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000192
实施例40合成目标化合物31r
由中间体27s反应制得目标化合物31r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例13相同，产率29.2％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.00(d,J＝2.0Hz,1H),8.23(d,J＝7.9Hz,1H),7.44(d,J＝8.8Hz,1H),7.23(d,J＝2.4Hz,1H),6.92(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.64(d,J＝8.9Hz,1H),4.75–4.66(m,1H),4.63–4.55(m,1H),4.37–4.27(m,1H),4.18–4.11(m,2H),3.23(s,6H),HRMS(EI):m/z calcd for C17H19N3O3F332.1410,found332.1403(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000193
实施例41合成标记中间体33s
将化合物20(240.0mg，1mmol)溶于20mL乙醇溶液中，向其中加入NaOH 水溶液(69.0mg，2mL)，上述溶液在80℃油浴条件下搅拌回流反应1h后，向其中加入化合物32s(135.5mg，1.2mmol)，继续搅拌回流反应3h，反应完毕后经柱层析分离得到146.0mg中间体33s，产率46.5％。1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ7.90(d,J＝7.9Hz,2H),7.55(d,J＝8.2Hz,1H),7.20(s,1H),6.89(d,J＝8.7Hz,1H),6.68(d,J＝7.9Hz,2H),6.55(s,1H),4.96(d,J＝3.4Hz,1H),4.68(s,1H),4.03(s,1H),3.97–3.85(m,1H),3.82(s,1H),3.47(s,2H),2.76(d,J＝2.7Hz,3H),MS(ESI):m/z calcd for C17H18N2O4314.13,found315.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000201
实施例42合成标记中间体33r
由化合物20反应制得中间体33r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例41相同，产率39.6％。1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ7.90(d,J＝8.8Hz,2H),7.54(d,J＝8.8Hz,1H),7.20(d,J＝2.5Hz,1H),6.88(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.67(d,J＝8.8Hz,2H),6.53(d,J＝5.0Hz,1H),4.04(dd,J＝9.9,4.2Hz,1H),3.91(dd,J＝9.9,6.1Hz,1H),3.82(dd,J＝10.7,5.0Hz,1H),3.47(d,J＝5.7Hz,2H),2.76(d,J＝4.1Hz,3H),MS(ESI):m/zcalcd for C17H18N2O4314.13,found315.3(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000202
实施例43合成标记中间体34r
将化合物33s(129.0mg，0.4mmol)溶于30mL CH2Cl2溶液中，向其中加入咪唑(237.9mg，3.5mmol)以及TBDMSCl(536.2mg，3.6mmol)，上述溶液在40℃油浴条件下搅拌回流反应，反应完毕后，抽滤除去沉淀，除去CH2Cl2，残余物经柱层析分离得到154.2mg中间体34r，产率71.1％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.96(d,J＝8.7Hz,2H),7.28(d,J＝8.8Hz,1H),7.10(d,J＝2.4Hz,1H),6.77(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.57(d,J＝8.8Hz,2H),4.08–3.94(m,2H),3.80(dd,J＝8.4,5.6 Hz,1H),3.57(d,J＝5.7Hz,2H),2.82(s,3H),0.80(s,18H),MS(ESI):m/z calcd for C29H46N2O4Si2542.30,found543.7(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000211
实施例44合成标记中间体34s
由中间体33r反应制得中间体34s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例43相同，产率24.2％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.97(d,J＝8.8Hz,2H),7.30(d,J＝8.8Hz,1H),7.12(d,J＝2.4Hz,1H),6.79(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.59(d,J＝8.8Hz,2H),4.06–3.99(m,2H),3.85–3.81(m,1H),3.60(d,J＝5.7Hz,2H),2.84(s,3H),0.83(s,18H),MS(ESI):m/z calcd for C29H46N2O4Si2542.30,found543.1(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000212
实施例45合成标记中间体35r
将化合物34r(245.7mg，0.45mmol)溶于30mL THF溶液中，向其中加入过量的(Boc)2O，上述溶液在85℃油浴条件下搅拌回流反应，反应完毕后，除去THF，残余物经柱层析分离得到279.2mg中间体35r，产率95.9％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(d,J＝8.5Hz,2H),7.36(t,J＝8.6Hz,3H),7.17(d,J＝2.3Hz,1H),6.88(dd,J＝8.9,2.2Hz,1H),4.10–3.96(m,2H),3.84(dd,J＝8.8,6.2Hz,1H),3.60(d,J＝5.8Hz,2H),3.26(s,3H),1.41(s,9H),0.83(s,18H),MS(ESI):m/z calcd for C34H54N2O6Si2642.35,found643.6(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000213
实施例46合成标记中间体35s
由中间体34s反应制得中间体35s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例45相同，产率88.0％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(d,J＝8.7Hz,2H), 7.35(t,J＝8.7Hz,3H),7.17(d,J＝2.4Hz,1H),6.87(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),4.13–3.98(m,2H),3.84(dd,J＝8.9,6.2Hz,1H),3.70–3.53(m,2H),3.25(s,3H),1.41(s,9H),0.83(s,18H),MS(ESI):m/zcalcd for C34H54N2O6Si2642.35,found643.4(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000221
实施例47合成标记中间体36s
将化合物35r(273.2mg，0.37mmol)溶于20mL THF溶液中，向其中加入TBAF的THF溶液2.5mL，上述溶液在30℃油浴条件下搅拌回流反应，反应完毕后，除去THF，残余物经柱层析分离得到78.6mg中间体36s，产率37.4％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(d,J＝8.5Hz,2H),7.38(dd,J＝15.0,8.7Hz,3H),7.23(d,J＝2.2Hz,1H),6.88(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),4.20–4.12(m,1H),4.07(s,2H),3.86(dd,J＝11.4,3.5Hz,1H),3.78(dd,J＝11.4,5.7Hz,1H),3.31(d,J＝2.7Hz,3H),1.49(s,9H),MS(ESI):m/z calcd for C22H26N2O6414.18,found415.3(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000222
实施例48合成标记中间体36r
由中间体35s反应制得中间体36r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例47相同，产率60.1％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(d,J＝8.8Hz,2H),7.43(t,J＝8.6Hz,3H),7.25(s,1H),6.94(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),4.21-4.13(m,1H),4.13-4.05(m,2H),3.87(dd,J＝11.4,3.8Hz,1H),3.79(dd,J＝11.4,5.4Hz,1H),3.33(s,3H),1.49(s,9H)。
Figure BDA0000516715270000223
实施例49合成标记中间体37r
将化合物36s(79.6mg，0.19mmol)溶于5mL吡啶溶液中，向其中加入TsCl (55.2mg，0.29mmol)，在0℃冰浴条件下搅拌反应，反应完毕后，除去吡啶，残余物经柱层析分离得到30.0mg中间体37r，产率27.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(t,J＝5.6Hz,2H),7.79(d,J＝8.2Hz,2H),7.43(d,J＝8.7Hz,3H),7.30(d,J＝8.1Hz,2H),7.15(d,J＝2.4Hz,1H),6.86(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),4.34–4.13(m,3H),4.03(d,J＝4.3Hz,2H),3.33(s,3H),2.40(s,3H),1.49(s,9H),MS(ESI):m/zcalcd for C29H32N2O8S568.19,found569.6(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000231
实施例50合成标记中间体37s
由中间体36r反应制得中间体37s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例49相同，产率62.3％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(d,J＝8.7Hz,2H),7.81(d,J＝8.2Hz,2H),7.44(dd,J＝8.7,3.8Hz,3H),7.32(d,J＝8.0Hz,2H),7.16(d,J＝2.3Hz,1H),6.87(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),4.34-4.20(m,3H),4.04(d,J＝4.1Hz,2H),3.34(s,3H),2.41(s,3H),1.49(s,9H)。
Figure BDA0000516715270000232
实施例51合成标记前体38r
将化合物37r(30.0mg，0.05mmol)溶于10mL CH2Cl2溶液中，向其中加入3,4-dihydro-2H-pyran(78.2mg，0.93mmol)以及PPTS(59.2mg，0.24mmol),上述溶液在40℃油浴条件下搅拌回流反应，反应完毕后，除去CH2Cl2，残余物经柱层析分离得到19.9mg标记前体38r，产率61.0％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(d,J＝8.5Hz,2H),7.78(dd,J＝8.2,5.5Hz,2H),7.42(dd,J＝8.7,3.3Hz,3H),7.33–7.25(m,2H),7.13(dd,J＝8.5,2.4Hz,1H),6.83(ddd,J＝8.8,3.8,2.6Hz,1H),4.78(dt,J＝6.8,3.8Hz,1H),4.43–4.18(m,3H),4.18–3.96(m,2H),3.95–3.69(m,1H),3.58–3.41(m,1H),3.33(s,3H),2.38(s,3H),1.88–1.62(m,3H),1.49(s,9H),MS(ESI):m/z calcd for C34H40N2O9S652.25,found653.6(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000241
实施例52合成标记前体38s
由中间体37s反应制得标记前体38s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例51相同，产率79.4％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(d,J＝8.5Hz,2H),7.78(dd,J＝8.2,5.4Hz,2H),7.42(dd,J＝8.6,2.9Hz,3H),7.28(s,2H),7.13(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.89-6.80(m,1H),4.86-4.69(m,1H),4.42-4.17(m,3H),4.12-3.96(m,2H),4.00-3.76(m,1H),3.51-3.47(m,1H),3.33(s,3H),2.39(d,J＝1.4Hz,3H),1.87-1.63(m,3H),1.64-1.52(m,3H),1.49(s,9H)。
Figure BDA0000516715270000242
实施例53合成标记中间体39s
由化合物1和化合物32s反应制得中间体39s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例41相同，产率80.9％。1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ7.77(t,J＝8.6Hz,3H),7.60(d,J＝2.5Hz,1H),7.05(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.64(d,J＝8.8Hz,2H),6.39(d,J＝4.9Hz,1H),4.98(d,J＝5.1Hz,1H),4.68(t,J＝5.6Hz,1H),4.07(dd,J＝9.8,4.2Hz,1H),3.94(dd,J＝9.9,6.1Hz,1H),3.88–3.76(m,1H),3.47(t,J＝5.7Hz,2H),2.75(d,J＝4.9Hz,3H),MS(ESI):m/z calcd for C17H18N2O3S330.10,found330.8(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000243
实施例54合成标记中间体39r
由化合物1和化合物32r反应制得中间体39r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例41相同，产率49.0％。1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ7.78(t,J＝8.7Hz,3H),7.60(d,J＝2.5Hz,1H),7.05(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.63(d,J＝8.8Hz,2H),6.38(d,J＝4.9Hz,1H),4.97(s,1H),4.68(s,1H),4.07(dd,J＝9.9,4.2 Hz,1H),3.94(dd,J＝9.9,6.1Hz,1H),3.84–3.81(m,1H),3.47(d,J＝5.5Hz,2H),2.75(d,J＝4.9Hz,3H),MS(ESI):m/z calcd forC17H18N2O3S330.10,found330.8(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000251
实施例55合成标记中间体40r
由中间体39s反应制得中间体40r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例43相同，产率63.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.84–7.75(m,3H),7.22(d,J＝2.5Hz,1H),6.95(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.55(d,J＝8.7Hz,2H),4.11–4.01(m,1H),4.03–3.94(m,1H),3.83(dd,J＝9.5,6.5Hz,1H),3.63–3.51(m,2H),2.81(s,3H),0.81(s,9H),0.80(s,9H),MS(ESI):m/z calcd for C29H46N2O3SSi2558.28,found559.1(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000252
实施例56合成标记中间体40s
由中间体39r反应制得中间体40s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例43相同，产率90.4％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.81(d,J＝8.3Hz,3H),7.24(d,J＝2.4Hz,1H),6.97(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.57(d,J＝8.6Hz,2H),4.08(dd,J＝9.5,3.6Hz,1H),4.03–3.97(m,1H),3.86(dd,J＝9.5,6.5Hz,1H),3.65–3.51(m,2H),2.83(s,3H),0.83(s,9H),0.82(s,9H),MS(ESI):m/z calcd for C29H46N2O3SSi2558.28,found559.0(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000253
实施例57合成标记中间体41r
由中间体40r反应制得标记中间体41r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例45相同，产率86.0％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.6Hz, 2H),7.86(d,J＝8.9Hz,1H),7.29(d,J＝8.6Hz,3H),7.02(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),4.10(dd,J＝9.5,3.5Hz,1H),4.06–3.97(m,1H),3.87(dd,J＝9.5,6.6Hz,1H),3.65–3.52(m,2H),3.24(s,3H),1.40(s,9H),0.83(s,9H),0.82(s,9H),MS(ESI):m/z calcd for C34H54N2O5SSi2658.33,found659.37(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000261
实施例58合成标记中间体41s
由中间体40s反应制得中间体41s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例45相同，产率92.9％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(d,J＝8.6Hz,2H),7.85(d,J＝8.9Hz,1H),7.33–7.25(m,3H),7.01(dd,J＝9.0,2.5Hz,1H),4.10(dd,J＝9.5,3.5Hz,1H),4.07–3.96(m,1H),3.87(dd,J＝9.5,6.5Hz,1H),3.66–3.49(m,2H),3.23(s,3H),1.40(s,9H),0.83(s,9H),0.82(s,9H),MS(ESI):m/z calcd for C34H54N2O5SSi2658.33,found659.1(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000262
实施例59合成标记中间体42s
由中间体41r反应制得中间体42s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例47相同，产率83.4％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01(d,J＝8.6Hz,2H),7.96(d,J＝8.9Hz,1H),7.43–7.34(m,3H),7.10(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),4.22–4.09(m,3H),3.88(dd,J＝11.4,3.7Hz,1H),3.79(dd,J＝11.4,5.1Hz,1H),3.32(s,3H),1.49(s,9H),MS(ESI):m/z calcdfor C22H26N2O5S430.16,found431.20(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000263
实施例60合成标记中间体42r
由中间体41s反应制得标记中间体42r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件 等均与实施例47相同，产率59.2％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.00(d,J＝8.7Hz,2H),7.95(d,J＝8.9Hz,1H),7.37(dd,J＝5.5,2.9Hz,3H),7.10(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),4.24–4.09(m,3H),3.88(dd,J＝11.4,3.6Hz,1H),3.79(dd,J＝11.3,5.1Hz,1H),3.32(s,3H),1.48(s,9H),MS(ESI):m/z calcd for C22H26N2O5S430.16,found431.21(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000271
实施例61合成标记中间体43r
由中间体42s反应制得中间体43r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例49相同，产率14.0％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.99(d,J＝8.6Hz,2H),7.90(d,J＝8.9Hz,1H),7.79(d,J＝8.2Hz,2H),7.37(d,J＝8.5Hz,2H),7.34–7.27(m,3H),6.98(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),4.35–4.15(m,3H),4.05(s,2H),3.32(s,3H),2.39(s,3H),1.49(s,9H),MS(ESI):m/z calcd for C29H32N2O7S2584.17,found584.9(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000272
实施例62合成标记中间体43s
由中间体42r反应制得中间体43s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例49相同，产率14.4％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.99(d,J＝8.7Hz,2H),7.91(d,J＝8.9Hz,1H),7.79(d,J＝8.3Hz,2H),7.37(d,J＝8.6Hz,2H),7.33–7.26(m,3H),6.98(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),4.35–4.16(m,3H),4.12–4.00(m,2H),3.32(s,3H),2.39(s,3H),1.49(s,9H),MS(ESI):m/z calcd for C29H32N2O7S2584.17,found584.8(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000273
实施例63合成标记前体44r
由中间体43r反应制得标记前体44r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例51相同，产率66.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.00(d,J＝8.6Hz,2H),7.90(d,J＝9.0Hz,1H),7.77(dd,J＝8.2,6.2Hz,2H),7.38(d,J＝8.6Hz,2H),7.30–7.26(m,2H),7.25(s,1H),7.03–6.93(m,1H),4.77(dt,J＝6.9,3.7Hz,1H),4.44–4.15(m,3H),4.15–3.96(m,2H),3.96–3.63(m,1H),3.60–3.44(m,1H),3.32(s,3H),2.37(s,3H),1.89–1.62(m,3H),1.49(s,9H),MS(ESI):m/z calcd for C34H40N2O8S2668.22,found669.29(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000281
实施例64合成标记前体44s
由中间体43s反应制得标记前体44s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例51相同，产率72.1％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.00(d,J＝8.5Hz,2H),7.91(d,J＝8.9Hz,1H),7.77(dd,J＝8.1,6.3Hz,2H),7.37(d,J＝8.5Hz,2H),7.32–7.26(m,2H),7.26(d,J＝3.8Hz,2H),6.96(dt,J＝8.9,3.0Hz,1H),4.88–4.69(m,1H),4.40–4.14(m,3H),4.14–3.92(m,2H),3.90–3.68(m,1H),3.59–3.43(m,1H),3.32(s,3H),2.38(s,3H),1.87–1.63(m,3H),1.48(s,9H),MS(ESI):m/z calcd for C34H40N2O8S2668.22,found669.1(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000282
实施例65合成标记中间体45r
由化合物2反应制得中间体45r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例41相同，产率54.1％。1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ7.82(t,J＝9.3Hz,3H),7.61(s,1H),7.07(d,J＝8.9Hz,1H),6.81(d,J＝8.8Hz,2H),4.98(d,J＝5.2Hz,1H),4.68(s,1H),4.06(s,1H),3.95(s,1H),3.82(s,1H),3.47(s,2H),3.01(s,6H),MS(ESI):m/z calcd forC18H20N2O3S344.12,found345.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000291
实施例66合成标记中间体45s
由化合物2反应制得中间体45s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例41相同，产率89.2％。1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ7.82(s,3H),7.62(s,1H),7.06(d,J＝9.0Hz,1H),6.81(d,J＝6.1Hz,2H),5.00(s,1H),4.70(s,1H),4.05(s,1H),3.94(s,1H),3.82(s,1H),3.47(s,2H),3.01(s,6H),MS(ESI):m/z calcd for C18H20N2O3S344.12,found345.2(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000292
实施例67合成标记中间体46s
由中间体45r反应制得中间体46s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例49相同，产率8.8％,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.5Hz,2H),7.79(d,J＝8.3Hz,3H),7.29(d,J＝8.1Hz,2H),7.23(d,J＝2.4Hz,1H),6.93(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),6.75(d,J＝8.8Hz,2H),4.34–4.16(m,3H),4.04(d,J＝4.2Hz,2H),3.06(s,6H),2.39(s,3H),MS(ESI):m/z calcd for C25H26N2O5S2498.13,found499.4(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000293
实施例68合成标记中间体46r
由中间体45s反应制得中间体46r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例49相同，产率7.0％,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.2Hz,2H),7.85(d,J＝8.8Hz,1H),7.79(d,J＝7.9Hz,2H),7.34–7.28(m,2H),7.24(s,1H),6.95(dd,J＝14.2,9.1Hz,1H),6.75(d,J＝8.5Hz,2H),4.24(s,3H),4.05(s,2H),3.06(s,6H),2.39(s,3H),MS(ESI):m/zcalcd for C25H26N2O5S2498.13,found499.5(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000301
实施例69合成标记前体47s
由中间体46s反应制得标记前体47s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例51相同，产率35.5％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(d,J＝8.5Hz,2H),7.83(d,J＝8.9Hz,1H),7.77(dd,J＝8.1,6.1Hz,2H),7.29(d,J＝9.0Hz,1H),7.25–7.17(m,2H),6.90(ddd,J＝8.9,4.3,2.6Hz,1H),6.75(d,J＝8.9Hz,2H),4.86–4.70(m,1H),4.43–4.11(m,4H),4.13–3.96(m,2H),3.95–3.66(m,2H),3.65–3.40(m,2H),3.05(s,6H),2.37(d,J＝1.2Hz,3H),MS(ESI):m/z calcd for C30H34N2O6S2582.19,found582.9(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000302
实施例70合成标记前体47r
由中间体46r反应制得标记前体47r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例57相同，产率94.0％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.5Hz,2H),7.83(d,J＝8.8Hz,1H),7.80–7.70(m,2H),7.35(s,1H),7.25–7.14(m,2H),6.90(d,J＝7.0Hz,1H),6.75(d,J＝8.7Hz,2H),4.42–3.96(m,5H),3.97–3.68(m,3H),3.64–3.35(m,2H),3.05(s,6H),2.37(s,3H),1.89–1.38(m,4H),MS(ESI):m/z calcd for C30H34N2O6S2582.19,found583.5(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000303
实施例71合成标记中间体48r
由化合物21反应制得中间体48r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例41相同，产率56.0％。1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ7.97(d,J＝9.0Hz,2H),7.57(d,J＝8.8Hz,1H),7.22(d,J＝2.4Hz,1H),6.90(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.85(d,J＝9.1Hz,2H),4.04(dt,J＝7.3,3.7Hz,1H),3.91(dd,J＝9.9,6.1Hz,1H), 3.86–3.74(m,1H),3.47(d,J＝5.7Hz,2H),3.03(s,6H),MS(ESI):m/z calcd for C18H20N2O4328.14,found329.17(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000311
实施例72合成标记中间体48s
由化合物21反应制得中间体48s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例41相同，产率52.2％。1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ7.96(d,J＝5.7Hz,2H),7.57(d,J＝8.4Hz,1H),7.22(s,1H),6.94–6.75(m,3H),4.96(s,1H),4.68(s,1H),4.03(s,1H),3.91(s,1H),3.81(s,1H),3.47(s,2H),3.03(s,6H),MS(ESI):m/z calcd for C18H20N2O4328.14,found329.3(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000312
实施例73合成标记中间体49s
由化合物48r反应制得中间体49s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例49相同，产率7.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(d,J＝9.0Hz,2H),7.78(d,J＝8.3Hz,2H),7.36(d,J＝8.8Hz,1H),7.29(d,J＝8.1Hz,2H),7.10(d,J＝2.5Hz,1H),6.80–6.70(m,3H),4.35–4.18(m,3H),4.01(d,J＝4.6Hz,2H),3.06(s,6H),2.39(s,3H),MS(ESI):m/zcalcd for C25H26N2O6S482.15,found482.8(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000313
实施例74合成标记中间体49r
由化合物48s反应制得中间体49r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例49相同，产率25.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.05(d,J＝9.0Hz,2H),7.76(d,J＝8.3Hz,2H),7.33(d,J＝8.8Hz,1H),7.26(s,2H),7.08(d,J＝2.4Hz,1H),6.77–6.65(m,3H),4.35–4.17(m,3H),4.09–3.92(m,2H),3.04(s,6H),2.36 (s,3H),MS(ESI):m/z calcd forC25H26N2O6S482.15,found483.4(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000321
实施例75合成标记前体50s
由化合物49s反应制得标记前体50s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例51相同，产率83.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(d,J＝8.7Hz,2H),7.80–7.75(m,2H),7.35(d,J＝8.8Hz,1H),7.27(s,1H),7.26–7.24(m,1H),7.07(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.76(d,J＝8.7Hz,2H),4.90–4.70(m,1H),4.40–4.10(m,3H),4.10–3.90(m,2H),3.90–3.70(m,1H),3.60–3.40(m,1H),3.07(s,6H),2.37(d,J＝2.6Hz,3H),1.60–1.40(m,6H),MS(ESI):m/z calcd for C30H34N2O7S566.21,found566.9(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000322
实施例76合成标记中间体50r
由化合物49r反应制得标记前体50r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例51相同，产率91.2％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(d,J＝8.8Hz,2H),7.78(dd,J＝8.2,5.2Hz,2H),7.36(d,J＝8.8Hz,1H),7.30–7.26(m,1H),7.27–7.20(m,2H),7.09(dd,J＝7.6,2.4Hz,1H),6.78(d,J＝8.9Hz,2H),4.88–4.70(m,1H),4.44–4.14(m,4H),3.96–3.75(m,5H),3.61–3.44(m,4H),3.08(s,6H),2.38(d,J＝2.3Hz,3H),MS(ESI):m/z calcd forC30H34N2O7S566.21,found567.5(M+H)+。
Figure BDA0000516715270000323
实施例77标记化合物[18F]14r
称取2mg标记前体44r，加入1.7mL乙腈溶解。将其加入到已除水的含一定活 度的含K222/K2CO3的18F-的反应管中，在100℃的条件下标记12min，冷却后加入0.20mL的HCl(1M)，涡旋后继续反应5min，冷却后加入少量水用NaHCO3中和至偏碱性，最后过C18反相小柱子用水冲洗除去盐和剩余的18F-，之后用乙腈淋洗得到最终标记产品，N2吹干后，用HPLC分离得到纯度大于98％的标记物[18F]14b。标记率约为5-40％。HPLC分离条件为：Waters，C-18半制备柱(10×250mm，5μm)；流动相：乙腈:水＝3:2(体积比)。保留时间为9.09min。
实施例78标记化合物[18F]14s
由标记前体44s反应制得[18F]14s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例77相同，标记率约为5-40％。HPLC分离条件为：Waters，C-18半制备柱(10×250mm，5μm)；流动相：乙腈:水＝＝3:2(体积比)。保留时间为9.09min。
实施例79标记化合物[18F]15r
由标记前体47r反应制得[18F]15r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例77相同，标记率约为5-40％。HPLC分离条件为：Waters，C-18半制备柱(10×250mm，5μm)；流动相：乙腈:水＝3:2(体积比)。保留时间为15.23min。
实施例80标记化合物[18F]15s
由标记前体47s反应制得[18F]15s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例77相同，标记率约为5-40％。HPLC分离条件为：Waters，C-18半制备柱(10×250mm，5μm)；流动相：乙腈:水＝3:2(体积比)。保留时间为15.23min。
实施例81标记化合物[18F]28r
由标记前体38r反应制得[18F]28r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例77相同，标记率约为5-40％。HPLC分离条件为：Waters，C-18半制备柱(10×250mm，5μm)；流动相：乙腈:水＝3:2(体积比)。保留时间为7.95min。
实施例82标记化合物[18F]28s
由标记前体38s反应制得[18F]28s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例77相同，标记率约为5-40％。HPLC分离条件为：Waters，C-18半制备柱(10×250mm，5μm)；流动相：乙腈:水＝＝3:2(体积比)。保留时间为7.95min。
实施例83标记化合物[18F]29r
由标记前体50r反应制得[18F]29r，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例77相同，标记率约为5-40％。HPLC分离条件为：Waters，C-18半制备柱(10×250mm，5μm)；流动相：乙腈:水＝＝3:2(体积比)。保留时间为12.58min。
实施例84标记化合物[18F]29s
由标记前体50s反应制得[18F]29s，其反应的原料比例、溶剂、反应条件等均与实施例77相同，标记率约为5-40％。HPLC分离条件为：Waters，C-18半制备柱(10×250mm，5μm)；流动相：乙腈:水＝＝3:2(体积比)。保留时间为12.58min。
实施例85标记化合物的效果实验
以下通过竞争结合实验和放射自显影实验对本发明所述化合物进行亲和力评价，充分验证它们与Aβ斑块的高亲和力。通过正常小鼠体内生物分布实验对标记化合物进行初始脑摄取及脑清除评价。
1.竞争结合实验
竞争结合实验(Ki测定)：一定浓度的Aβ1-42聚集体蛋白与一定浓度的放射性配基[125I]IMPY起结合反应，反应***中同时加不同浓度的待测化合物(分别为本发明实施例中的目标化合物与[125I]IMPY起竞争反应，平衡后分离复合物通过测定放射性来计算抑制常数(Ki)。
1.1实验步骤：
(1)配制pH＝7.4的PBS(0.2M)缓冲液4L；
(2)放射配基[125I]IMPY按照已有方法制备。将[125I]IMPY配制成100000cpm/100μL的水溶液；
(3)将待测化合物配制成10-3至10-9mol/L的一系列乙醇溶液；
(4)受体Aβ1-42蛋白按照已有方法制备。将其稀释成约30nM的水溶液；
(5)玻璃纤维滤膜用含0.1％(体积分数)聚乙烯亚胺的PBS溶液浸泡0.5h；
(6)在12×75mm硼硅玻璃管中分别加入100μL不同浓度待测化合物溶液和100μL[125I]IMPY溶液、700μL PBS及100μL Aβ1-42溶液。用封口膜封好，涡旋；
(7)在37℃恒温水浴中振荡孵育2h；
(8)多头细胞收集器收集反应液，用PBS冲洗三遍，每次3mL；
(9)用γ计数仪测量计数；
(10)数据处理。
1.2实验结果：
由竞争结合实验得到的半抑制常数(IC50)以及进一步根据公式计算出的抑制常数见表1。
表1标记化合物的抑制常数
Figure BDA0000516715270000351
2.正常小鼠体内分布实验
通过体内分布实验研究了在小鼠体内的药代动力学性质，特别是初始脑摄取和脑清除情况。
2.1实验步骤
将5-10μCi标记化合物(100μL生理盐水溶液，含5％乙醇)由尾静脉注射入正常小鼠(ICR，雄性，20-22g)体内(n＝5)，分别于注射后2分钟、10分钟、30分钟和60分钟将其断头处死，解剖取出相关脏器，测量湿量及放射性计数。数据表示为脏器中放射性百分剂量(％ID/器官)和每克脏器中放射性百分剂量(％ID/g)。
2.2实验结果
实验结果如表2所示，本发明所述的18F标记化合物都可以顺利的通过血脑屏障，2分钟进脑量都较高，特别是[18F]29s的初始脑摄取较高而且其在正常小鼠脑部清除很快，2分钟与60分钟脑摄取比为27.8。
表2.18F标记化合物在正常小鼠体内生物分布实验(％ID/g)
Figure BDA0000516715270000361
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (2)

1.与Aβ斑块具有亲和力的含手性侧链取代的氟代2-芳基苯并杂环化合物，其特征在于，所述化合物为28s和/或29s，它们的结构如式(I)所示：
Figure FFW0000021139360000011
其中，对于化合物28s，其为S构型，R1为5位取代基，
R1为
Figure FFW0000021139360000012
F为18F；
R2为NHCH3，X为N，Y为O，Z为CH；
对于化合物29s，其为S构型，R1为5位取代基，
R1为
Figure FFW0000021139360000013
F为18F；
R2为N(CH3)2，X为N，Y为O，Z为CH。
2.权利要求1所述化合物在制备Aβ斑块显像剂中的应用。
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