CN103798052A

CN103798052A - 一种丛枝菌根真菌诱导黄瓜抗旱的方法

Info

Publication number: CN103798052A
Application number: CN201410083659.8A
Authority: CN
Inventors: 许亚峰; 袁力; 汪浩然; 陈艳花; 徐华超; 谢淮北
Original assignee: Anhui University of Science and Technology
Current assignee: Anhui University of Science and Technology
Priority date: 2014-03-07
Filing date: 2014-03-07
Publication date: 2014-05-21

Abstract

一种丛枝菌根真菌诱导黄瓜抗旱的方法，包括以下步骤：将初始丛枝菌根真菌菌剂单独接种扩繁，丛枝菌根真菌菌剂菌根化黄瓜苗的培养：接种介质采用Hoagland营养液与珍珠岩的混合物，抗旱诱导：待幼苗生长3个月后，将幼苗移入规格为25cm×25cm的黑色育苗袋中，各装入灭菌土壤3.0kg，每盆施全磷80mg/kg、全氮100mg/kg，中度干旱保持土壤相对含水量在田间持水量的40%左右；处理前充分浇水，任其自然干旱，当自然干旱到各处理设定相对含水量时进行控水处理，控水期间运用称重补水法保持同处理各重复的土壤含水量维持在试验要求范围，含水量调节时间定为每天早上8:00进行，补给前一天缺失的水分。

Description

一种丛枝菌根真菌诱导黄瓜抗旱的方法

技术领域

本发明涉及一种诱导抗性的方法，尤其涉及一种丛枝菌根真菌诱导黄瓜抗旱的方法。

背景技术

丛枝菌根(Arbuscularmycorrhiza，AM)是土壤中的菌根真菌与高等植物的根系形成的一种联合体，是广泛存在于自然界中一种普遍的植物共生现象。大量研究发现，菌根能够促进植物生长，增强植物的抗逆性，提高植物的水分和养分的吸收能力以及改良土壤等能力。目前，退化生态***的恢复重建备受国内外的关注，成为现代生态学领域研究热点之一。AM接种技术为菌根化育苗造林，为有效解决退化生态***植被恢复开辟了一条重要途径。利用菌根技术来改善石山区适生造林树种的抗旱及耐旱性研究，仍鲜见报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：本发明提供一种丛枝菌根真菌诱导黄瓜抗旱的方法，其步骤是：

（1）将初始丛枝菌根真菌菌剂单独接种扩繁，扩繁后的丛枝菌根的繁殖体孢子密度>30个/克干土，初始丛枝菌根真菌菌剂是指摩西球囊霉GM(BGCNM01A、BGCHEB07B，约300孢子/20g)，地表球囊霉GV(BGCGD01C，约1000个孢子/20g)，根内球囊霉GI(BGCBJ09)，两次混合接种所用的丛枝菌根真菌菌剂为上述三种真菌分别扩繁后混制而成，混制比例按0.5～1:1:1，以重量比计；

（2）丛枝菌根真菌菌剂菌根化黄瓜苗的培养：接种介质采用Hoagland营养液与珍珠岩的混合物，等量称取GM(BGCNM01A，BGCHEB07B)，GV，GI菌种各20g，混合均匀，将混合菌种与无菌珍珠岩以1∶1的比例混合，在泡沫漂浮孔穴育苗盘中加入扩繁后的所述混合丛枝菌根真菌菌剂18g～25g，育苗盘每个空穴播种黄瓜种子2粒，使育苗盘下半部分浸入自来水中，待种子出苗后30天间苗，每孔留苗1棵，并把自来水更换成1/2～1/5强度的霍格兰(Hoagland)营养液，根据水位高度每天补足减少的水分，每2～3周更换一次营养液；生长55～65天取苗，当根系菌根侵染率大于30%时即可用于移栽；

（3）抗旱诱导：待幼苗生长3个月后，将幼苗移入规格为25cm×25cm的黑色育苗袋中，各装入灭菌土壤3.0kg，每盆施全磷80mg/kg、全氮100mg/kg，中度干旱保持土壤相对含水量在田间持水量的40%左右；处理前充分浇水，任其自然干旱，当自然干旱到各处理设定相对含水量时进行控水处理，控水期间运用称重补水法保持同处理各重复的土壤含水量维持在试验要求范围，含水量调节时间定为每天早上8:00进行，补给前一天缺失的水分；

（4）指标测定：当黄瓜幼苗生长9个月后，进行生长指标测定，然后采用酸性品红染色，通过感染长度确定菌根侵染情况，并测定生物量及N、P元素含量，生长测定：在开始控水处理后每隔8天测定苗高和地径，直至干旱胁迫试验结束，生物量测定:在胁迫试验结束后，将不同处理的植株冲洗干净，然后分根茎叶柄置于牛皮纸袋中，放入105℃的烘箱中杀青20min后，维持在85℃烘干至恒重，称量其干质量；植物N、P测定:全氮采用浓硫酸－高氯酸消煮，用凯氏定氮仪测定;全磷采用硝酸－高氯酸消煮，用钼锑抗比色法测定；菌根依赖性(%)=(接种处理干质量－不接种处理干质量)/接种干质量×100%。

所述初始丛枝菌根真菌菌剂扩繁：将河沙和土壤按3：1混合，以三叶草或玉米为宿主植物；把河沙土壤混合物过1mm筛，121℃水蒸汽灭菌或160～170℃干热灭菌2h，加入0.005～0.01%尿素和0.02～0.04%过磷酸钙，接种3%～5%初始丛枝菌根真菌菌剂，用层施法或混施法拌匀，然后加入18%～22%水，播种所述宿主植物的种子，常规管理3～4个月后即可收获。

所述收获的方法是把所述宿主植物的地上部剪去，剪碎根段混匀，含有所述宿主植物根段、丛枝菌根真菌孢子、根外菌丝的风干基质即可用做丛枝菌根真菌菌剂。

在干旱胁迫条件下，接种AM真菌促进了黄瓜幼苗的生长，增加了黄瓜幼苗地上部分和地下部分的生物量。虽然从根冠比和菌根依赖性来看，黄瓜幼苗对AM真菌是弱依赖性或无依赖性，菌根化苗与对照无明显差异，但在中度干旱胁迫时，菌根化苗全株干质量增幅最大，比对照增加33.36%。初步认为，接种AM真菌在一定程度上可提高抗旱能力。

菌根与营养元素吸收的关系一直是菌根学家研究的热点。菌根的作用不仅仅局限于在植物根部对养分的吸收，而且可能通过一定的途径或方式调节着植物养分运输的生理过程，促进根部的养分通过茎尽快向叶片转移，以满足叶片光合代谢的需要，从而改变养分元素在植物体内的分配。而AM菌根对不同宿主幼苗N、P元素吸收的影响不同。本试验中，随着干旱胁迫的加剧，AM真菌总体上能较好地促进P元素的吸收，且明显高于对照;而接种对黄瓜幼苗N元素的吸收无明显影响，总体上降低了各器官的N元素含量，在不同的试验条件下，AM菌根对不同宿主N、P元素的吸收影响不同，可能与供试的土壤营养状况有关，也可能与植株营养元素向各器官转移所处的阶段有关，仍需进一步研究证实。

具体实施方式

（1）将初始丛枝菌根真菌菌剂单独接种扩繁，扩繁后的丛枝菌根的繁殖体孢子密度>30个/克干土，初始丛枝菌根真菌菌剂是指摩西球囊霉GM(BGCNM01A、BGCHEB07B，约300孢子/20g)，地表球囊霉GV(BGCGD01C，约1000个孢子/20g)，根内球囊霉GI(BGCBJ09)，两次混合接种所用的丛枝菌根真菌菌剂为上述三种真菌分别扩繁后混制而成，混制比例按0.5～1:1:1，以重量比计；所述初始丛枝菌根真菌菌剂扩繁：将河沙和土壤按3：1混合，以三叶草或玉米为宿主植物；把河沙土壤混合物过1mm筛，121℃水蒸汽灭菌或160～170℃干热灭菌2h，加入0.005～0.01%尿素和0.02～0.04%过磷酸钙，接种3%～5%初始丛枝菌根真菌菌剂，用层施法或混施法拌匀，然后加入18%～22%水，播种所述宿主植物的种子，常规管理3～4个月后即可收获。

水分处理(对黄瓜苗高、地径和生物量有极显著的影响;接种处理对苗高和地径的生长有极显著的影响，对生物量达到显著影响。而水分处理和接种处理的交互作用对苗高、地径和生物量均不显著。接种AM菌根对黄瓜幼苗苗高和地径的生长有显著的促进作用，处理间差异显著(P＜05)。在相同水分条件下，菌根化苗苗高和地径显著高于对照;随着水分胁迫程度的加剧，苗高和地径生长逐渐减缓，而对照苗高和地径生长较缓慢。接种菌根同时能促进黄瓜幼苗生物量的增加。在同一水分条件下，菌根化苗地上部分、地下部分和全株生物量均高于对照，但处理间差异不显著。菌根化植株干质量在中度干旱胁迫时增幅最大，比对照增加33.36%，其次是正常水分条件，轻度干旱胁迫条件，分别比对照增加22.85%，7.14%。从根冠比来看，菌根化植株与对照差异不明显;从菌根依赖性来看，黄瓜幼苗对AM菌根是弱依赖性或无依赖性，但从其他测定指标分析，AM菌根在干旱条件下能促进苗木的生长，增加干质量的积累。菌根真菌能够促进P元素的吸收，增强苗木吸收水分和养分的的能力，从而提高苗木的抗旱能力。

Claims

1.一种丛枝菌根真菌诱导黄瓜抗旱的方法，其特征在于，它包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的丛枝菌根真菌诱导黄瓜抗旱的方法，其特征在于，所述初始丛枝菌根真菌菌剂扩繁：将河沙和土壤按3：1混合，以三叶草或玉米为宿主植物；把河沙土壤混合物过1mm筛，121℃水蒸汽灭菌或160～170℃干热灭菌2h，加入0.005～0.01%尿素和0.02～0.04%过磷酸钙，接种3%～5%初始丛枝菌根真菌菌剂，用层施法或混施法拌匀，然后加入18%～22%水，播种所述宿主植物的种子，常规管理3～4个月后即可收获。

3.根据权利要求1所述的丛枝菌根真菌诱导黄瓜抗旱的方法，其特征在于，所述收获的方法是把所述宿主植物的地上部剪去，剪碎根段混匀，含有所述宿主植物根段、丛枝菌根真菌孢子、根外菌丝的风干基质即可用做丛枝菌根真菌菌剂。