CN103717224A - 一氧化碳(co)对脂肪酸和胆固醇摄取的抑制 - Google Patents

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Abstract

本发明的目的是提供用于抑制活细胞内脂肪酸和胆固醇摄取的组合物，该组合物是用于活细胞的脂肪酸或胆固醇摄取的抑制剂，包括一氧化碳（CO）或能体内释放CO的化合物。

Description

一氧化碳(CO)对脂肪酸和胆固醇摄取的抑制
技术领域
本发明涉及用一氧化碳（CO）抑制活细胞内脂肪酸和胆固醇摄取。
背景技术
脂肪酸是基本的营养物，作为能量来源尤其重要。然而，当自由脂肪酸被过量带入细胞比如肝脏细胞时，则促使肥胖，导致生活方式相关的疾病比如代谢综合征的问题。
关于一氧化碳（CO）对活体的作用，据记载在动脉粥样硬化的发展期间CO产量被HO-1（血红素加氧酶-1）/CO***提高，导致血管壁松弛（非专利文献1）。而且同一篇文献提出该***抑制动脉粥样硬化中斑块的形成。
此外，据记载，在暴露到CO的动脉中，内皮细胞膜的渗透性增加且通过血管壁的胆固醇摄取增加（非专利文献2）。同一篇文献提出内皮细胞膜的渗透性是由CO导致内皮细胞间缝隙变宽的结果。
此外，关于CO对血管的作用，据记载CO导致血管舒张且能释放CO的羰基化合物被用于治疗高血压等等（专利文献1）。
然而，没有发现CO和细胞内脂肪酸、胆固醇等等的代谢之间的关系。
引用列表
专利文献
专利文献1日本专利公布(Kokai)No.2009-215311A
非专利文献
非专利文献1DA-NAN LIU等人，CARDIOVASCULAR JOURNAL OF
AFRICA，第5期，卷21，2010年9/10月
非专利文献2J.S.M.SARMA等人，Atherosclerosis，22(1975)193-198
发明概述
本发明的目的是提供用于抑制活细胞内脂肪酸和胆固醇摄取的组合物。
如上面所描述的，据记载血管细胞间的缝隙被CO变宽，血管壁松弛且通过血管壁的胆固醇摄取增加。然而，没有发现CO参与细胞的物质的摄取等等。
本发明发明人发现活细胞内的CO抑制脂肪酸比如硬脂酸或棕榈酸及胆固醇的摄取。基于这个发现，本发明发明人发现当CO或能体内释放CO的化合物被用于抑制活细胞内脂肪酸或胆固醇的摄取时，可以改善与细胞内脂肪酸和胆固醇的积累有关的代谢综合征等等的病症而且可以预防或治疗与以上病症相关的另外的疾病，藉以完成本发明。
更具体地，本发明如下。
[1]用于活细胞的脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂，包括一氧化碳（CO）。
[2]用于活细胞的脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂，包括能体内释放一氧化碳（CO）的化合物。
[3]根据[2]所述的用于脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂，其中能体内释放一氧化碳（CO）的化合物是具有亚甲二氧基苯基（MDP）基团的亚甲二氧基苯衍生化合物或金属羰基络合物。
[4]根据[3]所述的用于脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂，其中能体内释放一氧化碳（CO）的化合物是由下式代表的亚甲二氧基苯衍生化合物：
[式1]
Figure BDA0000463006650000031
其中R1代表苯环上的取代基，且n代表取代基的数目且为0、1、2、3或4。
[5]根据[3]所述的用于脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂，其中能体内释放一氧化碳（CO）的化合物选自由肉豆蔻醚、黄樟素、异黄樟素、醉人素及胡椒碱组成的组。
[6]根据[3]所述的用于脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂，其中能体内释放一氧化碳（CO）的金属羰基络合物是钌羰基络合物或铁羰基络合物。
[7]根据[1]至[6]中任一项所述的用于脂肪酸和/或胆固醇的抑制剂，其中CO经由PGRMC1抑制活细胞的脂肪酸和/或胆固醇摄取。
[8]根据[7]所述的用于脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂，其中CO通过结合到PGRMC1的血红素抑制PGRMC1的功能且抑制进入细胞的脂肪酸和胆固醇摄取。
[9]一种改善、治疗或预防剂，包括根据[1]至[8]中任一项所述的抑制剂，用于选自由代谢综合征、代谢综合征相关的疾病、具有由代谢综合征增加的发展风险的心脏病或脑血管疾病、肥胖、脂肪肝及非酒精性脂肪性肝炎组成的组的病症或疾病。
[10]一种身体脂肪积聚抑制物（suppressor），包括根据[1]至[8]中任一项所述的抑制剂。
[11]一种用于抑制细胞的脂肪酸和/或胆固醇摄取的方法，包括在体外将一氧化碳（CO）与细胞接触。
如实施例中所示出的，CO抑制细胞内脂肪酸和胆固醇的摄取。因此，当CO被给药到活体，或能体内产生和释放CO的化合物例如具有亚甲二氧基苯基（MDP）基团的亚甲二氧基苯衍生化合物被给药到活体时，体内细胞中脂肪酸和胆固醇的摄取被抑制，且因此其可用于治疗和预防疾病比如与细胞内脂肪酸和胆固醇的积聚相关的代谢综合征。
本发明说明书包括日本专利申请第2011-127407号和第2011-263015号的说明书和/或附图中所描述的内容，其是本申请的优先权的基础。
附图简述
图1是示出CO抑制细胞内硬脂酸摄取的图像。
图2是示出CO抑制细胞内LDL摄取的图像。
图3是示出PGRMC1蛋白质的吸收光谱的图。
图4是示出抑制细胞内硬脂酸和棕榈酸摄取的图像，其中PGRMC1基因被靶向PGRMC1的siRNA敲低（knock down）。
图5是示出用于产生PGRMC1敲低的载体的构建体的图。
图6是示出PGRMC1敲低小鼠中PGRMC1基因表达的存在或不存在的图。
图7是示出当PGRMC1敲低小鼠被用高脂肪膳食喂养时体重增加的图。
图8是示出当PGRMC1敲低小鼠被用高脂肪膳食喂养时脂肪积聚的图像。
图9是示出当PGRMC1敲低小鼠被用高脂肪膳食喂养时的脂肪体积比的图。
实施方案的描述
下文中，详细描述本发明。
本发明是用于活细胞内脂肪酸或胆固醇摄取的抑制剂，含有作为活性成分的一氧化碳（CO）或能体内产生CO的化合物，且活细胞内脂肪酸和/或胆固醇的摄取通过导致CO作用于细胞来抑制。
其摄取通过根据本发明的用于脂肪酸或胆固醇摄取的抑制剂来抑制的脂肪酸不受限制但为包括硬脂酸、棕榈酸等等的自由脂肪酸。此外，本发明中的胆固醇包括脂蛋白中包含的胆固醇比如低密度脂蛋白(LDL)胆固醇，而且还包括当胆固醇被氧化时所产生的氧化的胆固醇。优选地，本发明中，其进入细胞的摄取被抑制的胆固醇是可能导致代谢综合征、代谢综合征相关的疾病、具有由代谢综合征增加的发展风险的心脏病或脑血管疾病、肥胖、脂肪肝比如酒精性脂肪肝及非酒精性脂肪性肝炎等等的那些胆固醇。
此外，能体内释放CO的化合物可以被给药到活体。当这种化合物被给药到活体中时，该化合物通过体内酶的作用来代谢并释放CO且活体的细胞内脂肪酸或胆固醇的摄取通过所释放的CO的作用来抑制。而且，脂肪酸和胆固醇的摄取可以被同时抑制。
能体内释放CO的化合物的实例包括由以下式I所代表的具有亚甲二氧基苯基（MDP）基团的亚甲二氧基苯衍生化合物。
[式2]
Figure BDA0000463006650000051
亚甲二氧基苯衍生化合物的例子包括由式II所代表的化合物。
[式3]
Figure BDA0000463006650000052
其中R1代表苯环上的取代基，且n代表取代基的数目且为0、1、2、3或4，优选0或1。
此外，亚甲二氧基苯衍生化合物的例子包括由式III所代表的化合物。
[式4]
Figure BDA0000463006650000061
这些化合物中的大多数被含在植物油中且可以从植物中提取并提纯。可替代地，这些化合物可以被化学合成。
例子包括其中R2是CH3O-且R3是H2C=CH-CH2-的化合物（肉豆蔻（肉豆蔻（Myristica fragrans））来源的肉豆蔻醚）、其中R2是H且R3是H2C=CH-CH2-的化合物（黄樟（黄樟（Sassafras albidum)）来源的黄樟素）、其中R2是H且R3是CH3-HC=CH-的化合物（黄樟来源的异黄樟素），且另外的例子包括由下面式IV所代表的桦木(Betiia verrucosa)来源的醉人素及由下面式V所代表的胡椒（黑胡椒（Piper nigrum））来源的胡椒碱。
[式5]
Figure BDA0000463006650000062
Figure BDA0000463006650000063
这些化合物通过属于细胞色素P450家族的酶，羟化酶来体内氧化，如下式中所示的，从而产出CO。属于细胞色素P450家族的酶大量存在于肝脏中且CO也主要在肝脏中产生。
[式6]
Figure BDA0000463006650000064
此外，金属羰基化合物也可以用作体内释放CO气体的化合物。金属羰基化合物的例子包括含有金属和作为配体的羰基的金属羰基络合物。金属的例子包括钌（Ru）、铁（Fe）、锰（Mn）、钴（Co）、镍（Ni）、钼（Mo）及铑（Rh），这些例子中钌和铁是优选的。
上面金属羰基络合物的例子包括由式[M(CO)aXb]d所代表的化合物。式中，M是上面的金属，X是原子或通过离子键、共价键或配位键结合到M的基团，且a、b和c各自是至少1其中当b>1时每个X可以相同或不同。X的例子包括卤素、具有给出孤对电子以形成与M的配位键的N、P、O或S原子的基团、或共轭的碳基团。由上式所代表的化合物的例子包括那些由[Ru(CO)3Cl2]2所代表的化合物。
此外，二氯甲烷（CH2Cl2）也在体内通过细胞色素P450的作用释放CO。
当给药到活体内的CO或从给药到活体内的化合物所释放的CO在体内与细胞接触时，发现细胞内脂肪酸或胆固醇的摄取被抑制。
而且，PGRMC1（孕酮受体膜相关组分1，Progesterone ReceptorMembrane associated Component1）被鉴定为与CO抑制脂肪酸或胆固醇摄取相关的分子中的一个。PGRMC1是结合血红素的蛋白质，且由于结合到PGRMC1的血红素的CO，吸收峰被认为在419nm出现（图3）。上面表明了当CO结合到PGRMC1的血红素时PGRMC1的功能被抑制且进入细胞的脂肪酸和胆固醇摄取被抑制。因此，当PGRMC1基因在细胞内被敲低时，脂肪酸的摄取被抑制（图4）。
而且，在用高脂肪膳食喂养PGRMC1敲低小鼠的情况下，发现与对照组相比体重增加被显著地抑制（图7）且身体脂肪（皮下脂肪和内脏脂肪）的积聚被抑制（图8和图9）。
被根据本发明的含有CO或能体内释放CO的化合物的用于活体的细胞内脂肪酸或胆固醇摄取的抑制剂作为目标的活体不受限制，且可以储存脂肪作为能量的任何动物比如哺乳动物类、鸟类或鱼类的活体是所述目标。其中，哺乳动物类是优选的且例子包括人、牛、马、猪、绵羊、山羊、猫、狗、兔、大鼠及小鼠，人和伴侣动物比如狗和猫是优选的。而且将被作为目标的细胞不受限制且活体中的任何细胞是所述目标。其中，脂肪组织中的脂肪细胞和肝脏细胞是特别优选的。
当脂肪酸被带入脂肪组织的细胞时，脂肪酸结合到甘油以形成脂肪。脂肪的形成可以是代谢综合征、肥胖等等的原因。
因此，当活体的细胞内脂肪酸和胆固醇的摄取被CO抑制时，可以预防或治疗代谢综合征和肥胖。用于本文的代谢综合征指由生活方式导致的病症比如高血脂或肥胖，且在日本卫生、劳动和福利的部门定义其为其中具有腰部尺寸等于或大于代表腹腔内的内脏脂肪积聚的预定的尺寸的受试者还具有脂质代谢异常、高血压及高血糖中的两种或更多种的情况。
另外，根据本发明的用于脂肪酸或胆固醇摄取的抑制剂表现出对选自由代谢综合征、代谢综合征相关的疾病、具有由代谢综合征增加的发展风险的心脏病或脑血管疾病、肥胖、脂肪肝比如酒精性脂肪肝及非酒精性脂肪性肝炎组成的组的病症或代谢疾病的改善、预防或治疗效果。具有由代谢综合征增加的发展风险的疾病指由代谢综合征导致的疾病或病症，且例子包括高血压、糖尿病、高血脂、肥胖及糖尿病并发症（糖尿病肾病、糖尿病视网膜病等等）。
本发明包括含有抑制剂的药物组合物，所述抑制剂为含有作为活性成分的CO或能体内释放CO的化合物的用于脂肪酸或胆固醇摄取的抑制剂，且所述药物组合物用于改善、预防或治疗选自由代谢综合征、代谢综合征相关的疾病、具有由代谢综合征的增加的发展风险的心脏病或脑血管疾病、肥胖、脂肪肝比如酒精性脂肪肝及非酒精性脂肪性肝炎组成的组的病症或代谢疾病。此外，根据本发明的用于脂肪酸或胆固醇摄取的抑制剂也可以用作例如身体脂肪积聚抑制物。
当CO是活性成分时本发明的药物组合物是例如含有CO气体的溶液。在这种情况下，例如，其中CO气体被溶解的溶液可以通过静脉注射、静脉滴注等等来给药。对于其中CO气体被溶解的溶液，可使用滴注输液比如0.9%生理盐水、5%葡萄糖溶液或林格氏溶液。其中CO气体被溶解的溶液通过在施加的压力下在水溶液中溶解CO气体来产生。CO在25℃可以以每升水溶液约21.4mL的量溶解。根据本发明的呈水溶液形式的用于脂肪酸或胆固醇摄取的抑制剂，每升水溶液含有5mL或更多CO、优选地10mL或更多CO、还优选地15mL或更多CO、特别优选地20mL或更多CO。其中CO气体被溶解的溶液通过静脉注射、静脉滴注等等来给药到受试者。
当活性成分是能体内释放CO的化合物时，它的形式不受限制且可以是以固体（片剂、粉末、颗粒等等）或液体（乳剂、溶液、分散液等等）的形式。更具体地，药物组合物可以被制成混悬剂、乳剂、片剂、药丸、胶囊、咀嚼片、气雾剂、肠溶片、缓释制剂、植入制剂等等。
药物组合物可以经由不同的包括肠胃外的给药途径比如肌肉给药、皮内给药或静脉给药、经肺、经鼻、口服及局部植入途径来给药。
药物组合物可以包括载体、稀释剂及赋形剂，其通常用在药物制剂的领域。例如，对于片剂，乳糖等等被用作载体或赋形剂。对于用于注射的含水液体，使用生理盐水、葡萄糖、含有其他佐剂的等渗溶液等等，其可以与合适的增溶佐剂比如醇、多元醇比如丙二醇、非离子型表面活性剂等等组合使用。对于油溶液，使用大豆油等等，其可以与作为增溶佐剂的苯甲酸苄酯、苯甲醇等等组合使用。
在上面的药物组合物中，作为活性成分的能体内释放CO的化合物可以以按重量计0.001%至10%、优选地按重量计0.01%至5%、还优选地按重量计0.05%至5%的量被含有。
本发明的药物组合物的剂量根据症状、年龄、体重等等而变化，但在口服给药中通常是以每天1mg至1000mg、优选地5mg至200mg按一到几个分开的剂量给药到成年人。
CO或能释放CO的化合物可以例如局部给药到脂肪组织或肝脏。
而且，当CO或能体内释放CO的化合物在体外与细胞接触时，细胞对脂肪酸和/或胆固醇的摄取可以被抑制。本发明包括用于抑制细胞对脂肪酸和/或胆固醇的摄取的方法，包括将CO或能体内释放CO的化合物在体外与细胞接触。将被使用的细胞的例子包括从活体收集的脂肪组织内的脂肪细胞及肝脏细胞。为了接触，例如，CO或能体内释放CO的化合物可以被添加到其中细胞被培养的培养基。导致接触的CO或能体内释放CO的化合物的量不受限制，但例如，能体内释放CO的化合物可以以按重量计0.001%至10%、优选地按重量计0.01%至5%、还优选地按重量计0.05%至5%的量被添加到含有细胞的培养基。用于体外抑制细胞对脂肪酸和/或胆固醇的摄取的方法可用于，例如对于细胞内脂肪酸和/或胆固醇的摄取的机理方面的研究。
此外，CO或能体内释放CO的化合物还可以被用作试剂比如实验室试剂，且本发明包括含有CO或能体内释放CO的化合物的试剂。
而且，能体内释放CO的化合物当被混入饮料或食品内时还可以被用作饮料或食物组合物。食品和饮料包括健康食品、用于特定的健康用途的食物、具有营养素功能要求的食物、营养补充剂、补充剂等等。本文所用的用于特定的健康用途的食物指为了饮食中特定的健康保养的目的被摄食且被标记为声称通过它的摄食实现预期的健康保养的食品。这些饮料产品可以带有声称其用于改善代谢综合征的用途的标记等等。
食品和饮料不受限制且例子包括乳制品、糖果类（confectioneries）（饼干类、糖类（candies）、果冻类、冰淇淋类等等）、汤类、果汁类、面包类、加工过的肉类食品（火腿、香肠等等）、面条类、加工过的海鲜产品及调料类（调味品等等）。
任何形式可以用于牲畜饲料。
本发明参考下面的实施例具体地描述，但不限于此。
实施例1CO对细胞内硬脂酸摄取的抑制
将人类肝癌细胞系HuH7细胞接种在用载玻片(1cm2；matsunami glass)覆盖的六孔板（Iwaki）中且在CO2培养箱中用DMEM+10%FCS培养过夜。培养后，丢弃培养基，向其加入其中将硬脂酸（sigma）溶解在无血清DMEM中以给出400μM的最终浓度的1%BSA（Wako Pure Chemical Industries，Ltd.），且将细胞在CO2培养箱中再培养12小时。此外，将作为CO持续释放的药物的1μM的CO-Ru（使用Sigma CORM2([Ru(CO)3Cl2]2)）或作为对照的1μM的钌络合物与脂肪酸一起加入以进行培养。随后，将培养基丢弃，将细胞用PBS清洗3次，且在载玻片上将溶解在PBS中的尼罗红试剂（sigma）以100ng/ml加入以反应5分钟，从而将脂肪酸染色。此外，将细胞用PBS清洗3次，加入DAPI试剂（2ng/ml，Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.）以反应5分钟，从而将细胞核染色。用荧光显微镜来观察细胞核，藉以检测尼罗红衍生的绿荧光作为脂肪酸和DAPI衍生的蓝荧光。结果在图1中示出。图中，仅被添加硬脂酸的细胞被示为SA400，被添加钌络合物的细胞被示为Ru，且被添加CO-Ru的细胞被示为CO-Ru1μM。图中，蓝色区域示出用DAPI试剂染色的细胞核且绿色区域示出被带进细胞的硬脂酸的存在。仅被添加硬脂酸的细胞（SA400）及被添加钌络合物的细胞（Ru）中，蓝色染色的区域的边缘被染成绿色且这种结果表明硬脂酸被带入细胞内。另一方面，被添加CO-Ru的细胞内，蓝色染色的区域的边缘未被染成绿色。这种结果表明，被添加CO-Ru的细胞内硬脂酸的摄取被抑制。
实施例2CO对细胞内LDL摄取的抑制
在用载玻片覆盖的皿中以如上面的相同的方式培养HuH7细胞后，将培养基丢弃，并将荧光标记的FITC共轭的LDL(Molecular Probes)加到无血清DMEM以便给出8mg/ml的最终浓度以进行培养2小时（对照）。另外，与这个步骤同时，以如上面的相同的方式加入1μM的CO-Ru以进行分析。培养后，将培养基丢弃，将细胞用PBS清洗3次且加入DAPI试剂（2ng/ml，Wako Pure Chemical Industries，Ltd.）以反应5分钟。通过使用荧光显微镜来进行观察，藉以检测FITC-LDL衍生的绿荧光作为脂肪酸和DAPI衍生的蓝荧光。结果在图2中示出。上图显示对照且下图显示被添加CO-Ru的细胞。对照中，蓝色染色的区域的边缘被染成绿色且这种结果表明LDL被带入细胞内。另一方面，在被添加CO-Ru的细胞内，蓝色染色的区域的边缘未被染成绿色。这种结果表明，在被添加CO-Ru的细胞内，LDL的摄取被抑制。
实施例3其中PGRMC1基因被靶向PGRMC1的siRNA敲低的细胞内硬脂酸和棕榈酸摄取的抑制
在实施例1的实验中，将靶向PGRMC1的siRNA（序列：GAUGUGACCAAAGGCCCGCAAAUUCU)(SEQ ID NO:1)）通过脂质转染方法(Lipofectamin2000,INVITROGEN Corporation)转染到从人类肝细胞癌衍生的细胞系HuH7细胞以敲低PGRMC1基因。以如实施例1中相同的方式，将其中硬脂酸（sigma）或棕榈酸被溶解以给出400μM的最终浓度的1%BSA（Wako Pure Chemical Industries，Ltd.）加入到其中PGRMC1基因被敲低的HuH7细胞，并培养细胞。将培养基丢弃，将细胞用PBS清洗3次，且在载玻片上将溶解在PBS中的尼罗红试剂（sigma）以100ng/ml加入以反应5分钟，从而将脂肪酸染色。此外，将细胞用PBS清洗3次，加入DAPI试剂（2ng/ml，Wako Pure Chemical Industries,Ltd.）以反应5分钟，从而将细胞核染色。用荧光显微镜来观察细胞核，藉以检测尼罗红衍生的绿荧光作为脂肪酸和DAPI衍生的蓝荧光。结果在图4中示出。图中，蓝色区域示出用DAPI试剂染色的细胞核且绿色区域示出被带进细胞的硬脂酸或棕榈酸的存在。当棕榈酸（图4A）或硬脂酸（图4B）被加到其中PGRMC1基因未被敲低的细胞时，蓝色染色的区域的边缘被染成绿色且这种结果表明硬脂酸或棕榈酸被带入细胞内。另一方面，当棕榈酸（图4C）或硬脂酸（图4D）被加到其中PGRMC1基因被敲低的细胞时，蓝色染色的区域的边缘未被染成绿色。这种结果表明，在PGRMC1敲低细胞内，硬脂酸和棕榈酸的摄取被抑制。
实施例4利用PGRMC1敲低小鼠（PGRMC1KD小鼠）的对由高脂肪膳食给药导致的脂肪积聚的影响
（1）PGRMC1敲低小鼠的产生
产生具有强力霉素依赖性的PGRMC1基因敲低的小鼠。所使用的小鼠品系是C57/BL6，且图5中示出的构建体通过用于产生的已知的方法来引入小鼠。这种小鼠中，被tetR调节的H1启动子被***在shRNA基因的上游，其中shRNA在缺少强力霉素给药时不表达，但在强力霉素被给药到小鼠时shRNA表达，藉以在小鼠中PGRMC1表达被抑制。因此，其中强力霉素诱发的PGRMC1表达被抑制的小鼠被表述为PGRMC1敲低小鼠。
（2）PGRMC1敲低小鼠中PGRMC1表达
将含有2g/L强力霉素（DOX）的水作为饮用水给予野生型小鼠和PGRMC1敲低小鼠（雄性，8周龄）后，肝脏中PGRMC1表达通过使用抗-PGRMC1抗体的蛋白质印迹法来检查。如图6中所示的，当将强力霉素给予PGRMC1敲低小鼠时，证实PGRMC1表达被抑制。
（3）PGRMC1敲低小鼠的体重增加
将有强力霉素或没有强力霉素的饮用水给予PGRMC1敲低小鼠和野生型小鼠，给予高脂肪膳食（脂肪：40%，蔗糖：40%，Research Diets,Inc.D12327），且在3.5个月（14周）的周期内测量体重。
结果在图7中示出。图中的Wt（-）和Wt（+）分别示出当没给予强力霉素或给予强力霉素时野生型小鼠的体重方面的变化。而且，PGRMC1(-)和PGRMC1（+）分别示出当没给予强力霉素或给予强力霉素时PGRMC1敲低小鼠的体重方面的变化。如图7中所示的，当与对照组比较时给予了强力霉素的PGRMC1敲低小鼠具有显著抑制的体重增加。
（4）PGRMC1敲低小鼠中的脂肪积聚
将用在上面（3）中的Wt（+）和PGRMC1（+）小鼠在第14周时通过CT扫描对内脏脂肪和皮下脂肪的积聚进行分析。结果在图9中示出。图8A示出野生型小鼠的CT扫描图像且图8B示出PGRMC1敲低小鼠的CT扫描图像。图8A和图8B的左边图像示出横截面视图，图8A和图8B的中间图像示出通过处理CT扫描数据获得的小鼠的脂肪积聚的侧视图，且图8A和图8B的右边图像示出通过处理CT扫描数据获得的小鼠的脂肪积聚的顶视图。沿中间图像和右边图像中的线Z至Z的横截面图是左边图像的横截面图。CT扫描分析的结果中，内脏脂肪区域用黄色示出且皮下脂肪区域用橙色示出。图中，左边图像中，在小鼠身体的中心部分内发现的白色区域示出内脏脂肪。附近的灰色区域示出皮下脂肪。在中间和右侧图像中，X至X和Y至Y之间的范围内白色区域示出内脏脂肪且附近的灰色区域示出皮下脂肪。如图中所示的，其中PGRMC1基因表达被抑制的PGRMC1敲低小鼠中的脂肪积聚被抑制。此外，图9示出在第14周积聚在野生型小鼠和PGRMC1敲低小鼠中的脂肪的体积比（脂肪体积对身体体积的百分数）。身体脂肪是皮下脂肪和内脏脂肪的总和。如图9中所示的，与野生型小鼠比较PGRMC1敲低小鼠具有减少的脂肪体积比。
从上面的结果，表明PGRMC1可能调整活体中的脂肪代谢。
工业实用性
根据本发明的包含CO或能体内释放CO的化合物的细胞对脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂可以用作药用产品或食品。
本文所引用的所有出版物、专利和专利申请本身将通过引用被并入本说明书中。
Figure IDA0000463006780000011

Claims (11)

1.一种用于活细胞的脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂，所述抑制剂包括一氧化碳（CO）。
2.一种用于活细胞的脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂，所述抑制剂包括能体内释放一氧化碳（CO）的化合物。
3.根据权利要求2所述的用于脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂，其中能体内释放一氧化碳（CO）的所述化合物是具有亚甲二氧基苯基（MDP）基团的亚甲二氧基苯衍生化合物或金属羰基络合物。
4.根据权利要求3所述的用于脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂，其中能体内释放一氧化碳（CO）的所述化合物是由下式代表的亚甲二氧基苯衍生化合物：
[式1]
Figure FDA0000463006640000011
其中R1代表苯环上的取代基，且n代表取代基的数目且为0、1、2、3或4。
5.根据权利要求3所述的用于脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂，其中能体内释放一氧化碳（CO）的所述化合物选自由肉豆蔻醚、黄樟素、异黄樟素、醉人素及胡椒碱组成的组。
6.根据权利要求3所述的用于脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂，其中能体内释放一氧化碳（CO）的所述金属羰基络合物是钌羰基络合物或铁羰基络合物。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的用于脂肪酸和/或胆固醇的抑制剂，其中CO经由PGRMC1抑制活细胞的脂肪酸和/或胆固醇摄取。
8.根据权利要求7所述的用于脂肪酸和/或胆固醇摄取的抑制剂，其中CO通过结合到PGRMC1的血红素抑制PGRMC1的功能，从而抑制进入细胞的脂肪酸和胆固醇摄取。
9.一种改善、治疗或预防剂，包括根据权利要求1至8中任一项所述的抑制剂，用于选自由代谢综合征、代谢综合征相关的疾病、具有由代谢综合征增加的发展风险的心脏病或脑血管疾病、肥胖、脂肪肝及非酒精性脂肪性肝炎组成的组的病症或疾病。
10.一种身体脂肪积聚抑制物，所述身体脂肪积聚抑制物包括根据权利要求1至8中任一项所述的抑制剂。
11.一种用于抑制细胞的脂肪酸和/或胆固醇摄取的方法，所述方法包括在体外将一氧化碳（CO）与所述细胞接触。
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