CN103860423B - 一种具有抗菌消炎脱臭的漱口液及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有抗菌消炎脱臭的漱口液及其制备方法和用途,它以石榴皮提取物、玫瑰花、锦灯笼为主要原料，与保湿剂、甜味剂、防腐剂和蒸馏水配制而成，该漱口液由多种活性成分共同作用，能在牙齿表面造成阻碍，令细菌难于粘附在牙齿表面，减少附在牙齿表面并导致牙斑的细菌，从而起到保持口腔清洁、清除口腔异味,可用于预防或治疗牙龈炎、牙周炎、口腔溃疡及口腔和咽喉炎症；同时能消除口臭,保持口气清新，既可用于口腔炎症的辅助治疗，也可用于日常口腔保健，长期使用不会产生任何副作用，该产品使用时利用含漱动作，不仅有利于口腔周围肌肉的运动，还能促进口腔的自洁作用，是保持口腔卫生、防治口腔感染的最佳选择。

Description

一种具有抗菌消炎脱臭的漱口液及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及一种具有抗菌消炎脱臭的漱口液及其制备方法和用途，尤其涉及一种具有抗菌消炎、脱臭、使用方便、无任何毒副作用的液态口腔漱口液及其制备方法和用途。

背景技术

口腔是病原微生物侵入人体的途径之一，口腔的温度、湿度和食物残渣，适宜微生物繁殖生长，口腔内的牙间隙、齿龈槽难以清洁,这些解剖特征有利于细菌生长。所以口腔卫生对人体的健康是非常重要的，尤其是高热、术后及意识障碍、人工呼吸的患者，因不能经口进食，唾液分泌减少，口腔干燥，口腔自净能力下降，导致细菌繁殖力增强，而且，因口腔分泌物不能下咽，存留在口腔内，成为细菌良好的培养基，这些可能成为龋齿、牙周脓肿的原因，亦可能导致支气管炎、肺炎。另外，由于唾液等存在口腔这一特殊的内环境中，在恒定的湿度、温度和营养下，细菌繁殖生长，正常时都寄生一些微生物，当我们抵抗力下降时，它们便活跃致病，使口腔内细菌大量繁殖，碳水化合物分解、发酵、产酸作用增强，因而不仅容易引起牙周病、腮腺炎等，而且可使口腔发臭，影响食欲和消化功能，致口腔感染，甚至导致全身感染。据中国口腔保健协会权威统计数据显示，我国口腔疾病患病率高达97.6％，几乎人人都有不同程度的口腔疾病，如牙痛、牙龈炎、牙周炎、牙龈出血等疾病。

口腔健康是一个国家社会文明的象征，世界卫生组织已将口腔健康列为评价人类健康水平的一项重要指标。随着科学和文明的发展，人们生活质量的提高，大家对口腔保健的意识逐渐增强，口腔护理显得尤为重要。口腔护理的重要性在国内虽然得到了认可，但认识和重视程度仍不够。口腔护理是预防口腔内疾病，保持、促进身体健康、提高康复治疗患者生活质量（QQL）的科学技术，是保持口腔清洁，预防疾病的手段之一。口腔护理可使口腔内细菌数减少，由于机械刺激,促进唾液分泌,增强口腔的自净力，从而保持口腔清洁、湿润，使患者舒适、清爽，预防口腔感染等并发症，防止口臭、口垢，促进食欲，维护口腔的正常功能。口腔护理已经不是简单的口腔清洁,口腔护理已经从单纯的预防疾病,发展为保持、促进身体健康,提高患者生活质量的科学技术。目前用于口腔疾病和口腔护理的药剂如含片、口胶、膜片等在牙缝中难于透入，不能发挥应有的治疗作用，而且使用的制剂大多采用粗浸膏制作，有效成分含量低且不稳定，难以达到既定的效果。

石榴皮系维吾尔医常用药材，为石榴科植物石榴(punicagranatumL.)的干燥果皮。石榴皮性酸、味涩,在我国传统医药中主要用于久泻、出血等证。石榴皮中的多酚是一类具有多酚羟基化合物的总称，包括鞣花单宁、没食子单宁、鞣花酸、没食子酸等多种化合物，含量约为其干质量的10%-20%，具有抗菌、抗氧化、抗衰老、抗癌防癌、降血压和预防心脑血管疾病等多种生理和药理活性，但多酚类物质不稳定，温度高、受热时间长易氧化，导致提取率低、活性下降，故将石榴皮采用低温提取浓缩及大孔树脂吸附得到多酚有效部位，提高多酚类成分的稳定性和提取率，该部位含总多酚以没食子酸计为60%以上。由于石榴皮多酚提取物含大量酚类物质，在水中溶解性差，加入一定量保湿剂搅拌均匀，可提高其在水中溶解度。本发明是在200910113497.7石榴皮多酚抗菌消炎泡腾片及其制备方法和用途的基础上，对石榴皮提取物的用途进一步的研究。

玫瑰花收载于中国药典2010年版一部和维吾尔药材标准上册，系维吾尔医常用药材，具有消肿、止血、止痛、清热强心、润便等功效，具有清热解渴、理气活血、宜气养颜之功效。玫瑰花含挥发油,油中主要成分为香茅醇、牻牛儿醇，橙花醇、丁香油酚等。玫瑰花中含丰富的黄酮类物质，这类化合物具有较高的抗氧化活性，能有效清除自由基、清除色素沉着。此外，尚含槲皮苷、鞣质、脂肪油、有机酸等。我们前期***研究了玫瑰花中总黄酮化合物，结果发现，乙醇为提取溶媒时，可以将玫瑰花中黄酮类物质提取完全。

锦灯笼为茄科植物酸浆PhysalisalkekengiL.var.franchetii(mast.)Makino的干燥宿萼或带果实的宿萼。其性味甘、酸、寒，具有清热、解毒、利尿、化痰之功效，用于治疗咽痛喑哑、痰热咳嗽、小便不利，外治天疱疮、湿疹等。临床上常用于急性、化脓性扁桃腺炎及咽喉肿痛。锦灯笼含有内酯类、黄酮类、萜类、生物碱类、甾醇类、氨基酸类及无机元素等几大类化学成分，如酸浆苦素类化合物、木犀草苷等，具有明确的抗菌、抗炎、抗过敏及镇痛等活性。文献报道，锦灯笼抗菌有效成分初步认为在其油状液中，此部分在试管内对绿脓杆菌，金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用。中国药典2010年版一部收载的锦灯笼，是以木犀草苷为对照对其进行含量测定。在采用不同提取溶媒对锦灯笼进行提取时，其含量有较大差别。试验结果表明，水为提取溶媒时，锦灯笼中木犀草苷的含量为0.08%；而采用乙醇进行提取时，木犀草苷的含量在0.14%以上，说明锦灯笼中黄酮类物质木犀草苷在乙醇有较好的溶解性。

本发明中玫瑰花和锦灯笼采用合并提取，以黄酮类化合物木犀草苷含量为考察指标，分别考察水和不同浓度的乙醇作为提取溶媒，结果乙醇浓度在60%以上时，木犀草苷含量较高。预实验中，玫瑰花和锦灯笼采用水和低浓度乙醇进行提取时，提取液中有悬浮颗粒，影响溶液的澄明度。本发明漱口液为口服溶液剂，按药典规定应为澄清液体制剂，为提高漱口液的澄清度和稳定性，以溶液外观性状、口感、均匀性/稳定性为指标，考察了辅料的种类、用量和各组分的加入顺序，筛选出最佳处方配比。

现市场上的漱口液中多数是中西药结合来预防和治疗口腔疾病，并以西药为主要功效成分，虽具有较好的抑菌作用，但西药副作用大、容易产生耐药性，存在口感不佳及药物不良反应，严重者甚至可能引起菌群失调、口腔黏膜剥脱及迭加感染；而一些含中草药成分的口腔护理溶液则恰在此方面显示了自己的优越性。本发明利用药食同源植物为主要原料制成纯中药漱口液，由多种活性成分共同作用，经体外抗菌活性、抗炎活性研究，结果表明对金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌的活性较强，能减轻二甲苯所致的炎性水肿。适用于口腔溃疡、牙周炎、牙龈炎、牙龈出血、口臭、咽喉炎、扁桃腺炎等口腔疾病。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有抗菌消炎脱臭的漱口液及其制备方法和用途，该漱口液以石榴皮多酚提取物、玫瑰花、锦灯笼、保湿剂、甜味剂、防腐剂和蒸馏水配制而成，该漱口液能在牙齿表面造成阻碍，令细菌难于粘附在牙齿表面，减少附在牙齿表面并导致牙斑的细菌，从而起到保持口腔清洁、清除口腔异味、可用于预防或治疗牙龈炎、牙周炎、口腔溃疡及口腔和咽喉炎症；同时能消除口臭,保持口气清新。既可用于口腔炎症的辅助治疗，也可用于日常口腔保健，长期使用不会产生任何副作用，该产品使用时利用含漱动作，不仅有利于口腔周围肌肉的运动，还能促进口腔的自洁作用。含漱法简单、方便，易于被患者接受和实施，是保持口腔卫生、防治口腔感染的最佳选择。

本发明所述的一种具有抗菌消炎脱臭的漱口液,该漱口液是由重量百分比为石榴皮多酚提取物5-20%、玫瑰花10-30%、锦灯笼10-30%、保湿剂为甘油或丙二醇5-20%、甜味剂为糖精钠、甜蜜素或阿斯巴甜0.5-2%、防腐剂为苯甲酸钠或山梨酸钾0.1-1%，余量为蒸馏水制成。

所述的具有抗菌消炎脱臭的漱口液的制备方法，按下列步骤进行：

a、取石榴皮粉碎成粗粉，加10-20倍量浓度为40%乙醇，在温度71-85℃条件下提取1-3次，每次1-3小时，滤过，合并滤液减压回收乙醇，浓缩至每mL相当于生药0.15-0.2g的浓缩液；将浓缩液加入到已处理好的HPD300型大孔吸附树脂柱上，吸附3-12小时，先用去离子水冲洗至流出液颜色较淡时，再用2-5倍柱体积的60%乙醇洗脱，收集含醇洗脱液，回收乙醇，减压浓缩并真空干燥，粉碎，过80-120目筛，得到石榴皮多酚提取物备用；

b、取玫瑰花10-30%、锦灯笼10-30%加入5-20倍量浓度为65%-90%乙醇加热回流提取1-4次，每次1-3小时，滤过，合并滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05-1.10温度60℃的溶液，备用；

c、取步骤a中石榴皮多酚提取物5-20%溶于保湿剂为甘油或丙二醇5-20%中,搅拌均匀，加入到步骤b的溶液中，同时加入甜味剂为糖精钠、甜蜜素或阿斯巴甜0.5-2%、防腐剂为苯甲酸钠或山梨酸钾0.1-1%和余量蒸馏水,充分搅拌混匀,静置24小时后过滤、包装、灌装，即得具有抗菌消炎脱臭的漱口液。

所述具有抗菌消炎脱臭的漱口液在制备预防或治疗牙龈炎、牙周炎、口腔溃疡及口腔和咽喉炎症的药物中的用途。

所述的具有抗菌消炎脱臭的漱口液在制备辅助治疗口腔炎症或日常口腔保健中的药物中的用途。

本发明所述的一种具有抗菌消炎脱臭的漱口液及其制备方法和用途，它是以石榴皮多酚提取物、玫瑰花、锦灯笼为主要原料，与保湿剂、甜味剂、防腐剂和水配制而成，该产品由多种活性成分共同作用，能抑制、清除口腔细菌,预防或治疗牙龈炎、牙周炎、口腔溃疡及口腔和咽喉炎症，同时，消除口臭，保持口气清新。该漱口液由纯中药制成，不仅具有一般漱口液的全部功效，而且对人体没有任何副作用。该产品的特点是：原料易得、制备简单、安全性好，即使咽下也不会对患者造成伤害。本发明提供的配方具有良好的抗菌作用，可用于漱口水、片剂、颗粒剂、膜剂、口胶、泡腾制剂等，不但可以用于口腔炎症的辅助治疗，也可用于日常口腔保健，适于在临床上大规模推广。

附图说明

图1为本发明木犀草苷标准曲线图；

图2为本发明提取溶剂结果图。

具体实施方式

实施例1（重量百分比）

a、取石榴皮粉碎成粗粉，加10倍量浓度为40%乙醇温浸，温度71℃，提取3次，每次1小时，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至每mL相当于生药0.15-0.2g；将浓缩液经HPD300大孔树脂色谱柱，吸附12h，先用蒸馏水洗脱至流出液近无色，再用2倍柱体积60%乙醇洗脱，收集含醇洗脱液，回收乙醇，减压浓缩干燥，粉碎，过80目筛，备用；

b、取玫瑰花10%、锦灯笼10%，加5倍量浓度为65%乙醇加热回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05-1.10(温度60℃)的溶液，备用；

c、取步骤a中石榴皮多酚提取物5%溶于保湿剂丙二醇5%中,搅拌均匀，加入到步骤b浓缩后的溶液中，同时加入甜味剂糖精钠0.5%、防腐剂苯甲酸钠0.1%和余量蒸馏水,充分搅拌混匀,静置24小时后过滤、包装、灌装，即得具有抗菌消炎脱臭的漱口液。

实施例2（重量百分比）

a、取石榴皮粉碎成粗粉，加15倍量浓度为40%乙醇温浸，温度75℃，提取2次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至每mL相当于生药0.15-0.2g；将浓缩液经HPD300大孔树脂色谱柱，吸附12h，先用蒸馏水洗脱至流出液近无色，再用3倍柱体积60%乙醇洗脱，收集含醇洗脱液，回收乙醇，减压浓缩干燥，粉碎，过100目筛，备用；

b、取玫瑰花20%、锦灯笼20%，加10倍量浓度为70%乙醇加热回流提取1次，提取3小时，滤过，合并滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05-1.10(温度60℃)的溶液，备用；

c、取步骤a中石榴皮多酚提取物10%溶于保湿剂丙二醇10%中,搅拌均匀，加入到步骤b浓缩后的溶液中，同时加入甜味剂甜蜜素0.8%、防腐剂甜蜜素0.8%和余量蒸馏水,充分搅拌混匀,静置24小时后过滤、包装、灌装，即得具有抗菌消炎脱臭的漱口液。

实施例3（重量百分比）

a、取石榴皮粉碎成粗粉，加20倍量浓度为40%乙醇，在温度80℃条件下提取3次，每次1.5小时，滤过，合并滤液减压回收乙醇，浓缩至每mL相当于生药0.15-0.2g；将浓缩液加入到已处理好的HPD300型大孔吸附树脂柱上，吸附6小时，先用去离子水冲洗至流出液颜色较淡时，再用4倍柱体积的60%乙醇洗脱，收集含醇洗脱液，回收乙醇，减压浓缩并真空干燥成干浸膏，粉碎，过120目筛，得到石榴皮多酚提取物，备用；

b、取玫瑰花15%、锦灯笼20%，加15倍量浓度为75%乙醇加热回流提取3次，每次2小时，滤过，合并滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05-1.10温度60℃的溶液，备用；

c、取步骤a中石榴皮多酚提取物15%溶于保湿剂为甘油10%中,搅拌均匀，加入到步骤b的溶液中，同时加入甜味剂为阿斯巴甜0.6%、防腐剂为苯甲酸钠0.3%和余量蒸馏水,充分搅拌混匀,静置24小时后过滤、包装、灌装，即得具有抗菌消炎脱臭的漱口液。

实施例4（重量百分比）

a、取石榴皮粉碎成粗粉，加18倍量浓度为40%乙醇，在温度85℃条件下提取3次，每次3小时，滤过，合并滤液减压回收乙醇，浓缩至每mL相当于生药0.15-0.2g；将浓缩液加入到已处理好的HPD300型大孔吸附树脂柱上，吸附3小时，先用去离子水冲洗至流出液颜色较淡时，再用3倍柱体积的60%乙醇洗脱，收集含醇洗脱液，回收乙醇，减压浓缩并真空干燥成干浸膏，粉碎，过80目筛，得到石榴皮多酚提取物，备用；

b、取玫瑰花20%、锦灯笼30%，加20倍量浓度为80%乙醇加热回流提取4次，每次1小时，滤过，合并滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05-1.10温度60℃的溶液，备用；

c、取步骤a中石榴皮多酚提取物20%溶于保湿剂为甘油20%中,搅拌均匀，加入到步骤b的溶液中，同时加入甜味剂为甜蜜素1%、防腐剂为山梨酸钾0.5%和余量蒸馏水,充分搅拌混匀,静置24小时后过滤、包装、灌装，即得具有抗菌消炎脱臭的漱口液。

实施例5（重量百分比）

a、取石榴皮粉碎成粗粉，加14倍量浓度为40%乙醇，在温度80℃条件下提取2次，每次3小时，滤过，合并滤液减压回收乙醇，浓缩至每mL相当于生药0.15-0.2g；将浓缩液加入到已处理好的HPD300型大孔吸附树脂柱上，吸附9小时，先用去离子水冲洗至流出液颜色较淡时，再用5倍柱体积的60%乙醇洗脱，收集含醇洗脱液，回收乙醇，减压浓缩并真空干燥成干浸膏，粉碎，过100目筛，得到石榴皮多酚提取物，备用；

b、取玫瑰花30%、锦灯笼20%，加15倍量浓度为90%乙醇加热回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05-1.10温度60℃的溶液，备用；

c、取步骤a中石榴皮多酚提取物5%溶于保湿剂丙二醇5%中,搅拌均匀，加入到步骤b的溶液中，同时加入甜味剂为糖精钠0.8%、防腐剂为苯甲酸钠0.8%和余量蒸馏水,充分搅拌混匀,静置24小时后过滤、包装、灌装，即得具有抗菌消炎脱臭的漱口液。

实施例6本发明所述的一种具有抗菌消炎脱臭漱口液的用途：

所述漱口液配方中玫瑰花和锦灯笼木犀草苷的测定：

照高效液相色谱法（《中国药典》2010年版一部，附录VID）测定；

色谱条件及***适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.2%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为350nm。理论板数按木犀草苷峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备：取木犀草苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含49.2μg的溶液，即得；

标准曲线制备：分别精密吸取木犀草苷对照品溶液4μL、8μL、10μL、12μL、15μL，按上述色谱条件进样，以进样浓度（C）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标进行回归，得标准曲线方程为Y=32336C+77398，r²=0.999（见图1），结果表明，回归方程在19.68μg/mL～73.8μg/mL范围内木犀草苷峰面积与进样浓度具有良好的线性关系；

供试品溶液的制备：取玫瑰花和锦灯笼分别采用水和不同浓度的乙醇溶液进行提取，提取液经微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液按上述色谱条件进样，结果见图2。

实施例7

所述漱口液的配方筛选：

石榴皮多酚提取物溶液：取石榴皮多酚提取物5g，溶于10ml丙二醇中,搅拌均匀，加水至50ml；

玫瑰花提取液：取玫瑰花10g，加60%乙醇提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩至50ml；

锦灯笼提取液：取锦灯笼10g，加80%乙醇提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩至50ml；

漱口液：取玫瑰花、锦灯笼各10g，加70%乙醇提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05-1.10温度60℃的溶液，备用；另取石榴皮多酚提取物5g，溶于10ml丙二醇中,搅拌均匀，加入到上述溶液中，充分搅拌混匀，加水至100ml；

体外抑菌实验：

药用纸片的制备：选吸水力强而质地均匀的滤纸，用打孔机打成6mm的圆片，分装于洁净干燥的试管内，放入高压灭菌锅中干热（温度120℃）灭菌2小时后，取出放入恒温干燥箱内进行干燥，取干燥后的纸片一定数量，放入不同溶液中，浸润后备用；

体外抑菌试验─采用纸片法：将金黄色葡萄球菌（SA）、大肠杆菌(EC)分别接种于营养琼脂斜面，培养18-24小时，制成菌悬液，麦氏比浊法测定菌液浓度，使之在10⁶—10⁷cfu/ml。将0.1ml菌液分别涂布于营养琼脂平板，每个菌种做3个平行样，半分钟后将含各种药液的纸片轻按于平板上，以空白纸片做阴性对照，细菌于温度37℃恒温培养18h后取出，通过测定抑菌圈大小，来判定受试菌种对药液敏感程度，结果见表1：

表1不同提取液体外抑菌试验

实施例8

所述漱口液的体外抑菌、抗炎实验：

药用纸片的制备：选吸水力强而质地均匀的滤纸，用打孔机打成6mm的圆片，分装于洁净干燥的试管内，放入高压灭菌锅中干热（温度120℃）灭菌2小时后，取出放入恒温干燥箱内进行干燥，取干燥后的纸片一定数量，放入漱口液中，浸润后备用；

体外抑菌试验─采用纸片法：将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、变形链球菌分别接种于营养琼脂和血琼脂斜面，培养18-24小时，制成菌悬液，麦氏比浊法测定菌液浓度，使之在10⁶—10⁷cfu/ml。将0.1ml菌液分别涂布于营养琼脂和血琼脂平板，每个菌种做3个平行样，半分钟后将含各种药液的纸片轻按于平板上，以空白纸片做阴性对照，细菌于温度37℃恒温培养18h后取出，通过测定抑菌圈大小，来判定受试菌种对药液敏感程度，结果见表2：

表2抑菌实验结果

抗菌药物敏感程度的判定标准为：抑菌圈直径≥15mm为高度敏感，10－15mm为中度敏感，＜10mm为耐药。

小鼠耳肿胀实验：

KM小鼠50只，雌雄各半，体重18-22g,按动物体重、性别随机均分为NS对照组、阳性对照药复方硼砂溶液（0.1ml/只）、漱口液低、中、高三个剂量组（0.1ml/只、0.2ml/只、0.4ml/只），每组10只，各给药组小鼠每天涂药一次，涂于右耳，连涂5天，空白对照组涂以等量的蒸馏水，末次涂药30min后,各给药组以蒸馏水洗去药液，用棉球擦净，给小鼠右耳涂以二甲苯0.1ml/只，左耳为对照。30min后，将小鼠断颈处死，用直径8mm的打孔器，将双耳相同部位各打下一片，用电子天平分别称重，以左、右耳片重量之差作为肿胀度，计算各组肿胀程度，求出肿胀率，结果见表3：

表3二甲苯所致小鼠耳肿胀实验的影响

备注：与对照组比较，^﹡p<0.05，^﹡﹡p＜0.01，p>0.05

由表3可以看出，给药5天后，漱口液中剂量组（0.2ml/只）、高剂量组（0.4ml/只）有明显的抑制小鼠耳廓肿胀的作用，耳肿胀值均低于NS组，差异有显著性（p<0.05或p<0.01），表明本发明的漱口液具有显著的抗炎作用，阳性对照复方硼砂溶液亦有同样作用。

Claims (3)

1.一种具有抗菌消炎脱臭作用的漱口液,其特征在于该漱口液是由重量百分比为石榴皮提取物5-20%、玫瑰花10-30%、锦灯笼10-30%,5-20%的保湿剂为甘油或丙二醇,0.5-2%的甜味剂为糖精钠、甜蜜素或阿斯巴甜,0.1-1%的防腐剂为苯甲酸钠或山梨酸钾，余量为蒸馏水配制而成。

2.根据权利要求1所述的具有抗菌消炎脱臭作用的漱口液在制备预防或治疗牙龈炎、牙周炎、口腔溃疡及咽喉炎症的药物中的用途。

3.根据权利要求1所述的具有抗菌消炎脱臭作用的漱口液在制备辅助治疗口腔炎症或日常口腔保健的药物中的用途。