CN103655791B - 一种痰瘀同治的荷丹制剂及其应用 - Google Patents

一种痰瘀同治的荷丹制剂及其应用 Download PDF

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Abstract

一种痰瘀同治的荷丹制剂，该药物组合物由包括以下重量配比的中药提取物制备而成：荷叶提取物40‑80份、丹参提取物10‑20份、山楂提取物30‑60份、补骨脂提取物或盐补骨脂提取物10‑20份、番泻叶提取物1‑3份。本发明还公开了一种荷丹制剂在制备同时治疗痰浊、瘀血的药物中的应用，本发明的荷丹制剂具有降低血脂水平的活性，可用于痰瘀同治，降低血脂水平。

Description

一种痰瘀同治的荷丹制剂及其应用
技术领域
本发明涉及中药制剂在同时治疗痰浊、瘀血中的应用，特别涉及一种痰瘀同治的荷丹制剂及其在制备痰瘀同治的药物中的应用。
背景技术
传统中医认为，痰浊、瘀血是机体水谷精微代谢失常的病理产物。脾的运化功能失常则痰浊内生，水气内停，凝集成痰，经脉痹阻，是故气滞湿阻、痰凝血瘀互见而发病。近年来在胸痹、中风、消渴等病的临床实践中，对痰瘀同病有了进一步的认识和重视，常以“痰瘀阻络”、“痰瘀交结”、“痰瘀凝结”、“痰瘀壅滞”等为辨证，采用祛痰化瘀方药治疗而获良效。
“高脂血症与痰浊淤血相关性理论基础与研究依据”（《时珍国医国药》，2006年第4卷第8期）中探讨了高脂血症与痰浊淤血的相关性，明确痰淤在高脂血症防治中重要位置及治疗原则，即驱除血中之浊气、浊脂，使血液畅通，痰淤得化，浊脂得除，以达到治疗高脂血症的目的。
“高脂血症痰瘀辨证的血脂和血流动力学检测分析”（《湖南中医学院学报》，2001年第3期）中证明“痰凝”症征积分与高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)呈高度相关，而"血瘀”症征积分与总胆固醇(TC)及每搏输出量(SV)、射血分数(EF)、总外周阻力(RT)、血管弹性(C)均高度相关，表明血脂升高是高脂血症“痰浊内阻”病理的物质基础。
由此可见，痰浊、瘀血是血脂代谢紊乱的主要确切病理因素，血中TC、TG升高，HDL-C下降是高脂血症的主要特征和生化基础，内皮细胞的损伤是其主要的病理特征，现有技术中也公开了多种具有同时治疗痰浊、血淤的中药组合物。
“痰瘀同治之通脉化浊汤对动脉粥样硬化大鼠血脂的影响”（《实用中医内科杂志》，2011年第8期）报道了一种通脉化浊汤，与模型组相比通脉化浊汤组的TC、LDL水平均明显降低，HDL-C水平提高，可用于痰瘀同治，降低动脉粥样硬化大鼠的血脂。
专利CN1931261B中公开了一种降压降脂胶囊，由决明子、山楂、荷叶三味原料药制备而成，其将“痰瘀阻络，毒损心络”作为治疗高血压、高血脂病的一个重要切入点，具有清热活血、降浊通便之功效。
专利CN02139069.X中公开了一种以荷叶为主药，行气祛湿、配合山楂理气消食、番泻叶润肠通便而化痰降浊，以盐补骨脂温补肝肾、丹参活血化瘀，临床治疗血脂异常的荷丹片。但因其研究开发时间较早，受当时研究水平所限，其中药材多为仅进行粗提的粗制品，存在有效成分含量低、服用量大、吸收不完全、生物利用度低、药效发挥较慢、携带不方便等不足。
发明内容
本发明的目的在于提供一种痰瘀同治的荷丹制剂及其在制备同时治疗痰浊、瘀血的药物中的应用，以解决现有制剂中有效成分含量低的问题。
其中，所述的药物组合物为荷丹制剂，由以下重量配比的中药提取物制成：荷叶提取物40-80份、丹参提取物10-20份、山楂提取物30-60份、补骨脂提取物10-20份、番泻叶提取物1-3份。
优选的，该药物组合物由以下重量配比的中药提取物制成：荷叶提取物50-70份、丹参提取物12-18份、山楂提取物40-50份、补骨脂提取物12-18份、番泻叶提取物1-3份。
在本发明的一个实施方式中，以上提取物中，荷叶提取物中荷叶黄酮含量为50-80wt.%，荷叶生物碱含量为5-15wt.%；丹参提取物中丹参素含量为3～10wt.%，丹参总酚酸含量为50～75wt.%，丹酚酸B含量为20～45wt.%；山楂提取物的山楂总黄酮含量为50～70wt.%；补骨脂提取物中补骨脂素与异补骨脂素含量之和为50-60wt.%、番泻叶提取物中番泻苷A与番泻苷B之和为15-35wt.%。
优选的，以上提取物中，其中荷叶提取物中荷叶黄酮含量为60-70wt.%，荷叶生物碱含量为8-12wt.%；丹参提取物中丹参素含量为5～8wt.%，丹参总酚酸含量为60～70wt.%，丹酚酸B含量为30～40wt.%；山楂提取物的山楂总黄酮含量为60～65wt.%；补骨脂提取物中补骨脂素与异补骨脂素含量之和为52-56wt.%、番泻叶提取物中番泻苷A与番泻苷B之和为20-30wt.%。
以上组成是按重量份作为配比的，在生产时可按照相应比例增大或减少，如大规模生产可以以公斤为单位，或以吨为单位，小规模生产也可以以毫克为单位，重量可以增大或者减小，但各组成之间的生药材重量配比的比例不变。
本发明中所述补骨脂提取物可以由补骨脂提取制备而成，也可以由炮制后的补骨脂提取制备而成，优选的炮制补骨脂可以为盐补骨脂，经补骨脂用盐水拌匀，微润，置锅内用文火炒至微鼓起而制得的。
本发明中所述的药物可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括：片剂、胶囊剂、口服液、***剂、颗粒剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂、滴丸剂。本发明的制剂，优选的是口服剂型，如：胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂等。
本发明所述的药物，其口服给药的制剂可含有常用的赋形剂，诸如粘合剂、填充剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂和湿润剂，必要时可对片剂进行包衣。
本发明所述组合物优选的是将中药原料药荷叶、丹参、山楂、补骨脂或盐补骨脂、番泻叶分别提取得到提取物，将五种提取物混合作为药物活性成分，制备成适合服用的药物制剂。
其中所述分别提取，方法如下：
荷叶提取物制备方法包括如下步骤：
(1)荷叶粉碎，加入碱性有机溶剂，回流提取，收集提取液备用；
(2)将(1)中所得荷叶药材残渣，加入酸性有机溶剂，回流提取，收集提取液备用；
(3)将(1)中提取液经离心、过滤后的上清液，减压蒸馏回收溶剂后，再经离心、过滤，取上清液经大孔树脂吸附后冲洗除去杂质，洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到浓缩液备用；
(4)将(2)中提取液经离心、过滤后的上清液，减压蒸馏回收溶剂后，加入酸性有机溶剂复溶，脱色，离心、过滤；取上清液，调节pH≥12.0，经大孔树脂吸附后，冲洗除去杂质，洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到浓缩液备用；
(5)合并(3)、(4)中制得浓缩液，经干燥制得荷叶提取物；
所述丹参提取物制备方法包括如下步骤：
丹参粉碎，加入有机溶剂加热回流提取，提取液，调节pH为1.5～4.2放冷，离心或过滤，取澄清液或滤液经大孔树脂柱吸附，先用水冲洗，水洗液弃去，再用有机溶剂洗脱，洗脱液减压浓缩，干燥，即得丹参提取物；
所述山楂提取物制备方法包括如下步骤：
山楂粉碎，加水温浸，加热回流提取或超声提，提取液浓缩，离心或过滤，取澄清液或滤液经大孔树脂柱吸附，先用水冲洗，再用有机溶剂洗脱，洗脱液浓缩，干燥，得山楂提取物；
温浸是指药品在60-75℃的水中，恒温浸渍8-16h。
所述补骨脂提取物或盐补骨脂提取物制备方法包括如下步骤：
补骨脂或盐补骨脂粉碎，加入有机溶剂提取，提取液浓缩，冷置，过滤，收集沉淀用有机溶剂溶解，过滤，滤液浓缩，干燥，即得补骨脂提取物或盐补骨脂提取物；
所述番泻叶提取物制备方法包括如下步骤：
番泻叶粉碎，用有机溶剂提取（温度为60-90℃），提取液过滤，在80℃下回收溶剂，过滤后浓缩，于40-60℃下干燥得番泻叶提取物。
优选的，所述分别提取，包括如下步骤：
荷叶提取物制备方法包括如下步骤：
(1)荷叶粉碎后加荷叶重量3-5倍、质量分数为40%-70%的乙醇，调pH为9.0-14.0，在65℃-85℃下回流提取1-3次，每次提取1-3小时，收集提取液备用；
(2)将(1)中所得荷叶药材残渣，加入残渣重量3-5倍、质量分数为60%-95%的乙醇，调pH为1.0-6.0，在65℃-85℃下回流提取2-4次，每次提取1-3小时，收集提取液备用；
(3)将(1)中提取液经离心、过滤后的上清液，减压蒸馏回收乙醇后，调节pH为6.5-7.0，再经离心、过滤，取上清液配制成1mg/mL-5mg/mL溶液，经大孔树脂吸附后用纯水、质量分数为10%-30%的乙醇分别冲洗除去杂质，质量分数为50-90%的有机溶液洗脱，收集洗脱液，在真空度为0.06Mpa-0.09Mpa、温度为65℃-85℃下蒸发浓缩，得到浓缩液备用；
(4)将(2)中提取液经离心、过滤后的上清液，减压蒸馏回收乙醇后，加入酸性有机溶剂复溶，脱色，调节pH为7.0后离心、过滤除去鞣质；取上清液，调节pH≥12.0，并配制成0.1mg/mL-2mg/mL溶液，经大孔树脂吸附后，用纯水、质量分数为10%-30%的乙醇分别冲洗除去杂质，质量分数为50%-90%的有机溶液洗脱，收集洗脱液，在真空度为0.06Mpa-0.09Mpa、温度为65℃-85℃下蒸发浓缩，得到浓缩液备用；
(5)合并(3)、(4)中制得浓缩液，经真空干燥制得荷叶提取物；
所述丹参提取物制备方法包括如下步骤：
丹参粉碎，加丹参重量2-6倍、质量分数为40%～70%的乙醇，加热回流提取2～4次，每次0.5～2小时；合并提取液，用酸调节pH为1.5～4.2放冷，离心或过滤，取澄清液或滤液上树脂体积为丹参体积2～4倍的大孔树脂柱，先用水冲洗，水洗液弃去，再用树脂体积为生药体积2～4倍的大孔树脂柱、质量分数为85～95%的乙醇洗脱，收集洗脱液；洗脱液减压浓缩，干燥，即得丹参提取物；
所述山楂提取物制备方法包括如下步骤：
山楂粉碎，加山楂重量2-6倍的水温浸1-3h，加热回流提取或超声提取2～4次，提取液减压浓缩，离心或过滤，取澄清液或滤液上大孔树脂柱，先用水冲洗，再用质量分数为50%～70%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；洗脱液减压浓缩，干燥，得山楂提取物；
所述补骨脂提取物或盐补骨脂提取物制备方法包括如下步骤：
补骨脂或盐补骨脂粉碎，加补骨脂或盐补骨脂重量2-4倍、质量分数为50-80%的乙醇提取1～3次，提取液浓缩，冷置，过滤，收集沉淀用质量分数为80-95%的乙醇溶解，过滤，滤液浓缩，干燥，即得补骨脂提取物或盐补骨脂提取物；
所述番泻叶提取物制备方法包括如下步骤：
番泻叶粉碎，加番泻叶重量1-3倍、质量分数为30%-80%的乙醇提取（温度为60-90℃）1～3次，提取液过滤，在80℃下回收乙醇，过滤后浓缩，于40-60℃下干燥得番泻叶提取物。
将上述制得的提取物按规定比例混合，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分，制备成片剂、胶囊、滴丸、颗粒、溶液、注射剂及其他药学上可接受的剂型。
根据本发明，荷叶提取物中荷叶黄酮含量为50%-80%，荷叶生物碱含量为5%-15%；丹参提取物中丹参素含量为3%～10%，丹参总酚酸含量为50%～75%，丹酚酸B含量为20%～45%；山楂提取物的山楂总黄酮含量为50%～70%；补骨脂提取物或盐补骨脂中补骨脂素与异补骨脂素含量之和为50%-60%、番泻叶提取物中番泻苷A与番泻苷B之和为15%-35%。
以下通过实验数据进一步说明本发明的有益效果。
药效研究：
本实验旨在观察本发明所述药物与荷丹片对Triton WR-1339诱导的高脂血症小鼠模型和高脂饲料引起高脂血症大鼠模型的作用，阐明痰瘀同治的治疗机理。
1.材料与方法
1.1药品与试剂
Triton WR-1339（Sigma，美国）；精制荷丹片（本发明实施例1方法制备的何丹片称为精制荷丹片）、荷丹片（现有技术制备的何丹片，购买自南昌济顺制药有限公司）；TG、TC测试盒（南京建成生物工程研究所，南京）；HDL-C、LDL-C测定试剂盒（荣盛生物，上海）；其他试剂均为分析纯。
1.2实验动物
美国癌症研究所（Institute of Cancer Research，ICR）小鼠，20±2g；斯泼累格·多雷（Sprague Dawley，SD）大鼠，200±2g，雌雄各半，均购于浙江省医学科学院实验动物中心。实验动物饲养一周以适应本实验室条件，分笼饲养，动物可以自由饮水，摄取普通饲料，控制实验室光照12h明-12h暗，室内温度为24±1℃，湿度为55±10%。
1.3方法
1.3.1药物试液的制备
取精制荷丹片，分别配成浓度为0.5，1和2mg·ml-1。荷丹片溶液浓度为1mg·ml-1，于4℃保存备用。
1.3.2动物实验
1.3.2.1急性高脂血症小鼠模型
将ICR小鼠随机分为6组：正常对照组，模型对照组，精制荷丹实验组（7.5、15和30mg·kg-13个剂量组）和荷丹对照组。除正常对照组外，其他各组分别尾静脉注射Triton WR-1339（400mg·kg-1）诱导血脂升高，正常对照组注射等体积NS。注射Triton WR-1339后12h，实验组分别用精制荷丹药液灌胃（剂量分别为7.5、15和30mg·kg-1），荷丹对照组以荷丹灌胃（15mg·kg-1）。Triton WR-1339注射后的12h、18h和24h，每组随机选取10只，去眼球采血，分离血清，-38℃保存，供血脂指标测定用。
1.3.2.2高脂血症大鼠模型
将48只SD大鼠随机分为6组：正常对照组，喂普通饲料；模型对照组，喂高脂饲料（高脂饲料组成质量分数为：猪油10%，蛋黄粉10%，胆固醇1%及基础饲料79%）；3个剂量的精制荷丹实验组和荷丹对照组也喂食高脂饲料，并分别灌胃给予精制荷丹（分别为5、10和20mg·kg-1）和荷丹（10mg·kg-1），每天一次，连续4周。同时，正常对照组和模型对照组分别灌胃给予等体积生理盐水（NS）。实验前后，分别尾静脉采血，分离血清，-38℃保存，供血脂指标测定用。
1.3.2.3血脂指标测定
按试剂盒说明书方法操作，分别测定小鼠和大鼠血清中的总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的含量，并计算HDL-C/TC和HDL-C/LDL-C的比值。
1.3.2.4统计方法
数据以平均值±标准差表示，采用统计软件（SPSS13.0for Windows）进行方差分析，两组间比较采用t检验。
2.结果
2.1精制荷丹对Triton WR-1339诱导的高脂血症小鼠血脂指标的影响
由表1和表2可以看出，与正常对照组相比，注射Triton WR-1339的小鼠的血清TG、TC和LDL-C水平分别升高了约7倍、5倍和4倍，HDL-C/TC和HDL-C/LDL-C比值分别降低了40％和10％，建立了急性高脂血症小鼠模型。而给予精制荷丹（JZHD）处理（剂量分别为7.5、15或30mg·kg-1）的小鼠明显抑制Triton WR-1339诱导的高脂血症小鼠血脂水平的升高，且与同剂量（15mg·kg-1）荷丹（HD）相比，其抑制作用更为明显（见下表，分别为18h与24h）。
表1
注：#代表与正常对照组相比，P<0.01；
*代表与小鼠模型相比，P<0.05；**代表与小鼠模型相比，P<0.01。
表2
注：#代表与正常对照组相比，P<0.01；
*代表与小鼠模型相比，P<0.05；**代表与小鼠模型相比，P<0.01。
2.2精制荷丹对高脂血症大鼠的影响
喂高脂饲料的同时给予精制荷丹（JZHD）保护的大鼠各血脂指标明显好转。由表3可知，剂量为10和20mg·kg-1·d-1的精制荷丹实验组大鼠的TG、TC和LDL-C水平分别维持在73.2、86.4、51.7mg·100ml-1和67.2、84.0、47.5mg·100ml-1，相比模型组明显下降。且与相同剂量荷丹（HD）实验组（10mg·kg-1·d-1）相比，其作用更为明显，具有显著性差异。
表3
注：#代表与正常对照组相比，P<0.01；
*代表与小鼠模型相比，P<0.05；**代表与大鼠模型相比，P<0.01。
3.讨论
实验结果表明，精制荷丹片能显著抵抗高血脂动物模型血清TG，TC和LDL-C等指标的升高，同时升高血清HDL-C/TC和HDL-C/LDL-C的比值。数据提示与荷丹片相比，精制荷丹片更具有降低血脂水平的活性，可用于痰瘀同治，降低血脂水平。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
1、(1)荷叶粉碎后加荷叶重量4倍、质量分数为60%的乙醇，调pH为12.0，在75℃下回流提取2次，每次提取2小时，收集提取液备用；
(2)将(1)中所得荷叶药材残渣，加入残渣重量4倍、质量分数为85%的乙醇，调pH为3.0，在75℃下回流提取3次，每次提取2小时，收集提取液备用；
(3)将(1)中提取液经离心、过滤后的上清液，减压蒸馏回收乙醇后，调节pH为7.0，再经离心、过滤，取上清液配制成3mg/mL溶液，泵入AB-8大孔树脂柱中吸附，上样量为4BV，以纯水、20%乙醇各2BV梯度洗脱后，用70%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，在真空度为0.06Mpa-0.09Mpa、温度为65℃-85℃下蒸发浓缩，得到浓缩液备用；
nBV是指上柱子时树脂的体积是样品体积的n倍。
(4)将(2)中提取液经离心、过滤后的上清液，减压蒸馏回收乙醇后，加入质量分数为2%的盐酸溶液，经超声溶解1h后，用正己烷分三次萃取色素，调节溶液pH为7.0，离心，过滤，调节上清液pH为13.0，泵入D101大孔树脂柱中吸附，上样量为2BV，以纯水、质量分数为30%的乙醇浓度的有机溶液各2BV梯度除杂，最后用4BV体积质量分数为50%的甲醇溶液洗脱，收集质量分数为50%的甲醇洗脱部分，在真空度为0.06Mpa-0.09Mpa、温度为65℃-85℃下蒸发浓缩，得到浓缩液备用；
(5)合并(3)、(4)中制得浓缩液，经进一步浓缩后真空干燥制得荷叶提取物；
2、取丹参，粉碎，每次加丹参重量4倍、质量分数为60%的乙醇加热回流提取3次，每次1小时；合并提取液，用酸调节pH为2.8放冷，离心，取澄清液上树脂体积为丹参体积3倍的大孔树脂柱，先用水冲洗，水洗液弃去，再用树脂体积为生药体积2.5倍的大孔树脂柱、质量分数为90%的乙醇洗脱，收集洗脱液；洗脱液减压浓缩，干燥，即得丹参提取物。
3.取粉碎的山楂，加山楂重量4倍的水温浸2h，加热回流提取3次，每次2小时，提取液减压浓缩，离心，取澄清液上大孔树脂柱，先用水冲洗，再用质量分数为60%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；洗脱液减压浓缩，干燥，得山楂提取物。
4、取盐补骨脂粉碎，加盐补骨脂重量3倍、质量分数为70%的乙醇提取2次，提取液浓缩，冷置，过滤，收集沉淀用质量分数为85%的乙醇溶解，过滤，滤液浓缩，干燥，即得盐补骨脂提取物；
5、取番泻叶粉碎，加番泻叶重量2倍、质量分数为50%的乙醇提取（温度80℃）2次，提取液过滤，在80℃下回收乙醇，过滤后浓缩，于50℃下干燥得番泻叶提取物。
6、取上述1-5步制得的荷叶提取物120g、丹参提取物30g、山楂提取物90g、盐补骨脂提取物30g、番泻叶提取物4g混合，加入低取代羟丙基纤维素等辅料适量，制成颗粒，压片，包衣，制成1000片，即得。
实施例2
将实施例1的1-5步制得的荷叶提取物320g、丹参提取物160g、山楂提取物240g、盐补骨脂提取物160g、番泻叶提取物4g混合，加入糖粉，淀粉，低取代羟丙基纤维素等辅料适量，制成颗粒剂1000g。
实施例3
将实施例1的1-5步制得的荷叶提取物160g、丹参提取物20g、山楂提取物120g、盐补骨脂提取物20g、番泻叶提取物6g混合，加入淀粉，低取代羟丙基纤维素等辅料适量，制颗粒，装入胶囊1000粒。
实施例4
取实施例1得到的荷叶提取物40g、丹参提取物10g、山楂提取物30g、盐补骨脂提取物10g、番泻叶提取物1g。混合，加入低取代羟丙基纤维素等辅料适量，制成颗粒，压片，包衣，即得。
实施例5
取实施例1得到的荷叶提取物80份、丹参提取物20份、山楂提取物60份、盐补骨脂提取物20、番泻叶提取物3份。混合，加入低取代羟丙基纤维素等辅料适量，制成颗粒，压片，包衣，即得。
实施例6
取实施例1得到的荷叶提取物50份、丹参提取物12份、山楂提取物40份、盐补骨脂提取物12、番泻叶提取物1份。混合，加入低取代羟丙基纤维素等辅料适量，制成颗粒，压片，包衣，即得。
实施例7
取实施例1得到的荷叶提取物70份、丹参提取物18份、山楂提取物50份、盐补骨脂提取物18、番泻叶提取物3份。混合，加入低取代羟丙基纤维素等辅料适量，制成颗粒，压片，包衣，即得。
实施例8
其中荷叶提取物，制备方法如下：
(1)荷叶粉碎后加荷叶重量3倍、质量分数为40%的乙醇，调pH为9.0，在65℃下回流提取1次，每次提取1小时，收集提取液备用；
(2)将(1)中所得荷叶药材残渣，加入残渣重量3倍、质量分数为60%的乙醇，调pH为1.0，在65℃下回流提取2次，每次提取1小时，收集提取液备用；
(3)将(1)中提取液经离心、过滤后的上清液，减压蒸馏回收乙醇后，调节pH为6.5，再经离心、过滤，取上清液配制成1mg/mL溶液，经大孔树脂吸附后用纯水、质量分数为10%的乙醇分别冲洗除去杂质，质量分数为50%的有机溶液洗脱，收集洗脱液，在真空度为0.06Mpa、温度为65℃下蒸发浓缩，得到浓缩液备用；
(4)将(2)中提取液经离心、过滤后的上清液，减压蒸馏回收乙醇后，加入酸性有机溶剂复溶，脱色，调节pH为7.0后离心、过滤除去鞣质；取上清液，调节pH≥12.0，并配制成0.1mg/mL溶液，经大孔树脂吸附后，用纯水、质量分数为10%的乙醇分别冲洗除去杂质，质量分数为50%的有机溶液洗脱，收集洗脱液，在真空度为0.06Mpa、温度为65℃下蒸发浓缩，得到浓缩液备用；
(5)合并(3)、(4)中制得浓缩液，经真空干燥制得荷叶提取物；
其中所述丹参提取物，制备方法如下：
丹参粉碎，加丹参重量2倍、质量分数为40%的乙醇，加热回流提取2次，每次0.5小时；合并提取液，用酸调节pH为1.5放冷，离心或过滤，取澄清液或滤液上树脂体积为生药体积2倍的大孔树脂柱，先用水冲洗，水洗液弃去，再用树脂体积为生药体积2倍的大孔树脂柱、质量分数为85%的乙醇洗脱，收集洗脱液；洗脱液减压浓缩，干燥，即得丹参提取物；
其中所述山楂提取物，制备方法如下：
山楂粉碎，加山楂重量2倍的水温浸1h，加热回流提取或超声提取2次，提取液减压浓缩，离心或过滤，取澄清液或滤液上大孔树脂柱，先用水冲洗，再用质量分数为50%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；洗脱液减压浓缩，干燥，得山楂提取物；
其中所述盐补骨脂提取物，制备方法如下：
盐补骨脂粉碎，加盐补骨脂重量2倍、质量分数为50%的乙醇提取1次，提取液浓缩，冷置，过滤，收集沉淀用质量分数为80%的乙醇溶解，过滤，滤液浓缩，干燥，即得盐补骨脂提取物；
其中所述番泻叶提取物，制备方法如下：
番泻叶粉碎，加番泻叶重量1倍、质量分数为30%的乙醇提取（温度60℃）1次，提取液过滤，在80℃下回收乙醇，过滤后浓缩，于40℃下干燥得番泻叶提取物。
实施例9
其中荷叶提取物，制备方法如下：
(1)荷叶粉碎后加荷叶重量5倍、质量分数为70%的乙醇，调pH为14.0，在85℃下回流提取3次，每次提取3小时，收集提取液备用；
(2)将(1)中所得荷叶药材残渣，加入残渣重量5倍、质量分数为95%的乙醇，调pH为6.0，在85℃下回流提取4次，每次提取3小时，收集提取液备用；
(3)将(1)中提取液经离心、过滤后的上清液，减压蒸馏回收乙醇后，调节pH为7.0，再经离心、过滤，取上清液配制成5mg/mL溶液，经大孔树脂吸附后用纯水、质量分数为30%的乙醇分别冲洗除去杂质，质量分数为90%的有机溶液洗脱，收集洗脱液，在真空度为0.09Mpa、温度为85℃下蒸发浓缩，得到浓缩液备用；
(4)将(2)中提取液经离心、过滤后的上清液，减压蒸馏回收乙醇后，加入酸性有机溶剂复溶，脱色，调节pH为7.0后离心、过滤除去鞣质；取上清液，调节pH≥12.0，并配制成2mg/mL溶液，经大孔树脂吸附后，用纯水、质量分数为30%的乙醇分别冲洗除去杂质，质量分数为90%的有机溶液洗脱，收集洗脱液，在真空度为0.09Mpa、温度为85℃下蒸发浓缩，得到浓缩液备用；
(5)合并(3)、(4)中制得浓缩液，经真空干燥制得荷叶提取物；
其中所述丹参提取物，制备方法如下：
丹参粉碎，加丹参重量6倍、质量分数为70%的乙醇加热回流提取4次，每次2小时；合并提取液，用酸调节pH为4.2放冷，离心或过滤，取澄清液或滤液上树脂体积为生药体积4倍的大孔树脂柱，先用水冲洗，水洗液弃去，再用树脂体积为生药体积4倍的大孔树脂柱、质量分数为95%的乙醇洗脱，收集洗脱液；洗脱液减压浓缩，干燥，即得丹参提取物；
其中所述山楂提取物，制备方法如下：
山楂粉碎，加山楂重量6倍的水温浸3h，加热回流提取或超声提取4次，提取液减压浓缩，离心或过滤，取澄清液或滤液上大孔树脂柱，先用水冲洗，再用质量分数为70%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；洗脱液减压浓缩，干燥，得山楂提取物；
其中所述盐补骨脂提取物，制备方法如下：
盐补骨脂粉碎，加盐补骨脂重量4倍、质量分数为80%的乙醇提取3次，提取液浓缩，冷置，过滤，收集沉淀用质量分数为95%的乙醇溶解，过滤，滤液浓缩，干燥，即得盐补骨脂提取物；
其中所述番泻叶提取物，制备方法如下：
番泻叶粉碎，加番泻叶重量3倍、质量分数为80%的乙醇提取（温度90℃）3次，提取液过滤，在80℃下回收乙醇，过滤后浓缩，于60℃下干燥得番泻叶提取物。
实施例10
提取物的检测：
用HPLC方法对实施例1样品进行了检测，结果如下：
其中荷叶提取物中荷叶黄酮含量为65%，荷叶生物碱含量为10%；丹参提取物中丹参素含量为7%，丹参总酚酸含量为62%，丹酚酸B含量为32%；山楂提取物的山楂总黄酮含量为60%；盐补骨脂提取物中补骨脂素与异补骨脂素含量之和为55、番泻叶提取物中番泻苷A与番泻苷B之和为25%。
实施例11
提取物的检测：
用HPLC方法对实施例7样品进行了检测，结果如下：
其中荷叶提取物中荷叶黄酮含量为50%，荷叶生物碱含量为5%；丹参提取物中丹参素含量为3%，丹参总酚酸含量为50%，丹酚酸B含量为20%；山楂提取物的山楂总黄酮含量为50%；盐补骨脂提取物中补骨脂素与异补骨脂素含量之和为50%、番泻叶提取物中番泻苷A与番泻苷B之和为15%。
实施例12
提取物的检测：
用HPLC方法对实施例8样品进行了检测，结果如下：
其中荷叶提取物中荷叶黄酮含量为80%，荷叶生物碱含量为15%；丹参提取物中丹参素含量为10%，丹参总酚酸含量为75%，丹酚酸B含量为45%；山楂提取物的山楂总黄酮含量为70%；盐补骨脂提取物中补骨脂素与异补骨脂素含量之和为60%、番泻叶提取物中番泻苷A与番泻苷B之和为35%。
实施例13
提取物的检测：
用HPLC方法对实施例9样品进行了检测，结果如下：
其中荷叶提取物中荷叶黄酮含量为60%，荷叶生物碱含量为8%；丹参提取物中丹参素含量为5%，丹参总酚酸含量为60%，丹酚酸B含量为30%；山楂提取物的山楂总黄酮含量为60%；盐补骨脂提取物中补骨脂素与异补骨脂素含量之和为52%、番泻叶提取物中番泻苷A与番泻苷B之和为20%。
实施例14
提取物的检测：
用HPLC方法对实施例1样品进行了检测，结果如下：
其中荷叶提取物中荷叶黄酮含量为70%，荷叶生物碱含量为12%；丹参提取物中丹参素含量为8%，丹参总酚酸含量为70%，丹酚酸B含量为40%；山楂提取物的山楂总黄酮含量为65%；盐补骨脂提取物中补骨脂素与异补骨脂素含量之和为56%、番泻叶提取物中番泻苷A与番泻苷B之和为30%。

Claims (8)

1.一种痰瘀同治的荷丹制剂，其特征在于，所述荷丹制剂由以下重量配比的中药提取物制备而成：荷叶提取物40-80份、丹参提取物10-20份、山楂提取物30-60份、补骨脂提取物或盐补骨脂提取物10-20份和番泻叶提取物1-3份；所述荷丹制剂作为制备治疗痰浊、瘀血药物的应用；
其中荷叶提取物中荷叶黄酮含量为50-80wt.％，荷叶生物碱含量为5-15wt.％；丹参提取物中丹参素含量为3～10wt.％，丹参总酚酸含量为50～75wt.％，丹酚酸B含量为20～45wt.％；山楂提取物的山楂总黄酮含量为50～70wt.％；补骨脂提取物或盐补骨脂提取物中补骨脂素与异补骨脂素含量之和为50-60wt.％、番泻叶提取物中番泻苷A与番泻苷B之和为15-35wt.％；
其中所述荷叶提取物，制备方法包括如下步骤：
(1)荷叶粉碎，加入质量分数为40％-70％的甲醇或乙醇，调pH至9.0-14.0，回流提取，收集提取液备用；
(2)将(1)中所得荷叶药材残渣，加入质量分数为60％-95％的甲醇或乙醇，调pH至1.0-6.0，回流提取，收集提取液备用；
(3)将(1)中提取液经离心、过滤后的上清液，减压蒸馏回收溶剂后，再经离心、过滤，取上清液经大孔树脂吸附后冲洗除去杂质，洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到浓缩液备用；
(4)将(2)中提取液经离心或过滤后的上清液，减压蒸馏回收溶剂后，复溶，脱色，离心或过滤；取上清液，调节pH≥12.0，经大孔树脂吸附后，冲洗除去杂质，洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到浓缩液备用；
(5)合并(3)、(4)中制得浓缩液，经干燥制得荷叶提取物；
其中所述丹参提取物，制备方法包括如下步骤：丹参粉碎，加入乙醇溶液回流提取，提取液调节pH为1.5～4.2，离心或过滤，取澄清液或滤液经大孔树脂柱吸附，先用水冲洗，再用甲醇或乙醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩，干燥，即得丹参提取物；
其中所述山楂提取物，制备方法包括如下步骤：山楂粉碎，加水温浸，温浸为山楂在60-75℃的水中，恒温浸渍1-3h或8-16h；加热回流提取或超声提取，提取液浓缩，离心或过滤，取澄清液或滤液经大孔树脂柱吸附，先用水冲洗，再用甲醇或乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，干燥，得山楂提取物；
其中所述补骨脂提取物或盐补骨脂提取物，制备方法包括如下步骤：补骨脂或盐补骨脂粉碎，加入乙醇溶液提取，提取液浓缩，冷置，过滤，收集沉淀用乙醇溶液溶解，过滤，滤液浓缩，干燥，即得补骨脂提取物或盐补骨脂提取物；
其中所述番泻叶提取物，制备方法包括如下步骤：番泻叶粉碎，用乙醇溶液提取，提取液过滤，过滤后浓缩，干燥得番泻叶提取物。
2.如权利要求1所述的痰瘀同治的荷丹制剂，其特征在于，所述荷丹制剂由以下重量配比的中药提取物制备而成：荷叶提取物50-70份、丹参提取物12-18份、山楂提取物40-50份、补骨脂提取物或盐补骨脂提取物12-18份和番泻叶提取物1-3份。
3.如权利要求1所述的痰瘀同治的荷丹制剂，其特征在于，其中荷叶提取物中荷叶黄酮含量为60-70wt.％，荷叶生物碱含量为8-12wt.％；丹参提取物中丹参素含量为5～8wt.％，丹参总酚酸含量为60～70wt.％，丹酚酸B含量为30～40wt.％；山楂提取物的山楂总黄酮含量为60～65wt.％；补骨脂提取物或盐补骨脂提取物中补骨脂素与异补骨脂素含量之和为52-56wt.％、番泻叶提取物中番泻苷A与番泻苷B之和为20-30wt.％。
4.如权利要求1所述的痰瘀同治的荷丹制剂，其特征在于，所述荷丹制剂为片剂、胶囊剂、口服液、***剂、颗粒剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、注射剂、栓剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂或滴丸剂。
5.如权利要求1所述的痰瘀同治的荷丹制剂，其特征在于，其中荷叶提取物，制备方法包括如下步骤：
(1)荷叶粉碎后加荷叶重量3-5倍，质量分数为40％-70％的乙醇，调pH为9.0-14.0，回流提取1-3次，每次提取1-3小时，收集提取液备用；
(2)将(1)中所得荷叶药材残渣，加入残渣重量3-5倍，质量分数为60％-95％的乙醇，调pH为1.0-6.0，回流提取2-4次，每次提取1-3小时，收集提取液备用；
(3)将(1)中提取液经离心、过滤后的上清液，回收乙醇后，调节pH为6.5-7.0，再经离心、过滤，经大孔树脂吸附后用纯水、质量分数为10％-30％的乙醇分别冲洗除去杂质，质量分数为50％-90％的甲醇或乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩后得到浓缩液备用；
(4)将(2)中提取液经离心、过滤后的上清液，回收乙醇后，复溶，脱色，调节pH为7.0后离心、过滤除去鞣质；取上清液，调节pH≥12.0，经大孔树脂吸附后，用纯水、质量分数为10％-30％的乙醇分别冲洗除去杂质，质量分数为50％-90％的甲醇或乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩得到浓缩液备用；
(5)合并(3)、(4)中制得浓缩液，经真空干燥制得荷叶提取物；
其中所述丹参提取物，制备方法包括如下步骤：丹参粉碎，加丹参重量2-6倍、质量分数为40％～70％的乙醇，加热回流提取2～4次，每次0.5～2小时；合并提取液，用酸调节pH为1.5～4.2，离心或过滤，取澄清液或滤液上树脂体积为丹参体积2～4倍的大孔树脂柱，先用水冲洗，再用树脂体积为生药体积2～4倍的大孔树脂柱、质量分数为85％～95％的乙醇洗脱，收集洗脱液；洗脱液减压浓缩，干燥，即得丹参提取物；
其中所述山楂提取物，制备方法包括如下步骤：山楂粉碎，加山楂重量2-6倍的水温浸1-3h，加热回流提取或超声提取2～4次，提取液减压浓缩，离心或过过滤，取澄清液或滤液上大孔树脂柱，先用水冲洗，再用质量分数为50％～70％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；洗脱液减压浓缩，干燥，得山楂提取物；
其中所述补骨脂提取物或盐补骨脂提取物，制备方法包括如下步骤：补骨脂或盐补骨脂粉碎，加补骨脂或盐补骨脂重量2-4倍、质量分数为50-80％的乙醇提取1～3次，提取液浓缩，冷置，过滤，收集沉淀用质量分数为80-95％的乙醇溶解，过滤，滤液浓缩，干燥，即得补骨脂提取物或盐补骨脂提取物；
其中所述番泻叶提取物，制备方法包括如下步骤：番泻叶粉碎，加番泻叶重量1-3倍、质量分数为30％-80％的乙醇，在温度为60-90℃下，提取1～3次，提取液过滤，过滤后浓缩干燥，得番泻叶提取物。
6.一种荷丹制剂在制备同时治疗痰浊、瘀血的药物中的应用，其特征在于，所述荷丹制剂由以下重量配比的中药提取物制备而成：荷叶提取物40-80份、丹参提取物10-20份、山楂提取物30-60份、补骨脂提取物或盐补骨脂提取物10-20份、番泻叶提取物1-3份；所述荷丹制剂作为制备治疗痰浊、瘀血药物的应用；
其中，所述荷叶提取物，制备方法包括如下步骤：
(1)荷叶粉碎，加入质量分数为40％-70％的甲醇或乙醇，调pH至9.0-14.0，回流提取，收集提取液备用；
(2)将(1)中所得荷叶药材残渣，加入质量分数为60％-95％的甲醇或乙醇，调pH至1.0-6.0，回流提取，收集提取液备用；
(3)将(1)中提取液经离心、过滤后的上清液，减压蒸馏回收溶剂后，再经离心、过滤，取上清液经大孔树脂吸附后冲洗除去杂质，洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到浓缩液备用；
(4)将(2)中提取液经离心或过滤后的上清液，减压蒸馏回收溶剂后，复溶，脱色，离心或过滤；取上清液，调节pH≥12.0，经大孔树脂吸附后，冲洗除去杂质，洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到浓缩液备用；
(5)合并(3)、(4)中制得浓缩液，经干燥制得荷叶提取物；
所述丹参提取物，制备方法包括如下步骤：丹参粉碎，加入乙醇溶液回流提取，提取液调节pH为1.5～4.2，离心或过滤，取澄清液或滤液经大孔树脂柱吸附，先用水冲洗，再用甲醇或乙醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩，干燥，即得丹参提取物；
其中所述山楂提取物，制备方法包括如下步骤：山楂粉碎，加水温浸，温浸为山楂在60-75℃的水中，恒温浸渍1-3h或8-16h；加热回流提取或超声提取，提取液浓缩，离心或过滤，取澄清液或滤液经大孔树脂柱吸附，先用水冲洗，再用甲醇或乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，干燥，得山楂提取物；
其中所述补骨脂提取物或盐补骨脂提取物，制备方法包括如下步骤：补骨脂或盐补骨脂粉碎，加入乙醇溶液提取，提取液浓缩，冷置，过滤，收集沉淀用乙醇溶液溶解，过滤，滤液浓缩，干燥，即得补骨脂提取物或盐补骨脂提取物；
其中所述番泻叶提取物，制备方法包括如下步骤：番泻叶粉碎，用乙醇溶液提取，提取液过滤，过滤后浓缩，干燥得番泻叶提取物。
7.如权利要求6所述的一种荷丹制剂在制备同时治疗痰浊、瘀血的药物中的应用，其特征在于，该荷丹制剂由以下重量配比的中药提取物制备而成：荷叶提取物50-70份、丹参提取物12-18份、山楂提取物40-50份、补骨脂提取物或盐补骨脂提取物12-18份、番泻叶提取物1-3份。
8.如权利要求6或7所述的一种荷丹制剂在制备同时治疗痰浊、瘀血的药物中的应用，其特征在于，其中荷叶提取物中荷叶黄酮含量为50-80wt.％，荷叶生物碱含量为5-15wt.％；丹参提取物中丹参素含量为3～10wt.％，丹参总酚酸含量为50～75wt.％，丹酚酸B含量为20～45wt.％；山楂提取物的山楂总黄酮含量为50～70wt.％；补骨脂提取物或盐补骨脂提取物中补骨脂素与异补骨脂素含量之和为50-60wt.％、番泻叶提取物中番泻苷A与番泻苷B之和为15-35wt.％。
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