CN103906751A

CN103906751A - 作为晚期SV40因子（LSF）抑制剂用于治疗癌症的[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g]喹啉-6(5H)-硫酮和[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g][1,2,4]***并[1,5-a]喹啉衍生物

Info

Publication number: CN103906751A
Application number: CN201280048586.8A
Authority: CN
Inventors: 斯科特·E·绍斯; 乌拉·汉森; 乔舒亚·A·毕晓普
Original assignee: Boston University
Current assignee: Boston University
Priority date: 2011-10-02
Filing date: 2012-10-02
Publication date: 2014-07-02
Also published as: US9399644B2; US20140249312A1; US9175001B2; US20150344491A1; WO2013052465A1

Abstract

本发明总体而言涉及用于抑制、预防和/或治疗癌症（例如，肝细胞癌（HCC））的[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g]喹啉-6(5H)-硫酮和[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g][1,2,4]***并[1,5-a]喹啉衍生物和/或组合物。在一些实施方式中，本发明涉及小分子化合物在抑制、预防和/或治疗转录因子晚期SV40因子（LSF）的表达，从而用于治疗HCC或其它癌症类型中的用途。

Description

作为晚期SV40因子(LSF)抑制剂用于治疗癌症的[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g]喹啉-6(5H)-硫酮和[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g][1,2,4]***并[1,5-a]喹啉衍生物

相关申请的交叉引用

本申请要求美国临时申请号61/542,245（2011年10月2日提交）和美国临时申请号61/585,272（2012年1月11日提交）的优先权，将两者的内容引入本文作为参考。

关于联邦资助研究或开发的声明

本发明是在合同编号GM067041的政府支持下作出的，所述政府支持由美国国家卫生研究院授予。政府在本发明中拥有一定的权利。

本文中使用的章节标题仅用于组织目的，不应以任何方式被解释为对所描述的主题进行限制。

附图说明

本专利或申请文件包含用彩色绘制的至少一幅附图。美国专利商标局在收到请求和必要费用后，将提供带有彩图的专利或专利申请公开的副本。

本领域技术人员将理解的是，如下所述的附图仅用于说明目的。附图并非旨在以任何方式对本发明教导的范围进行限制。

在附图中，附图中元件的尺寸和相对位置不一定按比例进行绘制。例如，各种元件的形状和角度可以不按比例绘制，并且其中一些元件被任意地放大和放置，以提高附图的易读性。此外，所绘制的元件的特定形状并非旨在传达关于特定元件实际形状的任何信息，选择该特定形状仅仅是为了便于在附图中识别。

图1是下述内容的图示：（i）含硫代基团的治疗剂化合物（结构式I）的S-对映异构体；（ii）含硫代基团的治疗剂化合物（结构式II）的R-对映异构体；（iii）非手性含硫代基团的治疗剂化合物（结构式III）；以及结构式III化合物的两种互变异构形式（即III-1和III-2）。

图2是下述内容的图示：（i）含硫代基团的治疗剂化合物（结构式I）的S-对映异构体的通式结构（即XI），其中，变量R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉、R₁₀和R₁₃在本文中进行定义；（ii）含硫代基团的治疗剂化合物（结构式II）的R-对映异构体的通式结构（即XII），其中，变量R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉、R₁₀和R₁₃在本文中进行定义；（iii）非手性含硫代基团的治疗剂化合物（结构式III）的通式结构（即XIII），其中，变量R₁、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₃在本文中进行定义。

图3是下述内容的图示：（i）含有***的治疗剂化合物（结构式IV）的S-对映异构体；（ii）含有***的治疗剂化合物（结构式V）的R-对映异构体；以及（iii）非手性的含有***的治疗剂化合物（结构式VI）。

图4是下述内容的图示：（i）含有***的治疗剂化合物（结构式IV）的S-对映异构体的通式结构（即XIV），其中，变量R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉、R₁₀和R₁₂在本文中进行定义；（ii）含有***的治疗剂化合物（结构式V）的R-对映异构体的通式结构（即XV），其中，变量R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉、R₁₀和R₁₂在本文中进行定义；（iii）非手性含有***的治疗剂化合物（结构式VI）的通式结构（即XVI），其中，变量R₁、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂在本文中进行定义。

图5是：（i）结构通式的图示，所述结构通式表示含硫代基团的治疗剂化合物（结构式I和II）的外消旋混合物；以及（ii）细胞系处理数据的图表图示，用含硫代基团的治疗剂化合物（结构式I和II）的外消旋混合物对所述细胞系进行处理。

图6是：（i）结构通式的图示，所述结构通式表示含有***的治疗剂化合物（结构式IV和V）的外消旋混合物；以及（ii）细胞系处理数据的图表图示，用含有***的治疗剂化合物（结构式IV和V）的外消旋混合物对所述细胞系进行处理。

图7是：（i）非手性的含有***的治疗剂化合物（结构式VI）的图示；以及（ii）用结构式VI的化合物对细胞系进行处理的数据的图表图示。

图8是：（i）非手性的含有***的治疗剂化合物（结构式VI，也记为LB-242）的图示；以及（ii）用具有结构式VI的化合物对小鼠进行处理的数据的图表图示。在这项研究中，对裸鼠皮下注射QGY-7703细胞，一旦肿瘤的平均尺寸达到200mm³，如本文所述使用处于磷酸盐缓冲盐水（PBS）中的载体或“VI”进行处理。

对于在本申请中所引用的所有文献和类似材料（包括但不限于专利、专利申请、文章、书籍和论文），无论此类文献或类似材料的形式，都明确地以引用的方式、出于任何和所有目的并入本文中。

技术领域

本发明总体而言涉及用于治疗癌症（例如，肝细胞癌（HCC））的方法、化合物和组合物。在一些实施方式中，本发明涉及小分子化合物抑制转录因子晚期SV40因子（LSF）的表达、从而用于治疗HCC或其它癌症类型的用途。

背景技术

肝细胞癌（HCC）是在肝脏中发病的原发性恶性肿瘤。HCC是五种最常见的癌症之一，也是全世界癌症死亡的第三大原因。尽管所有癌症的总发病率在降低，但HCC的发病率正在上升。2008年，在美国HCC的估算新发病例为21,370例，其中18,410例将会死亡。随着子类别显示不同的基因表达图谱，存在有多种病因。HCC的预后仍然很差。5年的平均存活率小于10%。HCC的死亡率与它的发病率相平行，这是由于HCC是耐常规化疗的、快速增长及早期血管侵害的肿瘤，仅有单一的全身性疗法（索拉非尼）可用于晚期疾病，但生存获益平均仅为几个月。

肝细胞癌（HCC）的特征在于确诊较晚和治疗的预后不良，所述治疗通常包括肿瘤的手术切除和化疗^5-7。目前，对于原发性恶性肿瘤唯一批准的治疗是索拉非尼，索拉非尼为最初被开发用于原发性肾癌的受体酪氨酸激酶和Raf抑制剂，其也对HCC在一定程度上有效，作为单一治疗可延长2-3个月的存活期。

对于HCC，目前的治疗方案并非最佳方案，尤其是在转移后更是如此。迄今为止还未能证明辐射和化疗令人满意；手术是治疗HCC最有效的方案。然而，手术只适用于具有小的、可切除的肿瘤的患者。作为单一疗法，只有单一的、基于分子的、以酪氨酸激酶受体和MEK/ERK通路为靶标的药物（索拉非尼）在患者中产生了响应。然而，该药物增加的存活时间仅为几个月。因此，当务之急是要发现有效的新型靶向疗法，用于这一高度侵略性的癌症。

转录因子LSF是在整个动物界中保守性的转录因子小家族的成员¹⁵，其在哺乳动物组织和细胞系中广泛表达¹⁴。随着细胞从静止期（quiescence）发展至DNA复制（G0至S）^3,13，LSF的活性受到严格控制，并且其为细胞通过G1/S过渡期得以有效发展所必需^1,12。LSF活性的调节通常通过翻译后修饰而进行，通常LSF蛋白水平很低并且恒定不变。然而最近发现，在肿瘤细胞中、特别是在HCC细胞系和HCC患者样品中，LSF蛋白水平显示出高度上调^4,16。这些升高的LSF水平显示在HCC细胞中促进了肿瘤的发生。基于由他人以及本申请的申请人所进行的工作，据信在受试者中抑制LSF和HCC的修复之间存在相关性。

发明内容

定义

出于对本申请进行解释的目的，将使用下列定义，并且只要是适当的，以单数形式使用的术语也包括复数含义，反之亦然。如果如下所述的任何定义与该词汇在任何其它文件中的使用相冲突，为用于对本说明书及其相关权利要求的范围和意图进行解释的目的，如下所述的定义应当总是优先适用。尽管有上述规定，通过引用并入本文的任何文件的范围和含义，不应通过以下给出的定义而改变。更确切地说，应该由普通从业人员根据其内容、以及参照本文所提供的说明书内容的公开，对所述并入的文件进行解释。

除了另有说明或者明显不适用“和/或”的情况，使用“或”意味着“和/或”。除了另有说明或者明显不适用“一个或多个/一种或多种”的情况，使用“一个/一种”意味着“一个或多个/一种或多种”。“包含（comprise、comprises、comprising）”和“包括（include、includes、including）”可互换使用，并非旨在限制。此外，在一个或多个实施方式的描述中使用术语“包含”时，本领域技术人员将理解的是，在一些特定情况下，可以替代地使用“基本上由……组成”和/或“由……组成”来对实施方式进行描述。

本文所使用的短语“参比样品”和“参比水平”可互换使用，指条件的对照。例如，在治疗的上下文中，参比水平可以是未经治疗的受试者的水平。在一些实施方式中，诊断的上下文中的参比水平可以是正常健康受试者的水平。在一些实施方式中，本文所使用的参比水平或样品是指受试者在接受治疗前的时间点所测得的水平。

本文所使用的术语“给药”和“给予”相对于疾病或疾患的治疗可互换使用，两个术语均是指使用有效剂量的药物组合物、通过例如胃肠道或全身给药的给药方法对受试者进行治疗，所述药物组合物包含本文所公开的化合物。

本文所使用的“药剂”是合成的或生物来源的化学分子。在本发明的上下文中，药剂可以是可用于药物组合物中的分子。在一些实施方式中，药剂可以是化学治疗剂。在一些实施方式中，药剂可以是本文所公开的小分子化合物（例如，小分子LSF抑制剂）。在一些实施方式中，药剂可以提供预防或治疗价值。在一些实施方式中，本文所公开的小分子化合物可以作为预防物或预防性治疗用于癌症的预防，例如，在受试者处于发展为癌症的风险中或很可能发展为癌症的情况下。在一些实施方式中，药剂可以单独使用以实现本发明，例如，通过将本文所公开的小分子化合物配制成组合物，所述组合物可能进一步包含（或可能不包含）药学上可接受的载体。

本文所使用的术语“脂肪族”是指本文所定义的任何直链、支链或环状的烷基、烯基和炔基部分。本文所用的“脂肪族”基团可以是取代或未取代的。

本文所使用的术语“烯基”是指含有一个或多个双键的下述基团：（i）C2-C10（即，长度为2-10个碳的碳链）的直链或支链烃；或（ii）C3-C8的环状烃（即，长度为3-8个碳的碳链）。本文所用的“烯基”基团可以是取代或未取代的。术语“烯基”还旨在适用于下述化合物：其中，在烯基基团的烷基链上的一个或多个亚甲基基团（如果有的话）可被杂原子（例如，-O-、-Si-或-S-）取代。在一些实施方式中，烯基基团可以是含有一个或多个双键的下述基团：C2-C6（即，长度为2-6个碳的碳链）的直链或支链烃，或者C3-C6（即，长度为3-6个碳的碳链）的环状烃。在一些实施方式中，烯基基团可以是含有一个或多个双键的下述基团：C2-C4（即，长度为2-4个碳的碳链）的直链或支链烃，或者C3-C5（即，长度为3-5个碳的碳链）的环状烃。

本文所使用的术语“亚烯基”是指包含两个连接位点的烯基基团，所述位点连接到至少两个部分。本文所用的“亚烯基”基团可以是取代或未取代的。术语“亚烯基”还旨在适用于下述化合物：其中，在亚烯基基团的烷基链上的一个或多个亚甲基基团（如果有的话）被杂原子（例如，-O-、-Si-或-S-）取代。

本文所使用的术语“烷氧基”是指由式-O-R'所表示的基团，其中R'为烷基、烯基、炔基或芳基烷基。

本文所使用的术语“烷基”是指完全饱和的下述基团：（i）C2-C10的直链或支链烃；或（ii）C3-C7的环状烃（即，长度为3-7个碳的碳链，如环丙基基团、环丁基基团、环戊基基团、环己基基团或环己基亚甲基基团）。本文所使用的“烷基”基团可以是取代或未取代的。术语“烷基”还旨在适用于下述化合物：其中，在烷基链上的一个或多个亚甲基基团可被杂原子（例如，-O-、-Si-或-S-）取代。在一些实施方式中，烷基基团可以是完全饱和的下述基团：C2-C6的直链或支链烃或C3-C6的环状烃。

本文所使用的术语“亚烷基”是指包含至少两个连接位点的直链或支链的烷基链、芳基烷基链或环烷基链部分，所述位点连接到至少两个部分（例如，{-CH₂-}（亚甲基）；{-CH₂CH₂-}（亚乙基）等，其中，括号表示连接位点）。本文所用的“亚烷基”基团可以是取代或未取代的。术语“亚烷基”还旨在适用于下述化合物：其中，在亚烷基基团的烷基链上的一个或多个亚甲基基团可被杂原子（例如，-O-、-Si-或-S-）取代。在一些实施方式中，亚烷基可以是C1-C10的烃。在一些实施方式中，亚烷基可以是C1-C6的烃。在一些实施方式中，亚烷基可以是C1-C4的烃。

本文所使用的术语“炔基”是指含有一个或多个三键的下述基团：（i）C2-C10的直链或支链烃；或（ii）C3-C8的环状烃。本文所用的“炔基”基团可以是取代或未取代的。术语“炔基”还旨在适用于下述化合物：其中，在炔基基团的烷基链上的一个或多个亚甲基基团（如果有的话）可被杂原子（例如，-O-、-Si-或-S-）取代。在一些实施方式中，炔基基团可以是含有一个或多个三键的下述基团：C2-C6的直链或支链烃，或者C3-C6的环状烃。在一些实施方式中，炔基基团可以是含有一个或多个三键的下述基团：C2-C4的直链或支链烃，或者C3-C5的环状烃。

本文所使用的术语“亚炔基”是指包含至少两个连接位点的炔基基团，所述位点连接到至少两个部分。本文所用的“亚炔基”基团可以是取代或未取代的。术语“亚炔基”还旨在适用于下述化合物：其中，在亚炔基基团的烷基链上的一个或多个亚甲基基团（如果有的话）可被杂原子（例如，-O-、-Si-或-S-）取代。在一些实施方式中，亚炔基可以是C1-C10的烃。在一些实施方式中，亚炔基可以是C1-C6的烃。在一些实施方式中，亚炔基可以是C1-C4的烃。

本文所使用的术语“芳基”单独使用或作为另一基团（例如，芳基烷基等）的一部分时，是指碳环芳香族基团，例如苯基。芳基基团还包括稠合多环芳香环系，其中，碳环芳香环稠合至另一个碳环芳香环（例如，1-萘基、2-萘基、1-蒽基，2-蒽基等）；或者其中，碳环芳香环稠合至一个或多个碳环非芳香环（例如，四氢萘基、茚满等）。本文所使用的“芳基”基团可以是取代或未取代的。芳基基团可以包含至多30个碳原子，并且通常包含一个或多个六元芳香环。

本文所使用的术语“亚芳基”是指包含至少两个连接位点的芳基或杂芳基基团，所述位点连接到至少两个部分（例如，亚苯基等）。稠合至碳环、非芳香环的亚芳基的连接位点可以在芳香环、非芳香环中的任意一个上。本文所使用的“亚芳基”基团可以是取代或未取代的。

本文所使用的术语“芳基烷基”是指通过亚烷基接头，连接至另一部分（例如烷基基团或芳基基团）的芳基或杂芳基基团。本文所使用的“芳基烷基”基团可以是取代或未取代的。术语“芳基烷基”还旨在适用于下述化合物：其中，在芳基烷基基团的烷基链上的一个或多个亚甲基基团可被杂原子（例如，-O-、-Si-或-S-）取代。

本文所使用的术语“芳基亚烷基（arylalkylene）”是指包含至少两个连接位点的芳基烷基基团，所述位点连接到至少两个部分。连接位点可以在芳香环或亚烷基基团上。本文所使用的“芳基亚烷基”基团可以是取代或未取代的。术语“芳基亚烷基”还旨在适用于下述化合物：其中，在芳基亚烷基基团的烷基链上的一个或多个亚甲基基团（如果有的话）可被杂原子（例如，-O-、-Si-或-S-）取代。当芳基亚烷基被取代时，取代基可位于芳香环或芳基亚烷基的亚烷基部分上，或者芳香环及芳基亚烷基的亚烷基部分上均有取代基。

本文所使用的术语“苄基”是指下述式的基团：

其中，R'''各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或甲基、乙基、甲氧基或乙氧基基团，R''''各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或甲基或乙基基团。在未取代的苄基基团中，R'''和R''''各自独立地为氢。

本文所使用的术语“癌症”和“恶性肿瘤”可互换使用，是指以细胞不受控制的异常生长为特征的疾病或疾病状态。癌细胞可以在局部扩散，或者通过血流和淋巴***向身体的其它部位扩散。术语“癌症”还旨在包括受试者体内的器官或组织的任何具有以下特征的疾病：在组织中的正常或异常细胞的增殖控制不佳或不受控制，并且其对整个身体产生影响。该定义范围内的癌症疾病包括良性肿瘤、发育异常、增生以及呈现转移性生长或任何其它类似转化的肿瘤（例如往往先于癌症发生的白斑）。术语癌症还包括转移性肿瘤，所述转移性肿瘤是已经迁移至受试者的其它部位，在该位置建立新的肿瘤的癌细胞（如原发肿瘤或转移瘤）。本文所公开的、“抑制”癌症转移的小分子化合物可能导致继发性肿瘤的延迟出现、减缓原发性或继发性肿瘤的发展、减少继发性肿瘤的发生、延缓或降低疾病继发效应的严重程度、遏制肿瘤生长以及肿瘤复原等等。在极端情况下，本文将肿瘤生长的完全抑制称为预防（例如，几乎完全抑制、未发生的情况下没有转移、癌症已经转移的情况下没有发生进一步转移、或者由转移细胞通过肿瘤的再种引起的原发性肿瘤的增长几乎完全抑制）。

本文所使用的“癌细胞”是指在体内、离体、或者在组织培养物中的癌细胞、癌前细胞（pre-cancerous cell）或转化细胞，其具有自发的或诱发的表型变化，所述表型变化无需涉及对新遗传物质的吸收。尽管转化可由转化病毒的感染和新基因组核酸的并入而引起、或由对外源核酸的吸收而引起，它也可自发引起或在暴露于致癌物质（carcinogen）后使得内源性基因发生突变而引起。转化/癌症与如下体外、体内和离体的状况有关：例如，在适合的动物宿主（如裸鼠）中的形态学变化、细胞永生化、异常生长控制、病灶形成、锚着非依赖性（anchorage independence）、恶性肿瘤（malignancy）、接触抑制和生长密度限制的缺失、生长因子或血清非依赖性、肿瘤特异性标志物、侵袭或转移、以及肿瘤生长（参见例如Freshney，Culture Animal Cells:A Manual of Basic Technique.（第三版，1994年））。

本文所使用的术语“细胞LSF活性”和“LSF的生物活性”在本文中可互换使用。这两个术语均是指LSF调节LSF下游细胞过程的能力，例如，调节LSF下游基因的表达。在一些实施方式中，LSF的生物活性可以引起对LSF-下游基因的表达的刺激作用。在其它实施方式中，LSF的生物活性可以诱导对LSF-下游基因表达的抑制作用。在另外的其它实施方式中，LSF的生物活性可归因于与其它细胞蛋白的相互作用。

本文所使用的术语“衍生物”是指在结构上与另一物质（即，可称为“母体”化合物的“原始”物质）相关的化学物质。“衍生物”可由结构上相关的母体化合物经一个或多个步骤制备得到。衍生物的一般物理性质和化学性质仍与母体化合物相类似。

本文所使用的术语“疾患”和“疾病”可互换使用，是指身体状态或一些器官的任何改变，这些改变阻碍或干扰功能的表现和/或对于患病的人或与其接触的人引起症状，如不舒服、功能紊乱、痛苦、甚至死亡。疾病或疾患也可涉及瘟热（distemper）、欠佳（ailing）、微恙（ailment）、痼疾（malady）、紊乱（disorder）、失常（sickness）、病患（illness）、病痛（complaint）、不适（indisposition）、病症（affection）。在一些实施方式中，所述疾患或疾病是癌症。在一些实施方式中，所述疾病或疾患是肝癌，例如肝细胞癌（HCC）。在一些实施方式中，所述疾病或疾患选自于选自以下癌症所组成的组中的癌症：结肠癌、乳腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、子宫内膜癌、胰腺癌、***癌、骨癌、肾癌、白血病、大肠癌、肺癌、小细胞肺癌（SSLC）、胃癌和其它癌症。

如本文所使用，治疗剂的“疗效”是指最小有效剂量和毒性副作用程度之间的关系。如果治疗终点可以通过给予较低的剂量或较短的剂量方案来实现，则药剂的疗效增加。如果可以降低毒性，治疗剂可以在较长的给药方案中给药、甚至以更大的患者依从性进行长期给药，提高生活质量。此外，药剂的毒性降低使得从业人员可以加大用药量，从而尽早达到治疗终点，或达到更高的治疗终点。

例如，可以通过在一定时间段之后，根据肿瘤体积达到两倍或四倍对肿瘤生长进行定量测定来评价癌症肿瘤的发展。在这个例子中，可以参考在接受治疗的动物中肿瘤变为两倍或四倍大小所花费时间的量（变为两倍或四倍肿瘤大小所花费的天数的平均值），与未接受治疗的动物（对照组）相比较而确定治疗剂的“疗效”。

本文所使用的术语“有效量”是指给予至少一种治疗剂（例如，小分子化合物）或药物组合物（例如制剂），从而能够减少或终止异常增殖的至少一种症状（例如，癌症或恶性肿瘤的症状）的量。例如，使用如本文所公开的方法的有效量可以认为是足以将异常增生的症状、例如癌症（如HCC）或恶性肿瘤的至少一种症状减少至少10%的量。本文所使用的有效量还可以包括足以预防或延迟疾病症状的发展、改变疾病症状的过程（例如但不限于，减缓疾病症状的进程）或逆转疾病症状的量。因此，术语“有效量”或“治疗有效量”是指药物组合物的治疗剂（例如，本文中所公开的具有结构式（I）至（X）的小分子化合物中的至少一种）减轻癌症（如HCC）的至少一些症状的量。换句话说，本文所公开的小分子化合物的“治疗有效量”是在给予化合物的受试者中，对例如癌症（如HCC）发挥有益效果的化合物的量。有益效果可包括抑制或延迟癌症（如HCC）的进展。作为单剂量或多剂量，对个体给药的剂量将根据多种因素而变化，所述因素包括小分子化合物的药动学性质、给药途径、受试者的身体状况和特征（性别、年龄、体重、健康、体形）、症状的程度、并行治疗、治疗的频率和所期望的效果。

本文所使用的术语“对映体”是指彼此为镜像并且不能重叠的一对分子异构体。相对于它们与平面偏振光的相互作用以及相对于生物活性，对映体可彼此区分。

本文所使用的术语“表达”是指通过对由基团转录的RNA进行翻译而获得的蛋白的量、和/或由基因转录的RNA的量。

本文所使用的“卤素”是指氟、氯、溴或碘。

本文所使用的术语“杂芳基”是指包含1个、2个、3个或4个杂原子的芳香族杂环，所述杂原子彼此独立地选自于氮、硫和氧。本文所使用的“杂芳基”基团可以是取代或未取代的。杂芳基可以稠合至一个或两个环（例如环烷基、芳基或杂芳基环）。杂芳基与分子的连接位点可以在杂芳基、环烷基、杂环烷基或芳基环上，并且所述杂芳基可以通过碳或杂原子连接。杂芳基基团的实例包括：咪唑基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、异噁唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁二唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、喹啉基、异喹啉基、吲唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、吲嗪基、咪唑并吡啶基、吡唑基、***基、噁唑基、四唑基、苯并咪唑基、苯并异噻唑基、苯并噻二唑基、苯并噁二唑、吲哚基、四氢吲哚基、氮杂吲哚基、咪唑并吡啶基、喹唑啉基、嘌呤基、吡咯并[2,3]嘧啶基、吡唑并[3,4]嘧啶基或苯并(b)噻吩基，上述基团可任选地被取代。

本文所使用的术语“杂环”是指在环中包含至少两种不同元素的原子的任何环状分子结构。此外，以参考文献“生物化学与分子生物学牛津词典，牛津大学出版社，牛津，1997”作为证据，杂环是在有机化学领域得到公认的术语。

本文所使用的术语“羟基”指-OH基团。

本文所使用的术语“HIV”是指人类免疫缺陷病毒。

本文所使用的短语“LSF的水平”涵盖LSF的表达和/或生物活性。

本文所使用的术语“LSF”是晚期SV40因子或晚期猿猴病毒40因子的简称，也被称为别名LBP-1（前导结合蛋白-1）、LBP-1c、LBP-1d、SEF（SAA3增强因子）、TFCP2（转录因子CP2）和CP2。LSF调节各种细胞和病毒启动子。对于本发明的目的而言，术语“LSF”是指由基因TFCP2编码的转录因子。LSF是在多种细胞类型中对于细胞周期进程所需的DNA-结合转录因子。它结合至α-珠蛋白启动子上，并激活α-珠蛋白基因的转录。已经报道了LSF有利于进入细胞周期的G1/S期、促进DNA合成并作为抗凋亡因子发挥作用。

本文所使用的短语“LSF的水平”包含LSF的表达和/或生物活性。

本文所使用的全部术语“降低（lower）”、“减少（reduced）”、“减少（reduction）”或“下降（decrease）”、“下调（down-regulate）”或“抑制”通常指统计学显著量的下降。然而，为避免疑问，“降低（lower）”、“减少（reduced）”、“减少（reduction）”或“下降（decrease）”或“抑制”是指与参比水平相比下降至少10%，例如下降至少约20%、或至少约30%、或至少约40%、或至少约50%、或至少约60%、或至少约70%、或至少约80%、或至少约90%、或直至并包含100%下降（即，与参比样品相比不存在的水平），或者与参比水平相比以10-100%之间任意水平下降。当“下降”或“抑制”用于基因或蛋白（例如LSF）的表达或活性水平的上下文中时，它是指在细胞、细胞提取物或细胞上清液中蛋白或核酸水平或活性的降低。例如，所述降低可能是由于降低的RNA稳定性、转录或翻译，增加的蛋白降解或RNA干扰。在一些实施方式中，本文所公开的小分子LSF抑制剂降低了LSF的活性或表达。在对照条件下，表达或活性的水平优选降低至少约5%、至少约10%、至少约25%、至少约50%、至少约75%、至少约80%、或甚至至少约90%。本文所使用的关于LSF的术语“水平”是指LSF的表达或活性。

本文所使用的术语“抑制LSF”是指抑制LSF的表达（水平）和/或LSF的生物活性。在一些实施方式中，术语“抑制LSF”是指LSF的蛋白水平和/或LSF的基因转录物水平的下降。例如，抑制LSF可导致对LSF进行编码的TFCP2的基因表达减少。术语“抑制LSF”还指LSF生物活性的下调或抑制，例如LSF对LSF-调节下游基因的表达进行调节的功能，所述基因如胸苷酸合成酶（TYMS）¹、分泌性磷蛋白表达1（SPP1）⁴、补体因子H（CFH）和纤连蛋白1（FN1）¹¹。

本文所使用的术语“LSF的抑制剂”和“LSF抑制剂”可互换使用，通常指抑制LSF的药剂。所述药剂可以是合成的或生物来源的。它们可以是抑制LSF的有机或无机分子、或肽、抗体或反义RNA。本文所公开的小分子化合物（例如，具有结构式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX和X的化合物）能抑制LSF的表达和/或LSF的生物活性（水平）。在一些实施方式中，LSF抑制剂是由化合物分离得到的对映体。在一些实施方式中，LSF抑制剂是它们的前药、衍生物和/或药学上可接受的盐。

如本文所使用的“转移”细胞是指具有转移潜力的细胞，并且在用于本发明的方法中时，能够接种感兴趣的肿瘤或细胞集落。本文所使用的“高转移性”细胞是指具有高的转移潜力的细胞，例如，来自以下本文所述细胞系的细胞可以被认为是高转移性细胞：例如但不限于LM2、MDA-MB-231、PC-3、DU-145、Lewis肺癌。转移性细胞可以以各种方式生成，将在下面进行进一步讨论。

本文所使用的术语“正常的健康受试者”是指没有任何疾病或疾患的任何症状的受试者，或者未确认患有任何疾病或疾患的受试者，或者未接受任何药物治疗的受试者，或者根据医学检查由医生确认为健康的受试者。

本文所使用的术语“任选取代的”和“取代或未取代的”是等价并且可互换的，是指含有一个或多个取代基的烷基、亚烷基、烯基、亚烯基、炔基、亚炔基、芳基、芳基烷基、亚芳基、杂芳基或芳基亚烷基基团。对于任何烷基、亚烷基、烯基、亚烯基、炔基、亚炔基、芳基、芳基烷基、亚芳基、杂芳基或芳基亚烷基基团而言，适当的取代基包括在本发明的一些实施方式中所使用的反应条件下保持稳定的任何取代基。适当的取代基的非限制性实例可包括：烷基（例如，甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、环己基等）基团、卤代烷基（例如，三氟甲基、2,2,2-三氟乙基等）基团、烷氧基（例如，甲氧基、乙氧基等）基团、芳基（例如苯基）基团、芳基烷基（例如，苄基）基团、硝基、氰基、季铵化的氮原子或卤素基团（例如，氟、氯、溴或碘）基团。

此外，烷基、亚烷基、烯基、亚烯基、炔基、亚炔基、芳基、芳基烷基、亚芳基、杂芳基或芳基亚烷基基团中的任何部分也可被=O和/或=S取代。

本文所使用的短语“胃肠外给药”和“经胃肠外给药”是指除了肠内和局部给药以外的给药模式，通常通过注射给药，包括但不限于：静脉内、肌内、动脉内、鞘内、心室内、囊内、眶内、心内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、脑脊髓内以及胸骨内注射、输液及其它注射或输液技术（不作限制）。

本文所使用的“药物组合物”是指适合给予受试者（例如，人或哺乳动物）的化学或生物组合物。对这样的组合物进行特别配制，用于经由若干途径中的一个或多个进行给药，所述途径包括但不限于：口服、胃肠外、静脉内、动脉内、腹膜内、皮下、鼻内、舌下、脊柱内、脑室内等。

本文所使用的术语“药学上可接受的”是指下述化合物、材料、组合物、制剂和/或剂型：在合理的医学判断范围内，所述化合物、材料、组合物、制剂和/或剂型适合于与人和/或动物组织进行接触而没有过多毒性、刺激性、过敏反应或其它问题或并发症，且与合理的收益/风险比相称。

本文所使用的短语“药学上可接受的载体”是指药学上可接受的材料、组合物或辅料，例如液态或固态填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或包封材料，所述载体涉及将受试药剂（例如小分子化合物I-X）从一个器官或身体的一部分携带或运输至另一个器官或身体的另一部分。每种载体在与制剂中其它成分相容的意义上而言必须是“可接受的”，例如载体不会降低药剂对治疗的影响。换句话说，载体是药学上惰性或基本上惰性的。文献或本文中有时使用术语“生理上可耐受的载体”和“生物相容的递送辅料”，并且旨在与短语“药学上可接受的载体”互换使用。

本文所使用的术语“苯氧基”是指由式-O-R''表示的酚基团，其中R''为芳基或杂芳基。

本文所使用的术语“苯基”是指下式的基团：

其中，R'''各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或甲基、乙基、甲氧基或乙氧基基团。在未取代的苯基集团中，R'''各自为氢。

本文所使用的术语“预防（prevent、preventing、prevention）”是指避免或延迟疾病或疾患中的一种或多种症状或可测量标志物的表现。在症状或标志物的表现中的延迟是相对于在具有疾病或疾患发展的相似可能性或易感性的对照组或未接受治疗的受试者中，此类症状或标志物出现时间的延迟。术语“预防（prevent、preventing、prevention）”不仅包括完全避免或预防症状或标志物，还包括相对于在具有疾病或疾患发展的相似可能性或易感性的对照组或未接受治疗的受试者中产生的症状或标志物，或相对于基于对受到疾病或疾患感染的人群中历史或统计测量可能产生的症状或标志物，降低所述症状或标志物的任意一种的严重度或程度。“降低严重度”是指相对于对照或参比，症状或可测量的疾病标志物的严重度或程度降低至少10%，例如至少15%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或甚至100%（即，没有任何症状或可测量的标志物）。

本文所使用的“前药”是指可通过某些化学或生理过程（例如，酶促过程和代谢水解）转变为预防性或治疗性化合物的化合物。

针对基因的表达，本文所使用的术语“调节”和“调控”是可互换的，是指对例如基因的表达产生作用。在一些实施方式中，所述作用可以是刺激，例如增加基因的表达。在一些实施方式中，所述作用可以是抑制，例如减少基因的表达。

本文所使用的“肉瘤”是指衍生自***的癌症细胞类型，例如骨（骨肉瘤）、软骨（软骨肉瘤）、肌肉（横纹肌肉瘤（rhabdomyosarcoma或rhabdosarcoma））、脂肪细胞（脂肪肉瘤）、淋巴组织（淋巴肉瘤）、产生胶原的纤维细胞（纤维肉瘤）。肉瘤可能由某些病毒感染而引起，例如Kaposi肉瘤病毒、Rous肉瘤病毒等。

本文所使用的术语“受试者”和“个体”可以互换使用，包括接受预防性或治疗性治疗的人和动物（例如，其它哺乳动物受试者）。例如，术语“受试者”可以指使用本发明的化合物I-X提供治疗（包括预防性治疗）的人。“非人”受试者可包括哺乳动物（例如大鼠、小鼠、兔、羊、猫、狗、牛、猪）和非人灵长类动物。

本文所使用的短语“全身给药（systemic administration、administeredsystemically”和“外周给药（peripheral administration、administeredperipherally）是可互换的，是指将本文所公开的药物组合物进行给药进入动物***，从而进行代谢和其它类似的进程，所述组合物包含具有结构式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVI或XXXI的小分子化合物中的至少一种。

本文所使用的术语“组织”旨在包括完整的细胞、血液、血液制品（如血浆和血清）、骨骼、关节、肌肉、平滑肌和器官。在一些实施方式中，组织可以指肝组织。

针对疾病或疾患的治疗，本文所使用的术语“治疗（treat）”、“治疗（treatment）”和“治疗（treating）”可互换使用，是指预防疾病的发展、或改变疾病进展（例如但不限于，减缓疾病的进程）、或逆转疾病的症状、或在受试者中降低一种或多种症状和/或一种或多种生化标志物、防止一种或多种症状的恶化或进程、促进恢复或改善预后、和/或在处于这一风险的受试者中预防疾病、以及减缓或减少现有疾病的进展。在一些实施方式中，对于完全或部分预防疾病或其病征或症状而言，治疗可以是预防性的。例如，处于HCC高度风险中的受试者（例如，感染HBV或HCV的受试者）可以进行预防性治疗，以防止HCC的发病。在一些实施方式中，预防性治疗可以施用于接受疾病前期治疗以及疾病缓解的受试者。例如，对于经由前期疗法已经将其HCC肿瘤移除或稳定的受试者，可以进行预防性治疗（例如，使用LSF抑制剂），以防止HCC的复发和转移。在其它实施方式中，对于消除或减少病症或疾病的至少一种症状而言，治疗可以是治疗性的。例如，在HCC的情况下，治疗性治疗是指在已患有HCC的受试者中抑制或延缓HCC的进程。可测量的减轻包括可测量的标志物或症状（例如测量肿瘤大小或生物标志物水平）的任何统计学显著下降。

本文所使用的术语“肿瘤”和“肿瘤细胞”可互换使用，是指细胞正在异常增殖的组织块或组织类型。

本文中所使用的“致瘤性细胞”是指当导入至受试者中合适的位点时，可形成肿瘤的细胞。所述细胞可以是非转移性的或转移性的。肿瘤细胞可以来源于例如下述组织或器官的癌症：乳腺、肺、结肠、膀胱、***、肝、胃肠道、子宫内膜、气管-支气管、胰腺、肝脏、子宫、卵巢、鼻咽、***、骨或骨髓、脑、皮肤或其它合适的组织或器官。癌细胞可以是人来源的。

本文所使用的术语“上调”、“增加”或“激活”均用来指统计学上显著量的增加；为避免任何疑问，术语“上调”、“增加”或“升高”是指相对于参比水平增加至少10%，例如增加至少约20%、或至少约30%、或至少约40%、或至少约50%、或至少约60%、或至少约70%、或至少约80%、或至少约90%、或直至并包括100%的增加，或者相对于参比水平以10-100%之间任意水平增加。在一些实施方式中，所述增加可以大于100%。例如，增加可为约2倍、或约3倍、或约4倍、或约5倍或约10倍的增加，或者相对于参比水平，以2倍至10倍之间或更多的任何水平增加。当“增加”用于基因或蛋白的表达或活性的上下文中时，它是指在细胞、细胞提取物或细胞上清液中的蛋白或核酸水平或活性的正向变化。例如，这种增加可能是由于增加的RNA稳定性、转录或翻译，或者降低蛋白降解。优选地，这种增加是超过对照条件下表达或活性水平的至少5%、至少约10%、至少约25%、至少约50%、至少约75%、至少约80%、至少约100%、至少约200%、或甚至约500%或更多。

总体说明

应当理解的是，在“总体说明”一节中所陈述的讨论可涉及本文所述发明的各种实施方式中的一些或所有实施方式。

晚期SV40因子（LSF）

LSF是在多种细胞类型中为细胞周期进程所需的DNA-结合转录因子。LSF结合至α-珠蛋白启动子上，并激活α-珠蛋白基因的转录。已经报道了LSF有利于进入细胞周期的G1/S期，促进DNA合成，并作为抗凋亡因子而发挥作用¹。

LSF还调节红细胞基因的表达，发挥珠蛋白基因启动子转录开关的作用，并激活许多其它细胞和病毒基因启动子。基因产物与某些炎症反应因子相互作用，这种基因的多态性可涉及阿尔茨海默氏病的发病机制。

LSF的主要细胞靶标是胸苷酸合成酶（TS）基因（TYMS），其在DNA合成所需的dTTP的生产中编码限速酶¹。TS一直是用于癌症治疗的长期化疗的靶标，并且最近讨论了在肝癌细胞系中LSF升高的水平可有助于对于一种普遍使用的胸苷酸合成酶抑制剂5-氟尿嘧啶的化学抗性⁴。LSF的抑制消除了TS诱导，诱导或停滞在G1/S期转换，或者在进入S期之后细胞凋亡。因此，LSF在DNA合成和细胞存活中起重要作用。

在肝脏中，LSF由炎性细胞因子激活并调节急性期蛋白的表达^8,9。

LSF抑制剂

化合物抑制LSF的能力可通过测定LSF的表达或活性（水平）相对于缺乏LSF抑制剂的情况下LSF水平的减少来进行评估。在一些实施方式中，化合物抑制LSF的能力可通过测量生物活性（例如，LSF的转录活性相对于缺乏LSF抑制剂的情况下LSF转录活性）的降低来进行评估。LSF的表达包括由基因（例如，编码LSF的TFCP2）转录的RNA的量，和/或由基因（例如TFCP2）转录的RNA翻译获得的LSF蛋白的量。例如，LSF抑制剂相对于缺乏LSF抑制剂情况下的参比水平，可以以至少约10%、至少约15%、至少约20%、至少约30%、至少约40%、至少约50%、至少约60%、至少约70%、至少约80%、至少约90%、95%、99%或甚至100%地抑制LSF的表达。

此外，化合物抑制LSF的能力还可以通过测量相对于阴性对照（例如，缺乏LSF抑制剂的实验条件下）LSF生物活性的降低或抑制来进行评估。LSF的生物活性可以指LSF调控LSF靶向基因（例如，胸苷酸合成酶（TYMS））和/或LSF-下游基因（例如，分泌型磷蛋白1（SPP1）、补体因子H（CFH）和其它肿瘤相关基因）的表达的能力（参见Yoo等，PNAS，2010，107：8357-8362，在此将其全部引入作为参考）。因此，LSF抑制剂可以抑制LSF的生物活性，例如，相对于缺乏LSF抑制剂的参比水平，以至少约10%、至少约15%、至少约20%、至少约30%、至少约40%、至少约50%、至少约60%、至少约70%、至少约80%、至少约90%、95%、99%或甚至100%降低编码骨桥蛋白（OPN，也被称为分泌磷蛋白1、SPP1）的SPP1的表达。

在一些实施方式中，化合物抑制LSF的能力由相对于未经该LSF抑制剂治疗的参比条件，抑制LSF诱导的肿瘤生成和癌细胞的转移来进行评估，所述癌细胞例如本文实施例中所示的体外或体内动物模型中的肝癌细胞。在该实施方式中，LSF抑制剂相对于未经LSF抑制剂治疗的情况，以至少约15%、至少约20%、至少约30%、至少约40%、至少约50%、至少约60%、至少约70%、至少约80%、至少约90%、95%、99%或甚至100%减少肿瘤的重量和体积。

本发明的一部分涉及针对LSF抑制剂的小分子化合物、以及相关组合物和方法。在一些实施方式中，如本文所公开的LSF的小分子抑制剂可用于抑制细胞LSF活性。在一些实施方式中，本文所公开的LSF抑制剂可以降低LSF的表达（水平）。

LSF的主要靶标之一是胸苷酸合成酶（TS）基因（TYMS），该基因编码在DNA合成所需的dTTP生产中的限速酶¹。Yoo等，PNAS，2010，107：8357-8362中公开了LSF-下游基因的其它实例，包括但不限于SPP1（编码骨桥蛋白）、补体因子H（CFH）、TSPAN8、S100A10、CDH17、EFNB2、ZEB1、REG1A、REG3A、SAA4、TAGLN、FGFR2、EGFR、CYP2B7P1、CYP2B6、GPX2、DPYD、PKLR、LEF1、ICAM2和IGFBP7。

在一些实施方式中，LSF下游的基因是肿瘤相关的基因，例如，与侵略和转移、血管生成、上皮-间质转化（EMT）、细胞生长、药物代谢、衰老、细胞粘附、糖酵解、Wnt信号传导、生长和再生、炎症反应（例如急性期蛋白）和基质降解酶的调节剂（例如MMP9）相关的基因。在各种实施方式中，LSF是由TFCP2编码的转录因子。因此，抑制LSF可以破坏或抑制LSF与DNA的结合和/或LSF与其它蛋白形成复合物的相互作用。

因此，在一些实施方式中，细胞LSF活性的抑制可以通过测量由转录因子LSF调节的下游基因的水平来确定。LSF对LSF靶向基因或LSF-下游基因的表达（水平）的作用可以是刺激性或抑制性的。例如，由LSF诱导的一个基因是编码OPN的SPP1。因此，LSF生物活性的抑制导致SPP1mRNA水平的降低、和/或相应编码蛋白（OPN）的量的减少。在另一个实施方式中，被LSF下游抑制的一个基因是TAGLN。因此，LSF生物活性的抑制导致TAGLN mRNA水平的增加。在一些实施方式中，LSF的细胞活性可通过TS水平的降低来进行测量。

在进一步的实施方式中，LSF的抑制可以减少LSF的表达，例如蛋白水平的降低、和/或LSF基因转录水平（例如mRNA）的降低。

本发明的一个方面提供了鉴别LSF抑制剂的方法，例如，通过包含Yoo等⁴所述的在LSF依赖性荧光素酶报告测试中测量LSF活性的方法。如本文所公开，相对于缺乏LSF抑制剂的表达，LSF抑制剂能够以至少约10%、至少约15%、至少约20%、至少约30%、至少约40%、至少约50%、至少约60%、至少约70%、至少约80%、至少约90%、95%、99%或甚至100%降低LSF的功能性转录活性或表达（例如LSF的蛋白水平和/或LSF的基因转录物水平）。LSF的表达可以通过技术人员已知的标准方法（例如，免疫印迹、ELISA和定量PCR）以及在下面实施例一节中提供的方法来进行测定。

在一些实施方式中，相对于缺乏LSF抑制剂的活性水平，本文所公开的LSF抑制剂能够抑制或降低细胞LSF活性的至少约10%，例如，至少约15%、至少约20%、至少约30%、至少约40%、至少约50%、至少约60%、至少约70%、至少约80%、至少约90%、95%、99%或甚至100%。

在一些实施方式中，相对于缺乏LSF抑制剂的表达，LSF的小分子抑制剂能够以至少10%、至少约15%、至少约20%、至少约30%、至少约40%、至少约50%、至少约60%、至少约70%、至少约80%、至少约90%、95%、99%或甚至100%降低由LSF上调的下游基因（例如编码OPN的SPP1）的表达。在替代的实施方式中，相对于缺乏LSF抑制剂的表达，LSF抑制剂能够以至少10%、至少约15%、至少约20%、至少约30%、至少约40%、至少约50%、至少约60%、至少约70%、至少约80%、至少约90%、95%、99%或甚至100%提高由LSF下调的下游基因（例如TAGLN）的表达。

这种小分子LSF抑制剂的实例包括具有结构式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XVI、XVII、XVIII和XXX的化合物（如本文所定义）。

LSF和癌症之间的联系

最近的出版物已经证明了LSF和癌症（特别是HCC）之间的联系⁴。事实上，作者主张LSF在癌症（特别是HCC）中具有调节作用，LSF的抑制是治疗性干预的可行目标。因此，LSF的小分子抑制剂可以是有效的预防剂或治疗剂。因此，诸如结构式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XVI、XVII、XVIII和XXX化合物（如本文所定义）的小分子LSF抑制剂是用于治疗癌症（例如，HCC）的可能的预防剂或治疗剂。

前药：

前药在给予受试者时是无活性的（即酯），但是在体内可转化为活性化合物，例如通过水解成游离羧酸或游离羟基。前药化合物通常在机体中提供溶解性、组织相容性或延迟释放的优势。术语“前药”还意味着包括将这样的前药给予受试者时，在体内释放出活性化合物的任何共价键结的载体。活性化合物的前药可以通过对存在于活性化合物的官能团进行修饰而制备，以这样的方式使得修饰物在常规操作中或在体内裂解为母体活性化合物。前药的一些实例包括羟基、氨基或巯基基团键合至任何基团的化合物，当活性化合物的前药给予受试者时，所述基团分别裂解形成游离羟基、游离氨基或游离巯基基团。前药的一些其它实例包括但不限于：活性化合物中的醇官能团的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物，或胺官能团的乙酰胺、甲酰胺和苯甲酰胺衍生物等。参见Harper,“Drug Latentiation”,Jucker,ed.Progress in Drug Research4:221-294(1962)；Morozowich等,“Application of Physical Organic Principles toProdrug Design”,E.B.Roche ed.Design of Biopharmaceutical Propertiesthrough Prodrugs and Analogs,APHA Acad.Pharm.Sci.40(1977)；Bioreversible Carriers in Drug in Drug Design,Theory and Application,E.B.Roche,ed.,APHA Acad.Pharm.Sci.(1987)；Design of Prodrugs,H.Bundgaard,Elsevier(1985)；Wang等,“Prodrug approaches to the improveddelivery of peptide drug”in Curr.Pharm.Design.5(4):265-287(1999)；Pauletti等,(1997)Improvement in peptide bioavailability:Peptidomimeticsand Prodrug Strategies,Adv.Drug.Delivery Rev.27:235-256；Mizen等,(1998)“The Use of Esters as Prodrugs for Oral Delivery of(3-Lactamantibiotics,”Pharm.Biotech.ll,:345-365；Gaignault等,(1996)“DesigningProdrugs and Bioprecursors I.Carrier Prodrugs,”Pract.Med.Chem.671-696；Asgharnejad,“Improving Oral Drug Transport”,in TransportProcesses in Pharmaceutical Systems,G.L.Amidon,P.I.Lee and E.M.Topp,Eds.,Marcell Dekker,p.185-218(2000)；Balant等,“Prodrugs for theimprovement of drug absorption via different routes of administration”,Eur.J.Drug Metab.Pharmacokinet.,15(2):143-53(1990)；Balimane and Sinko,“Involvement of multiple transporters in the oral absorption of nucleosideanalogues”,Adv.Drug Delivery Rev.,39(1-3):183-209(1999)；Browne,“Fosphenytoin(Cerebyx)”,Clin.Neuropharmacol.20(1):1-12(1997)；Bundgaard,“Bioreversible derivatization of drugs—principle andapplicability to improve the therapeutic effects of drugs”,Arch.Pharm.Chemi86(1):1-39(1979)；Bundgaard H.“Improved drug delivery by theprodrug approach”,Controlled Drug Delivery17:179-96(1987)；BundgaardH.“Prodrugs as a means to improve the delivery of peptide drugs”,Arfv.Drug Delivery Rev.8(1):1-38(1992)；Fleisher等,“Improved oral drugdelivery:solubility limitations overcome by the use of prodrugs”,Arfv.DrugDelivery Rev.19(2):115-130(1996)；Fleisher等,“Design of prodrugs forimproved gastrointestinal absorption by intestinal enzyme targeting”,Methods Enzymol.112(Drug Enzyme Targeting,Pt.A):360-81,(1985)；Farquhar D等,“Biologically Reversible Phosphate-Protective Groups”,Pharm.Sci.,72(3):324-325(1983)；Freeman S等,“Bioreversible Protectionfor the Phospho Group:Chemical Stability and Bioactivation ofDi(4-acetoxy-benzyl)Methylphosphonate with Carboxyesterase,”Chem.Soc.,Chem.Commun.,875-877(1991)；Friis and Bundgaard,“Prodrugs ofphosphates and phosphonates:Novel lipophilic alphaacyloxyalkyl esterderivatives of phosphate-or phosphonate containing drugs masking thenegative charges of these groups”,Eur.J.Pharm.Sci.4:49-59(1996)；Gangwar等,“Pro-drug,molecular structure and percutaneous delivery”,Des.Biopharm.Prop.Prodrugs Analogs,[Symp.]Meeting Date1976,409-21.(1977)；Nathwani and Wood,“Penicillins:a current review of their clinicalpharmacology and therapeutic use”,Drugs45(6):866-94(1993)；Sinhababuand Thakker,“Prodrugs of anticancer agents”,Adv.Drug Delivery Rev.19(2):241-273(1996)；Stella等,“Prodrugs.Do they have advantages inclinical practice?”,Drugs29(5):455-73(1985)；Tan等,“Development andoptimization of anti-HIV nucleoside analogs and prodrugs:A review of theircellular pharmacology,structure-activity relationships andpharmacokinetics”,Adv.Drug Delivery Rev.39(1-3):117-151(1999)；Taylor,“Improved passive oral drug delivery via prodrugs”,Adv.Drug DeliveryRev.,19(2):131-148(1996)；Valentino and Borchardt,“Prodrug strategies toenhance the intestinal absorption of peptides”,Drug Discovery Today2(4):148-155(1997)；Wiebe and Knaus,“Concepts for the design of anti-HIVnucleoside prodrugs for treating cephalic HIV infection”,Adv.DrugDelivery Rev.:39(l-3):63-80(1999)；Waller等,“Prodrugs”,Br.J.Clin.Pharmac.28:497-507(1989)，以引用的方式将上述内容的整体并入本文。

因此，在一些实施方式中，本发明还涉及化合物I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XVI、XVII、XVIII和XXX（如本文所定义）中任意化合物的前药。

分析

在一些实施方式中，本发明还涉及分析（例如，细胞分析）。细胞分析可以在细胞、细胞培养物（或其传代培养物）中进行，或者用组织（如肿瘤）进行。细胞或组织的来源可以来自于任何来源。细胞或组织可以是正常的或患病的。在一些实施方式中，进行分析是为了确定细胞或组织是否处于疾病状态或具有易成为疾病状态的倾向。

因此，在一些实施方式中，本发明涉及用于处理细胞（包括组织细胞）的分析方法，所述方法包括使细胞与以下物质接触：（i）至少一种小分子化合物（例如，如本文所定义的化合物I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XVI、XVII、XVIII和XXX）；（ii）包含所述化合物的组合物、混合物或制剂；（iii）所述化合物的前药；或者（iv）使用所述化合物、组合物或前药的组合疗法。在一些实施方式中，使细胞相继（以任何顺序）或同时与所述化合物、组合物、混合物或制剂、前药或联合疗法进行接触。在一些实施方式中，细胞或组织可与各种不同的化疗剂、维生素、抗氧化剂补充剂和/或营养物（neutraceuticals）各自以不同的浓度接触，从而确定各种治疗剂、维生素、抗氧化剂补充剂和/或它们的组合的毒性水平。在一些实施方式中，细胞分析可以例如用于确认疾病状态。在一些实施方式中，例如，细胞分析可以用于监测疾病状态的进程（或非疾病状态）。此外，基于该分析的结果，医生或从业人员可以进一步决定对于受试者的治疗方案，或甚至可以基于该分析结果定制治疗方案（即个性化药物治疗）。

治疗

在一些实施方式中，作为LSF抑制剂的小分子化合物可用于治疗受试者。所述治疗可以是预防性的或针对已有的疾病。例如，所述治疗可包括对具有癌细胞和/或肿瘤的受试者的治疗。

因此，本发明可涉及通过向所述受试者给予以下物质，从而在受试者中对疾病状态（如肿瘤）进行治疗：（i）至少一种小分子化合物（例如，化合物I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XVI、XVII、XVIII和XXX）；（ii）包含所述化合物的组合物、混合物或制剂；（iii）所述化合物的前药；或者（iv）使用所述化合物、组合物或前药的组合疗法。所述受试者可以是任何受试者。例如，所述受试者是患者或处于临床环境的受试者。所述受试者可以是癌症患者。

用于对受试者进行治疗的混合物和/或制剂可以包含药学上可接受的载体以及认为适合的任何其它化合物或制剂。将使用技术人员已知的方法来确定各种化合物、其它治疗剂和/或药学上可接受的载体的具体比率以及它们的剂量。通常情况下，特定制剂（以及包含在其中的个体化合物和药剂）的合适的每日剂量是产生治疗效果的最低有效剂量的量。然而，如果观察到有益治疗效果的同时避免了毒性作用，则可以增加（一种或多种化合物和/或药剂的）剂量。

本发明的各种实施方式

应当理解的是，除非另有说明，步骤的顺序或执行某些操作的顺序并不重要，只要本发明的教导可以操作即可。此外，在一些实施方式中，除非另有说明，两个或多个步骤或操作可以同时进行，只要本发明的教导可以操作即可。

本文所公开的小分子化合物可用于抑制LSF表达。这种小分子LSF抑制剂的实例包括本文所示的具有结构式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX和X的化合物。所述化合物也可以是用于治疗癌症（例如HCC）的可能的预防剂或治疗剂。因此，更一般而言，在一些实施方式中，本发明涉及具有结构式XI、XII或XIII的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，每个X独立地为O或S；R₁为氢或烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团；R₂为氢或羟基、烷氧基、苯氧基、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团；每个R₃和每个R₆满足（i）独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、烷氧基、苯氧基、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团；或者（ii）两个R₆部分和/或两个R₃部分与亚烷基、亚烯基或亚炔基基团一起形成取代或未取代的C3至C6的环；R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀和R₁₁各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、烷氧基、苯氧基、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团；并且，R₁₃为氢或烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团。

在一些实施方式中，本发明涉及具有结构式XI、XII或XIII的化合物：其中，每个X为O或S；R₁为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、取代或未取代的苯基、或者取代或未取代的苄基基团；R₂为氢或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀和R₁₁各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；并且R₁₃为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团。

在一些实施方式中，本发明涉及具有结构式XI、XII或XIII的化合物：其中，每个X为O或S；R₁为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基基团；R₂为氢或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基基团；每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团；R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀和R₁₁各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团；并且R₁₃为氢、甲基或乙基。

在一些实施方式中，本发明涉及具有结构式I、II或III的化合物或其药学上可接受的盐：

根据实施例中提供的信息，化合物I、II和III显示出作为LSF抑制剂的性质。因此，所述化合物作为癌症预防剂和/或治疗剂也应该是有用的。

此外，更一般而言，在一些实施方式中，本发明涉及具有结构式XIV、XV或XVI的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，每个X独立地为O或S；R₁为氢或烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团；R₂为氢或羟基、烷氧基、苯氧基、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团；每个R₃和每个R₆满足（i）独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、烷氧基、苯氧基、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团；或者（ii）两个R₆部分和/或两个R₃部分与亚烷基、亚烯基或亚炔基基团一起形成取代或未取代的C3至C6的环；并且R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、烷氧基、苯氧基、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团。

在一些实施方式中，本发明涉及具有结构式XIV、XV或XVI的化合物：其中，每个X为O或S；R₁为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、取代或未取代的苯基、或者取代或未取代的苄基基团；R₂为氢或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；并且R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团。

在一些实施方式中，本发明涉及具有结构式XIV、XV或XVI的化合物：其中，每个X为O或S；R₁为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基基团；R₂为氢或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基基团；每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团；并且R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团。

在一些实施方式中，本发明涉及具有结构式IV、V或VI的化合物或其药学上可接受的盐，

根据实施例中提供的信息，化合物IV、V和VI显示出作为LSF抑制剂的性质。因此，所述化合物作为癌症预防剂和/或治疗剂也应该是有用的。

在一些实施方式中，本发明涉及组合物。该组合物可包含一种或多种上述化合物。例如，所述组合物可以是制剂。因此，在一些实施方式中，本发明涉及包含具有结构式XI、XII或XIII的化合物或其药学上可接受的盐的组合物：

在一些实施方式中，本发明涉及含有一种或多种具有结构式XI、XII或XIII的化合物的组合物：其中，每个X为O或S；R₁为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、取代或未取代的苯基、或者取代或未取代的苄基基团；R₂为氢或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀和R₁₁各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；并且R₁₃为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团。

在一些实施方式中，本发明涉及含有一种或多种具有结构式XI、XII或XIII的化合物的组合物：其中，每个X为O或S；R₁为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基基团；R₂为氢或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基基团；每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团；R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀和R₁₁各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团；并且R₁₃为氢、甲基或乙基。

在一些实施方式中，本发明涉及含有一种或多种具有结构式I、II或III的化合物或其药学上可接受的盐的组合物：

在一些实施方式中，本发明涉及含有一种或多种具有结构式XIV、XV或XVI的化合物或其药学上可接受的盐的组合物：

在一些实施方式中，本发明涉及含有一种或多种具有结构式XIV、XV或XVI的化合物的组合物：其中，每个X为O或S；R₁为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、取代或未取代的苯基、或者取代或未取代的苄基基团；R₂为氢或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；并且R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团。

在一些实施方式中，本发明涉及含有一种或多种具有结构式XIV、XV或XVI的化合物的组合物：其中，每个X为O或S；R₁为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基基团；R₂为氢或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基基团；每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团；并且R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团。

在一些实施方式中，本发明涉及含有一种或多种具有结构式IV、V或VI的化合物或其药学上可接受的盐的组合物，

在一些实施方式中，任意前述化合物和/或组合物可进一步包含药学上可接受的载体。

如上所述，上述公开的小分子化合物显示出作为LSF抑制剂的性质。因此，在一些实施方式中，本发明涉及一种方法，所述方法包括给予受试者有效量的具有结构式XI、XII或XIII的化合物或其药学上可接受的盐，从而在所述受试者中抑制或处理LSF：

在一些实施方式中，本发明涉及一种方法，所述方法包括给予受试者有效量的具有结构式XI、XII或XIII的化合物，从而在所述受试者中抑制或处理LSF：其中，每个X为O或S；R₁为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、取代或未取代的苯基、或者取代或未取代的苄基基团；R₂为氢或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀和R₁₁各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；并且R₁₃为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团。

在一些实施方式中，本发明涉及一种方法，所述方法包括给予受试者有效量的具有结构式XI、XII或XIII的化合物，从而在所述受试者中抑制或处理LSF：其中，每个X为O或S；R₁为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基基团；R₂为氢或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基基团；每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团；R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀和R₁₁各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团；并且R₁₃为氢、甲基或乙基。

在一些实施方式中，本发明涉及一种方法，所述方法包括给予受试者有效量的具有结构式I、II或III的化合物或其药学上可接受的盐，从而在所述受试者中抑制或处理LSF：

在一些实施方式中，本发明涉及一种方法，所述方法包括给予受试者有效量的具有结构式XIV、XV或XVI的化合物或其药学上可接受的盐，从而在所述受试者中抑制或处理LSF：

在一些实施方式中，本发明涉及一种方法，所述方法包括给予受试者有效量的具有结构式XIV、XV或XVI的化合物，从而在所述受试者中抑制或处理LSF：其中，每个X为O或S；R₁为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、取代或未取代的苯基、或者取代或未取代的苄基基团；R₂为氢或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；并且R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团。

在一些实施方式中，本发明涉及一种方法，所述方法包括给予受试者有效量的具有结构式XIV、XV或XVI的化合物，从而在所述受试者中抑制或处理LSF：其中，每个X为O或S；R₁为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基基团；R₂为氢或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基基团；每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团；并且R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团。

在一些实施方式中，本发明涉及一种方法，所述方法包括给予受试者有效量的具有结构式IV、V或VI的化合物或其药学上可接受的盐，从而在所述受试者中抑制或处理LSF：

在上述任意方法中，所述组合物还可以包含药学上可接受的载体。在上述任意方法中，所述受试者可患有肝细胞癌，或具有患肝细胞癌的风险。在上述任意方法中，所述受试者可以患有HIV，或具有患HIV的风险。在上述任意方法中，所述受试者为哺乳动物。在上述任意方法中，所述受试者可以是人。

由于它们能够抑制LSF，可以使用本文所公开的化合物和组合物制备用于治疗癌症的药物。因此，在一些实施方式中，本发明涉及本文所讨论的任意化合物或组合物在制造用于治疗癌症（例如肝细胞癌）的药物方面的用途。在一些实施方式中，所述药物进一步包含药学上可接受的载体。在一些实施方式中，所述药物进一步包含至少一种其它治疗剂。在一些实施方式中，所述药物用于治疗存在于哺乳动物体内的肝细胞癌。所述哺乳动物可以是人。

类似地，由于所述化合物和含有本文所公开的所述化合物的组合物可用作LSF抑制剂，在一些实施方式中，本发明还涉及本文公开的任意所述化合物和/或组合物在制造能够在细胞或组织中抑制LSF的组合物方面的用途。

如实施例10和图5-7所示，本文所公开的化合物和组合物可用于抑制细胞中的LSF。因此，在一些实施方式中，本发明涉及一种方法，所述方法包括：a）使癌细胞或癌组织与本文所公开的任意小分子化合物进行接触；以及b）直接或间接地监测与所述癌细胞或癌组织相关的LSF的表达或活性。类似地，本发明还涉及一种方法，所述方法包括：a）使癌细胞或癌组织与含有本文所公开的小分子化合物的任意组合物进行接触；以及b）直接或间接地监测与所述癌细胞或癌组织相关的LSF的表达或活性。

如图5所示，各种小分子化合物（例如，化合物I和II的外消旋混合物）是非常强的LSF抑制剂。例如，与化合物IV和V的外消旋混合物（图6）以及化合物VI（图7）相比，该外消旋混合物的效果高出约一个数量级（即，约10倍有效）。在申请人迄今为止所进行的实验中，化合物I和II的混合物是目前观测到的最强的LSF抑制剂。

实施例

根据下列实施例可以对本发明的各个方面进行进一步的理解，实施例不应被理解为以任何方式对本发明教导的范围进行限制。

实施例1：FQI-1（8-(2-乙氧基苯基)-7,8-二氢-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g]喹啉-6(5H)-酮）的合成

向火焰干燥的带有搅拌棒并回填充满氩气的25mL圆底烧瓶中加入7.5mL的二甲基甲酰胺、134mg（0.7mmol）的2-乙氧基肉桂酸以及306mg的N-[(二甲基氨基)-1H-2,3,-***-[4,5-b]吡啶-1-基-亚甲基]-N-甲基甲胺六氟磷酸盐（HATU）（0.81mmol，1.15当量）。反应在室温下搅拌1小时，然后向其中加入244μL的N,N'-二异丙基乙胺（DIPEA）（1.4mmol，2.0当量）和112mg的亚甲二氧基（methylenedioxle）苯胺（0.735mmol，1.05当量）。反应在室温下搅拌3小时，然后向其中加入25mL的乙酸乙酯（EtOAc）和25mL的水。然后分离出有机层，水层用EtOAc洗涤（2×25mL）。合并有机层，并用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，通过过滤收集。然后将乙酸乙酯溶液浓缩，上样至硅胶，并通过柱色谱纯化，洗脱剂为50:50的己烷:EtOAc。收集并浓缩通过UV看到的目标物质，得到230mg所期望的丙烯酰胺（收率为84%）。然后，不经进一步纯化而使用该物质。向8mL微波反应管中加入230μmol的丙烯酰胺（70mg）和4mL的三氟乙酸。反应在70℃和200W功率的微波条件下进行30分钟。从微波反应器中将管取出，并冷却至室温。将粗反应混合物转移至50mL的圆底烧瓶并置于冰浴中。在搅拌条件下向其中加入2mL的二氯甲烷（CH₂Cl₂）和15mL的饱和碳酸氢钠（分批，3×5mL），然后用EtOAc萃取（2×10mL）。分离有机层，合并，然后经硫酸钠干燥。通过过滤分离EtOAc，并使用旋转蒸发仪在减压下浓缩EtOAc层，上样至硅胶。然后通过快速柱色谱在硅胶上纯化粗产物，使用6:4的己烷:EtOAc作为洗脱剂，得到8-(2-乙氧基苯基)-7,8-二氢-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g]喹啉-6(5H)-酮（60mg，193μmol）。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm1.34(t,J=7.03Hz,3H),2.72-2.92(m,2H),3.95-4.04(m,2H),4.53(t,J=6.64Hz,1H),5.84(s,2H),6.32(s,1H),6.40(s,1H),6.73-6.78(m,2H),6.81(d,J=8.60Hz,1H),7.13(m,1H),8.03(br.s.,1H).¹³C NMR(126MHz,氯仿-d)δppm14.88(s)35.69(s)36.72(s)63.51(s)97.80(s)101.15(s)111.40(s)118.68(s)120.57(s)128.19(s)128.29(s)129.74(s)131.80(s)143.57(s)146.98(s)156.16(s)171.72(s)FTIR CM^-13208,2982,2895,1677,1482,1233,1039.Low ResMS:计算得到的分子量(C₁₈H₁₇NO₄)=311.3.观察到的M+1离子=312。实施例2：5-(2-乙氧基苯基)-4,5-二氢-[1,3]二氧杂环戊烯[4,5-g][1,2,4]***并[1,5-a]喹啉（化合物VII——化合物IV和V的外消旋混合物）的合成

在氮气气氛下，将FQI-1（200mg，1.0当量）溶解于0.96mL的干燥乙腈和0.64mL的三乙胺中。一次性加入五硫化二磷（214mg，1.5当量），并将反应加热至100℃，反应5小时。在真空下除去溶剂，残余物在20mL的二氯甲烷和10ml的盐水之间分配。分离各层，将有机部分用另外两份盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。在氮气气氛下，将得到的粗制橙色泡沫状物在小瓶中溶于1.3mL的正丁醇中。加入乙酸（8uL）和甲酰肼（39mg，1.0当量），将小瓶紧密盖封，加热至130℃，反应24小时。在真空中除去溶剂，并将残留物悬浮于二氯甲烷中，用三份盐水洗涤。有机层经硫酸钠干燥，浓缩，得到粗制油状物，将粗制油状物通过快速柱色谱（氯仿中含2%-5%的甲醇）纯化。合并包含产物的部分，得到棕色油状物，用氯仿/己烷重结晶，得到***VII，棕褐色固体（40mg，19%）。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ=8.55(s,1H),7.21(ddd,J=1.8,7.4,8.2Hz,1H),6.97(s,1H),6.89(dd,J=0.9,8.2Hz,1H),6.78(dt,J=0.9,7.6Hz,1H),6.67(dd,J=1.4,7.6Hz,1H),6.60(d,J=0.6Hz,1H),6.04-6.00(m,2H),4.71(t,J=6.7Hz,1H),4.08(dddd,J=2.1,7.0,9.3,16.3Hz,2H),3.55(dd,J=7.2,16.0Hz,1H),3.35(dd,J=6.4,15.9Hz,1H),1.40(t,J=7.0Hz,3H).ESI-MS(M+H⁺)m/z=336。

实施例3：5-(2-甲氧基苯基)-4,5-二氢-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g][1,2,4]***并[1,5-a]喹啉（化合物VIII——外消旋混合物）的合成

在氮气气氛下，将8-(2-甲氧基苯基)-7,8-二氢-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g]喹啉-6(5H)-酮（172mg，1.0当量——基本上如实施例1所述的方法，使用2-甲氧基肉桂酸作为起始原料而制备）溶解于0.87mL的干燥乙腈和0.58mL的三乙胺中。一次性加入五硫化二磷（193mg，1.5当量），将反应加热至100℃，反应6小时。在真空下除去溶剂，残余物在20mL的二氯甲烷（DCM）和10ml的盐水之间分配。分离各层，将有机部分用另外两份盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。在氮气气氛下，将得到的粗制橙色泡沫状物溶于小瓶中的1.1mL的正丁醇中。加入乙酸（7uL）和甲酰肼（35mg，1.0当量），将小瓶紧密盖封，加热至130℃，反应24小时。在真空中除去溶剂，并将残留物悬浮于DCM中，用三份盐水洗涤。有机层经硫酸钠干燥，浓缩，得到粗制油状物，将粗制油状物通过快速柱色谱（氯仿中含2%-5%的甲醇）纯化。合并包含产物的部分，得到棕色油状物，用氯仿/己烷重结晶，得到***VIII，棕褐色固体（50mg，27%），经UPLC-MS（ELSD）测定其纯度＞99%。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ=8.54(s,1H),7.21(ddd,J=1.6,7.4,7.8Hz,1H),6.96(s,1H),6.89(d,J=8.2Hz,1H),6.77(t,J=7.4Hz,1H),6.64(dd,J=1.4,7.4Hz,1H),6.56-6.54(m,1H),5.99(s,2H),4.67(t,J=6.6Hz,1H),3.83(s,3H),3.50(dd,J=7.0,16.0Hz,1H),3.32(dd,J=6.3,16.0Hz,1H).ESI-MS(M+H⁺)m/z=322。

实施例4：5-(2-丙氧基苯基)-4,5-二氢-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g][1,2,4]***并[1,5-a]喹啉（化合物IX——外消旋混合物）的合成

在氮气气氛下，将8-(2-丙氧基苯基)-7,8-二氢-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g]喹啉-6(5H)-酮（175mg，1.0当量——基本上如实施例1所述的方法，使用2-丙氧基肉桂酸作为起始原料而制备）溶解于0.8mL的干燥乙腈和0.54mL的三乙胺中。一次性加入五硫化二磷（179mg，1.5当量），将反应加热至100℃，反应6小时。在真空下除去溶剂，残余物在20mL的DCM和10ml的盐水之间分配。分离各层，将有机部分用另外两份盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。在氮气气氛下，将得到的粗制橙色泡沫状物在小瓶中溶于1.0mL的正丁醇中。加入乙酸（6uL）和甲酰肼（31mg，1.0当量），将小瓶紧密盖封，加热至130℃，反应24小时。在真空中除去溶剂，并将残留物悬浮于DCM中，用三份盐水洗涤。有机层经硫酸钠干燥，浓缩，得到粗制油状物，将粗制油状物通过快速柱色谱（氯仿中含2%-5%的甲醇）纯化。合并包含产物的部分，得到125mg的棕色油状物，用氯仿/己烷重结晶，得到***化合物IX，黄色固体（31mg，17%），经UPLC-MS（ELSD）测定其纯度＞99%。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ=8.54(s,1H),7.19(dt,J=2.0,8.2Hz,1H),6.99-6.92(m,1H),6.88(d,J=8.2Hz,1H),6.76(t,J=7.4Hz,1H),6.65(dd,J=1.6,7.8Hz,1H),6.59-6.54(m,1H),6.03-5.96(m,2H),4.67(dd,J=6.4,7.4Hz,1H),4.03-3.88(m,2H),3.55(dd,J=7.4,16.2Hz,1H),3.33(dd,J=6.4,16.2Hz,1H),1.78(qd,J=7.1,13.9Hz,2H),0.98(t,J=7.4Hz,3H).ESI-MS(M+H⁺)m/z=350。

实施例5：5-(2-乙氧基苯基)-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g][1,2,4]***并[1,5-a]喹啉（VI）的合成

在氮气气氛下，称取8-(2-乙氧基苯基)-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g]喹啉-6(5H)-酮——化合物VII（200mg，1.0当量），置于反应瓶中。加入POCl₃（2mL），反应加热至120℃，反应2小时。将反应混合物倒入20mL的冰水中，并用25mL的乙酸乙酯萃取三次。用水和饱和碳酸氢钠洗涤合并的有机相，经硫酸镁干燥，并在真空下浓缩，得到220mg的粗制棕色固体。将该固体的一半保留，而在氮气气氛下，将另一半（110mg，1.0当量）在反应瓶中溶解于1mL的正丁醇中。一次性加入甲酰肼（23mg，1.2当量），将小瓶紧密盖封，加热至130℃，反应48小时。在真空中除去溶剂，残留物在DCM和盐水中分配。用盐水洗涤有机层两次，经硫酸钠干燥，浓缩，得到棕色残留物，将棕色残留物通过快速柱色谱（氯仿中含3%-5%的甲醇）纯化。分离得到***化合物VI，橙色泡沫状物（22mg，20%），经UPLC-MS（ELSD）测定其纯度＞98%。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ=9.13(s,1H),7.51(s,1H),7.47(ddd,J=1.6,7.8,8.2Hz,1H),7.43(s,1H),7.28(dd,J=1.6,7.8Hz,1H),7.10(t,J=7.8Hz,1H),7.05(d,J=8.2Hz,1H),6.87(s,1H),6.15-6.09(m,2H),5.31(s,1H),4.03(q,J=7.0Hz,2H),1.16(t,J=7.0Hz,3H).ESI-MS(M+H⁺)m/z=334。

实施例6：5-(2-丙氧基苯基)-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g][1,2,4]***并[1,5-a]喹啉（化合物XXX）的合成

在氮气气氛下，称取8-(2-丙氧基苯基)-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g]喹啉-6(5H)-酮——化合物IX（180mg，1.0当量），置于反应瓶中。加入POCl₃（2mL），反应加热至120℃，反应2小时。将反应混合物倒入20mL的冰水中，并用25mL的乙酸乙酯萃取三次。用水和饱和碳酸氢钠洗涤合并的有机相，经硫酸镁干燥，并在真空下浓缩，得到190mg的粗制棕色固体；在氮气气氛下，将该固体在反应瓶中溶解于1.7mL的正丁醇中。加入甲酰肼（40mg，1.2当量），反应加热至130℃。48小时之后，加入额外的甲酰肼（10mg，0.3当量），反应加热至130℃，再反应24小时。将反应混合物在真空下浓缩，并在DCM和盐水中分配。用盐水洗涤有机层两次，经硫酸钠干燥，浓缩，得到棕色残留物，将棕色残留物通过快速柱色谱（100%的氯仿至氯仿中含2%-5%的甲醇）纯化。分离得到棕色油状产物（104mg），所述棕色油状产物被起始喹啉污染。将棕色油状产物通过二次柱色谱（100%的***，随后是***中梯度含有1%至2%至5%至10%的乙醇）再纯化，得到分析纯的***化合物XXX（30mg，16%，经UPLC-MS（ELSD）测定其纯度＞98%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ=9.13(s,1H),7.50(s,1H),7.46(ddd,J=1.2,7.4,8.2Hz,1H),7.43(s,1H),7.28(dd,J=1.2,7.4Hz,1H),7.09(t,J=7.4Hz,1H),7.04(d,J=8.2Hz,1H),6.87(s,1H),6.11(d,J=7.0Hz,2H),3.96-3.84(m,2H),1.53(sxt,J=7.0Hz,2H),0.70(t,J=7.0Hz,3H).ESI-MS(M+H⁺)m/z=348。

实施例7：8-(2-乙氧基苯基)-7,8-二氢-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g]喹啉-6(5H)-硫酮（化合物X——化合物I和II的外消旋混合物）的合成

在氮气气氛下，称取FQI-1（200mg，1.0当量），置于干燥的反应瓶中。加入干燥甲苯（4.3mL），接着加入Lawesson试剂（416mg，1.6当量）。将小瓶紧密盖封，将反应加热至回流并过夜。冷却后，在真空下除去溶剂，残留物经快速柱色谱（己烷中梯度含有20%-70%的乙酸乙酯）纯化。将含有产物的部分合并，得到120mg不纯的红色油状物，将红色油状物用二氯甲烷/己烷重结晶，得到化合物X，白色针状物（40mg，19%）。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=9.69(br.s.,1H),7.20(ddd,J=2.9,6.0,8.3Hz,1H),6.89-6.82(m,3H),6.46(d,J=3.1Hz,2H),5.93(d,J=1.2Hz,2H),4.54(dd,J=6.4,7.8Hz,1H),4.10-4.02(m,2H),3.42(dd,J=7.8,17.0Hz,1H),3.23(dd,J=6.4,17.0Hz,1H),1.40(t,J=7.0Hz,3H).ESI-MS(M+H+)m/z=328。

实施例8：8-(2-乙氧基苯基)-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g]喹啉-6(5H)-硫酮（化合物III）的合成

向火焰干燥的带有搅拌棒的250mL圆底烧瓶加入5mmol（950mg）的3-(2-乙氧基苯基)丙炔酸、100mL的甲苯和7.5mmol（1.5mL）的亚硫酰氯。将反应加热至85℃，在该温度下搅拌12小时，然后冷却至室温。在减压下除去溶剂，然后将所得粗物质共沸（2×25mL甲苯），以除去过量的亚硫酰氯。在高真空下将所得原料干燥2小时，制成1.0M的CH₂Cl₂溶液。向带有搅拌棒并在真空下火焰干燥的25mL圆底烧瓶中加入5mL的CH₂Cl₂、1.0mmol（1mL，1.0M的CH₂Cl₂溶液）的酰氯（如上述方法制备）以及1.1mmol（151mg）的苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-胺。将反应升温至50℃，并在该温度下搅拌15小时。反应冷却至室温，加入10mL的饱和碳酸氢钠将反应淬灭，用EtOA_c（2×10mL）萃取，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空下浓缩。然后将粗制原料溶于最少量CH₂Cl₂（5mL）中，并倒入20mL冰冷的己烷中。N-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-3-(2-乙氧基苯基)丙炔酰胺从溶液中沉淀，通过过滤分离，用冰冷的***（10mL）洗涤，并在高真空中干燥2小时，得到309mg所期望的炔丙基酰胺。不经进一步纯化而使用所得到的物质。向火焰干燥的带有搅拌棒的10mL圆底烧瓶中加入84mg的炔丙基酰胺（0.270mmol，1当量）、500uL的CH₂Cl₂、1mL的三氟乙酸以及3mg的Pd(OAc)₂（0.01mmol，0.05当量）。反应在室温下搅拌2小时，然后通过加入10ml的饱和氯化铵将反应淬灭，用CH₂Cl₂（3×10mL）萃取，经硫酸钠干燥，通过过滤分离CH₂Cl₂相，浓缩，上样至硅胶，并通过快速柱色谱法在硅胶上分离，使用7:3的己烷:EtOAc作为洗脱剂，得到8-(2-乙氧基苯基)-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g]喹啉-6(5H)-酮。然后通过使用大孔聚苯乙烯键合的三巯基三嗪（trimercaptotriazine）（MP-TMT）树脂（15mg）的5mL四氢呋喃（THF）溶液在室温下处理24小时，清除残留的钯（Pd）。然后经硅藻土垫对物质进行过滤，并用CH₂Cl₂（2×10mL）洗涤硅藻土。然后将CH₂Cl₂溶液浓缩，上样至硅胶，并通过第二硅胶柱纯化，洗脱剂为7:3的己烷:EtOAc，得到纯化的8-(2-乙氧基苯基)-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-g]喹啉-6(5H)-酮——FQI-2（65mg，232μmol）。经¹H NMR、¹³C NMR和HPLC-MS确定，所述材料的纯度>95%。¹H NMR(500MHz,氯仿-d)δppm1.12(t,J=6.97Hz,3H),3.95(m,2H),5.91(d,J=1.22Hz,2H),6.47(s,1H),6.55(s,1H),6.90(s,1H),6.95(d,J=8.56Hz,1H),6.99(m,1H),7.15(d,J=7.34Hz,1H),7.35(m,1H),12.98(br.s.,1H).¹³C NMR(126MHz,氯仿-d)δppm14.60(s),63.96(s),96.33(s),101.62(s),104.48(s),112.29(s),114.87(s),118.72(s),120.69(s),126.86(s),130.08(s),130.48(s),135.55(s),144.13(s),150.43(s),150.99(s),155.71(s),164.40(s).FTIR CM^-12978,2886,1653,1487,1251,1037.Low Res MS:计算得到的分子量(C₁₈H₁₅NO₄)=309.3.观察到的M+1离子=310。

向火焰干燥的、带有搅拌棒、并保持在氩气氛下的反应管中加入117.7mg的FQI-2（0.37mmol）、3mL的甲苯和84mg的Lawesson试剂。将溶液升温至110℃，搅拌30分钟。然后将反应冷却至室温，通过加入25mL的水将反应淬灭，用CH₂Cl₂（2×20ml）萃取，经硫酸钠干燥，通过棉塞过滤，浸渍至硅胶上。然后将回收的物质通过柱色谱（洗脱剂为70:30的己烷:EtOAc）纯化，得到硫代羰基产物（化合物III）。

实施例9：将FQI-1进行手性HPLC分离，得到(R)-FQI-1和(S)-FQI-1

向1.5mL的HPLC小瓶中加入10mg的FQI-1以及1mL的己烷:异丙醇:氯仿的8:1:1混合物。将溶液超声处理30分钟，以确保完全溶解。使用己烷中含有20%异丙醇的混合物以1mL/min的流速对装有分析型ChiralCel OD柱（粒径为10μ，ID为4.6mm，长250mm）的Agilent1100系列HPLC进行预冲（prime），持续30分钟。预冲后，将100μL的FQI-1溶液注射至柱上，并使其分离。从9分钟标记开始，使得大量收集液每隔15秒由柱的端部滴至一系列1.5mL的HPLC小瓶中（共24个小瓶，每个小瓶中收集约250μL）。在15分钟标记后，用己烷中含有20%异丙醇的混合物将小瓶中的溶液稀释至750μL，并进行对映体纯度分析。收集并合并所有包含er>95:5的物质的小瓶。此过程重复20次，得到7mg的(S)-FQI-1（保留时间为9.6分钟，[α]_D ²³=-8.5°（c=0.47，CHCl₃）er>99:1）和10mg的(R)-FQI-1（保留时间为10.6分钟，[α]_D ²³=+10.5（c=0.67，CHCl₃）er>99:1）。

(S)-FQI-1的保留时间为9.6分钟；(R)-FQI-1的保留时间为10.6分钟。

(S)-FQI-1和(R)-FQI-1的旋光度以及绝对构型的确定

(S)-FQI-1

(-)-(S)-FQI-1[α]_D ²³=-8.5°（c=0.47，CHCl₃，er=99:1）

文献中已知的并用于旋光度比较分析的化合物。（Paquin,J.F.,Stephenson,C.R.,Defieber,C.&Carreira,E.M.Catalytic asymmetricsynthesis with Rh-diene complexes:1,4-addition of arylboronic acids tounsaturated esters.Org.Lett.7,3821-3824（2005）；Chen,G.,Tokunaga,N.&Hayashi,T.Rhodium-catalyzed asymmetric1,4-addition of arylboronic acidsto coumarins:asymmetric synthesis of(R)-tolterodine.Org.Lett.7,2285-2288（2005））

[α]_D ²³=-53.4°[α]_D ²³=-45.2°

(+)-(R)-FQI-1[α]_D ²³=+10.5（c=0.67，CHCl₃，er=99:1）

文献中已知的并用于旋光度比较分析的化合物。（Defieber,C.,Paquin,J.F.,Serna,S.&Carreira,E.M.Chiral[2.2.2]dienes as ligands for Rh(I)inconjugate additions of boronic acids to a wide range of acceptors.Org.Lett.6,3873-3876（2004）；Alper,H.&Dong,C.Enantioselectivecyclocarbonylation of2-vinylanilines to six-membered lactams.Tetrahedron:Asymmetry15,35-40（2004））

[α]_D ²³=+37.4[α]_D ²³=+21.6

说明：在本实施例9中，对外消旋混合物的对映异构体进行了分离。在一些上述合成方法中，产生了外消旋混合物（例如，化合物VII、VIII、IX和X）。在每种情况下，基本上可以按上述方法将外消旋混合物的对映异构体分离出来。尤其是（但不以限制的方式），可以分离化合物VII的对映异构体（即化合物V和VI），可以分离化合物X的对映异构体（即化合物I和II）。

本领域技术人员还应当理解的是，本文所提供的结构式按照惯例进行书写，但并非意味着排除本领域技术人员能够理解的、可替代的等效结构。尤其是，含硫代基团的化合物（例如，I、II、和III）可以以互变异构的形式来表示，例如图1（底部）所示的化合物III。

实施例10：LSF-依赖性报告检测

用以下物质对NIH3T3细胞进行转染：表达构建体pEF1α-LSF（LSF表达载体）^1,2；报告构建体pGL3B-WT4E1b（由LSF3驱动的萤火虫荧光素酶报告载体）³；phRL-TK（对照水母荧光素酶报告载体）；以及pEFGP，基本上如前文所述³。转染5小时后，加入辅料（DMSO）或化合物（VI、I和II、IV和V）（分别为图7、图5和图6），保持DMSO处于0.5%。转染后36小时获得细胞提取物，通过双萤光素酶分析（Promega）对萤火虫和水母的荧光素酶活性进行测定。将5μl提取物与30μl荧光素酶分析试剂（Promega）进行混合，使用20/20n光度计（Turner Biosystems）测定荧光，持续10秒。随后，加入30μl的Stop&Glo试剂（Promega），仍测定荧光，持续10秒。LSF的转录活性以相对荧光素酶活性给出（萤火虫与水母活性之比），再归一化至仅存在辅料的相对荧光素酶活性。该分析数据图形化地示于图5-7中。

实施例11：小鼠异种移植物分析

如先前所述的方法⁴，使用QGY-7703细胞（5×10⁵）在无胸腺裸小鼠的侧腹中建立皮下异种移植物。当肿瘤达到约200mm³体积时（需大约一周），腹膜内注射化合物VI（2mg（VI）/Kg小鼠总重量）或辅料（DMSO对照）的磷酸盐缓冲生理盐水溶液（5倍），每3天给予1次，历时2周。再对动物进行2周的跟踪研究。对于该实验中得到的肿瘤体积图形化地示于图8中。

参考文献

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虽然对本发明的教导进行描述时结合了各种实施方式，但并不意味着本发明的教导仅限于上述实施方式。相反，本发明的教导涵盖各种如本领域技术人员所理解的替代方案、修改方案及等同方案。

Claims

1.具有结构式XI、XII或XIII的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中，

每个X独立地为O或S；

R₁为氢或烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团；

R₂为氢或羟基、烷氧基、苯氧基、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团；

每个R₃和每个R₆满足：（i）独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、烷氧基、苯氧基、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团；或者（ii）两个R₆部分和/或两个R₃部分与亚烷基、亚烯基或亚炔基基团一起形成取代或未取代的C3至C6的环；

R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀和R₁₁各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、烷氧基、苯氧基、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团；并且

R₁₃为氢或烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团。

2.如权利要求1所述的化合物，其中，对于所述结构式XI、XII或XIII：

每个X为O或S；

R₁为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、取代或未取代的苯基、或者取代或未取代的苄基基团；

R₂为氢或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；

每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；

R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀和R₁₁各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；并且

R₁₃为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团。

3.如权利要求1所述的化合物，其中，对于所述结构式XI、XII或XIII：

每个X为O或S；

R₁为氢或甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基基团；

R₂为氢或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基基团；

每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团；

R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀和R₁₁各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团；并且

R₁₃为氢、甲基或乙基。

4.如权利要求1所述的化合物，其中，所述具有结构式XI、XII或XIII的化合物是具有结构式I、II或III的化合物、或其药学上可接受的盐：

5.具有结构式XIV、XV或XVI的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中，

每个X独立地为O或S；

每个R₃和每个R₆满足：（i）独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、烷氧基、苯氧基、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团；或者（ii）两个R₆部分和/或两个R₃部分与亚烷基、亚烯基或亚炔基基团一起形成取代或未取代的C3至C6的环；并且

R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、烷氧基、苯氧基、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基或芳基烷基基团。

6.如权利要求5所述的化合物，其中，对于所述结构式XIV、XV或XVI：

每个X为O或S；

每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团；并且

R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、苯基或苄基基团。

7.如权利要求5所述的化合物，其中，对于所述结构式XIV、XV或XVI：

每个X为O或S；

每个R₃和每个R₆独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团；并且

R₄、R₅、R₇、R₈、R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂各自独立地为氢、氟、氯、溴、碘或羟基、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、未取代的苯基、或未取代的苄基基团。

8.如权利要求5所述的化合物，其中，所述具有结构式XIV、XV或XVI的化合物是具有结构式IV、V或VI的化合物、或其药学上可接受的盐：

9.一种组合物，所述组合物包含具有结构式XI、XII或XIII的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，

每个X独立地为O或S；

10.如权利要求9所述的组合物，其中，对于所述具有结构式XI、XII或XIII的化合物：

每个X为O或S；

11.如权利要求9所述的组合物，其中，对于所述具有结构式XI、XII或XIII的化合物：

每个X为O或S；

R₁₃为氢、甲基或乙基。

12.如权利要求9所述的组合物，其中，所述具有结构式XI、XII或XIII的化合物是具有结构式I、II或III的化合物、或其药学上可接受的盐：

13.如权利要求9-12中任一项所述的组合物，其中，所述组合物进一步包含药学上可接受的载体。

14.一种组合物，所述组合物包含具有结构式XIV、XV或XVI的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，

每个X独立地为O或S；

15.如权利要求14所述的组合物，其中，对于所述具有结构式XIV、XV或XVI的化合物：

每个X为O或S；

16.如权利要求14所述的组合物，其中，对于所述具有结构式XIV、XV或XVI的化合物：

每个X为O或S；

17.如权利要求14所述的组合物，其中，所述具有结构式XIV、XV或XVI的化合物是具有结构式IV、V或VI的化合物、或其药学上可接受的盐：

18.如权利要求14-17中任一项所述的组合物，其中，所述组合物进一步包含药学上可接受的载体。

19.一种包括如下步骤的方法：向受试者给予有效量的具有结构式XI、XII或XIII的化合物、或其前药、或其药学上可接受的盐，从而在所述受试者中抑制或处理LSF；

其中，

每个X独立地为O或S；

20.如权利要求19所述的方法，其中，对于所述结构式XI、XII或XIII：

每个X为O或S；

21.如权利要求19所述的方法，其中，对于所述结构式XI、XII或XIII：

每个X为O或S；

R₁₃为氢、甲基或乙基。

22.如权利要求19所述的方法，其中，所述具有结构式XI、XII或XIII的化合物是具有结构式I、II或III的化合物、或其药学上可接受的盐：

23.如权利要求19-22中任一项所述的方法，其中，所述组合物进一步包含药学上可接受的载体。

24.如权利要求19-23中任一项所述的方法，其中，所述受试者患有肝细胞癌、或具有患肝细胞癌的风险。

25.如权利要求19-23中任一项所述的方法，其中，所述受试者患有HIV、或具有患HIV的风险。

26.如权利要求19-23中任一项所述的方法，其中，所述受试者为哺乳动物。

27.如权利要求19-23中任一项所述的方法，其中，所述受试者是人。

28.一种包括下述步骤的方法：向受试者给予有效量的具有结构式XIV、XV或XVI的化合物、或其前药、或其药学上可接受的盐，从而在所述受试者中抑制或处理LSF；

其中，

每个X独立地为O或S；

29.如权利要求28所述的方法，其中，对于所述结构式XIV、XV或XVI：

每个X为O或S；

30.如权利要求28所述的方法，其中，对于所述结构式XIV、XV或XVI：

其中，每个X为O或S；

31.如权利要求28所述的方法，其中，所述具有结构式XIV、XV或XVI的化合物是具有结构式IV、V或VI的化合物、或其药学上可接受的盐：

32.如权利要求28-31中任一项所述的方法，其中，所述组合物进一步包含药学上可接受的载体。

33.如权利要求28-32中任一项所述的方法，其中，所述受试者患有肝细胞癌、或具有患肝细胞癌的风险。

34.如权利要求28-32中任一项所述的方法，其中，所述受试者患有HIV、或具有患HIV的风险。

35.如权利要求28-32中任一项所述的方法，其中，所述受试者为哺乳动物。

36.如权利要求28-32中任一项所述的方法，其中，所述受试者是人。

37.权利要求1-8中任一项所述的化合物在制造用于治疗癌症、如肝细胞癌的药物方面的用途。

38.如权利要求37所述的用途，其中，所述药物进一步包含药学上可接受的载体。

39.如权利要求37所述的用途，其中，所述药物进一步包含至少一种治疗剂。

40.如权利要求37-39中任一项所述的用途，其中，将所述药物给予受试者以治疗存在于哺乳动物中的肝细胞癌。

41.如权利要求40所述的用途，其中，所述哺乳动物是人。

42.权利要求9-18中任一项所述的组合物在制造用于治疗肝细胞癌的药物方面的用途。

43.如权利要求42所述的用途，其中，所述药物进一步包含药学上可接受的载体。

44.如权利要求42所述的用途，其中，所述药物进一步包含至少一种治疗剂。

45.如权利要求42-44中任一项所述的用途，其中，将所述药物给予受试者以治疗存在于哺乳动物中的肝细胞癌。

46.如权利要求45所述的用途，其中，所述哺乳动物是人。

47.权利要求1-8中任一项所述的化合物在制造能够抑制细胞或组织中的LSF的组合物方面的用途。

48.权利要求9-18中任一项所述的组合物在制造能够抑制细胞或组织中的LSF的组合物方面的用途。

49.一种包括下述步骤的方法：

a）使癌细胞或癌组织与权利要求1-8中任一项所述的化合物进行接触；以及

b）直接或间接地监测与所述癌细胞或癌组织相关的LSF的表达或活性。

50.一种包括下述步骤的方法：

a）使癌细胞或癌组织与权利要求9-18中任一项所述的组合物进行接触；以及