CN103923139B - 一种从槐米中提取芦丁的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于芦丁提取领域，具体地说是一种从槐米中提取芦丁的方法。该制备方法利用新采集的槐花蕾为起始原料，经蒸汽消除降解酶，经粉碎过筛后，用澄清石灰水为主溶媒，加入抗氧剂及金属离子络合剂渗漉提取槐米中的有效成分芦丁，分时段收集过滤后的渗漉液，并按比例加入中药澄清剂及吸附树脂放置一定时间后过滤调酸，待芦丁沉淀析出后弃去上层含杂质清液，板框压滤，将板框压滤中间品加入已调好PH值的纯化水中重新溶解过滤后调解PH值，放置结晶后板框压滤，纯化水洗涤干燥后得到符合欧洲药典要求的芦丁成品。本发明芦丁含量≥95.0%，产品纯度高，各项指标均达到欧洲药典要求，提取过程不采用甲醇，避免了甲醇有毒且难以除掉的问题。
Description
技术领域
本发明属于芦丁提取领域，具体地说是一种从槐米中提取芦丁的方法。
背景技术
芦丁可用作食用抗氧化剂和营养增强剂及营养增补剂，具有维生素P样作用和抗炎作用，能降低如芥子油对动物眼睛或皮肤引起的炎症，有抗病毒作用，并能降低毛细血管通透性和脆性的作用，保持及恢复毛细血管的正常弹性。芦丁存在于芸香叶、烟叶、橙皮、番茄等植物内，槐花米和荞麦花内含量尤其丰富。我国药用的芸香苷是从槐花米中提得。利用芦丁具有酸性，在碱水中溶解度较大，并与碱成盐而溶于水，加酸可使其成酸沉淀、游离析出的原理。槐米花经洗涤后，用热水处理后用澄清石灰水提取用盐酸将滤液调至合适PH值，静置析出结晶，分离，得芸香苷粗品，经溶解、再结晶、干燥既得成品。槐米为豆科植物槐的花蕾。槐米生产于广西、河南、山东、山西、陕西、安徽、河北、江苏等地，近年来广西全州一带已有大规模种植基地。广西及越南槐米质量好，收率高，因其特殊的气候利于槐米的生长，其所生产芦丁杂质低，含量高。
目前，中国药品标准及欧洲药典中均收录有芦丁，欧洲药典名称为：三水合芦丁，最新欧洲药典要求的芦丁质量要求远高于国家药品标准，其主要技术指标如下：含量95.0~101.0%（按干品计），水分要求为7.5~9.5%，硫酸盐灰分：不超过0.1%，甲醇不溶物：不超过3%，光吸收杂质：在450nm和800nm波长下的吸收值不超过0.10；对杂质A、B、C及总杂质有限度要求，用液相色谱法检测相关杂质。目前用传统工艺生产的芦丁只能满足1963年美国药典NF11版芦丁标准要求，要达到欧洲药典要求必须经过甲醇溶解精制，而甲醇的溶解精制不可避免的造成引入了甲醇，但甲醇对人体健康有很大的危害，欧洲药典对产品中的甲醇残留有限度要求，很难除去。三水合芦丁分子式如下。
发明内容
本发明的目的是克服现有芦丁提取制备工艺存在精制有机溶液甲醇有毒、甲醇后期去除难等问题，提供一种从槐米中提取芦丁的方法。
本发明的方案是通过这样实现的：一种从槐米中提取芦丁的方法，采集槐花蕾进行热汽蒸煮消除降解酶后晾干，晾干的槐花蕾进行粉碎过筛得到花蕾碎粉，该方法步骤还包括：
步骤1)渗漉提取：将花蕾碎粉放入渗漉罐中，往渗漉罐中加入含有抗氧剂、金属离子络合剂的澄清石灰水对芦丁进行提取，收集得到的渗漉液。
步骤2)澄清除杂：在步骤1)得到的渗漉液中加入澄清剂，澄清剂与渗漉液的比例=0.05~0.1kg：1L，搅拌均匀后，加入大孔吸附树脂，大孔吸附树脂与渗漉液的比例=0.1~0.2L：2L，静置25~40min，过滤除去沉淀除杂，得到除杂后的提取溶液。
步骤3)调酸结晶：往步骤2)得到除杂后的提取溶液中加入酸液，调节pH至2.0~3.5，待芦丁沉淀析出后弃去上层溶液，含有沉淀的溶液进行板框压滤，得到芦丁粗品。
步骤4)精制纯化：利用pH值为8.0~10.0的含有OH－的纯水溶液重新溶解步骤3)得到的芦丁粗品，待芦丁粗品完全溶解后，再利用酸液调节含芦丁粗品溶液pH至2.0~3.5，静置溶液至芦丁结晶沉淀析出，含有沉淀的溶液进行板框压滤得到精制芦丁品，用pH中性纯化水洗涤精制芦丁品，洗涤完成后干燥产品至含水量为7.5~9.5%，得到最终芦丁产品。
作为本发明的进一步限定，所述的渗漉提取中采用的抗氧化剂为亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、维生素C（VC）中的一种或他们的混合物，抗氧化剂在澄清石灰水中的含量为0.01~0.1%；所述的金属离子络合剂为EDTA、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、乙二胺四甲叉磷酸钠(EDTMPS)、二乙烯三胺五甲叉膦酸盐(DETPMPS)中的任一种或他们的混合物，金属离子络合剂在澄清石灰水中的含量为0.01~0.1%；所述澄清石灰水为含有0.05~0.15%的Ca(OH)2。
作为本发明的进一步限定，所述的澄清除杂步骤中的澄清剂为天然中药澄清剂KBT-ZTC，天然中药澄清剂KBT-ZTC为科立尔生物技术有限公司生产、由主凝剂A和助剂B组成的天然中药澄清剂；所述步骤3)和4)中用到的酸液为0.1~0.5mol/L的盐酸HCl溶液或是0.1~0.5mol/L的硫酸H2SO4溶液。
本发明实现的技术原理是：本工艺以广西地区的槐的干燥花蕾为原料，经粉碎过筛后，用澄清石灰水为主溶媒，加入抗氧剂及金属离子络合剂渗漉提取槐米中的有效成分芦丁，分时段收集过滤后的渗漉液，并按比例加入中药澄清剂及吸附树脂放置一定时间后过滤调酸，待芦丁沉淀析出后弃去上层含杂质清液，板框压滤，将板框压滤中间品加入已调好PH值的纯化水中重新溶解过滤后调解PH值，放置结晶后板框压滤，纯化水洗涤干燥后得到符合欧洲药典要求的芦丁成品。
本发明具备以下良好效果：
（1）本发明制备得到的芦丁产品中芦丁含量95.0~101.0%（按干品计），水分要求为7.5~9.5%，硫酸盐灰分：不超过0.1%，甲醇不溶物：不超过3%，光吸收杂质：在450nm和800nm波长下的吸收值不超过0.10，各项指标达到了欧洲药典要求。
（2）本发明通过引入中药澄清剂及吸附树脂除杂，能够去除渗漉液中的植物叶绿素、胶质等杂质，有效提高产品纯度，减轻了后续除杂压力。
（3）本发明改变了传统工艺先生产出芦丁粗品再用甲醇溶解除去醇不溶性杂质的工艺，在提取的后环节采用特定的PH值及温度下用纯水溶解后过滤除去醇不溶物并用在纯水中重结晶的方法提高了产品纯度。在生产过程中不再使用到有机溶剂，避免产品中有机溶剂残留对人体健康的危害，本发明工艺改进后，产品工艺趋于简单、生产周期缩短、产品成本降低了5~15%，节约了能源及人力，产品符合国家保护、提倡、支持、鼓励发展环保节能政策要求。
附图说明
图1.本发明一种从槐米中提取芦丁的方法的流程图。
具体实施方式
以下结合实施例和附图描述本发明一种从槐米中提取芦丁的方法，这些描述并不是对本发明内容作进一步的限定。
实施例1
采集槐花蕾10kg进行热汽蒸煮消除降解酶后晾干，晾干的槐花蕾进行粉碎过筛得到花蕾碎粉，花蕾碎粉进入以下步骤进行提取：
步骤1)渗漉提取：将花蕾碎粉放入渗漉罐中，往渗漉罐中加入含有抗氧剂、金属离子络合剂的澄清石灰水对芦丁进行提取，抗氧化剂为VC，抗氧化剂VC在澄清石灰水中的含量为0.1%，金属离子络合剂为EDTA，金属离子络合剂在澄清石灰水中的含量为0.1%，澄清石灰水为含有0.15%的Ca(OH)2，收集得到的渗漉液。
步骤2)澄清除杂：在步骤1)得到的渗漉液中加入天然中药澄清剂KBT-ZTC，天然中药澄清剂KBT-ZTC与渗漉液的比例=0.1kg：1L，搅拌均匀后，加入大孔吸附树脂，大孔吸附树脂与渗漉液的比例=0.2L：2L，静置40min，过滤除去沉淀除杂，得到除杂后的提取溶液。
步骤3)调酸结晶：往步骤2)得到除杂后的提取溶液中加入酸液，酸液为0.3mol/L的盐酸HCl溶液，调节pH至2.0，待芦丁沉淀析出后弃去上层溶液，含有沉淀的溶液进行板框压滤，得到芦丁粗品。
步骤4)精制纯化：利用pH值为8.0的含有OH－的纯水溶液重新溶解步骤3)得到的芦丁粗品，待芦丁粗品完全溶解后，再利用酸液调节含芦丁粗品溶液pH至3.5，酸液为0.3mol/L的盐酸HCl溶液，静置溶液至芦丁结晶沉淀析出，含有沉淀的溶液进行板框压滤得到精制芦丁品，用pH中性纯化水洗涤精制芦丁品，洗涤完成后干燥产品至含水量为9.0%，得到最终芦丁产品。
实施例2
采集槐花蕾10kg进行热汽蒸煮消除降解酶后晾干，晾干的槐花蕾进行粉碎过筛得到花蕾碎粉，花蕾碎粉进入以下步骤进行提取：
步骤1)渗漉提取：将花蕾碎粉放入渗漉罐中，往渗漉罐中加入含有抗氧剂、金属离子络合剂的澄清石灰水对芦丁进行提取，抗氧化剂为亚硫酸氢钠，亚硫酸氢钠抗氧化剂在澄清石灰水中的含量为0.05%，金属离子络合剂为单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺按照重量1:1:1进行混合，金属离子络合剂在澄清石灰水中的含量为0.01%，澄清石灰水为含有0.05%的Ca(OH)2，收集得到的渗漉液。
步骤2)澄清除杂：在步骤1)得到的渗漉液中加入天然中药澄清剂KBT-ZTC，天然中药澄清剂KBT-ZTC与渗漉液的比例=0.06kg：1L，搅拌均匀后，加入大孔吸附树脂，大孔吸附树脂与渗漉液的比例=0.1L：2L，静置30min，过滤除去沉淀除杂，得到除杂后的提取溶液。
步骤3)调酸结晶：往步骤2)得到除杂后的提取溶液中加入酸液，酸液为0.2mol/L的盐酸HCl溶液，调节pH至2.0，待芦丁沉淀析出后弃去上层溶液，含有沉淀的溶液进行板框压滤，得到芦丁粗品。
步骤4)精制纯化：利用pH值为8.0的含有OH－的纯水溶液重新溶解步骤3)得到的芦丁粗品，待芦丁粗品完全溶解后，再利用酸液调节含芦丁粗品溶液pH至2.5，酸液为0.2mol/L的盐酸HCl溶液，静置溶液至芦丁结晶沉淀析出，含有沉淀的溶液进行板框压滤得到精制芦丁品，用pH中性纯化水洗涤精制芦丁品，洗涤完成后干燥产品至含水量为9.5%，得到最终芦丁产品。
实施例3
采集槐花蕾10kg进行热汽蒸煮消除降解酶后晾干，晾干的槐花蕾进行粉碎过筛得到花蕾碎粉，花蕾碎粉进入以下步骤进行提取：
步骤1)渗漉提取：将花蕾碎粉放入渗漉罐中，往渗漉罐中加入含有抗氧剂、金属离子络合剂的澄清石灰水对芦丁进行提取，抗氧化剂为亚硫酸钠，亚硫酸钠抗氧化剂在澄清石灰水中的含量为0.05%，金属离子络合剂为二乙烯三胺五甲叉膦酸盐(DETPMPS)，金属离子络合剂在澄清石灰水中的含量为0.1%，澄清石灰水为含有0.05%的Ca(OH)2，收集得到的渗漉液。
步骤2)澄清除杂：在步骤1)得到的渗漉液中加入天然中药澄清剂KBT-ZTC，天然中药澄清剂KBT-ZTC与渗漉液的比例=0.05~0.kg：1L，搅拌均匀后，加入大孔吸附树脂，大孔吸附树脂与渗漉液的比例=0.1~0.L：2L，静置25min，过滤除去沉淀除杂，得到除杂后的提取溶液。
步骤3)调酸结晶：往步骤2)得到除杂后的提取溶液中加入酸液，酸液为0.1mol/L的硫酸H2SO4溶液，调节pH至3.5，待芦丁沉淀析出后弃去上层溶液，含有沉淀的溶液进行板框压滤，得到芦丁粗品。
步骤4)精制纯化：利用pH值为9.0的含有OH－的纯水溶液重新溶解步骤3)得到的芦丁粗品，待芦丁粗品完全溶解后，再利用酸液调节含芦丁粗品溶液pH至2.0，酸液为0.1mol/L的硫酸H2SO4溶液，静置溶液至芦丁结晶沉淀析出，含有沉淀的溶液进行板框压滤得到精制芦丁品，用pH中性纯化水洗涤精制芦丁品，洗涤完成后干燥产品至含水量为7.5%，得到最终芦丁产品。
实施例4
采集槐花蕾10kg进行热汽蒸煮消除降解酶后晾干，晾干的槐花蕾进行粉碎过筛得到花蕾碎粉，花蕾碎粉进入以下步骤进行提取：
步骤1)渗漉提取：将花蕾碎粉放入渗漉罐中，往渗漉罐中加入含有抗氧剂、金属离子络合剂的澄清石灰水对芦丁进行提取，抗氧化剂为亚硫酸钠、VC按照重量比为1:1混合得到，抗氧化剂在澄清石灰水中的含量为0.1%，金属离子络合剂为乙二胺四甲叉磷酸钠(EDTMPS)，金属离子络合剂在澄清石灰水中的含量为0.05%，澄清石灰水为含有0.15%的Ca(OH)2，收集得到的渗漉液。
步骤2)澄清除杂：在步骤1)得到的渗漉液中加入天然中药澄清剂KBT-ZTC，天然中药澄清剂KBT-ZTC与渗漉液的比例=0.08kg：1L，搅拌均匀后，加入大孔吸附树脂，大孔吸附树脂与渗漉液的比例=0.15L：2L，静置35min，过滤除去沉淀除杂，得到除杂后的提取溶液。
步骤3)调酸结晶：往步骤2)得到除杂后的提取溶液中加入酸液，酸液为0.5mol/L的盐酸HCl溶液，调节pH至2.0，待芦丁沉淀析出后弃去上层溶液，含有沉淀的溶液进行板框压滤，得到芦丁粗品。
步骤4)精制纯化：利用pH值为10.0的含有OH－的纯水溶液重新溶解步骤3)得到的芦丁粗品，待芦丁粗品完全溶解后，再利用酸液调节含芦丁粗品溶液pH至2.0，酸液为0.5mol/L的盐酸HCl溶液，静置溶液至芦丁结晶沉淀析出，含有沉淀的溶液进行板框压滤得到精制芦丁品，用pH中性纯化水洗涤精制芦丁品，洗涤完成后干燥产品至含水量为8.5%，得到最终芦丁产品。
实施例5
采集槐花蕾10kg进行热汽蒸煮消除降解酶后晾干，晾干的槐花蕾进行粉碎过筛得到花蕾碎粉，花蕾碎粉进入以下步骤进行提取：
步骤1)渗漉提取：将花蕾碎粉放入渗漉罐中，往渗漉罐中加入含有抗氧剂、金属离子络合剂的澄清石灰水对芦丁进行提取，抗氧化剂为亚硫酸钠、亚硫酸氢钠按照重量比1:1混合得到，抗氧化剂在澄清石灰水中的含量为0.05%，金属离子络合剂为EDTA、单乙醇胺按照重量比1:1混合得到，金属离子络合剂在澄清石灰水中的含量为0.1%，澄清石灰水为含有0.1%的Ca(OH)2，收集得到的渗漉液。
步骤2)澄清除杂：在步骤1)得到的渗漉液中加入天然中药澄清剂KBT-ZTC，天然中药澄清剂KBT-ZTC与渗漉液的比例=0.1kg：1L，搅拌均匀后，加入大孔吸附树脂，大孔吸附树脂与渗漉液的比例=0.2L：2L，静置40min，过滤除去沉淀除杂，得到除杂后的提取溶液。
步骤3)调酸结晶：往步骤2)得到除杂后的提取溶液中加入酸液，酸液为0.2mol/L的硫酸H2SO4溶液，调节pH至3.0，待芦丁沉淀析出后弃去上层溶液，含有沉淀的溶液进行板框压滤，得到芦丁粗品。
步骤4)精制纯化：利用pH值为8.0的含有OH－的纯水溶液重新溶解步骤3)得到的芦丁粗品，待芦丁粗品完全溶解后，再利用酸液调节含芦丁粗品溶液pH至3.0，酸液为0.2mol/L的硫酸H2SO4溶液，静置溶液至芦丁结晶沉淀析出，含有沉淀的溶液进行板框压滤得到精制芦丁品，用pH中性纯化水洗涤精制芦丁品，洗涤完成后干燥产品至含水量为7.5~9.5%，得到最终芦丁产品。
实施例1~5制备得到的芦丁产品中芦丁含量95.0~101.0%（按干品计），水分要求为7.5~9.5%，硫酸盐灰分：不超过0.1%，甲醇不溶物：不超过3%，光吸收杂质：在450nm和800nm波长下的吸收值不超过0.10，各项指标达到了欧洲药典要求。
本发明上述实施例方案仅是对本发明的说明而不能限制本发明，权利要求中指出了本发明产品组成成分、成分比例、制备方法参数的范围，而上述的说明并未指出本发明参数的范围，因此，在与本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何改变，都应当认为是包括在权利要求书的范围内。本发明是经过多位芦丁的提取制备方法的研究人员长期工作经验积累，并通过创造性劳动创作而出。
Claims (3)
1.一种从槐米中提取芦丁的方法，采集槐花蕾进行热汽蒸煮消除降解酶后晾干，晾干的槐花蕾进行粉碎过筛得到花蕾碎粉，其特征在于，该方法步骤还包括：
步骤1)渗漉提取：将花蕾碎粉放入渗漉罐中，往渗漉罐中加入含有抗氧剂、金属离子络合剂的澄清石灰水对芦丁进行提取，收集得到的渗漉液；
步骤2)澄清除杂：在步骤1)得到的渗漉液中加入澄清剂，澄清剂与渗漉液的比例=0.05~0.1kg：1L，搅拌均匀后，加入大孔吸附树脂，大孔吸附树脂与渗漉液的比例=0.1~0.2L：2L，静置25~40min，过滤除去沉淀除杂，得到除杂后的提取溶液；
步骤3)调酸结晶：往步骤2)得到除杂后的提取溶液中加入酸液，调节pH至2.0~3.5，待芦丁沉淀析出后弃去上层溶液，含有沉淀的溶液进行板框压滤，得到芦丁粗品；
步骤4)精制纯化：利用pH值为8.0~10.0的含有OH－的纯水溶液重新溶解步骤3)得到的芦丁粗品，待芦丁粗品完全溶解后，再利用酸液调节含芦丁粗品溶液pH至2.0~3.5，静置溶液至芦丁结晶沉淀析出，含有沉淀的溶液进行板框压滤得到精制芦丁品，用pH中性纯化水洗涤精制芦丁品，洗涤完成后干燥产品至含水量＜10%，得到最终芦丁产品；
所述的澄清除杂步骤中的澄清剂为天然中药澄清剂KBT-ZTC；所述步骤3)和4)中用到的酸液为0.1~0.5mol/L的盐酸HCl溶液或是0.1~0.5mol/L的硫酸H2SO4溶液。
2.根据权利要求1所述的一种从槐米中提取芦丁的方法，其特征在于，所述的渗漉提取中采用的抗氧化剂为亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、维生素C中的一种或他们混合物，抗氧化剂在澄清石灰水中的含量为0.01~0.1%。
3.根据权利1或2任一项所述的一种从槐米中提取芦丁的方法，其特征在于，所述的金属离子络合剂乙二胺四乙酸、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、乙二胺四甲叉磷酸钠、二乙烯三胺五甲叉膦酸盐中的任一种或他们的混合物，金属离子络合剂在澄清石灰水中的含量为0.01~0.1%；所述澄清石灰水为含有0.05~0.15%的Ca（OH）2 。
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