CN103781778B

CN103781778B - 6-(哌啶-4-基氧基)-2h-异喹啉-1-酮盐酸盐的结晶性溶剂化物

Info

Publication number: CN103781778B
Application number: CN201280043723.9A
Authority: CN
Inventors: N.纳格尔; B.鲍姆加特纳; H.博科托尔德; O.普利坦伯格; D.卡德赖特; M.莫尼克; S.格斯勒; J.蒂尔纳
Original assignee: Sanofi Aventis France
Current assignee: Sanofi Aventis France
Priority date: 2011-07-08
Filing date: 2012-06-27
Publication date: 2015-10-07
Anticipated expiration: 2032-06-27
Also published as: JP2014518235A; HUE027309T2; RU2014104358A; JP6357100B2; US8710078B2; RU2619129C2; EP2729460B1; EP2729460A1; CA2843773C; CA2843773A1; US20130012444A1; HRP20160356T1; HK1192546A1; ES2568245T3; MA35340B1; SG2014007520A; AU2012283276A1; CN103781778A; CY1118326T1; AU2012283276B2

Abstract

本发明涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的结晶性溶剂化物、它们的制备方法和它们的用途。

Description

6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的结晶性溶剂化物

技术领域

本发明涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的新型结晶性溶剂化物、它们的制备方法和它们的用途，具体地为用于制备药物的用途。

背景技术

6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮作为药学活性化合物是已知的。在WO2007/065916中6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮被描述为游离碱。WO2007/012421、WO2008/077550和WO2009/080335描述了6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮及其盐酸盐的合成，但不含有任何可控的、可重现的结晶操作的证据。所述物质仅通过冷冻干燥得到。

6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮的盐酸(HCl)盐为式(I)化合物：

式(I)化合物还可以其互变异构体形式1-羟基-异喹啉存在且所述互变异构体为本发明的另一个实施方案。

溶剂化物为通过溶剂化作用所形成的化合物，其为溶剂分子与溶质的分子或离子的组合。溶剂化作用为溶质与溶剂的相互作用，其导致溶质物质在溶液中的稳定化作用，借此溶液中的离子被溶剂分子所络合。溶剂起溶解作用。溶剂可为气体、液体或固体。如果溶剂为固体，则气体、液体和固体可被溶解。液体在固体中的实例为例如汞在金中形成汞齐。溶剂化物且尤其是固体溶剂化物可具有不同的且独特的物理性质，例如不同的溶解度特征、不同的热力学稳定性、不同的结晶行为、不同的可过滤性、不同的熔点温度和/或不同的X-射线衍射峰。不同溶剂化物及其多晶型形式的物理性质差异由固体中邻近分子的不同取向和分子间相互作用造成。化合物或溶剂化物的多晶型形式可通过X-射线衍射以及通过其它方法来区别，所述其它方法例如红外光谱或者拉曼光谱。

水合物为含有水的溶剂化物。根据本发明，式(I)的水合物包括式(I)的所有含水溶剂化物，其中水相对于化合物(I)以任意比例存在。

然而，如本领域的技术人员所公认的，已知化学化合物的新型固体溶剂化物的存在不可被预见。结晶相(水合物或溶剂化物)的存在不可被预见。同样，在其中发生结晶得到具体形式的条件，以及多晶型形式和溶剂化物的特性都不可被预知。由于各种多晶型物和溶剂化物的性质如溶解度和稳定性以及因此用于使用和储存的适应性可以改变，所以鉴别多晶型物的存在对于提供具有增强的储存稳定性或可预知的溶解度特征的药物是必要的。

发明内容

本发明的目的是提供6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐(化合物(I))的新型固体形式。具体目的是提供化合物(I)的新型结晶性固体形式。具体目的是提供化合物(I)的新型结晶性固体形式，其具有良好的性质特征或者用于制备化合物。具体目的是提供化合物(I)的新型结晶性固体形式，其具有所述的良好性质，其使得化合物(I)用作药物活性化合物更为有利。具体目的是提供化合物(I)的新型结晶性固体形式，对于稳定性、可溶性、加工性、吸湿性、流动性、可过滤性或结晶速度而言，其具有良好的性质。

本发明的目的由下列实施方案来满足。

本发明的实施方案涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的水合物。在一个实施方案中所述水合物为二水合物。

本发明的另一个实施方案涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐二水合物和多晶型物2及其任意混合物。

本发明的另一个实施方案涉及化合物(I)与有机溶剂的溶剂化物，尤其是选自以下的溶剂化物：乙酸甲酯溶剂化物、1,4-二噁烷溶剂化物或乙腈溶剂化物。

在本发明的上下文中，多晶型物、多晶型形式、溶剂化物等总是表示6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的多晶型物、多晶型形式或溶剂化物。在本申请中术语“多晶型物”、“形式”和“相”可互换使用。如在下文所提供的实施例中所概述，得到本发明的无水和无溶剂形式以及水合物和有机溶剂化物。

附图说明

图1-在室温使用CuKα₁辐射以发射模式测量的6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐二水合物的X-射线粉末衍射图(x-轴：衍射角2θ(2θ)[°]；y-轴：相对强度[最高衍射峰的%])。

图2-化合物(I)的二水合物的TGA热分析图。

图3-由于在开始第一吸附循环前在开始时的干燥期，已经转化成相2的作为二水合物相对湿度(25-40℃)的函数的DVS相变和含水量。

图4-在室温使用CuKα₁辐射以发射模式测量的化合物(I)的多晶型物2的X-射线粉末衍射图(x-轴：衍射角2θ(2θ)[°]；y-轴：相对强度[最强衍射峰的%])。

图5-在室温使用CuKα₁辐射以发射模式测量的化合物(I)的多晶型物1的X-射线粉末衍射图(x-轴：衍射角2θ(2θ)[°]；y-轴：相对强度[最强衍射峰的%])。

图6-在室温使用CuKα₁辐射以发射模式测量的化合物(I)的多晶型物3的X-射线粉末衍射图(x-轴：衍射角2θ(2θ)[°]；y-轴：相对强度[最强衍射峰的%])。

图7-在25℃以相3开始的作为相对湿度的函数的相变和含水量(如从DVS和湿度分辨的XRPD中所测定的)。

图8-在室温使用CuKα₁辐射以发射模式测量的化合物(I)的多晶型物4的X-射线粉末衍射图(x-轴：衍射角2θ(2θ)[°]；y-轴：相对强度[最强衍射峰的%])。

图9-在室温使用CuKα₁辐射以发射模式测量的化合物(I)的1,4-二噁烷溶剂化物的X-射线粉末衍射图(x-轴：衍射角2θ(2θ)[°]；y-轴：相对强度[最强衍射峰的%])。

图10-在室温使用CuKα₁辐射以发射模式测量的化合物(I)的乙腈溶剂化物的X-射线粉末衍射图(x-轴：衍射角2θ(2θ)[°]；y-轴：相对强度[最强衍射峰的%])。

图11-在室温使用CuKα₁辐射以发射模式测量的化合物(I)的乙酸甲酯溶剂化物的X-射线粉末衍射图(x-轴：衍射角2θ(2θ)[°]；y-轴：相对强度[最强衍射峰的%])。

图12-在室温使用CuKα₁辐射以发射模式测量的化合物(I)的无定形形式的X-射线粉末衍射图(x-轴：衍射角2θ(2θ)[°]；y-轴：相对强度[无定形光晕(amorphous halo)的最大强度的%])。

图13-在25℃作为二水合物相对湿度的函数的DVS水蒸汽吸附。

图14-为了与二水合物比较，在25℃作为化合物(I)的无定形形式相对湿度的函数的DVS水蒸汽吸附。

水合物

本发明的一个实施方案为6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐(I)的结晶性水合物。本发明的另一个实施方案为化合物(I)的结晶性水合物，其中所述水合物含有约10.5-12.5%水(w/w)。本发明的另一个实施方案为水合物，其中所述水合物每分子6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐(I)含有1.85-2.2分子水。本发明的另一个实施方案为水合物，其中所述水合物每分子6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐(I)含有2分子水。

在本申请中将每分子含有1.85-2.2分子水的结晶性水合物称为“二水合物”且为本发明的实施方案。

在水合物的另一个实施方案中，含水量为10.5-11.4%水(w/w)。在另一个实施方案中，水合物含有约1.85-2.0分子水。在水合物的另一个实施方案中，含水量为11.4%(w/w)。在另一个实施方案中，水合物每分子(I)含有2.0分子水。尽管水合物相通常含有约10%-12.5%水，但是其还可以较低的含水量出现。即使二水合物被干燥且剩余含水量低至约3%，水合物的晶体结构仍然保持。如果环境中的湿度再次升高，水吸收(uptake)是可逆的。分离出的产物中的含水量取决于结晶后水合物后处理过程中的干燥条件。

在一个实施方案中，二水合物具有如下性质：在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中具有至少一个在7.7±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个实施方案中，二水合物具有如下性质：在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中具有至少在7.7(强)、15.2(强)和16.8(中等)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个实施方案中，二水合物具有如下性质：在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中具有至少在7.7(强)、15.2(强)、16.8(中等)、22.4(强)、25.0(强)和26.6(强)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个实施方案中，二水合物具有如下性质：在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中具有至少在7.7(强)、15.2(强)、16.8(中等)、18.4(中等)、20.4(中等)、22.4(强)、25.0(强)、26.6(强)和30.3(中等)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个实施方案中，水合物还可具有如下特征：它的使用CuKα₁辐射以发射模式得到的X-射线粉末衍射图与图1中所示的X-射线粉末衍射图基本上一致，其中图中所示衍射峰强度以及上文指出的那些衍射峰的强度并非必要条件，而是可以改变。

二水合物的特征也可通过它的通过单晶结构分析测定的晶体参数来表征。

发现二水合物以空间群P-1，Z=2结晶，在不对称单元中具有一分子(I)和两分子水。

所测量的晶胞数据在表1中给出。

表1.在室温化合物(I)的二水合物的晶胞参数

(1)计算值

结晶水分子位于与结晶轴平行的通道中且水分子与氯阴离子以及与分子阳离子形成氢键。

二水合物的特征还可在于如图2中所示的它的TGA图。当将二水合物在干燥环境中加热时，明显的重量损失在轻微升高的温度已经开始且在约110℃结束。在该实例中，所述图显示重量损失为0.57mg水，对应于10.8质量%水，其意味着该样品在加热时每摩尔化合物(I)损失了约1.9摩尔水。

二水合物中的含水量还可通过本领域已知的其它方法如Karl-Fischer滴定法测定。

此外，二水合物的特征还可在于如图3中所示的在25℃测量的它的DVS(动态蒸汽吸附)水蒸汽吸附和脱附等温线。在开始吸附循环前，将二水合物探针用干燥的氮气处理，其导致转换成如湿度分辨XRPD所示的相2。如图3中所示，吸附和脱附等温线几乎是相同的。在吸附循环中，当相2暴露于1%-20%的相对湿度时，探针的含水量迅速增加且在20%-95%之间几乎保持稳定。在脱附循环中，当二水合物暴露于95%-20%相对湿度时，含水量几乎保持稳定。重量损失在低于20%相对湿度开始且在低于10%尤其是低于5%相对湿度变强。在低相对湿度下的质量变化为完全可逆的且当湿度再次增加时，对于小样品而言，再水合作用进展迅速。然而，对于大体积样品，过度干燥样品的再水合作用可需要相当长时间且再水合作用可能需要数天。在40℃观察到几乎相同的水吸附和脱附等温线。

取决于环境和二水合物的储存条件，尤其是如果湿度低于约10%，尤其是低于约5%，二水合物可部分或完全转换成多晶型物2。转化程度取决于湿度、样品大小和暴露于干燥环境的长短。因此在另一个实施方案中，本发明涉及二水合物，其包含多晶型物2的量为1%-99%，尤其是为1%-10%。为了定义，相对于二水合物的量来计算任意量的另一种多晶型物。

湿度箱中的XRPD分析显示在相当低的相对湿度(2%)下且当样品几乎完全脱水时，发生向相2的转换。对于测量，箱中的相对湿度(r.h.)首先历时6小时从50%线性降低至2%，在2%保持6小时，然后在2%-95%之间循环两次持续6小时(使样品在95%和2%保持6小时)，且最后历时7小时增加至50%。对于二水合物，在2%r.h.观察到可逆性转换成相2，在8%-10%r.h发生逆转换成二水合物。当在25℃和40℃进行湿度控制的XRPD时，得到很大程度上相同的结果。

另一方面，温度分辨XRPD显示，这种水的损失与向相3转换同时发生或者在向相3转换之前发生，所述向相3转换在约90℃开始发生。

基于这些发现，二水合物在低于90℃是稳定的且在室温也是稳定的。因此，与其它所述无水多晶型物相比，当需要高稳定性时，二水合物是特别合适的。它是可在低于90℃的不同环境中在20%-95%相对湿度下(这是通常的储存条件)储存，而不具有转换成另一种所述结晶相的风险的唯一一种。即使暴露于非常干燥的环境，可能的水损失是可逆的且一旦化合物回到具有通常湿度条件的环境中可得回失去的水。因此，二水合物特别适于制备具有改善稳定性的药物和药物组合物。

此外，相应的无定形物质为吸湿性的且与二水合物相比含水量随着相对湿度变化更为强烈。这种水吸收和含水量的差异性使得在药物产品生产过程中精确配药变得困难。相比之下，已经证明在通常储存条件下二水合物在超过两年里是稳定的(在25℃/65%相对湿度未检测到分解)。相应地，对于药物产品生产，结晶性二水合物因此为优选的固体形式。

此外，二水合物的特征还在于如图13中所示的在25℃测量的它的DVS(动态蒸汽吸附)水蒸汽吸附和脱附等温线。类似地，通过图14中所示的在25℃测量的无定形化合物(I)的DVS(动态蒸汽吸附)水蒸汽吸附和脱附等温线，与无定形化合物(I)的特征进行对比是可能的。二水合物令人惊奇且意想不到地属于罕见的化学计量的水合物类型，即当暴露于宽广范围的相对湿度时所述水合物保持完全恒定的含水量。所述性质是有利的，例如当活性药物成分在结晶后干燥时或者在生产剂型期间以及在固体剂型储存期间称量时。

正如已提到的，无定形物质为吸湿性的且调节其含水量至环境相对湿度(图13)。只有当含水量偶然对应于在样品所暴露的环境相对湿度下的平衡含水量时，才达到所述物质的稳定(分子)重量。此外，无定形物质的许多关键性质随着其含水量而变化，例如分子流动性(molecular mobility)、溶出速度(dissolution rate)和转换成其它固体相的趋势。因此，吸湿性无定形物质已经被认为不宜用于口服固体剂型。意想不到地，因为有利的性质和稳定性，密切相关的二水合物适于作为用于药物产品生产的固体。

多晶型物2

本发明的另一个方面涉及化合物(I)的多晶型物2，其具有如下性质：在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中具有至少在8.1(中等)、15.8(强)和16.5(中等)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个方面中，多晶型物具有如下性质：在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中具有至少在8.1(中等)、15.8(强)、16.5(中等)、17.7(中等)、19.6(中等)、20.8(中等)、22.2(中等)、25.0(中等)、26.6(中等)和30.5(中等)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个实施方案中，多晶型物2的特征还在于基本上如图4中所示的它的X-射线粉末衍射图。这已经使用CuKα₁辐射以发射模式得到，其中图中所示衍射峰强度以及上文指出的衍射峰的强度并非必要条件，而是可以改变。

多晶型物2的特征还在于它的DVS水蒸汽吸附(其中它转换成二水合物)和脱附等温线(其中它转换回形式2)。对于更多详情参见二水合物和图3的描述。

多晶型物2不是靠从溶液中结晶直接得到的。当二水合物暴露于相当低的相对湿度(优选小于5%，更优选小于2%)时，多晶型物2通常在环境温度或在40℃形成，且当多晶型物2暴露于渐增的湿度(优选在相对湿度高于约10%)时，它转换回二水合物。相应地，如果应得到二水合物，多晶型物2是格外有用的。取决于环境和多晶型物2的储存条件，尤其是如果湿度增加至高于约10%，多晶型物2部分或完全转换成二水合物且因此样品可包含二水合物的范围为0.1%-100%。

在另一个方面中，本发明涉及化合物(I)的多晶型物1、多晶型物3和多晶型物4，它们与多晶型物2不同，可由化合物(I)直接得到，然后也可将其转化成二水合物。

在一个方面中，三种无水多晶型物的特征在于在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中展现出特征性衍射峰，所述特征性衍射峰至少在

1)15.4°2θ和在选自以下的各范围内：

2)16.6-16.8，和

3)21.5-21.7°2θ±0.2°2θ。

多晶型物1

本发明的另一个方面涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的多晶型物1，其在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图(XRPD)中具有至少在4.5(中等)、15.4(强)、16.8(强)、21.7(中等)和24.7(中等)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个方面中，多晶型物1具有如下性质：在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中具有至少在4.5(中等)、15.4(强)、16.8(强)、19.8(弱)、21.7(中等)、22.5(强)、22.8(强)、24.7(中等)和27.3(中等)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个实施方案中，多晶型物1的特征还在于它的X-射线粉末衍射图，例如在图5中所示的X-射线粉末衍射图。这已经使用CuKα₁辐射以发射模式得到，其中图中所示衍射峰强度以及上文指出的衍射峰的强度并非必要条件，而是可以改变。

多晶型物1的特征还在于它的熔化特性，例如它的DSC熔点。当加热时，在化学分解之后且伴随着化学分解，相1在约300℃开始熔化。在熔化前未观察到转换成另一种结晶相。

如用在25℃进行的湿度控制的XRPD所测定的，暴露于升高的湿度导致转换为二水合物。首先将箱中的相对湿度在2%保持6小时，然后历时19小时线性增加至95%，在95%保持6小时，历时19小时线性下降至2%且在2%再保持10小时。在95%约15分钟后相1转换成二水合物，其在2%r.h.约40分钟后转而变成相2。同样，在20℃和75%相对湿度下储存相1导致在3周之内完全转化为二水合物。转化速率与相对湿度相关。从相混合物开始的用混悬液进行的成熟实验(参见成熟实验)表明，在0℃-40℃温度范围内相1只是亚稳性多晶型物。

多晶型物1因此可用于制备二水合物且进一步用于制备多晶型物2。

多晶型物3

本发明的另一个方面涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的多晶型物3，其具有如下性质：在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中具有至少在4.5(中等)、15.4(强)、16.7(强)、21.7(强)和25.5(中等)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个方面中，多晶型物3具有如下性质：在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中具有至少在4.5(中等)、15.4(强)、16.7(强)、21.7(强)、22.0(中等)、22.3(中等)和25.5(中等)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

多晶型物3的特征还在于基本上如在图6中所示的它的X-射线粉末衍射图。这已经使用CuKα₁辐射以发射模式得到，其中图中所示衍射峰强度以及上文指出的衍射峰的强度并非必要条件，而是可以改变，且表示本发明的另一个实施方案。

多晶型物3的特征还在于它的熔化特性，例如它的DSC熔点。当加热时，在化学分解之后且伴随着化学分解，相3在约300℃开始熔化。在熔化之前在低湿度下未观察到转换成另一种结晶相。

如用在25℃进行的湿度控制的XRPD所测定的，暴露于升高的湿度导致转换为二水合物。首先历时6小时将箱中的相对湿度(r.h.)从50%线性降低至2%，在2%保持6小时，然后历时12小时线性增加至95%，在95%保持6小时，历时12小时线性下降至2%且在2%再保持6小时。结果，在95%r.h.约30分钟后相3转换成水合物，其在2%r.h.约30分钟后转而变成相2。

此外，相3的特征还在于在25℃测量的它的DVS(动态蒸汽吸附)水蒸汽吸附和脱附等温线(图7)。与上述湿度控制的XPRD一致，所述图显示随着湿度增加相3仍然保持且在高于约80%相对湿度变成二水合物(循环1，吸附)。随着湿度下降，二水合物在低湿度(低于约10%r.h.)转化回相2(循环1，脱附)。然后随着湿度增加相2转化成二水合物且沿着相同的等温线随着湿度下降其转化回多晶型物2(循环2，也参见图3)。

相1和相4转换成二水合物，然后二水合物转化回相2的相应DVS图看上去类似。

同样，在20℃和75%相对湿度下储存相3导致在3周之内完全转化为二水合物。转化速率与相对湿度相关。当混悬在水中，几乎立即观察到完全转换成二水合物(<10分钟)。

此外，在干燥的有机溶剂中从相混合物开始的用混悬液进行的成熟实验(参见实施例)表明，在0℃-40℃温度范围内相3为最稳定的无水相。这些数据显示，多晶型物3在室温和室温附近在低相对湿度(小于约10%相对湿度)下是最稳定的相。

多晶型物3还可通过在升高的温度从多种无水溶剂中结晶而容易地得到且因此适用于分离并纯化粗制的化合物(I)。

多晶型物4

本发明还涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的多晶型物4，其具有如下性质：在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中具有至少在15.4(中等)、16.7(中等)、21.5(强)和30.7(弱)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个方面中，多晶型物4具有如下性质：在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中具有至少在15.4(中等)、16.7(中等)、16.9(中等)、21.5(强)、21.9(弱)、22.4(中等)、23.2(弱)、27.6(弱)和30.7(弱)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个实施方案中，多晶型物4的特征还在于它的X-射线粉末衍射图，例如在图8中所示的X-射线粉末衍射图。这已经使用CuKα₁辐射以发射模式得到，其中图中所示衍射峰强度以及上文指出的衍射峰的强度并非必要条件，而是可以改变。

多晶型物4的特征还在于它的熔化特性，例如它的用DSC(差示扫描量热法)测定的熔点。当加热时，在化学分解之后且伴随着化学分解，相4在约300℃开始熔化。在熔化之前在低湿度下未观察到转换成另一种结晶相1、2或3。

如通过湿度控制的XRPD所测定的，暴露于升高的湿度导致转换为二水合物。首先历时6小时将湿度从50%线性降低至2%，在2%保持6小时，然后历时12小时线性增加至95%，在95%保持6小时，历时12小时线性下降至2%且在2%再保持6小时。结果，在95%约15分钟后相4转换成二水合物，二水合物在2%r.h.约20分钟后转而变成相2。

多晶型物4特征还在于它的DVS(动态蒸汽吸附)水蒸汽吸附和脱附等温线。多晶型物4的吸附/脱附行为与图7中对于多晶型物3所述的行为类似。

同样，在20℃和75%相对湿度下储存相4导致在3周之内完全转化为二水合物。转化速率明显与相对湿度相关。在干燥的有机溶剂中从相混合物开始的用混悬液进行的成熟实验表明，在0℃-40℃温度范围内相4只是亚稳性多晶型物。

溶剂化物

此外，本发明涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的1,4-二噁烷溶剂化物、乙酸甲酯溶剂化物和乙腈溶剂化物。

本发明的1,4-二噁烷溶剂化物在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中显示在15.1(强)和22.5(强)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个方面中，1,4-二噁烷溶剂化物具有如下性质：在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中具有至少在15.1(强)、19.7(中等)、20.3(中等)、21.6(中等)、22.5(强)、23.8(中等)、24.9(中等)和30.2(中等)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个实施方案中，1,4-二噁烷溶剂化物的特征还在于它的X-射线粉末衍射图，例如在图9中所示的X-射线粉末衍射图。这已经使用CuKα₁辐射以发射模式得到，其中图中所示衍射峰强度以及上文指出的衍射峰的强度并非必要条件，而是可以改变。

根据温度分辨X-射线粉末衍射、DSC和TGA，与对于半溶剂化物预计的16.6%及对于一摩尔当量二噁烷预计的23.9%相比，1,4-二噁烷溶剂化物在热重法中主要在80℃-120℃温度范围内显示16.6%的重量损失。在该温度范围内，如通过XRPD所测定的，观察到向相3的转换。所述溶剂化物因此是相对稳定的。

因此，本发明的另一个方面涉及1,4-二噁烷溶剂化物通过在高温(例如在约80℃-120℃温度范围内)干燥1,4-二噁烷溶剂化物用于制备多晶型物3的用途。

在另一个方面中，二水合物可如下制备：将1,4-二噁烷溶剂化物干燥且在约0℃-40℃使无溶剂产物暴露于潮湿气氛以得到二水合物。

1,4-二噁烷溶剂化物中1,4-二噁烷和化合物(I)的摩尔比可以改变。在本发明的一个实施方案中，1,4-二噁烷含量的范围为约1.1至约0.1摩尔当量的1,4-二噁烷，在另一个实施方案中为约1.1至约0.3摩尔当量的1,4-二噁烷，在另一个实施方案中为约1至约0.3摩尔当量的1,4-二噁烷，在另一个实施方案中为约0.7至约0.3摩尔当量的1,4-二噁烷，在另一个实施方案中为约0.5摩尔当量的1,4-二噁烷，其中后面的1,4-二噁烷含量对应于如通过TGA所测定的二噁烷溶剂化物样品的重量损失。因此具体目的为6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐x0.51,4-二噁烷溶剂化物。

乙腈溶剂化物为本发明的另一个目的。所述溶剂化物在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中显示至少在6.8(中等)、11.3(中等)和27.7(强)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个方面中，乙腈溶剂化物具有如下性质：在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中具有至少在6.8(中等)、11.3(中等)、15.3(强)、20.9(中等)、23.9(强)、24.0(中等)、27.4(中等)和27.7(强)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个实施方案中，乙腈溶剂化物的特征还在于基本上如在图10中所示的它的X-射线粉末衍射图，其已经在混悬液中使用CuKα₁辐射以发射模式得到，其中图中所示衍射峰强度以及上文指出的衍射峰的强度并非必要条件，而是可以改变。

通过从化合物(I)开始以乙腈溶剂化物的形式重结晶化合物(I)，乙腈溶剂化物可用于纯化化合物(I)。因此，本发明的另一个方面涉及化合物(I)的乙腈溶剂化物用于纯化化合物(I)的用途。

本发明的乙酸甲酯溶剂化物在使用CuKα₁辐射以发射模式在混悬剂中测量的(毛细管法)X-射线粉末衍射图中显示至少在15.0(强)和23.7(强)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个方面中，乙酸甲酯溶剂化物具有如下性质：在使用CuKα₁辐射的X-射线粉末衍射图中具有至少在6.9(中等)、15.0(强)、20.8(中等)、22.8(中等)、23.7(强)、24.0(中等)、25.1(中等)和28.0(中等)°2θ±0.2°2θ的特征性衍射峰。

在另一个实施方案中，乙酸甲酯溶剂化物的特征还在于基本上如在图11中所示的它的X-射线粉末衍射图，其已经使用CuKα₁辐射以发射模式得到，其中图中所示衍射峰强度以及上文指出的衍射峰的强度并非必要条件，而是可以改变。

在母液外，乙酸甲酯溶剂化物仅为中等稳定的且在湿气存在条件下开始转换为水合物。因此，本发明的另一个方面涉及化合物(I)的乙酸甲酯溶剂化物用于制备水合物的用途，例如使其经受促进乙酸甲酯损失且吸引水的条件如升高的温度和/或湿度。

本发明的另一个方面涉及本发明的6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的多晶型形式或多晶型形式的混合物及水合物作为药物(pharmaceutical)或药剂(medicament)的用途。

在一个实施方案中，本发明涉及多晶型形式(选自多晶型形式1、2、3、4)和水合物或这些形式的混合物(包含多晶型形式1、2、3、4中的至少一种和水合物)作为药物或药剂的用途。

本发明的另一个方面涉及固体药物组合物，其包含至少一种本发明的6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的多晶型形式或溶剂化物(尤其是选自多晶型形式1、2、3、4的形式和水合物)及一种或多种药用赋形剂(即无活性物质，例如稀释剂和其它辅料)。在本发明的一个实施方案中，所述药物组合物包含多晶型形式1、2、3或4中的一种(尤其是多晶型物2)，且还包含任意比例的水合物。在另一个实施方案中，所述药物组合物包含水合物。

当化合物(I)在人类医学和兽医学中用作药物时可使用的固体药物组合物，通常以约0.01wt%至约90wt%(重量百分比)含有化合物(I)的一种多晶型物或多种多晶型物或水合物，具体地为约0.1wt%至约20wt%，例如约0.1wt%至约10wt%，且每单位剂量具有约0.2mg至约100mg的量，具体地每单位剂量具有约1mg至约20mg的量。所提到的所有值是基于游离碱6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮计算的，其分子量为244.12。但是取决于药物组合物的种类和具体实例的其它细节，百分比和量可从标明的百分比和量偏离。

一般而言，合适的赋形剂是本领域的技术人员已知的。稀释剂或载体物质为可药用的且适于增加固体药物组合物毛体积(bulk volume)，从而使得最终产物具有用于患者或医生给药和配药的适当形式和体积的任何化合物。稀释剂的实例为植物性脂肪和油脂、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、碳酸钙、磷酸钙、高岭土、微晶纤维素、淀粉等以及它们的组合。可存在于药物组合物中用于达到需要的性质特征和/或支持其生产的其它辅料的实例为抗粘着剂(antiadherents)、粘合剂(例如***胶、明胶、纤维素、纤维素衍生物、聚乙烯基吡咯烷酮、藻酸钠、淀粉、蔗糖、聚乙二醇等)、缓冲盐、包衣(例如纤维素、合成性聚合物、紫胶(shellac)、多糖等)、崩解剂(例如淀粉、纤维素、交联聚乙烯基吡咯烷酮、乙醇酸淀粉钠、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、树胶如琼脂、瓜尔胶等)、矫味剂和着色剂、助流剂、润滑剂(例如滑石、硅石、硬脂酸镁等)、防腐剂(例如抗氧化剂如维生素A、维生素E、维生素C、棕榈酸视黄酯和硒、蛋氨酸、半胱氨酸、柠檬酸、柠檬酸钠、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯等)、吸着剂(sorbents)、增甜剂、湿润剂及其它辅料，所述其它辅料包括例如明胶、酪蛋白、卵磷脂、***胶、胆固醇、西黄蓍胶、硬脂酸、苯扎氯铵、硬脂酸钙、单硬脂酸甘油酯、鲸蜡硬脂醇(cetostearyl alcohol)、脱水山梨糖醇酯(sorbitan esters)、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯、聚乙二醇、聚氧乙烯硬脂酸酯、胶态二氧化硅、磷酸盐(phosphates)、十二烷基硫酸钠、羧甲基纤维素钠、纤维素衍生物、硅酸镁铝、三乙醇胺、聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮以及它们的任意组合。

本发明的药物组合物在化合物(I)所需的用途中可具有适于配药和给药的任何形式，且例如可为混悬剂、片剂、丸剂、硬明胶胶囊剂或软明胶胶囊剂、锭剂等。所述药物组合物可例如口服给药、含服给药、直肠给药、肠胃外给药、皮下给药、经鼻给药、局部给药、通过吸入或通过眼或经皮途径给药，尤其是口服给药，优选的给药取决于具体情况。当用本发明的呈一种或多种多晶型物或水合物形式的化合物(I)治疗受试者(优选哺乳动物，更优选人类)时使用的并且对于得到需要的治疗或预防效果有效的剂量可变，且由医生鉴于具体情况的细节来确定。正如本领域中已知的，所述剂量取决于多种因素例如所要治疗疾病的严重度、一般健康(general health)、给药途径、体重、性别、饮食、给药时机和给药途径、需要的治疗持续时间、吸收速率和***速率、与其它药物的组合及其它因素。本发明化合物(I)的结晶相或结晶相混合物(无水的和/或水合的)的每日总剂量可以单一剂量或分开剂量向患者给药。

本发明的另一个方面涉及本发明的6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的多晶型形式或多晶型形式的混合物和水合物与一种或多种另外的药理学活性成分组合作为药物或药剂的用途，所述药理学活性成分例如对常与此相关的代谢紊乱或障碍具有良好的效果。所述药物的实例为：

1.降血糖药、抗糖尿病药；

2.治疗和/或预防由糖尿病引起的或与糖尿病相关的并发症的活性成分；

3.治疗血脂异常的活性成分；

4.抗动脉粥样硬化药；

5.抗肥胖药；

6.抗炎活性成分；

7.抗血栓活性成分；

8.用于治疗高血压的活性成分；

9.用于治疗心力衰竭的活性成分。

它们可与本发明的式(I)化合物组合具体用于效果的协同性改善。活性成分组合的给药可如下进行：向患者分开给药所述活性成分，或者以组合产品的形式给药，其中多种活性成分存在于一种药物制剂中。

用于组合产品的合适的另外活性成分具体地为：在Rote Liste2011,Chapter12中提到的所有抗糖尿病药；在Rote Liste2011,Chapter17中提到的所有抗高血压药；在Rote Liste2011,Chapter19中提到的所有减肥药(slimming agents)/食欲抑制药(appetite suppressants)；在Rote Liste2011,Chapter27中提到的所有β受体阻滞剂、钙通道阻滞剂和肾素-血管紧张素***抑制剂，例如氨氯地平(Amlodipin)；在Rote Liste2011,Chapter1中提到的所有减肥药/食欲抑制药；在Rote Liste2011,Chapter58中提到的所有脂质降低药(lipid reducers)。在一个实施方案中，它们可与ACE(血管紧张素转化酶)抑制剂组合，所述ACE抑制剂例如贝那普利(Benazepril)、卡托普利(Captopril)、西拉普利(Cilazapril)、依那普利(Enalapril)、福辛普利(Fosinopril)、咪达普利(Imidapril)、赖诺普利(Lisinopril)、莫昔普利(Moexipril)、培哚普利(Perindopril)、喹那普利(Quinapril)、雷米普利(Ramipril)、螺普利(Spirapril)、群多普利(Trandolapril)或佐芬普利(Zofenopril)。在一个实施方案中，它们可与钙通道阻滞剂组合，所述钙通道阻滞剂例如维拉帕米(Verapamil)、戈洛帕米(Gallopamil)、芬地林(Fendilin)、地尔硫卓(Diltiazem)、尼群地平(Nitrendipin)、非洛地平(Felodipin)、氨氯地平(Amlodipin)、硝苯地平(Nifedipin)、乐卡地平(Lercanidipin)、尼莫地平(Nimodipin)、尼卡地平(Nicardipin)、拉西地平(Lacidipin)、伊拉地平(Isradipin)、尼索地平(Nisoldipin)、尼伐地平(Nilvadipin)或马尼地平(Manidipin)。它们可与本发明的式I化合物组合用于作用的协同性改善。所述活性成分组合可如下给药：向患者分开添加所述活性成分，或者以组合制剂的形式给药，其中多种活性成分存在于一种药物制剂中。下文提到的大多数活性成分在USPDictionary of USAN和International Drug Names,USPharmacopeia,Rockville2006中披露。

在本发明的一个实施方案中，本发明化合物(I)的无水相或无水相的混合物和/或水合物或者包含它们的药物组合物用于处理(包括治疗和/或预防/阻止)与Rho-激酶和/或Rho-激酶介导的肌球蛋白轻链磷酸酶的磷酸化相关的疾病，具体地用于治疗和/或预防如下疾病：高血压、肺动脉高血压(pulmonary hypertension)、眼高压(ocular hypertension)、视网膜病变(retinopathy)、青光眼、周围循环障碍(peripheral circulatory disorder)、周围动脉闭塞性疾病(PAOD)、冠心病、心绞痛、心脏肥大、心力衰竭、缺血性疾病、终末器官损伤(包括缺血性器官衰竭)、纤维化肺、纤维化肝、肝衰竭、肾病(包括高血压诱导的肾病、非高血压诱导的肾病和糖尿病性肾病)、肾衰竭、纤维化肾、肾小球硬化症、器官肥大、哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、成人呼吸窘迫综合征、血栓性障碍、中风(stroke)、脑血管痉挛、脑缺血症、疼痛(例如神经性疼痛)、神经元变性、脊髓损伤、阿尔茨海默病、早产、***功能障碍、内分泌功能障碍、动脉硬化、***肥大、糖尿病和糖尿病的并发症、代谢综合征、血管再狭窄、动脉粥样硬化、炎症、自身免疫性病症、骨病(osteopathy)(如骨质疏松症)、消化道细菌感染、败血病(sepsis)、癌症发生和进展(例如乳腺癌、结肠癌、***癌、卵巢癌、脑癌和肺癌及它们的转移灶)。

相应地，本发明的另一个方面涉及本发明的6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的多晶型形式或多晶型形式的混合物和/或水合物用于制备药物的用途，尤其是用于处理(包括治疗和/或预防/阻止)如下疾病的药物：高血压、肺动脉高血压、眼高压、视网膜病变、青光眼、周围循环障碍、周围动脉闭塞性疾病(PAOD)、冠心病、心绞痛、心脏肥大、心力衰竭、缺血性疾病、终末器官损伤(包括缺血性器官衰竭)、纤维化肺、纤维化肝、肝衰竭、肾病(包括高血压诱导的肾病、非高血压诱导的肾病和糖尿病性肾病)、肾衰竭、纤维化肾、肾小球硬化症、器官肥大、哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、成人呼吸窘迫综合征、血栓性障碍、中风、脑血管痉挛、脑缺血症、疼痛(例如神经性疼痛)、神经元变性、脊髓损伤、阿尔茨海默病、早产、***功能障碍、内分泌功能障碍、动脉硬化、***肥大、糖尿病和糖尿病的并发症、代谢综合征、血管再狭窄、动脉粥样硬化、炎症、自身免疫性病症、AIDS、骨病(如骨质疏松症)、消化道细菌感染、败血病、癌症发生和进展(例如乳腺癌、结肠癌、***癌、卵巢癌、脑癌和肺癌及它们的转移灶)。

根据本发明的一个实施方案，本发明的药物组合物含有化合物(I)的多晶型物1。根据另一个实施方案，它含有化合物(I)的多晶型物1与化合物(I)的多晶型物2和/或化合物(I)的多晶型物3和/或化合物(I)的多晶型物4的组合，例如化合物(I)的多晶型物1与化合物(I)的多晶型物3的组合或者化合物(I)的多晶型物1与化合物(I)的多晶型物4的组合。根据本发明的另一个实施方案，本发明的药物组合物含有化合物(I)的多晶型物3。根据另一个实施方案，它含有化合物(I)的多晶型物3与化合物(I)的多晶型物1和/或化合物(I)的多晶型物2和/或化合物(I)的多晶型物4的组合，例如化合物(I)的多晶型物3与多晶型物4的组合。

根据本发明的另一个实施方案，本发明的药物组合物含有化合物(I)的多晶型物4。根据另一个实施方案，它含有化合物(I)的多晶型物4与化合物(I)的多晶型物1和/或化合物(I)的多晶型物2和/或化合物(I)的多晶型物3的组合，例如化合物(I)的多晶型物4与多晶型物2的组合。

根据本发明的另一个实施方案，本发明的药物组合物含有化合物(I)的水合物。根据另一个实施方案，所述药物组合物含有化合物(I)的水合物与化合物(I)的多晶型物1和/或化合物(I)的多晶型物2和/或化合物(I)的多晶型物4的组合，例如化合物(I)的水合物与多晶型物2的组合。在本发明的一个实施方案中，在药物组合物中单独使用水合物，即以基本上不含有其它多晶型物来使用。基本上不含有表示它含有小于10%，优选小于5%，更优选小于1%的一种或多种其它多晶型物，尤其是多晶型物2。

本发明的另一个方面涉及本发明的多晶型形式和溶剂化物的制备方法。在另一个方面中，本发明涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的纯化方法，其包括结晶步骤，其中得到上文所述6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的多晶型物1、多晶型物2、多晶型物3、多晶型物4或水合物。所述方法优选包括如下文所概述的多晶型物1、多晶型物2、多晶型物3、多晶型物4或水合物的制备。在6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐纯化方法的另一个实施方案中，可制备并使用它们的乙酸甲酯溶剂化物、1,4-二噁烷溶剂化物或乙腈溶剂化物。

一般而言，本发明的多晶型形式和溶剂化物可通过如下得到：从化合物(I)的溶液或从化合物(I)的混悬液或从化合物(I)的固体起始，使化合物(I)结晶或重结晶。化合物(I)的溶液或化合物(I)的混悬液可已经在化学合成化合物(I)的末期得到，或者它可已经通过使先前合成的粗制化合物(I)溶解或混悬得到。术语“粗制的化合物(I)”包含任意形式的化合物(I)，例如直接从化学合成得到的物质、不同的多晶型形式或溶剂化物或多晶型形式和/或溶剂化物的混合物，可以还未对其结晶性质进行表征，且可将其转换为不同的多晶型形式或溶剂化物或转换为另一种不同的多晶型形式或溶剂化物。

更具体地，本发明的多晶型形式1、3和4及溶剂化物可通过如下得到：

(a)提供化合物(I)的溶液或混悬液，例如使粗制的化合物(I)溶解或混悬在合适的溶剂中，所述溶剂例如醇，例如甲醇、乙醇、异丙醇；酮，例如丙酮或甲基乙基酮；醚，例如四氢呋喃或二噁烷；或者其它溶剂，如乙腈或乙酸甲酯，其中化合物(I)的溶液通常为澄清的溶液且可任选地已被过滤；

(b)保持、加热、冷却和/或浓缩溶液或混悬液和/或加入一种或多种另外的溶剂，需要或不需搅动(agitation)例如搅拌(stirring)，从而形成需要的不同的多晶型物或溶剂化物的结晶或者允许形成需要的不同的多晶型物或溶剂化物；和

(c)分离出不同的多晶型物或溶剂化物。

化合物(I)的多晶型形式和溶剂化物的制备方法可用常规设备且按照标准操作进行。例如，步骤(b)中溶液或混悬液的浓缩可通过在大气压或在减压下部分或全部蒸馏出溶剂来完成。步骤(c)中分离出多晶型物或溶剂化物可通过任何常规技术例如过滤或真空过滤或离心法来完成。分离还可包括干燥，例如通过施用高温和/或减压的干燥，例如在适度减压下，在约室温(即温度为约18℃至约25℃，例如约20℃)或在约40℃的干燥。

在优选的实施方案中，溶液或混悬液可在步骤(a)或步骤(b)中被种晶，从而促进结晶或多晶型物转化。种晶优选用少量需要的多晶型物或溶剂化物(例如多晶型物1、多晶型物3或多晶型物4)来完成。

本发明的另一个方面涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐二水合物的制备方法，所述方法包括如下步骤：

(a)在适于得到溶液的温度使6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐溶解在含水的合适溶剂中或者溶解在水中；

(b)通过部分蒸发溶剂而将溶液充分浓缩，以允许形成二水合物结晶，或者将溶液冷却下来且将其保持足以允许形成二水合物结晶的一段时间；和

(c)分离出二水合物。

用于使6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮溶解和结晶的合适溶剂或溶剂混合物可选自丙酮/水、甲基乙基酮/水、甲醇/水、乙醇/水、异丙醇/水、四氢呋喃/水、乙腈/水或水。

适于得到溶液的温度为约55℃至约70℃，优选为约65℃。

通过浓缩而足以允许形成二水合物晶体的析出物的时间为例如约1小时至10天，如约2天。使溶液冷却下来可如下来进行：例如通过使其保持在室温和/或通过在约1分钟至约30分钟内主动冷却，且可取决于样品大小而变化。通过冷却得到的温度为约0℃。

上文提到的溶剂混合物中的含水量可取决于所用溶剂而变化，但对于有机溶剂和水可在宽广的范围内变化。对于溶剂混合物例如乙醇/水、2-丙醇/水或丙酮/水，例如它的范围可为约4:1-1:4(v/v)，但它可为更多的水且还可使用纯水。在一个实施方案中使用4:1的溶剂/水混合物。在另一个实施方案中，使用丙酮/水混合物。在一个实施方案中使用丙酮/水的比例为3:1(v/v)，在另一个实施方案中使用丙酮/水的范围为3:2(v/v)。

根据优选的实施方案，所述溶液可用二水合物结晶进行种晶，优选在步骤(b)期间进行种晶。

干燥得到的二水合物可例如用具有确定湿度的氮气流(大于约30%水)来完成，以避免过分干燥二水合物且从晶体中失去水。

本发明的另一个方面涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的多晶型物2的制备方法，所述方法包括如下步骤：

(a)在约20℃至约40℃的温度，将6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐二水合物暴露于相当低的湿度，优选具有小于2%相对湿度的气体，例如氮气或空气；

(b)在约室温，将6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐二水合物保持足以允许形成化合物(I)的多晶型物2的一段时间，例如保持1天至约50天，如保持约28天；和

(c)分离出多晶型物2。

暴露于空气的时间段可取决于样品的大小而变化且对于小样品还可小于一天。

本发明的一个方面涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的多晶型物1的制备方法，所述方法包括如下步骤：

a)使6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐或其二水合物溶解在甲醇和异丙醇的溶剂混合物(优选比例为约2:1)中，得到溶液，优选通过加热在约55℃至约65℃的温度；

(b)冷却(例如至约0℃的温度)足以允许形成多晶型物1结晶的一段时间，例如冷却约30分钟至约4小时；和

(c)分离出多晶型物1。

本发明的另一个方面涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的多晶型物3的制备方法，所述方法包括如下步骤：

(a)使6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐或其二水合物溶解在合适的溶剂例如甲醇中，得到溶液，例如在约室温或在约55℃至约65℃的温度；

(b)冷却(例如至约0℃的温度)足以允许形成多晶型物3结晶的一段时间，例如冷却约30分钟至约4小时；和

(c)分离出多晶型物3；

或者

(a')在约室温，使6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐二水合物混悬在选自以下的溶剂中：甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇和丙酮，得到混悬液；

(b')使混悬液在约0℃至约45℃的温度，优选在约15℃至约25℃，更优选在约20℃，保持足以允许形成多晶型物3结晶的一段时间，例如保持约1天至约50天，如保持约35天；和

(c')分离出多晶型物3。

取决于结晶条件，在所述方法中多晶型物3可与另一种多晶型物(例如多晶型物1或4)一起得到。根据优选的实施方案，所述溶液可用多晶型物3晶体进行种晶，优选在步骤(b)期间。

本发明的另一个实施方案涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的多晶型物4的制备方法，所述方法包括如下步骤：

(a)在约室温，使6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐二水合物混悬在2-丁醇中，得到混悬液；

(b)使混悬液在约0℃至约45℃的温度，优选在约15℃至约25℃，更优选在约20℃，保持足以允许形成多晶型物4结晶的一段时间，例如保持约1天至约50天，如保持约35天；

(c)分离出多晶型物4。

根据优选的实施方案，所述溶液可用多晶型物4晶体进行种晶，优选在步骤(b)期间。

本发明的另一个方面涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的乙酸甲酯溶剂化物的制备方法，所述方法包括如下步骤：

(a)在约室温，使6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐二水合物混悬在乙酸甲酯中，得到混悬液；

(b)使混悬液在约室温维持足以形成乙酸甲酯溶剂化物的一段时间，例如保持约1天至约50天，如保持约35天；

(c)分离出乙酸甲酯溶剂化物。

取决于分离条件，所述溶剂化物可部分转换成其它多晶型物例如二水合物、形式1或3。

本发明的另一个方面涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的1,4-二噁烷溶剂化物的制备方法，所述方法包括如下步骤：

(a)在约室温，使6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐二水合物混悬在1,4-二噁烷中，得到混悬液；

(b)使混悬液在约室温保持足以形成1,4-二噁烷溶剂化物的一段时间，例如保持约1天至约50天，如保持约28天；

(c)分离出1,4-二噁烷溶剂化物的析出物。

取决于分离条件，可得到二噁烷溶剂化物和另外的二水合物。

在另一个方面中，本发明涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的乙腈溶剂化物的制备方法，所述方法包括如下步骤：

(a)在约室温，使6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐二水合物混悬在乙腈中，得到混悬液；

(b)使混悬液在约室温保持足以形成乙腈溶剂化物的一段时间，例如保持约1天至约50天，如保持约35天；

(c)分离出乙腈溶剂化物的析出物。

取决于分离条件，不仅可得到乙腈溶剂化物而且可得到二水合物以及另外的形式1和3。

具体实施方式

实施例

下列实施例以实例的方式示例性说明本发明的多晶型物和溶剂化物的形成。作为制备多晶型物和溶剂化物的起始原料，化合物(I)可如WO2007/012421中所述来得到。在使用或得到二水合物之处将指出这一点。将6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐简写为“化合物(I)”。

如果没有另外提到，在下文提到的所有形成和成熟实验中，干燥在40℃在减压下(约<50毫巴)过夜进行。多晶型物、水合物和溶剂化物通过它们的XRPD图来鉴定和表征。

1)形成二水合物(C₁₄H₂₁ClN₂O₄，MW=316.78)

a)在70℃，将10g粗制的6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐溶解在25mL水中。将溶液冷却至55℃且加入75mL丙酮。历时3小时将混合物冷却至室温且放置两天以供结晶。冷却(4℃)6小时后，经由过滤将产物分离出来，用丙酮/水(3:1)洗涤且在真空中干燥。得到7.9g(纯度97.1%)的6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐二水合物。

含水量(Karl Fischer)：10.52%

b)在65℃，将8.5g粗制的6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐溶解在21.5mL水中。历时1小时将温度降低至50℃且历时30分钟加入32.3mL丙酮。将温度降低至40℃且将混合物搅拌3小时。将反应混合物冷却至环境温度。收集结晶性物质，用水/丙酮(1/3)洗涤且干燥，得到4.54g(纯度>99.9%)的6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐二水合物。

含水量(Karl Fischer)：10.6%

¹HNMR(500MHz,d₆-DMSO)δ1.85-1.95(m,2H),2.13-2.22(m,2H),3.04-3.14(m,2H),3.20-3.29(m,2H),4.79-4.86(m,1H),6.44(d,J=7.1Hz,1H),7.10(dd,J=8.9,2.5Hz,1H),7.14(dd,J=7.2,6.7Hz,1H),7.22(d,J=2.5Hz,1H),8.09(d,J=8.6Hz,1H),8.97-9.13(bs,2H)11.09(bd,J=5Hz,1H).

c)在约65℃，将0.205g化合物(I)(二水合物)溶解在20mL乙醇和3mL水中。在相同温度允许从搅拌的溶液中蒸发溶剂过夜。

d)在65℃，将0.200g化合物(I)(二水合物)溶解在20mL乙醇和4mL水中。将溶液迅速冷却至0℃。45分钟后通过真空过滤将产物分离且干燥。

如果在实施例c)和d)中乙醇被四氢呋喃或甲基乙基酮代替，二水合物以相同的方式得到。

e)在65℃，将0.204g化合物(I)(二水合物)溶解在3mL水中。将溶液迅速冷却至0℃。30分钟后通过真空过滤将产物分离且干燥。

2)形成多晶型物1(C₁₄H₁₇N₂O₂Cl，MW=280.76)

将1.2g6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐混悬在异丙醇中且搅拌6小时。通过过滤将固体物质(1.14g)分离出来。将其中的60.7mg混悬在0.352mL异丙醇和0.647mL甲醇的混合物中。将混合物加热直至得到澄清的溶液。随着冷却得到结晶性产物，其通过过滤分离出来。

3)形成多晶型物2(C₁₄H₁₇N₂O₂Cl，MW=280.76)

在25℃，将约3mg化合物(I)(二水合物)暴露于干燥的氮气气氛(氮气流)至少6小时。该处理后，样品的X-射线衍射图对应于相2。

4)形成多晶型物3(C₁₄H₁₇N₂O₂Cl，MW=280.76)

a)在65℃，将0.201g化合物(I)(二水合物)溶解在20mL乙腈和3mL水中。在相同温度允许从搅拌的溶液中蒸发溶剂过夜。得到多晶型物3和痕量二水合物。

b)在65℃，将0.208g化合物(I)(二水合物)溶解在10mL甲醇中。将搅拌的溶液迅速冷却至0℃。30分钟后通过真空过滤将产物分离且干燥。

c)在20℃，将0.203g化合物(I)(二水合物)混悬在1.2mL甲醇中且搅拌35天。通过真空过滤将产物分离且干燥。

如果将化合物(I)的二水合物混悬在乙醇、1-丙醇或2-丙醇中，得到相同的产物(多晶型物3)。

5)形成多晶型物4(C₁₄H₁₇N₂O₂Cl，MW=280.76)

a)在20℃，将0.202g化合物(I)(二水合物)混悬在2.0mL2-丁醇中且搅拌35天。通过真空过滤将产物分离且干燥。

6)形成乙酸甲酯溶剂化物

a)将0.208g化合物(I)(二水合物)混悬在2.5mL乙酸甲酯中。在室温，将溶液在封闭的容器中搅拌35天。如在混悬液中通过XRPD所测定的，混悬液中存在的固体为乙酸甲酯溶剂化物。

真空过滤和干燥后，得到含有形式1和3的二水合物。

7)形成1,4-二噁烷溶剂化物

a)在20℃，将0.204g化合物(I)(二水合物)溶解在2.5mL1,4-二噁烷中连续搅拌35天。如在混悬液中通过XRPD所测定的，混悬液中存在的固体为1,4-二噁烷溶剂化物。

真空过滤和干燥后，得到含有二水合物的溶剂化物。

8)形成乙腈溶剂化物

a)将0.206g化合物(I)(二水合物)混悬在2.5mL乙腈中。将混悬液在20℃搅拌35天。如在混悬液中通过XRPD所测定的，混悬液中存在的固体为乙腈溶剂化物。

将混悬液中存在的固体经由真空过滤分离出来且在室温减压干燥过夜。

真空过滤和干燥后，得到含有形式1和3的二水合物。

9)成熟实施例

在给定温度通过成熟实验(浆化物转化)研究化合物(I)的多晶型物和水合物的相对稳定性。

下列成熟实验如下进行：从二水合物起始，在指定条件下搅拌混悬液。在真空过滤后以及在40℃真空(<50毫巴)干燥过夜后，在混悬液中通过XPRD研究样品。还通过DSC和TGA研究分离出的物质。

a)在20℃，使0.210g化合物(I)的二水合物在0.4mL水中成熟35天。类似地，二水合物的成熟在水/甲醇(体积/体积1:1)和水/乙醇(体积/体积1:1)中来完成。在所有成熟实验中固体仍为二水合物。

下列成熟实验如下进行：从化合物(I)的二水合物起始，在指定条件下搅拌混悬液且通过真空过滤分离出固体。在真空过滤后以及在干燥后，在混悬液中通过XRPD研究样品。还通过DSC和TGA研究分离出的物质。

(b)在20℃，使0.203g化合物(I)的二水合物在1.2mL甲醇中成熟35天。

(c)成熟还如在(b)中通过使用乙醇、1-丙醇或2-丙醇来完成。

在所有实验(b)和(c)中，得到多晶型物3。

d)在20℃，使0.202g化合物(I)的二水合物在2.0mL2-丁醇中成熟35天。干燥后得到多晶型物4。

化合物(I)的二水合物和由多晶型物1、多晶型物3和多晶型物4组成的相的相混合物混悬液的下列成熟实验在0℃、20℃和40℃进行。通过真空过滤将产物分离出来且在干燥后进行分析。

e)在0℃，使0.3mg相1、23.9mg相3、29.9mg相4和27.9mg二水合物在0.7mL2-丙醇中的混合物成熟2周。

f)在0℃，使0.3mg相1、27.2mg相3、18.1mg相4和29.6mg二水合物在2.0mL2-丁醇中的混合物成熟2周。

g)如e)和f)中的类似实验，分别在20℃和在40℃用相1、相3、相4和二水合物在2-丙醇和2-丁醇中的相应混合物来完成。

在所有实验e)、f)和g)中，在过滤和干燥后得到多晶型物3。

完成的成熟实验证明，在找到的多晶型物中，在所研究的温度范围内，相3为热力学上最稳定的无水形式。

10)形成无定形化合物(I)

将80mg6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐溶解在40ml水中且使溶液经受冷冻干燥。将溶液在液氮中冷冻且暴露于高真空约16小时。然后使得到冻干物经受X-射线粉末衍射，如通过X-射线所测定的，其证明得到的样品为无定形的(图12)。

本发明还涉及6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的新型结晶性溶剂化物(其中一个或多个非酸性氢原子被氘替代)、它们的制备方法和它们的用途，具体为用于制备药物。它们的制备方法可为上述方法的类似方法，使用相应的氘代化合物。

分析方法和操作条件

X-射线粉末衍射(XRPD)

以使用CuKα₁辐射(λ为1.54060埃)的StoeStadi-P发射衍射仪进行所有X-射线粉末衍射。对于室温粉末衍射，使用线性位置灵敏探测器；而对于温度分辨XRPD，使用图像板位置灵敏探测器(IP-PSD)。除非另有说明，否则X-射线粉末衍射在室温进行。在平面制品中研究干燥的样品而在石英玻璃毛细管中研究混悬液。评估所测量的数据且用软件WinXPOW V2.12作图。

所观察到的化合物(I)的相1、相2、相3和相4、水合物以及乙酸甲酯溶剂化物、1,4-二噁烷溶剂化物和乙腈溶剂化物的X-射线粉末衍射图展示在附图中。附图中所示X-射线粉末衍射图为扣除背景的。

指定以°(度)为单位的2θ(2θ)角。指定的以°(度)为单位的2θ(2θ)角被理解为具有±0.6°2θ的可能方差(potential variance)。

特征性衍射峰的相对强度如下规定。如果衍射峰的相对强度大于最强衍射峰强度的75%或者它本身为最强衍射峰，它被指定为“强”，而如果它为最强衍射峰强度的20%-75%，则被指定为“中等”。在20%强度以下的被指定为“弱”。

温度分辨X-射线粉末衍射图显示，化合物(I)的相1、相2、相3和相4熔化，而在熔化前未发生固体-固体转变。

热重分析法(TGA)

以METTLER TGA851e(模块TGA/SDTA851e/SF1100/042)进行热重分析。使用以盖密封的100μl铝坩埚。在开始测量之前，样品换样器立即向盖上打小孔。用约50mL/分钟的氮气气流清洗加热炉室。所述测量通常在25℃开始保持约25分钟的时间，然后以10°/分钟的速度将样品加热。

通过草酸钙水合物参比样品检验温度和重量损失。

差示扫描量热法(DSC)

以Mettler DSC822e(模块DSC822e/700/109/414935/0025)进行所有DSC测量。如果没有表明不同，使用具有密封盖和孔的40μl铝坩埚。所有测量在50mL/分钟的氮气气流中进行。除非另有说明，否则加热速度为10℃/分钟。经由铟参比的熔化峰校准温度和热流。

所测量的数据用软件STARe V6.1来评估。

动态蒸汽吸附(DVS)

在来自Surface Measurement Systems的DVS-1上记录水分吸附/脱附等温线。在25℃运行两个循环，其中首先将样品用干燥的氮气处理，然后将相对湿度从0%逐步增加至95%，然后再下降回至0%，且测量样品的重量。对于两个循环，通常的总测量时间为约20-30小时。

将数据用软件DVSWinV.2.15来评估。

晶体结构

通过X-射线单晶结构分析来测定化合物(I)的二水合物的晶体结构。在室温，在Bruker/AXS三循环衍射仪上收集单晶X-射线衍射数据，所述衍射仪装配有SMART APEX面积探测器和钼Kα旋转阳极发生器，在50kV/120mA操作并将细焦点调节至0.5x5mm²。

Claims

1.6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的结晶性水合物，所述6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐具有下式：

其具有基本与图1所示相同的X-射线粉末衍射图。

2.固体药物组合物，其包含权利要求1的6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐水合物和一种或多种药用赋形剂。

3.权利要求2的组合物，其用于治疗和/或预防如下疾病：高血压、眼高压、视网膜病变、青光眼、周围循环障碍、周围动脉闭塞性疾病(PAOD)、冠心病、心绞痛、心脏肥大、心力衰竭、缺血性疾病、终末器官损伤、纤维化肺、纤维化肝、肝衰竭、肾病、器官肥大、哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、成人呼吸窘迫综合征、血栓性障碍、中风、脑血管痉挛、脑缺血症、疼痛、神经元变性、脊髓损伤、阿尔茨海默病、早产、***功能障碍、内分泌功能障碍、动脉硬化、***肥大、糖尿病和糖尿病的并发症、代谢综合征、血管再狭窄、动脉粥样硬化、炎症、自身免疫性病症、骨病、消化道细菌感染、败血病或癌症发生和进展。

4.权利要求2的组合物，其用于治疗和/或预防如下疾病：肺动脉高血压、肾衰竭、纤维化肾或肾小球硬化症。

5.权利要求2或3的组合物，其用于制备用于治疗和/或预防肾病的药物。

6.权利要求5的组合物，其中所述肾病为糖尿病性肾病。

7.药物，其包含权利要求1的化合物和至少一种另外的活性成分。

8.权利要求7的药物，其包含作为另外的活性成分的一种或多种抗糖尿病药、活性降血糖成分或抗高血压药。

9.权利要求7的药物，其包含作为另外的活性成分的一种或多种β受体阻滞剂、钙通道阻滞剂或肾素-血管紧张素抑制剂。

10.权利要求9的药物，其包含作为另外的活性成分的维拉帕米、戈洛帕米、芬地林、地尔硫卓、尼群地平、非洛地平、氨氯地平、硝苯地平、乐卡地平、尼莫地平、尼卡地平、拉西地平、伊拉地平、尼索地平、尼伐地平或马尼地平。

11.权利要求10的药物，其包含作为另外的活性成分的氨氯地平。

12.权利要求7的药物，其包含作为另外的活性成分的一种或多种ACE(血管紧张素转化酶)抑制剂。

13.权利要求12的药物，其包含作为另外的活性成分的贝那普利、卡托普利、西拉普利、依那普利、福辛普利、咪达普利、赖诺普利、莫昔普利、培哚普利、喹那普利、雷米普利、螺普利、群多普利或佐芬普利。

14.权利要求1的6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的水合物在制备用于治疗和/或预防如下疾病的药物中的用途：高血压、眼高压、视网膜病变、青光眼、周围循环障碍、周围动脉闭塞性疾病(PAOD)、冠心病、心绞痛、心脏肥大、心力衰竭、缺血性疾病、终末器官损伤、纤维化肺、纤维化肝、肝衰竭、肾病、器官肥大、哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、成人呼吸窘迫综合征、血栓性障碍、中风、脑血管痉挛、脑缺血症、疼痛、神经元变性、脊髓损伤、阿尔茨海默病、早产、***功能障碍、内分泌功能障碍、动脉硬化、***肥大、糖尿病和糖尿病的并发症、代谢综合征、血管再狭窄、动脉粥样硬化、炎症、自身免疫性病症、骨病、消化道细菌感染、败血病或癌症发生和进展。

15.权利要求1的6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的水合物在制备用于治疗和/或预防如下疾病的药物中的用途：肺动脉高血压、肾衰竭、纤维化肾或肾小球硬化症。

16.权利要求1的6-(哌啶-4-基氧基)-2H-异喹啉-1-酮盐酸盐的水合物在制备用于治疗和/或预防肾病的药物中的用途。

17.权利要求16的用途，其中所述肾病为糖尿病性肾病。