CN103882081B - 一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法 - Google Patents
一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103882081B CN103882081B CN201410163024.9A CN201410163024A CN103882081B CN 103882081 B CN103882081 B CN 103882081B CN 201410163024 A CN201410163024 A CN 201410163024A CN 103882081 B CN103882081 B CN 103882081B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bacitracin
- fermentation
- fed
- feed supplement
- tired
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 62
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 62
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 title claims abstract description 35
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 title claims abstract description 35
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 title claims abstract description 35
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 title claims abstract description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 239000006052 feed supplement Substances 0.000 claims abstract description 25
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 18
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 13
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 claims abstract description 8
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 claims abstract description 7
- 238000012262 fermentative production Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims abstract description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroquinoline Chemical compound N1CCCC2=CC(OC)=CC=C21 FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 9
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 claims description 9
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 claims description 8
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 claims description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 7
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 7
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 7
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 7
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 7
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 7
- 238000012366 Fed-batch cultivation Methods 0.000 claims description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 4
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 2
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 claims description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 2
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 claims description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 5
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 description 2
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 2
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003570 biosynthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- -1 fermention medium Chemical compound 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 230000036284 oxygen consumption Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000000452 restraining effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Abstract
一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法，步骤如下：a、斜面培养：将地衣芽孢杆菌接种于斜面培养基上，在37℃下培养24h；b、制备菌悬液：用无菌水将步骤a制备的斜面菌种洗下制成菌悬液；c、一级种子培养：将步骤b中制备的菌悬液接种于装有种子培养基的一级种子罐中，在温度37℃、转速600rpm、通气量0.5vvm的条件下培养16h；d、补料分批发酵：将步骤c中制备的一级种子按照体积比10％的接种量接种于装有发酵培养基的发酵罐中，在温度37℃、转速600rpm、通气量1.0vvm的条件下进行发酵，当菌体进入指数生长期后，开始匀速流加补料，补料结束后控制pH7.0-7.5，40h终止发酵；e、检测发酵单位：检测杆菌肽的发酵单位并与不补料发酵生产的杆菌肽的发酵单位进行比较。
Description
技术领域
本发明属于微生物发酵领域，具体涉及一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法。
背景技术
杆菌肽属多肽类抗生素，是由多种氨基酸结合而成的不稳定的多肽，对革兰氏阳性菌和部分阴性菌有强烈的抑制作用，它可以抑制细菌细胞壁的合成，影响其蛋白质合成及细胞膜功能，从而达到消除病原菌的目的。杆菌肽由多个氨基酸组成，由于其高效、无毒副作用、无残留、不产生抗药性及交叉耐药性、***快等优点被广泛应用于畜禽养殖业。
杆菌肽发酵生产使用地衣芽孢杆菌，以玉米淀粉、豆粕粉为主要碳、氮源，培养温度为37℃，经40h耗氧发酵培养生物合成杆菌肽，但发酵水平不高，生产能耗和生产成本高，目前对微生物发酵法生产杆菌肽的研究主要是发酵培养基的优化，或者发酵条件的优化，并没有取得很好的效果；也有的工厂通过传统的诱变育种来筛选高产杆菌肽的菌株，虽然发酵单位有了一定的提高，但是菌株的活力却在不断的下降。
发明内容
本发明提供了一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法，其目的在于克服现有技术的不足之处，提高发酵单位，降低生产能耗和生产成本。
本发明为实现其目的采用的技术方案是：
一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法，包括以下操作步骤：
a、斜面培养：将地衣芽孢杆菌接种于斜面培养基上，在37℃下培养24h；
b、制备菌悬液：用无菌水将步骤a制备的斜面菌种洗下制成菌悬液；
c、一级种子培养：将步骤b中制备的菌悬液接种于装有种子培养基的一级种子罐中，在温度37℃、转速600rpm、通气量0.5vvm的条件下培养16h；
d、补料分批发酵：将步骤c中制备的一级种子按照体积比10％的接种量接种于装有发酵培养基的发酵罐中，在温度37℃、转速600rpm、通气量1.0vvm的条件下进行发酵，当菌体进入指数生长期后，开始匀速流加补料，补料结束后控制pH7.0-7.5，40h终止发酵；
e、检测发酵单位：发酵结束后检测杆菌肽的发酵单位，并与不补料发酵生产的杆菌肽的发酵单位进行比较。
步骤a中所用斜面培养基(m/v)的成分及用量为：葡萄糖1％、蛋白胨1.5％、牛肉膏1％、酵母浸出粉0.2％、琼脂2.0％，培养基的pH7.0。
步骤c中所用种子培养基(m/v)的原料及用量为：黄豆饼粉3％、玉米粉2％、玉米淀粉1％、玉米浆0.5％、硫酸铵0.15％、碳酸钙0.3％，培养基的pH6.8。
步骤d中所用发酵培养基(m/v)的成分及用量为：豆粕粉9％、玉米粉2％、玉米淀粉3％、硫酸铵0.3％、硫酸镁0.003％、碳酸钙0.5％，培养基的pH7.2，发酵培养基的体积为发酵罐容积的50-80％。
步骤d所述的补料(m/v)成分及用量为：豆粕粉6-9％、玉米粉0.5-1％、玉米淀粉2-3％、玉米浆0.3-0.5％、葡萄糖5-8％，补料pH为5.5-6.5，补料流加速度为每小时流加发酵液体积的1-2％，共流加发酵液总体积的10％-20％。
步骤d中补料结束后通过调节转速控制pH7.0-7.5。
本发明的有益效果是：本发明提供的方法提高了发酵水平，并且补料成分简单，价格低廉，发酵结束时检测营养物质基本被耗尽，同时缓解了对数期速效营养不足的矛盾，有利于生物量的提高，降低生产能耗和生产成本，与不补料相比杆菌肽产量有较大幅度的提高。
具体实施方式
本发明提供了一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法，其目的在于克服现有技术的不足之处，提高发酵单位，降低生产能耗和生产成本，下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。
具体实施例1，一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法，包括以下操作步骤：
a、斜面培养：将地衣芽孢杆菌接种于斜面培养基上，在37℃下培养24h；
b、制备菌悬液：用无菌水将步骤a制备的斜面菌种洗下制成菌悬液；
c、一级种子培养：将步骤b中制备的菌悬液接种于装有10L种子培养基的15L一级种子罐中，在温度37℃、转速600rpm、通气量0.5vvm的条件下培养16h；
d、补料分批发酵：将步骤c中制备的一级种子按照体积比10％的接种量接种于装有30L发酵培养基的50L发酵罐中，在温度37℃、转速600rpm、通气量1.0vvm的条件下培养3h后，开始以0.3L/h的速率匀速流加成分及含量为豆粕粉6％、玉米粉0.5％、玉米淀粉3％、玉米浆0.3％、葡萄糖7％的补料(m/v)，共流加3L补料，13h流加结束，然后通过调节转速将pH控制在7.0-7.5的范围之内，40h终止发酵；
e、检测发酵单位：发酵结束后检测杆菌肽的发酵单位为959U/ml，不补料发酵生产的杆菌肽的发酵单位为830U/ml。
具体实施例2，一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法，包括以下操作步骤：
a、斜面培养：将地衣芽孢杆菌接种于斜面培养基上，在37℃下培养24h；
b、制备菌悬液：用无菌水将步骤a制备的斜面菌种洗下制成菌悬液；
c、一级种子培养：将步骤b中制备的菌悬液接种于装有10L种子培养基的15L一级种子罐中，在温度37℃、转速600rpm、通气量0.5vvm的条件下培养16h；
d、补料分批发酵：将步骤c中制备的一级种子按照体积比10％的接种量接种于装有30L发酵培养基的50L发酵罐中，在温度37℃、转速600rpm、通气量1.0vvm的条件下培养3h后，开始以0.6L/h的速率匀速流加成分及含量为豆粕粉9％、玉米粉0.6％、玉米淀粉2.3％、玉米浆0.5％、葡萄糖5％的补料(m/v)，共流加5L补料，11.5h流加结束，然后通过调节转速将pH控制在7.0-7.5的范围之内，40h终止发酵；
e、检测发酵单位：发酵结束后检测杆菌肽的发酵单位为1036U/ml，不补料发酵生产的杆菌肽的发酵单位为830U/ml。
具体实施例3，一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法，包括以下操作步骤：
a、斜面培养：将地衣芽孢杆菌接种于斜面培养基上，在37℃下培养24h；
b、制备菌悬液：用无菌水将步骤a制备的斜面菌种洗下制成菌悬液；
c、一级种子培养：将步骤b中制备的菌悬液接种于装有10L种子培养基的15L一级种子罐中，在温度37℃、转速600rpm、通气量0.5vvm的条件下培养16h；
d、补料分批发酵：将步骤c中制备的一级种子按照体积比10％的接种量接种于装有30L发酵培养基的50L发酵罐中，在温度37℃、转速600rpm、通气量1.0vvm的条件下培养4h后，开始以0.4L/h的速率匀速流加成分及含量为豆粕粉8％、玉米粉1％、玉米淀粉2％、玉米浆0.5％、葡萄糖6％的补料(m/v)，共流加4L补料，14h流加结束，然后通过调节转速将pH控制在7.0-7.5的范围之内，40h终止发酵；
e、检测发酵单位：发酵结束后检测杆菌肽的发酵单位为1100U/ml，不补料发酵生产的杆菌肽的发酵单位为830U/ml。
本发明提供的方法提高了发酵水平，并且补料成分简单，价格低廉，发酵结束时检测营养物质基本被耗尽，同时缓解了对数期速效营养不足的矛盾，有利于生物量的提高，降低生产能耗和生产成本，与不补料相比杆菌肽产量有较大幅度的提高。
Claims (5)
1.一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法，其特征在于包括以下操作步骤：
a、斜面培养：将地衣芽孢杆菌接种于斜面培养基上，在37℃下培养24h；
b、制备菌悬液：用无菌水将步骤a制备的斜面菌种洗下制成菌悬液；
c、一级种子培养：将步骤b中制备的菌悬液接种于装有种子培养基的一级种子罐中，在温度37℃、转速600rpm、通气量0.5vvm的条件下培养16h；
d、补料分批发酵：将步骤c中制备的一级种子按照体积比10％的接种量接种于装有发酵培养基的发酵罐中，在温度37℃、转速600rpm、通气量1.0vvm的条件下进行发酵，当菌体进入指数生长期后，开始匀速流加补料，补料结束后控制pH7.0-7.5，40h终止发酵，所述的补料(w/v)成分及用量为：豆粕粉6-9％、玉米粉0.5-1％、玉米淀粉2-3％、玉米浆0.3-0.5％、葡萄糖5-8％，补料pH为5.5-6.5，补料流加速度为每小时流加发酵液体积的1-2％，共流加发酵液总体积的10％-20％；
e、检测发酵单位：发酵结束后检测杆菌肽的发酵单位，并与不补料发酵生产的杆菌肽的发酵单位进行比较。
2.根据权利要求1所述的一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法，其特征在于，步骤a中所用斜面培养基(w/v)的成分及用量为：葡萄糖1％、蛋白胨1.5％、牛肉膏1％、酵母浸出粉0.2％、琼脂2.0％，培养基的pH7.0。
3.根据权利要求1所述的一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法，其特征在于，步骤c中所用种子培养基(w/v)的原料及用量为：黄豆饼粉3％、玉米粉2％、玉米淀粉1％、玉米浆0.5％、硫酸铵0.15％、碳酸钙0.3％，培养基的pH6.8。
4.根据权利要求1所述的一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法，其特征在于，步骤d中所用发酵培养基(w/v)的成分及用量为：豆粕粉9％、玉米粉2％、玉米淀粉3％、硫酸铵0.3％、硫酸镁0.003％、碳酸钙0.5％，培养基的pH7.2，发酵培养基的体积为发酵罐容积的50-80％。
5.根据权利要求1所述的一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法，其特征在于，步骤d中补料结束后通过调节转速控制pH7.0-7.5。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410163024.9A CN103882081B (zh) | 2014-04-22 | 2014-04-22 | 一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410163024.9A CN103882081B (zh) | 2014-04-22 | 2014-04-22 | 一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103882081A CN103882081A (zh) | 2014-06-25 |
| CN103882081B true CN103882081B (zh) | 2016-02-10 |
Family
ID=50951202
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410163024.9A Expired - Fee Related CN103882081B (zh) | 2014-04-22 | 2014-04-22 | 一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103882081B (zh) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104357520A (zh) * | 2014-12-04 | 2015-02-18 | 丽珠集团福州福兴医药有限公司 | 一种替考拉宁的补料培养基及生产替考拉宁的方法 |
| CN104830933B (zh) * | 2015-05-29 | 2018-12-25 | 河北圣雪大成制药有限责任公司 | 一种流加混合氨基酸母液提高杆菌肽效价的方法 |
| CN110295213B (zh) * | 2019-05-10 | 2020-12-08 | 衡阳师范学院 | 一种基于指数流加补料原理的鲜味肽发酵生产方法 |
| CN113897410B (zh) * | 2021-09-15 | 2023-10-03 | 南京工业大学 | 利用里氏木霉与地衣芽孢杆菌一体化生物加工制备杆菌肽的方法 |
| CN114317648B (zh) * | 2022-01-26 | 2024-04-30 | 河北圣雪大成制药有限责任公司 | 一种提高多粘菌素e发酵水平的方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102899375A (zh) * | 2012-09-20 | 2013-01-30 | 天津科技大学 | 一种利用氧载体提高发酵液中杆菌肽效价的方法 |
| CN103146629A (zh) * | 2013-03-05 | 2013-06-12 | 绿康生化股份有限公司 | 携带透明颤菌血红蛋白基因的地衣芽孢杆菌的菌株、构建方法及应用 |
-
2014
- 2014-04-22 CN CN201410163024.9A patent/CN103882081B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102899375A (zh) * | 2012-09-20 | 2013-01-30 | 天津科技大学 | 一种利用氧载体提高发酵液中杆菌肽效价的方法 |
| CN103146629A (zh) * | 2013-03-05 | 2013-06-12 | 绿康生化股份有限公司 | 携带透明颤菌血红蛋白基因的地衣芽孢杆菌的菌株、构建方法及应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 葡萄糖浓度对杆菌肽发酵过程的影响;刘铁军等;《医学信息》;20111231;第24卷(第9期);第4659-4660页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103882081A (zh) | 2014-06-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Li et al. | Utilization of white rice bran for production of L-lactic acid | |
| CN103882081B (zh) | 一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法 | |
| CN109609432B (zh) | 一种凝结芽孢杆菌的产孢方法 | |
| CN103409347B (zh) | 一种产碱性蛋白酶的菌株及其工业化液体发酵方法 | |
| CN102229920B (zh) | 一种提高里氏木霉纤维素酶液体深层发酵水平的方法 | |
| CN104403953B (zh) | 一种饲料用酿酒酵母菌高密度发酵培养基配方及其应用 | |
| CN105087680A (zh) | 一种乳酸菌发酵培养基及高产量生产乳酸的工艺 | |
| CN103992978A (zh) | 一株假肠膜明串珠菌及其联产右旋糖酐和甘露醇的方法 | |
| CN102899375A (zh) | 一种利用氧载体提高发酵液中杆菌肽效价的方法 | |
| CN103966271B (zh) | 发酵生产dha的方法 | |
| CN102899372B (zh) | 两阶段溶氧量控制发酵生产环磷酸腺苷的方法 | |
| CN103013961A (zh) | 利用木薯渣发酵生产中性蛋白酶和饲料添加剂的方法 | |
| CN104630167A (zh) | 海洋微生物发酵生产低温葡萄糖氧化酶的方法 | |
| CN103805660B (zh) | 一种利用廉价原料生产乳酸链球菌素的方法 | |
| CN112831437B (zh) | 枯草芽孢杆菌及高产吲哚乙酸、高芽孢形成率的发酵方法 | |
| CN104497174B (zh) | 一种组合微生物凝固天然胶乳的方法 | |
| CN102093990B (zh) | 微生物发酵生产低温淀粉酶的方法 | |
| CN109652469A (zh) | 一种利用副干酪乳杆菌发酵制备l-乳酸的方法 | |
| CN113817635A (zh) | 一种利用大豆乳清废水培养芽孢杆菌的方法 | |
| CN102051386B (zh) | 间歇式回流细胞高生产率发酵生产有机酸的方法 | |
| CN103952447A (zh) | 一种利用厌氧条件下发酵生产丁二酸的方法 | |
| CN111394280A (zh) | 一种适合地衣芽孢杆菌生长的培养基及其应用 | |
| CN106035985A (zh) | 一种混菌液态发酵黄酒加工废弃物生产单细胞蛋白的方法 | |
| CN102533604B (zh) | 一种黄色短杆菌及其应用及发酵制备赖氨酸的方法 | |
| CN108522857A (zh) | 一种小麦酒精糟非烘干法用作饲料的生产方法及饲料 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20160210 |