CN103897011A - 一类cddo咪唑衍生物、其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一类具有通式I结构的新型CDDO咪唑衍生物或其药学上可接受的盐、其制备方法和医药用途，属于生物医药领域。该类化合物的制备方法反应条件温和，所用试剂低毒，原料易得，后处理方便。药理实验研究表明，本发明化合物具有优良的抗肿瘤活性，可以作为抗肿瘤药物应用。

Description

一类CDDO咪唑衍生物、其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及药物领域，具体涉及一类CDDO(2-氰基-3，12-二氧代齐墩果烷-1，9(11)-二烯-28-羧酸)咪唑衍生物及其制备方法；本发明还涉及该类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。 

背景技术

齐墩果酸(Oleanolic acid，OA)是一种齐墩果烷型五环三萜类化合物，在自然界分布广泛，资源丰富，具有多种生物活性。近年来其抗肿瘤活性与作用机制受到国内外研究者的广泛重视(Mol Cancer Ther.2007，6，154-162.)。Honda课题组十多年来坚持不懈致力于OA的结构改造及抗肿瘤活性研究，这导致了具有特殊结构片段的2-氰基-3，12-二氧代齐墩果烷-1，9(11)-二烯-28-羧酸(CDDO)的发现，CDDO表现出优良的抗炎及抗肿瘤活性，具有多靶点的独特作用机理。继而，该课题组以CDDO为先导化合物，对其C₁₇位羧基修饰得到多种衍生物，活性大大提高，如CDDO-Me，CDDO-Im等，尤其是具有咪唑环的CDDO-Im在啮齿动物实验中显示出比CDDO-Me更高的活性，且毒性更低。然而，CDDO-Im稳定性较差，固体形式的CDDO-Im在4℃下一年内即分解变质(Cancer Res.2008，68.6727.)。 

为寻找活性更强、稳定性更好的CDDO衍生物，Honda等发现了一个乙炔基取代的新型CDDO咪唑衍生物(1)(Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters.2011，21，2188-2191.)。尽管化合物1活性与CDDO-Im相当，且稳定性较CDDO-Im有所提高，但该化合物仍含有不稳定的酰基咪唑结构，且制备困难。因此，寻找性质稳定、易制备的新型CDDO咪唑衍生物仍然非常重要。 

发明内容

本发明首次公开了一类新型CDDO咪唑衍生物、其制备方法和医药用途。 所采用的制备方法反应条件温和，所用试剂低毒，原料易得，后处理方便。药理实验表明，本发明化合物具有优良的抗肿瘤活性，活性较CDDO-Me提高或相当，可以作为抗肿瘤药物应用。 

本发明的目的之一在于提供一种通式I所示的CDDO咪唑衍生物或其药学上可接受的盐： 

其中：R₁和R₂分别选自F-；Cl-；Br-；I-；F₃C-；F₂HC-；FH₂C-；NC-；O₂N-； 

其中R₅、R₆分别选自氢或1至7个碳原子的直链或支链烷基； 

R₃：当R₄与咪唑环N₁相连时，R₃不存在；否则，R₃选自氢或1至7个碳原子的直链或支链烷基； 

R₄选自含1至8个碳原子的直链或支链脂肪烃片段。 

具体的讲，通式I所示化合物优选自下列化合物： 

本发明的另一目的在于提供通式I所示化合物的制备方法之一，其特征是，CDDO与II或其有机酸或无机酸盐在缚酸剂下成酯，得到目标物I。 

其中，X为Cl、Br、I；R₁、R₂、R₃和R₄与上述相同。 

所采用的缚酸剂选自碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、三乙胺、吡啶、DBU或N-甲基吗啉其中一种或多种。所采用的溶剂选自DMF、DMSO、DMAC、丙酮、乙腈、吡啶、甲苯、苯、二甲苯、1，4-二氧六环、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃或***其中一种或多种。采用的反应温度为0℃-140℃。与II成盐的有机酸选自甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸、甲磺酸、三氟乙酸、草酸、丙二酸、丁二酸、酒石酸、丙酮酸其中一种。与II成盐的无机酸选自盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸或磷酸其中一种。 

本发明的另一目的在于提供通式I所示化合物的制备方法之二，其特征是，化合物III与IV在无水条件及缚酸剂下成酯，得到目标物I。 

其中，R₁、R₂、R₃和R₄与上述相同。 

所采用的缚酸剂选自碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、三乙胺、吡啶、DBU或N-甲基吗啉其中一种或多种。所采用的无水溶剂选自二氯甲烷、氯仿、***、四氢呋喃、乙酸乙酯、丙酮、乙腈、1，4-二氧六环、甲苯、苯或二甲苯其中一种或多种。所采用的反应温度为-10℃至50℃。 

本发明的进一步目的在于提供一种含有效剂量的本发明化合物与药学上可接受的载体制成的药物组合物。本发明化合物可以单独或与一种或一种以上药用载体制成不同剂型，例如片剂、胶囊、颗粒剂、液体制剂等，以供临床口服、注射或局部药用。在这些不同制剂中，本发明化合物的含量可以是0.1％-99.9％。本发明化合物的给药量可以是0.001-10000mg/kg/0.3天，根据临床需要可以适度调整。 

本发明的再一目的是提供本发明化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明化合物可以单独或与临床上常用的抗肿瘤药物如烷化剂、抗代谢药物、抗肿瘤抗生素、抗肿瘤植物药、激素类等联合应用，另外还可以与放射治疗联合应用。 

以下是本发明代表性化合物的部分药理实验及结果： 

四甲基氮唑蓝比色法(MTT)体外试验 

按常规操作采用MTT法对本发明部分代表性化合物进行抗肿瘤活性测试，选取CDDO及CDDO-Me作为阳性对照药。CDDO及CDDO-Me目前处于I期临床研究，用于治疗实体肿瘤及淋巴瘤。 

材料 

仪器：超净工作台(SW-CJ-1FD，AIRTECH，苏净安泰)、恒温CO₂培养箱(3111，Thermo，美国)、倒置生物显微镜(IX71，OLYMPUS，日本)、酶联免疫检测仪(Model680，BIO-RAD，美国)、平板摇床(Kylin-bell lab Instruments)、高压灭菌锅(YXO.SG41.280，上海华线)、离心机(SIGMA)。 

试剂：DMEM(GIBCO)、胎牛血清(GIBCO)、胰蛋白酶(SIGMA)、DMSO(SIGMA)。 

细胞株：人肝癌细胞株HepG2、小鼠黑色素瘤细胞株B16。 

方法 

将冻存的细胞株复苏，置于恒温CO₂培养箱中培养，每天换液一次，待其取处于指数生长期状态良好时即可点板。加入1ml0.25％胰蛋白酶消化液，消化1-2min，在显微镜下观察细胞状态，当贴壁细胞变圆收缩时即可吸除消化液，加入1-2ml 10％DMEM培养基制成细胞悬液，进行细胞计数，按照每孔5000(HepG2细胞)或者4000(B16细胞)个细胞数及总孔数计算所需细胞悬液的量，将此细胞悬液接种于96孔板上，100μl/孔，周围用PBS液封，置恒温CO₂培养箱中培养18h。 

用2％DMEM培养基配制10μM的受试药物，吸除培养基，加入阳性对照药CDDO、CDDO-Me及受试药物，150μl/孔，每个药物3个复孔，培养48小时。将MTT试剂加入到96孔板中，30μl/孔，继续孵育4小时。吸除板内培养基，每孔加入150μl DMSO，平板摇床振摇10min使结晶溶解。用酶联免疫检测仪在波长570nm处测每孔吸光值，并按下列公式计算细胞抑制率。3次初筛结果平均值为其最终抑制率，初筛抑制率大于60％的化合物进行浓度梯度筛选(5倍稀释)，以备计算受试药物的IC₅₀值(graphpad软件计算)，3次重复实验结果为所测化合物的最终IC₅₀值。 

结果 

表1.受试化合物浓度为10μM时对HepG2细胞的抑制率(％) 

表2.受试化合物浓度为10μM时对B16细胞的抑制率(％) 

表3.部分受试化合物IC₅₀值(HepG2细胞) 

初步肿瘤细胞毒性研究表明，所选代表性化合物对HepG2及B16细胞的抑制活性较阳性对照药CDDO、CDDO-Me提高或与之相当。 

具体实施方式

为了进一步阐明本发明，下面列举一系列实施例。这些实施例是例证性的，不应当理解为对本发明的限制。 

实施例1：中间体CDDO的合成 

参考中国专利CN102070697A所述方法，以齐墩果酸(西安天丰生物科技有限公司，规格98％)为原料经11步合成得到白色固体，经质谱、氢谱等分析方法鉴定为CDDO。 

ESI-MS：490.2[M-H]^-，492.3[M+H]⁺

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，5.98(1H，s)，3，0-3.05(2H，m)，1.89-1.99(2H，m)，1.56，1.48，1.35，1.17，1.0，0.91(each3H，s) 

实施例2：中间体1-(2-溴乙基)咪唑氢溴酸盐的制备(化合物编号：II-1，下同) 

在一单颈瓶中，加入咪唑(6mmol，0.41g)，KHCO₃(25.6mmol，2.56g)，Bu₄N⁺Br^-(0.128mmol，0.042g)，1，2-二溴乙烷16ml。室温下反应10.5h，加入CH₂Cl₂35ml，用水多次洗涤，直至TLC显示无杂质。有机相加入40％HBr7.8ml，搅拌，静置于冰箱数小时。取水相，浓缩，得红棕色固体。10-15ml***洗涤数次，真空干燥得粉红色固体0.51g，产率33.2％。ESI-MS：溴同位素特征离子峰174.9，177[M+H]⁺，检测时用去离子水溶解样品。 

反应式如下： 

实施例3：I-1的合成 

将0.0491g CDDO(0.1mmol)溶于2ml DMF，加入0.0552g K₂CO₃(0.4mmol)及0.004g KI(0.024mmol)，搅拌，加入1-(2-溴乙基)咪唑氢溴酸盐，室温反应。直至TLC分析显示反应完毕，加入CH₂Cl₂35ml稀释，水洗5-6次。有机相旋干。制备薄层得到白色固体32mg，产率54.7％。 

ESI-MS：586.7[M+H]⁺；620.7[M+Cl]^-

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，7.52(1H，s)，7.03(1H，s)，6.95(1H，s)，5.98(1H，s)，4.35(2H，m)，4.27(2H，m)，1.49，1.18，1.11，0.92(each3H，s)。 

实施例4：中间体1-(3-溴丙基)咪唑氢溴酸盐的制备(II-2) 

4.13-(1-咪唑基)丙酸甲酯的制备 

将咪唑0.335g(5mmol)和丙烯酸甲酯0.86g(10mmol)溶于6ml乙腈，回流反应22h，然后旋干反应液，加入乙酸乙酯40ml，饱和NaCl液洗涤数次。有机相无水NaSO₄干燥，旋干，得到白色固体0.57克，产率74％。ESI-MS：155.1[M+H]⁺

4.23-(1-咪唑基)丙醇的制备 

50ml两颈瓶中加入LiAlH₄0.63g，然后滴加无水THF15ml，室温搅拌5分钟，然后降温至0-5℃。溶有咪唑丙酸甲酯1.1g的无水THF液缓慢滴加入反应液。维持0-5℃5分钟，然后升温至70℃。4.5h后TLC显示反应完毕。降温至0℃，快速搅拌下，依次滴加入水0.63ml，15％NaOH溶液0.63ml，水0.63ml。硅藻土辅助过滤，少量乙酸乙酯多次清洗滤饼，合并滤液，旋干，得棕色油状物0.8克，过柱分离得纯品0.38克，产率43％。 

ESI-MS：127.1[M+H]⁺

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：7.45(1H，s)，7.0(1H，s)，6.92(1H，s)，4.10(2H，t，J＝6.75)，3.57(2H，t，J＝5.9)，1.97(2H，m) 

4.31-(3-溴丙基)咪唑氢溴酸盐的制备(II-2) 

将0.15克3-(1-咪唑基)丙醇(1.19mmol)溶于0.872ml质量分数为40％的HBr，滴加入浓硫酸0.11ml，130℃反应6.5h，加入CH₂Cl₂60ml，冰浴下调PH至近中性。有机相水洗3-4次，至无杂质。即刻加入0.54ml40％HBr酸化，取水层，加少量丙酮，70℃旋干。得到1-(3-溴丙基)咪唑氢溴酸盐。 

实施例5：I-2的合成 

参照I-1的制备法，制得目标物I-214mg。 

ESI-MS：600.4[M+H]⁺

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：8.05(s，1H)，7.49(s，1H)，7.09(s，1H)，6.92(s，1H)，6.0(s，1H)，4.11(m，4H)，2.90(d，1H，J＝4.5)，2.13(m，2H)，1.50，1.19，0.93(each3H，s) 

实施例6：中间体1-(4-溴丁基)咪唑氢溴酸盐的制备(II-3) 

参照1-(2-溴乙基)咪唑氢溴酸盐的制法，将咪唑(6mmol，0.41g)溶于10ml CH₂Cl₂，加入1，4-二溴丁烷0.93ml(7.8mmol)，KHCO₃2.56g(25.6mmol)，Bu₄N⁺Br^-0.042g(0.128mmol)，室温反应68h。用50ml CH₂Cl₂稀释，水洗多次，直至无杂质。有机相即刻加入40％HBr3.9ml，加入水10ml，充分搅拌，取水相，70℃旋干，得橙红色粘稠状物0.396克，产率23.3％。 

实施例7：I-3的合成 

参照I-1的制法，制得目标物I-3。 

ESI-MS：636.4[M+Na]⁺

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，7.50(1H，s)，7.08(1H，s)，6.93(1H，s)，5.98(1H，s)，4.13(2H，m)，4.0(2H，t)，2.88(1H，m)，2.1(1H，s)，1.49，1.18，0.89(each3H，s) 

实施例8：中间体1-(2-溴乙基)-4-甲基咪唑氢溴酸盐的制备(II-4) 

参照1-(2-溴乙基)咪唑氢溴酸盐的制法，由0.492克4-甲基咪唑(6mmol)得到棕红色粘稠物0.321克，产率19.9％。 

实施例9：I-4的合成 

参照I-1的制法，制得目标物I-454mg，产率90％。 

ESI-MS：600.4[M+H]⁺

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，7.42(1H，s)，6.66(1H，s)，5.97(1H，s)，4.32(2H，m)，4.18(2H，m)，2.20(3H，s)，1.49，0.92(each3H，s) 

实施例10：中间体1-(3-溴丙基)-4-甲基咪唑氢溴酸盐的制备(II-5) 

参照1-(2-溴乙基)咪唑氢溴酸盐的制法，将4-甲基咪唑(6mmol，0.492g)溶于10ml CH₂Cl₂，加入1，3-二溴丙烷3.1ml(30mmol)，KHCO₃1.28g(12.8mmol)，Bu₄N⁺Br^-0.042g(0.128mmol)，室温反应46h。停止反应，用50mlCH₂Cl₂稀释，水洗多次，直至无杂质。有机相加入40％HBr8.5ml，取水相，70℃旋干，得深红色粘稠状物，真空干燥得0.81克，产率47.7％。 

ESI-MS：溴同位素特征峰203，205[M+H]⁺

实施例11：I-5的合成 

参照I-1的制法，制得目标物I-5。 

ESI-MS：614.4[M+H]⁺，636.4[M+Na]⁺，652.4[M+K]⁺

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，7.37(1H，s)， 6.62(1H，s)，5.99(1H，s)，3.95-4.17(4H，m)，2.90(1H，d，J＝4.29)，2.23(3H，s)，1.49，1.18，0.93(each3H，s) 

实施例12：中间体1-(4-溴丁基)-4-甲基咪唑氢溴酸盐的制备(II-6) 

按照实施例10II-5的制法，制得该中间体。 

实施例13：I-6的合成 

参照I-1的制法，制得目标物I-6。 

ESI-MS：650.4[M+Na]⁺，666.4[M+K]⁺

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，7.37(1H，s)，6.63(1H，s)，5.98(1H，s)，4.07-4.17(2H，m)，3.86-3.93(2H，m)，2.90(1H，d，J＝5.04)，1.49，1.19，0.92(each3H，s)。 

实施例14：中间体1-(2-溴乙基)-4-硝基咪唑的制备(II-7) 

14.14-硝基咪唑的制备 

将咪唑(10克)的浓硫酸(98％，30ml)溶液升温至70℃，缓慢滴加浓硝酸(65-68％，30ml)，加毕升温至95℃反应，产生红棕色气体，用NaOH溶液吸收。5.5h后，停止加热，倾入冰水中，调PH至3-4，过滤，滤饼水洗二次，干燥得淡绿色粉末，9.96克，产率60.2％。 

ESI-MS：111.9[M-H]^-

14.21，4-二硝基咪唑的制备 

将7克4-硝基咪唑溶于50ml CH₃COOH，0℃滴加发烟硝酸5.4ml，5min内加毕。0.5h后，15℃下加醋酐12ml，10min内加完。室温反应48h。反应液倾入126ml冰水中，静置，过滤，滤饼为白色固体，3.9克。滤液用250ml CH₂Cl₂萃取6次。萃取液用饱和NaCl液洗涤三次。有机相旋干，得细针状白色晶体4.1克，加上之前所得滤饼共8克，产率82％。备用。 

14.31-(2-羟乙基)-4-硝基咪唑的制备 

冰盐浴(-5℃)，将0.72克1，4-二硝基咪唑分批加入到乙醇胺(0.278克)的甲醇/水(各5ml)溶液中。升至室温反应，约16h后，TLC检测反应完毕。旋干反应溶剂，甲醇重结晶，得暗红色针晶。 

ESI-MS：158[M+H]⁺。 

14.41-(2-溴乙基)-4-硝基咪唑的制备 

将0.314克1-(2-羟乙基)-4-硝基咪唑(2mmol)溶于1.28ml40％HBr(8.8mmol)，再滴加浓硫酸90微升。125℃反应，直至TLC显示原料作用完毕。冷却，调PH至中性，用40ml CH₂Cl₂萃取，饱和NaHCO₃及饱和食盐水洗涤，有机相旋干得淡黄色固体0.15克，产率34.1％。 

ESI-MS：溴同位素特征峰220，221.9[M+H]⁺。 

实施例15：I-7的合成 

0.0491克CDDO(0.1mmol)溶于3ml无水甲苯，加入DBU(1，8-二氮杂二环十一碳-7-烯)15微升，再加入1-(2-溴乙基)-4-硝基咪唑的无水甲苯溶液。升温至117℃回流反应，4h后，TLC监测显示反应完毕，旋干反应液，制备薄层得到白色固体I-7(49mg，产率77.8％)。 

ESI-MS：631.6[M+H]⁺；665.5[M+Cl]^-

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，7.81(1H，d，J＝1.47Hz)，7.48(1H，d，J＝1.47Hz)，6.0(1H，s)，4.42(4H，m)，1.48，1.08，0.92(each3H，s)。 

实施例16：中间体1-(3-溴丙基)-4-硝基咪唑的制备(II-8) 

16.11-(3-羟丙基)-4-硝基咪唑的制备 

参照1-(2-羟乙基)-4-硝基咪唑的制备法，产率55％。 

16.21-(3-溴丙基)-4-硝基咪唑的制备 

参照1-(2-溴乙基)-4-硝基咪唑的制备法，得橙褐色粘稠物，产率83％。 

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：7.83(1H，d，J＝1.29)，7.52(1H，d，J＝1.29)，4.29(2H，t，J＝6.63)，3.38(2H，t，J＝6.12)，2.39(2H，m，J1＝6.6，J2＝6.2) 

实施例17：I-8的合成 

参照I-7的制法，制得白色固体40mg，产率40％。 

ESI-MS：645.6[M+H]⁺；679.6[M+Cl]^-

H¹-NMR(300MHz，CDCl3，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，7.75(1H，d，J＝1.47)，7.45(1H，d，J＝1.44)，6.02(1H，s)，4.14(4H，m)，2.22(2H，m)，1.51，1.19，0.94(each3H，s)。 

实施例18：中间体1-(4-溴丁基)-4-硝基咪唑的制备(II-9) 

将0.6786克4-硝基咪唑(6mmol)溶于10ml CH₂Cl₂与4ml丙酮的混合液，依次加入1，4-二溴丁烷0.93ml(7.8mmol)，K₂CO₃1.656克(12mmol)，Bu₄N⁺Br^-0.042克(0.128mmol)，室温反应50h。反应液加入80ml CH₂Cl₂稀释，水洗3次，有机相浓缩。快速柱层析得到黄绿色液体，46℃真空干燥过夜得0.84克黄绿色油状物，产率56.5％。 

ESI-MS：溴同位素特征峰270，272[M+Na]⁺。 

实施例19：I-9的合成 

参照I-1的制法，制得目标物I-9。 

ESI-MS：681.4[M+Na]⁺，697.3[M+K]⁺

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，7.79(1H，d，J＝1.44)，7.46(1H，d，J＝1.47)，6.0(1H，s)，4.07-4.21(4H，m)，2.83(1H，d，J＝4.05)，2.06(1H，s)，1.48，1.18，0.92(each3H，s) 

实施例20：中间体1-(2-溴乙基)咪唑-4-甲酸甲酯的制备(II-10) 

20.1咪唑-4，5-二羧酸的制备 

室温下，5g苯并咪唑(0.0423mol)溶于55ml水，加入浓硫酸70ml，最后缓缓加入K₂Cr₂O₇37克。升温至95℃维持15分钟，然后倾入冰水中。置于冰箱冷却数小时，抽滤，水洗多次，得到淡绿色固体。 

20.2咪唑-4-甲酸的制备 

1.97克咪唑-4，5-二羧酸溶于75ml醋酐，回流反应。溶液由白色浑浊液变为咖啡色液。反应6h后，趁热过滤，滤液加入30ml水，室温下搅拌过夜。然后在95℃下反应1h，冷却至室温。加入30ml乙醇，1.8克活性炭，78℃下反应0.5h。趁热过滤，滤液冷却至室温然后置于冰箱。析出白色颗粒状固体0.38克，产率26.5％。 

ESI-MS：113[M+H]⁺，111.1[M-H]^-

20.3咪唑-4-甲酸甲酯的制备 

将0.1g咪唑-4-甲酸溶于3ml甲醇，室温下加入浓硫酸0.1ml，后升温至反应液回流。13h后，反应液旋干，加入30ml乙酸乙酯，4ml水，用K₂CO₃调PH至弱碱性，有机层旋干，得到0.045克白色固体，产率40.1％。 

ESI-MS：149[M+Na]⁺

20.41-(2-溴乙基)咪唑-4-甲酸甲酯的合成 

将咪唑-4-甲酸甲酯0.03克(0.25mmol)溶于2ml DMF，依次加入1，2-二溴乙烷0.0433ml(0.5mmol)，K₂CO₃0.1035克(0.75mmol)，Bu₄N⁺Br^-0.0023克(0.006mmol)，室温反应48h。加入CH₂Cl₂稀释，水洗(10ml×5)，无水硫酸钠干燥。有机相旋干，然后经100-200目硅胶柱层析分离制得产品。 

ESI-MS：溴同位素特征峰255，257[M+Na]⁺

实施例21：I-10的合成 

按照I-1的制法制备。 

ESI-MS：666.3[M+Na]⁺

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，7.75(1H，d，J＝3.57，7.59(1H，d，J＝3.45)，5.98(1H，s)，4.67(2H，m)，4.41(2H，m)，3.88(3H，s)，2.78(1H，d，J＝4.26)，1.49(3H，s)，0.91(3H，s)。 

实施例22：中间体1-(3-溴丙基)咪唑-4-甲酸甲酯的制备(II-11) 

参照1-(2-溴乙基)咪唑-4-甲酸甲酯的制法，由0.07克咪唑-4-甲酸甲酯得到纯品0.027克，产率20％。 

ESI-MS：溴同位素特征峰269，271[M+Na]⁺

实施例23：I-11的合成 

按照I-1的制法制备。 

ESI-MS：680.4[M+Na]⁺

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，7.76(1H，s)，7.58(1H，s)，5.99(1H，s)，4.38(2H，m)，4.11(2H，m)，3.87(3H，s)，2.94(1H，d，J＝4.8)，2.18(2H，m)，1.50，1.32，1.18，0.93(each3H，s) 

实施例24：中间体1-(4-溴丁基)咪唑-4-甲酸甲酯的制备(II-12) 

按照1-(2-溴乙基)咪唑-4甲酸甲酯的制法制备。 

ESI-MS：溴同位素特征峰283，285[M+Na]⁺

实施例25：I-12的合成 

按照I-1的制法。 

ESI-MS：694.4[M+Na]⁺

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，7.74(1H，s)，7.58(1H，s)，5.98(1H，s)，4.34(2H，m)，4.12(2H，m)，3.87(3H，s)，2.91(1H，d，J＝4.7)，1.50，1.19，0.92(each3H，s) 

实施例26：中间体1-(3-溴丙基)-4，5-二氰基咪唑的制备(II-13) 

将0.177克4，5-二氰基咪唑(1.5mmol)溶于10ml丙酮，依次加入0.414克K₂CO₃(3mmol)，0.032克Bu₄N⁺Br^-(0.09mmol)，0.168ml 1，3-二溴丙烷(1.65mmol)。回流反应17.5h，TLC监测显示反应完毕。柱层析得白色固体。 

ESI-MS：溴同位素特征峰273，275[M+Cl]^-

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：7.78(1H，s)，4.42(2H，t，J＝6.75)，3.37(2H，t，J＝5.85)，2.44(2H，m，J1＝5.82，J2＝6.6) 

实施例27：I-13的合成 

参照I-1的制法，制得目标物I-13。 

ESI-MS：672.4[M+Na]⁺，688.4[M+K]⁺

H¹-NMR(300MHz，CDCl₃，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，7.74(1H，s)，6.01(1H，s)，4.13-4.35(4H，m)，2.87(1H，d，J＝4.44)，2.27(2H，m)，1.50，1.31，1.27，1.19，1.04，1.02，0.93(each3H，s) 

实施例28：中间体1-(4-溴丁基)-4，5-二氰基咪唑的制备(II-14) 

按照1-(3-溴丙基)-4，5-二氰基咪唑的制法。 

ESI-MS：溴同位素特征峰287，289[M+Cl]^-

实施例29：I-14的合成 

参照I-1的制法，制得目标物I-14 

ESI-MS：686.4[M+Na]⁺，702.4[M+K]⁺

H¹-NMR(300MHz，CDC]₃，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，7.75(1H，s)，5.99(1H，s)，4.10-4.24(4H，m)，2.83(1H，d，J＝4.29)，2.06(1H，s)，1.57，1.51，1.19，0.92(each3H，s) 

实施例30：I-15的合成 

将干燥好的CDDO(0.0491g，0.1mmol)溶于5ml无水CH₂Cl₂，0℃下，滴加草酰氯90微升及催化量的无水DMF一滴。加毕，室温反应过夜。然后旋干反应液，除去多余的草酰氯，加入无水CH₂Cl₂5ml，以及三乙胺0.042ml(0.3mmol)、DMAP0.61mg。0℃下，加入1-甲基咪唑-2-甲醇0.0168克(0.15mmol)。后转为室温，2h后，反应完毕。旋干，制备薄层得到白色固体。 

ESI-MS：608.3[M+Na]⁺

H¹-NMR(300MHz，25℃，TMS)，δppm：8.05(1H，s)，7.0(1H，d，J ＝1.08)，6.89(1H，d，J＝0.99)，5.94(1H，s)，5.21(2H，m，J＝13.02)，3.73(1H，s)，2.89(1H，d，J＝4.68)，1.48，0.91(each3H，s) 

。

Claims (10)

1.一种通式I所示的CDDO咪唑衍生物或其药学上可接受的盐： 

其中：R₁和R₂分别选自F-；Cl-；Br-；I-；F₃C-；F₂HC-；FH₂C-；NC-；O₂N-； 其中R₅、R₆分别选自氢或1至7个碳原子的直链或支链烷基； 

R₃：当R₄与咪唑环N₁相连时，R₃不存在；否则，R₃选自氢或1至7个碳原子的直链或支链烷基； 

R₄选自含1至8个碳原子的直链或支链脂肪烃片段。 

2.权力要求1所述CDDO咪唑衍生物，选自下列化合物： 

。

3.一种权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，CDDO与II或其有机酸或无机酸盐在缚酸剂下成酯，得到目标物I； 

其中，X选自Cl、Br、I；R₁、R₂、R₃和R₄如上所述。 

4.根据权力要求3所述的制备方法，其特征在于，所采用的缚酸剂选自碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、三乙胺、吡啶、DBU或N-甲基吗啉其中一种或多种。 

5.根据权力要求3所述的制备方法，其特征在于，所采用的溶剂选自DMF、DMSO、DMAC、丙酮、乙腈、吡啶、甲苯、苯、二甲苯、1，4-二氧六环、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃或***其中一种或多种；采用的反应温度为0℃-140℃。 

6.根据权力要求3所述的制备方法，其特征在于，与II成盐的无机酸选自盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸或磷酸其中一种；与II成盐的有机酸选自甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸、甲磺酸、三氟乙酸、草酸、丙二酸、丁二酸、酒石酸、丙酮酸其中一种。 

7.一种权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，化合物III与IV在无水条件及缚酸剂下成酯，得到相应的目标物I； 

其中，R₁、R₂、R₃和R₄如上所述。 

8.根据权力要求7所述的制备方法，其特征在于，所采用的缚酸剂选自碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、三乙胺、吡啶、DBU或N-甲基吗啉其中一种或多种。 

9.根据权力要求7所述的制备方法，其特征在于，所采用的无水溶剂选自二氯甲烷、氯仿、***、四氢呋喃、乙酸乙酯、丙酮、乙腈、1，4-二氧六环、甲苯、苯或二甲苯其中一种或多种；所采用的反应温度为-10℃至50℃。 

10.权力要求1或2所述化合物在制备抗肿瘤药物中的用途。