CN103548698A - 帝王花快速繁殖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及帝王花快速繁殖的方法,是一种以无菌播种获得的实生苗,取其上胚轴以上部分作为诱导材料,进行快速繁育苗木的方法,首先去除帝王花种子表面的黑色绒毛,然后,在超净工作台上进行种子消毒,将包被在种子表面的表皮去除,取出种胚,接种在1/2MS+蔗糖25~35g/L+0.6~0.8%琼脂粉的培养基中,PH5.8~6.2,进行光照培养28~35天,获得无菌实生苗;切取所述的无菌实生苗上胚轴以上部分,接种于不定芽诱导培养基中诱导不定芽;将产生的不定芽分割成2~3个芽为一丛,进行增殖培养获得生成丛芽,将所述的丛芽中2~3cm高的芽切下,接入生根培养基进行生根培养,获得的组培生根苗进行移栽,生根率达90%。
Description
技术领域
本发明涉及帝王花快速繁殖的方法,是一种以无菌播种获得的实生苗,取其顶芽作为诱导材料,进行快速繁育苗木的方法。
背景技术
帝王花为山龙眼科(Proteaceae)普洛蒂亚属(Protea)多年生、多花茎常绿灌木,又名菩提花,俗称木百合花或龙眼花,原产南非,是南非共和国的国花。普洛蒂亚属有大约130多个种和品种,其中帝王花是其中最知名的一种。因为其巨大的花魁,异常美丽的色彩和优雅的造型而成为世界名贵花卉。
帝王花枝叶茂盛,花朵大,苞叶和花瓣挺拔,色彩异常美丽,观赏期长,适合于盆栽观赏。目前在园林装饰树种方面越来越受到大家的欢迎。帝王花植株高约1米。花球直径12-30厘米,一个生长季,一株帝王花能够开6-10个花球,个别品种甚至能达到40个花球。帝王花既是优良的鲜切花,也适合制作干花。作为鲜切花可以摆放很长时间,所以受到世界上越来越多人的欢迎和喜爱。市场潜力巨大。帝王花喜温暖,稍干燥和阳光充足的环境,不耐寒,土壤宜爽水,忌积水,适宜疏松和排水良好的酸性土壤。冬季不低于7度,少数品种可耐0度左右的低温。幼苗的土壤需排水好。在生长期中,夏季需凉爽干燥气候,烈日时适当遮荫,适宜生长温度为27度,冬季需要温暖、充足的阳光及稍高的空气湿度环境。
帝王花适应能力相当广泛,在不同的气候条件和环境因素下,帝王花的花型、花色等很多性状发生巨大变化,所以在世界各地都得到了广泛的种植。在国内,近年来帝王花只偶尔在逢年过节时,在一些大城市的鲜花市场有“惊艳一瞥”,而且大多是从国外进口,价格昂贵。如果能够使这世界花卉进入寻常百姓家庭,潜在的市场非常巨大。此外,南非本身产量也非常有限,国际市场需求又很大,而中国和南非气候又非常互补,所以中国若能成功种植,将大大满足国际市场需求,同时也很好的提高了种植户的经济效益。而要成功种植帝王花,首先要有稳定的种苗供应。
帝王花通常采用播种繁殖,种子大多从国外进口,价格昂贵。种子种植发芽需要1-3个月时间,不通过处理,需要发芽的时间更长,而且整体出苗率很低,只有40%左右。常规的组织培养,采用成年帝王花植株茎杆进行组培,帝王花属于灌木类,叶芽发芽困难,很容易褐化,成活率低,导致生产成本较高,也不适合推广。常规的扦插繁殖技术成活率则更低,只有10%左右。所以如何提高帝王花的繁殖率,加快从播种到成株的速度就成为目前亟待解决的问题。
目前常规繁殖方法主要面临面临下述问题:
(1)扦插繁殖成活率;
(2)采用播种繁殖,种子价格昂贵,种子发芽的时间长,而且整体出苗率低;
(3)采用成年帝王花植株嫩枝切段作为外植体进行组培,腋芽萌发困难,诱导材料容易褐化,成活率低。
中国专利申请201010608154公开了一种王帝王花的扦插繁殖方法。选择王帝王花母本剪取半木质化位置以上的枝条作为插穗,保留叶片4~6枚。基质采用泥炭和珍珠岩按体积比为4:6混合,调整pH值5.5~6.5,EC值小于0.5。用1000ppm的吲哚-3-丁酸溶液浸插穗基部,浸泡15分钟后立即风干。扦插深度为插穗长度的1/3~1/4。扦插后按常规技术进行管理,待出苗后进行大田移栽。该技术使王帝王花扦插繁殖的成活率达到90%以上,繁殖周期缩短至40~60天。得到的种苗品质优良,种苗寿命长,后代表现性状稳定一致。
发明内容
本发明目的在于,提供一种成活率高,缩短成长期的帝王花快速繁殖的方法。
本发明目的通过下述技术方案实现:
一种帝王花快速繁殖的方法,以无菌播种获得的实生苗,,取其上胚轴以上部分作为诱导材料,进行快速繁育苗木,依序按下列步骤进行操作:
第一步:首先去除帝王花种子表面的黑色绒毛,然后在超净工作台上进行种子消毒。将包被在种子表面的表皮去除。取出种胚,接种在1/2MS+蔗糖25~35g/L+0.6~0.8%琼脂粉的培养基中,PH5.8~6.2,进行光照培养28~35天,获得无菌实生苗;
第二步:切取无菌实生苗上胚轴以上部分,接种于不定芽诱导培养基中,所述的不定芽诱导培养基为MS+TDZ0.1~0.5mg/L+IBA0.01~0.1mg/L+蔗糖25~35g/L+0.6~0.8%琼脂粉,PH5.8~6.2,培养30~45天后外植体基部长出不定芽;
第三步:将产生的不定芽分割成2-3个芽为一丛,转入芽增殖培养基中,继续进行增殖培养,所述的增殖培养基为MS+BA0.5~1.0mg/L+IBA0.01~0.1mg/L+蔗糖25~35g/L+0.6~0.8%琼脂粉,PH5.8~6.2,生成丛芽;
第四步:将丛芽中2~3cm高的芽切下,接入生根培养基进行生根培养,生根培养基为1/2MS+IAA0.1~1.0mg/L蔗糖15~25g/L+0.6~0.8%琼脂粉,经15~20天开始生根,培养28~35天获得组培生根苗,进行移栽。
在上述方案基础上,所述的种子消毒方法为:在清水中加入少量洗衣粉,用洗衣粉水将种子表面的污垢清洗干净,然后再超净工作台上,将清洗好的种子用70~75%的酒精浸泡20-30秒钟,然后用浓度为0.05%升汞消毒10~15分钟,再用无菌水冲洗5-6次,完毕后用无菌纱布吸干种子表面多余的水分。
在上述方案基础上,所述光照培养的条件为:培养温度25±2℃、光照强度为1500~2000lux,光照时间每天10~14小时。
所述的琼脂粉由卡拉胶替代。
本发明优越性在于:采用帝王花种子无菌播种获得的实生苗,取其子叶以上部分作为诱导不定芽的材料,并经过不断增殖,最终获得大量组培苗木。克服了现有技术的一些缺陷,为帝王花繁育提供了一种新途径。
具体实施方式
一种帝王花快速繁殖的方法,依序按下列步骤进行操作:
第一步:首先去除帝王花种子表面的黑色绒毛,然后在超净工作台上将种子浸泡在75%的酒精中30秒,之后用0.05%升汞消毒12分钟,再用无菌水冲洗6遍,最后用无菌纱布吸干多余的水分;将包被在种子表面的表皮去除。取出种胚,接种在1/2MS+蔗糖30g/L+0.6~0.8%琼脂粉的培养基中,PH5.8~6.2,进行光照培养,培养室温度25±2℃、光照强度为1500~2000lux,光照时间每天12小时,培养1个月,获得无菌实生苗;
第二步:切取无菌实生苗上胚轴以上部分,接种于诱导培养基中,所述的诱导培养基为MS+TDZ0.1~0.5mg/L+IBA0.01~0.1mg/L+蔗糖25~35g/L+0.6~0.8%卡拉胶,PH5.8~6.2,进行光照培养,培养室温度25±2℃、光照强度为1500~2000lux,光照时间每天12小时,培养40天产生不定芽;
第三步:将不定芽分割成2-3个芽为一丛,转入增殖培养基进行续代增殖培养,所述的增殖培养基为MS+BA0.5~1.0mg/L+IBA0.01~0.1mg/L+蔗糖25~35g/L+0.6~0.8%卡拉胶,PH5.8~6.2,生成组培丛芽,继代1次,增殖比例为1:3.5;
第四步:将继代增殖培养过程获得的组培丛芽中2~3cm的芽切下,接入发根培养基进行生根培养,所述的培养基为1/2MS+IAA0.1~1.0mg/L蔗糖15~25g/L+0.6~0.8%卡拉胶,PH5.8~6.2,经15~20天生根,生根率90%,一个月后获得组培生根苗,即可移栽。
Claims (5)
1.一种帝王花快速繁殖的方法,以无菌播种获得的实生苗,取其上胚轴以上部分作为诱导材料,进行快速繁育苗木,其特征在于:依序按下列步骤进行操作:
第一步:首先去除帝王花种子表面的黑色绒毛,然后,在超净工作台上进行种子消毒,将包被在种子表面的表皮去除,取出种胚,接种在1/2MS+蔗糖25~35g/L+0.6~0.8%琼脂粉的培养基中,PH5.8~6.2,进行光照培养28~35天,获得无菌实生苗;
第二步:切取所述的无菌实生苗上胚轴以上部分,接种于不定芽诱导培养基中,所述的不定芽诱导培养基为MS+TDZ0.1~0.5mg/L+IBA0.01~0.1mg/L+蔗糖25~35g/L+0.6~0.8%琼脂粉,PH5.8~6.2,培养30~45天后外植体基部长出不定芽;
第三步:将产生的不定芽分割成2~3个芽为一丛,转入芽增殖培养基中,继续进行增殖培养,所述的增殖培养基为MS+BA0.5~1.0mg/L+IBA0.01~0.1mg/L+蔗糖25~35g/L+0.6~0.8%琼脂粉,PH5.8~6.2,生成丛芽;
第四步:将所述的丛芽中2~3cm高的芽切下,接入生根培养基进行生根培养,生根培养基为1/2MS+IAA0.1~1.0mg/L蔗糖15~25g/L+0.6~0.8%琼脂粉,经15~20天开始生根,培养28~35天获得组培生根苗,进行移栽。
2.根据权利要求1所述的帝王花快速繁殖的方法,其特征在于:所述的种子消毒方法为:在清水中加入少量洗衣粉,用洗衣粉水将种子表面的污垢清洗干净,在超净工作台上将清洗好的种子用70~75%的酒精浸泡20~30秒钟,然后用浓度为0.05%升汞消毒10~15分钟,再用无菌水冲洗5~6次,完毕后用无菌纱布吸干种子表面多余的水分。
3.根据权利要求1所述的帝王花快速繁殖的方法,其特征在于:所述光照培养的条件为:培养温度25±2℃、光照强度为1500~2000lux,光照时间每天10~14小时。
4.根据权利要求1所述的帝王花快速繁殖的方法,其特征在于:所述的丛芽是由所述第三步生成组培丛芽,继代1次,增殖比例为1:3.5。
5.根据权利要求1所述的帝王花快速繁殖的方法,其特征在于:所述的琼脂粉由卡拉胶替代。
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