CN103529001A - 一种基于单色荧光off-on开关***的dsDNA高灵敏检测方法 - Google Patents
一种基于单色荧光off-on开关***的dsDNA高灵敏检测方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种基于单色荧光off-on开关***的dsDNA高灵敏检测方法，属于化学和生物医学领域。具体步骤如下：合成水溶性谷胱甘肽（GSH）包被的CdTe量子点（QDs），控制该量子点的荧光发射波长在605nm；将水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点，与金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+（Ru）混合，致使水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点荧光完全猝灭，得到QDs-Ru装配组；向QDs-Ru装配组中加入dsDNA后，随着dsDNA浓度的逐渐增加，在605nm处的单色荧光强度逐渐增强，从而实现对dsDNA快速高灵敏检测。本发明的检测***可使dsDNA检测限达到10pg/mL，与背景技术中现有技术相比，灵敏度提高了500倍，并且操作简单快速，特异性好，成本低，整个过程可在30分钟内完成。
Description
技术领域
本发明涉及一种基于单色荧光“off-on”开关***的dsDNA高灵敏检测方法，属于化学和生物医学领域。
背景技术
量子点(QDs)作为优良的荧光纳米材料，具有化学稳定性好，荧光效率高，宽的激发光谱，窄的发射光谱等诸多独特特性，可与生物分子结合制备生物荧光探针，用于生物分子的检测与传感。DNA作为遗传信息的载体，其快速高灵敏检测在医学应用中越来越重要，而基于荧光分析的测量与表征可谓DNA研究的重要基础。因此，利用新型荧光标记技术，特别是用量子点标记DNA则是最近研究领域发展的新动态。近年来，基于量子点修饰的荧光探针，与染料标记的目标物之间发生荧光能量共振转移(FRET)的生物传感器引起人们广泛研究。然而基于能量共振转移的生物传感器，最重要的是设计一对满足要求的能量供体和受体，基于量子点荧光和简单开关***对于生物目标分子的检测显示出更大的优势。量子点首先与猝灭剂作用发生荧光猝灭，而当目标分析物与猝灭剂特异性结合之后，就会促使猝灭剂从量子点表面脱离，从而使量子点的荧光恢复，最终达到快速灵敏检测目标分析物的目的。
Dan Zhao等(Anal.Chem.2009)报道了一种利用量子点和金属钌配合物设计的双色荧光信号对dsDNA的检测方法，操作简单快速，但其检测灵敏度较低，dsDNA的检测限只有5ng/mL。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有检测dsDNA的技术，检测灵敏度较低的问题，提供一种基于单色荧光“off-on”开关***的dsDNA高灵敏检测方法。
本发明的目的是通过下述技术方案实现的。
本发明的一种基于单色荧光“off-on”开关***的dsDNA高灵敏检测方法， 具体步骤如下：
步骤一、合成水溶性谷胱甘肽(GSH)包被的CdTe量子点(QDs)，控制该量子点的荧光发射波长在605nm；
步骤二、将步骤一所得的水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点(QDs)与金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+(Ru)混合，混合摩尔比为1:100，金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+通过静电作用与水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点结合，致使水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点荧光完全猝灭，得到QDs-Ru装配组；
步骤三、向步骤二所得的QDs-Ru装配组中加入dsDNA后，随着dsDNA浓度的逐渐增加，在605nm处的单色荧光强度逐渐增强，从而实现对dsDNA快速高灵敏检测。
有益效果
1、本发明的一种基于单色荧光“off-on”开关***的dsDNA高灵敏检测方法，为实现dsDNA的简单快速、高灵敏、特异性检测，我们利用水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点(QDs)和金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+(Ru)设计一种单色荧光“off-on”开关***。CdTe QDs是用谷胱甘肽(GSH)作为表面配体，QDs在水溶液中带负电，金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+自身在水溶液中不发荧光并且带正电，两者能够通过静电相互作用结合，形成QDs-Ru装配组，QDs的荧光发生猝灭。dsDNA的加入，特异性与金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+结合形成Ru-dsDNA复合物而在605nm处发荧光，金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+从QDs表面的脱离，会使QDs的荧光得到恢复，在同一波长的激发下，QDs的荧光和Ru-dsDNA复合物的荧光在605nm处产生叠加，从而能够高灵敏检测dsDNA。本发明的检测***，dsDNA检测限可达10pg/mL，与背景技术中现有技术相比，灵敏度提高了500倍。
2、本发明的一种基于单色荧光“off-on”开关***的dsDNA高灵敏检测方法，不需要任何的共价修饰或探针设计，目标物dsDNA也无需任何修饰，操作简便，快速，灵敏度高，特异性好，成本低，检测只需要在30分钟内就可完成。
3、本发明可广泛应用于生物医学领域的dsDNA检测，包括所有dsDNA病毒，以及引起体液中DNA含量发生变化的临床样品的检测，有望设计成DNA快速检测试纸条。
附图说明
图1为本发明检测dsDNA的流程示意图；
图2为本发明CdTe QDs和Ru-dsDNA复合物的紫外吸收(a，c)及荧光发射光谱(b，d)；
图3为本发明金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+对QDs的荧光猝灭的荧光光谱，QDs的浓度为1nM，从a到m，金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+的浓度分别为0,1,5,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100nM；
图4为本发明1nM QDs-Ru装配组与不同浓度dsDNA作用后的荧光光谱，从a到o，dsDNA浓度分别为0,0.05,0.5,5,10,20,40,60,80,100,200,400,600,800,1000ng/mL；
图5为本发明荧光强度增强值对应于dsDNA浓度变化的线性关系曲线，此***的dsDNA线性检测浓度范围为0.5ng/mL-100ng/mL。
具体实施方式
以下实施例与附图对本发明进行进一步说明。
实施例1
本发明的一种基于单色荧光“off-on”开关***的dsDNA高灵敏检测方法，如图1所示，具体步骤如下：
步骤一、合成水溶性谷胱甘肽(GSH)包被的CdTe量子点(QDs)，控制该量子点的荧光发射波长在605nm；
合成步骤：将63.8mg的Te粉和100mg的NaBH4混合，然后加入5mL N2饱和的去离子水，混合液在N2保护下反应2h直到溶液变成淡粉色，此溶液这里称为Te的前驱液。
将0.2312g(1mmol)的CdCl2·2.5H2O，0.3685g(1.2mmol)的谷胱甘肽(GSH)，100mL去离子水混合，在磁力搅拌下，逐滴滴加NaOH调节pH为8-9，得到混合液。通30min N2后，将Te的前驱液迅速注入到混合液中，在N2保护下，反应溶液缓慢加热到100℃，并持续反应5.5h，直到得到所需发射波长的CdTe量子点停止反应，如图2所示。CdTe量子点用异丙醇沉降洗涤3次，在真空干燥箱中干燥得到固体粉末，以备后续实验用。
步骤二、将步骤一所得的水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点(QDs)与金 属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+(Ru)混合，混合摩尔比为1:100；金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+通过静电作用与水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点结合，致使水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点荧光完全猝灭，得到QDs-Ru装配组；
89μL的PBS(0.01M，pH7.4)中加入1μL的CdTe QDs(100nM)，得到QDs溶液，然后将10μL不同浓度的[Ru(phen)2(dppz)]2+加入到QDs溶液中，室温下反应10min，QDs的荧光发生猝灭，形成QDs-Ru装配组。用荧光光谱仪检测QDs荧光，激发波长为390nm，如图3所示。
步骤三、向步骤二所得的QDs-Ru装配组中加入dsDNA后，随着dsDNA浓度的逐渐增加，在605nm处的单色荧光强度逐渐增强，从而实现对dsDNA快速高灵敏检测。
所述dsDNA为小牛胸腺DNA，质量浓度详见表1。
1μL的CdTe QDs(100nM)，10μL的[Ru(phen)2(dppz)]2+(1μM)依次加入到89μL PBS(0.01M，pH7.4)中，室温混合10min形成QDs-Ru装配组，得到QDs-Ru装配组溶液。然后向QDs-Ru装配组溶液中分别加入1μL不同浓度的dsDNA，室温下孵育15min，用荧光光谱仪进行荧光检测，激发波长为390nm，荧光光谱图如图4所示，dsDNA线性检测浓度范围如图5所示。所有荧光强度检测均重复三次(n=3)，计算本发明方法的批次内的差异系数Intra-assay CV，CV是变异系数也可称为相对标准偏差(Relative Standard Deviation,RSD)，CV%=标准偏差(SD)/平均值(mean)。重复性结果详见表1。
表1 单色荧光“off-on”开关***检测小牛胸腺DNA的批次内差异性
本次试验的结果：本发明的单色荧光“off-on”开关***检测dsDNA，随着dsDNA浓度的逐渐增加，在605nm处的单色荧光强度逐渐增强。检测灵敏度高，检测限可达10pg/mL。线性检测浓度范围为0.5ng/mL-100ng/mL，如图5所示。而且批次内差异系数仅为0.91%，说明本发明检测***重复性好。
实施例2
本发明的一种基于单色荧光“off-on”开关***的dsDNA高灵敏检测方法，如图1所示，具体步骤如下，：
步骤一、合成水溶性谷胱甘肽(GSH)包被的CdTe量子点(QDs)，控制该量子点的荧光发射波长在605nm；
合成步骤：将63.8mg的Te粉和100mg的NaBH4混合，然后加入5mL N2饱和的去离子水，混合液在N2保护下反应2h直到溶液变成淡粉色，此溶液这里称为Te的前驱液。
将0.2312g(1mmol)的CdCl2·2.5H2O，0.3685g(1.2mmol)的谷胱甘肽(GSH)，100mL去离子水混合，在磁力搅拌下，逐滴滴加NaOH调节pH为8-9，得到混合液。通30min N2后，将Te的前驱液迅速注入到混合液中，在N2保护下，反应溶液缓慢加热到100℃，并持续反应5.5h，直到得到所需发射波 长的CdTe QDs停止反应，如图2所示。CdTe QDs用异丙醇沉降洗涤3次，在真空干燥箱中干燥得到固体粉末，以备后续实验用。
步骤二、将步骤一所得的水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点(QDs)与金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+(Ru)混合，混合摩尔比为1:100，金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+通过静电作用与水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点结合，致使水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点荧光完全猝灭，得到QDs-Ru装配组；
89μL的PBS(0.01M，pH7.4)中加入1μL的CdTe QDs(100nM)，得到QDs溶液，然后将10μL不同浓度的[Ru(phen)2(dppz)]2+加入到QDs溶液中，室温下反应10min，QDs的荧光发生猝灭，形成QDs-Ru装配组。用荧光光谱仪检测QDs荧光，激发波长为390nm，如图3所示。
步骤三、向步骤二所得的QDs-Ru装配组中加入dsDNA后，随着dsDNA浓度的逐渐增加，在605nm处的单色荧光强度逐渐增强，从而实现对dsDNA快速高灵敏检测。
所述dsDNA为任意质量浓度比混合的三种不同长度、不同碱基组成的dsDNA(12bp dsDNA+36bp dsDNA+54bp dsDNA)，质量浓度详见表2。
1μL的CdTe QDs(100nM)，10μL的[Ru(phen)2(dppz)]2+(1μM)依次加入到89μL PBS(0.01M，pH7.4)中，室温混合10min形成QDs-Ru装配组，得到QDs-Ru装配组溶液。然后向QDs-Ru装配组溶液中分别加入1μL不同浓度的上述任意质量浓度比混合的三种不同长度、不同碱基组成的dsDNA，室温下孵育15min，用荧光光谱仪进行荧光检测，激发波长为390nm。荧光强度检测结果详见表2。
本次试验的结果：随着混合dsDNA浓度的逐渐增大，在605nm处的单色荧光强度逐渐增强，从而实现对dsDNA快速高灵敏检测。
实施例3
本发明的一种基于单色荧光“off-on”开关***的dsDNA高灵敏检测方法，如图1所示，具体步骤如下：
步骤一、合成水溶性谷胱甘肽(GSH)包被的CdTe量子点(QDs)，控制该量子点的荧光发射波长在605nm；
合成步骤：将63.8mg的Te粉和100mg的NaBH4混合，然后加入5mL N2 饱和的去离子水，混合液在N2保护下反应2h直到溶液变成淡粉色，此溶液这里称为Te的前驱液。
将0.2312g(1mmol)的CdCl2·2.5H2O，0.3685g(1.2mmol)的谷胱甘肽(GSH)，100mL去离子水混合，在磁力搅拌下，逐滴滴加NaOH调节pH为8-9，得到混合液。通30min N2后，将Te的前驱液迅速注入到混合液中，在N2保护下，反应溶液缓慢加热到100℃，并持续反应5.5h，直到得到所需发射波长的CdTe量子点停止反应，如图2所示。CdTe量子点用异丙醇沉降洗涤3次，在真空干燥箱中干燥得到固体粉末，以备后续实验用。
步骤二、将步骤一所得的水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点(QDs)与金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+(Ru)混合，混合摩尔比为1:100；金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+通过静电作用与水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点结合，致使水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点荧光完全猝灭，得到QDs-Ru装配组；
89μL的PBS(0.01M，pH7.4)中加入1μL的CdTe QDs(100nM)，得到QDs溶液，然后将10μL不同浓度的[Ru(phen)2(dppz)]2+加入到QDs溶液中，室温下反应10min，QDs的荧光发生猝灭，形成QDs-Ru装配组。用荧光光谱仪检测QDs荧光，激发波长为390nm，如图3所示。
步骤三、向步骤二所得的QDs-Ru装配组中加入dsDNA后，随着dsDNA浓度的逐渐增加，在605nm处的单色荧光强度逐渐增强，从而实现对dsDNA快速高灵敏检测。
所述dsDNA为任意质量浓度比混合的两种不同长度、不同碱基组成的dsDNA(12bp dsDNA+36bp dsDNA)，质量浓度详见表2。
1μL的CdTe QDs(100nM)，10μL的[Ru(phen)2(dppz)]2+(1μM)依次加入到89μL PBS(0.01M，pH7.4)中，室温混合10min形成QDs-Ru装配组，得到QDs-Ru装配组溶液。然后向QDs-Ru装配组溶液中分别加入1μL不同浓度的上述任意质量浓度比混合的两种不同长度、不同碱基组成的dsDNA，室温下孵育15min，用荧光光谱仪进行荧光检测，激发波长为390nm。荧光强度检测结果详见表2
本次试验的结果：随着混合dsDNA浓度的逐渐增大，在605nm处的单色荧光强度逐渐增强，从而实现对dsDNA快速高灵敏检测。
实施例4
本发明的一种基于单色荧光“off-on”开关***的dsDNA高灵敏检测方法，如图1所示，具体步骤如下：
步骤一、合成水溶性谷胱甘肽(GSH)包被的CdTe量子点(QDs)，控制该量子点的荧光发射波长在605nm；
合成步骤：将63.8mg的Te粉和100mg的NaBH4混合，然后加入5mL N2饱和的去离子水，混合液在N2保护下反应2h直到溶液变成淡粉色，此溶液这里称为Te的前驱液。
将0.2312g(1mmol)的CdCl2·2.5H2O，0.3685g(1.2mmol)的谷胱甘肽(GSH)，100mL去离子水混合，在磁力搅拌下，逐滴滴加NaOH调节pH为8-9，得到混合液。通30min N2后，将Te的前驱液迅速注入到混合液中，在N2保护下，反应溶液缓慢加热到100℃，并持续反应5.5h，直到得到所需发射波长的CdTe量子点停止反应，如图2所示。CdTe量子点用异丙醇沉降洗涤3次，在真空干燥箱中干燥得到固体粉末，以备后续实验用。
步骤二、将步骤一所得的水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点(QDs)与金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+(Ru)混合，混合摩尔比为1:100；金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+通过静电作用与水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点结合，致使水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点荧光完全猝灭，得到QDs-Ru装配组；
89μL的PBS(0.01M，pH7.4)中加入1μL的CdTe QDs(100nM)，得到QDs溶液，然后将10μL不同浓度的[Ru(phen)2(dppz)]2+加入到QDs溶液中，室温下反应10min，QDs的荧光发生猝灭，形成QDs-Ru装配组。用荧光光谱仪检测QDs荧光，激发波长为390nm，如图3所示。
步骤三、向步骤二所得的QDs-Ru装配组中加入dsDNA后，随着dsDNA浓度的逐渐增加，在605nm处的单色荧光强度逐渐增强，从而实现对dsDNA快速高灵敏检测。
所述dsDNA为任意质量浓度比混合的两种不同长度、不同碱基组成的dsDNA(36bp dsDNA+54bp dsDNA)，质量浓度详见表2。
1μL的CdTe QDs(100nM)，10μL的[Ru(phen)2(dppz)]2+(1μM)依次加入到89μL PBS(0.01M，pH7.4)中，室温混合10min形成QDs-Ru装配组，得到QDs-Ru装配组溶液。然后向QDs-Ru装配组溶液中分别加入1μL不同浓度 的上述任意质量浓度比混合的两种不同长度、不同碱基组成的dsDNA，室温下孵育15min，用荧光光谱仪进行荧光检测，激发波长为390nm。荧光强度检测结果详见表2
本次试验的结果：随着混合dsDNA浓度的逐渐增大，在605nm处的单色荧光强度逐渐增强，从而实现对dsDNA快速高灵敏检测。
表2 QDs-Ru装配组与不同种类dsDNA不同浓度下的荧光强度
表2中DNA1：ctDNA(小牛胸腺DNA)，DNA2：12bp dsDNA+36bp dsDNA+54bp dsDNA，DNA3：12bp dsDNA+36bp dsDNA，DNA4：36bp dsDNA+54bpdsDNA。
表2的结果表明，本发明的单色荧光“off-on”开关***，随着dsDNA浓度的逐渐增大，在605nm处的单色荧光强度逐渐增强，并且对于dsDNA响应的灵敏度和检测能力只依赖于dsDNA的总质量，而与dsDNA的种类组成和长度无关。
实施例5
本发明的一种基于单色荧光“off-on”开关***的dsDNA高灵敏检测方法，如图1所示，具体步骤如下：
步骤一、合成水溶性谷胱甘肽(GSH)包被的CdTe量子点(QDs)，控制该量子点的荧光发射波长在605nm；
合成步骤：将63.8mg的Te粉和100mg的NaBH4混合，然后加入5mL N2饱和的去离子水，混合液在N2保护下反应2h直到溶液变成淡粉色，此溶液这里称为Te的前驱液。
将0.2312g(1mmol)的CdCl2·2.5H2O，0.3685g(1.2mmol)的谷胱甘肽(GSH)，100mL去离子水混合，在磁力搅拌下，逐滴滴加NaOH调节pH为8-9，得到混合液。通30min N2后，将Te的前驱液迅速注入到混合液中，在N2保护下，反应溶液缓慢加热到100℃，并持续反应5.5h，直到得到所需发射波长的CdTe量子点停止反应，如图2所示。CdTe量子点用异丙醇沉降洗涤3次，在真空干燥箱中干燥得到固体粉末，以备后续实验用。
步骤二、将步骤一所得的水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点(QDs)与金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+(Ru)混合，混合摩尔比为1:100；金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+通过静电作用与水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点结合，致使水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点荧光完全猝灭，得到QDs-Ru装配组；
89μL的PBS(0.01M，pH7.4)中加入1μL的CdTe QDs(100nM)，得到QDs溶液，然后将10μL不同浓度的[Ru(phen)2(dppz)]2+加入到QDs溶液中，室温下反应10min，QDs的荧光发生猝灭，形成QDs-Ru装配组。用荧光光谱仪检测QDs荧光，激发波长为390nm，如图3所示。
步骤三、向步骤二所得的QDs-Ru装配组中加入dsDNA后，随着dsDNA浓度的逐渐增加，在605nm处的单色荧光强度逐渐增强，从而实现对dsDNA快速高灵敏检测。
所述dsDNA为临床样品DNA，可以包括所有DNA病毒，以及体液中DNA含量发生变化的临床样品。
首先需要对临床样品进行DNA的提取，从而得到临床样品DNA。随后，1μL的CdTe QDs(100nM)，10μL的[Ru(phen)2(dppz)]2+(1μM)依次加入到89μL PBS(0.01M，pH7.4)中，室温混合10min形成QDs-Ru装配组，得到QDs-Ru装配组溶液。然后向QDs-Ru装配组溶液中分别加入1μL上述经过DNA提取得到的临床样品DNA，室温下孵育20min，用荧光光谱仪进行荧光检测，激发波长为390nm。
本次试验的结果：临床样品DNA浓度的不同，在605nm处的检测到的单色荧光强度也不同，根据荧光强度增强值对应于dsDNA浓度变化的线性关系曲线，如图5所示，可以计算出临床样品DNA的浓度，从而实现对临床样品DNA的快速高灵敏检测。
综上所述，本发明合成的水溶性谷胱甘肽包被的CdTe QDs和Ru-dsDNA复 合物在350-500nm处均有吸收，而且同在605nm处有荧光发射，如图2所示，构建一种基于单色荧光“off-on”开关***的dsDNA高灵敏检测方法。金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+(Ru)是一种良好的猝灭剂，其自身在水溶液中不发荧光，当QDs和金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+混合，随着金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+浓度的增加，QDs的荧光逐渐下降，当两者摩尔比例达到QDs：Ru=1：100时，QDs的荧光被完全猝灭，如图3所示。当向QDs荧光被完全猝灭的QDs-Ru装配组中加入dsDNA时，随着dsDNA浓度的逐渐增加，在605nm处的单色荧光发射逐渐增强，如图4所示。这表明金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+同时又是一种dsDNA分子光开关，dsDNA的加入，特异性与金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+结合形成Ru-dsDNA复合物而在605nm处发荧光，金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+从QDs表面的脱离，会使QDs的荧光得到恢复，在同一波长的激发下，QDs的荧光和Ru-dsDNA复合物的荧光在605nm处产生叠加，从而能够高灵敏检测dsDNA。dsDNA线性检测浓度范围为0.5ng/mL-100ng/mL，如图5所示。
通过以上各种检测，证明本发明方法可以快速、高灵敏、特异性检测dsDNA，操作简单，重复性好，结果可靠，成本低，对于dsDNA的检测限可达10pg/mL。本发明方法给其它临床样品DNA的检测提供了一种新方法，可将其应用于所有dsDNA病毒的检测。而且本方法对于dsDNA检测能力只依赖于dsDNA总质量，而与dsDNA的种类组成和长度无关，因此可以应用于检测由DNA损伤引起体液中DNA含量发生变化的临床样品的检测，并且有望设计成DNA快速检测试纸条。
Claims (2)
1.一种基于单色荧光off-on开关***的dsDNA高灵敏检测方法，其特征在于，具体步骤如下：
步骤一、合成水溶性谷胱甘肽（GSH）包被的CdTe量子点（QDs），控制该量子点的荧光发射波长在605nm；
步骤二、将步骤一所得的水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点（QDs）与金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+（Ru）混合，金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+通过静电作用与水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点结合，致使水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点荧光完全猝灭，得到QDs-Ru装配组；
步骤三、向步骤二所得的QDs-Ru装配组中加入dsDNA后，随着dsDNA浓度的逐渐增加，在605nm处的单色荧光强度逐渐增强，从而实现对dsDNA快速高灵敏检测。
2.如权利要求1所述的一种基于单色荧光off-on开关***的dsDNA高灵敏检测方法，其特征在于：步骤二所述的水溶性谷胱甘肽包被的CdTe量子点与金属钌配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+混合，混合摩尔比为1:100。
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